Retrovirusurile

Ciclu particular replicativ

ARNmc+, bisegmentat
Reverstranscriptaz ARN ADN
2 genome cu informaie genetic identic ARN virion matur, ADN
provirus
Structural nucleocapsid icosaedric
- anvelop
- genom 5LTR gag pol env 3
Clasificare
Oncornavirinae HTLV 1,HTLV2, HTLV5
Spumavirinae
Lentivirinae boli cronice, lent progresive
- produc boli neurologice i imunosupresie
- HIV-1 foarte variabil (9 subtipuri), HIV-2 (5 subtipuri) mai stabil
antigenic
 Virusul imunodeficienei umane
- Virion sferic, 100-140 nm
- Nucleocapsida central miez cilindric nchis n container
icosaedric
- Anvelopa cu spiculi externi mciucai
- Gena env flancat de 6 gene adiionale vif, vpr, vpu, tat, rev, nef
codific proteine nestructurale implicate n replicare sau cu funcii
accesorii n patogeneza bolii
- Antigene structurale I antigen de miez polipeptid de
55KDal, prin clivare apar mai multe proteine : p24,18
- p24 n ser marker al replicrii virale
- dispariia eficiena chimioterapiei
II antigenele anvelopei env precursor gp160KDal gp 41, gp 120
gp 41 fuziunea anvelopei cu membrana celular
gp 120 ataare la receptori
III Reverstranscriptaza
 Replicarea HIV

1. ataarea gp120 la Lf Th i Mf (CD4)

2. fuziunea i penetrarea n citoplasm
1. gp41 (domeniu fuziune HIV) R fuziune cel gazd
2. clivaj bucla V3 a gp120 (proteaze celulare) modif conformaional gp nveli
3. recunoaterea altor proteine membranare (coreceptori chemokine CCR5, CXCR4)
fuziunea membranei celulare i invelis viral
4. ptrunderea nucleocapsidei decapsidare
3. ARN m.c.+ ADN m.c.- ADN d.c. (proviral) integrarea n genomul celulei
gazd (integraza)
4. eliberare prin nmugurire, imature (maturare prin actiunea proteazei virale)
5. proteaza viral

Doar Lf CD4 activate (citokine) replicare HIV (secv ce interac cu LTR)

 CD4 antigen
Co-receptor

CD4+ cell

HIV gp120 binds to CD4/co-receptor

CD4 antigen
Co-receptor

CD4+ cell
HIV T4 cell
gp4
1
Co-receptor

gp41 CD4
antigen

gp120
 Matrix

Gp120 binds to CD4/co-

receptor
Reverse
transcriptase

Protease
Integrase

tRNA

Binding causes a conformational

change in the gp120 molecules
Gp41 is exposed and embeds in
the membrane of the CD4 cell
Membranes begin to fuse
Membranes fuse
Nucleocapsid enters
CD4 cell
 Nuclear targeting
signal

Nucleocapsid in
cytoplasm
Cell
Nuclear
membrane membrane

Nuclear
pore
 virusul poate ptrunde n organism prin contact sexual, transfuzii de snge,
obiecte contondente contaminate sau perinatal (transplacentar, la natere
sau prin alptare).

