PROTEINE

Proteine
suport chimic structural i funcional al
materiei vii;
surs primar de aminoacizi, din care se
sintetizeaz proteinele proprii celulare;
purttor material al tuturor nsuirilor
biologice: difereniere, cretere, dezvoltare,
reproducere;
rol catalitic (enzime);
funcie represoare, participnd la reglarea
expresiei genelor;

Proteine
pigmeni respiratori (hemoglobina, citocromii);
anticorpi;
particip
la
constituirea
biomembranelor;

ultrastructurii

intervin n procesele de permeabilitate

selectiv a membranelor, n transportul apei,
al unor ioni i a unor substane organice;
particip la meninerea echilibrului acidobazic.

PROTEINE
Proteinele fibrilare sunt rezistente fizic i
insolubile n ap i soluii diluate (colagenul
din tendoane i oase; -keratina din pr,
coarne, piele, unghii, pene; elastina din
esutul conjunctiv elastic).
Proteinele globulare sunt solubile n ap i
soluii diluate (enzime, anticorpi, hormoni,
proteine de transport).

STRUCTURA PROTEINELOR
varietate structural existena unui numr
foarte mare de forme izomere
20 de aminoacizi standard
numrul total de proteine distincte care pot fi
asamblate este de 20n,
n = resturi aminoacizi in lanul polipeptidic.

STRUCTURA PROTEINELOR
Conformaia prezint aranjamentul temporar

geometric datorat rotirii limitate a unor grupe de atomi

n jurul unei legturi , fr deformarea unghiurilor de
valen i fr a avea loc scindri ale legturilor covalente.
conformaie nativ

Configuraia reprezint orientarea n spaiu, respectiv

dispunerea tridimensional a atomilor sau

gruprilor de atomi ai moleculei, n raport cu un anumit

centru de referin, considerat rigid.

Structurile configuraionale nu pot fi transformate una n
cealalt fr distrugerea uneia sau mai multor legturi
covalente.

Legtura peptidic
delocalizarea electronilor
caracter parial de dubl legtur
coplanar,
planul rigid n care se afl legtura C-N
nu permite rotaia liber, ci doar o rotaie
restrns

Legtura peptidic

Legtura peptidic

atomii Cadiaceni legturilor peptidice ct i atomii de

oxigen i hidrogen ocup poziii trans
aranjament trans repetabil stabil

 Structura primar

tipul i modul de nlnuire al resturilor aminoacizilor n catena

polipeptidic, deci caracterizeaz calitativ i cantitativ proteinele.

Structura secundar

satisfacerea potenialului de formare a legturilor de hidrogen n

interiorul lanului polipeptidic sau ntre lanurile polipeptidice.

Structura teriar

modul de organizare secundar a lanului polipeptidic, la care se

adaug modul de pliere a acestuia datorit interaciilor dintre radicalii
grefai de-a lungul su.

Structura cuaternar

modul n care lanurile polipeptidice individuale (protomeri) se

asociaz pentru a constitui structura funcional (oligomenul).

Structura primara

- existena legturilor peptidice;

- existena unei secvene bine definite a resturilor
aminoacizilor, n catenele polipeptidice (control
genetic);
- existena unor conformaii i configuraii specifice
fiecrei proteine activitatea biologic.

Regiuni variabile ale insulinei,

insulinei
dependent de specie
Specia

Catena A,
poziiile
8 9 10

Catena B,
poziia
30

Om

Thr Ser Ile

Thr

Porc

Thr Ser Ile

Ala

Cine

Thr Ser Ile

Ser

Iepure

Ala Ser Val

Ala

Capr

Ala Gly Val

Ala

Oaie

Thr Gly Ile

Ala

Anemia falciform
hemoglobina A normal - rest de Glu din
poziia a asea, a catenei
hemoglobina S restul de Glu substituit cu
un rest de Val

Structura primara
fiind substituit un aminoacid cu radical
ionic cu altul cu radical nepolar
proteina rezultat nu mai conserv
proprietile proteinei iniiale (proteinele nu
mai sunt omologe)
substituia este neconservativ

Structura secundar
o organizare spaial tridimensional,
stabilizat de legturile de hidrogen dintre
gruprile >NH (donoare de hidrogen) i
gruprile >C=O (acceptoare de hidrogen).
legturi de hidrogen intracatenare si/sau
intercatenare

Structura secundar
Pauling i Corey (1951) au demonstrat
existena a dou structuri secundare
pentru lanurile polipeptidice:
-helix-ul
structura .

