Analiza radioimunologică (RIA) este o tehnică de determinare

cantitativă a unui număr mare de substanţe prezente în lichidele biologice

în cantitate foarte mică.

RIA este o tehnică obiectivă, cu mare sensibilitate, parţial

automatizată, aparatură costisittoare (echpament nuclear), reactivi scumpi,
cu durată de utilizare scurtă, personal cu calificare specială, supusă unei
legislaţii speciale (radioizotopi).
 Tehnica ELISA
În cazul utilizării sistemelor de fază solidă pentru separarea
moleculelor libere şi a celor marcate, tehnica este denumită ELISA (enzime
linked immunosorbent asssay). Tehnica imunoenzimatică ELISA este
bazată pe reacţia Ag-Ac.
Sistemul de analiză constă din mai multe reacţii:
- Ag sau Ac este imobilizat pe suport solid (plăci de pastic cu
godeuri)
- Ag sau Ac din proba de testat se leagă specific de reactantul
imobilizat
- reactantul marcat enzimatic reacţionează cu complexul reactant
imobilizat-Ag (sau Ac) din probă.
 Reactantul marcat enzimatic format din Ag (sau Ac) conjugat
cu o enzimă este activ atât imunologic cât şi enzimatic şi reacţionează
atât cu Ag (sau Ac) din probă imobilizat pe suportul solid cât şi cu
substratul corespunzător enzimei.
Vizualizarea reacţiei dintre reactantul enzimatic şi complexul
Ag-Ac iniţial se realizează prin adăugarea unui substrat corespunzător
enzimei utilizate.
 Formarea complexului este identificată prin reacţia de culoare
care apare la adăugarea substratului specific (p-nitrofenilfosfat disodic
pentru fosfataza alcalină şi tetrametilbenzidina pentru peroxidază).
Intensitatea culorii indică prezenţa sau absenţa Ag, respectiv Ac
din probă (se citeşte spectrofotometric folosind un cititor de plăci
ELISA).
Tehnica ELISA se poate folosi pentru evidenţierea Ac
(boliinfecţioase, autoimune) sau a Ag (boli infecţioase, neoplazice,
endocrinologice, farmacologie).