Horticultur

LUCRAREA NR. 1
PROCESE BIOFIZICE LA NIVEL CELULAR
Adsorbia i eluiunea
Adsorbia
Adsorbia este un fenomen de suprafa prin care are loc concentrarea particulelor
dispersate pe suprafaa de contact cu mediul de dispersie. Adsorbia se realizeaz sub
influena diferitelor fore de natur electrostatic i se exercit ntre particulele celor dou
faze ale sistemului de dispersie. Intensitatea adsorbiei depinde de suprafaa mediului
adsorbant i de natura moleculelor substanei adsorbite. S-a stabilit c un gram de celuloz
are o suprafa de un milion cm2, iar 100 molecule adsorb 4-5 milioane de molecule de ap.
Fenomenul de adsorbie este frecvent n celula vegetal la suprafaa particulelor
coloidale care au proprietatea de a fixa moleculele de ap i alte substane. Aceasta explic
hidratarea optim a protoplasmei, permeabilitatea membranelor plasmatice lipo-proteice i
mecanismul de ptrundere a diferitelor minerale prin plasmalema i tonoplastul celulei vii.
Experien. Adsorbia coloranilor pe crbune
Materiale necesare: crbune animal, soluie de fuxin 0,1% (se mai poate utiliza rou
de Congo sau albastru de metilen), eprubete, plnie, hrtie de filtru, ac spatulat.
Modul de lucru. ntr-o eprubet se introduc 3 ml soluie de colorant peste care se
adaug un vrf de ac spatulat de praf de crbune animal. Se agit, observndu-se c
amestecul se coloreaz n negru. Se filtreaz amestecul printr-un filtru umed, rezultnd un
filtrat incolor.
Interpretarea. Moleculele de colorant au fost adsorbite la suprafaa particulelor de
crbune animal.
Un fenomen similar de adsorbie are loc n sol. Complexul adsorbant, organic i
anorganic al solului, fixeaz ionii provenii din disocierea electrolitic srurilor minerale.
Durata experienei: 10 minute.
Eluiunea
Eluiunea este fenomenul de trecere a moleculelor din starea adsorbit n stare liber.
Experien. Fenomenul de eluiune
Materiale necesare: plnie cu amestec filtrat de fuxin (sau alt colorant) i crbune
animal, alcool etilic de 900, eprubete.
Modul de lucru. Plnia cu amestecul filtrat de fuxin sau alt colorant i crbune
animal se trece pe o alt eprubet i peste filtru se adaug alcool etilic. Se constat c n
eprubet se filtreaz un lichid colorat.
Interpretarea. Alcoolul etilic slbete forele de adsorbie a colorantului pe suprafaa
particulelor de crbune, iar moleculele de substan colorat se desprind de pe suprafaa
particulelor de crbune i sunt nlocuite cu molecule de alcool, cu o afinitate mai mare fa de
particulele de crbune. Fuxina liber trece prin porii filtrului i coloreaz filtratul.
n mod asemntor are loc eliberarea treptat a ionilor fixai pe particule coloidale ale
solului, ca urmare a activitii solubilizante exercitate de periorii radiculari ai plantelor sau
de microorganisme.
Difuziunea
Difuziunea este procesul fizic de ntreptrundere a moleculelor de la dou sau mai
multe lichide sau gaze miscibile, cu concentraii diferite, puse n contact direct. Difuziunea se
realizeaz datorit diferenelor de energie cinetic a moleculelor din mediile de contact.
Sensul difuziunii este de la faza mai concentrat spre cea mai diluat, iar difuziunea
continu pn la uniformizarea concentraiilor celor dou faze.
 Viteza de difuziune depinde de natura substanelor care difuzeaz (mrimea
moleculelor, concentraia soluiilor, vscozitatea mediului) i de unii factori externi (de
exemplu, temperatura).
Difuziunea este un fenomen care se manifest frecvent n materia vie, celular, fiind
implicat n procesul de absorbie a apei i ionilor minerali prin peretele celular i prin
membranele plasmatice.
Experien. Difuziunea cristaloidelor n ap
Materiale necesare: soluie de sulfat de cupru 20 %, ap distilat, eprubet, pipet.
Modul de lucru: ntr-o eprubet se introduc 5 ml ap. Cu o pipet se iau 3 ml de
CuSO4 20% i se introduce pipeta pn la fundul eprubetei. Se las soluia s curg ncet,
nlocuind treptat apa din fundul eprubetei, apoi se scoate pipeta nchis. Se observ c ntre
cele dou medii exist o linie de demarcaie distinct. Se las eprubeta n stativ timp de o or,
dup care se constat c linia de demarcaie dispare. Dup un timp mai ndelungat coninutul
eprubetei se uniformizeaz, rezultnd un amestec omogen.
Interpretarea. Moleculele soluiei concentrate de sulfat de cupru cu o energie cinetic
ridicat difuzeaz printre moleculele de ap. Sensul difuziunii este de la mediul cu o
concentraie mai mare spre mediul cu o concentraie mai mic uneori chiar n sens ascendent,
contrar legii gravitaiei universale, pn la egalizarea concentraiilor.
Durata experienei: 1 or.
Osmoza. Osmoza este procesul de ntreptrundere a moleculelor de la dou soluii
miscibile, de concentraii diferite, separate printr-o membran semipermeabil. Aceast
membran permite trecerea numai a solventului din soluie, nu i a substanei solvite.
Solventul difuzeaz prin membran, de la soluia mai diluat (hipotonic) spre soluia mai
concentrat (hipertonic), pn la egalizarea concentraiilor soluiilor de pe cele dou pri ale
membranei semipermeabile. Osmoza se datorete unei fore numit presiunea osmotic i
depinde de diferena de concentraie dintre cele dou soluii.
Experien. Obinerea unei membrane semipermeabile prin procedeul Traube
Principiu. O membran semipermeabil se poate realiza pe cale chimic prin
procedeul Traube, care se bazeaz pe urmtoarea reacie:
2CuSO4 + K4Fe (CN)6 = Cu2Fe (CN)2 + 2 K2SO4
Ferocianura de cupru constituie o membran de precipitare, strict semipermeabil.
Materiale necesare: soluie de ferocianur de potasiu 5 %, soluie de sulfat de cupru 5
%, cristale de ferocianur de potasiu, sulfat de cupru, sulfat de zinc, sulfat de aluminiu, azotat
de cobalt, clorur de cobalt, eprubete, cristalizor.
Modul de lucru: a). ntr-o eprubet se pun 10 ml soluie de sulfat de cupru la care se
adaug un cristal de ferocianur de potasiu. Se observ c la suprafaa cristalului apare o
pelicul de culoare brun de ferocianur cupric. Aceast pelicul de precipitare, de culoare
brun funcioneaz ca o membran semipermeabil. Ea las s ptrund numai apa, care
dizolv treptat cristalul i formeaz n interior o soluie concentrat de culoare galben. n
felul acesta se realizeaz membrana artificial Traube, strict semipermeabil.
Apa intr n interior printr-un curent de endosmoz, membrana sau "celula Traube" i
mrete volumul, ia forme diferite i crap. Cele dou soluii vin din nou n contact i
membrana se reface, procesul continund pn la uniformizarea concentraiilor.
b). ntr-o eprubet se pun 10 ml soluie de ferocianur de potasiu n care se introduce
un cristal de sulfat de cupru, suspendat cu o a. Rezultatul este acelai, respectiv formarea
membranei de precipitare semipermeabil de ferocianur cupric, ntr-un proces care
continu pn la consumarea cristalului.
c). ntr-un cristalizor cu soluie de ferocianur de potasiu se introduc, separat, cristale
de sulfat de cupru, sulfat de zinc, sulfat de nichel, azotat de cobalt, clorur de cobalt. n jurul
tuturor cristalelor se formeaz membrane de tip Traube, cu diferite forme i culori care dau
imaginea unei "grdini minerale" n miniatur.
Interpretarea. Prin toate procedeele utilizate s-au obinut membrane artificiale strict
semipermeabile de tipul celor folosite n osmometre, imitnd membranele plasmalema i
tonoplastul.
Durata experienei: 20 minute.

