Transaminazele serice Transaminazele serice acioneaz la nivel intracelular, cataliznd reacia de transfer a unei grupri amino (-NH2) de la un -aminoacid

la un -cetoacid !ctiunea lor nu se manifest "n plasm, putnd fi considerate enzime plasmatice nefuncionale #eactia de transaminare reprezint una dintre cile gemerale de cata$olizare a aminoacizilor "n organism, alturi de decar$o%ilare &i de dezaminare 'a are importan "n meta$olismul intermediar "n sinteza aminoacizilor neeseniali proprii organismului, utiliznd aminoacizi &i cetoacizi "n e%ces din rezerva meta$olic (pool) Tot prin aceast reacie se sta$ile&te corelaia dintre meta$olismul protidic cu cel glucidic prin intermediul -cetoacizilor rezultai din ciclul (re$s '%ist dou transaminaze serice cu aplicaii clinice importante) a) glutamat-oxaloacetat transaminaza (COT sau TGO) sau aspartat-aminotransferaza (!*T) + catalizeaz transferul gruprii amino de la acidul ,-aspartic la acidul -cetoglutaric rezultnd acidul o%alilacetic &i acidul ,-glutamic 'a e%ist "n concentraii mari "n miocard &i ficat &i "n concentraii mai redus "n mu&c-iul sc-eletic, rinic-i &i esutul cere$ral b) glutamat-piruvat transaminaza (GPT sau TGP) sau alanina-aminotransferaza (!,T) + catalizeaz transferul gruprii amino de la ,-alanin la acidul -cetoglutaric, rezultnd acidul piruvic &i acidul ,glutamic) 'a e%ist "n ficat, concentraia fiind mai redus "n miocard &i "n mu&c-iul sc-eletic, rinic-i Nivelele crescute din ficat &i localizarea sa e%clusive citoplasmatic e%plic relativa sa specificitate "n $olile -epatice Determinarea activittii enzimatice a transaminazelor serice prin metoda colorimetric cu 2 !dinitro-"enil-#idrazin (D$%&) Principiul metodei' *e incu$eaz su$strat ./T sau .0T cu ser ne-emolizat !cidul piruvic eli$erat "n reacie reacioneazcu 2,1-dinitro-fenil-idrazina "n mediu $azic formnd dinitrofenil-idrazona, colorat "n ro&u-crmiziu 2ntensitatea culorii este proporional cu acitivitatea enzimei din pro$a analizat (odul de lucru' )eactivi (ml) Proba de analizat (P) *tandard (*) (artor (() *u$strat 3,4 3,4 3,4 3 *e incu$eaz5 4 minute la 67 8 *er ne-emolizat 3,9 *tandard piruvat 3,9 !p5 distilat5 3,9 *e omogenizeaz5, se incu$eaz5 :3 minute pentru ./T &i 63 minute pentru .0T la 6738 2,1-;N<H 3,4 3,4 3,4 #epaus 23 minute la temperatura camerei Na/H 3,1N 4 4 4 #epaus 4 minute la temperatura camerei Calcul' 8oncentraia de piruvat rezultat din reacia enzimatic este proproional cu concentraia enzimei din ser &i depinde de durata incu$rii +ctivitate GOT' ,P-,* x C* x ./-0x .-t1,P-,* x 2x ./-0 x .-2/ 1,P-,*x00 03mol-l-min-ml ser +ctivitate GPT' ,P-,* x C* x ./-0 x .-t 1,P-,* x2x./-0x.-0/ 1,P-,* x 22 23mol-l-min-ml ser 8* = 23m> = 2%93-6 ?mol 4alori normale' ./T) copii su$ 6 luni ma%im 13@2 9

