FIZIOLOGIA SISTEMULUI IMUN IMUNITATEA Definitie: 1.

. condiie n care organismul, n contact cu un agent patogen (microbian sau de alt natur) nu contracteaz n mod specific starea patologic (boala) indus de agentul patogen respectiv; 2.totalitatea mecanismelor de aparare impotriva microorganismelor invazive (bacterii, virusuri,paraziti) si a structurilor non-self. IMUNITATEA INNASCUTA NESPECIFICA: structuri si mecanisme cu rol protector (tegumente, mucoase, enzime din secretii exocrine lizozimul, bactericidina), pH-ul secretiei gastrice, temperatura corpului ce ofera conditii precare de dezvoltare unor microorganisme, presiunea mare a O2 in alveolele pulmonare ce inhiba dezvoltarea germenilor anaerobi, nivelul cortizolemiei ce influenteaza raspunsul inflamator si rezistenta la infectii. IMUNITATEA INNASCUTA SPECIFICA: rezistenta unui organism fata de anumiti agenti microbieni care il particularizeaza de alte organisme din aceeasi populatie sau specie, sensibile la actiunea acelor agenti microbieni. Atunci cnd rezistena caracterizeaz toi membrii unei specii, aceasta nu este o condiie de imunitate, ci o lipsa de susceptibilitate a speciei, sau lips de agresivitate a agentului microbian. IMUNITATEA DOBINDITA: condiia organismului care prezint o stare de rezisten specific fa de un anumit agent patogen microbian. Aceast rezisten se poate instala ACTIV, ca IMUNITATE NATURALA, n urma contactului cu diferite microorganisme, sau ARTIFICIALA, n cazul administrrii de antigene sub forma VACCINURILOR. IMUNITATEA NATURALA DOBINDITA IN MOD PASIV: este consecutiv pasajului anticorpilor materni la ft. IMUNITATEA DOBINDITA ARTIFICIAL: se poate instala n mod pasiv, n urma administrrii de seruri imune sau anticorpi preformai. ANTIGENUL: este orice molecula de origine endogen sau exogen, recunoscuta de un organism ca non-self, impotriva careia se
1

declanseaza RASPUNS IMUN specific umoral (productie de anticorpi) sau celular (clone specifice efctorii). Definirea unei molecule de antigen implica si capacitatea sa de a interactiona cu efectorii raspunsului imun (anticorpi sau celule efectorii). Moleculele celmai bine recunoscute ca Ag sint proteinele cu masa moleculara relativ mare (Mr > 10000D), dar pot functiona ca Ag si polipeptide de mici dimensiuni si chiar molecule de sinteza cu Mr< 1000D. Pot fi Ag si moleculele polizaharidice, lipidice, acizi nucleici sau moleculele organice de sinteza. Cind in mod accidental sint recunoscute ca Ag si moleculele normale ale propriului organism, se instaleaza autoimunitatea. RASPUNSUL IMUN: implic n mod absolut necesar stimularea i proliferarea limfocitelor antigen-specifice i sinteza unor molecule de recunoatere a antigenului, reprezentate de anticorpi i/sau receptori membranari. O substan este antigenic dac ea declaneaz un rspuns imun i reacioneaz specific cu anticorpii sau receptorii membranari aprui n timpul rspunsului imun. Rspunsul imun se deruleaz n trei secvene: 1.Selecia clonal este etapa n care snt selectate de ctre antigen doar acele limfocite capabile s recunoasca antigenul, denumite limfocite antigen-specifice. O clon limfocitar este o populaie de limfocite capabil s recunoasca un singur tip de antigen, datorit prezenei pe suprafaa membranei celulare a unui singur tip de receptor pentru antigen. 2.Activarea clonal: activarea metabolismului intermediar al limfocitelor selectate; 3.Expansiunea clonal: proliferarea celulelor selectate i activate metabolic; consecin: creterea numrului limfocitelor din clona stimulat de antigen. Antigenul: caracter imunogen; imunogenitatea este complementar unei alte caliti a antigenului, specificitatea: capacitatea antigenului de a reaciona specific numai cu receptorii antigenici solubili (anticorpi) sau membranari, aprui ca urmare a stimulrii antigenice.

Antigenele se mpart n dou categorii: antigenele complete sau imunogenele i antigenele incomplete sau haptenele. Imunogenele: antigene caracterizate de imunogenitate i specificitate. Ele snt timodependente i timoindependente. ANTIGENELE COMPLETE TIMODEPENDENTE declaneaz fie rspuns imun de tip celular, (RIC), fie rspuns imun de tip umoral (RIU); apariia rspunsului imun este condiionat de implicarea LIMFOCITELOR T HELPER (LTH) ntr-un proces complex de cooperare intercelular. Majoritatea antigenelor aparin acestei categorii, fiind de natur proteic. ANTIGENELE COMPLETE TIMOINDEPENDENTE snt capabile s declaneze doar RIU, ele stimulnd direct limfocitele B, independent de prezena LTH. Ele reprezint o categorie minoritar de antigene. ANTIGENELE INCOMPLETE (haptenele) snt substane cu greutate molecular mic sau foarte mic incapabile s declaneze un rspuns imun n lipsa cuplrii cu o macromolecul complex i intens imunogen, denumit purttor sau carrier. Haptenele au numai specificitate, nu i imunogenitate. Un antigen complet este alctuit dintr-o component haptenic, responsabil de specificitatea antigenului, denumit determinant antigenic i de o componenta carrier, ntreg ansamblul haptencarrier fiind responsabil de imunogenitatea antigenului. Determinanii antigenici snt de dou tipuri: 1.liniari sau secveniali i 2.conformaionali. Cei liniari snt alctuii din lanuri scurte de aminoacizi (8-12), dispui succesiv n lanul peptidic i recunoscui doar de limfocitele T, dup prelucrarea antigenelor integrale de ctre celulele prezentatoare de antigen (CPA). Determinanii antigenici conformaionali snt alctuii din grupuri de 8-12 aminoacizi ce aparin unor regiuni diferite ale lanului peptidic sau chiar unor lanuri diferite, aflai n proximitate datorit unor puni disulfurice sau unor legturi necovalente. Ei snt recunoscui doar de limfocitele B (LB) i de anticorpi. FUNCTIONAL : determinanii antigenici snt de tip efector i de tip imunoreglator. Determinanii antigenici efectori: pot fi de tip conformaional, cnd snt recunoscui numai de limfocitele B i declaneaz RIU (determinani antigenici B), sau de tip
3

 secvenial, cnd snt recunoscui de limfocitele T citotoxice (LTC) i induc RIC (determinani antigenici C). Determinanii antigenici imunoreglatori: snt implicai n controlul intensitii rspunsului imun declanat; snt recunoscui de limfocitele T helper care amplifica rspunsul imun declanat (determinani antigenici H), sau de limfocitele T supresoare (determinani antigenici S), care limiteaz sau chiar sisteaz raspunsul imun declanat. Antigenele alctuite predominent din determinani efectori (B sau C) i determinani reglatori H se comport ca imunogene, iar antigenele alctuite predominent din determinani antigenici S au comportament tolerogen, fiind implicate in procesul de toleranta imuna. Antigenele snt caracterizate de imunogenitate, specificitate i de imunomodulare, proprietate prin care antigenul este implicat in decizia asupra tipului de raspuns imun indus i a intensitii acestuia. Determinanii antigenici efectori snt recunoscui de limfocite extrem de mult diversificate (zeci de milioane de clone limfocitare diferite). Determinanii antigenici imunoregulatori snt implicai n supravegherea rspunsului imun indus. Aceast categorie include determinanii antigenici H, care snt recunoscui de ctre limfocitele T helper cu rol de amplificare a rspunsului imun declanat i determinanii antigenici S, care snt recunoscui de catre limfocitele T supresoare, cu rol de limitare sau chiar sistare a rspunsului imun. Pentru a fi imunogen, antigenul trebuie s fie o substan nonself sau strin. Cel mai frecvent, antigenele snt percepute ca nonself dac provin din organisme diferite pe scar filogenetic. Antigenul este cu att mai imunogen cu ct are o structur mai complex i este prelucrat de ctre CPA. Tipul de rspuns imun indus de un imunogen i amploarea acestuia snt condiionate genetic de haplotipul de gene MHC motenite. Ptrunse n organism, antigenele complete tranziteaz esuturile, sectorul circulant i organele limfoide secundare (splina i ganglionii limfatici). Antigenele T independente ajunse n splin i ganglionii limfatici declaneaz RIU, ca urmare a activrii directe a limfocitelor B. Antigenele T dependente snt captate la nivel tisular de diferite CPA. Acestea le transport preponderant pe cale limfatic la organele limfoide secundare (splin, ganglionii limfatici, esutul
4

limfoid). Aici, ele snt prezentate sub forma unor fragmente ale determinanilor antigenici (denumite epitopi) limfocitelor B sau T, rspunsul imun indus putnd fi de natur umoral sau celular, n funcie de natura imunogenului. ORGANIZAREA SISTEMULUI IMUN Sistemul imun cuprinde dou compartimente: 1.compartimentul central: alctuit din mduva hematogen (unde se produc i matureaz limfocitele B i se produc limfocitele T) i din timus, sediul maturrii limfocitelor T i 2.compartimentul periferic: reprezentat de esutul limfoid capsulat i necapsulat. Splina i ganglionii limfatici alctuiesc esutul limfoid capsulat i reprezint sediul derulrii celei mai mari pri a rspunsului imun. Ariile timodependente ale organelor limfoide secundare capsulate, populate de limfocite T, sint: paracortexul ganglionar si stratul limfoid periarteriolar intern al splinei. Ariile bursodependente, populate de limfocite B, ale acestor structuri sint: cortexul ganglionar si stratul periarteriolar extern al splinei. Celulele B sint dispuse in aglomerari denumite foliculi. esutul limfoid necapsulat este localizat la nivelul epiteliului digestiv, bronic i la nivel cutanat.
Scheme Imuno\Fig. 2.36.pdf