.
Horticultur
LUCRAREA NR. 2

PROCESE FIZIOLOGICE LA NIVEL CELULAR

SCHIMBUL DE AP DINTRE
CELULA VEGETAL I MEDIUL EXTERN
CELULA VEGETAL CA SISTEM OSMOTIC
n dependen de concentraia soluiei din mediul extern (hipotonic, hipertonic,
izotonic) fa de concentraia sucului vacuolar, ntre celula vegetal i soluia extern are loc
un curent de ap realizat prin procese de endosmoz i exosmoz. Prin aceste procese, celula
realizeaz strile de turgescen, plasmoliz i deplasmoliz.
Turgescena i plasmoliza
Turgescena este starea fiziologic normal a celulelor vegetale saturate cu ap.
Acest stare se realizeaz prin schimburile permanente de ap dintre celule i mediul exterior
n fenomene osmotice cu sens endosmotic. Manifestarea fenomenului de osmoz la nivelul
celulei este explicat de analogia dintre celula vegetal i osmonetrul Pfeffer; peretele celular
permeabil este similar vasului poros, citoplasma i, n special, membranele plasmatice
(plasmalema i tonoplastul) au rol de membran semipermeabil, iar sucul vacuolar
corespunde soluiei din interiorul osmometrului.
Schimburile osmotice la nivelul celulei sunt puse n eviden i prin fenomenele de
plasmoliz i deplasmoliz.
Plasmoliza este un fenomen citofiziologic de ieire treptat a apei din celul, n
special vacuol, atunci cnd esutul este pus ntr-o soluie extern hipertonic (mai
concentrat).
Prin contractarea i reducerea volumului protoplasmei are loc desprinderea
plasmalemei de peretele celulozic. Plasmoliza se desfoar n trei faze: incipient, concav
i convex.
Experien. Observarea turgescenei i a plasmolizei celulare
Aparate: microscop
Materiale necesare: bulb de ceap roie, lame, lamele, baghete, ac spatulat, brici,
bisturiu, soluii de azotat de potasiu sau zaharoz 1 M, hrtie sugativ.
Modul de lucru: Se execut o seciune prin epiderma inferioar, colorat a frunzei
bulbului de ceap roie care se aeaz pe o lam ntr-o pictur de ap distilat. Preparatul se
acoper cu lamela i se examineaz la microscop cu obiectivul mic. Se observ aspectul
normal al celulelor turgescente, cu peretele celulozic subire, strat subire de citoplasm i
vacuol central mare cu suc vacuolar colorat n rou-violet, datorit prezenei antocianilor.
Pentru a produce plasmoliza se aeaz de o parte a lamelei o fie de sugativ, iar
concomitent, pe partea opus, se picur cu bagheta soluie concentrat de azotat de potasiu
sau zaharoz. La microscop se constat c protoplasma i micoreaz volumul, concentraia
sucului vacuolar crete, iar plasmalema se desprinde treptat de peretele celulozic, avnd loc
fenomenul de plasmoliz.
Desprinderea plasmalemei se realizeaz mai nti la colurile peretelui celular
(plasmoliz incipient), apoi parial, de-a lungul peretelui (plasmoliz concav) i n final
plasmalema se desprinde complet de peretele celular, iar protoplasma ia o form eliptic sau
sferic (plasmoliz convex).
 Interpretarea. n soluia extern hipertonic, datorit fenomenului de exosmoz, are
loc ieirea apei din celul, respectiv din vacuol, ceea ce produce modificri n starea
fiziologic a celulei prin plasmolizare treptat funcie de diferena de concentraie dintre
mediul extern i sucul vacuolar.
Durata experienei: 15 minute
Experien. Deplasmoliza
Principiu. Deplasmoliza este fenomenul invers plasmolizei, de intrare a apei n
celulele plasmolizate atunci cnd esutul vegetal revine ntr-o soluie extern hipotonic (mai
diluat).
Materiale necesare: aceleai ca la experiena anterioar.
Modul de lucru. La preparatul cu celule plasmolizate se pune o fie de sugativ pe o
latur a lamelei, iar pe cealalt parte se picur cu bagheta ap distilat, care va nlocui soluia
concentrat de azotat de potasiu sau de zaharoz. La microscop se constat c volumul
vacuolei se mrete concentraia sucului scade, iar plasmalema se alipete din nou de peretele
celulozic. Fenomenul care se realizeaz este deplasmoliza.Celulele revin, n final la aspectul
normal, de turgescen.
Interpretarea. n soluia hipotonic, datorit fenomenului de endosmoz, are loc
intrarea apei n celule i revenirea acestora la starea de hidratare. Ptrunderea apei n vacuole
continu pn cnd celulele ajung la starea de turgescen, care const n hidratarea maxim.
Plasmoliza i deplasmoliza sunt caracteristice numai celulelor vegetale vii, deoarece
numai la acestea membranele plasmatice prezint proprieti de semipermeabilitate. La
esutul vegetal mort, ngheat sau nclzit la fierbere, cu protoplasm denaturat i cu
membrane plasmatice care i-au pierdut semipermeabilitatea, celulele nu mai prezint
fenomenele de plasmoliz - deplasmoliz.
n natur, fenomenul de plasmoliz n celula vegetal are loc sub aciunea unor factori
externi nefavorabili, mai ales la nivelul sistemului radicular (seceta pedologic, srturarea
solului, temperaturi excesive, prezena unor substane toxice).
Potenialul osmotic celular
Fora osmotic a celulei, numit i potenialul osmotic celular, depinde de
concentraia sucului vacuolar contribuind, n mare msur, la absorbia apei de ctre celula
vegetal. Cu ct celula este mai puin saturat n ap, ajungnd pn la starea de plasmoliz,
cu att fora ei osmotic va fi mai mare.
Determinarea valorii presiunii osmoticea celulei nu poate fi fcut direct, cu ajutorul
osmometrului i de aceea se folosesc metode indirecte (fiziologice i fizice).
a). Metode fiziologice
Experien. Substane osmotic active i inactive
Principiu. Anumite substane uor solubile n ap, cu molecule mici, care formeaz
soluii adevrate sunt active din punct de vedere osmotic. Alte substane greu solubile n ap
sau insolubile, cu molecule mari, care formeaz soluii coloidale, sunt inactive din punct de
vedere osmotic.
Materiale necesare: rdcin de sfecl roie sau morcov, bisturiu, spatul, substane
osmotic active (organice: zaharoz, glucoz, fructoz, acid citric; minerale: clorur de sodiu,
clorur de potasiu, azotat de potasiu), substane osmotic inactive (amidon).
Modul de lucru. Se folosesc cuburi tiate din rdcina tuberizat de sfecl roie sau
morcov, cu latura de 3 cm. Cu ajutorul unui bisturiu se face cte o excavaie n fiecare cub.
La cteva cuburi se introduc n excavaii substane osmotic active (zaharoz, glucoz, clorur
de sodiu, azotat de potasiu), iar la un cub se introduce n excavaie amidon, ca substan
osmotic inactiv. Cuburile se aeaz pe o plac de sticl i se acoper cu un clopot de sticl.
Dup 24 ore se constat c toate cuburile n care s-au pus substane osmotic active au devenit
flasce n timp ce cubul la care s-a pus amidon i-a pstrat turgescena.
 Interpretarea. Substanele osmotic active, prin dizolvare n ap din esuturi, devin
soluii hipertonice fa de concentraia sucului celular i determin ieirea apei din celule prin
exosmoz. Astfel esutul devine treptat flasc. n schimb, amidonul - substa osmotic inactiv
- nefiind solubil n ap, nu determin ieirea apei din celule prin exosmoz i, ca urmare,
esutul i pstreaz turgescena.
Durata experienei: 24 ore, iar pentru observare, 3 minute.

