Dr.

Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

BIOCHIMIE curs III Proteine. Glucide. Lipide. Metabolismul - definitie, caracterizare, anabolism, catabolism.
Cuprins:
Proteinele................................................................................................................... 3 Tipuri de proteine.................................................................................................... 4 Structura proteinelor............................................................................................... 4 Aminoacizi standard............................................................................................. 4 Structura primar................................................................................................. 7 Structura secundar............................................................................................ 9 Structura teriar................................................................................................ 11 Structura cuaternar.......................................................................................... 12 Masa molecular................................................................................................... 12 Solubilitatea proteinelor........................................................................................ 13 Punctul izoelectric i caracterul amfoter...............................................................14 Caracter amfoter................................................................................................ 14 Punct izoelectric................................................................................................. 15 Precipitarea proteinelor...................................................................................... 15 Glucide..................................................................................................................... 16 Nomenclatura........................................................................................................ 17 Clasificarea............................................................................................................ 17 Lipide........................................................................................................................ 17 Rol n cadrul materiei vii........................................................................................ 18 Structura............................................................................................................... 18 Clasificarea......................................................................................................... 18

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III Vitamine............................................................................................................ 18 Metabolismul definitie, generalitati........................................................................19 Reacia de hidroliz............................................................................................... 20 Reactia de hidrogenare......................................................................................... 20 Reactia de dezaminare.......................................................................................... 21 Reactia de transaminare....................................................................................... 22 Reactia de esterificare........................................................................................... 22 Reactia de condensare.......................................................................................... 22 Reactia de polimerizare......................................................................................... 23 Reactiile catabolice............................................................................................... 23 Reactii anabolice................................................................................................... 24 METABOLISMUL ENERGETIC................................................................................. 24 DETERMINAREA METABOLISMULUI ENERGETIC ..................................25

METABOLISMUL ENERGETIC DE BAZ ( METABOLISMUL BAZAL ) ...................25 METABOLISMUL ENERGETIC VARIABIL ..............................................................26

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Proteinele
Proteinele sunt substane organice macromoleculare formate din lanuri simple sau complexe de aminoacizi; ele sunt prezente n celulele tuturor organismelor vii n proporie de peste 50% din greutatea uscat. Toate proteinele sunt polimeri ai aminoacizilor, n care secvena acestora este codificat de ctre o gen. Fiecare protein are secvena ei unic de aminoacizi, determinat de secvena nucleotidic a genei.

Biosinteza proteinelor este un proces prin care fiecare celul i sintetizeaz proteinele proprii, prin intermediul unui proces care include multe etape, sinteza ncepnd cu procesul de transcripie i terminnd cu procesul de translaie.Procesul dei similar, este diferit n funcie de de celul: eucariot sau procariot. Datorit compoziiei, fiind formate exclusiv din aminoacizi se ntlnesc alturi de ali compui importani de tipul polizaharidelor, lipidelor i acizilor nucleici ncepnd cu structura virusurilor, a organismelor procariote, eucariote i terminnd cu omul.Practic nu se concepe via fr

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

proteine.Proteinele pot fi enzime care catalizeaz diferite reacii biochimice n organism, altele pot juca un rol important n meninerea integritii celulare (proteinele din peretele celular), n rspunsul imun i autoimun al organismului.

Tipuri de proteine
n funcie de compoziia lor chimic ele pot fi clasificate n: Holoproteine cu urmtoarele clase de proteine o Proteine globulare (sferoproteine) sunt de regul substane solubile n ap sau n soluii saline:protaminele, histonele, prolaminele, gluteinele, globulinele, albuminele. o Proteinele fibrilare (scleroproteinele) caracteristice regnului animal, cu rol de susinere, protecie i rezisten mecanic:colagenul, cheratina i elastina. Heteroproteinele sunt proteine complexe care sunt constituite din o parte proteic i o parte prostetic; n funcie de aceast grupare se pot clasifica astfel: o Glicoproteine o Lipoproteine o Nucleoproteine

Structura proteinelor
Aminoacizi standard
Din punct de vedere chimic, proteinele sunt heteropolimeri constituii din 20 de L- aminoacizi (aa numiii aminoacizi standard vezi tabelul), n care gruprile carboxil se pot combina cu gruprile amino formnd legturi peptidice, formnd lanurile peptidice. Aminoacizii standard au proprieti variate, proprieti care sunt direct responsabile de structura tridimensional a proteinei, dar i de proprietile acesteia. Alanin Arginin ALA A

ARG R

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Asparagin ASN N Aspartat Cistein ASP CYS D C GLU E

