Fenomene de transport prin membrana celular

Structura

celulare

i funciile membranei de transport membranar

Modaliti Receptori

i traductori de informaie n membranele biologice

Membrana celular (7,5 nm)

ansamblu de structuri supramoleculare aflat la periferia celulei care separ mediul celular de interstiial; separ i organitele celulare de citoplasm; este semipermeabil; este selectiv.

Funciile membranei celulare

Prin proprietile de semipermeabilitate i selectivitate asigur:

transport de molecule, ioni, macromolecule, complexe supramoleculare; traducere i transfer de informaie prin receptorii specifici pe care i conine; interconversia diferitelor forme de energie, prin enzimele sau complexele enzimatice pe care le conine.

STRUCTURA MEMBRANEI CELULARE

Lipide Proteine Glicoproteine

LIPIDELE
Fosfogliceride (fosfolipide) (acizi grasi, glicerol, fosfat, alcool) Sfingolipide Colesterol Glicolipide

Bistratul lipidic:
Rol major: formarea matricii pentru fixarea proteinelor

Intr-o soluie apoas fosfolipidele formeaz de la sine structuri complexe Micele Bistraturi

Membran solid

Membran fluid

Dac lungimea lanurilor lipidice crete stabilitatea bistratului crete permeabilitatea bistratului scade

Fluiditate translaie (difuzie lateral) rotaie n jurul propriei axe basculare dintr-un monostrat n cellalt flexie (ndoire)

Membrane artificiale
Lipozomi, Bistrate lipidice
BLM (black lipid membranes) SSM (solid supported membranes)
Ag/AgCl I(t) Na+

PC Thiol

GOLD

Bistratul lipidic = barier pentru molecule hidrofile proteine, zaharuri, acizi nucleici, ioni

Membranele celulare = bistraturi lipidice n care sunt ncorporate (integral sau parial) proteine glicoproteine lipoproteine

Mediu extracelular
Glicolipid

Lan de oligozaharide

Fosfolipid

Colesterol

Citoplasm

Proteine integrale

Protein periferic

Proteinele membranare
a) proteine intrinseci (integrale) (70%) (enzime, receptori, canale ionice, pompe ionice, transportori) b) proteine extrinseci (periferice) (particip (particip la reacii enzimatice, semnalizare celular celular , la scheletul membranar al suprafeei citoplasmatice, asigur asigur leg leg tura cu citoscheletul)
Pot efectua micri de translaie, unele bine orientate (intervin proteine motoare) 10% din fosfolipidele i proteinele membranare leag covalent lanuri de oligozaharide Glicolipide, glicoproteine
Glucoza, galactoza, Acidul sialic

Citoscheletul

Micrografie electronic n care se observ dispoziia proteinelor scheletului intern al membranei

Clasificarea proteinelor integrale

Pompe ionice (transport activ prmar) Transportori (transport pasiv i transport activ secundar) Canale ionice (transport pasiv)

Modaliti de transport membranar

1. Macrotransport (endocitoza, transcitoza,
exocitoza)
fagocitoza pinocitoza endocitoza mediat de receptori

2. Microtransport pasiv activ

Macrotransport
Fagocitoza (sunt inglobate particule de substan
solid

Fagocite Macrofage

distrug

substane toxice reziduuri celulare bacterii

Pinocitoza
Are loc analog cu fagocitoza, dar sunt transportate picturi de lichid

Endocitoza mediat de receptori

Anumite substane extracelulare se leag la receptori membranari specifici

Pinocitoza
Endocitoz Transcitoz

trecerea proteinelor plasmatice din snge n spaiul extravascular - transcitoz prin endoteliul capilar
Exocitoz

n terminaiile nervoase i celulele secretorii (ex. acetilcolina, insulina)

Microtransport
Transportul pasiv - cauza : diferena de potenial electrochimic - nu necesit energie chimic metabolic Transportul activ - potenial electrochimic mai mic potenial electrochimic mai mare - necesit energie chimic (hidroliza ATP sau GTP, energia electronilor din lanul de oxido-reducere, energia fotonilor, gradienii imprimai unor solvii de reacii chimice anterioare etc)

Microtransport

Transportul pasiv

are loc n sensul gradientului electrochimic sau de presiune fr consum de energie metabolic nspre echilibrul termodinamic cauze:
Fore

electrostatice termic

Agitaia

Diferena de potenial electrochimic

c in W = Win Wex = RT ln + zF( Vin Vex ) c ex
W > 0 - ionii au tendina de a prsi celula; W < 0 - ionii au tendina de a ptrunde n celul

Ecuaia Nernst

RT c ex E = Vin Vex = ln zF c in
Transportul unei specii ionice nceteaz la echilibru W = 0

Modaliti de transport pasiv

Difuzia Difuzia Difuzia

simpl facilitat prin canale i pori

Difuzia simpl

dizolvare n membran legea lui Fick:

/t = - PAc
P = D/
coeficient de partiie
Ex. Schimburile

de gaze n alveolele pulmonare

Specii care strbat membrana prin difuzie simpl

Difuzia facilitat

molecule transportoare - uniport acioneaz n sensul gradientului electrochimic au o anumit specificitate pot distinge speciile levogire de cele dextrogire

Ex.: transportori pentru glucoz, colin, pentru diferii ioni (n acest caz transportorul se numete ionofor)

Mecanismul difuziei facilitate

Stri conformaionale distincte: T1 i T2

Mecanisme de inhibiie: competitiv necompetitiv

Difuzie facilitat

transportori pentru ioni - ionofori: valinomicina (K+, Rb+) Nigericina (K+, H+, schimb neutru)

