Lucrare Practic Nr.

5 Monozaharidele
Definiie. Monozaharidele sau monozele sunt alcooli polihidroxilici, cu cinci pn la opt atomi de carbon , care conin i grup carbonil.Sunt polihidroxialdehide sau polihidroxicetone. Monozaharidele hidroxialdehide se numesc aldoze, iar monozaharidele hidroxicetone se numesc cetoze. De obicei, grupa carbonil se combin cu o grup hidroxil mai reactiv din molecul, cu formarea unui semiacetal: OH CHO (CHOH)4 CH2OH Aldohexoz (form aciclic) H H C (CHOH)3 C O

CH2OH 1,5 - Semiacetalul unei aldohexoze (forma ciclic)

Proprieti fizice. Izomerie. Monozaharidele sunt substane solide, cristaline foarte uor solubile n ap, solubile n alcool, insolubile n solveni organici nepolari (cloroform, eter etilic, tetraclorur de carbon). Prin nclzire la temperaturi ridicate, peste punctul de topire, se caramelizeaz. Datorit unghiului de 10928 format de valenele atomului de carbon hibridizat sp3, catenele atomilor de carbon nu formeaz linii drepte, ci linii frnte , ce pot avea diferite forme , din cauza rotaiei libere n jurul legturilor covalente simple . Acestea fac ca la o molecul , de exemplu glucoz, s se apropie dou grupe care au afinitate chimic, cum este gruparea carbonil i o grup hidroxil. n poziia steric favorabil, perechea de electroni neparticipani ai atomului de oxigen aparinnd grupei hidroxil din poziia 5 (sau 4), atac atomul de carbon cu densitate mic de electroni al grupei carbonil, cu producerea unei noi legturi C-O, iar atomul de hidrogen al aceleiai grupe hidroxil migreaz la atomul de oxigen al grupei carbonil , formndu-se un semiacetal. n soluie se stabilete un echilibru, concentraia formei cilclice care este favorizat energetic este mult mai mare dect concentraia formei aciclice. Prin tranformarea grupei carbonil, s-a creat un nou centru de asimetrie care duce la formarea a doi stereoizomeri, care se gsesc n echilibru dinamic n soluie.Apariia acestor doi stereoizomeri , numii i anomeri, notai cu i se datorete faptului c grupa hidroxil glicozidic poate avea orientri diferite fa de planul ciclului. Trecerea din forma n forma i invers se face prin intermediul formei carbonilice, aciclice.

H H H HO H H C C C C C OH OH H OH O H HO H H

C C C C C

O OH H OH OH HO H HO H H C C C C C CH2OH beta-Glucoz (beta-glucopiranoz) H OH H OH O

CH2OH Forma aciclic aldehidic

CH2OH alfa-Glucoz (alfa-glucopiranoz)

Mai elocvente sunt formulele de perspectiv:

CH2OH H HO CH2OH OH O H H OH H HO H H OH H HO CH2OH

OH
H H OH H OH

O OH
H H OH H H

OH

OH

alfa-glucoz

Forma aldehidic

beta-glucoz

Monozaharidele naturale, n soluie , prezint activitate optic; aceasta permite caracterizarea lor prin rotaia specific. Monozaharidele cu configuraia atomului de carbon asimetric cel mai ndeprtat de gruparea carbonil identic cu a D-aldehidei glicerice fac parte din seria D, iar cele cu configuraia corespunztoare identic cu a atomului de carbon asimetric al L-aldehidei glicerice fac parte din seria L. De exemplu:
H H HO H C C C C O OH H OH OH H HO H HO HO C C C C *C O H OH H H

H *C

CH2OH D-glucoz L-glucoz Rotirea planului luminii polarizate de ctre pentoze i hexoze nu este legat de apartenena la seria D sau L; unele monozaharide ca fructoza , rotesc planul luminii polarizate spre stnga (sunt levogire), dei fac parte din seria D. Pe lng notarea
2