CELULELE IMPLICATE IN REALIZAREA RASPUNSULUI IMUN Celulele din sngele periferic implicate n geneza rspunsului imun se regsesc n formula leucocitar astfel: neutrofile 62%, eozinofile 2,3%, bazofile 0,4%, monocite 5,3%, limfocite 30%. Dintre acestea, unele ndeplinesc rol de celule prezentatoare de antigen, i snt profund implicate n diverse etape ale rspunsului imun, iar altele au rol auxiliar n acest proces, fiind implicate ns n tipuri particulare de rspuns imun, cum este aprarea antiparazitar n cazul eozinofilelor sau reaciile de tip alergic n cazul bazofilelor i mastocitelor. Celulele prezentatoare de antigen se mpart n dou categorii, n funcie de eficacitatea lor. CPA profesionale snt reprezentate de macrofage, celulele dendritice i limfocitele B. Din categoria CPA ocazionale fac parte neutrofilele, celulele endoteliale, celulele epiteliale i epidermice.
5

Scheme Imuno\Fig.2.1.pdf

MACROFAGELE snt celule produse la nivelul mduvei hematogene. Forma circulant a acestora e reprezentat de monocite, care dup ce tranziteaz pentru numai 12-24 de ore torentul circulator, ajung n esuturi, prin traversarea peretelui capilar prin diapedez, ele fiind atrase de o serie de factori chemotactici. Maturaia macrofagelor se realizeaz intratisular, la acest nivel ele devenind CPA propriuzise. n aceast calitate, macrofagele capteaz antigenele corpusculare sau particulate (bacterii, virusuri, parazii de mici dimensiuni, diverse celule somatice devenite imunogene), ele neputnd capta antigenele solubile. Macrofagele se ntlnesc n alveolele pulmonare, splin, ganglionii limfatici, mduva hematogen, sinusoidele hepatice (celulele Kupffer), cavitatea sinovial (celulele A sinoviale), esutul conjunctiv (histiocitele), rinichi (celulele mezangiale), creier (celulele microgliale). Dup captare, macrofagele endociteaz antigenele captate n decursul procesului de fagocitoz, proces ce consum energie i necesit apariia unor modificri citoscheletale ce duc la emiterea de pseudopode. Fagocitoza poate fi realizat direct, sau poate fi mult amplificat ca urmare a procesului de opsonizare, proces care implic prezena opsoninelor. Aceste substane snt prezente n plasm i n ser; legate de elementele particulate imunogene ele le confer acestora o mai mare susceptibilitate la fagocitoz. Opsoninele identificate n ser snt: produii de clivare a componentelor complementului (C3b, C5b), imunoglobulinele (IgG1 i IgG3, IgG4, IgG2 i IgA). Macrofagele capteaz antigenele corpusculare opsonizate prin componenta C3b a complementului; exprima pe suprafaa membranei receptori pentru complement (CR), antigene corpusculare opsonizate prin anticorpi de tipul IgG i antigene neopsonizate; macrofagele au pe membrana lor receptori pentru anumite oligozaharide prezente n structura peretelui bacterian, aa cum snt manoza i fucoza (F/MR); in timpul procesului de fagocitoz, realizeaz prelucrarea antigenelor endocitate sub aciunea echipamentului enzimatic extrem de bogat al lizozomilor; n urma
6

prelucrrii antigenului rezulta fragmente denumite epitopi, singurii conservai dintre acetia fiind cei mai imunogeni, denumii epitopi imunodominani; pstrarea unei mici pri din epitopii selectai i eliberarea lor n etape succesive contribuie la ntreinerea n timp a rspunsurilor imune; cea mai mare parte dintre epitopii selectai snt cuplai cu moleculele complexului major de histocompatibilitate MHCII situate pe membrana macrofagelor i prezentati limfocitelor T, n cadrul unui proces de cooperare intercelular; un element cheie n derularea acestui proces este constituit de recunoaterea epitopilor prezentai de macrofag n asociere cu moleculele MHCII de ctre limfocitele T helper (TH) din ariile timodependente ale ganglionilor limfatici. Echipamentul lizozomal al macrofagelor este extrem de bogat. Granulele primare azurofile lizozomale conin enzime hidrolitice: mieloperoxidaz, lizozim i proteine cationice; Granulele secundare conin fosfataz alcalin, lactoferin i lizozim. Evenimentele metabolice ale procesului de fagocitoz produc o serie de specii reactive ale oxigenului: anionul superoxid (produs prin captarea de ctre oxigenul molecular a unui electron n plus), apa oxigenat, radicalul hidroxil, oxigenul atomic (unul dintre electroni se deplaseaz pe o orbit cu energie mai mare). Toi aceti produi snt foarte instabili i au un puternic efect toxic asupra bacteriilor. Macrofagele secret o serie de substane cu diverse roluri n organism: factorul de necroz tumoral (TNF), pirogeni endogeni precum interleukina 1 i interleukina 6 (IL-1 i IL6), componente ale complementului (de la C1 la C5, properdina, factorii B, D, I, H). Macrofagele elibereaz, de asemenea, diferite proteine plasmatice i factori ai coagulrii, -interferon (-IFN), enzime hidrolitice (colagenaze, lipaze, fosfataze), metabolii ai acidului arahidonic.
Scheme Imuno\Fig. 9.6.pdf Scheme Imuno\Fig. 9.7.pdf Scheme Imuno\Fig. 9.9.pdf Scheme Imuno\Fig. 9.11.pdf Scheme Imuno\Fig. 9.18.pdf Scheme Imuno\Fig. 9.19.pdf

CELULELE DENDRITICE snt celule produse de mduva hematogen, de unde migreaz spre diferite esuturi. CARACTERISTICI: -prezena de pseudopode n stare de repaos cu anumite particularitati: snt extrem de numeroase, subiri, efilate sau foarte lungi, depind de cteva ori diametrul celulei, fapt

ce le confer un aspect asemntor celulelor dendritice din sistemul nervos central. Aceste celule snt CPA datorit prezenei pe suprafaa lor a receptorilor pentru captare a antigenelor (CR si FcR) i a moleculelor de prezentare a antigenului, mai ales de tip MHCII. Tipuri de celule dendritice: celulele Langherhans, de la nivel cutanat, care se gasesc si la nivelul mucoasei bucale, faringiene, colului uterin; ele transporta antigenele in paracortexul ganglionar (zona timodependenta), unde vor fi prezentate limfocitelor T; celulele dendritice interstiiale, prezente n diverse esuturi i organe, cu rol asemanator celulelor Langherhans; celulele dendritice interdigitate, din ariile timodependente ale organelor limfoide, cu rol de a produce o mare cantitate de molecule MHCII; celulele dendritice foliculare, repartizate n ariile bursodependente ale organelor limfoide; celule dendritice vluroase, prezente doar n circulaia limfatic i celulele dendritice sanghine, prezente foarte rar pe frotiul de snge periferic i care par nrudite cu celulele polimorfonucleare. NEUTROFILELE reprezint 95% din granulocitele circulante. Au durat de via scurt (2-3 zile), comparativ cu sistemul monocito-macrofagic, ale crui componente pot persista ani i au proprieti asemntoare acestora: marginaia: este procesul de aderare la endoteliul capilar, mediat de receptori ai neutrofilului i liganzi prezeni pe suprafaa celulelor endoteliale i iniiat de chemoatractani ai neutrofilului (factori chemotactici) precum interleukina 8 (IL8); diapedeza este procesul de extravazare prin traversarea capilarului la limita dintre dou celule endoteliale. Dei lipsite de specificitate pentru antigene, neutrofilele joac un rol important n inflamaia acut, intervenind mpreun cu anticorpii i complementul n realizarea proteciei mpotriva microorganismelor. Agenii chemotactici pentru neutrofile: fragmente ale complementului (C5a), factori derivai din sistemul fibrinolitic i sistemul kininelor, factori derivai din alte tipuri de leucocite, bacterii i trombocite.