infecia induce o stare de imunodepresie prin distrugerea limfocitelor T

helper de ctre virus sau prin rspunsul gazdei fa de celulele infectate cu
virus.
evoluia infeciei spre stadiul SIDA recunoate mai multe faze:
- infecia primar care evolueaz n 50-70% din cazuri cu sindrom
mononucleozic dup 3-6 sptmni de la contagiu
- perioada de laten care dureaz luni sau ani, cnd infecia evolueaz
asimptomatic sau poate fi prezent limfadenopatie persistent
generalizat;
- perioada de pre-SIDA cnd sub efectul unor inductori are loc
activarea replicrii virusului, cu pierdere n greutate , oboseal,
transpiraii nocturne, unele infecii oportuniste
- perioada final de SIDA caracterizat prin infecii multiple recurente
(bacteriene, virale, fungice, parazitare) sau boli neoplazice
Patogeneza i patologia
- Infecia primar 10 ani diseminarea virus n sistem limfatic i
monocito-macrofagic
- laten clinic
- inducia expresiei HIV
- SIDA evoluie letal n 2 ani
HIV se adsoarbe pe CD4 prin gp120 replicare- diseminare
hematogen i viremie detectabil 8-12 sptmni
- numr de limfocite scade la 500/mmc
- sindrom asemntor MNI: 50-75% dintre pacieni la 3-6
spt.dup contagiu
- rspunsul inflamator este detectat ntre 1-3 luni urmat de
scderea brusc a viremiei, intrarea n perioada de laten a infeciei
n sngele periferic doar 1/1000 sau 1/10000 din celule sunt
infectate, numrul de limfocite CD4 tinde spre normal
- Celulele organelor limfoide exprim virusul, deteriorarea sistemului imun se
traduce prin scderea lent, continu a LT CD4
- <200 LT CD4/mmc SIDA viremia crete brusc tulpinile izolate sunt
mai virulente
Suferina limfocitelor B activare policlonal hipergamaglobuline
nefuncionale, complexe imune circulante, autoanticorpi
Monocitele i macrofagele rol major n diseminarea infeciei
- infectate , fr efect citopatic
Clinic
- Infecia primar asemntoare MNI, fr angin
- SIDA imunosupresie pronunat infecii cu variate microorganisme
oportuniste, forme neobinuite de cancer
- prodrom astenie, scdere ponderal, febr, dispnee, diaree,
limfadenopatie, suferin gastro-intestinal
- boala neurologic
- infecii oportuniste
- cancere sarcom Kaposi, LMNH, carcinom naso-faringian, etc
Diagnostic etiologic
diagnostic direct
- izolarea virusului prin cocultivare
- decelarea ADN proviral n limfocite sau ARN viral n
plasm prin PCR (calitativ sau cantitativ)
- dozarea Ag p24 prin ELISA
diagnostic serologic
* reacii de triaj
- teste rapide: pe membran, immunodot, latexaglutinare;
- ELISA indirect sau competitiv
* reacii de confirmare (corecteaz reaciile fals-pozitive)
- Western Blot (2 categorii de AC env +/- gag +/- pol)
- IF.
Tratament antiviral
ageni antivirali
- inhibitori ai reverstranscriptazei: zidovudina, didanozina, zalcitabina,
stavudina
- inhibitori ai proteazei virale: indinavir, ritonavir, sakinavir.
principii de tratament
- se administreaz antivirale n asociaii, pentru a crete eficiena
terapeutic i a preveni selecia de tulpini rezistente
- se ncepe tratamentul cnd limfocitele CD4 au ajuns la 500/L
- administrarea zidovudinei la gravide scade riscul transmiterii
transplacentare a infeciei.
- asociate, ncetinesc progresia bolii, nu previn SIDA
aprecierea eficienei terapiei
- creterea numrului de limfocite CD4
- absena Ag p24
- nivel sczut al viremiei plasmatice.
Profilaxie
nu exist vaccin
nu exist chimioprofilaxie eficient
msuri nespecifice: sex protejat, obiecte personale de toaleta, controlul
serologic anterior sarcinii, al donatorilor de snge etc
educaie medical, moral i religioas.
Pandemia de HIV/SIDA

evolueaz cu dou tipuri de virus ce difer prin secvenele genomice: HIV1 i

HIV2
HIV1 are o rspndire universal, HIV2 circul numai n Africa de Vest
HIV1 este mai virulent, intervalul de timp pn la stadiul de SIDA fiind de 2
ori mai scurt
2003 pe glob: 40 milioane cazuri din care aprox.50% sunt femei, cu 3
milioane decese
2003 n Romnia: 13.972 cazuri din care 5722 sunt HIV-infecii, 4414 fiind
copii.
 Prionii
Proteine infecioase, lipsite de secvene nucleotidice capabile s
codifice descendenii
Sunt izomorfe (izomeri) ale unei proteine normale codificat de o gen
identic la mai multe specii i localizat la om pe braul scurt al
cromozomului 20
Proteina prionic normal PrPc este ancorat n membrana extern a
celulelor tuturor mamiferelor i psrilor, inclusiv la om. Funcia
necunoscut.
Izomorfa patogen PrPsc fixat pe membrana celular determin
leziunile din bolile prionice
Bolile prionice ereditare prin linia germinativ
- altele se transmit i orizontal intra sau interspecific,
asemntor infeciilor
Boli prionice
Animale - Scrapie infecioas
- Encefalopatia transmisibil a nurcilor infecioas
- Encefalopatia spongiform bovin infecioas
BSE boala vacii nebune
Umane
Kuru infecioas
Creutzfeld Jacob (CJD)
iatrogen infecioas
sporadic necunoscut
familial mutaie PrPc
Sdr. Gerstmann Straussler Scheincker (GSS) mutaie PrPc
Insomnia fatal familial mutaie PrPc
Boala Alzheimer mutaie PrPc
Boala Kuru populaia Fore din Noua Guinee
- 1957-1966 cea mai frecvent cauz de deces la femei
- a disprut dup renunarea la ritualul canibalic de a
mnca creierul rudelor moarte