Acid glutamic

Glutamin GLN Q Glicin Histidin HIS GLY H I L LYS MET M PHE F K G

Isoleucin ILE Leucin Lizin Metionin LEU

Fenilalanin Prolin Serin Treonin Triptofan Tirosin Valin

PRO P SER THR T TRP TYR W Y VAL V S

n lanul polipeptidic aminoacizii formeaz legturile peptidice prin cuplarea grupei carboxil cu o grup amino; odat legat n lanul proteic aminoacidul se "transform" n aminoacid "rezidual" iat atomii de carbon ,azot, hidrogen i oxigen implicai n legturi formeaz "scheletul" proteinei. Atunci cnd lanul proteic se tremin cu o grup carboxil poart denumirea de carboxi-terminus sau ( C -terminus), n timp ce, dac se termin cu gruparea amino, devine amino-terminus (N-terminus). Responsabile de proprietile chimice sunt aceleai grupri carboxil i amino libere, neimplicate n formarea legturilor peptidice, ns mai intervin i diferiii radicali grefai pe scheletul proteinei.

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Datorit gruprilor carboxil i amino libere ele dau aceleai reacii ca i la aminoacizi. Caracterul amfoter este responsabil de formarea de sruri att cu bazele ct i cu acizii Legtura peptidic este responsabil de formarea de combinaii complexe denumie chelai. Prezena diferiilor radicali alchilici, sau arilici determin formarea unor derivai ai substanelor proteice (derivaii halogenai i nitrici sunt cei mai importani).

Dup cum s-a vzut mai sus lanurile peptidice sunt formate de gruprile carboxil i aminice a aminoacizilor; exist de fapt 2 forme pentru fiecare protein, numite forme de rezonan: una datorat dublei legturi care asigur rigiditatea i nu permite rotaia n jurul axei sale; a doua form de rezonan este dat de unghiul diedru (planul atomilor C'-N-C-C'), (planul atomilor N-C-C'-N), (planul atomilor C-C'-N-C)[9], unghiurile i pot avea diferite valori fiind responsabile de gradul de libertate a proteinelor, controlnd structura tridimensional a lanului proteic. [10]

Structura substanelor proteice este nc insuficient cunoscut datorit dinamicitii structurii proteinelor, deoarece ele sunt n permanen supuse unor procese de sintez i de degradare.Pentru evidenierea succesiunii aminoacizilor n structura proteinelor se folosesc 2 metode: 1. Degradarea Edman Prin degradarea Edman se poate identifica o secven de pn la 30 aminoacizi, cu o eficien de 98%/aminoacid.Un alt avantaj ar fi cantitatea de numai 10-100 picomoli de peptid necesari pentru determinare. Degradarea Edman folosete ca reactiv izotiocianatul de fenil care evideniaz selectiv aminoacidul.Grupa amino terminal se adiioneaz la izotiocianat trecnd printr-un derivat de tiouree.Dup ce se trateaz cu un acid slab, aminoacidul marcat sub form de feniltiohidantoin se detaeaz de restul polipeptidei.Aceasta cu noul su aminoacid terminal poate fi supus la lat ciclu de tratri pentri identificarea urmtoarei grupe amino.

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III 2. Degradarea Sanger Degradarea Sanger are la baz tratarea polipetidei cu fluoro-2,4dinitrobenzen, avind loc atacul reactivului asupra gruprii amino a aminoacidului Nterminal. Metoda Sanger are dezavantajul degradrii complete a polipeptidei.

S-a ajuns la concluzia c exist 4 niveluri (structuri) , care alctuiesc edificiul proteic.

Structura primar
Structura primar este dat de aminoacizii care intr n lantul proteic prin formarea legturilor pepetidice. n structura primar se observ lanul de aminoacizi. n proteinele naturale legtura peptidic se stabilete ntre gruparea carboxilic de la C1 i gruparea aminic de la C2, nct lanul peptidic va fi format dintr-o succesiune de uniti CO-NH-CH ,legate cap-cap. La unul din capetele lanului peptidic se gsete o grupare -NH2 liber,iar la cellat capt seafl o grupare -COOH liber

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Legtura peptidic -CO-NH- se gsete n acelai plan, iar carbonul -CH- se poate roti, putnd s apar n planuri diferite. Datorit lungimii relativ mici a catenelor laterale, ele se pot aranja de o parte i de alta a lanului proteic, astfel c lanul proteic nu este ramificat. Datorit deplasrii alternative a unui electron de la gruparea -NH la C=O se produce oscilarea dublei legturi de la atomul de carbon i oxigen la atomul de azot, fomrndu-se astfel cele 2 forme mezomere.

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III Datorit numrului relativ mic de aminoacizi care intr n structura proteinelor, teoretic ar trebui s se formeze proteine cu masa molecular n jur de 4200. ns n realitate masele moleculare ale proteinelor au valori de peste 10,000 ceea ce a dus la concluzia c cel puin o parte de aminoacizi se repet de mai multe ori n cadrul unei molecule.