Neutrofilele conin un ntreg arsenal de proteine stocate n dou tipuri de granulaii lizozomale: granulaiile primare azurofile conin hidrolaze acide, mieloperoxidaz i lizozim (muramidaz); granulaiile secundare (specifice) conin lactoferin, lizozim i proteine cu efect antibiotic: defensine, seprocidine, catelicidine i proteina inductoare a permeabilitii bacteriene (BPI bacterial permeability inducing protein). Neutrofilele au receptori pentru fraciunea Fc a IgG (FcR), prin intermediul crora pot fi activate de complexe imune, intervenind astfel n mecanismul declanrii hipersensibilitii de tip III. Neutrofilele au precursor medular comun cu monocitele, CFUGM (colony-forming-unit-granulocyte macrophage unitate formatoare de colonii pentru granulocite i macrofage), derivat din celula stem pluripotent. Mieloblatii derivai din acest precursor comun devin promielocite i apoi mielocite, care se maturizeaz i ajung n circulaie ca neutrofile mature. Pe parcursul acestor diviziuni i diferenieri celulare, apar modificari ale markerilor de suprafa celulari: CFU-GM exprim molecula MHCII i CD38 pe suprafaa lor, n timp neutrofilul exprim CD13, CD14, CD15. Un element important n activitatea neutrofilului (fagocitoza i chemotaxia) desfurat n prezena opsoninelor este interaciunea direct cu microorganismele sau/i citokinele eliberate n timpul rspunsului imun. EOZINOFILELE:celule cu slabe performane fagocitare care reprezint 2-5% n formula leucocitar a sngelui periferic. Ele snt totui capabile de a distruge microorganisme endocitate i joac un rol important n aprarea antiparazitar. Mecanismul de aciune mpotriva paraziilor implic fenomenul de degranulare a eozinofilelor, proces n urma cruia este eliberat coninutul granulelor n mediul extracelular. Acest proces poate fi declanat i de ali stimuli. Nu snt celule prezentatoare de antigen, eozinofilul fiind implicat n limitarea procesului inflamator i reducerea migrrii neutrofilelor n focarul inflamator datorit eliberrii de histaminaz i aril-sulfataz, inactivatorii substanelor cu efect proinflamator eliberate de mastocite. BAZOFILELE SI MASTOCITELE: celule implicate n realizarea rspunsului imun, dar nu snt celule prezentatoare de antigen.

Bazofilele snt foarte puin numeroase n sngele periferic, ele reprezentnd numai 0,2% din leucocitele circulante. Mastocitele snt celule extrem de asemntoare bazofilelor din punct de vedere funcional; se gsesc doar la nivelul mucoaselor i esutului conjunctiv, fiind clasificate din acest motiv n dou categorii: mastocite ale mucoaselor (MMC mucosa mast cell) i mastocite ale esutului conjunctiv (CTMC conective tissue mast cell). Prima categorie pare T-dependent, n timp ce cea de a doua categorie de mastocite prolifereaz independent de limfocitele T. Bazofilele i mastocitele conin granulaii bogate n heparin, leucotriene, histamin i factorul eozinofil chemotactic al anafilaxiei (ECF-A). Stimulul degranulrii bazofilelor i mastocitelor este cel mai frecvent un antigen capabil s declaneze reacii alergice, adic un alergen. Pentru declanarea acestui tip de rspuns imun, alergenul interacioneaz prin intermediul IgE situate la suprafaa bazofilelor i mastocitelor care exprim receptori pentru fraciunea Fc a acestor imunoglobuline (FcR). Mediatorii eliberai astfel produc simptomele clinice inflamatorii caracteristice alergiei. LIMFOCITELE B pot juca rolul de CPA, datorit prezenei pe membrana lor a receptorilor de captare a antigenelor (CR, FcR si BCR) i a moleculelor MHCII, prin care pot prezenta celulelor T diversele antigene. Caracteristic limfocitelor B este capacitatea lor de a capta antigenele solubile i nu pe cele de tip corpuscular. MOLECULELE PREZENTATOARE DE ANTIGEN Cele dou tipuri de molecule prezentatoare de antigen, MHCI i MHCII snt sintetizate sub strictul control al unui grup de gene situat pe braul scurt al cromozomului 6. Moleculele MHCI: prezente pe suprafaa tuturor celulelor din organism, cu excepia eritrocitelor. Ele snt specializate n prezentarea antigenelor endogene, fiind recunoscute n decursul cooperrii intercelulare de ctre limfocitele T citotoxice i supresoare, care au pe suprafaa lor molecula CD8 i snt implicate n reacia de respingere a grefei. Moleculele MHCII: prezente numai pe suprafaa celulelor implicate n geneza rspunsului imun, aa cum snt CPA, limfocitele B, limfocitele T. Ele snt specializate n prezentarea antigenelor exogene, fiind recunoscute de molecula CD4 de pe membrana limfocitului T helper.

10

POPULATIILE LIMFOCITARE LIMFOCITELE T reprezint o clas celular foarte heterogen,n cadrul creia se descriu patru subclase de limfocite T: helper, citotoxice, supresoare i contrasupresoare. Aceast clasificare nu corespunde integral realitii, ea bazndu-se pe diferenierea fenotipic a subclaselor limfocitare. Spre exemplu, nu toate limfocitele T CD4 snt helper, unele fiind citotoxice sau chiar supresoare, aa cum nici toate celulele CD8 nu snt exclusiv citotoxice sau supresoare, unele avnd comportament de tip helper, dovedit prin factorii solubili secretai. Limfocitele T: reprezint 60-80% din totalul limfocitelor periferice i au o durat de via mare (ani, zeci de ani), ele fiind intens recirculate. Pe suprafaa lor se disting trei categorii de receptori: 1.receptori pentru recunoaterea antigenic, i anume: TCR (T cell receptor); complexul CD3 (CD = clas de difereniere) cu rol n recunoaterea antigenului sau epitopului prezentat de CPA; CD4 sau CD8 care snt co-receptoti implicai n recunoaterea moleculelor prezentatoare de antigen MHC; 2.receptori cu rol accesor n activarea limfocitelor T: CD28, CD45, CD25; 3.receptori cu rol n adeziunea intercelular: CD2, CD11/CD18. Limfocitele T recunosc antigenul dup structura primar a determinantului antigenic, spre deosebire de limfocitele B i imunoglobuline, care recunosc antigenele dup structura lor spaial. Ele recunosc numai antigenele expuse asociat de moleculele MHC pe suprafaa CPA. Clasificare fenotipica: limfocite TH (CD3+/CD4+/CD28+); limfocite TC (CD3+/CD8+/CD28+); limfocite TS (CD3+/CD8+/CD28-). Activarea limfocitelor T: este realizat numai de antigenele T dependente, n cadrul unui proces ce necesit n mod obligatoriu participarea CPA. Cooperarea dintre CPA i limfocit este de tip
11

bidirecional, ambele celule activndu-se reciproc. Activarea limfocitului T de ctre CPA este anterograd, ea derulndu-se n sensul prezentrii antigenului. Activarea limfocitului este realizat prin intermediul unor semnale activatoare transmise spre citoplasm prin intermediul a dou ci distincte: 1.calea principal, a binomului TCR-CD3, dup strbaterea creia are loc activarea metabolic i stimularea diviziunii celulare; efectul global este expansiunea clonala i 2. calea secundar, reprezentat de CD28, prin intermediul creia se realizeaz stimularea funciilor efectorii ale limfocitelor T care produc fie interleukine (limfocitele TH), fie mediatori implicai n distrugerea imunogenilor (limfocitele TC). Activarea retrograd se deruleaz dinspre limfocitul T ctre CPA, care este activat. Ea se desfoar n sens invers fa de prezentarea antigenic. Acest tip de activare se realizeaz prin eliberarea de ctre limfocitul T a IL-4 i/sau a IFN-. Efectul acestor substane este cel de a stimula exprimarea pe suprafaa CPA a moleculelor MHCII, ceea ce sporete capacitatea de prezentare a antigenului. Activarea limfocitelor T se desfoara n dou etape, prima fiind antigen-independent, iar cea de a doua- antigen-dependent. n timpul primei etape, are loc stabilirea unor contacte extinse i intime ntre suprafeele membranare ale CPA i limfocitele T. Cea de a doua etap const n stabilirea unor legaturi ntre complexul epitop/MHC de pe suprafaa CPA i binomul TCR/CD4 sau TCR/CD8 de pe suprafaa limfocitului T. Stimularea antigenic a limfocitelor T este urmat de trecerea acestora din faza G0 a ciclului mitotic la faza G1, dup care vor parcurge fazele S i G2. Toate limfocitele aflate n una din fazele G1/S/G2 se afl n interfaz i se numesc limfoblati T. Cei care depesc faza G2 trec n faza M, celulele rezultate devenind n cea mai mare parte limfocite T efectorii, cu rapid implicare n derularea rspunsului imun deja declanat. O mic parte dintre aceste celule snt pstrate n diverse sectoare ale organelor limfoide, ele fiind celule cu memorie.
Scheme Imuno\Fig. 2.41.pdf