Boala Creutzfeld- Jacob

- Forma infecioas iatrogen transplant de esuturi de la donatori
infectai- cornee, duramater, timpan
- intervenii chirurgicale cu
instrumentar contaminat
- terapie cu hormoni hipofizari
- obiceiuri alimentare evreii din Liban, Israel creier
i ochi de oaie inciden crescut a bolii
- Forma ereditar mutaie a codonului 178 aspartat-asparagin
- Evreii din Libia, Tunisia mutaie a codon 200 de la glutamat la
lizin
CJD sporadic necunoscut
Sindromul Gerstmann Straussler- Scheincker
- Toate cazurile sunt ereditare cu variaii ale simptomatologiei funcie
de codonii mutaiei
-ataxie mutaii de la prolin la leucin, 102 i 105
- Demen alanin la valin, 117
Boala Alzheimer
- Cunoscut ca ereditar
- 198 - substituia fenilalaninei prin serin
- 217 glutamin prin arginin
Insomnia fatal familial
- Descris la 3 familii italiene cu mutaii n codon 168
Istoric
- 80 ani controverse privind etiologia bolii scrapie
- 1988 Stanley B. Prusiner descoper prionii
- 1992 descoperit gena care codific prionii
Au fost mai multe ipoteze
- 1910 ipoteza infeciei cu un protozoar
- Ipoteza unui virus filtrabil 1946 1500 oi vaccinate cu un extract
formolat de esut limfoid ovin
- Ipoteza bolii ereditare receptivitatea la transmiterea bolii de 100%
la capre, la oi 0-80 dup ras
S.B. Prusiner ambele ipoteze infecioas/boal genetic
Teste biologice pentru infectivitatea prionilor
Scrapie reprodus experimental la diferite animale prin injecie de
extracte cerebrale de la oi bolnave dup o perioad de incubaie
lung oarecii dup 1 an, hamsterii aurii sirieni cu 50% mai
receptivi
n creierul de hamster mbogit pentru infeciozitatea scrapie Prusiner
a descoperit particule n form de bastonae purttoare de
infeciozitate
- Prioni d-50nm
- ultrastructur neregulat similar amiloizilor, total diferit de
structura virusurilor
- proteazele le distrug infectivitatea
- rezisten extrem la UV cu 254 nm care inactiveaz acizii
nucleici
Contribuia geneticii moleculare
- Descoperirea genei PrPc i a mutaiilor punctiforme din diferiii codoni
Rezist la ageni inactivatori ai infeciozitii
- 1340C 18-30 min, unele tulpini scrapie rezist 90 min
- Deeuri solide autoclavate 2 ore
Rezistena explic transmiterea la vite epidemia de BSE
Calea de transmitere fina de oase cu resturi de la oile bolnave de
scrapie
La om consum de carne infectat chiar prelucrat termic
Patogenia
- Apariia PrPsc n organism origine endogen mutaii n codonii
genei care codific PrPc
- origine exogen
PrPc se fixeaz pe o gam mai larg de celule dar, leziuni apar acolo
unde realizeaz concentraii maxime
- creier ntotdeauna
- scrapie - i mduva spinrii + ochi
Leziunile - plci de amiloid
- degenerescen spongiform
- glioz
- pieredere neuroni
- n absena inflamaiei i rspunsuns imun
Simptomatologia declin subacut sau cronic al funciei cognitive
demen
i/sau motorii (ataxia)
Debut 40-70 ani