CH2OH

seriei optice folosind convenia de simbolizare D-L, se noteaz sensul rotaiei specifice a planului luminii polarizate cu semnele + sau ntre paranteze. Astfel glucoza este notat cu D(+) glucoz, iar fructoza cu D(-) fructoz. n natur, se gsesc doar stereoizomerii aparinnd seriei D, care sunt i cei mai stabili. Reprezentani. Termenii de baz sunt descrii de glucoz , care este o aldohexoz i fructoza care este o cetopentoz. Alte monozaharide ntlnite care deriv practic de la aceti doi termeni sunt: manoza, galactoza, riboza etc. Din punct de vedere al proprietilor fizice, monozaharidele sunt compui neutri, cristalini, incolori, uor solubili n ap, puin solubili n alcool, insolubili n eter etilic, cloroform, hidrocarburi. Toate au un gust dulce, caracteristic. Reacii de recunoatere. Zaharurile sunt substane organice larg rspndite n regnul vegetal i animal, de o importan deosebit. Pentru recunoaterea lor se folosesc reacii de culoare, care pot da indicaii importante, dar nici una nu este caracteristic pentru un anumit zahr. Pentru caracterizarea lor complet este necesar s se prepare un derivat cu o structur bine definit ca: hidrazon, osazon, oxim. Reaciile chimice cel mai des ntlnite pentru recunoaterea i diferenierea monozaharidelor sunt: - reacii de culoare (cu -naftolul); - reacii de reducere i oxidare; - reacii de condensare (reacia cu fenil-hidrazina). a) Reacii de culoare. - Reacia cu -naftolul. Reacia este pozitiv pentru toate monozaharidele. n prezena acizilor minerali concentrai (HCl, H2SO4) i la cald, monozaharidele dau natere la furfurol i hidroxi-metil-furfurol, care n prezena fenolilor sau naftolilor formeaz compui de condensare colorai.
OH + H CHO O OH O H O OH H2SO4 -H2O CH OH OH +1/2O2 H2SO4 -H2O

CH O colorant rosu

(violet)

Mod de lucru. La 1-2 mL soluie zahr se adaug circa 2-3 picturi de soluie alcoolic de -naftol, 15%. Apoi se toarn cu precauie acid sulfuric concentrat (9698%), astfel nct s se formeze un strat de 1 mL.La suprafaa de contact dintre cele dou straturi apare un inel violet . Dac n loc de -naftol se folosete o soluie alcoolic de timol 3% se formeaz un inel colorat n rou.

Reacii specifice pentru cetoze. Reacia Seliwanoff. Este una din cele mai importante reacii de culoare pentru cetoze. Prepararea reactivului Seliwanoff: 1,5 g rezorcin se trateaz cu 100 mL de HCl concentrat i 200 mL de ap distilat. Mod de lucru. La 5 mL de reactiv Seliwanoff se adaug 5-6 picturi dintr-o soluie de monozaharid 5% i se nclzete eprubeta pe baie de ap. Dac substana esteo cetoz, apare o coloraie roie-viinie. Cu soluia de glucoz se obine o culoare slab-roz. Reacia Pinoff. Mod de lucru Circa 50 mg din substana de analizat se trateaz cu 8-10 mL dintr-un amestec de alcool etilic i acid sulfuric (75 mL alcool i 20 mL acid sulfuric concentrat) i cu 0,2 mL dintr-o soluie alcolic de -naftol 5%. Se nclzete amestecul pe baie de ap. Dac substana este o cetoz, apare o coloraie violet dup 2-3 minute. Reacii specifice pentozelor. Reacia cu -naftolul (Pierre-Thomas) Mod de lucru.La 2-4 mL din soluia proaspt preparat de -naftol 3-4% n H2SO4 concentrat se adaug 1-2 mL din soluia unei pentoze, n aa fel nct soluia de pentoz s curg ncet pe pereii interiori ai eprubetei. Se agit uor prin micri circulare, fr s se amestece cele dou soluii. Pentozele dau la limita de separaie dintre cele dou lichide un inel albastru. Reacia furfurolului.
HO HC H2 C CH CH OH CHO HCl -3H2O H2N - C6H5 O CHO furfurol -H2O O rosu CH = N - C6H5

OH HO

Mod de lucru. O soluie de pentoz n 30-40 mL de HCl 12 % se distil pe o baie de ulei pn cnd se obin 5-6 mL de distilat. Se mai adaug apoi de 2-3 ori cte 5 mL HCl 12% i de fiecare dat se mai distil cte 5 mL. Distilatul obinut formeaz, cu un maestec de anilin i acid acetic n pri egale, compui colorai n rou. Pentru identificarea distilatului se poate folosi i hrtie de filtru mbibat cu acetat de anilin, care se coloreaz n rou.

b) Reacii de reducere i de oxidare Reducerea monozaharidelor cu amalgam de sodiu n mediu acid sau cu hidrogen molecular n prezena Ni conduce la formarea de alcooli polihidroxilici. Pentozele trec n pentitoli, hexozele n hexitoli. Prin reducere, D-fructoza poate da acelai hexitol (D-Sorbitol) ca i Dglucoza, deoarece difer ntre ele numai prin substituenii de la atomii de carbon 1 i