Forta de suciune celular

Fora de suciune celular este fora activ care determin ptrunderea apei n
celulele plantelor, ca rezultant a tuturor factorilor osmotici i de turgescen. Se exprim prin
formula:
FS = (PO + PI) - PT, unde;
FS = fora de suciune;
PO = presiunea osmotic;
PI = presiunea de imbibiie;
PT = presiunea de turgescen.
Presiunea de imbibiie (PI) se exercit n deosebi la celulele tinere i celulele
puternic plasmolizate, la care coloizii macromoleculari plasmatici au un grad avansat de
deshidratare. La celulele mature, cu vacuol mare i citoplasm resorbit, valoare presiunii de
imbibiie tinde ctre zero, iar formula forei de suciune devine:
FS = PO PT
Experien. Determinarea forei de suciune celular prin metoda fiziologic E.
Pringsheim
Principiu. Metoda const n gsirea unei soluii izotonice sucului celular care, datorit
lipsei schimburilor osmotice, nu modific dimensiunile unor segmente de esut vegetal aflate
n anumit timp n soluia respectiv.
Aparate: microscop.
Materiale necesare: tuberculi de cartof, 6 eprubete, perforator, rigl gradat, soluii
de NaCl de diferite molariti (0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1 M).
Modul de lucru. n 5 eprubete se toarn cte 10 ml soluii de NaCl de diferite
concentraii, iar n a 6-a se toarn H2O. Cu ajutorul unui perforator se scot 6 segmente
cilindrice din parenchimul unui tubercul de cartof, toate de aceeai lungime (de exemplu 40
mm). n fiecare eprubet se introduce cte un segment cilindric. Dup 45 minute se scot
segmentele din soluii i se msoar din nou, constantndu-se c lungimea esutului vegetal se
modific (crete sau scade). ntr-o anumit soluie lungimea segmentului vegetal rmne
nemodificat.
Interpretarea. Soluiile de NaCl de diferite concentraii realizeaz schimburi osmotice
cu sucul celular al esutului vegetal. n cazul soluiilor hipertonice, datorit fenomenului de
exosmoz, lungimea esutului scade, iar n cazul soluiilor hipotonice, datorit fenomenului
de endosmoz, lungimea esutului crete. Soluia izotonic cu sucul celular va fi aceea n
care, datorit lipsei schimburilor osmotice, lungimea esutului rmne nemodificat.
Exemplu: dac lungimea materialului vegetal nu se modific n soluia de 0,4 M
NaCl, aceasta reprezint soluia izotonic sucului celular. Valoare forei de suciune se
calculeaz prin raportarea presiunii osmotice a soluiei molare de NaCl la cea a soluiei
izotonice:
1 M NaCl.33,61 atmosfere
0,4 M NaCl.X atmosfere
----------------------------------------------
X = 33,61 x 0,4 = 13,44 atmosfere
 n mod similar se poate lucra cu fii din limbul frunzelor, att la speciile
monocotiledonate ct i la cele dicotiledonate.
Durata experienei: 60 minute.
Horticultur