Structura secundar
Structura secundar se refer la forma i la lungimea lanurilor polipeptidice, proprieti induse de legturile de hidrogen. Cele mai ntlnite tipuri de structura secundar sunt alpha helixul i lanurile beta. Elicea alpha se formeaz prin rotaia unui lan polipeptidic n jurul propriei axe.

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

10

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Mioglobina

Structura teriar
Prin intermediul cristalografiei cu raze X s-a dovedit faptul c macromoleculele proteice au o conformaie tridrimensional , realizat de obicei prin intermediul cuplrii mai multor lanuri polipeptidice scurte ntre ele, cuplare care duce la formarea fibrelor proteice;legturile intercatenare pot fi principale sau secundare: 1. Legturi de hidrogen , sunt legturi coordinativ heteropolare care se stabilesc cu uurin ntre gruparea carbonil C=O (electronegativ) i gruparea NH(electropozitiv), din 2 lanuri polipeptidice alturate, sau n cazul formelor lactam-lactim ntre gruparea -OH i azotul iminic =NH. Legturile de hidrogen au lungimea cuprins ntre 2,7-3,1A i energia de 3-7Kcal/mol la peptide, iar la ap 2-3Kcal/mol. Legturile de hidrogen se pot stabili i ntre catenele lateralecare au grupri carboxil, hidroxil, amino sau tiolice. Din punct de vedere energetic [17]legtura de hidrogen nu este puternic dar datorit rspndirii relativ uniforme de-a lungul scheletului proteic ofer proteinei stabilitatea necesar. 2. Legturi disulfidice. Legtura disulfidic este foarte puternic ,50-100kcal/mol i are un rol foarte importantn stabilizarea arhitecturii spaiale a moleculei proteice; legtura este rezistent la hidroliz, ns se poate desface iar prin reducere formeaz tioli(SH), iar prin oxidare formeaz acizi.n general legtura sulfidic se ntlnete la proteinele transformate, care au o rezisten mecanic mare.

n afar de aceste legturi se mai pot stabili alte tipuri de legturi: legturi ionice (stabilite de obicei ntre gruprile aminice i cele carboxilice ionizate),

11

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III legturi de tip van der Waals (legturi electrostatice slabe care se stabilesc ntre radicalii hidrofobi), legturi fosfodiesterice (ntre 2 resturi de serin i acid fosforic) legturi eterice (stabilite la nivelul aminoacizilor cu grupri hidroxilice.

Structura cuaternar
Structura cuaternar se refer la modul cum se unesc subunitile proteice.Enzimele care catalizeaz asamblarea acestor subuniti poart denumirea de holoenzime, n care o parte poart denumirea de subuniti reglatoare i subuniti catalitice. Proteine care au structura cuaternar :hemoglobina, ADN polimeraza i canalele ionice, dar i nucleozomi i nanotubuli, care sunt complexe multiproteice.Fragmentele proteice pot suferi transformri n structura cuaternar, transformri care se reflect fie n structurile individuale fie n reorientrile fiecrei subuniti proteice. Numrulsubunitilor din oligomerice sunt denumite prin adugarea sufix-ului -mer (grecescul pentru subunitate), precedat de numele subunitii. Exemplu: * 1 = monomer * 2 = dimer * 3 = trimer * 4 = tetramer * 5 = pentamer * 6 = hexamer * 7 = heptamer, etc.

Masa molecular
Datorit formrii aproape n exclusivitate din aminoacizi, putem considera proteinele ca fiind de fapt nite polipeptide, cu mas molecular foarte mare intre 10.000 i 60.000.000.Masa molecular se determin prin diferite metode, mai ales n cazul proteinelor cu masa molecular foarte mare ca de exemplu proteina C reactiv. Masa molecular a diferitelor proteine

12

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III Sursa proteinei/Izolat din lapte gru pancreas orz globule roii molute(snge) , artropode(snge) muchi stomac rinichi

Denumirea proteinei

Masa molecular

Lactalbumin Gliadina Insulina Hordeina Hemoglobina

17000 27.500 12,000 27.500 68.000

Hemocianina

2.800.00

Miozina Pepsin Peroxidaza Virusul mozaicului tutunului (capsida)

850.000 36.000 44.000

tutun

17.000.000

Deoarece la multe proteine masa molecular apare ca un multiplu de 17,500, mult vreme s-a mers pe ipoteza c particulele proteice sunt formate prin unirea mai multor molecule de baz ce au masa molecular n jurul valorii de 17,500. Aceste molecule de baz s-ar putea uni ntre ele prin aa numitele valene reziduale, ducnd la formarea de agregate moleculare. Atunci cnd are loc ruperea acestor valene reziduale ar avea loc doar modificarea proprietailor fizice ale proteinelor, n timp ce dac are loc ruperea legturilor principale (legturile peptidice), proteina i modific proprietile fizico-chimice.

