VITEZA DE SEDIMENTARE A HEMATIILOR

Principiu. n sngele recoltat pe anticoagulant, lasat n repaus, se produce separarea plasmei de elementele figurate care sedimenteaza, n virtutea gravitatiei. n sngele circulant elementele figurate se gasesc n suspensie, dispersate n plasma. Mentinerea hematiilor n suspensie si implicit valorile V.S.H.-ului sunt determinate de: Factori globulari: - ncarcatura electronegativa a eritrocitelor, care determina respingerea acestora; - vscozitatea sngelui conditionata de masa eritrocitara; astfel scaderea numarului de hematii (anemie) determina accelerarea V.S.H.-ului, iar cresterea numarului de eritrocite (poliglobulie) determina scaderea V.S.H.-ului.

Factori plasmatici: - raportul albumine/globuline. Albuminele, care prezinta un grad mare de disociere ionica, determina cresterea numarului de sarcini electronegative care se opun sedimentarii. n schimb, globulinele si fibrinogenul, cu un grad de disociere ionica mult mai redus, favorizeaza sedimentarea. Astfel, scaderea raportului albumine/globuline fie prin scaderea concentratiei de albumine, fie prin cresterea concentratiei de globuline sau fibrinogen va accelera sedimentarea si va creste valoarea V.S.H.-ului. - cresterea fibrinogenului plasmatic favorizeaza sedimentarea prin fenomenul de pseudoaglutinare Materiale necesare: seringa de 2 cm3 si ac de punctie venoasa; pipete Westergreen cu stativul corespunzator; citrat de sodiu 3,8%, soluie sterila; materiale necesare recoltarii sngelui prin puncie venoasa.

Tehnica se aspira n seringa soluie de anticoagulant cu care se clateste seringa, reinndu-se 0,4ml; se punctioneaza vena, dupa dezinfectare, si se aspira snge n seringa pna la 2 ml; continutul seringii se amesteca prin cateva miscari de rasturnare; proba se trece apoi ntr-o eprubeta din care se aspira cu pipeta Westergreen pna la diviziunea 0, astfel nct coloana de snge sa fie continua; se plaseaza pipeta n stativ n poziie perfect verticala; citirea se face dupa o ora, iar rezultatul se exprima n mm coloana de plasma separata de eritrocite n decurs de o ora (mm/ora). Valori normale: barbat: 1 10 mm/ora; femeie: 2 13 mm/ora; nou-nascut: 0,5 mm/ora (datorita poliglobuliei). Variaii fiziologice: la femei, V.S.H.-ul creste n timpul menstruaiei; la femei, V.S.H.-ul creste n sarcina (mai ales n ultimele luni). Variaii patologice: Cresterea V.S.H.-ului apare n boli infecioase sau inflamatorii (pneumonii, reumatism articular acut, tuberculoza activa, septicemie, pielonefrite), n anemii, infarct miocardic, leucemii, neoplasme, etc Scaderea V.S.H.-ului apare n poliglobulii, etc Pentru a evita rezultatele eronate trebuie respectate urmatoarele conditii: sngele se recolteaza dimineata pe nemncate determinarea se face imediat dupa recoltare (n primele 2-3 ore); conservarea sngelui,creste V.S.H.-ul se utilizeaza ca anticoagulant citratul de sodiu deoarece oxalatul de sodiu creste V.S.H.-ul pozitia pipetei trebuie sa fie perfect verticala, nclinarea acesteia crescnd V.S.H.-ul temperatura camerei trebuie sa fie cuprinsa ntre 20 si 27C deoarece cresterea temperaturii creste V.S.H.-ul sa se evite hemoliza

DOZAREA HEMOGLOBINEI Evaluarea cantitativa a Hb din sange se face prin metode colorimetrice, sptectrometrice si chimice. Hemoglobina (Hb) reprezinta elementul principal pentru realizarea functiei respiratorii a eritrocitului. Eritrocitul contine: 60% apa, 33-35% Hb, 5-7% alte substante (enzime, pompe ionice de Na+/K+, de Ca+2, schimbatori ionici de Cl-/HCO3-). Metoda colorimetrica Sahli Principiul metodei este compararea clorheminei obtinute in sangele de cercetat cu solutia de clorhemina standard a hemometrului. Hemometrul este alcatuit dintr-un stativ cu 3 eprubete: -2 eprubete laterale ce contin substanta etalon (sau 2 baghete de sticla de aceeasi culoare); -o eprubeta centrala ce serveset pentru deerminare si este gradata de jos in sus de la 10 la 140% sau unitati hemometrice (uH). Diviziunea 100 corespunde conform etalonarii cu 16 g%. Tehnica de lucru -se introduce in eprubeta de dozare a aparatului HCl pana la diviziunea 1 UH -se dezinfecteaza pulpa degetului, se inteapa cu acul, se sterge prima picatura, iar din a doua picatura de sange se aspira cu pipeta capilara 20 mm3 -se agita cu bagheta de sticla si se asteapta 5 minute pentru trasnformarea hemoglobinei in clorhidratat de hematina, de culoare brun inchis. se adauga apa distilata picatura cu picatura si se aesteca pana ce in tubul de cercetat se obtine o nuanta egala cu cea a etalonului. -se citeste cifra corespunzatoare meniscului inferior al lichidului din tub si reprezinta direct cantitatea de hemoglobina din sangele respectiv exprimat in unitati Sahli (procentual). In cazul in care eprubeta nu are a doua scara de diviziune in g%, calculul se face astfel: 100.16g/dl 85..X X=85 x 16 / 100 = 13,6 g/dl sange Valori normale: -barbati = 15,1 2 g/dl -femei= 13,1 2 g/dl Variatiile fiziologice si patologice ale Hb urmeaza sensul de variatie a numarului de eritrocite.