MICROBIOLOGIA CLINIC

Disciplin a microbiologiei aplicate

Ofer semne paraclinice importante pentru diagnosticul
etiologic al bolilor infecioase
intete terapia antimicrobian cnd este posibil i
necesar

Monitorizeaz eficient terapia antimicrobian

Instrument de lucru al clinicianului

Pacientul ntreab:
M vindec? Nu mor? Nu rmn nenorocit?
Membrii familiei sunt la adpost de aceast boal?
Ct m cost?
Organele decizionale ntreab: ct ne cost? (CAS)
Direct: diagnostic, terapie, spitalizare, combatere, profilaxie
Indirect : zilele de munc pierdute
Microbiologul face observaii i msurtori expuse
variailor i erorilor:
- Biologice
- Analitice
- Preanalitice

- Postanalitice

Controlul erorilor n microbiologia

clinic

controlm fluxul informaional clinic-laborator;

alegem teste performante;
standardizm i controlm calitatea activitii;
utilizm criterii obiective pentru interpretarea
rezultatelor;
supervizm activitatea i pregtirea continu a
personalului;
asigurm comunicarea clar a rezultatelor;
atragem clinicianul n programul controlului de
calitate al investigaiei microbiologice.

Performana testelor de laborator

Rezultatele
testului

Prezena bolii

Totaluri

Prezent

Absent

Pozitiv (anormal)

Real pozitiv (RP)

Fals pozitiv (FP)

RP + FP

Negativ (normal)

Fals negativ (FN)

Real negativ (RN)

FN + RN

RP + FN
(total cu boal)

FP + RN
(total fr boal)

RP + FP + RN + RN
=N
(total observaii)

Totaluri

Sn = RP/ RP + FN

PP = RP/ RP + FP

Sp = RN/ FP + RN

PN = RN/ FN + RN
Ef = RP + RN/ N
Pr = RP + FN/ N

Examinri repetate i asocieri de teste

Regula crede pozitivul

suficient un singur rezultat pozitiv din serie ori

din asociere
crete sensibilitatea investigaiei
scade specificitatea

Regula crede negativul

necesar pozitivitatea tuturor testelor din serie

sau din asociere
scade sensibilitatea
crete specificitatea

Standardizarea i controlul de calitate n

microbiologia clinic
Controlul variaiilor preanalitice

norme pentru alegerea, recoltarea i transportul

probelor
standarde de calitate a probelor acceptate pentru
examinare
atitudinea fa de probele neadecvate

Controlul variaiilor analitice

controlul de calitate al reactivilor

controlul performanelor aparaturii de laborator

Controlul variaiilor post-analitice

sistem de nregistrare i comunicare a rezultatelor care

reduce la minimum numrul transcrierilor i permite
controlul lor n orice moment

HEMOCULTURA
N
DIAGNOSTICUL
INFECIEI

Recoltarea sngelui pentru

hemocultur
Recoltarea sngelui de pe dispozitive
intravasculare: problem
controversat
nu exist diferene semnificative: durata
scurt a meninerii cateterului i tehnici
stricte de asepsie.
discordane:
BGP: contaminare/colonizare
BGN: bacteriemie
puncia venoas periferic
Interpretarea clinicianului

nlocuirea/nu a acului dup

flebotomie

Numrul de hemoculturi i momentul

prelevrii
stilul clinicianului; nu exist un gold standard
Reguli pentru prelevarea hemoculturilor
Maxim 3 HC n 24 ore din locuri de puncie
diferite
n bolile febrile acute: 2 HC
n sindromul febrei de origine necunoscut:
2 HC la 45-60 min negative