LIMFOCITELE B reprezint 15-20% din totalul limfocitelor periferice. Ele snt puin recirculate i au durat scurt de via.
12

Majoritatea snt distribuite n cortexul ganglionilor limfatici i n pulpa alb a splinei, unde alctuiesc foliculii limfoizi. Pe suprafaa membranei limfocitelor B exist aceleai categorii de receptori, ca i n cazul limfocitelor T: receptori pentru recunoaterea antigenului BCR (B cell receptor), receptori cu rol accesor n activarea metabolic a limfocitelor B, (CD45 i CD25) i receptori de adeziune intercelular. Limfocitele B recunosc antigenele solubile dup structura spaial a determinanilor antigenici; nu necesit prezena i implicarea CPA n declanarea rspunsului imun; dup stimularea antigenic, limfocitele B parcurg etapele ciclului celular n mod asemantor cu limfocitele T, devenind limfoblati B, a cror principal caracteristic este prezena unui mare numr de molecule MHCII pe suprafaa membranei celulare, fapt ce le confer posibilitatea de a funciona ca CPA; celulele rezultate n urma diviziunilor celulare devin limfocite B efective, adic plasmocite, cu direct implicare n derularea i finalizarea rspunsului imun;o mic parte dintre ele trec n rezerv ca limfocite B cu memorie, n anumite sectoare din organele limfoide secundare.

RASPUNSUL IMUN UMORAL (RIU) este declanat de antigenele T-dependente; necesit cooperarea a trei categorii celulare: CPA, limfocitele T helper i T supresoare, (cu rol imunoregulator) i limfocitele B efectorii. parcurge dou etape, prima cu efect activator, derulat dinspre CPA spre limfocitele B, care activat devine plasmocit productor de anticorpi i a doua etap cu efect inhibitor sau de control, care limiteaz rspunsul imun eficient la minimul necesar;cea de a doua etap este realizat prin intermediul unor subclase de imunoglobuline i prin activarea limfocitelor T supresoare care limiteaz participarea limfocitelor B i T la RIU; Meninerea unui echilibru stabil ntre cele dou etape ale RIU reprezint cheia homeostaziei RIU. Secvenial, derularea RIU parcurge urmtorul model:

13

 antigenul declanator este preluat de CPA (macrofage sau celule dendritice); transportat n ariile timodependente ale organelor limfoide, unde este prezentat limfocitelor T helper (TH), care se activeaz i devin limfoblati TH; acetia migreaz n alte domenii ale organelor limfoide, unde urmeaz s ntlneasc limfocitele B cu care coopereaz ulterior; simultan, antigenul este transportat pe cale limfatic n zonele bursodependente ale organelor limfoide, unde este recunoscut de limfocitele B antigen specifice, care vor fi activate, tranformndu-se n limfoblati B ce migreaz treptat, venind n contact cu limfoblatii TH, cu care coopereaz fie direct, datorit numeroaselor molecule MHCII de pe suprafaa limfoblatilor B, fie indirect, prin intermediul interleukinelor IL2 i IL4, eliberate de limfoblastul TH activat; in urma acestei cooperri, limfoblastul B este complet activat, el devenind plasmocit productor de anticorpi specifici eliberai n circulaie. PRINCIPALELE INTERLEUKINE IMPLICATE IN RIU SINT IL-2, IL-4 i IL-5. IL-2: este sintetizat n anumite subtipuri de limfocite TH: THp, celule imature, primitive, inocente, care nu au avut nici un contact cu antigenul i care sintetizeaz numai IL-2; TH0 care au un nalt grad de maturaie i apar n urma unei scurte stimulri antigenice, ele sintetiznd mici cantiti din toate interleukinele; TH1, derivate din limfocitele TH0 n lipsa cooperrii cu limfocitele B i implicate n reglarea rspunsului imun celular (RIC); sintetizeaza IL-2, IFN- i IL-3; TH2, derivate din TH0 cnd acesta coopereaz cu limfocitul B i implicate n reglarea RIU; sintetizeaza mari cantiti de IL-4, IL-5, IL-6 i IL-10 ; IL-2 produs de limfocitul TH1 activeaz RIC, n timp ce IL-2 produs de limfocitele THp i TH0 stimuleaz RIU primar. IL-4: este sintetizat de limfocitele TH0 i TH2, principala sa funcie fiind cea de stimulare a RIU secundar;

14

 stimuleaz producerea i maturaia limfocitelor B la nivelul mduvei hematogene, intervenind n creterea expresiei moleculelor MHCII pe suprafaa acestora; deine un important rol n producerea de anticorpi: ea inhib producerea de IgM, stimuleaz producerea de IgG i particip la producerea de IgE. Il-5: sintetizat de limfocitele TH0 i TH2; amplific RIU declanat la nivelul mucoaselor bronic, digestiv i urogenital; la nivel medular, ea stimuleaz producerea de limfocite B productoare de anticorpi polireactivi i de eozinofile; stimuleaza producerea de IgA i inhib producerea de IgM.
Scheme Imuno\Fig. 7.12.pdf

IMUNOGLOBULINELE Imunoglobulinele: snt glicoproteine identificate n plasm, lichidele interstiiale i secreiile organismului, care au proprieti de anticorpi, ele combinndu-se specific cu antigenele inductoare de rspuns imun; structural, imunoglobulinele (Ig) snt alctuite din dou perechi de lanuri, unele cu greutate molecular mare, denumite heavy, (H) (de tip , , , i ) i altele cu greutate molecular mic, denumite light (L) (de tip sau ). Ambele tipuri de lanuri au secvene variabile, notate cu VH i VL i pri constante, notate cu CH i CL. Secvenele variabile VH i VL formeaz mpreuna situsul de recunoatere a antigenului, cu care acesta stabilete legturi, denumit paratop. O molecul de Ig conine dou situsuri de legare a antigenului identice, capabile s recunoasc o unic structur antigenic, prin urmare anticorpii snt structuri monospecifice. Secvenele constante ale Ig snt responsabile de celelalte funcii ale acestora: activarea complementului pe calea clasic; ataarea la suprafaa unor celule; traversarea barierei feto-placentare.

15

-Fragmentul ce conine situsul de legare a antigenului este denumit Fab; -cel responsabil de funciile efectoare ale moleculei de Ig este denumit Fc; -la limita acestora exista puni disulfidice, plasate ntre lanurile grele in zona denumit balama. Molecula de Ig are o variabilitate izotipic, allotipica i idiotipic. variabilitatea izotipic diferentiaza membrii apartinind unor specii diferite; cea allotipic se datoreaz diferenelor genetice intraspecie; variabilitatea idiotipic se datoreaz prezenei anumitor secvene de aminoacizi din regiunea variabil a moleculei de Ig, ce determin capacitatea de legare a antigenului. Variabilitatea idiotipic se coreleaz cu cea a situsului de legare a antigenului. Zona variabila din structura Ig, (denumita si idiotip) implicata in legarea antigenului (Fab) poate functiona concomitent si drept determinant antigenic. Acesti determinanti antigenici imunoglobulinici, aparuti in cantitate mare in timpul RIU determina la rindul lor aparitia de Ig anti-idiotip. Acest proces se deruleaza in 3-5 valuri succesive, astfel realizindu-se o retea idiotip-antiidiotip, implicata in stimularea sau inhibarea RIU. Imunoglobulinele se mpart n 5 clase (izotipuri), n funcie de particularitile secvenelor constante ale lanurilor grele (CH), care snt de tip , ,,, i . IgG se regsesc n concentraiile cele mai mari, ele reprezentnd 75% din totalul Ig circulante. Durata persistenei lor n lichidele organismului poate ajunge la trei sptmni, ceea ce le confer un grad nalt al valorii funcionale. Exist mai multe subclase de IgG, n funcie de numrul de puni disulfurice dintre lanurile H: IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4. Funcional, molecula de IgG conine dou zone distincte: poriunea Fab, care este situsul combinativ al moleculei de IgG i este implicat strict n recunoaterea antigenic i poriunea Fc, denumit fragment constant sau cristalizabil, responsabil de aciunile biologice ale moleculei. IgG1 reprezint subclasa dominant a IgG. Au rol important n activarea complementului pe calea clasic, n realizarea imunitii pasive a nou-nscutului. IgG2 este un slab activator al complementului. IgG3 este cel mai puternic activator al complementului pe calea clasic, iar IgG4 nu este activator de complement. IgG snt implicai n geneza RIU secundar, ce apare ncepnd cu al doilea contact cu antigenul declanator.
16