2. La reducerea cetozelor ia natere un atom de carbon asimetric care conduce la formarea a doi stereoizomeri. Astfel, din fructoz rezult i D-manitol. Alcoolii polihidroxilici, foarte rspndii n lumea vegetal, sunt substane solide, cristaline, solubile n ap, insolubile n eter.Sunt substane nutritive, cu gust dulce, cu aplicaii n industria farmaceutic.
H H HO H H C C C C C O OH H OH OH 2[H] H HO H H CH2OH C C C C OH H OH OH 2[H] HO H H CH2OH C C C C O H OH OH 2[H] HO HO H H CH2OH C C C C OH H OH OH

CH2OH D-Glucoz

CH2OH D-Sorbitol

CH2OH D-Fructoz

CH2OH D-Manitol

Oxidarea n condiii blnde, cu ap de clor, ap de brom sau acid azotic diluat duce la formarea acizilor aldonici, fr degradarea moleculei.
H H HO H H C C C C C OH OH H OH O H H HO H H C C C C C O OH H OH OH [O] H HO H H COOH C C C C OH H OH OH -H2O O H HO H H C C C C C OH OH H O

CH2OH alfa-Glucoz (alfa-glucopiranoz)

CH2OH Forma aciclic aldehidic

CH2OH Acid D-gluconic

CH2OH gama-Lactona acidului gluconic

Acizii aldonici, fiind hidroxiacizi, pot trece la nclzire , n urma eliminrii unei molecule de ap, n - sau -lactone. Prin oxidarea aldozelor n urma protejrii grupei carbonil i a grupelor de alcool secundar (prin esterificare), se transform chimic numai grupa CH2OH liber n grup COOH. Dup punerea n libertate (refacerea) grupelor protejate, rezult acizi uronici.
H H HO H H C C C C C C H 2O H a lf a - D - G lu c o z OH OH H OH O H H HO H H C C C C C COOH a c id g lu c u r o n ic OH OH H OH O

Reaciile zaharurilor reductoare. Oxidndu-se uor, monozaharidele sunt reductoare. Puterea reductoare a monozaharidelor se datorete prezenei n molecul a gruprilor aldehidice. Monozaharidele reduc srurile metalelor grele pn la oxizi sau metalele respective. Cele mai utilizate reaciice pun n eviden capacitatea reductoare a monozaharidelor, sunt: 1. Reacia Fehling Aceast reacie este cea mai sensibil pentru zaharurile reductoare i servete la dozarea lor:

2KOH + CuSO4 CHO H HO H H C C C C OH H OH OH

Cu(OH)2 + K2SO4 COOH H C C C C OH H OH OH + 2CuOH + H2O

+2Cu(OH)2

HO H H

CH2OH 2CuOH Cu2O +H2O

CH2OH

Mod de lucru. Se amestec volume perfect egale din soluia Fehling I cu soluia Fehling II. Se dilueaz apoi cu un volum dublu de ap distilat, se trateaz cu 2-3 mL dintr-o soluie de zahr reductor (glucoz) i se nclzete la fierbere, pe baie de ap. Precipit oxidul cupros (Cu2O), de culoare roie crmizie. n cazul n care puterea reductoare este mic, precipitarea nu se observ dect dup un repaos de cteva ore. 2. Reacia Benedict. Este o variant a reaciei Fehling i se bazeaz tot pe reducerea sulfatului de cupru. Mod de lucru. Se trateaz circa 5-7 mL de reactiv Benedict cu 9-10 picturi din soluia de analizat i se nclzete amestecul 5-6 minute pe baie de ap. Existena glucozei este dovedit de apariia unui precipitat a crui culoare ne va indica aproximativ cantitatea de glucoz prezent n soluie: - opalescen verde, pn la 1g de glucoz; - precipitat galben, ]ntre 10 i 20 grame de glucoz; - precipitat rou-crmiziu, peste 25 g de glucoz. 3. Reacia Tollens. Prin tratarea unui zahr reductor cu reactivul Tollens se reduce sarea de argint, cu formarea unei oglinzi caracteristice. Reacia poate avea loc i la rece , ns prin nclzire ea este accelerat.