LUCRAREA NR. 3
REGIMUL DE APA AL PLANTELOR
Absorbtia apei n plante
Absorbia radicular a apei
Absorbia radicular este procesul de preluare a apei din mediul extern prin perii
absorbani, transportul curentului de ap prin celulele parenchimului cortical al rdcinii pn
la vasele conductoare de lemn din cilindrul central. Ptrunderea apei n celulele absorbante
ale rdcinii se realizeaz pe principiul schimburilor osmotice care au loc ntre plante i
soluia solului, funcie de diferena de concentraie dintre cele dou medii.
Experien. Determinarea absorbiei radiculare a apei cu potometrul Vesque
Dispozitive: potometru format dintr-un rezervor pentru ap n form de U, plnie cu
robinet i tub lateral gradat.
Materiale necesare: dopuri de cauciuc i buta nrdcinat de salcie.
Modul de lucru. ntr-un orificiu al potometrului (denumire de la grec. potos = a bea)
se introduce un dop de cauciuc cu planta sau butaul nrdcinat, iar prin cellalt orificiu se
toarn ap fiart i rcit. Se fixeaz cel de al doilea dop prin care trece tubul gradat cu plnia
de separare, plin cu ap. Se d drumul la robinet pentru a umple potometrul i tubul lateral
gradat pn la un anumit nivel care se noteaz. Dup o or de observaie, coloana de ap se
retrage pn la un nivel care se noteaz.
Interpretarea. Cantitatea de ap absorbit de rdcini, pe unitatea de timp, se
calculeaz funcie de distana dintre nivelele marcate, de diametrul interior al tubului capilar
sau de gradaia existent pe tub. Durata experienei: 60 minute.
Experien. Punerea n eviden a zonei de absorbie radicular
Aparate: microscop
Materiale necesare: pahar Berzelius, soluie de rou netru sau albastru de metilen
0,1%, lam, lamel, plantule de porumb sau de gru.
Modul de lucru: Plantule de porumb sau de gru, cu sistem radicular intact se
introduc cu rdcinile n pahare Berzelius care conin soluii diluate de rou neutru sau
albastru de metilen. Dup o or se spal rdcinile cu ap. Macroscopic, se observ colorarea
rdcinilor numai n zona perilor absorbani i, mai puin, n zona aspr. Se fac seciuni
longitudinale prin rdcin n zona pilifer. Una din seciuni se aeaz cu partea secionat pe
lam, iar cealalt cu partea secionat n sus. Prin observarea la microscop cu obiectivul mic
se poate constata aspectul de psl al perilor absorbani n jurul rdcinii, structura intern a
acestora i zona de ptrundere n rdcin a coloranilor absorbii din soluie.
Interpretarea. Experiena demonstreaz c absorbia apei de ctre rdcinile plantelor
este localizat n zona pilifer i numai parial n zona aspr, unde suberul izoleaz esuturile
externe ale rdcinii. Absorbia nu are loc prin zona neted i piloriz; n aceste zone lipsesc
esuturile conductoare de transport al apei. Durata experienei: 60 minute.
Experien. Influena concentraiei soluiei externe asupra absorbiei apei prin
rdcini
Principiu. Absorbia radicular a apei este un proces de osmoz creat ntre sucul
vacuolar al perilor absorbani i soluia solului. Sensul curentului osmotic (endosmoz sau
exosmoz) este dependent concentraiilor celor dou medii lichide, respeciv de presiunile
osmotice exercitate.
Materiale necesare: plantule de mazre, fasole sau porumb, soluie de NaCl 25%,
eprubete.
 Modul de lucru. Plantule cu periorii absorbani intaci se introduc cu rdcinile n
dou eprubete, dintre care una plin cu ap, iar cealalt plin cu soluie concentrat de NaCl.
Se urmrete ca smna s fie fixat la deschiderea eprubetei, deasupra mediului lichid.
Dup 30-45 minute se constat c plantele care au stat cu rdcinile n ap i pstreaz
turgescena, n timp ce plantele puse n soluie de NaCl se ofilesc, iar rdcinile devin flasce.
Interpretarea. Experiena demonstreaz c n ap mediul extern a fost hipotonic fa
de sucul vacuolar ceea ce a permis o absorbie normal prin rdcin, ca urmare a unui curent
permanent de endosmoz. Soluia extern de NaCl a fost mai concentrat, hipertonic fa de
sucul vacuolar al celulelor absorbante, determinnd un curent de exosmoz. n aceste condiii
perii nu pot absorbi apa din mediul extern ci din contra, cedeaz i apa proprie, plasmoliznd.
De aici rezult c absorbia radicular a apei pe principiul osmotic are loc numai atunci cnd
soluia solului este hipotonic fa de sucul vacuolar al perilor absorbani. Durata
experienei: 45 minute.
Circulatia apei in plante
Apa absorbit din sol prin rdcini este transportat spre toate organele aeriene ale
plantei printr-un esut conductor specializat, care este esutul conductor lemnos.
Calea de circulaie (transport) a apei n plante
Corespunztor cu evoluia speciilor din regnul vegetal s-a difereniat treptat, n corpul
plantelor, un sistem conductor specializat, n continu perfecionare anatomic i funcional
cu rol n asigurarea circulaiei apei de la nivelul rdcinii spre organele aeriene.
Experien. Metoda O.F. Curtis pentru stabilirea cii de circulaie a apei prin
decorticarea esuturilor
Materiale necesare: ramuri de soc, bisturiu, pahar Berzelius.
Modul de lucru. Se aleg 5 butai de soc (fragmente dintr-o ramur care s posede n
partea superioar un nod cu muguri sau frunzulie). La captul inferior se decortic cei 5
butai n modul urmtor:
- butaul 1 se las cu esuturile intacte (control);
- " 2 se ndeprteaz scoara i liberul pe lungimea de 5 cm de la baz;
- " 3 se scoate mduva pe aceeai lungime de la baz;
- " 4 se ndeprteaz, scoara, liberul i mduva pe aceeai lungime;
- " 5 se fac crestturi adnci pn la mduv, n spiral, pe 5 cm de la baz.
Butaii astfel decorticai se introduc ntr-un pahar Berzelius cu ap de robinet, ntr-un
strat de 2-3 cm, sub limita maxim la care s-au fcut decorticrile. Dup 3-5 zile, cu condiii
optime pentru vegetaie, se constat formarea de noi frunze la butaii 1-4 la care nu s-a
ntrerupt continuitatea vaselor lemnoase, n timp ce la butaul 5, cu lemnul complet ntrerupt
mugurii se ofilesc
Interpretarea. Experiena demonstreaz c circulaia apei, respective a sevei brute pe
verticala plantelor se face numai prin vasele conductoare lemnoase (xilem).
Durata experienei: 3-5 zile.
Experien. Metoda soluiilor colorate
Aparate: microscop.
Materiale necesare: soluii diluate de colorant (eozin, fuxin 0,1%), brici, lam,
lamel, ramuri de Impatians, Pelargonium, Tilia.
Modul de lucru. ntr-o soluie diluat de colorant se introduc ramuri de la diferite
plante. Dup 60 minute se scoate materialul biologic din soluia colorat i se fac seciuni
transversale la baza ramurilor. Prin examinrea la microscop ntr-o pictur de ap se constat
colorarea n rou numai la nivelul pereilor vaselor lemnoase.
Interpretarea. Experiena demonstreaz c circulaia ascendent a apei, respectiv a
sevei brute are loc prin lumenul vaselor conductoare lemnoase.
Durata experienei: 60 minute.
 LUCRAREA NR. 5
Experien. Metoda aerului aspirat
Principiu. Metoda determin vaporii de ap eliminai prin transpiraie dintr-un curent
de aer. Vaporii de ap sunt fixai pe o substan higroscopic, iar prin cntrire se determin
diferena de greutate a substanei higroscopice folosite.
Dispozitive: instalaie special alctuit din 3 pri componente; camer transparent
de transpiraie, tuburi de sticl n form de U i pomp de vid.
Materiale necesare: clorur de calciu deshidratat, tuburi de cauciuc, cleme, plant cu
frunze intacte.
Modul de lucru. n camera de transpiraie se introduce ramura unei plante cu ct mai
multe frunze. Se pune CaCl2 deshidratat, ntr-un tub n form de U i se cntrete la balana
tehnic, cu robinetele nchise. Se face legtura dintre cele 3 pri ale instalaiei prin
intermediul tuburilor de cauciuc. n paralel se monteaz o instalaie identic, dar fr frunze
n camera de transpiraie, cu care se determin cantitatea de vapori de ap existeni n
atmosfera nconjurtoare. Se pun instalaiile n stare de funcionare concomitent,
deschizndu-se robinetele i clemele.
n intervalul de 30 minute apa curge prin pompa de vid i creeaz un vid parial n
interiorul instalaiei care determin aspirarea unui curent de aer din mediul extern. Vaporii de
ap din atmosfer (n cazul ambelor instalaii) i cei provenii din transpiraie (n cazul
instalaiei cu plant) se fixeaz pe CaCl2 din tuburile n form de U. Dup o jumtate de or
se ntrerupe funcionarea instalaiilor i se recntresc ambele tuburi cu CaCl2.
Interpretarea. Pentru calcularea apei provenite din transpiraie se noteaz:
A = greutatea iniial a tubului cu CaCl2 de la instalaia cu plant;
B = greuatea final a tubului de la aceiai instalaie;
C = greutatea inial a tubului de la instalaia fr plant;
D = greuatea final a tubului de la instalaia control.
Cantitatea de vapori provenii din transpiraie rezult din relaia:
T = (B-A) - (D-C)