IgM au o durat de via mai scurt, de 10 zile. Ele snt alctuite din cinci structuri asemantoare celei aparinnd moleculei de IgG, fiind, deci, un pentamer. Ele snt implicate n RIU primar, declanat la primul contact cu antigenul i snt cele mai active imunoglobuline n activarea complementului pe calea clasic. Au aciune aglutinant asupra bacteriilor i virusurilor. IgA se gsete n ser sub form de monomeri, sau este secretat la nivelul mucoaselor sau n lapte sub form de dimeri. Au fost identificate dou subtipuri de IgA, ce difer prin structura lanurilor (1 i 2). IgD este prezent n ser cantit in cantiti foarte mici. Ea apare frecvent asociat cu IgM, ndeplinind funcia de receptor pentru antigen. IgE: prezent n ser n cantiti foarte mici; implicat n declanarea reaciilor de hipersensibilitate imediat.
Scheme Imuno\Fig. 4.27.pdf Scheme Imuno\Fig. 4.1.pdf Scheme Imuno\Fig. 4.4.pdf Scheme Imuno\Fig. 4.6.pdf SISTEMUL COMPLEMENT

Sistemul complement: este un complex de proteine serice cu activitate enzimatic, citolitic i reglatoare care prin activare produc chemotaxie, opsonizare i citoliz a agenilor patogeni. Complementul este alctuit din 25-30 de enzime ce snt activate n cascad, rolurile jucate de acest sistem n cadrul RIU fiind cel de a finaliza aciunea anticorpilor asupra antigenelor i cel de a realiza recunoaterea nespecific a structurilor nonself, aceste roluri putnd fi ndeplinite fie separat, fie complementar. n mediile lichidiene, fiecare factor al complementului se gsete sub form inactiv. Un factor al complementului odat activat, va avea drept substrat un alt factor n form inactiv, pe care l va activa, Conversia enzimatic a fiecrui factor inactiv n forma sa activ este un proces de proteoliz limitat, n urma cruia rezult dou fragmente: un fragment mic, notat cu a i unul mare, notat cu b, acesta din urm putnd funciona n cadrul cascadei de activare a

17

complementului ca enzim, sau cofactor (fixator pe membrana celular a unui alt factor). Cea mai mare parte a reaciilor complementului se desfoar pe suprafaa membranelor celulare care au receptori pentru fraciunile complementului. Fragmentele mici a rmn n faza fluid, intervenind n procesul inflamator prin efecte precum vasodilataia, creterea permeabilitii capilare, chemoatracia i activarea leucocitar. Fragmentele mari bsnt depozitate succesiv pe membranele celulare, alctuind complexe macromoleculare. Procesul de activare n cascad a sistemului complement este caracterizat de posibilitatea modificrii specificitii de substrat, aceleai enzime putnd aciona asupra unor noi factori inactivi, ceea ce asigur continuitatea lanului de reacii enzimatice. Factorii complementului snt notai de la C1 la C9. Activarea complementului se face pe mai multe ci. Iniial au fost descrise calea clasic i cea altern de activare,care snt distincte dar au o secven final comun. Evenimentul central al cascadei complementului este constituit de conversia factorului inactiv C3 n forma activ C3b, sub aciunea C3-convertazelor. Calea clasic de activare este declanat episodic de prezena complexelor imune ataate membranelor celulare i reprezint o achiziie filogenetic de dat mai recent. Calea altern funcioneaz continuu, cu o intensitate sczut, care crete atunci cnd pe membranele celulare activatoare (bacteriene, parazitare, ale celulelor infectate viral) se depoziteaz factori ai complementului. Aceast cale de activare este de dat filogenetic mai veche. Calea altern de activare a complementului (sau calea properdinei) implic aciunea unor factori precum factorul B (omologul factorului C2 al cii clasice), factorul D i factorul P sau properdina, care intr n structura C3-convertazei adevrate a cii alterne a complementului. A treia cale de activare a complementului (MBL pathway mannose binding lectin pathway) a fost recent descoperit. MBL este o protein plasmatic din familia collectinelor, ce funcioneaz ca o lectin, fiind singura apt s activeze complementul. Agenii patogeni capabili de a se lega de MBL snt Salmonella, Neisseria, Candida albicans. Concentraia sczut a MBL se asociaz cu deficite de opsonizare ce se pot manifesta clinic prin diaree sever, hepatit cronic de tip B, infecia HIV i boli autoimune. Indiferent de calea de activare a complementului, la finele cascadei enzimatice este generat complexul de atac al membranelor,

18

MAC (C5bC6C7C8C9), o structur complex, tubuliform, care se inser pe membrana int pe care o perforeaz. Ca urmare a crerii de multiple comunicri ntre mediul intra i cel extracelular, are loc alterarea profund a gradientelor de concentraie ionica de o parte i alta a membranei celulare, cu ptrunderea masiv a ionilor de Na n celul, urmat de hiperhidratarea acut celular, n final producndu-se liza osmotic a celulei i moartea acesteia. Reaciile complementului se deruleaz numai pe suprafaa membranelor int i nu pe cele self, aceastea fiind protejate anticomplement prin trei categorii de receptori: receptori antifactori ataabili, receptori anticonvertaze C3 i receptori anticomplex de atac al membranelor, prezeni n activarea pe toate cile a sistemului complement. Calea clasic a complementului dispune i de un inhibitor specific i anume inhibitorul componentei C1 (C1-INH). Raspunsurile imune umorale sint: 1.primare-declansate la primul contact cu antigenul, caracterizate prin elaborarea de IgM; aceasta se datoreaza participarii la generarea RIU la primul contact cu antigenul a limfocitelor THp, care coopereaza cu CPA; limfocitele THp elaboreaza IL2, care nu are efect asupra fenomenului de comutare izotipica, drept urmare limfocitele B stimulate produc IgM. Concentratiile de IgM sint relativ mici, deoarece la acest prim contact antigenic participa clone limfocitare B si TH imature si insuficient expansionate. In plus, timpul de al IgM este redus; 2.secundare, caracterizate prin elaborarea de IgG, deoarece la contacte repetate cu acelasi antigen, la cooperarea cu CPA participa limfocite TH2, care elaboreaza IL4, care, spre deosebire de IL2 activeaza mecanismul de comutare izotipica: este inhibata productia de IgM si stimulata cea de IgG.Titrurile acestei imunoglobuline sint inalte, deoarece la contacte repetate cu acelasi antigen participa clone limfocitare B si TH2 mature, bine expansionate si care in plus sint celule cu memorie. IgG au timpul de crescut ceea ce explica persistenta lor mai indelungata in plasma. Controlul RIU consta in activarea limfocitelor T supresoare. Acestea se subimpart fenotipic si functional in 3 clase, care nu actioneaza niciodata independent una de alta, ci stimulindu-se treptat una pe alta, constituind cascada supresoare. Aceasta este declansata

19

abea dupa declansarea productiei de anticorpi, avind rolul de a inhiba secventa de activare (efectorie) a RIU. Cele 2 secvente ale RIU, de activare si rectrocontrol sint decalate in timp si echilibrate functional.
Scheme Imuno\Fig 0001.jpg Scheme Imuno\Fig 0002.jpg Scheme Imuno\Fig 0003.jpg Scheme Imuno\Fig 0004.jpg Scheme Imuno\Fig 0005.jpg Scheme Imuno\Fig. 3.23.pdf

RASPUNSUL IMUN CELULAR Rspunsul imun celular (RIC) este implicat n trei condiii patologice majore: eliminarea celulelor infectate cu microorganisme cu habitat sau dezvoltare intracelular (micobacterii, virusuri, legionella, brucela), supravegherea i aprarea antitumoral i rejetul grefelor de esuturi sau organe. Prin urmare, RIC joac un rol esenial n recunoaterea i ndeprtarea prin distrugere a dou categorii celulare: celulele proprii sau self devenite antigenice (prin infectare sau degenerare malign) i celulele strine, nonself, provenite prin transplant de esuturi sau organe. Pentru realizarea acestor funcii, este necesar participarea a trei tipuri de limfocite efectoare: limfocitele T citotoxice (LTC), celulele natural killer (NK) i celulele killer (K). Aceste tipuri celulare recunosc celulele int prin mecanisme diferite, dar le distrug prin mecanism asemntor, de citotoxicitate extracelular. Limfocitele T citotoxice exprim pe suprafaa lor cele trei categorii de receptori: cei de recunoatere antigenic, TCR, care stabilesc conexiuni att cu antigenul expus, ct i cu molecula prezentatoare a acestuia, MHCI sau MHCII; din aceast categorie fac parte receptorii CD3 i CD8. A doua categorie de receptori e reprezentat de cei cu rol accesor n activarea LTC, i anume CD25, CD28 i CD45. Cea de a treia categorie e reprezentat de receptorii de adeziune intercelular, reprezentat de CD2. n funcie de anumite particulariti fenotipice i funcionale, LTC se mpart n dou categorii: LTC CD8+,care reprezint peste 90% din totalul acestora i au rol distructiv i LTC CD4+, care reprezint sub 10% din totalul LTC i ndeplinesc rol preponderent imunoreglator, intervenind n maturaia limfocitelor THp care devin LTH1. LTC realizeaz o recunoatere imunologic specific, dependent de structurile MHCI, de tip clonotip, n sensul c fiecare clon de LTC poate recunoate o singur specificitate antigenic, datorit precondiionrii genetice. (restrictie HLA)
20

