Filtrarea: se face pe filtru celular cu vacuum, pentru separarea masei celulare din lichidul rezultat; antibioticul se gsete n filtrat.

Filtratul se depoziteaz la rece (3-5oC) pn la prelucrarea ulterioar; Extracia de face folosind solveni selectivi (cel mai bun este acetatul de butil); extracia are loc n mediu acid, pentru trecerea penicilinei n forma acid, singura solubil n faza organic; Extractul se trateaz cu acetat de potasiu i carbonat de potasiu. Are loc transformarea penicilinei n forma potasic, insolubil (precipit). Purificarea se face folosind crbune activ, cu care se trateaz soluia de penicilin potasic n ap.

Prelucrarea mediilor de cultur

DEZAVANTAJELE PENICILINELOR

Nu acioneaz asupra microoganismelor gramnegative Apariia fenomenului de penicilinorezisten la microorganismele patogene Inactivarea in vivo de enzima penicilinaz Sunt labile termic i chimic (la pH acid se deschide ciclul beta-lactamic)

Antibiotice beta-lactamice de semisintez

Sunt substane care conin partea din molecul cu ciclurile beta-lactamic i tiazolidinic Eliminarea gruprii laterale din penicilin conduce la acid 6-amino-penicilanic (6-APA) Scindarea are loc enzimatic Dup etapa de scindare urmeaz cuplarea cu un reactiv chimic, prin sintez organic

Semisinteza
La grupa amino a acidului 6aminopenicilanic (6-APA) se leag diverse grupri care confer activitate biologic, rezultnd peniciline de semisintez 6-APA Etapele semisintezei * 6-APA se obine din penicilin G prin hidroliz enzimatic (enzima: penicilamidaz), sau prin hidroliz cu mas microbian de Escherichia Coli sau Nocardia * E. Coli se obine la rndul su prin fermentaie biochimic la pH=8, la 30oC, n trei etape (inoculator, intermediar, regim) i este urmat de separarea masei microbiene sub forma unei creme * Scindarea enzimatic are loc prin dispersarea E. Coli ntr-o soluie de penicilin, la 30-35oC, timp de 4 ore. Masa microbian se separ prin centrifugare i se recircul, iar din soluia apoas se separ 6-APA, prin concentrare i cristalizare

PENICILINE DE SEMISINTEZ
Denumire Radical lateral Rezistenta la penicilinaza Stabilitate la pH Activitate gram-negativi

Denumire

Radical lateral

Rezistenta la penicilinaza Stabilitate la pH Activitate gram-negativi

CEFALOSPORINE DE SEMISINTEZ
R1 R2 R1 R2

CEFAPIRIN

CEFTEZOL

CEFATRIXIN
CEFALOTIN

CEFAMANDOL
CEFALORIDIN

CEFAXITIN

CEFAZAFLUR

CEFAZOLIN CEFABID

Inhibitori de beta-lactamaz
Acid clavulanic

Se obine prin biosintez, productor: Streptomyces Clavuligerus Se administreaz ca atare sau mai ales asociat cu antibiotice beta-lactamice, de cele mai multe ori acionnd sinergic cu acestea

Activitatea acidului clavulanic n comparaie cu a unor antibiotice

CMI concentraia minim inhibitorie pentru culturi standard

TETRACICLINE

TETRACICLINE
Au spectru de aciune mai larg dect betalactamicele Au toxicitate mai sczut i sunt mai bine tolerate de sistemul digestiv Lipsa fenomenelor secundare Mai stabile chimic dect beta-lactamicele Inconvenient: solubilitatea n ap este mai redus la forma bazic (se administreaz doar intravenos n aceast form), iar forma clorhidrat, solubil n ap, este mai puin stabil

BIOTEHNOLOGIA TETRACICLINELOR
Se obin prin procese fermentative asemntoare cu beta-lactamicele Microorganism productor: Streptomyces Aureofaciens, la 27 - 28oC i pH = 6,5 - 6,8 Poate utiliza drept surse de hidrai de C glucoza i zaharoza Dup fermentaie produsul se complexeaz cu acizi organici, uree sau amoniac (insolubili n ap) Se filtreaz, se dizolv n HCl la pH = 1,5 - 2 pentru solubilizare, se filtreaz soluia de clorhidrat n final se reprecipit cu amoniac la pH = 4 penicilina baz brut Se purific prin dizolvare n amestec acetat de butil-metanol, din care la amestecare cu ap rezult cristale pure, galbene

Etape biologice de obinere a clortetraciclinei

BIOTEHNOLOGII ENZIMATICE
Enzimele sunt molecule polimerice mari de tip proteic (polipeptide), cu masele de la 6 000 pn la 600 000. Se formeaz n organismele vii prin biosintez condus direct de gene. Din punct de vedere funcional acioneaz ca nite biocatalizatori biologici, care au rolul de a permite realizarea unor reacii cu o vitez mrit. Structural, enzimele pot fi alctuite: - numai din catene polipeptidice ale cror uniti de baz sunt resturi de aminoacizi, caz n care sunt numite holoproteine ; - din dou componente, una proteic i una neproteic, i n acest caz sunt numite heteroproteine. Partea neproteic poate fi o coenzim, care nu se leag covalent de partea proteic sau o grupare prostetic (nucleotide, vitamine hidrosolubile, ioni metalici etc.), care se leag covalent.