AgNO3 + NaOH AgOH + 2NH3 CHO H HO H H C C C C OH H OH OH

AgOH + NaNO3 [Ag(NH3)2]OH COOH H C C C C OH H OH OH + 4NH3 + H2O

+ 2[Ag(NH3)2]OH

2Ag +

HO H H

CH2OH

CH2OH

Mod de lucru. Circa 3-4 mL de soluie de AgNO3 10% se trateaz cu 2 mL de soluie de NaOH 10% i se adaug apoi amoniac pn la dizolvarea precipitatului de oxid de argint format n tot volumul de soluie din eprubet. Se dilueaz cu un volum egal de ap distilat i se adaug 2-3 mL de soluie de zahr reductor. Se nclzete pe baie de ap i dup un anumit interval de timp se observ depunerea argintului metalic sub forma unei oglinzi uniforme, consistente, pe pereii i pe fundul eprubetei. Reacii specifice pentru hexoze: Fermentaia alcoolic sub aciunea enzimelor din drojdia de bere: C6H12O6 2C2H5-OH + 2CO2 Mod de lucru. Se ia o cantitate de hexoz (glucoz), se amestec cu o cantitate egal de drojdie de bere i se introduce amestecul ntr-o eprubet cu puin ap. Eprubeta este prevzut cu un tub curbat care permite colectarea CO2 format. Se menine amestecul de reacie n etuv la 32C i dup puin timp se observ degajarea dioxidului de carbon. Aciunea fenil-hidrazinei asupra zaharurilor formarea hidrazonelor (condensarea monozaharidelor cu fenil-hidrazina).
CH = O H HO C OH +H2N-NH-C6H5 - H2O H HO H H C H OH HC=N-N H-C6H5 C OH C H +H2N-NH-C6H5 C OH - C6H5-NH2 - NH3 C OH HO H H HC=N-N H-C6H5 C=O C C H OH C OH

H C OH H C CH2OH

CH2OH fenil - hidrazona glucozei HC=N-NH-C6H5 HC=N-NH-C6H5

CH2OH

+H2N-NH-C6H5 - H 2O

HO C H H C OH H C OH CH2OH osazon

Monozaharidele dau prin tratare cu 1 mol de fenil-hidrazin n soluie alcolic sau apoas acetic, la rece , fenil-hidrazone . Dac fenil-hidrazina este n exces i operaia se face la cald, se formeaz osazone.
Mod de lucru. Formarea hidrazonelor. Se trateaz circa 50 mL de soluie de manoz 2% (sau galactoz) cu 5-6 mL soluie de fenil-hidrazin i se agit. Lichidul se tulbur i precipit fenil-hidrazona manozei. Prepararea osazonelor. Se fierbe pe baie de ap timp de o or, un amestec de 50 mL soluie de glucoz 1% i 10 mL soluie fenil-hidrazin. Dup rcire separ cristale de osazon care se filtreaz, se spal cu ap, se usuc i se ia punctual de topire (205C).

Reprezentani a) Acidul zaharic. Prin tratarea glucozei cu acid azotic 25%, se oxideaz att gruparea carbonil, ct i grupa alcoolic primar, formndu-se acidul zaharic.

CH = O H HO C C OH H OH + 2HNO3 H HO

COOH C OH + 2NO + 2H2O C H OH

H C OH H C CH2OH

H C OH H C COOH acidul zaharic

Mod de lucru. Aceast reacie se utilizeaz pentru identificarea glucozei n zaharurile extrase din produsele naturale, deoarece nicu una din monoze, n afar de glucoz, nu d prin oxidare acid zaharic. Oxidarea se execut la ni n felul urmtor: ntr-o capsul de porelan se trateaz circa 5,5 g glucoz cu 32-33 mL acid azotic 25% (d = 1,15) i se nclzete soluia pe o baie de ap care fierbe ncet , agitnd continuu coninutul cu o baghet de sticl. Se continu nclzirea pn cnd nceteaz complet dezvoltarea de vapori nitroi iar lichidul se evapor pn la consisten siropoas. Evaporarea nu trebuie dus att de departe nct reziduul s se coloreze n galben. Masa siropoas obinut se dizolv ntr-o cantitate mic de ap (6-8 mL), se nclzete pe baie de ap i se adaug treptat carbonat de potasiu fin pulverizat, pn la reacia alcalin fa de turnesol (albstrete hrtia roie de turnesol). Zaharatul de potasiu astfel obinut este foarte solubil i este transformat n zaharat acid de potasiu, care este greu solubil, cu ajutorul acidului acetic. Pentru aceasta se nclzete soluia zaharatului de potasiu i se adaug pictur cu pictur, acid acetic glacial pn cnd soluia ncepe s miroase a acid acetic. Amestecul se las n repaos peste noapte i apoi se filtreaz. Cristalele obinute se spal cu puin ap cu ghea i se recristalizeaz din ct mai puin ap fierbinte, la care se adaug puin crbune animal. Se obin aproximativ 2 g de acid zaharic.

b) Pentaacetil glucoza. Prin nclzirea glucozei cu anhidrid acetic i clorur de zinc anhidr sau prin acetilare cu anhidrid acetic n prezena piridinei 8

la 0C (baie de ghea), se obine pentaacetil glucoza.Dimpotriv, prin acetilare cu anhidrid acetic, n prezena acetatului de sodiu, se formeaz pentaacetil glucoza.