Intensitatea transpiraiei se calculeaz din formula:

T x 60
It (mg vapori de ap/h/cm2, dm2) =
txS
n care: 60 = numrul de minute dintr-o or;
t = timpul de lucru n minute;
S = suprafaa foliar n cm2 sau dm2.
Durata experienei: 30 minute.

Metode de studiere a nutriiei minerale

Studierea nutriiei minerale a plantelor se face prin metode analitice, sintetice
(fiziologice) i agronomice.
Metodele analitice identific elementele minerale din esuturile vegetale, fr a
studia rolul fiziologic al acestora.
Identificarea calitativ a elementelor minerale se poate face prin metode histochimice,
microcristalografice i analize chimice din cenu.
4.1. Metode histochimice i microcristalografice pentru identificarea unor
elemente minerale
 Metoda histochimic permite identificarea direct a unui element n esutul vegetal, ca
urmare a reaciilor chimice caracteristice elementului respectiv.
Metoda microcristalografic permite identificarea elementelor minerale sub form de
cristale specifice, care se observ la microscop.

4.1.1. Identificarea anionilor din esutul vegetal

Experien. Identificarea azotului nitric (NO-3)

Materiale necesare: plante cu coninut diferit de nitrai (Urtica, Tradescantia,
Pelargonium), sticl de ceas, soluie de difenilamin 0,2% n H2SO4 concentrat (d = 1,84).
Modul de lucru. Seciunile prin tulpini sunt tratate cu picturi din soluia de
difenilamin. Se constat apariia instantanee a coloraiei albastru intens (fig. 45).
Interpretarea. n prezena nitrailor din esuturi, difenilamina (incolor) se oxideaz i
trece n tetrafenilhidrazin (de culoare albastr).
2C6H5 - NH - C6H5 + 1/2 O2------ (C6H5)4N2 + H2O
difenilamin tetrafenilhidrazin
Intensitatea coloraiei n albastru depinde de coninutul de anioni NO -3. Treptat,
culoarea albastr trece n negru, datorit acidului sulfuric din compoziia reactivului, care
carbonizeaz esuturile.
! Acest test colorimetric se mai poate aplica la determinarea azotului nitric din peiolul
de castravei, morcov, mazre, pepene galben, sfecl, elin, tomate i vi de vie, precum i
din limbul frunzelor mature de ridichi.
Durata experienei: 10 minute.

Experien. Identificarea azotului amidic

Aparate: microscop.
Materiale necesare: alcool etilic absolut, brici, lam de microscop, lamel, baghet
de sticl, plantule etiolate de lupin.
Modul de lucru. Din axa hipocotil a unor plantule etiolate de lupin, lungi de 10-12
cm, se taie segmente de 1-2 cm, care se secioneaz longitudinal sau transversal. Se pun
seciunile pe lam, se zdrobesc uor prin apsare cu bagheta i se trateaz cu cteva picturi
de alcool etilic absolut. Dup evaporarea alcoolului, se examineaz la microscop. n celule i
la marginea seciunilor, se constat prezena unor cristale incolore, cu forme caracteristice
(rombice, dreptunghiulare).
Interpretarea. Cristalele rezultate reprezint asparagina, amida acidului asparagic
(CONH2 - CH2 - CHNH2 - COOH), care se acumuleaz n cantiti mari n plantulele de
leguminoase, ndeosebi n cele de lupin. Acestea conin circa 20 % asparagin din greutatea
uscat. Durata experienei: 15 minute.
4.1.2. Identificarea cationilor n esuturi

Experiena. Identificarea calciului (Ca2+)