 -Helix

Pentru lanurile polipeptidice constituite din L--aminoacizi,

-helix-ul de dreapta
unghiurile de torsiune = -57o i = -47o,
pasul 5,4
fiecare elice este constituit din cte 3,6 resturi aminoacizi.

 -Helix
ntreruperea structurii secundare -helix
resturile glicil nu posed caten lateral
flexibilitate lanurilor polipeptidice
resturile de proliln structur planar, care nu permite
rsucirea elicoidal.
volumelor mari ale resturilor aminoacizilor (valin, izoleucin,
treonin) impedimentri sterice ntre elici adiacente
Resturile aminoacizilor alanin, leucin, acid glutamic i
metionin avantajeaz constituirea structurilor secundare helix.

Stabilizatori i destabilizatori ai
structurii secundare -helix
Aminoacizi
stabilizatori

Aminoacizi
destabilizatori

Ala, Leu, Glu, Met

Pro, Cys, Tyr, Ser

Lys, Phe, Gln, Trp

Ile, Val, Thr

 -foi pliate

 -foi pliate
fibrele de -keratin cu structur secundar helix sunt supuse la umezeal i cldura
se lungesc transform n structura secundar
-keratinic,
legturile de hidrogen intralan se rup
se constituie o structur zig-zag n care lanurile
polipeptidice adiacente interacioneaz prin
intermediul legturilor de hidrogen interlan

 -foi pliate paralele (-keratin)

 -foi pliate antiparalele (fibroina)

Structura tertiara
se caracterizeaz prin alternana de-a
lungul catenei polipeptidice a unor
segmente regulate rigide cu segmente
flexibile, aleator nfurate.
este stabilizat de interaciile radicalilor de
pe resturile de aminoacizi care pot fi:
hidrofobe, legturi de hidrogen, ionice,
covalente (de reticulare).

Structura tertiara
Orice protein posed o conformaie spaial
unic,
unic conferit de secvena proprie a
aminoacizilor
specificitatea funcional a macromoleculei
energie minim
stabilitate maxim

Structura tertiara

Structura tertiara

Structura tertiara

Agenti chaotropici (de denaturare)

pH
Temperatura
Saruri
Detergenti
Alcooli, acizi, baze
Radiatii

Seriile Hofmeister

Efect salting in
Efect salting out

Mioglobina
conine o grupare neproteic (hem) care
este legat de un lan polipeptidic constituit
din 153 resturi de aminoacizi.
Lanul polipeptidic este constituit din opt
zone -helix separate de zone neelicoidale
unde lanul i schimb direcia, ceea ce
face ca macromolecula s fie compact

Mioglobina
prezent n muchi ca transportor de
oxigen molecular
rezervor de oxigen n muchii mamiferelor
acvatice

Liganzii axiali sunt resturile histidil din

protein i oxigenul molecular

Structura teriar a mioglobinei

se aseamn cu cea a hemoglobinei (lanul
).

 n unele macromolecule proteice, se

constituie canale interioare formate din
resturi ale aminoacizilor ncrcai electric
sau puternic polare (canale ionice).

Structura cuaternara
protomeri (monomeri; subuniti)
oligomer.

 Protomerii individuali nu posed funciile

biologice specifice oligomerului.
Complementaritatea presupune specificitate
strict care induce posibilitatea de reglare a
activitii proteinelor (oligomerilor).

Proteinele oligomere
dimeri, tetrameri, hexameri, dependent de
numrul protomerilor
homodimeri, homotetrameri,
homohexameri
protomerii se aeaz simetric
ocupa poziii echivalente geometric
determin simetrii rotaionale

Proteina
Hexokinaza
Fosfataza alcalin
Creatinkinaza
Concanavalina A
LDH
Fosfofructokinaza
Piruvatdehidrogenaza
Piruvatkinaza
Aldolaza
Hemoglobina
Feritina

Numr protomeri
2
2
2
4
4
4
4

Funcia
Enzim

4
4
12
24

Enzim

Enzim
Enzim
Lectin
Enzim
Enzim
Enzim
Enzim
Transportor
Agent de stocare Fe

simetrie cilindric

Aranjarea simetrica a
protomerilor
simetrie helical

Hemoglobina
Hemoglobina uman a adultului este o protein
oligomer constituit din dou catene protomere
identice i dou catene protomere identice
Catene 1; 2; 1; 2
Interaciile hidrofobe sunt mai puternice ntre
catenele neidentice (1 2; 21; 2 2) dect
cele realizate ntre protomerii identici 12 sau
12 se obin dimeri de tipul

