Functiile acizilor nucleici

detin functii importante in desfasurarea proceselor vitale normale si patologice.

ADNul e subst de baza a aparatului genetic, cu rol in ereditate si variabilitate, ARNul detine mai mult rol
functional in sinteza proteica. ARNul, prin cele 3 tipuri ale sale (m,r,t) are rol de mesager, cuplator al
ribozomilor si transportor al aminoacizilor la locul sintezei proteice.
ADN:
!functia autocatalitica (proces de replicare semiconservativa, proces care asigura conservarea informatiei
genetice
!"eterocatalitica, evidentiata in procesul de transcriptie (info. de pe ADN din struct sa primara, care are
la baza aperiodicitatea bazelor azotate e copiata in ARN premesager
!fubctie in variabilitate, ADNul asigura variabilitate datorita posibilitatii lui de a suferi procese de
mutatii si de recombinare
!F#N$%A A#%&$A%A'%$A a ADN ((replicarea, sieza, dublarea cantitatii de informatie)
decurge dupa modelul semiconservativ, adica dintr!o molecula parentala de ADN rezulta ) molecule fiice
identice, fiecare prezentand o catena de tip parental si una nou sintetizata, a.i. molecula parentala sa se
conserve pe *umatate in fiecare din cele ) fiice
Replicarea ADN este cel mai important eveniment al celulei, in care o molecula isi diri*eaza propria sa
sinteza, determinand dublarea cantitatii de info genetica. $antitatea dublata este conservata si repartizata
in mod egal in urma D+,#N $-'#'AR-, in ) molecule fiice identice.
nainta modelului de replicare semiconservativ au fost descrise inca ) modele de replicarece ulterior sau
dovedit a fi gresite (.! modelul conservativ, cf caruia molec parentala se conserva total, adica in urma
replicarii rezulta o molecula fiica cu ambele catene parentale, si una cu ambele nou sintetizate/ )! modelul
dispersiv, cf caruia prin replicare rezulta moleculele fiicece prezinta fiecare catena a o alternanta de
secvente parentale si secv. nou sintetizate)
Replicarea semiconservatia (ce are loc in interfaza, in stadiul 0, de sinteza) debuteaza cu separarea
catenelor, fiecare catena devenind matrita1 sablon pt sinteza unei noi catene, pe baza de
complementaritate. Replicarea se realizeaza dupa modelul desc"iderii unui fermoar, capatand o structura
caracteristica (litera 2), structura denumita F#R$A de R-3'$AR-, sau bifurcatie de replicare. 3rocesul
incepe de la nivelul unor secvente specifice, cu localizare stricta, denumite origini ale replicarii
(R-3$&N) ce prezinta o zona centrala bogata in adenine si timine si flacata de regiuni de guanine si
citozine, ce asigura o mai mare stabilitate. De la nivelul acestor origini de replicare, sinteza se realizeaza
bidirectional. Astfel, pe masura ce oc"iurile de replicare se maresc si se intalnesc, ele fuzioneaza, aspect
ce dureaza pana cand toata catena este dublata. 'a -4(in special la specia umana), daca replicarea ar
incepe de la un singur replicon, si s!ar desfasura intr!un singur sens, de la un capat la altul procesul ar
dura 566 ore. Astfel s!a constata ca e7ista mai multe puncte de origine, in care replicarea e initiata
simultan, mai multi repliconi.
3R&$-0#' de R-3'$AR-
decurge cu a*utorul unui comple7 multiproteic, ce se deplaseaza pe molecula de ADN si care reprezinta o
adevarata masinarie a replicarii denumita R-3'0&8, format din 9-'$A,- (cea care separa catenele),
%&3&,&8-RA,- (enzime ce actioneaza asupra dublului "eli7, determinand modificari ale
conformatiei lui spatiale), proteine 00: (proteine de atasare la monocatene, proteine care mentin
monocatenele separate), 3R8A,- (proteina care catalizeaza sinteza unui oligonucleotid de ARN),
3'&8-RA,- (cea mai importanta, enzime care aditioneaza nucleotide la structura oligonucleotidului
sintetizat de primaza) si ';A,- (enzime ce asigura continuitatea catenei nou sintetzate).