Ele pot recunoate o mare varietate de antigene, ntruct exista o mare diversificare clonotipic a acestor celule. CELULELE NK Celulele NK (natural killer natural ucigae) reprezint 15% din totalul limfocitelor periferice. Ele snt limfocite non-B non-T care aparin clasei LGL (limfocite mari granuloase) din punct de vedere morfologoic. Pe suprafaa acestor celule se gsesc cele trei tipuri de receptori: de recunoatere a celulelor int (CD16 i NK-R), receptori de adeziune intercelular (CD2) i receptori cu rol accesor n activarea celular (CD25, receptorul pentru IFN IFN-R). Celulele NK realizeaz o recunoatere imunologic nespecific, MHCI independent, celulele recunoscnd complexele imune membranare alctuite din antigene membranare i IgG prin intermediul receptorului CD16 i NK-R.Celulele infectate viral i cele canceroase au o slab expresie a moleculelor MHCI pe suprafaa membranei, prin urmare, celulele NK joac un rol decisiv n aprarea antiviral i anticanceoas. Celulele NK sintetizeaz un compus cu rol distructiv, denumit perforin, asemnator ca mod de aciune componentei C9 a complementului. Astfel, are loc distrucia celular prin liz osmotic. Distrucia complexelor imune de ctre celulele NK se realizeaz prin mecanism de tip ADCC, sau de citotoxicitate celular anticorpdependent. Celulele K Celulele K (killer ucigae) se aseamn din punct de vedere fenotipic i funcional cu celulele NK. Particularitatea lor const n numrul mare de receptori CD16. Ele acioneaz asupra intelor celulare prin mecanism de tip ADCC, distrugnd celulele int cu ajutorul perforinei eliberate, n manier similar LTC i celulelor NK. Celulele K realizeaz o recunoatere imunologic nespecific de tip MHCI-independent, ca i celulele NK. DINAMICA RIC Celulele cu cea mai mare implicare n realizarea RIC snt LTC, datorit extremei diversificri clonotipice, ce permite acestor celule recunoaterea oricrei specificiti antigenice. Trstura fundamental a RIC o constituie declanarea acestuia la nivel

21

predominent intraganglionar, desfurarea sa ulterioara fiind realizat la nivel tisular. La baza derulrii RIC st participarea celulelor T cu memorie, dei nu toate limfocitele ce se regsesc n sngele periferic aparin acestei categorii. Astfel, exist limfocite T naive, inocente, fr nici un contact anterior cu antigenul pentru care au fost programate genetic i limfocite T cu memorie, ce au avut contacte repetate cu antigenul pentru care au fost programate. Cele dou categorii de limfocite T se difereniaz fenotipic, parcurg ci diferite i au distribuii (hominguri) diferite la nivelul organelor limfoide secundare. Limfocitele T naive parcurg un traseu predominent intracirculator: snge limf -snge i au un homing intraganglionar, cu rol de a spori ansele acestor celule de a ntlni antigenul specific transportat la acest nivel de CPA. Limfocitele Tcu memorie au un trafic i homing predominent intratisular. Prima etap a RIC este cea de inducie, iniiat n focarul antigenic, dar derulat mai ales intraganglionar. La finele acestei etape, are loc apariia celulelor T cu memorie i creterea expresiei receptorilor de adeziune intercelular la nivelul celulelor din acest focar. Aceast prim etap este iniiat de ptrunderea intratisular a antigenului, care este captat imunologic nespecific de CPA, n special de macrofagele rezidente la acest nivel. O parte dintre macrofagele implicate n acest proces rmn la nivel intratisular, participnd la declanarea unui proces inflamator. O alt parte dintre macrofage migreaz pe calea limfaticelor aferente i transport intraganglionar antigenul captat la nivel tisular. Ele se stabilesc ulterior n corticala ganglionar, unde prezint antigenul transportat celulelor T naive, aflate n permanent trafic la acest nivel. Celulele care vor recunoate epitopii prezentai pe membranele CPA se vor activa, devenind n final limfocite T cu memorie. Cea de a doua etap a RIC se deruleaz intratisular i implic aderarea limfocitelor T cu memorie la endoteliul vascular, traversarea prin diapedez a capilarului i cooperarea la nivelul focarului antigenic cu macrofagele rmase intratisular. Rezultatul final al acestei etape este distrugerea complet i ndeprtarea antigenului declanator.Celulele implicate n aceat etap snt: macrofagele, limfocitele TH1, limfocitele TC CD8+ i limfocitele TC CD4+. Iniial, are loc recunoaterea de ctre limfocitele TC a celulelor int, dup antigenele expuse alturi de moleculele MHCI. La acest proces particip i macrofagele rmase n focar, care elibereaz enzime, radicali liberi de oxigen i fagociteaz permanent resturile celulare.
22

Macrofagele prezint diverse fragmente antigenice expuse asociat moleculelor MHCII limfocitelor TH i LTC CD4+, celule care coopereaz. Rezultatul acestei cooperri este maturarea limfocitelor THp, care devin LTH1. Acestea elibereaz local IL-2, factorul de necroz tumoral (TNF) i IFN. IL-2 stimuleaz LTC CD8+, care produc i elibereaz perforina ce va altera membrana celulelor int. IFN activeaz macrofagele care consecutiv activrii, din CPA devin celule efectoare cu funcie distructiv sau citotoxic: crete capacitatea lor fagocitar, crete citotoxicitatea lor oxigenindependent, bazat pe activitatea proteazelor i hidrolazelor acide foarte diversificate, ca i citotoxicitatea oxigen-dependent, bazat pe generarea speciilor reactive de oxigen (anionul superoxid, acidul hipocloros, radicalul hidroxil i apa oxigenat). Limfocitele TC, celulele NK si K distrug celulele printr-un proces de citotoxicitate extracelulara, prin eliberare de mediatori solubili. Astfel sint eliminate celule singenice (infectate sau metaplaziate) si allogenice (din transplant de tesut sau organ). Liza celulelor tinta este realizata prin lezarea membranelor tinta sub actiunea perforinei si a granzimelor si prin alterari nucleare, fragmentarea ADN fiind cea mai frecventa. Granzimele sint omologii proteazelor si catepsinelor mastocitare si ale neutrofilelor, ce contribuie la distrugerea membranelor tinta.
Scheme Imuno\Fig 0006.jpg Scheme Imuno\Fig 0007.jpg

TOLERANTA IMUNOLOGICA Prin toleran imunologic se nelege o stare a organismului n care acesta, n contact cu un anumit antigen, nu mai reacioneaz prin declanarea unui rspuns imun. Astfel, tolerana imunologic este un proces de inhibiie activ i specific a rspunsului imun umoral sau celular fa de un antigen endogen sau exogen, antigen capabil s declaneze rspunsul imun n condiii obinuite. Antigenul are prin urmare dou proprieti, el fiind imunogen sau tolerogen, n funcie de cteva condiii, i anume: doza sau concentraia antigenului, calea de ptrundere a acestuia i maturitatea sistemului imun a organismului gazd. Doza sau concentraia antigenului influeneaz comportamentul antigenului astfel: la doze mici, apare comportamentul tolerogen, denumit toleran de zon sau doz joas, fenomen caracteristic limfocitelor T. La doze sau concentraii medii
23