copii 6 luni-4ani aduli .0T copii su$ 4 ani aduli

2-2A @2 2-23@2 3,2-96 @2 2-9:,4@2

*emni"ica5ie diagnostic' a) GOT e%ist "n cantiti mari "n miocard &i esutul -epatic &i mai puin "n mu&c-ii striai, rinic-i, pancreas, plmni, eritrocite 8re&teri ale activitii enzimatice ale ./T apar "n) .6 infarct miocardic 2 infarct pulmonar + cre&terile sunt u&oare pn la moderate, persistnd pn la 6-4 zile de la atacul de durereB 06 insuficiena cardiac dreapt cu congestie (staz -epatic)B ! operaii pe cordB 76 distrofii musculare progresive sau $oli traumatice musculareB 2 sindromul de zdro$ire, arsuriB 8 infarcte renale, splenice &i intestinaleB 9 pancreatit acutB : leziuni necrotice ale sistemului nervos centralB ./ to%emie gravidic .. afeciuni -epatice + nivelul ca &i durata cre&terii transaminazelor sunt paralele cu e%tinderea leziunii (aidc cu modificarea permea$ilitii celulare &i necroza)B determinrile de ./T sau de .0T sunt deose$it de utile "n urmrirea evoluiei -epatitei cornice sau acute, dar interpretarea valorilor anormale tre$uie fcut cu pruden &i innd seama de conte%tual clinic b) GPT + cre&terile acestei enzime reprezint un semn precoce "n -epatitele virale, aceste determinri putnd fi utilizate ca martor al leziunii -epatocitelor &i astfel s se poat face o difereniere "ntre afectarea -epatic &i cea produs prin colestaz 8re&teri de 933 de ori peste valoarea normal apar "nB !feciuni -epatice o Hepatita viral acut ("naintea apariiei icterului)B o Hepatita to%ic (c-loroform, 88l1, compu&i organici ai fosforului) !feciuni pancreatice o 0ancreatit acut o unele tipuri de tumori 8re&teri moderate de 9-C ori valoarea normal apar "n) o 8olestaz -epatic cronic o ciroz o ictere mecanice (pn la 7-93 ori valorile normale)B o tumori -epaticeB o leziuni ale musculaturii @n parametru important legat de activitatea transaminazelor este raportul ./TD.0T numit raport de )ittis care + in condiii fiziologice normale + este egal cu . 0 En a"ec5iunile #epatice acest raport este mai mic dec;t . 06 8nd ./T are valori crescute, iar .0T are valori normale este posi$il suspectarea prezenei unui in"arct miocardic, iar raportul de #ittis devine mai mare dec;t . 06 Creatin"os"o<inaza (CP=) 8reatin fosfoFinaza catalizeaz fosforilarea creatinei de ctre !T0 "n celulele musculare &i esutul cere$ral ;atorit rolului su "n producerea de energie pentru organism, 80( reflect cata$olismul tisular normal 80( se prezint su$ forma a trei izoenzime) 2

9 2 6

80(-GG (80(9) localizat "n special "n esutul cere$ralB 80(->G (80(2) localizat "n special "n mu&c-iul cardiac &i puin "n mu&c-iul sc-eleticB 80(->> (80(6) localizat "n mu&c-ii sc-eletici

*copurile determinrii activitii enzimatice a 80() detectarea &i diagnosticul infarctului miocardic acut &i a reinfarctizrii ("n special prin 80(->G)B evaluarea posi$ilelor cauze ale durerii precordiale &i monitorizarea severitii isc-emiei miocardice dup c-irurgia cardiac sau dup catetrismB detectarea afeciunilor musculaturii sc-eletice care nu sunt de origine neurogen + de %emplu) distrofia muscular ;uc-enne &i dermatomioliza precoce Halori de referin) 80( total) $r$ai ) 13 + 974@Dl femei ) 24 + 913@Dl En serul su$iecilor snto&i se gsesc aproape e%clusiv izoenzimele 80(->>, astfel "nct o cre&tere a izoenzimei 80(->G atrage atenia asupra unor leziuni miocardice ;e fapt, o cre&tere a activitii 80( la peste 9:3@Dl &i o activitate 80(->G de peste 4I din activitatea total este sugestiv pentru infarctul miocardic acut En 2>! sau dup c-irurgie cardiac, 80(->G "ncepe s creasc "n 2-1 ore, atinge valoarea ma%im "n 92-21 de ore &i revine la normal de o$icei "n 21-1A de ore 0ersistena valorilor crescute indic evoluia afectrii miocardice &i s-a constatat c 2D6 din pacieni prezint valori crescute dup 72 de ore de la de$ut !tunci cnd cresterile dureaz mai mult de 6 zile de la de$utul infarctului, prognosticul este foarte rezervat #einfarctizarea este indicat de valori crescute ale 80( aprute la un interval de cinci zile dup o revenire preala$il la normal 2zoenzima CP=-(> poate prezenta valori crescute "n) traumatismul cardiacB miocardit (uneori)B insuficiena caridac congestiv (cre&teri moderate)B c-irurgia cardiac &i "nlocuirea valvelor cardiaceB angiografia coronarian (cre&teri tranzitorii)B &ocuri &i traumatisme electrice &i termice (valori crescute apar la apro%imativ 43I din pacieni, dar nu sunt susinute de ,;H9J ,;H2) ;etectarea 80(-GG poate indica leziune tisular cere$ral, tumori cere$rale maligne, &oc sever, insuficien renal Halorile crescute ale 80(->> urmeaz afectarea musculaturii sc-eletice dup un traumatism sau dup o $oal muscular 8re&teri moderate apar &i "n -ipotiroidism, iar p cre&tere marcat apare "n activitatea muscular intens cauzat de strile de agitaie 8re&teri ale valorilor 80( total se pot datora cardiomiopatiei alcoolice, into%icaiei cu mono%ide de car$on, -ipertermiei severe,-ipoFaliemiei sever (scderi marcate ale poasiului seric) sau apar dup convulsii