Solubilitatea proteinelor
Proteinele sunt substane solide, macromoleculare, solubile n general n ap i insolubile n solveni organici nepolari. Unele proteine sunt solubile n ap dar insolubile n alcool, altele sunt solubile n soluii apoase de

13

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

electrolii, acizi organici. Datorit gradului diferit de solubilitate n diferii solveni, proteinele se pot izola, identifica i separa. Solubilitatea lor depinde foarte mult de legturile care se stabilesc ntre gruprile libere de la suprafaa macromoleculelor i moleculele solventului.La suprafaa macromoleculelor proteice se gsesc grupri libere de tip polar,-COOH, -NH2, -OH, -SH, -NH, grupri cu caracter hidrofil care favorizeaz dizolvarea proteinelor n ap.De asemenea exist grupri de tip apolar, hidrofobe, de regul radicali de hidrocarburi -CH3, -C6H5, -C2H5, care favorizeaz dizolvarea proteinelor n alcool. ns n marea lor majoritate predomin gruprile polare,determinante pentru caracterul hidrofil. n contact cu apa proteinele greu solubile manifest fenomenul de gonflare, datorit tendinei de hidratare datorat gruprilor polare. Gelatina de exemplu se mbib foarte puternic cu apa dnd natere prin rcire la geluri. La dizolvarea proteinelor n ap, are loc fenomenul de formare a coloizilor hidrofili. S-a constatat c n soluii diluate se gsesc macromolecule proteice izolate, iar n cazul soluiilor concentrate se formeaz agregate de macromolecule proteice. Soluiile coloidale ale proteinelor, coaguleaz prin nclzire, prezint efectul Tyndall (dispersia fasciculului de lumin).

Punctul izoelectric i caracterul amfoter

Caracter amfoter
Proteinele la fel ca i aminoacizii sunt substane amfotere i formeaz n soluii apoase amfioni:

, n prezena H2O n mediu acid proteinele se comport ca baze slabe ele primind protoni i fomand cationi proteici:

, cation al proteinei. reacia st la baza electroforezei proteinelor,datorit incrcrii pozitive cationii migreaz spre catod, fenomen numit cataforez, proteina fiind n acest caz electropozitiv. n mediu bazic proteinele se comport ca acizii slabi ele cednd protoni, se formeaz astfel anioni proteici, care migreaz spre anod fenomenul fiind denumit anaforez, proteina avnd ncrcare electronegativ.

14

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

, anion al proteinei. datorit caracterului amfoter proteinele pot neutraliza cantiti mici de substan acid sau bazic, avind n acest fel rol de soluie tampon, prin acest lucru contribuind la meninerea echilibrului acido-bazic al organismului. n general caracterul amfoter este imprimat de cele gruprile -NH2 i -COOH libere care nu sunt implicate n legaturile peptidice.Dac n molecula proteinei exist mai muli aminoacizi dicarboxilici atunci molecula se va comporta ca un acid slab, iar n cele n care predomin aminoacizii diaminai se comport ca baze slabe. Chiar dac ntr-o molecul exist un numr egal de grupri amino si carboxil,deci teoretic molecula ar trebui sa fie neutr, n realitate datorit gradului de ionizare mult mai mare a gruprii carboxil fa de gruparea amino, molecula proteinei va avea un caracter slab acid, n soluia ei ntlnindu-se amfiioni proteici, anioni proteici i protoni (H+ ).

Punct izoelectric
Prin acidulare echilibrul reaciei se deplaseaz spre formarea de cationi proteici. La o anumit concentraie a H+, proteina devine neutr deoarece gruparea aminic i cea carboxilic sunt la fel de disociate i deci molecula este neutr din punct de vedere electric. n acel moment se vor gsi n soluie amfiioni, H+, ioni hidroxil -HO; pH-ul la care soluia unei proteine conine anioni i cationi n proporie egal poarta denumirea de punct izoelectric , se noteaz cu pHi, fiind o constant foarte important a proteinelor i nu numai. Fiecare protein la punctul, izoelectric are un comportament specific, avnd o solubilitate si reactivitate chimic minim; de asemenea hidratarea particulelor coloidale , vscozitatea i presiunea osmotic sunt de asemenea minime. Precipitarea proteinei n schimb la punctul izoelectric este n schimb maxim, dar nu se deplaseaz sub influena curentului electric.De obicei valorile punctului izoelectric variaz ntre 2,9 i 12,5 i se determin prin diferite metode:poteniometrice, electroforetice.

