Fiziologia celulei bacteriene

curs 3
 Obiective
A Elemente constitutive ale celulei bacteriene si
rolul lor fiziologic
B Principalele procese fiziologice particularitati la
bacterii:
Nutritia
Clasificarea bacteriilor in raport cu: sursa de energie,
acceptorul final de electroni relatia cu O2, cerintele
nutritive
Metabolismul bacterian
Cresterea si multiplicarea
 A. Elemente chimice constitutive ale celulei
bacteriene

a1. Apa: 75 - 85% din greutatea umeda; 40% spori

Apa libera
Apa legata fizico-chimic de diferite structuri
Rol:
mediu de dispersie
reactiv
produs final al unor reactii oxidative
a.2. Substantele minerale
a.3.Substantele organice: glucide, proteine, lipide,
pigmenti, enzime, substante antibiotice, vitamine
 a.2. Substantele minerale
Regleaza presiunea osmotica
Favorizeaza schimburile cu mediul
Reglare pH
Potential redox
Pot stimula cresterea si metabolismul
bacterian (ex. Fierul stimuleaza
producerea toxinei difterice)
 Principiul osmozei

dispourquoipapa.free.fr/animal/an0009.htm
 a.3.Substantele organice

Glucide:
Simple: metabolism intermediar
Complexe: structura perete celular, capsula

Importanta in diagnostic: teste care pot

stabili capacitatea unei bacterii de a
metaboliza un anumit zahar valoare
taxonomica
 Test de fermentare a glucozei
(dextrozei)

a. Tub neinoculat cu mediu lichid (bulion) continand: dextroza si rosu fenol,

(indicator pH)
b. Tub cu crestere bacteriana, microorganismul nu fermenteaza (glucoza
negativ)
c. Microorganismul fermenteaza slab glucoza (dextroza)
d. Microorganismul fermenteaza puternic glucoza (dextroza)
 a.3.Substantele organice
Proteinele
Simple: metabolism intermediar
Complexe, functii specializate:
Mucoproteine: mucopolizaharizi de grup la
Str. pneumoniae
Cromoproteine: catalaze, peroxidaze,
citocromi (lant respirator la nivelul membranei
celulare)
Nucleoproteine: acizi nucleici
 a.3. Substantele organice
Lipide
10% din greutatea uscata bacterii obisnuite,
40% Mycobacterii
Libere sau combinate cu alte molecule
Lipide structurale: membrana, perete, mezozom
Ex. - Ac. mycolic Mycobacterii
- Ceruri (acizi grasi + alcooli monovalenti
superiori) ceara D: Hipersensibilitate de tip IV
- Fosfolipide: Treponema palidum
Perete bacterian la Mycobacterium

1: Lipid extern,
2: Acid mycolic,
3: Polizaharid
(Arabinogalactan),
4: Peptidoglican,
5: Membrana plasmatica,
6: Lipoarabinomanan (LAM),
7: Fosfatidilinositolmanozid,
8: Perete bacterian
 a.3.Substantele organice
Pigmentii
La bacteriile cromogene
Localizare pigment clasificare bacterii:
Cromofore (in citoplasma)
Paracromofore (in perete sau strat mucos
Staphylococcus)
Cromopare (difuzibil Pseudomonas aeruginosa
criteriu identificare)
Rol:
Protectie UV (pigmenti carotenoizi)
Antibiotic (ex. Piocianina Ps aeruginosa fata de B.
anthracis)
Enzimatic: proteine transportoare
 Pigmenti bacterieni

Staphylococcus aureus
www.student.ccbcmd.edu

Pseudomonas aeruginosa
www.textbookofbacteriology.net/pseudomonas.html
 a.3.Substantele organice
Enzime
Extracelulare: hidrolaze etc.
Ectocelulare (membrana): permeazele etc.
Intracelulare

Constitutive
Inductibile
 a.3.Substantele organice
Antibiotice
Sintetizate pentru a inhiba alte microorganisme!