2 HC n decurs de 24-48 ore

EI acut: 3 HC n 3 ore
EI subacut: 3 HC n prima zi negative

2 HC n zilele urmtoare

Repetarea HC n urmtoarele
circumstane:
Episod septic nou
?! EI cnd HC iniiale au fost recoltate
sub ABT
Confirmarea rspunsului la terapie n
EI sau alte infecii endovasculare
Dup HC pozitive n anumite condiii
care ar putea s aib implicaii
diagnostice i prognostice
Bacteriemie de cateter cu S aureus
Bacteriemie cu BGN

Confirmarea diagnosticului bacteriemiei

de cateter

Repetarea HC poate s nu fie de

folos n urmtoarele
circumstane:
Febr persistent fr noi modificri
Nou episod febril care poate fi atribuit
unei cauze non-infecioase
Leucocitoz fr alte semne clinice
sugestive de sepsis.
Colonizare sau focar infecios fr
simptomatologie sistemic
Aceste propuneri necesit validri
ulterioare i nu pot fi aplicate la
imunodeprimai

Volumul de snge ce urmeaz a fi

nsmnat
10-30 ml la aduli
1-2 ml de snge per set la nou-nscui, 23 ml la sugari i 3-5 ml la copii.
raia optim a diluiei - 1:10

Durata incubrii
Sistemele automate: 5 versus 7 zile
subcultivarea de rutin a HC negative
dup 5-7 zile de incubare
fungi, Pseudomonas aeruginosa i
grupul HACEK : peste 7 zile
Legionella sau Brucella
MO de rutin a HC negative macroscopic
dup 24-48 ore de incubare
Gram
acridine orange

Medii de cultur
Sistemele de hemocultur automate i
semiautomate
BacT/Alert este superior BACTEC n
izolarea microorganismelor, n special a
stafilococilor i levurilor
BACTEC este superior bulionului cu
supliment de pepton i sistemului VITAL
Aceste sisteme pot ntmpina dificulti
n depistarea creterii bacililor gramnegativi nefermentativi (P aeruginosa, A
baumannii)

Sistemul Oxoid Signal:

numr crescut de rezultate fals pozitive
dificulti n semnalizarea creterii
bacteriilor anaerobe, a majoritii levurilor,
a H influenzae, bacililor gram-negativi
nonfermentativi, Neisseria meningitidis,
Nocardia spp., i Corynebacterium jeikeium
Mediile difazice
avantajoase pentru izolarea micobacteriilor
i brucelelor
timpul de depistare al microorgansimelor
poate fi comparabil cu al sistemelor
automate

Criterii de stabilire a semnificaiei

clinice a izolatelor din
hemoculturi
1. Identitatea izolatului

Staphylococcus aureus
Streptococcus
pneumoniae
E coli
ali membrii ai familiei
Enterobacteriaceae
Pseudomonas
aeruginosa
Candida albicans

S pyogenes
S agalactiae
Listeria monocytogenes
Neisseria meningitidis,
N gonorrhoeae
Haemophilus
influenzae,
membrii grupului
Bacteroides fragilis,
Candida spp altele
dect C albicans
Cryptococcus
neoformans.

2. Numrul de seturi de hemoculturi

pozitive
3. Numrul de flacoane pozitive
dintr-un set
4. Timpul de pozitivare al
hemoculturilor
5. Izolarea aceluiai microorganism
i din alt situs
6. Caracteristici clinice: febr,
leucocitoz cu devierea la stnga a
formulei leucocitare i imagistice

Rolul CRP i PCT n examenul

microbiologic al sngelui
pot fi influenai de etiologii noninfecioase
msurarea zilnic: mai sensibil n predicia
sepsisului fa de febr i leucocitoz
au cinetici diferite
nivelul seric al PCT crete mai rapid fa cel al
CRP anticiparea sepsisului cu 24-48 ore
naintea CRP
n 2005 Aikawa N et al: la pacienii diagnosticai cu
bacteriemie pe baza semnelor clinice, rata pozitiv
a diagnosticului pe baza PCT a fost de 70,2%, n
timp ce pe baza hemoculturilor a fost de 42,6%