1.

GENETICA MEDICAL
I IMPORTANA SA
N MEDICINA MODERN

Prof. dr. Cristina RUSU

1
A. CONINUTUL GENETICII MEDICALE.

G. MEDICAL = studiaz aplicaiile geneticii umane la

medicin
specialitate clinic distinct

G. UMAN = domeniul de aplicaie al geneticii la OM.

GENETICA = tiina EREDITII i VARIABILITII.

2
 1). EREDITATEA
Ereditatea = presupune stocarea, expresia i transmiterea
informaiei pentru realizarea caracterelor unui individ.

SUBSTRATUL MOLECULAR al ereditii este acidul

dezoxiribonucleic (ADN) 3 funcii majore:
(1). ADN deine informaia ereditar codificat

GENOM = totalitatea informaiei din ADN (un set 23 crs).

GENA un segment de ADN care deine informaia

pentru un caracter
"o gen un caracter "

3
 EREDITATEA

(2). ADN exprim informaia ereditar codificat sinteza

unor proteine specifice caracter:
"o gen o protein un caracter

(3). ADN transmite informaia ereditar n

succesiunea generaiilor, prin:
sinteza unor noi molecule de ADN
distribuia lor prin diviziune celular.

4
 EREDITATEA

Structurile celulare ce conin ADN:

nucleul i mitocondriile

(1). NUCLEUL 99,5% ADN

ADN + proteine fibre de cromatin
CROMOZOMI.
celulele somatice 46 cromozomi
2n = numr diploid;
23 perechi de cromozomi omologi;
Microscop Microscop celulele sexuale 23 cromozomi diferiti
electronic optic
n = numr haploid.
(2). MITOCONDRIILE 0.5% ADN.

5
 2). VARIABILITATEA

Variabilitatea = fenomenele care produc diferene genetice dintre

indivizi.
SURSE:
1) MUTAIILE: modificarea structurii genei o variant
genic (alel ), normal / anormal.

2) RECOMBINRILE GENETICE: in cursul meiozei se

produce schimb de material genetic intre cromozomi gamete
diferiti copii diferiti;

3) MIGRAIILE deplasarea unui individ dintr-o populatie in

alta + casatorie in noua populatie; descendentii sai vor fi usor
diferiti fata de populatia de origine si cea in care s-a deplasat.

6
 GENA
ADN

PROTEIN

CARACTER
mutaie 1 mutaie 2
Culoarea ochilor
(ochi negri)

M1 M2

Variant / alel Variant / alel

normal anormal

OCHI ALBATRI ALBINISM OCULAR

Mutaiile = cauze majore de boal sau predispoziie la boal !!!

7
 Consecina variabilitii: fiecare individ are
o structur genetic unic i specific !!!

Se stabilete n momentul fecundrii: gameii (n + n) zigot (2n).

Zigotul reunete genele parentale din gamei ntr-o combinaie nou,
unic i constant = GENOTIP.

GENOTIP
= (1) structura genetic unic i caracteristic unei persoane;
= (2) o pereche de alele ale unei gene un anumit caracter
FENOTIP
= ansamblul UNIC de caractere, produse prin interaciunea, permanent
dar n proporii diferite, dintre ereditate (genotip) i mediu !!!.
= manifestarea clinica a unei perechi de gene alele (genotip)

8
 FIECARE OM ESTE UNIC
de dou ori:
prin structura sa genetic
i prin mediul n care s-a dezvoltat n timp

Importana conceptului de unicitate sau individualitate

biologic:
vulnerabilitatea diferit a oamenilor la mbolnvire;
manifestrile i gravitatea diferit a unei boli la pacieni
diferii;
rspunsul diferit la tratament;

"nu exist boli ci numai bolnavi"

9
 3). RELATIA GENOTIP FENOTIP MEDIU.