?actatde#idrogenaza (?D&) face parte din clasa o%idoreductazelor &i catalizeaz transformarea acidului lactic "n acid piruvic "n prezena N!;K ca acceptor de HK 'cuaia reaciei catalizate este) 8H6 8H6 L L K 8H M /H K N!; N 8 = / K N!;H KHK L L 8//H 8//H 6

'a poate fi separat electroforetic "n 4 izoenzime ,;H 9, ,;H2, ,;H6, ,;H1, ,;H4, separarea fiind fcut "n ordinea scderii mo$ilitii lor electroforetice <raciunile rapide (,;H9, ,;H2) sunt de provenien miocardic, iar cele lente (,;H1, ,;H4) provin mai ales din ficat &i parial din musculatura sc-eletic En infarctul miocardic acut, ,;H este aproape "ntotdeauna crescut, "nc din primele 93-92 ore de la de$ut, atingnd un vrf dup 1A-72 de ore 0ersistena valorilor crescute timp de 93-91 zile este util pentru diagnosticul mai trziu la primul consult al pacientului dup o perioad suficient de lung astfel "nct valorile 80( &i ./T s devin normale Halori ale ,;H mai mari de 2333@Dl sugereaz un prognostic foarte rezervat ;eoarece e%ist numeroase afeciuni "n care valorile ,;H cresc, este necesar &i determinarea activitii izoenzimelor ,;H9 &i ,;H2 Halorile ,;H9 pot rmne crescute c-iar dac cele ale ,;H total revin la normal En infarctele minore, ,;H 9 poate fi crescut, "n timp ce ,;H total prezint valori normale En 2>! asociat cu insuficiena cardiac congestiv pot apare valori crescute ale ,;H 9 &i ale ,;H2 En insuficiena cardic congestiv propriu-zis, valorile izoenzimelor ,;H sunt normale 2ntroducerea valvelor intracardiace prostetice determin constant -emoliza cronic "nsoit de cre&teri ale ,;H total, ale ,;H9 &i ,;H2 !stfel de cre&teri apar &i "nainte de interveniile c-irurgicale la pacienii cu modificri -emodinamie severe ale valvelor cardiace Cre@teri ale izoenzimelor ?D& An di"erite tipuri de a"ec5iuni !feciunea 2nfarct miocardic acut 2nfarct cortical renal acut !nemie pernicioas Oocuri electrice &i termice, traumatisme 2>! cu congestie -epatic acut ,imfoame maligne 8arcinom de prostat 'm$olie pulmonar &i infarct ;ermatomiozite 2zoenzime ,;H crescute 2 &i 22 2 &i 22 2 H 2 &i H 222 &i 2H H 22 &i 222 H

;eterminarea activitii ,;H este util &i "n cazul respingerii acute a transplantului de inim deoarece ,;H9 cre&te mai mult de 933@Dl &i - ca procent - aPunge la 64I din ,;H total "n primele 1 sptmni dup intervenie !ceste valori pot scdea su$ o terapie imunosupresoare corespunztoareB ,;H total continu s rmn crescut, c-iar dac ,;H9 revine la normal Gama B glutamil tran"eraza (GGT sau C-GT) ..T catalizeaz transferul gruprii Q-glutamil de la peptide ctre ali aminoacizi 'ste o protein -eterodimeric, fiecare su$unitate constnd dintr-un singur lan polipeptidic 'ste localizat la nivelul mem$ranei citoplasmatice a numeroase celule, centrul activ al enzimei fiind situat "n e%terior ..T are un rol important att "n sintezele proteice &i "n rea$sor$ia pro%imal tu$ular a aminoacizilor din filtratul glomerular, ct &i "n meta$olimul mediatorilor inflamaiei (ca de e%emplu, leucotrienele), al su$stanelor carcinogene &i to%ice ..T msurat "n ser provine "n special din ficat 8ea mai mare parte este legat de lipoproteine, "n special H;,, dar &i de ,;, / mic parte este -idrosolu$il, fiind asemntoare ..T eli$erate de proteaze din mem$rana celulelor -epatice ..T legat de H;, este crescut "n special "n $olile -epatice non-icterice, "n timp ce ..T legat de ,;, este crescut "n colestaz, iar fraciunea -idrosolu$il cre&te 1