H H HO H H

C C C C C

OH OH H OH O 5(CH3-CO)2O CH3-COONa

AcO H AcO H H

C C C C C

H OAc H OAc O + 5CH3COOH

CH2OH

CH2-OAc Beta-pentaacetil-glucoza

Ac = CH3CO-

Mod de lucru. ntr-un mojar se amestec 2,5 g glucoz anhidr, fin pulverizat, cu 1,2 g acetat de sodiu anhidru. Amestecul se introduce ntr-un balon de 50 mL, se adaug 12,5 g anhidrid acetic (d = 1,08) i se nclzete pe baie de ap agitnd continuu, astfel nct n aproximativ 30 de minute s seobin o soluie limpede. Dup alte dou ore de nclzire pe baie de ap se toarn soluia, n vn subire i agitnd continuu, n 100 mL de ap cu ghea. Masa cristalin care se formeaz se sfarm cu grij i dup cteva ore, cnd cea mai mare parte din excesul de anhidrid acetic a fost descompus, se filtreaz i dup aceasta se mai ine sub ap nc 2-3 ore. La sfrit se filtreaz din nou i se poare recristaliza din alcool etilic. Randament: 3,5-4 g (65-74%).

c) Transpoziia Lobry de Bruyn van Eckenstein. Prin aciunea hidroxizilor alcalini diluai (NaOH, KOH) sau a unor baze organice slabe ca piridina, la cald, se produce o inversare a configuraiei atomului de carbon C2 (de exemplu glucoz-manozfructoz) de la C1 la C2 i invers, numit -inversiune. Astfel D-glucoza trece ntr-un amestec care la echilibru conine 66,5% D-glucoz, 2,5 % D-manoz i 31% Dfructoz. Monozaharidele cum sunt D-glucoza i D-manoza care difer ntre ele numai prin configuraia atomilor de carbon C2 se numesc epimeri. CH2OH CHO CHO H HO H H C C C C OH H OH OH HO HO H H C C C C H H OH OH HO H H C= O C C C H OH OH

CH2OH D-glucoz

CH2OH D-manoz

CH2OH D-fructoz

Mod de lucru. Se introduc ntr-o eprubet 10-15 mL de soluie glucoz 5% i de adaug 1-5 mL soluie KOH 10%. Se nchide ermetic cu un dop de cauciuc i se las n etuv la 35-36 C, timp de 8 ore. Se las apoi s se rceasc, se adaug acid acetic pn la neutralizarea hidroxidului i se mparte soluia n dou pri. n prima parte se pune n eviden manoza cu ajutorul fenil-hidrazinei, iar n a doua parte se demonstreaz prezena fructozei cu ajutorul reaciei Seliwanoff (1,5 g rezorcin cu 100 mL HCl conc. i 200 mL ap distilat). Glucoza, dei este prezent, nu poate fi pus n eviden pe aceast cale fiindc nu d reacia Seliwanoff (este o reacie caracteristic cetozelor), iar fenil-hidrazona ei este solubil n ap, spre deosebire de cea a manozei. Aceasta este singurul aspect n acest caz, care face diferena ntre glucoza i manoza din amestec.

Rol biologic n organism. Glucoza constituie o foarte important surs de energie pentru organismul uman (particip activ la toate procesele de ardere ce au loc n organism cu degajri mari de energie glicoliz). Particip direct, de asemenea, la sinteza unor compui vitali de o mare importan pentru organism: - Glicogen (excesul de glucoz din organism este depozitat la nivelul ficatului sub form de glicogen ca potenial surs ulterioar de energie) - pentoze - acizi uronici - glicerol, acetil-CoA - aminoacizi neeseniali - purine i pirimidine - NADPH - Trigliceride Glucoza intr n structura glicolipidelor i glicoproteinelor, oligozaharide ce ndeplinesc funcii foarte importante n organismul uman.

Bibliografie
1. Maria Dorneanu, Eugenia tefnescu, Odette Rogut, Chimie organic. Sinteze i reacii de recunoastere, 2002, Editura Gr.T.Popa, Iai, Universitatea de Medicin i Farmacie. 2. Mircea Iovu, Chimie Organic, 1999, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti. 3. Veronica Dinu, Eugen Truia, Elena Popa-Cristea, Aurora Popescu, Biochimie Medical, mic tratat, 2000, Editura Medical, Bucureti.

10