Interaciunea dintre ereditate i mediu se poate exprima

sintetic prin relaia:
GENOTIP FENOTIP

MEDIU
Genotipul caractere pur ereditare.
Mediul caractere neereditare (ex accidente).
Genotip + mediu caractere multifactoriale

10
 B. IMPORTANA GENETICII N
MEDICINA MODERN

Genetica medical are astzi un rol major n teoria i

practica medical.
De ce?
5 motive importante:
1. a) factorii genetici particip la formarea structurilor i
desfurarea funciile organismului;
acioneaz n orice organ i n fiecare etap a vieii, deci la orice
vrst;

b) omul sntos sau bolnav este rezultanta

interaciunii dintre ereditate i mediu.
11
 U.M.F IAI

IMPORTANA GENETICII N MEDICINA MODERN

2. Cunotinele despre rolul factorilor genetici au progresat rapid

i masiv (25 Pr. Nobel);
n 2001-2004 a fost descifrat genomul uman
(25.000 gene);
cea mai mare descoperire tiinific dup microscop !!!

Medicina a devenit molecular sau genomic,

12
 IMPORTANA GENETICII N MEDICINA MODERN

3. Mutaiile sunt o cauz major de boal sau vulnerabilitate la

boal. Bolile genetice:
B. cromozomiale
B. monogenice,
B. mitocondriale,
B. multifactoriale
B. prin mutaii somatice

4. Transmiterea genelor mutante la ali membri ai familiei n

specialitatea de genetica medical unitatea de studiu i aciune
este familia:
NU EXIST BOLI CI . FAMILII DE BOLNAVI

13
U.M.F IAI

IMPORTANA GENETICII N MEDICINA MODERN

5. Bolile genetice sunt o problem important de

SNTATE PUBLIC:
(1). 5-8% din populaia sub 25 de ani;

(2). numeroase i mare diversitate (orice vrst, orice

organ) n aproape toate specialitile medicale;

(3). cauz semnificativ de morbiditate i mortalitate

infantil;

(4). boli cronice (de o via) handicap major;

(5). boli ce pot fi prevenite (sfat genetic);

(6). ngrijirea pacienilor - cheltuieli importante,

14
 2. STRUCTURA I
ORGANIZAREA CELULAR A
ADN

Prof. dr. Cristina RUSU

15
 U.M.F IAI

J.D. WATSON F. CRICK

A). STRUCTURA ADN 1953, Cavendish Lab, Cambridge

n anul 1953, J.D. WATSON i F.

CRICK au propus un model al
structurii ADN:

dou catene polinucleotidice

legate prin bazele azotate

elice dubl, rsucit spre dreapta.

-A-T-C-G-C-G-A-T-T-A-C-G-A-T-
-T-A-G-C-G-C-T-A-A-T-G-C-T-A-
16
 U.M.F IAI

1. STRUCTURA PRIMAR I SECUNDAR

A ADN

1.1. STRUCTURA PRIMAR

ADN este un macro-polimer de
dezoxiribonucleotide;
[P 5dR1 - N]n

Grup fosfat
Baz azotat:
(ac.ortofosforic)
Pur A, G
Pentoz
Pir T, C
D-2-dezoxiriboza

17
 U.M.F IAI 1.1. Structura primar a ADN

Nucleotidele sunt polimerizate, unite

prin legturi covalente (puternice)
3- 5 fosfodiester

Se formeaz o caten (lan):

- linear (neramificat!)
- cu o polaritate 5 3 !!!

Aceast caten = structura

PRIMAR a ADN - ce
deine informaia ereditar
codificat

18
 U.M.F IAI 1.1. Structura primar a ADN

Informaia genetic codificat = secvena (ordinea) nucleotidelor

determin ordinea aminoacizilor n proteine.
5'- ATGCCTAGATCA - 3'
aa1- aa2-aa3- aa4

alfabet nucleic = patru "litere": A, T, G, C

"cuvinte" de trei litere = triplet sau codon aminoacid

ex: ATG Met
asamblate ntr-o "fraz" = o gen
secvena nucleotide secvena AA n protein.