ale antigenului, apare un raspuns imun de tip umoral sau celular, n funcie de natura antigenului. La doze sau concentraii nalte, rspunsul imun poate fi inhibat, ceea ce constituie fenomenul de toleran de zon sau doz nalt, fenomen caracteristic limfocitelor B. Aadar, rspunsul imun este un proces dependent de doza antigenului. Referitor la gradul de maturaie a sistemului imun al organismului receptor, contactele antigenice din perioada embriofetal duc la instalarea toleranei definitive fa de antigen, care este conservat pe toat durata vieii. Tolerana imunologic este de dou tipuri: nnscut i dobndit. Inducia acestor dou tipuri de toleran imunologic se realizeaz prin mecanisme diferite, n anumite sectoare ale sistemului imun. Tolerana imunologic nnscut are la baz procesul de distrugere sau deleie clonal. La nivelul timusului i mduvei hematogene snt distruse limfocitele T i B imature, autoreactive, n cadrul fenomenului denumit toleran nnscut central. Distrugerea limfocitelor T i B imature, autoreactive, la nivelul splinei i ganglionilor limfatici este denumit toleran nnscut periferic. Tolerana imunologic dobndit apare ca urmare a unui alt proces, i anume inhibiia clonal, prin care snt inactivate limfocitele mature T sau B, autoreactive. Tolerana nnscut central a limfocitelor T se deruleaz strict intratimic i parcurge trei etape: selecia pozitiv, diferenierea funcional i selecia negativ. a.Selecia pozitiv are loc la nivelul jonciunii corticomedulare. Acest proces permite conservarea limfocitelor T imature tolerante fa de moleculele MHC i distrugerea celor care nu recunosc aceste molecule sau reacioneaz fa de ele n timpul trecerii LT imature prin zona medular a timusului. Celulele epiteliale timice cu care vin n contact LT expun mari cantiti de molecule MHC pe suprafaa lor i elibereaz cantiti mari de glucocorticoizi cu efect distructiv asupra LT. Singurele LT imature conservate prin protecia antisteroidian oferit de semnalele sosite prin intermediul TCR snt cele cu afinitate medie pentru moleculele MHC. Celelalte LT imature, cu afinitate nalt sau fr afinitate pentru moleculele MHC snt distruse, ele putnd reaciona la maturitate mpotriva propriilor molecule MHC, ca n cazul primelor, sau pot fi celule inerte din punct de vedere imunologic, ca n cel de al doilea caz. b.Diferenierea funcional se desfoar la nivelul zonei medulare a timusului. n urma acestui proces are loc transformarea
24

limfocitelor CD4+CD8+ n limfocite T helper, sau limfocite T citotoxice i supresoare, n funcie de afinitatea TCR pentru moleculele MHC: afinitatea crescut a TCR pentru moleculele MHCII caracterizeaz viitoarele limfocite T helper, CD4+, n timp ce afinitatea crescut pentru moleculele MHCI va duce la transformarea celulelor n limfocite CD8+, adic LTC sau LTS. Aadar, la baza procesului de instalare a toleranei imune nnscute st un adevrat instructaj timic al limfocitelor T. c.Selecia negativ realizeaz distrugerea limfocitelor T autoreactive fa de diversele antigene self expuse n asociere cu moleculele MHC la suprafaa macrofagelor timice. Datorit imposibilitii tranzitrii timusului a tuturor antigenelor proprii ale organismului, o serie de clone limfocitare potenial autoreactive rmn nedistruse. Perfectarea procesului de toleran imun nnscut, ce debuteaz n perioada embriofetal i se desfoar la nivel timic are loc ulterior, n timpul vieii adulte, desfurndu-se la nivelul organelor limfoide secundare sau chiar la nivelul esuturilor. Un rol esenial n acest proces este jucat de expunerea antigenelor fa de care se va instala tolerana imunologic n asociere cu moleculele MHCI/II pe suprafaa CPA sau, mai ales, pe suprafaa celulelor somatice, ce pot juca rol de pseudo-CPA. Efectul global al procesului de inducie a toleranei nnscute centrale i periferice este cel de instalare a toleranei limfocitelor T i a limfocitelor B fa de antigenele T-dependente. Instalarea toleranei dobndite a limfocitelor T are loc la nivel exclusiv timic i reprezint procesul de inactivare a limfocitelor T mature. Ca urmare a acestui proces, se poate inactiva rspunsul limfocitelor i fa de antigenele nonself, nu doar fa de cele proprii ale organismului. La baza acestui proces stau dozele mici ale antigenelor T dependente, precum i activarea limfocitelor T supresoare, care elibereaza factori supresori, cu efect inhibitor. Inducia toleranei limfocitelor B este un proces desfurat prin mai multe mecanisme, dependent ns i de instalarea toleranei limfocitelor T, decisiv pentru rspunsurile imune ale limfocitelor B fa de antigenele T-dependente. Mecanismele ce permit instalarea toleranei imune a limfocitelor B snt distrugerea clonal (deleia clonal), epiuzarea clonal i eliminarea funcional fa de antigene T-dependente sau T-independente. a.Deleia clonal este mecanismul de distrugere a limfocitelor B potenial autoreactive, venite n contact cu diverse antigene self n

25

timpul vieii embriofetale, la nivelul mduvei hematogene. Procesul este incomplet, urmnd a fi definitivat n timpul vieii adulte. b.Epuizarea clonal apare n urma stimulrii repetate cu doze imunogene de antigene T-dependente a limfocitelor B i este un proces esenial pentru instalarea toleranei dobndite a limfocitelor B. Toate limfocitele B mature devin plasmocite productoare de imunoglobuline specifice. Durata de via scurt a plasmocitelor i stimularea antigenica intens vor conduce la dispariia pentru un timp a clonei limfocitare intens stimulate, n acest timp instalndu-se tolerana fa de antigenul inductor. c.Eliminarea funcional poate apare n urma stimulrii limfocitelor B cu antigene T-independente sau T-dependente. n primul caz, o concentraie mare de antigene T-independente va duce la formarea de numeroase complexe antigen-receptor, ce vor fi endocitate lent de ctre limfocitele B, datorit echipamentului enzimatic modest al acestora. Pe perioada desfaurrii catabolizrii acestor complexe, limfocitele B nu reacioneaz cu antigenele suplimentare cu care vin n contact. Procesul de eliminare funcional poate apare i n condiiile stimulrii limfocitelor B cu antigene T-dependente n doze imunogene, daca este perturbat cooperarea acestor limfocite cu LTH, din diferite cauze. Rspunsul imun i tolerana imun reprezint prile complementare i intercondiionate ale aceluiai proces: calitatea rspunsului imun depinde de inducerea i meninerea toleranei, iar aceasta din urm depinde de inducerea unui rspuns imun adecvat.
Scheme Imuno\Fig. 8.7.pdf

REACTIILE DE HIPERSENSIBILITATE Reaciile de hipersensibilitate snt rspunsuri imune anormale, extrem de intense, ce apar dup contacte repetate cu agentul declanator, denumit alergen. Aceste reacii se clasific n patru categorii: Hipersensibilitatea de tip I, denumit anafilactic sau de tip reaginic (HSI); Hipersensibilitatea de tip II, citotoxic-citolitic, mediat prin anticorpi (HSII); Hipersensibilitatea de tip III, mediat prin complexe imune (HSIII);

26

Hipersensibilitatea de tip IV, sau de tip ntrziat (tuberculinic) (HSIV). Primele trei tipuri snt mediate prin anticorpi, iar cea de a patra este mediat de limfociteleTmpreuna cu macrofagele. HIPERSENSIBILITATEA IMEDIATA SAU DE TIP ANAFILACTIC I ANAFILACTIC Hipersensibilitatea de tip I este un rspuns imun anormal declanat n urma contactului organismului cu antigene prezente n mediu n mod obinuit, fa de care indivizii normali nu reacioneaz. Ea se datoreaz unei producii crescute de IgE, genetic condiionat, caracteristic a acestor indivizi ce este definit ca teren atopic. Antigenele declanatoare se numesc alergene i snt antigene Tdependente. Acest tip de hipersensibilitate se desfoar n dou etape: prima este cea de contact iniial cu alergenul, lipsit de manifestri clinice. Pe parcursul ei, are loc sinteza crescut de IgE care snt depozitate pe membranele tuturor bazofilelor i mastocitelor din organism, aceste celule avnd receptori pentru fragmentul Fc al moleculelor de IgE (FcR) i fiind singurele ce conin depozite de histamin. Cea de a doua etap are loc ca urmare a contactelor repetate cu alergenul i are manifestri clinice dependente de poarta de intrare a alergenului i anume: dermatit atopic, febr de fn, astm bronic. Activarea bazofilelor i mastocitelor este consecutiv recunoaterii alergenului de ctre moleculele de IgE preformate n decursul contactelor anterioare cu acesta i se datoreaz unei cascade de reacii n care snt implicai mesageri de tipul adenilatciclazAMPc, fosfatidil-inozitolii i sistemul fosfolipaza A2-eicosanoizi. Ca urmare a activrii bazofilelor i mastocitelor, are loc eliberarea de mediatori: histamina, cu efect vasodilatator (poate duce la colaps vascular), bronhoconstrictor, hipersecretor la nivelul celulelor gastrice parietale i aritmogen; factorul chemotactic pentru eozinofile (ECFA), factorul chemotactic pentru neutrofile (NCFA), factorul activator al plachetelor (PAF), prostaglandinele D2, F2 alfa, tromboxanul A2, substana lent reactiv a anafilaxiei (SRSA), leucotriena 4.
Scheme Imuno\Fig 0008.jpg

