M.C.

Varut Nanotehnologii Farmaceutice 2019

Facultatea de Farmacie UMF CRAIOVA

Nanotehnologii
Farmaceutice

www.umfcv.ro 1
 Cuprins
1. Introducere in nanotehnologie
2. Tehnici de analiză și caracterizare la nivel nano
3. Nanomateriale si nanostructuri
4. Nanodispozitive
5. Biosenzori
6. Radioterapia
7. Termoterapia
8. Terapia fotodinamica
9. Diagnoza in nanomedicina
10. Ingineria tisulara si sisteme nanofarmaceutice
11. Farmacocinetica sistemelor nanoparticulante

www.umfcv.ro 2
 1 Introducere in Nanotehnologie
Nanotehnologia este un domeniu multidisciplinar ce presupune structuri nanometrice
utilizate ca vectori, senzori, sau actuatori in diferite dispozitive sau solutii

1mm
Nanotehnologia
Farmaceutica

Nanobiotehnologie Nanorobotica 1um

Nanotehnologie 1 nm=10-9m

www.umfcv.ro 3
1.1 Nanotehnologia farmaceutica
• Utilizeaza substante cu masa moleculara redusa pe care le ataseaza pe
suprafata unor nanostructure (sub 100 de nm de regula) cu utilizare in
nanomedicina, pentru tratament, diagnostic, monitorizare a sistemelor
biologice
• Nanomaterialele, au un raport suprafaţă-masa foarte mare (1000 m2/g) şi
proprietăţi mecanice, electronice, fotonice şi magnetice unice
• Sunt proiectate pentru a avea o gamă largă de aplicatii, de la eliberarea
de medicamente şi de gene la imagistică biomedicală şi mai recent, la
medicina personalizată.

www.umfcv.ro 4
1.1.1 Nanovectorii
• Nanovectorii sunt alcătuiți din cel puțin
trei componente:

 un material tip miez,

o încărcătură terapeutică și/sau imagistică
 o componentă biologică de suprafață, care
ajută la o biodistribuție și la o localizare
corespunzatoare și selectivă a
nanovectorului.
1Stuctura unui lipozom:bistrat fosfolipidic ce include
medicamente polare în mediul intern apos și
medicamente nepolare în stratul lipidic
www.umfcv.ro 5
1.1.1 Nanovectorii
• Lipozomii sunt cea mai simplă formă de nanovector utilitatea lor
bazându-se pe diferențele semnificative ale structurii endoteliale ce
caracterizează membranele diferitelor tipuri de tesut.

www.umfcv.ro 6
1.1.1 Nanovectorii
• Nanoparticule metalice pot fi utilizate cu success
pentru a a elibera in mod controlat diferite
molecule (antibiotic antitumorale) ca urmare a
unui stimul extern
• Terapia fotodinamica presupune iradierea cu o
anumita lungime de unda a unui tesut, process
ce genereaza desprinderea moleculelor atasate
de nanoparticule
• Se realizează astfel o tintire exactă a unei zone
afectate
• Odată activate, nanoparticulele pot juca un rol
de catatlizatori pentru diferite procese biologice

www.umfcv.ro 7
1.1.1 Nanovectorii
• Nanoparticule de Aur dezvoltă pe suprafata
lor un camp electric enorm atunci când
sunt iradiate cu diferite lungimi de undă
ceea ce generează asa numiții PLASMONI
DE SUPRAFAȚĂ
• Astfel moleculele atasate respectivei
particule se desprind și devin active
biologic sau diferite vibrații moleculare
sunt amplificate
• Pot servi ca și senzori specififici pentru
diferite molecule organice
www.umfcv.ro 8
1.1.1 Nanovectorii
• Nanoparticule pe bază de oxizi de Fier
(Ferită, Magnetită) sunt utilizați pentru
posibilitatea de a fi controlate cu un câmp
magnetic.
• De indată ce au atins o densitate suficient
de mare se pot activa prin aplicarea unui
camp electromagnetic
https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/articles/technology-spotlights/iron-oxide-nanoparticles-cha

• Se va produce astfel fie eliberarea unor tml

substanțe legate de suprafața

nanoparticulei, fie încălzirea
nanoparticulelor și a țesutului adiacent .
www.umfcv.ro 9
https://van.physics.illinois.edu/qa/listing.php?id=27163
1.1.1 Nanovectorii

www.umfcv.ro 10
2 Tehnici de analiză și caracterizare la nivel nano

1. Microscopia in lumina polarizata(POM)

2. Microscopia de Fluorescenta
3. Microscopia de Superresolutie
4. Microscopia Raman
5. Microscopia de Forta Atomica (AFM)
6. Microscopia Electronica (SEM & TEM)

www.umfcv.ro 11
2 Tehnici de analiză și caracterizare la nivel nano

• Microscopie optică este

în măsură să dea detalii
nu pierdere decât aprox.
400nm
• Un mare avantaj al
acestei tehnici este că
permite analiza celulară
în vitro
• Sistemul optic este
relativ ieftin