Diagnostic de laborator
- Intravitam biopsie esut amigdalian - evidentiere PrP prin Western
blot
- Postmortem examen histopatologic al creierului
Concluzie
Prionii difer de toate microorganismele
Bolile determinate sunt pseudoinfecii
Utilizm termenii caracteristici bolilor infecioase doar pentru c
informaiile provin din protocoale experimentale ale virologiei.
 Infecia nosocomial
Infecie interioar, ncruciat
contractat ntr-o unitate de asisten sanitar
n condiiile de mediu specifice unitilor sanitare
n condiiile actului explorator sau terapeutic
Epoca prepasteurian etiologia necunoscut
- 1846 anestezia general cu eter dezvoltarea
chirurgiei creterea morbiditii, mortalitii
- lipsa terapiei etiotrope
Epoca pasteurian date privind etiologia
- lipsa terapiei etiotrope
- chirurgia antiseptic i aseptic morbiditatea i
mortalitatea la cele mai sczute cote
- Streptococcus pyogenes , Staphylococcus aureus
Epoca antibioticelor
- Tratament antibacterian S.pyogenes cauz rar a infeciei
nosocomiale
- Investigaii agresive, terapii agresive, manipularea sistem imun,
chirurgia de transplant
- Amplificarea fondului de gazde imunocompromise iatrogen+HIV
- Inciden crescut cu microorganisme oportuniste
Epoca postantibiotic?
- Apar primele tulpini bacteriene rezistente la toate antibioticele
- Programe naionale de profilaxie a infeciilor nosocomiale n ri
dezvoltate
Infecia nosocomial contractat ntr-o unitate de asisten
sanitar
- Infecii contractate n spital sau ambulatoriu pot debuta la domiciliu
Ex. mastita stafilococic dup externarea din maternitate
hepatita cu virus B, C incubaie lung
Infecia nosocomial contractat n condiiile de mediu specifice
unitilor sanitare
Fondul microbian de spital microbiota indigen a pacienilor +
personal sanitar
- roztoare, insecte
- microoeganisme infectante pacieni +
personal
- microorganisme din aer, ap, alimente,
suprafee, instalaii, obiecte, instrumentar, medicamente
Categorii de microorganisme
1. Organisme ale microbiotei indigene cu avantaje selective
particulare n mediul de spital
Stafilococii S.aureus 1960 cedeaz locul BGN, 1970 revine
- stafilococii coagulao-negativi
Enterococii tulpini de E.feacalis i E.faecium cu rezisten la beta-
lactamine i aminoglicozide
- 1989 rezistena la vancomicin
- 1997 dalfopristin quinupristin
Bacilii coliformi 1960 multirezisten la antibiotice
- au un fond important de rezisten plasmidic
transmis i la ali patogeni
- se pot nmuli n medii apoase minimale nutritiv chiar
n prezena substane antibacteriene, la temperatura camerei
- suprefee umede din WC te, bi
- lenjeria, aternut
E.coli infecii sporadice i endogene cu excepia patotipurilor
diareigene
Klebsiella, Enterobacter, Serratia servicii terapie intensiv
- oc endotoxinic dup perfuzii cu
soluii
contaminate
- nou-nscui, sugari foarte receptivi
Pseudomonadele microbiota indigen disbiotic, se elimin cu
excrete, secreii, exsudate
- cresc n rezervoarele de ap
instalaii pentru ghea
soluii medicamentoase
snge conservat la frigider
ape de gur, ghivece cu flori
P.aeruginosa
P.fluorescens
P.putida
P.stutzeri
Burkholderia cepacia
Stenotrophomonas maltophilia
Alti bacili gram negativi A.faecalis, A. xylooxidans,
Flavobacterium
meningosepticum, Acinetobacter baumanii
Clostridium difficile
1987 primele izbucniri de spital ale enterocolitei
pseudomembranoase postantibioticoterapie
- transmitere fecal oral
- evoluie grav peste 60 de ani
2. Microorganisme cu surs n rezervoare de ap sau instalaii cu ap
stagnant
Pseudomonade
Legionella spp. adeziune la cele mai variate suprafee
- simbioza cu ciano i flavobacteriile + simbioza cu
protozoare i chiti - avantaje selective n rezervoare dre ap,
termorezistena la peste 600C, ageni de tratare ai apei
- infecii respiratorii, plgi
Micobacterii atipice M.chelonae, M. gordonae, M. fortuitum - infecii
post- bronhoscopie, dializai renali, chirurgie ocular, cardiac
3. Microorganisme al cror rezervor este amplificat prin transfuzii i
inoculri cu instrumentar contaminat cu snge
- VHB, VBD, VHC, HIV
- Transfuzii, medicaie cu derivate de snge, instrumente contaminate
cu urme de snge insuficient sterilizate
4. Microorganisme anerobe nesporulate
5. Organisme accidental patogene ale mediului extern ocazional
prezente n microbiota flotant a nveliurilor
- Candida albicans
- C. tropicalis, C. parapsilosis, C. krusei operaii pe cord deschis
- Fusarium spp. cancer, transplant medular
- Aspergillus neutropenici, terapie intensiv
- Coccidiile diaree cronic la imunosupresai spitalizai
6. Microorganisme clasice patogene
S. pyogenes, M. tuberculosis
Viroze nosocomiale nou-nscut, copil, imunosupresai VRS,
enterovirusuri
- herpesvirusuri VCM prin donare de snge sau
esuturi
- VGA pneumonie grav per se sau prin
suprainfecie cu tulpini de spital
- bolile eruptive ale copilriei
7. Pseudoinfeciile prionice
Faciliti de transmitere a infeciei n spitale
Condiii de risc ale contaminrii microbiene critice, semicritice, necritice
Pericolul minii ca vehicul al infeciei nosocomiale
Presiuni selective asupra fondului microbian de spital
Tulpini periculoase de spital rezisten multipl la substane
antimicrobiene
- capaciti sporite de colonizare rapid a
suprafeelor i virulen
Colonizarea/ infecia nosocomial; amplificarea anumitor virusuri n
fondul microbian de spital
- Infecia cu tulpini periculoase de spital apare pe fondul mult mai larg
al colonizrii nosocomiale
- Fenomenul aisberg al infeciei nosocomiale
- Cu fiecare pacient internm un cal troian

Infecia nosocomial este contractat n condiiile actului

explorator sau terapeutic