HIPERSENSIBILITATEA DE TIP II
27

Hipersensibilitatea de tip II este de tip imediat, iar mecanismul su declanator implic prezena antigenelor declanatoare pe membrana celulelor somatice care nu aparin categoriei CPA. mpotriva acestor antigene snt sintetizai anticorpi cu efect citotoxic. Ea se desfaoar astfel: prezena complexelor imune ataate pe membranele celulelor purttoare de antigene declanatoare iniiaz cascada reaciilor complementului, ce se va solda cu eliberarea unor cantiti importante de fragmente C3a i C5a (denumite anafilatoxine); aceste fragmente iniiaz local procesul inflamator, datorit efectelor vasodilatator, de cretere a permeabilitii capilare i chemotactic pentru diferite fagocite. n final, are loc procesul de citotoxicitate mediat prin anticorpi (ADCC), n care celulele efectoare snt neutrofilele, celulele K i macrofagele. Anticorpii citotoxici snt de tip IgM sau IgG. Ei pot fi generai ca urmare a inducerii unui RIU fa de celule sau esuturi strine, nonself (alloimunizare ) ce provin de la un individ din aceeai specie sau de la o alt specie. Exemple pentru acest tip de hipersensibilitate snt imunizarea posttransfuzional, fetomatern i posttransplant. Anticorpii citotoxici pot fi sintetizai i ca urmrii declanrii unui RIU de ctre celule sau esuturi self. Procesul se numete autoimunizare i reprezint pierderea toleranei fa de anumite structuri antigenice proprii ce au modificri structurale nnscute sau dobndite sau snt asemntoare structural unor antigene nonself. n aceast categorie intr afeciuni cu etiologie autoimun de tipul miasteniei gravis, anemiilor hemolitice autoimune. HIPERSENSIBILITATEA DE TIP III (Arthus) Hipersensibilitatea de acest tip apare n cadrul unui RIU secundar n timpul cruia se formeaz cantiti foarte mari de complexe imune circulante care declaneaz cascada complementului. Efectul acestei activri depinde de calea de acces a antigenului declanator, tisular sau circulatorie. La individul normal, formarea complexelor imune este o etap obligatorie, protectoare, n decursul careia antigenele declanatoare snt ndeprtate din organism. Formarea unor cantiti excesive de complexe imune n condiii patologice face imposibil eliminarea lor n totalitate. Complexele imune cantonate la nivel tisular duc la apariia modificrilor lezionale de tip inflamator localizate. n cazul ptrunderii antigenului direct n torentul circulator, complexele imune formate se depoziteaz n diferite esuturi i organe.
28

Acest tip de hipersensibilitate este ntlnit n afeciunile respiratorii induse prin expunerea repetat i ndelungat a subiecilor la inhalarea unor antigene organice din mediul ambiant (mucegaiul de fn ce induce boala plmnului de fermier, IgA din dejeciile psrilor ce induce boala cresctorilor de psri). Un alt exemplu l constituie complicaiile infeciilor amigdaliene cu streptococ beta hemolitic din grupa A, n care depunerea complexelor imune circulante la nivelul diverselor structuri (articulaii, plexuri coroide, membrana filtrant glomerular, vase cutanate) duce la apariia complicaiilor cunoscute: reumatism articular poststreptococic, coree, glomerulonefrit acut poststreptococic, purpur. HIPERSENSIBILITATEA DE TIP IV Hipersensibilitatea de tip IV implic un RIC. Acesta este declanat de aceleai antigene implicate n RIC normale, dar are o intensitate mult mai mare comparativ cu un rspuns imun celular normal i duce la apariia unor leziuni grave. In evolutie, acest tip de hipersensibilitate parcurge doua etape, una de inductie, caracterizata prin modificarea fenotipica a endoteliului vascular din focarul infectios si generarea de LTH cu memorie si cea de a doua, faza de desfasurare propriuzisa, ce duce la aparitia unor leziuni tisulare severe. Iniial, antigenele declanatoare snt opsonizate de fragmente ale complementului sau molecule de imunoglobuline. Astfel, ele snt captate de CPA, atrase in focarul infectios/inflamator de anafilatoxinele C3a si C5a, eliberate local. Macrofagele sint stimulate si sub actiunea unor factori eliberati din metabolismul bacterian si de stimuli veniti pe calea receptorilor pentru fraciunea Fc a IgG (FcR). Aceste macrofage au motilitate, raspund chemotactic si au capacitate fagocitara si citotoxica crescute. O parte ramin in focarul infectos, generind un intens proces inflamator, ce se poate croniciza. O parte dintre CPA, dup preluarea antigenului declanator, ajung la nivelul ganglionilor limfatici unde prezint pe moleculele MHCII antigenul limfocitelor TH, care din LTHp devin LTH1 cu memorie. Ele trec in circulatie, recunosc modificarile fenotipice ale andoteliului capilar din focarul inflamator, patrund aici si coopereaza cu macrofagele locale, care vor fi definitiv activate. Acestea contribuie major la distrugerea bacteriilor invadante (fagocitoza, citotoxicitate oxigen-dependenta si independenta), intensificarea inflamatiei locale, si inducerea unor leziuni datorita eliberarii de IL1, TNF, LTB4, IL8. IL1 activeaza si axul hipotalamo29

cortico-suprarenalian ce are drept efect hipercortizolemia.IL1 si TNF stimuleaza eliberarea endoteliala de IL6, care stimuleaza eliberarea hepatica de alfa1 antitripsina, alfa 2macroglobulina, proteina C reactiva si fractiuni ale complementului, cu rol de modulator al intensitatii inflamatiei. IL1 si TNF eliberate din macrofagele activate induc expresia fact. Von Willebrand si cresterea productiei de PAF endotelial, cu cresterea coagulabilitatii locale si aparitia de microtrombusi. Acest tip de hipersensibilitate este reprezentat de hipersensibilitatea de contact i de hipersensibilitatea ntrziat clasic. Hipersensibilitatea de contact este indus de substane precum metalele grele, anestezice, antibiotice (aplicate ca unguente), materiale textile sintetice, diverse substane ce intr n compoziia deodorantelor, parfumurilor, etc. Acestea strbat cu uurin bariera epidermal i intr n combinaie cu diverse proteine libere sau structurale, devenind antigene complete, ce vor fi decelate de CPA locale (celule Langherhans). Acestea vor coopera cu LTH activate intraganglionar, care se concentreaza intratisular si stimuleaza bazofilele si mastocitele prin IL3, IL4, HCSF (factorul de stimulare a celulelor histamino-formatoare). Mastocitele si bazofilele sint celulele efectorii ale acestui tip de hipersensibilitate. Eliberarea de catre acestea a mediatorilor vasomotori duce la instalarea vasodilatatiei si a cresterii permeabilitatii capilare, cu aparitia locala a eritemului si a papulei. Eliberarea continutului enzimatic duce la alterarea si chiar distrugerea celulelor epiteliale locale, cu aparitia unor spatii libere denumite de spongioliza, care devin vezicule cind se umplu cu lichid. Hipersensibilitatea ntrziat de tip granulomatos este o hipersensibilitate de tip IV, n cadrul creia macrofagele nu pot distruge microorganismele fagocitate. Un exemplu l constituie Mycobacterium tuberculosis, care are capacitatea de a inhiba fuziunea lizozomilor cu fagozomii, M.Leprae prezinta o capsula ce poate rezista atacului litic alenzimelor lizozomale, Legionella inhiba explozia respiratorie. Ca urmare a acestui fapt, antigenele bacteriene rmn cantonate n interiorul macrofagelor, ceea ce constituie un stimul cronic pentru LTH1, care vor activa macrofagele deja antrenate prin cooperare celular. Astfel, macrofagele vor deveni celule epitelioide, plate, cu putini lizozomi si numeroase bacterii in citoplasma; fiind in continuare suprastimulate, ele devin celule multinucleate rotunde, de mari dimensiuni, ce prezinta grave leziuni distrofice ale RER si mitocondrii. Incapabile sa desfasoare procese
30

energetice normale, ele au durat scurt de via. Odat cu ele mor i bacteriile coninute, astfel constituindu-se o leziune de tip necrotic, inconjurata de alte celule epitelioide, macrofage i limfocite. Efectul acestui tip de organizare este limitarea expansiunii focarului bacterian, si impiedicarea diseminarii bacteriene, la care contribuie si o intensa fibrozare a focarului.
Scheme Imuno\Fig. 21.1.pdf Scheme Imuno\Fig. 3.26.pdf Scheme Imuno\Fig. 3.13.pdf Scheme Imuno\Fig. 3.27.pdf

31