Hemoglobina

 Hemul este constituit din patru inele

pirolice reunite prin intermediul atomilor de
carbon , poziiile fiind corespunztor
substituite

Hemoglobina oxigenat
stabilizat de dou resturi histidil aflate
pe acelai lan polipeptidic

Hem
legturile simple alterneaz cu cele duble
se realizeaz o conjugare continu,
stabilitate maxim.
absorbia radiaiilor din spectrul vizibil,
(culoarea specific)

Adaptarea organismelor vertebratelor

presupune
legarea reversibil a oxigenului,
oxigenului
dependent de presiunea parial a
acestuia,
transportul cu ajutorul hemoglobinei
stocarea cu ajutorul mioglobinei.

 Forma redus a hemoglobinei

(deoxihemoglobin)
deoxihemoglobin este mai tensionat
dect forma oxigenat (oxihemoglobin).
oxihemoglobin

Mioglobina. Hemoglobina

Mioglobina
Ii desfoar activitatea la nivelul esuturilor musculare.
Se ncarc cu oxigen la valori mici ale presiunii pariale a
oxigenului (la 35-40 mmHg este total saturat).
La nivelul celulei musculare, presiunea parial a oxigenului fiind
mic, mioglobina descarc parial oxigenul, ncrcnd celula
muscular cu acest element.
Descrcarea mioglobinei de oxigen se realizeaz pn la un
grad de saturare de 40-60%, odat cu scderea presiunii
pariale la 15-20 mmHg. Forma curbei de saturare
corespunztoare este hiperbolic.
hiperbolic

Hemoglobina
Hemoglobina prezint o curb sigmoidal privind gradul de
saturare cu oxigen.
Ea asigur transportul oxigenului de la nivel pulmonar spre esuturi,
fierul din hemoglobin avnd capacitatea de a coordina att
molecula de O2, ct i molecule de CO2 (faciliteaz transportul
CO2 de la celule la plmn, n vederea eliminrii lui).
Curba sigmoidal a hemoglobinei indic faptul c aceasta are o
afinitate relativ mic pentru legarea primelor molecule de oxigen,
dar odat legate acestea, celelalte se vor lega mai uor. In
plmni, unde presiunea parial a oxigenului este mare (100
mmHg) i pH-ul relativ mare, hemoglobina tinde s devin
saturat cu oxigen (96%).
In esuturile periferice, unde presiunea parial a oxigenului este
mic i pH-ul sczut datorit CO2 format, hemoglobina va ceda o
parte din oxigenul transportat, pn la un grad de saturare de
60%.

Saturarea cu oxigen i eliberarea oxigenului de ctre

hemoglobin la nivelul plmnului, respectiv la nivelul
esutului, comparativ cu saturarea mioglobinei

Dioxidul de carbon
transportat de la nivelul esuturilor pentru
a fi eliminat, sub form de bicarbonat sau
sub form de carbaminoderivai ai
hemoglobinei (n
( urma interaciei dintre
CO2 i gruprile amino libere din globin
-15%)
Reacia (a) este catalizat de anhidraza
carbonic n ambele sensuri

Efectul Bohr
- Echilibrele realizate la nivelul celulelor
alveolare i al esuturilor periferice
- se desfoar n condiii fiziologice fr
modificarea esenial a pH-ului sngelui
datorit hemoglobinei deoxigenate (sistem
tampon)

Efectul Bohr

Influenta 2,3-difosfogliceratului
cel mai abundent fosfat organic din
hematii (concentraii sensibil echivalente
cu cele ale hemoglobinei)
se leag doar de deoxihemoglobin
stabilizarea configuraiei

Influenta 2,3-difosfogliceratului
are funcie reglatoare asupra hemoglobinei
umane, n concentraii normale de 4 mM din
eritrocite i chiar n concentraii de pn la 7 mM
din timpul efortului favorizeaza eliberarea

oxigenului la nivelul esuturilor.

Concentraiile crescute ale 2,3difosfogliceratului n celulele roii (hipoxie,

emfizem pulmonar obstructiv,
anemie cronic, altitudine) induc
scderea afinitii hemoglobinei fa
de oxigenul molecular

Methemoglobina. Metmioglobin.
nu prezint capacitate de transport a oxigenului
poate funciona ca o enzim cu activitate
asemntoare cu peroxidaza sau catalaza.
se comport asemntor monooxigenazelor
(citocrom P-450) reacii de oxigenare i
hidoxilare.
Eritrocitele conin methemoglobinreductaza,
methemoglobinreductaza

Formarea glucozilhemoglobinei
(HbA1C) n eritrocite
marker in diabet

Hemoglobina fetal (HbF)

tetramer - dou catene identice cu cele
din HbA i dou catene .
Catenele seamn cu cele din adult
n condiii fiziologice HbF prezint o mai
mare afinitate pentru oxigen dect HbA
faciliteaz transferul oxigenului din
circulaia matern n cea fetal prin
intermediul placentei.

