Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
REFERAT
1
CUPRINS
Abstract................................................................................................................. 3
1. Introducere...................................................................................................... 4
2. Scheme de cercetare si finantare pentru Biosenzori.......................................5
3. Biosenzori........................................................................................................ 7
3.1. Bazele si clasificarea biosenzorilor...............................................................7
3.1.1 Traductoare electrochimice.......................................................................7
3.1.2 Traductoare optice..................................................................................... 8
3.1.3 Senzori sensibili de masa..........................................................................8
3.1.4 Senzori termometrici.................................................................................9
3.2. Biosenzori pentru monitorizarea mediului....................................................9
3.2.1 Biosenzorii de tip enzime.........................................................................9
3.2.2 Imunosenzori........................................................................................... 11
3.2.3 Biosenzori de tip ADN..............................................................................11
3.2.4 Biosenzori celulari..................................................................................12
3.3. Reele wireless autonome de biosenzori....................................................12
4. Viitoare tendinte i concluziile.......................................................................14
BIBLIOGRAFIE....................................................................................................... 14
2
Biosenzori pentru monitorizarea mediului la scar global i
la nivelul UE
Abstract
3
1. Introducere
Din cauza dificultii de a prevedea efectele colective ale numrului tot mai mare de
poluani n ecosistemele receptoare, este nevoie de metode de screening n monitorizarea
mediului.
Punerea n aplicare a programelor de siguran necesit o analiz de mediu care
cuprinde dou pri: metode de screening bazata pe analiza de mare de transfer i capabila de
monitorizare continu on-line pe site-uri cu costuri reduse, i analiza probelor pozitive cu
tehnici analitice de confirmare.
Analiza Bioraspuns combin dou procese, recunoaterea biologice iniierea unui
efect biologic, i analize chimice. Componentele biomoleculare sunt folosite ca tinte pentru
substanele active. Dei este posibil s se aplice, de exemplu, teste obligatorii care asigur
efecte echivalente, informaii cu privire la contaminani responsabili sunt accesibile doar prin
analiz chimic. Prin urmare, o etap ulterioar este furnizata de analiza chimic a
substanelor care sunt legate de biorecunoasterea componentelor i care sunt, prin urmare,
bio-eficiente.
Biosenzorii sunt de obicei clasificati fie n funcie de elementul transductor (de
exemplu: electrochimic, piezoelectric, optic sau termic), fie n conformitate cu principiul de
biorecunoastere (enzimatic, recunoaterea imunoafinitatii, senzori ntregi,
sau ADN) (a se vedea figura 1).
Principalele avantaje ale biosenzorilor sunt: timpul scurt de analiza , teste cu cost
scazut i portabilitatea, msurtori n timp real i control de la distan. Aceste noi tehnologii
au fost aplicate n mod egal analizei cantitative a analitilor int i n msurtori
ecotoxicologice.
n prezent, biomonitorizarea este un instrument esenial pentru punerea n aplicare a
directivelor UE, cum ar fi Directiva Cadru privind Apa (DCA), precum i Directiva Cadru
privind strategia pentru mediul marin. Cu toate acestea, multe dintre aceste noi tehnologii
sunt nc n curs de dezvoltate i se bazeaz pe eforturi combinate din diverse domenii
tiinifice. n Europa, Comisia European (CE) a fost deschiztorul de drumuri pentru
dezvoltarea acestor noi tehnologii n analiza de mediu. Sub Programele Cadru 3,4,5 si 6 (PC),
un numr mare de proiecte de cercetare finanate au fost dedicate pentru dezvoltarea de noi
instrumente analitice, i mai mult de 300 de proiecte au fost efectuate pe senzori, biosenzori
i tehnici biologice.
4
Mai multe revizuiri pe biosenzori, senzori optici pentru diferite domenii de analiz,
sau tehnici biologice pentru analiza de mediu au fost publicate n ultimii ani.
Aici ne propunem s prezentm principiile, avantajele i limitrile tehnologiei biosenzorilor
pentru monitorizarea mediului, i s rezumam progresele obinute n acest domeniu n
conformitate cu sprijinul acordat de instituiile publice.
5
In timpul primelor programe-cadru UE, finanarea a fost dedicat susinerii
proiectelor de cercetare legate de determinarea pesticidelor n ap, n sprijinul Directivei
privin apa potabila din cadrul Uniunii Europene (98/83/CE).