Precipitarea proteinelor
Sub aciunea diferiilor factori fizici (ultrasunete, radiaii cu diferite lungimi de und, cldur), factori chimici (acizi, baze, diferii solveni organici), sau mecanici (agitare), are loc fenomenul de precipitare a proteinelor, precipitarea care poate fi reversibil sau ireversibil.

15

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Precipitare reversibil
Precipitarea reversibil se poate produce sub aciunea soluiilor concentrate ale srurilor alcaline dar i n prezena unor dizolvani organici miscibili cu apa n orice proporie, cum sunt de exemplu acetona i alcoolul.n cadrul acestei precipitri molecula proteinei sufer unele modificri fizico-chimice, dar nu are loc afectarea structurii moleculare. Puterea de precipitare a proteinelor de ctre diferii ioni este data de seria liofil a lui Hofmeister [8]. Dac anionul rmne acelai, puterea de precipitare a cationilor scade n urmtoarea ordine: Li+>Na+>NH4+> cnd cationul ramne acelai anionii se comport astfel: SO42->PO43->CH3COO>Citrat->tartrat->Cl->NO3->ClO3->Br->I->SCN-. Solvenii de tipul alcoolului sau acetonei n funcie de concentraia lor pot forma fie precipitate reversibile sau ireversibile. Srurile alcaline au un comportament diferit fa de proteine, n soluii diluate mrind solubilitatea proteinelor, iar n soluii concentrate determinnd precipitarea lor reversibil. De altfel soluiile srurilor alcaline de diferite concentraii se folosesc pentru precipitarea fracionat a proteinelor din amestecuri.

Precipitare ireversibil
n cursul acestei precipitri molecula proteinei sufer modificri fizicochimice ireversibile avnd loc i modificarea structurii moleculare. De regul se produce la adugarea de soluii ale metalelor grele (Cu,Pb, Hg, Fe, a acizilor minerali tari (HNO3, H2SO4) acidul tricloracetic, a soluiilor concentrate de alcool sau aceton, sau in cazul anumitor proteine n prezena cldurii. Prin precipitare ireversibil, dup cum arat i numele proteinele i pierd activitatea lor biologic (enzimatic, hormonal, etc.), are loc o descretere a solubilitii, modificarea activitii optice, de asemenea sunt mai uor de degradat sub aciunea unor enzime proteolitice. Prin ndeprtarea factorilor care au dus la precipitare, proetienele nu revin la forma lor iniial i nu ii pot reface structura molecular. Proteinele precipitate i pierd din proprietile hidrofile "obnnd" proprieti hidrofobe.

Glucide
Zaharidele cunoscute i sub denumirea de glucide sunt substane organice, cu funciune mixt ce au n compoziia lor att grupri carbonilice ct i grupri hidroxilice. Glucidele constituie o clas de substane foarte important att pentru organismele animale ct i pentru cele vegetale. Sub aspect biochimic i fiziologic , glucidele constituie o materie prim pentru sinteza celorlalte

16

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

substane:proteine, lipide, cetoacizi, acizi organici. De asemenea constituie substane de rezerv utilizate de ctre celule i esuturi. Biosinteza lor se realizeaz prin fotosintez.

Nomenclatura
Cel care incearc prima dat s denumeasc glucidele este C.Schmidt n anul 1844,care le denumete hidrai de carbon,datorit raportului observat ntre atomii de hidrogen i oxigen de 2:1.Se propune formula general de Cn(H 2O)n. Formula propus are 2 incoveniente: Hidrogenul i oxigenul nu sunt legai sub forma de molecule de ap de atomul de carbon sunt substane de tipul aldehidei formice CH2O, acid lactic C 3(H2O)3, care nu sunt glucide.

Nomenclatura actual de glucide provine de la grecescul (glikis=dulce).Nici aceast denumire nu este riguros tiinific deoarece glucide cu mas mare(celuloz, amidon) nu au gust dulce.

Clasificarea
Are la baz comportarea glucidelor la reacia de hidroliz:
1. Oze - Cunoscute i sub denumirea de monoglucide sunt glucidele care prin hidroliz nu pot fi descompuse n molecule mai simple care s posede proprieti fizico - chimice caracteristice glucidelor; 2. Ozide - substane formate prin unirea mai multor molecule de monoglucide:

Oligoglucide formate dintr-un numr mic de resturi de monoglucide Poliglucide numr foarte mare de monoglucide.