Aparate: microscop.
Materiale necesare: lam de microscop, lamel, brici, hrtie de filtru, soluie de acid
sulfuric 70%, plante de Begonia, Tradescantia sau Primula.
Modul de lucru. Seciuni transversale prin peiolul frunzei de Begonia sau Primula se
pun pe lama de microscop ntr-o pictur de ap, se aeaz lamela i se examineaz la
microscop. n celulele parenchimatice se observ prezena oxalatului de calciu sub form de
cristale incolore, lungi, izolate sau grupate n mnunchiuri numite rafide sau macle (fig.46
c,d).
Aceeai determinare se poate face ntr-un fragment din limbul frunzei de Tradescatia,
care se zdrobete pe lama de microscop cu o baghet. La sucul obinut se adaug o pictur
de ap, dup care se examineaz la microscop. Pe o latur a lamelei ndeprteaz apa cu
hrtie de filtru (sugativ), iar pe latura opus se pun cteva picturi de soluie de acid sulfuric
70%. La microscop se observ cristale aciculare de sulfat de calciu (fig. 46 b).
Interpretarea. n sucul celular, ndeosebi la nivelul vacuolelor, cationul Ca2+ intr n
combinaii organice formnd oxalai, malai, tartrai. Prin adugare de acid sulfuric, rezult
sulfat de calciu n forme specifice cristalizate, cu eliberare de acid oxalic:
COO COOH
Ca + H2SO4 CaSO4 + COOH
COO acid oxalic
Durata experienei: 30 minute

Experiena. Identificarea fierului (Fe2+)