CANALELE IONICE I PORII

Sunt structuri care asigur trecerea prin membrana celular a speciilor care nu sunt liposolubile

CANALE IONICE
proteine specializate intrinseci sunt selective permit trecerea ionilor n ambele sensuri, preponderent n sensul gradientului electrochimic complex enzim- substrat, cinetic Michaelis-Menten

Obs. Pentru ca un ion s treac dintr-o parte n

cealalt este necesar ca un canal s fie deschis

Cinetica Michaelis-Menten
specia transportat (S1) se leag de proteina canal (E), formnd un complex enzim-substrat (ES)

E + S1 ES E + S 2
k1 k2

Structura schematic a unui canal ionic

Filtru de selectivitate, vestibul, senzor, poart, inactivator

Canal ionic

A Filtru ionic Vestibul

Membrana celular

Membrana celular B

Poarta

Mecanism specific de deschidere : electric (canalele de Na+, K+ n membrana axonal) chimic (receptorul de acetilcolina, canalul de Na+, Ca++ controlat de GMPc) alte mecanisme (ex. mecanic, CC) jonciuni membranare (ex. sinapsa electric)

blocani specifici unele toxine (tetrodotoxina Na+)

Canal de K dependent de voltaj

Difuzia prin pori

Deosebiri ntre cele dou tipuri de difuzie (facilitat, canale)

transportorii - specificitate mai mare (disting ntre L i D)(mii ioni/s); canalele - viteza mult mai mare (milioane - sute de milioane de ioni/s; transportorii sunt n numr mult mai mare; transportorii pot participa la transportul activ secundar

Transportul activ

necesit energie metabolic

(hidroliza ATP sau GTP, energia electronilor din lanul de oxido-reducere, energia fotonilor, gradienii imprimai unor solvii de reacii chimice anterioare etc.)

se realizeaz n sensul invers gradientului electrochimic creeaz, n general, gradieni ai speciilor de-o parte i de alta a membranei

Modaliti de transport activ

Transport activ primar Transport activ secundar:

simport (co-transport) antiport (contra-transport)

Transportul activ primar

Pompe ionice membranare - proteine intrinseci cu proprieti enzimaticecuplaj energetic imediat Clasificare:
Pompe ionice activate de lumina (BR, HR, PR, SR, XR, Fotoredox) ATP-aze (F0F1-ATP-aze, P-ATP-aze, Transportori ABC)

Pompe ionice activate de lumina

Ex. Pompa protonic bacteriorodopsina BR Pompa de clor halorodopsina - HR

Familia F0F1

F0F1 - mitocondrii eucariote, cloroplaste activeaza fie sinteza fie hidroliza ATP V0V1 - vacuole pompe protonice, controleaz acidifierea diferitelor vacuole

La trecerea protonilor se rotete partea globular i prin rotire se stabilete o conformaie favorabil sintezei de ATP.

Familia P-ATPazelor (ATPaze E1E2)

Na+, K+-ATPaza (3Na+, 2K+, membrana plasmatic, genereaz gradieni de Na+ si K+) H+, K+ ATPaza , 1 H+, 1 K+, membrane plasmatice n stomac i rinichi, secreie gastric i duodenal Ca++, ATPaza SERCA, 1 Ca++, 2 H+ (SR, ER) scad concentraia Ca++ intracelular Ca++ ATPaza PMCA, 1 Ca+, 1 H+, membrana plasmatic, scad concentraia Ca++ intracelular H+ ATPaza, 1 H+, membrana plasmatic a drojdiilor, plantelor, protozoarelor, genereaz gradient protonic

Etapele de funcionare a pompelor ATPazice

Molecula ATP se leag la molecula pompei ATP este hidrolizat la ADP Pompa absoarbe parial energia furnizat Pompa i schimb conformaia Translocarea moleculei hidrofile Relaxarea pompei Pompa revine la conformaia iniial

Na+,K+- ATP-aza
Pomp ionic electrogenic, 2 2 In repaus: ~30% din energia ATP-ului celular In celulele nervoase, consumul ajunge la 70% din consumul energetic celular

Schema Albers-Post

Funcionarea Na+,K+- ATP-azei

Implicaii patologice ale disfunciilor P-ATPazelor

Exemple, mutaii ale: Ca+ +-ATPazei: rigiditate i crampe musculare Cu+ +-ATPazei:

sindrom Menks pacienii au deficit de Cu boala Wilson, incapacitatea de a elimina Cu din ficat cu efect toxic

Ulcerul - H+,K+-ATPaza gastric inhibitor Omeprazol

Transportorii ABC
Familia cea mai rspndit, substratele: ioni anorganici, zaharuri, aminoacizi, polizaharide complexe, peptide, proteine

CFTR (cystic fibrosis transmembrane

conductance regulator) canal de Cl- deschis prin hidroliza ATP echilibru hidric (plamn, rinichi) fibroz cistic (mucoviscidoz)

MDR1, MDR2 (multiple drug resistance proteins)

transport molecule hidrofobe spre exterior rezistena la chimioterapie

Transportul activ secundar

Ptrunderea speciilor transportate mpotriva gradientului lor electrochimic, prin asocierea cu molecule care se deplaseaz normal conform propriului lor gradient de concentraie Tipuri: simport (co-transport) antiport (contra-transport)

Simport

Antiport

n muchi- antiport 3 Na+/ 1 Ca++ - electrogenic (sarcina net +1). Asigura concentraia sczut a Ca++ n interior pe seama pomprii active a Na+