12.11.

2014

12.11.2014 1

Ce este Replicarea?
proprietatea unic a moleculelor bicatenare de ADN

sinteza matricial, semiconservativ a moleculelor de

ADN

dublarea IG

mecanismul principal ce asigur transmiterea IG

12.11.2014 2

Pentru ce se realizeaz Replicarea?

asigur transmiterea
exact a IG

asigur determin
legtura autorepro
material ducerea
ntre materiei
generaii vii

reprezint suportul
ereditii

12.11.2014 3

1
 12.11.2014

Cnd se realizeaz Replicarea?

12.11.2014 4

Cum se realizeaz Replicarea?

matricial;

complementar;

antiparalel;

bidirecionat;

semiconservativ;

fidel;

extrem de complex.

12.11.2014 5

12.11.2014 6

2
 12.11.2014

Principiile replicaiei:
Monomerii (nucleotidele) sunt adugai la captul
3 al unei catene cu ajutorul enzimei ADN-
polimeraza;

Secvena de nucleotide din catena nou sintetizat

este complementar cu catena matri;

Sinteza are loc semiconservativ: n fiecare molecul

bicatenar una dintre catene este veche (catena-
matri), iar alta nou-sintetizat (catena fiic).

12.11.2014 7

12.11.2014 8

12.11.2014 9

3
 12.11.2014

12.11.2014 10

Complexitatea replicaiei este determinat de:

Necesitatea energiei pentru denaturarea / despiralizarea ADN-ului;

Moleculele monocatenare tind de a forma regiuni bicatenare prin unirea

complementar a bazelor dintr-o caten palindroame;

Orice enzim poate realiza doar un numr limitat de reacii fizice sau
chimice, iar numrul de evenimente este mare, ceea ce presupune
implicarea unui numr mare de factori n replicare;

Necesitatea existenei unor mecanisme de prevenire i eliminare a

erorilor pe parcursul replicrii

Complexitatea conformaional a moleculelor mici circulare sau a celor

mari liniare

Regiunile de eu- i heterocromatina se replic asincron

12.11.2014 11

12.11.2014 12

4
 12.11.2014

12.11.2014 13

Care sunt etapele replicrii?

Iniierea

Elongarea

Terminarea

12.11.2014 14

Iniierea Replicaiei
identificarea punctului ori;

formarea ochiului de replicare cu dou furci

antisens:
despiralizarea ADN
denaturarea ADN
liniarizarea matrielor

sinteza ARN-primerilor

iniierea polimerizrii catenelor noi de ADN

12.11.2014 15

5
 12.11.2014

12.11.2014 16

Elongarea

mrirea ochiului de replicare;

sinteza bidirecionat a
catenelor noi de ADN:
sinteza continu a catenei
lider;
sinteza discontinu a catenei
ntrziate; fragmentelor
Okazaki.

12.11.2014 17

12.11.2014 18

6
 12.11.2014

Terminarea
ntlnirea furcilor de replicare cu direcie opus;

terminarea sintezei catenelor noi;

nlturarea ARN-primerilor;

completarea golurilor;

sudarea fragmentelor din catena nou de ADN;

renaturarea ADN-ului;

1 mol. ADN 2 mol. ADN.

12.11.2014 19

12.11.2014 20

Cine realizeaz Replicarea?

Aparatul de replicare:

Molecula iniial de
ADN - matri

Situsul ORI

ADN-polimeraza + alte
enzime (T,H,P etc.) +
alte proteine (SSB)
12.11.2014 21

7
 12.11.2014

ORI secvena de iniiere a Replicaiei

const din circa 300 p.n.

conine situsuri de interaciune cu proteine
speciale pentru iniierea replicrii
12.11.2014 22

Repliconul segmentul de ADN capabil de

replicare independent

const din 100-300 kb.

conine secvena ORI
formeaz dou furci de
replicare
cromozomii eucariotici
conin numeroi
repliconi

12.11.2014 23

Enzimele aparatului de replicare

ADN-
polimeraze

ADNligaza Primaza

Enzime

Topoizomeraze ADN-helicaze

12.11.2014 24

8
 12.11.2014

Caracteristica ADN-polimerazelor
la eucariote

ADN polimeraza

Localizarea Nucleu Nucleu Nucleu Nucleu Mitocondrii

Extinderea
Funcia sintetic Sinteza ADN Reparaie Reparaie Replicare
primerilor

Funcii
- Exonucleaz Exonucleaz - Exonucleaz
suplimentare

12.11.2014 25

Cine regleaz R?
situsul ORI + proteinele situs-specifice
proteine reglatoare ale ciclului celular

12.11.2014 26

Care sunt particularitile R la

eucariote?
n nucleele replicarea are loc cu ajutorul a trei ADN-
celulelor eucariote polimeraze , ,
sinteza ADN se realizeaz cu ajutorul
n mitocondrii polimerazei .

ADN cromozomial are multe situsuri de iniiere a R;

Viteza de replicare 20-100 baze pe secund;

la mamifere
conine 60000 puncte de origine a
Genomul uman replicaiei separate 100-150 kb.
Durata
12.11.2014perioadei S (replicrii ADN cromozomial n celulele umane 6-9ore)
27

9
 12.11.2014

Exemplu:
Dac crs 1 ar avea un singur ORI replicarea ar dura 15 zile:
Conine 260 000 000 p.b.;
n fiecare furc de replicare ar fi 130 000 000 p.b.
Viteza de replicare este 100 p.b./sec;

12.11.2014 28

Particularitile replicrii
capetelor ADN - cromozomial
Telomerii: Telomeraza:
Secvenele de ADN Enzim ADN-
de la captul polimeraz ARN
cromozomilor; dependent;
(GGGTTAA)n; Conine ARNsn
formeaz bucle; matri n sinteza
telomerilor.

12.11.2014 29

12.11.2014 30

10
 12.11.2014

30 ani

26 ani
12.11.2014 31

11