Aparate: microscop
Materiale necesare: vase Petri, spatul de sticl sau penset cu vrf de os, lam de
microscop, soluie de ferocianur de potasiu 5%, soluie de acid clorhidric 10%, semine de
mutar mbibate n ap timp de 3-5 ore.
Modul de lucru. La seminele negerminate de mutar (Sinapis alba) care au fost
mbibate n ap, se scot cotiledoanele cu ajutorul unei spatule din sticl sau penset cu vrf
din os, evitndu-se penseta metalic pentru a nu permite contactul seminelor cu fierul.
Cotiledoanele se pun ntr-un vas Petri, se trateaz cu soluie de ferocianur de potasiu
i se las timp de 2-4 ore. Se trec apoi n alt vas Petri, care conine soluie de HCl 10%. Dup
10-15 minute, se observ c acestea se coloreaz n albastru. Se scot cotiledoanele din HCl,
se spal cu ap i se pun pe lama de microscop. La microscop se constat c reeaua de
nervuri este colorate n albastru (fig. 47).
Interpretarea. Datorit prezenei fierului, n nervurile cotiledoanelor se formeaz
albastrul de Berlin, ca urmare a reaciei de precipitare a fierului. Reacia nu are loc la semine
germinate, deoarece n procesul germinrii cationul Fe2+ intr n diferite combinaii organice.
Durata experienei: 4 ore
Horticultur
LUCRAREA NR. 6
FOTOSINTEZA
Fotosinteza constituie procesul fiziologic de sintez a substanelor organice din
substane minerale, cu ajutorul pigmenilor fotosintetici i a energiei luminoase, cu eliberare
de oxigen.
CO2 + H2O + sruri minerale substane organice+ O2
Fotosinteza este unul dintre cele mai importante i complexe fenomene din natur, de
care depinde nssi existena vieii pe planeta Pmnt.
Pigmenii fotosintetici (asimilatori)
Fotosinteza are loc n celulele organelor verzi expuse la lumin. Acestea conin n
cloroplaste, un complex de pigmeni fotosintetici (asimilatori): pigmenii clorofilieni verzi
(clorofila a i clorofila b) i pigmenii carotenoizi galbeni (carotina i xantofila).
Extragerea pigmenilor fotosintetici
Experien. Metoda extragerii pigmenilor fotosintetici n solveni organici.
Principiu. Pigmenii fotosintetici din cloroplaste sunt insolubili n ap. Extragerea lor
se face prin solubilizarea, la rece sau la cald, n diferii solveni organici (aceton, alcool
etilic, alcool metilic, alcool butilic, cloroform), obinndu-se soluia brut de pigmeni.
Dispozitive: balan tehnic.
Materiale necesare: frunze proaspete sau uscate de la diferite specii de plante (n
special urzic), mojar cu pistil, flacon Erlenmayer, plnie de sticl, cilindru gradat, hrtie de
filtru, alcool etilic 90%.
Modul de lucru. Se cntresc 5 grame de frunze proaspete sau 2 grame de frunze
uscate i se mojareaz adugndu-se 1-2 picturi de ap, cu rol de desfacere a pigmenilor de
pe substratul proteic. Se adaug 25 ml alcool etilic, fracionat n 2-3 reprize, mojarnd n
continuare. Dup omogenizare se filtreaz amestecul printr-o hrtie de filtru uscat.
Pentru determinrile cantitative se utilizeaz o pomp de vid care extrage ntreaga
cantitate de pigmeni, iar esutul rmne incolor.
Interpretarea. Prin distrugerea integritii celulelor, solventul organic solubilizeaz si
extrage pigmenii din cloroplaste. Prin filtrare se obine extractul alcoolic de pigmeni, numit
si soluie brut de clorofil.
n afar de extragerea la rece, se poate face i extragerea la cald, prin fierberea
frunzelor n alcool etilic 900, la flacr mic ntr-un balon Erlenmayer prevzut cu refrigerent.
n acest mod extragerea pigmenilor se face total, pn la decolorarea frunzelor.
Durata experienei: 20 minute.
Separarea pigmenilor fotosintetici.
Separarea calitativ i cantitativ a pigmenilor fotosintetici din frunze se bazeaz pe
gradul diferit de solubilitate n anumii solveni organici, i pe gradul diferit de adsorbie a
pigmenilor pe hrtie de filtru sau pe unele materiale inerte, insolubile n solveni organici.
A) Metode bazate pe solubilitatea difereniat a pigmenilor n solveni organici.
Experien. Metoda Sorby Krauss.
Principiu Metoda const n separarea pigmenilor din soluia alcoolic de pigmeni pe
baza solubilitatii difereniate n alcool i benzin .
Materiale necesare: extract alcoolic de pigmeni, eprubet, pipete, benzin.
Modul de lucru. ntr-o eprubet se toarn 3 ml soluie alcoolic de pigmeni i se
adaug 5 ml benzin. Dup agitare puternic, amestecul se las n repaus pe un stativ. Se
constat separarea a dou straturi distincte: stratul superior de culoare verde, conine clorofila