ATG TGT AAA CCA

Met cis lys pro

19
 U.M.F IAI 1.1. Structura primar a ADN

Informaia genetic

Sensul de "citire" al informaiei genetice este

determinat de polaritatea 5' 3' a catenei de ADN
5'- ATGCCTAGATCA - 3'
aa1- aa2 -aa3-aa4

Informaia NU poate fi citit corect

dect ntr-un singur sens:
ROMA

20
 U.M.F IAI 1.1. Structura primar a ADN

Informaia genetic

Mutaia genei substituia unui nucleotid

modificarea unui codon nlocuirea unui aminoacid
modificarea structurii i funciei proteinei
sintetizate.

ATG TGT AAA CCA ATG AGT AAA CCA

Met cis lys pro Met ser lys pro

21
 U.M.F IAI

1.2. STRUCTURA SECUNDAR a ADN

legate ntre ele prin bazele

dou catene azotate,
polinucleotidice,
n mod complementar :
baza purinica baza
pirimidinica
AT i GC

catenele ADN sunt

antiparalele ()

22
 U.M.F IAI 1.2. Structura secundar a ADN

Catenele ADN se nfoar

una in jurul celeilalte dubl
spiral;
Structura ADN = perfect
regulat ! HISTONE
10 pb
Dou anuri laterale: mic
(histone) i mare ( proteine PROTEINE
REGLATOARE
reglatoare)
ADN - stabilitate metabolic.
Catenele se desfac i se refac (pe
baz de complementaritate) pentru
a realiza funciile ADN.

23
 U.M.F IAI

1.3. DENATURAREA I HIBRIDIZAREA ADN

n condiii experimentale
(tratare termic sau chimic)
ruperea (desfacerea) legturilor de
hidrogen = denaturare
monocatene;

monocatenele de ADN
rcite lent se pot reasocia pe
baza complementaritii =
renaturare sau hibridizare.

rcire brusc monocatene

separate

24
 U.M.F IAI

DENATURARE/ HIBRIDIZARE ADN

Monocatenele ADN separate se pot uni,

pe baz de complementaritate, cu alte
monocatene de ADN sau ARN
formnd hibrizi moleculari;

HM folosii n diagnostic i tratament:

hibridizare ntre o monocaten de

ADN nativ i o "sond de ADN
(secven de ADN obinut artificial) ce
corespunde unei gene, marcat
fluorescent:
- hibridizarea sondei prezena
semnalului prezena genei;
- absena semnal = deleia genei

25
del
 U.M.F IAI

HM folosii n tratamentul unor boli

hibridizarea ntre o molecul de ADN nativ i un oligonucleotid
antisens produce un heteroduplex care blocheaz funcia genei
(ex., oncogen sau genom HIV).

oligonucleotid
antisens

A Proteina AT Blocare
T anormal TA expresie

VINDECARE
Oncogen
BOALA
Oncogen
sau sau
Genom HIV Genom HIV

26
 U.M.F IAI

B. STRUCTURA GENOMULUI UMAN

GU = genom nuclear (complex, 99,5% ADN) + genom mitocondrial (simplu, mic, 0,5%).

25.000 gene

27
 U.M.F IAI

2.1. GENOMUL NUCLEAR

Enorm (3,2 miliarde perechi de baze/pb),

Fragmentat: (22A+X+Y) molecule de ADN + proteine

cromozomi.

Alctuit: ADN genic (25%) + ADN extragenic (75%)

28
 U.M.F IAI

a) ADN GENIC (25%)

Structura genelor este

foarte complex - ADN
genic:
25.000 gene

ADN codant = exoni

(10%)

ADN necodant (90%)

= introni, secvene
reglare,
- Gene ce codific proteine (1,5%),
- Gene ce codific ARN
29
 U.M.F IAI

b) ADN EXTRAGENIC (75%)

Secvene netrasncrise
(necodante);

Funcii puin cunoscute;

- reduce efectele nocive ale
mutaiilor

Alctuit din:
ADN nerepetitiv (60%)
ADN repetitiv (40%).