Lipide
Lipidele sunt substanele organice grase, insolubile n ap, dar solubile n majoritatea substanelor organice, ce conin grupa hidrocarbon. Acestea joac un rol important n viaa materiei vii. Lipidele au urmatoarele funcii: 1. energetic i de rezerv (lipidele sunt mai energoeficiente ca proteinele, fiind pstrate n organism cel mai des n esutul adipos);

17

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

2. structural (sunt prezente n cadrul membranei celulare, constituind un fel de barier pentru substanele de dinafar); 3. regulatorie (hormonii lipidali); 4. imunoprotectoare; 5. de accelerare a metabolismului (n calitate de coenzime); 6. de pigmeni.

Rol n cadrul materiei vii

- izolatori termici -protectie mecanica -depozit de substante cu valoare energetica

Structura
Clasificarea
1. Lipide simple

Triglicerid; Eter

2. Lipide complexe
o

Fosfolipid;

glicofosfolipid; fosfosfingolipid;

o o

Steroid; Glicolipid.

Vitamine
Vitamina D; Vitamina E;

18

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Vitamina K.

Metabolismul definitie, generalitati

Conform DEX, metabolismul este reprezentat de totalitatea proceselor complexe de sintez, de asimilare (cu nmagazinare de energie), de degradare i de dezasimilare (nsoit de eliberare de energie), pe care le sufer substanele dintr-un organism viu. Metabolism bazal = cantitatea de calorii produse ntr-o or, n condiii de repaus al organismului, raportat la un metru ptrat din suprafaa corpului. Din fr. mtabolisme. Altfel spus metabolismul este suma tuturor reactiilor enzimatice din celula. Este o activitate orientata, coordonata superior, la care participa mai multe seturi de sisteme multienzimatice corelate (reactii chimice catalizate de enzime), asigurand schimbul de materie si energie intre celula si mediul sau inconjurator. n aceste reactii enzimatice, produsul unei reacii devine substrat pentru urmtoarea reacie din secven, produii succesivi ai reaciilor chimice fiind cunoscui ca metabolii. Functiile metabolismului: 1. Obtinerea enegiei chimice din molecule combustibil. 2. Conversia substantelor nutritive exogene in unitati constituiente (precursori) ai componentelor macromoleculare. 3. Asamblarea acestor elemente in proteine, acizi nucleici, lipide si alte componente celulare. 4. Formarea si degradarea biomoleculelor necesare diferitelor functii celulare specializate. Metabolismul are doua sensuri, doua directii de actiune a reactiilor chimice:
-

Catabolismul reprezentat de degradarea constituientilor celulari la compusi simpli, rezultand energie (reacie exoterm). Anabolismul reprezentat de edificare si refacere a constituientilor celulari din compusi simpli, consumand energie (reacii endoterme).

19

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Energia necesar proceselor de biosintez provine n cea mai mare parte din desfacerea legturilor macroergice ale diferiilor compui (ATP). n funcie de capacitatea de producere a energiei, organismele se mpart n :

autotrofe (greac autos=nsui; trophe=hran) - organisme care i sintetizeaz substanele organice necesare, prin procesul de fotosintez i chemosintez. heterotrofe (greac heteros=diferit; trophe=hran) - organisme care i asigur hrana folosind diferite substane n descompunere (saprofite sau parazitnd alte organisme vii (parazite)).

Catabolismul i anabolismul se desfoar printr-o succesiune a numeroase reacii chimice: hidroliz, hidrogenare, deshidratare, decarboxilare, dezaminare, transaminare, esterificare, condensare, polimerizare.

Reacia de hidroliz
Hidroliza este procesul de desfacere a unei legturi chimice prin combinare cu apa (H2O). Aceasta se realizeaz prin scindarea moleculei de ap n hidrogen i hidroxil (-OH). Reacia invers a hirolizei este reacia de condensare cnd se accept ionul de hidroxil cu formare de ap.

n acest fel sunt desfcute n biologie prin procesele metabolice cu ajutorul enzimelor moleculele mari de proteine, polizaharahide sau lipide n molecule mai mici monomere. Sursa de energie necesar reaciei o asigur ATP-ul (acidul adenozintrifosforic).

Reactia de hidrogenare
Hidrogenarea este o reactie de aditie a hidrogenului rupand legaturile duble C=C din grasimi.

20

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III Reactia de decarboxilare

Decarboxilarea este o reactie chimica prin care un produs care contine o grupare carboxil este degradat la CO2 si un metabolit intermediar.

Prin acest proces proces se formeaz aminele corespunztoare: din histidina se formeaz histamina i heparina; din triptofan > serotonin; din fenilalanina adrenalin i noradrelanin. Tot prin decarboxilare se formeaz i amine toxice (cadaverin).