.!9-'$A,A
enzima ce separa cele ) catene de ADN atasandu!se la locul repliconului (la zona centrala a lui), unde
desface mai usor leg Adenina!%imina, iar ca energie, "elicaza utilizeaza energia A%3ului
)!%&3&,&8-RA,-'-
se ataseaza la dublul "eli7 si determina rela7area acestuia prin realizarea uneia sau a ) sectiuni pe una sau
ambele catene, aspect care permite eliminarea supertensiunii create de "elicaz prin avansarea ei pe catena.
%ot topoizomeraze sunt cele care dupa rela7area "eli7ului unesc capetele de ruptura, asigurand
continuitatea catenei.
3!00:urile (proteinele)
se ataseaza la fiecare monocatena, care au rolul de a impiedica imperec"erea bazelor complementare,
mentinand catenele separate.
<!3R8A,A
sintetizeaza un oligonucleotid de ARN (denumit primer, sau amorsa) si care prezinta specificitate de
secventa, adica ii este necesara o anumita secventa de pe catena, pe care sa o recunoasca si la care sa se
ataseze. %ot ea nu prezinta specificitate de sens/ se poate deplasa catre oricare capat al catenei.
5!3&'8-RA,-
prezinta urmatoarele caracteristici: N# prezinta specificitate de secventa ( nu are nevoie de o anumita
secv de pe catena pe care sa o recunoasca si la care sa se ataseze), 3R-,N%A specificitate de sens
(actionaza intotdeauna in sensul 5= !> 3=), e incapabila sa initieze sinteza noii catene, dar rolul ei e acela de
a adauga nucleotide la primer. 3olimerazele au rol in repararea erorilor (leziuni induse de factori
interni1e7terni in molecula de ADN). De asemena are capacitate e7onucleazica (de e7cizie1 de a indeparta,
de a degrada enzimatic)
Datorita faptului ca cele ) catene din ADN sunt antiparalele, si ca polimeraza actioneaza numai in direcita
5= !> 3=, inseamna ca sinteza se realizeaza asincron pe cele ) catene astfel: pe catena conducatoare sinteza
decurge continuu, in sensul 5= !> 3= si procesul necesita sinteza unui singur primer la care polimeraza
aditioneaza nucleotide. 3e catena decalata, sinteza decurge prin fragmente numite &4A,A4, scurte (.66
!> .666 perec"i de baze1 3:), fragmente de ADN obtinute prin aditionarea de nucleotide la fiecare
primer. 3e catena decalata, sinteza fiecarui fragment o?aza?i necesita sinteza in prealabil a cate unui
primer. 3rimerii suplimentari sunt indepartai prin digestie enzimatica si inlocuiti cu secvente
corespunzatoare de ADN. 'a finalul replicarii, pe catena decalata intervine ';A,A ce uneste
fragmentele o?aza?i asigurand continuitatea catenei nou sintetizate.
Replicarea decurge astfel:
.!separarea catenelor din dublu "eli7 de 9-'$A,Acu a*utorul %&3&,&8-RA,-'&R.
)!mentinerea catenelor separate cu a*utorul 00:urilor
3!replicarea pr!zisa (asincron pe decalata, continua pe principala)
<!rezultarea replicarii a ) moleculei fiice care respiralizeaza cu a*utorul topoizomerazelor rezultand struct
"elicala de7trogira 3D normala, pt fiecare molecula (ADN tip :, sau A)
R-A$%A 3&'8-R,AR in 'AN%
o metoda de analiza a acizilor nucleici reprezinta 3$Rul (reactia polimerizarii in lant) ce are la baza
principiul replicarii semiconservative a ADNului si care consta in amplificarea unui fragment de acid
nucleic de dimensiune variabila si cu structura partial cunoscuta. ADNul poate fi e7tras din variate surse
(sange, sperma, mumii). 8etoda este rapida, si este consistenta (ofera material suficient pt analiza) / este
si ieftina.
3asii acestei reactii:
necesita ) primeri ce se ataseaza la cele ) capete ale fragmentului de analizat, dupa care are loc e7tensia
acestor primeri, ce declanseaza sinteza de ADN dupa modelul fragmentului initial dupa modelul
fragmentului tinta, cu a*utorul ADN polimerazei
.!Denaturarea ADNului dublu catenar (@5 grade)
)! Aliniere si atasare a primerilor la capetele tinta (A6 grade)
3!-7tensia primerilor (cu a*ut taB polimerazei, la C) grade), prin aditie.