Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
SCOP
Tehnica recomandata pentru evidentierea diferitelor tipuri celulare si a parazitilor in frotiurile sangvine, a detaliilor morfologice ale tesuturilor
splinei, tesuturilor limfatice, ale nodulelor, ale maduvei; de asemenea, si demonstrara prezentei si a naturii bacteriilor, ricketsiilor si a granulatiilor
celulelor mastoide din sputa sau a altor lichide de aspiratie.
In particular, metoda de colorare se recomanda si la detectarea Trichomonas in frotiurile vaginale.
Pentru colorare se folosesc doi coloranti folositi succesiv (unul dupa celalalt) :
Solutie May Grunwald (A) continand eozinat de albastru de metilen si care coloreaza nuclei in albastru iar citoplasma bazofila in roz-rosu;
Solutie Giemsa(C) continand un colorant complex de eozinat-azur-albastru de metilen. Acest produs imbunatateste intensitatea colorarii nucleare,
precum si, selectivitatea individualizarii structurilor celulare.
La interpretarea rezultatelor trebuie sa se tina cont de doi factori: pH-ul apei de spalarea frotiurilor si de dilutia solutiei Giemsa. Acesti factori pot
realiza intensitatea nuantelor de culoare in functie de, timpul de diferentiere.
COMPONENTE CAS CE INDEX
A – solutie de colorare May Grunwald - - -
B – solutie de tampon fosfat concentrata x 10 - - -
C – solutie Giemsa - - -
METODA
Intr-un balon cotat de 1000 mL se introduce continutul unui flacon de B - solutie tampon de 100 mL si se aduce la semn cu apa de robinet(900
mL). Solutia este valabila cateva luni si se pastreaza la + 4oC.
- se depun 10 picaturi de A – solutie May Grunwald si se lasa la colorat 5 minute. In cazul in care se lucreaza cu baia de colorare se respecta
acelasi timp de colorare cu observatia ca reactivul din baie se poate refolosi ;
-se spala 1 minut cu apa de robinet ;
Intr-un cilindru gradat se introduc 90 mL solutie tampon fosfat diluata(B) si 10 mL de C – solutie Giemsa, se amesteca si se introduce in baia
de colorare ;
- se depun 10 picaturi de C – solutie Giemsa si se lasa la colorat 5 minute. In situatia in care se lucreaza cu baia de colorat se utilizeaza
colorantul diluat C in maniera de la alineatul precedent iar lamele se mentin la colorat 15 minute. De asemenea, reactivul din baie se poate
refolosi doar in cursul zilei de preparare ; - se spală cu apă de robinet 1-2 minute si se usuca usor cu hartie de filtru ;
- se agita in aer, cateva minute, pentru uscare mai avansata şi apoi se examineaza la microscop.
REZULTATE
- nucleii– rosu violet, roz;
- granulatii acidofile – rosu pal la oranj– cu nuante brune;
- citoplasma acidofila – rosu – palid la roz;
- granulatii bazofile –violet - intunecat;
- citoplasma bazofila – albastru – albastru – violet;
- granulatii neutrofile – brun - roz inchis;
- granulatiile neutrofile – rosu – violet;
- nucleele parazitilor si protozoarelor – rosu briliant.
- citoplasma policromatofilica – cenusiu – violet;
- granulatii azurofile – rosu purpuriu – purpuriu violet.
Precautii
Reactivii trebuie să fie utilizati in scop profesional de către operatori specializati.
In cazul de contactului cu ochii, se spala imediat cu multa apa si se consulta un specialist.
A se purta echipamentul de protectie corespunzator, manusi si masca de protectie a ochilor/fetei. In caz de accident a se consulta imediat
medicul.
Reactivii sunt clasificati drept periculosi.
Cititi cu atentie informatiile inscrise pe etichetele solutiilor privind simbolurile de pericol si indicatiile din instructiunile de lucru referitoare la
frazele de risc si de siguranta. Consultati intotdeauna fisa tehnica de securitate care cuprinde toate informatiile necesare utilizarii in siguranta a
produselor.
A nu se folosi kit-ul daca unul dintre ambalajele primare (flacon) este deteriorat.
Valabilitate
2 ani
Consideraţii privind eliminarea
Se vor preda surplusul de soluţii şi soluţiile nereciclabile unei firme acreditată de eliminare a deşeurilor. Se dizolvă sau se amestecă produsul cu
un solvent combustibil şi se arde într-un incinerator chimic cu filtru si scruber.
BIBLIOGRAFIE Giemsa G.: das Wassen der Giemsa Farburg, Zentralb. F. Bact. 1922-1923; 89; 99-106.
Giemsa various procedures, Staining procedures, fourth ed. P.173-174;
Editia 3/rev.2 - Martie 2016