Reactia de dezaminare
Dezaminarea este o reactie chimica prin care este eliminata dintr-un produs gruparea aminica. Are loc in mediu cu pH neutru sau slab alcalin ,cu formare de NH3 si acizi grasi nesaturati ,acizi grasi saturati sau hidroxiacizi. Dezaminarea are loc intotdeauna cu formare de NH3,care potate fi folosit in procesele biosintetice ca sursa de azot. Surplusul se elimina in mediu. Cantitatea de NH3 care se formeaza depinde de raportul dintre cantitatea de hidrati de carbon si de substante azotoase . Cand cantitatea de substante azotoase este mare ,se produce acumularea de ammoniac. Dezaminarea poate avea loc in conditii oxidative-aerobioza, sau in conditii reductive-anaerobioza. Astfel, in aerobioza poate avea loc o dezaminare oxidative sau hidrolitica cu formare de acizi organici nesaturati-cetoacizi,hidroxiacizi, si NH3.Aceasta este realizata de bacteriile aerobe si mucegaiuri. Dezaminare oxidativa are loc cu formare de NH3 si cetoacizi ,care pot fi ulterior complet oxidati si transformati in CO2 si apa . Prin acest process poate avea loc si dezaminarea aminoacizilor dicarboxilici . Procesul poate avea loc cu si fara participarea oxigenului molecular.

21

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Dezaminare hidrolitica are loc cu formare de hidroxiacizi in prezenta apei .

Reactia de transaminare
Transaminarea este o reacie chimic n cadrul metabolismului constnd n
transferul reversibil al grupului amino ctre diveri aminoacizi. Altfel spus, transaminarea const n procesul de transfer al gruprii amino de pe un aminoacid pe un cetoacid. La acest proces pot participa mai mult de jumtate din aminoacizii prezeni n fondul metabolic al organismului: acid glutamic, acid aspartic, alanina, ariginina, lizina, triptofanul, tirozina, fenilalanina, valina. leucina, cisteina. Transaminarea asigur sinteza continu de aminoacizi i cetoacizi corespunztori, reaciile fiind reversibile.

Reactia de esterificare
Prin esterificare se nelege totalitatea proceselor de obinere a esterilor. Esterii sunt derivai funcionali ai acizilor carboxilici, n care hidrogenul acid din gruparea OH este nlocuit cu un rest organic. Modul cel mai uzual de obinere a esterilor este prin reacia de esterificare direct a unui acid carboxilic cu un alcool, cu eliminare de ap. Reacia de esterificare i de saponificare (reacia invers) sunt reacii de echilibru, catalizate printre altele de protoni:

COOH + R'

OH

H+

COOR'

H2O

Reactia de condensare
Reacii de condensare sunt reprezentate de unirea moleculelor de compui carbonilici prin gruparea metilenic din poziia alfa ( condensare metilenic ) sau prin eliminarea unei molecule de ap ( condensare carbonilic ) => aldoli, respectiv aldehide/cetone nesaturate

22

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Reactia de polimerizare
Polimerizarea este procesul prin care mai multe molecule identice nesaturate se unesc formand o macromolecula. In reactiile de polimerizare n molecule de substanta M se unesc formand macromoleculele care au aceeasi compozitie cantitativa cu a substantei care polimerizeaza, insa produsul rezultat are proprietati complet diferite.

Reactiile catabolice
Reaciile catabolice genereaz energie. Ele se desfoar n dou faze succesive. ntr-o prim faz are loc metabolizarea incomplet, pe ci specifice, a substanelor nutritive, pn la stadiul de acetil coenzim A i acid oxaloacetic, produi intermediari comuni glucidelor, lipidelor i proteinelor. n aceast faz se elibereaz o cantitate redus de energie. n faza a doua are loc metabolizarea complet a produilor intermediari.

Aceast faz este comun tuturor substanelor nutritive. Ea const n reacii de oxido-reducere prin care se elibereaz peste 90% din energia chimic a moleculelor. O parte din aceste reacii se desfoar ciclic, n cadrul ciclului citric sau ciclul lui Krebbs, iar o alt parte are loc la nivelul lanului sau catenei respiratorii celulare.

Toate aceste reacii const, n esen, din arderea alimentelor n prezena oxigenului. n organism, energia se elibereaz treptat, n etape succesive, i nu se transform toat n cldur, ci o parte se depoziteaz. Ciclul Krebbs i catena respiratorie au sediul n mitocondrii, unde se desfoar respiraia celular. Reaciile anabolice necesit energie, iar cele catabolice elibereaz energie. Din aceast cauz ele se desfoar cuplat.

23

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Energia chimic nu poate fi utilizat direct: mai nti, ea este nmagazinat sub form de compui macroergici, al cror reprezentant principal este acidul adenozintrifosforic ( ATP ). Depozitarea energiei sub form de legturi fosfatmacroergice reprezint 40% din energia chimic eliberat n procesele de oxidare metabolic. Restul se pierde sub form de cldur. Totalitatea schimburilor energetice organism mediu reprezint metabolismul energetic.