"ntr-o varietate de $oli -epatice ..T este "ndeprtat din plasm prin $il, activitatea enzimei "n $il fiind de 93 ori mai mare dect cea plasmatic / parte din ea este degradat de rinic-i &i eliminat prin urin *inteza ..T poate fi indus "n ficat de colestaz, de consumul cronic de alcool sau de dozele terapeutice ale unor medicamente *copurile determinrii GGT' 9 depistarea alcoolismului - este cel mai sensi$il indicator, fiind enzima a crei cre&tere dep&e&te celelalte enzime -epatice dozate "n mod curent ,a alcoolici, nivelul seric al ..T poate aPunge la valori de peste 43 ori valoarea normal, gradul de cre&tere depinznd att de cantitatea de alcool consumat, ct mai ales de persistena "ndelungat a consumuluiB practic, este enzima-marFer pentru alcoolism 'ste foarte util "n diagnosticarea alcoolismului ascuns &i "n evidenierea valorilor crescute ale fosfatazei alcaline de origine osoas sau -epato-$iliar 2 monitorizarea a$stinenei de la alcool 6 diagnosticul $olilor -epatice &i $iliare + "n astfel de afeciuni, valorile ..T se coreleaz cu cele ale fosfatazei alcaline 1 diagnosticul unei -epatopatii "n prezena unei afeciuni osoase, a sarcinii sau "n perioada copilriei + sunt condiii "n care valorile fosfatazei alcaline cresc, "n timp ce valorile ..T se "ncadreaz "n valorile de referin ..T are valori considerate fiziologic normale' ,a femeile "nsrcinate &i la copiii de peste 6 luni En afeciunile osoase "n cazul persoanelor aflate "n perioada de cre&tere (copii &i adolesceni) En afeciuni renale &i "n efortul fizic intens *emni"ica5ie diagnostic B valori crescute' En afeciunile -epatice + cre&terile ei sunt paralele cu cele ale fosfatazei alcaline, leucinaminoppetidazei, 4R-nucleotidazei, dar este un indicator mai sensi$il dect ele En -epatita acut, cre&terile ei sunt mai puin marcate dect ale altor enzime -epatice, dar + ca dinamic + valorile ei sunt ultimele care revin la normal &i de aceea ea este util "n indicarea refacerii organismului En -epatita cronic, ..T cre&te mai mult dect "n -epatita acut, valorile ei fiind mai mari dect cele ale ./T &i .0T ..T prezint cre&teri marcate (impresionante) "n serul $olnavilor cu retenie $iliar !stfel, "n timp ce fosfataza alcalin cre&te de 6-4 ori fa de limita superioar a normalului, ..T dep&e&te aceast limit de 93-63 ori En ciroza $iliar primar, cre&terea ei este marcat En cazurile de ficat grsos (steatoz -epatic), cre&terile ei sunt paralele cu cele ale T.0 &i T./, dar sunt mai marcate En icterul o$structiv, cre&terile sunt mai rapide &i mai mari dect cele ale fosfatazei alcaline En colestaza mecanic sau viral, ..T &i fosfataza alcalin au niveluri la fel de crescute, dar "n colestaza indus medicamentos, ..T este mai mare dect leucinaminopeptidaza ..T este "ntotdeauna crescut "n pancreatita acut ..T este crescut la 43I din pacienii cu 2>! + cre&terea ei "ncepe "n a 1-a, a 4-a zi dup de$utul 2>!, atingnd un ma%im dupa A-92 zile En cancerul de prostat, cre&terile ei sunt paralele cu cele ale fosfatazei acide ..T cre&te de 6-93 ori peste limita normalului "n neoplasmul primitiv sau metastatic al ficatului, "n insuficiena cardiac congestiv cu staz -epatic, dup administrarea de $ar$iturice ..T este u&or crescut + de 9,4-2 ori peste limita superioar a normalului + &i "n serul pacienilor cu -ipertrigliceridemie, aceasta sugernd o stimulare a proteosintezelor -epatice 4