Bacteriocine plasmide col (colicine)

Bacitracina (B. licheniformis)
Gramicidina (B. brevis)
Polymixina (B. polymixa)

Utilizare TERAPEUTICA si TAXONOMICA IN IDENTIFICAREA BACTERIILOR

 a.3.Substantele organice
Vitamine
Biotina: sintetizata de E. coli, B. subtilis, B.
anthracis
Tiamina (B1): E. coli, B. subtilis
Vitamine grup B si K flora bacteriana
intestinala
 Metabolismul bacterian
Def. = totalitatea r. biochimice care au loc intr-o celula
bacteriana

Catabolism si Anabolism

Functii indeplinite prin metabolism:

Eliberare si stocare de energie
Obtinerea subunitatilor necesare sintezei componentilor
celulari, pornind de la substantele nutritive primare
Activarea subunitatilor monomere folosite pentru sinteza
constituentilor celulari macromoleculari, cf. informatiei
genetice a celulei
Formarea si degradarea biomoleculelor necesare diferitelor
functii celulare
Rol cheie ATP (conserva energia)
eliberaza pt
biosinteze, transport transmembranar, motilitate
45% din E se pierde Q
Particularitati metabolism bacterian
Unicelular
Necompartimentat (lipsa organite)
Plasticitate: adaptare la diferite tipuri de
substante nutritive
Flexibilitate: utilizarea aceluiasi substrat in
mai multe cai distincte, dar intricate
Eficienta maxima
 Sursa de energie
REACTII REDOX LUMINA
chimiotrofe fototrofe

Sursa de C
Comp organici CO2

heterotrofe autotrofe

Acceptor final de e
Non O
O2
Comp anorganici Comp organici
Respiratie aeroba Respiratie anaeroba Fermentatie
 Relatia cu Oxigenul a bacteriilor:

Strict aerobe: Mycobacterium tuberculosis,

Pseudomonas aeruginosa, B. anthracis
Strict anaerobe fermentatie: Clostridii, Bacteroides
Aerobe, facultativ anaerobe: majoritatea b. om
repiratie si fermentatie
Microaerofile conc. m. mici de O2: Neisseria,
Brucella, Campylobacter
Aerotolerante - folosesc fermentatia, dar se pot
dezvolta in prezenta O2
 Toleranta la O2
O2 este un compus toxic pentru bacterii, daca nu
poate fi redus la H2O (+4 e-)
Consecintele:
Oxideaza compusii chimici
Proces cu pierdere de energie
Distrugere molecule ADN
O2 fura electroni, pe care ii ataseaza progresiv,
formand radicalii liberi de O2 (O2- = superoxid;
H2O2 = peroxid de H
OH-= hidroxil; H2O = apa)
Necesar echipament enzimatic: catalaza,
peroxidaza, superoxiddismutaza pentru detoxifiere
Cerinte nutritive ale bacteriilor
1.Factori fizici-min/optim/Max
pH neutru; rar acid (Helycobacter, fungi/exceptie
Candida - neutru) sau alcalin (Vibrio)
Temperatura:
majoritatea patogenilor mezofili/conservare:
inghetare, liofilizare
Listeria psichrofila; Pseudomonas se multiplica la
minus 18oC in zaharuri concentrate
Termofile Taq polimeraza PCR
Presiunea osmotica (izo, hiper, hipotonic)
Influentata mai ales de concentratia zaharurilor si
NaCl stafilococi halotoleranti; Vibrio
parahaemolyticus halofil; E. coli enterohemoragic
sorbitol
 Cerinte nutritive ale bacteriilor
2. Factori chimici
Sursa de carbon:
Heterotrofe (carbon organic),
Auxotrofe, autotrofe (CO2)
Mixotrofe: ambele
Prototrofe:cer compusi complecsi (vit., aa), fastidiosi
Paratrofe:traiesc strict intracelular: Rickettsii, Chlamydii
Azot: nitrati, nitriti; N2 daca sunt fixatoare
Oxigen
Aerobi stricti
Microaerofili
Facultativ anaerobi
Anaerobi stricti
S, P
Minerale: Fe (competitie cu gazda/siderofori), Na, Cl, Mg, K, Ca
etc.
 Tipuri de cai metabolice
Cale catabolica: degradare compusi din mediu + energie 3
etape:
Degradare compusi in molecule constitutive (aa, zaharuri
etc.)
Molecule simple degradare incompleta la CO2 si H2O
+ intermediari ai caii metabolice centrale
Degradare completa la Co2 si H2O a bacteriilor aerobe si
reactii de fermentatie cu obtinere de alcool, acid lactic,
butiric etc. la anaerobi
Cale anabolica:
Intermediari sinteza blocuri de contructie,
monomeri; intermediari: glucozo-6-P, pentozo-P,
tetrozofosfati, triozofosfati, 3-fosfoglicerat, serina
Monomeri polimeri (proteine, ac. nucleici pe
matrice; lipide, carbohidrati enzimatic)
Autoasamblare
Cale amfibolica: in acelasi timp eliberare de energie si sinteza
Cale anaplerotica: aprovizionarea permanenta cu metaboliti
deficienti
 Metabolismul glucidic
Calea Embden Meyerhoff anaeroba; suita r.:
glucoza 2 piruvati + 2ATP
Calea hexozomonofosfatului: hexoza
pentoza; ac. nucleici, aa aromatici, vitamine
Calea Entner- Doudouroff furnizeaza rezerve
de precursori, vitamine pt. sinteza ADN si ARN
Calea fosfocetolazei
Ciclul acizilor tricarboxilici: Acetil-Coa
CO2 + H2O la nivelul membranei
citoplasmatice
 Metabolismul
soarta compusilor simpli
Aa: Transaminare, dezaminare
ciclul Krebs
Bazele purinice si pirimidinice:endo si
exonucleaza utilizate ca sursa de C;
sinteza atom cu atom
Lipide: glicerol+acizi grasi (lipaze)
ciclul Krebs
Sinteza ac. grasi: AcCoa carboxilaza si acid
gras sintetaza
 Cresterea
Formare de noi constituenti celulari
Sinteza specifica pornind de la substante
nutritive simple a unor compusi noi, care sunt
ulterior asamblati formand copii fidele ale
constituentilor celulari
Depinde de:
Informatia genetica
Substantele din mediu (natura, concentratie)
Continua pana intr-un moment critic (raport
volum/suprafata), cand cresterea se intrerupe si
apare multiplicarea
 Multiplicarea
Diviziune directa - coordonata de ADN
Scindare celula mama in 2 celule fiice
Prin invaginare membrana sau formare sept
transversal
Bacili, spirili: plan transversal
Unii spirili: longitudinal
Coci: planuri perpendiculare succesive (1,2,3)
Inmugurire: bacterii fotosintetice
Fragmentare: bacterii filamentoase
Segmentare - Tip special de spori: Streptomyces
 Diviziunea binara

fig.cox.miami.edu/.../c7.12.11.fission.jpg
Diviziunea prin inmugurire
(Ex. Candida)

www.mshri.on.ca
 Multiplicare/moarte celulara
Echilibru
Competitie pentru substrat
Pool de celule vii in cursul perioadelor de scadere a
substantelor nutritive
Cultura: rezultatul cresterii si multiplicarii intr-un mediu
nutritiv
Colonie pe mediu solid: rezultatul multiplicarii unei UFC;
Timp de generatie (de dublare) 15 minute la E. coli
Concentratia bacteriilor:
Nr. celule viabile: UFC/ml
Biomasa: Masa uscata celule/unitate volum cultura
Turbidimetrie (dar si celule moarte)
Curba cresterii bacteriene
 Mentinerea celulelor in faza
exponentiala
Chemostat:
Inlocuire mediu la intervale fixe celulele
cresc in regim de semiinfometare pentru un
anumit metabolit
Turbidostat:
Scurgerea mediului este reglata fotoelectric,
prin masurarea turbiditatii culturii; se adauga
mediu cand turbiditatea depaseste un anumit
nivel