Mai recent, n Europa sub Programul-Cadru 6 o parte de finanare a fost destinat
direct biosenzorilor pentru monitorizarea mediului; cu toate acestea, alte domenii importante
legate de dezvoltarea biosensingului de mediu au fost stimulate, cum ar fi nanotehnologia.
Cteva exemple de proiecte de cercetare finanate n aceast perioad sunt BIONANO-
SWITCH, BIOMED-nano, OPTANANOGEN, TASNANO, DINAMICS i ISAMCO, cele
mai multe dintre ele fiind legate de domeniul nanotehnologiei i de progresele tiinei
materialelor. De exemplu, BIONANO-SWITCH este nc n curs de desfurare, iar scopul
principal este dezvoltarea unui nanoactuator / sistem biosensor.
n Europa, al 7-lea Program Cadru prezint un domeniu tematic pe nanotiine,
nanotehnologii, materiale i noi tehnologii de producie. De asemenea, n cadrul Programului
Cadru 7, au fost incluse fonduri pentru proiecte de dezvoltare a senzorilor i platforme de
biosenzori pentru monitorizarea mediului de la distan. Ultima tendin n Europa este aceea
a platformelor de cercetare autonome capabile s funcioneze on-line n mod autonom.
3. Biosenzori
Biosenzorii pot fi definiti ca un dispozitiv integrat al receptorilor-traductor, care sunt
capabili s ofere informatii analitice selective cantitative sau semi-analitice folosind un
element de recunoatere biologic. Un biosenzor transform un eveniment biologic ntr-un
semnal detectabil prin aciunea unui traductor i a unui procesor.
Automatizarea i miniaturizarea tehnicilor biologice analitice, precum i dezvoltarea
de echipamente de msurare de la distan online, pot fi realizate prin tehnologia
biosenzorilor. n ultimii ani, un numr tot mai mare de aplicatii de biosenzor au fost
dezvoltate pentru analiza de mediu, pentru analize tinta i pentru monitorizarea tuturor
efectelor biologice, cum ar fi toxicitatea.
6
substanele chimice interacioneaz cu o suprafata sensibila a electrodului de detectare.
Schimbrile electrice se pot baza pe o schimbare n tensiunea msurat ntre electrozi
(poteniometric), o schimbare n curentul msurat la o tensiune aplicat data (ampermetrica),
sau o schimbare n capacitatea materialului sensibil la transport (conductometrica ). Astfel de
efecte pot fi stimulate electric sau pot rezulta in urma unei interaciuni spontane la starea de
curent-zero.Senzori de gaze cu electrolit solid care se disting sunt: voltmetrice, ampermetrice
si potentiometrice
Principiul de funcionare al biosenzorilor ampermetrici este definit de un potenial
constant aplicat ntre un electrod lucru i un electrod de referin. Potenialul impus
promoveaz o reacie redox, care produce un curent. Amploarea acestui curent este
proporional cu concentraia de specii electro active prezente n soluie.
Biosenzorii poteniometrici se bazeaz pe monitorizarea potenialului la un electrod
de lucru, cu privire la un electrod de referin.
Msurtori ale micilor schimbri n mas este o form de transducie care a fost
utilizata pentru dezvoltarea biosenzorului. Dispozitivele piezoelectrice i dispozitive acustice
7
de unda de suprafata pot fi grupate n aceast categorie.
Vibraiile cristalelor piezoelectrice produc un cmp electric oscilant n care frecvena
de rezonan a cristalului depinde de natura sa chimica, de dimensiunea, forma i masa sa.
Aceste cristale pot fi fcute s vibreze la o anumit frecven de oscilaie, care este
dependent de frecvena electrica. Frecvena de oscilaie este, prin urmare, dependenta de
frecvena electrica aplicata cristalului, precum i de masa cristalului. n cazul n care masa
crete, din cauza legarii analitilor, frecvena de oscilaie a modificrilor cristalului si
schimbarea pot fi msurate. Ecuaia general a cristalului poate fi rezumata dup cum
urmeaz n cazul n care schimbarea de mas (m) este foarte mica n comparaie cu masa
total de cristal:
f= Cf2m/A, unde
8
Electrozii enzimelor au fost folositi pe scar larg pentru monitorizarea unei game
largi de substraturi importante din punct de vedere clinic sau mediu, folosind n special
oxido-reductaze(ca tirozinaza, peroxidaz i lactaza), i hidrolaze(colinesteraza).