Reactii anabolice
* Glicogeneza - formarea glicogenului n glucoz prin procesul de hidroliz. Atunci cand nivelul de glucoza din sange este ridicat, celulele hepatice si musculare in special, activeaza glicogeneza determinand depozitarea materialului energetic in depozite de glicogen care vor fi degradate la glucoza in caz de nevoie. * Gliconeogeneza - formarea glucozei din proteine i grsimi. Atunci cand nivelul glicemiei este scazut si s-au consumat rezervele de glicogen, se activeaza calea gliconeogenezei care va sintetiza glucoza din proteine si grasimi. * Sinteza porfirinelor. Porfirinele sunt un grup de compui definii prin structura lor chimic, fiind o parte integrant a anumitor proteine care se gsesc n organism, precum hemoglobina, mioglobulina i enzime specifice. - cresterea si mineralizarea oaselor sau cresterea masei musculare.

METABOLISMUL ENERGETIC
Conservarea structurilor i perfecionarea lor, refacerea uzurilor necesit mult energie pe care sistemele vii o preiau din mediul nconjurtor, sub form de legturi chimice ale macromoleculelor, i o redau mediului sub form de cldur. Metabolismul energetic studiaz geneza i utilizarea energiei chimice a substanelor alimentare. Energia este eliberat la nivelul celulelor (n special

24

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

n mitocondrii) prin reacii de oxidare a lipidelor i glucidelor, uneori i a proteinelor. Aceast energie este nmagazinat mai nti sub forma unor noi legturi chimice, bogate n energie (legturi fosfat macroergice de ATP i CP). Fiecare celul folosete ATP ca surs primar de energie, pentru ndeplinirea funciilor sale caracteristice. Celulele acioneaz ca adevrai transformatori ai energiei chimice a substanelor n energie mecanic, electric caloric, osmotic .

DETERMINAREA METABOLISMULUI ENERGETIC

Deoarece toate transformrile energetice din orice sistem duc, n final, la apariia de energie caloric, schimburile energetice organism mediu pot fi evaluate prin calorimetrie i exprimate n calorii. Metodele calorimetrice pot fi directe i indirecte. Calorimetria direct const din msurarea cldurii degajate de un organism viu ntr-un interval de timp. Se folosesc camere calorimetrice. Producia caloric a organismului este evaluat cu ajutorul unor sisteme termoelectrice. Calorimetria indirect. Se bazeaz pe faptul c toat producia caloric a organismului provine din reacii de oxidare. n organism, ca i n bomba calorimetric, alimentele sunt arse n prezena oxigenului care se consum. n organism, arderile sunt mult mai lente, au loc n etape succesive, iar energia se elimin treptat. Prin determinarea consumului de oxigen ntr-un interval de timp se poate calcula calorigeneza corespunztoare. Trebuie s cunoatem puterea caloric (echivalentul caloric)a oxigenului i volumul de oxigen consumat de organism.

METABOLISMUL ENERGETIC DE BAZ ( METABOLISMUL BAZAL )

Fiecare organism prezint dou feluri de cheltuieli energetice: cheltuieli fixe, minime, necesare meninerii funciilor vitale (respiraie, circulaie, activitatea sistemului nervos) i cheltuielile variabile, n funcie de activitatea muscular, digestiv sau termoreglatoare.

25

Dr. Sorin Gheorghe Bolog BIOCHIMIE curs III

Primele reprezint metabolismul bazal, iar ultimele metabolismul energetic variabil Metabolismul bazal se determin n anumite condiii speciale: repaus fizic i psihic repaus digestiv de 12 ore i post proteic de 24 ore. Ingestia de proteine crete metabolismul bazal cu 30%, fenomen denumit aciunea dinamic specific a proteinelor (ADS). repaus termoreglator. stare de veghe. Metoda de determinare este calorimetric indirect.

Metabolismul bazal variaz n funcie de numeroi factori fiziologici: vrsta, sex, felul de via etc.

METABOLISMUL ENERGETIC VARIABIL

Cheltuielile energetice ale organismului pot crete n cursul eforturilor fizice de 10-20 de ori fa de cele bazale. Munca fizic necesit mult energie, care trebuie acoperit prin consum sporit de alimente energetice. n raport cu gradul efortului fizic prestat, cheltuielile energetice se clasific n cinci categorii: Cheltuieli energetice de repaus Cheltuieli energetice din efortul fizic uor Cheltuieli energetice din efortul fizic mediu Cheltuieli energetice n efortul fizic greu Cheltuieli energetice n efortul fizic foarte greu.

Tema OPTIONALA: Rezumatul cursului nr. 3 de biochimie.

26