a i b i carotina n benzin, iar stratul inferior de culoare galben-verzuie conine xantofila n
acool. Pentru a favoriza separarea celor dou straturi se vor aduga 1-2 picturi de ap care
dilueaza alcoolul i reduce miscibilitatea cu benzina.
Interpretarea. Separarea xantofilei de ceilali pigmeni din extractul alcoolic a fost
posibil pe baza solvirii diferentiate a componentelor n alcool sau n benzin.
Durata experienei: 15 minute.
Experien. Metoda K.A. Timireazev de separare a pigmenilor carotenoizi de cei
clorofilieni.
Principiu Metoda const n separarea pigmenilor verzi de cei galbeni din extractul
alcoolic de pigmeni pe baza saponificrii ireversibile a clorofilelor.
Materiale necesare: extract alcoolic de pigmeni, eprubete, plnie de sticl, hrtie de
filtru, alcool etilic, soluie de hidroxid de bariu N/10.
Modul de lucru. ntr-o eprubet se toarn 5 ml extract alcoolic de pigmeni i 5 ml
soluie de Ba(OH)2 N/10. Se las amestecul pe stativ 30 minute, agitnd la anumite intervale,
apoi se filtreaz. Pe hrtia de filtru rmn toi pigmenii, care au precipitat n prezena
Ba(OH)2, clorofila trecnd n stare saponificat. Plnia cu filtru se trece pe o alt eprubet i
se toarn 3 ml alcool etilic cu care se spal precipitatul. n prezena alcoolului sunt
solubilizai pigmenii carotenoizi; pigmenii clorofilieni rmn n stare ireversibil de
precipitat, sub form de sruri de Ba ale acizilor clorofilinici a i b(clorofil saponificat). n
filtratul de culoare galben trec carotina i xantofila dizolvate n alcool. Se adauga 5 ml de
benzin i se agit puternic. Dup 1-2 minute se separ dou straturi distincte: stratul superior
de benzin, de culoare galben-portocalie conine carotina, iar stratul inferior de alcool, de
culoare galben-verzuie conine xantofila.
Interpretarea. n prezena hidroxidului de bariu are loc precipitarea ireversibil a
pigmenilor clorofilieni n procesul de saponificare, ceea ce permite separarea pigmenilor
carotenoizi (carotina i xantofila), funcie de solvirea lor difereniat n alcool i benzin.
Durata experienei: 45 minute.
B. Metode bazate pe absorbia diferit a pigmenilor pe medii inerte.
Experient. Metoda cromatografiei pe hrtie.
Principiul: Metoda const n separarea pigmenilor din extractul alcoolic pe baza
adsorbiei difereniate pe hrtia cromatografic, sub aciunea unui amestec dizolvant.
Materiale necesare: vas cilindric de cromatografie, amestec dizolvant din solveni
organici (30 pri benzin + o parte aceton + 0,3 pri alcool metilic), extract alcoolic de
pigmeni, pipet gradat sau baghet, hrtie cromatografic tip Whatmann sau Schleicher-
Schull.
Modul de lucru. Se taie fii de hrtie cromatografic cu lungimi de 25 cm i limi
de
3 cm, iar la unul din capete se taie sub form de unghi ascuit pe care se traseaz cu creionul
o linie transversal la 3 cm de vrful fiei. Pe aceast linie, care constituie zona de start, se
picur cu o pipet gradat cu vrf fin sau cu o baghet, cantitatea de 1 ml extract alcoolic de
pigmeni n picturi succesive, astfel ca limea spotului (petei) s nu depeasc 1 cm. Dup
depunerea ntregii cantitii de soluie pe linia de start i evaporarea solventului se introduce
cromatograma ntr-un vas cilindric de cromatografie ce conine un strat de 2-3 cm din
amestecul dizolvant (benzin + aceton + alcool metilic). Se nchide vasul de cromatografie
fixnd cromatograma n poziie vertical i se las n repaus timp de 30 minute. Prin
nchiderea cilindrului, n interior se formeaz o atmosfer saturat n vaporii solvenilor
organici din amestecul dizolvant. Treptat se constat c solventul din vas migreaz n sens
ascendent, antrennd pigmenii fotosintetici. Acetia sunt separai pe hrtia cromatografic,
funcie de gradul diferit de adsorbie pe moleculele de celuloz. Benzile de adsorbie
observate de jos n sus prezint urmtorii pigmeni: clorofila b de culoare verde-glbuie,
clorofila a de culoare verde-albstruie, xantofila de culoare galben-verzuie i carotina de
culoare galben-portocalie.
Interpretarea. Adsorbia difereniat pe hrtia cromatografic, sub aciunea unui
solvent organic d posibilitatea separrii n benzi distincte a pigmenilor din extractul alcoolic
brut pe baza diferenei de Rf ( run front - front de fug), care reprezint distana parcurs de
fiecare component al amestecului, de la linia de start. Durata experienei: 45 minute.