Dinamica biosintezei catenelor polipeptidice

hemoglobinice n fetus i noul nscut

- biosinteza catenei prin mecanism de feed back fa

de catenele
HbF este treptat substituit cu HbA

Hemoglobinopatii
Producerea unor structuri anormale de
hemoglobine sau sinteza unor cantiti
insuficiente de hemoglobin normal
stri patologice

Methemoglobinemia

este o hemoglobinopatie n care hemoglobina normal din

eritrocite este substituit parial cu methemoglobin (HbM).
Cauze
- prezena excedentar de ageni oxidani (sulfonamide)
- scderea activitii methemoglobinreductazei.
Efecte
- este indus la nivelul esuturilor periferice hipoxia
policitemia (creterea numrului de eritrocite pentru
satisfacerea necesarului de oxigen).
- culoarea tegumentelor albstruie (cianoz)

Anemia falciform
O hemoglobinopatie rspndit n rndul
copiilor, datorat eritrocitelor secere
substituia n protomerul a unui rest de
Glu cu un rest de Val

Anemia falciform
scderea solubilitii HbS
polimerizarea deoxihemoglobinei
formarea unor precipitate care distorsioneaz
mecanic eritrocitele.
efectului de gelifiere in interiorul eritrocitelor,
eritrocitele se deformeaz iau forma unor seceri
capacitatea de liz membranar crete foarte mult
Celulele secere pot bloca fluxul sanguin n capilarele cu
diametru mic anoxia local.

Anemia falciform
Severitatea anemiei determinat de celulele secere
este mrit prin creterea concentraiei formei
deoxi a HbS prin:
- scderea presiunii pariale a oxigenului datorit
zborului la mari altitudini n incinte nepresurizate
sau datorit mersului la altitudine mare;
- scderea pH-ului;
- creterea concentraiei 2,3-difosfogliceratului;
- creterea concentraiei CO2.

Electromigrarea hemoglobinelor
(a) la indivizii normali;
(b) la indivizii cu anemie falciform
Heterozigoii care au HbS sunt mai puin susceptibili la unele forme de malarie
dect indivizii care au HbA

Talasemiile
hemoglobinopatii cauzate de biosinteza
deficitar a catenelor sau
scderea produciei de hemoglobin
normal
dezvoltarea unor boli hemolitice ereditare

Talasemiile
Biosinteza normal a catenelor i deficitar a
celor cauzeaz -talazemia
- excedentul de catene tetramerizeaz (4)
- constituie HbH precipita.
Biosinteza normal a catenelor i deficitar a
celor cauzeaz -talazemia
- catenele agregate tind s precipite
- induc moartea prematur a eritrocitelor.

Talasemiile
Boli cauzate de mutaii genetice variate:
-talazemiile sunt induse de deleia
genelor;
-talazemiile sunt induse de substituii ale
nucleotidelor n lanurile polinucleotidice.
-talazemiile sunt mai severe i se
materializeaz prin anemii puternice, care
necesit transfuzii sanguine.
sanguine

Hemoglobine anormale
Hemoglobina

Substituia

Situsul afectat

San Diego

109 (Val cu Met)

Crevas hem

Siracuza

143 (His cu Pro)

Contactul DP6

Denmark

95 (Pro cu Ala)

Contactul 1-2

Reiner

145 (Tyr cu Cys)

Captul C-terminal

Koln

98 (Val cu Met)

Contacte diverse

Humerscmidt

42 (Phe cu Ser)

Contacte diverse

Bristol

67 (Val cu Asp)

Legarea oxigenului

Philly

35 ( Tyr cu Phe)

Contactul 1-1

Bibba

136 ( Leu cu Pro)

Induce instabilitate

Savannah

24 ( Gly cu Val)

Contacte diverse

Hemoglobine anormale
Unii produi de degradare ai acestor
hemoglobine formeaz precipitate
granulare (corpi Heinz)
precipitatele sunt hidrofobic adsorbite pe
membrana eritrocitar
mrirea permeabilitatii
inducerea lizei membranare.
Afeciunile acestea sunt cunoscute sub
denumirea de anemii hemolitice