www.umfcv.ro 12
2.1 Polarized Light Microscopy (POM)
• Microscopia optica utilizeaza
lumina nepolarizata!!!
• Este similar cu microscopia
optică, dar utilizează lumina
polarizată pentru a spori
contrastul imaginii
• Nu oferă detalii sub limita de
diffracție ~ 400 nm
• Poate utiliza atat lumina plan
polarizata cat si lumina circular
polarizata
https://en.wikipedia.org/wiki/File:Rising_circular.gif

www.umfcv.ro 13
2.1 Polarized Light Microscopy (POM)
• Cu ajutorul luminii polarizate
linear se pot obtine
urmatoarele configuratii :
• Polarizori incrucisati
(Dark Field Microscopy)
• Polarizori paraleli
(Bright Field Microscopy)
https://en.wikipedia.org/wiki/Polarized_light_microscopy#/media/File:Paper_Micrograph_Bright.png

www.umfcv.ro 14
2.2 Micoscopia de Fluorescenta
Excitation Light

• Este o tehnica ce permite

identificarea cu precizie detalii
fluorescente (marker fluorescenti) R O Y G B I V
ale probei
• Poate fi aplicata usor pe microscopia
optica obijnuita
• Nu permite observarea unor detalii
sub limita de difractie ~ 400 nm

www.umfcv.ro 15
2.2 Microscopia de Fluorescență
Excitation Light
• Este o tehnica ce permite
identificarea cu precizie a unor
detalii fluorescente (marker
fluorescent) atat de pe suprafata
probei cat si din profunzime. R O Y G B I V

• Poate fi aplicata usor pe microscopia

optica obijnuita
• Nu permite observarea unor detalii
sub limita de difractie ~ 400 nm

www.umfcv.ro 16
2.2 Microscopie de Super-resolutie
Cele mai importante tehnici:
• STED (Stimulated Emission Depletion)
• STORM (Stohastic Optical Reconstruction Microscopy)
• PALM(Photo Activated Localization Microscopy)
Rezoluție optică ≈10- 50 nm
Necesita Fluorofori (coloranti fluorescenti)
SOFTWARE

www.umfcv.ro 17
 STED Microscopy

•Poate produce imagini de superrezolutie in timp real

•The sample is irradiated simultaneously with two different beams

• Proba este iradiată cu fotoni

de energie mare din domeniul
vizibil

• In punctul de focalizare o
multime de molecule emit
fluorescent (lumina verde)

• Pentru a opri fluorescenta

moleculelor se foloseste un alt
fascicul cu lungime de unda mai
mică (lumina rosie)
 PALM
•Nu poate reda imagini de superrezoluție in timp real
•Poate dura intre 5 și 30 min in funcție de rezoluție
•Presupune achizitia de multiple imagini și condensarea lor intr-o
imagine de superrezoluție
•Utilizează două fascicule pentru a comanda markerii, pentru a deveni
sau nu fluorescenti
 STORM
•Nu poate reda imagini de superrezoluție in timp real
•Poate dura intre 5 și 30 min in funcție de rezoluție
•Presupune achizitia de multiple imagini și condensarea lor intr-o
imagine de superrezoluție
•Utilizează două fascicule pentru a comanda markerii pentru a deveni
sau nu fluorescenti
 STED
Mitocondrie examinată ”in vitro”

https://www.google.com/imgres?imgurl=https%3A%2F%2Fscx1.b-cdn.net%2Fcsz%2Fnews%2F800%2F2019%2Flivemitochon.jpg&imgrefurl=https%3A%2F%2Fphys.org%2Fnews%2F2019-08-mitochondria-unprecedented-photobleaching-sted-microscopy.html&docid=32vg97-3f0z-ZM
&tbnid=VTsIZyV7vmLHRM%3A&vet=10ahUKEwiA0Z6fs8PlAhXD66QKHRdCD0kQMwhmKBQwFA..i&w=800&h=480&bih=708&biw=1440&q=STED%20vs%20STORM&ved=0ahUKEwiA0Z6fs8PlAhXD66QKHRdCD0kQMwhmKBQwFA&iact=mrc&uact=8

www.umfcv.ro 21
PALM vs STORM

www.umfcv.ro 22
Microscopia Raman

www.umfcv.ro 23
 AFM – Microscopia de Forta Atomica

Un ac foarte subtire (cu 4 atomi in varf), numit Cantilever,

este baleat pe suprafața probei

Exista mai multe moduri de examinare a suprafetei

insă cele mai importante sunt:

• Modul contact
• Modul noncontact
• Modul Intermitent

www.umfcv.ro 24
AFM – Imagini

Nanoparticule de Argint
www.umfcv.ro 25
 Electronic Microscopy

• SEM(Scanning Electronic Microscopy)

• TEM (Transmition Electronic Microcopy)

www.umfcv.ro 26
www.umfcv.ro 27