Biosenzorii de tip enzime, pot fi mpriti n: cei care msoar inhibitori ai unei
enzime specifice datorit prezenei unor grupuri de analiti int, i cei care msoar
transformarea catalitic a analitilor tinta de ctre o enzim specific.
Majoritatea elementelor transductoare asociate biosenzorilor pe baz de enzime sunt
electrochemici, ampermetrici sau poteniometrici. Cteva exemple de aplicaii in mediu ale
biosenzorilor electrochimici sunt prezentate n Tabelul 2.
9
electroactivi sunt prezenti n eantion, deoarece acestea pot genera valori false actuale.
Cele mai multe dintre recentele progrese n biosenzori electrochimici s-au bazat pe
nanotehnologie. Interesul major n nanomateriale este determinat de proprietile lor. n
special, capacitatea de a adapta dimensiunea i structura i, prin urmare proprietile
nanomaterialelor ofer perspective excelente pentru proiectarea de noi sisteme de detecie i
creterea performanei a testului bioanalitic.
O provocare extrem de importanta n electrozii ampermetrici de tip enzime este
stabilirea unei comunicari electrice satisfctoare ntre site-ul activ al enzimei i suprafaa
electrodului. Centrul redox a celor mai multe oxidoreductaze este izolat electric printr-o
membrana de proteine. Din cauza acestui invelis, enzima nu poate fi oxidata sau redus la
niciun potenial. n general, este nevoie de co-substraturi sau mediatori pentru a realiza
transducia eficient a biorecunosterii evenimentului. Nanotuburi de carbon aliniate (CNT),
pregtite pentru asamblare, pot aciona ca fire moleculare pentru a permite comunicarea
electrica ntre electrod de baza si proteinele redox.
3.2.2 Imunosenzori
Structura ADN-ului este foarte sensibila la influena poluanilor din mediu, cum ar fi metalele
grele, bifenili policlorurai (PCB) sau compuii aromatici policiclici (PAH). Aceste substane
sunt caracterizate de o afinitate mare pentru ADN-ului, cauznd mutageneza si
carcinogeneza. Deci, este foarte atractiv de a folosi sisteme care contin ADN, de exemplu,
biosenzori bazati pe ADN pentru a efectua teste genotoxice, sau de testare rapid a
poluanilor pentru activitii mutagene i cancerigene
Biosenzorii electrochimici pe baza de ADN imobilizat, au o specificitate mare de
10
biomolecule. Aceasta reduce consumul ADN-ului i duce la dezvoltarea unor metode
moderne de analiz a efectorilor de ADN.
Dezvoltarea biosenzorilor electrici hibrizi pe baza de ADN a atras eforturi
considerabile de cercetare. Astfel de aplicatii ale senzorului pe baza de necesit sensibilitate
ridicat prin transducia amplificata a interaciunii oligonucleotidelor..
Mai multe procese de amplificare pot fi utilizate pentru a mbunti dramatic
sensibilitatea testelor de particule bazate pe bioelectronice.
O reea de senzori fr fir este o reea fr fir constnd din dispozitive autonome
spaial distribuite folosind senzori i / sau biosenzori pentru monitorizarea condiiilor fizice
sau de mediu, cum ar fi temperatura, presiunea, salinitatea, micarea sau poluanii, n locaii
diferite (Fig. 3).
11
Aceast abordare ar putea fi ntr-un viitor apropiat unul din principalele progrese realizat
pentru monitorizarea continua a mediului, precum i pentru punerea n aplicare a noilor
directive UE, n special n medii dificile de monitorizat, cum ar fi zonele de coast i n largul
mrii.
Astazi, evenimente moleculare i biologice pot fi monitorizate i traduse n semnale
digitale prin intermediul biosenzorilor i, acest fapt, deschide o fereastr nou n producerea
de dispozitive analitice. Aceast nou abordare ar putea o revoluie n viitorul monitorizarii
mediului.
Cu toate acestea, costul de dispozitive de biosensing autonome de ncredere este nc
mult prea mare pentru implementari masive. Unele dintre neajunsurile care ar trebui s fie
depite sunt: complexitatea proceselor de biosensing, nevoia de etalonri periodice, care ar
trebui s fie reduse la minimum, iar nevoia pentru reactivi cat mai stabili biologic, costurile
energetice i de producie ar trebui s fie, de asemenea, reduse la minimum
12
4. Viitoare tendinte i concluziile
BIBLIOGRAFIE
13