30
 U.M.F IAI

ADN EXTRAGENIC REPETITIV (40%)

ADN repetitiv: secvene foarte

scurte, repetate de milioane de
ori; 3 tipuri:
ADN satelit
(formeaza anumite structuri
din cromozom);

ADN minisatelit (SNPs)

(minisatelii hipervariabili),
dispersat n toi cromozomii =
markeri genetici individuali =
folosii n amprenta genetic

ADN microsatelit AMPRENTA GENETIC

(DNA fingerprint) 31
 U.M.F IAI

2.2. GENOMUL MITOCONDRIAL

ADNmt cteva mii de

copii per celul = 0,5%

Genomul mitocondrial
difer de genomul
nuclear:
mic (16.569 pb);
circular;
37 de gene:

32
 U.M.F IAI

GENOMUL MITOCONDRIAL
Genomul mitocondrial provine exclusiv de la mam.
ADNmt poate suferi mutaii
Mutaiile produc o serie de boli degenerative n organe mari
consumatoare de energie (nervi, muchi) care se transmit
matern:
de la mam la toi descendenii;
brbaii bolnavi nu transmit boala

33
 U.M.F IAI

2.3. PROIECTUL GENOM UMAN

(1990 2005)

Obiectivele majore ale PGU:

descifrarea secvenei nucleotidice i structurii GU

(harta genetic a omului),
identificarea genelor umane (cartea vieii).

34
 U.M.F IAI
U.M.F IAI
U.M.F IAI

PROIECTUL GENOM UMAN

(1900 2005)

februarie 2001:
schia iniial a GU,
octombrie 2004:
versiunea finisat,
de nalt precizie, a
secvenei nucleotidice
aproape complete a GU
(2,85 miliarde de pb sau ~
99% din eucromatin).

GENOMICA STRUCTURAL
35
 U.M.F IAI

GENOMIC STRUCTURAL
( patru comentarii majore)

1. Numrul genelor umane Cine face diferena dintre

este surprinztor de mic
(~25.000).
Reprezint mai puin de
... 5 % din GU
Genele sunt distribuite
inegal ntre i n
interiorul cromozomilor
OM i alte specii ?
Poziia genelor n genom
Structura mai complex
(modular) a genelor i
proteinelor.
Modul n care lucreaz
genele (mai intens, mai
complex);

36
 U.M.F IAI

GENOMIC STRUCTURAL

Ce deosebete atunci un
2. Genomul a dou om de altul, fcndu-ne pe
persoane nenrudite, fiecare dintre noi UNIC?
din populaii diferite,
are n comun 99,9% diferena de 0,1% (3 mil
din secvenele nu- pb) = POLIMORFISM
cleotidice din ADN. INDIVIDUAL

Se spulber definitiv
ideea raselor umane

37
U.M.F IAI

POLIMORFISMUL INDIVIDUAL al ADN

O,1 % din genom = 3 milioane pb.

Aceast mic parte din genom este alctuit din

diferite secvene polimorfice de ADN, mai mari sau
mai mici:
CNP: copy number repeats = secvene mari de ADN

MINISATELIII HIPERVARIABILI: secvene foarte scurte (14-65 pb),

SNPs ( single nucleotid polymorphism) 1 pb la fiecare 1000 pb (n total

1,4 miliarde)

Numrul, secvena i poziia acestor markeri

polimorfici sunt caracteristice fiecrui individ

38
 U.M.F IAI

POLIMORFISMUL INDIVIDUAL al ADN

O,1 % din genom = 3 milioane pb.

IMPORTAN:

Markerii genetici individuali determin

(dar nc nu tim cum):
rspunsul la agresiuni (boal), predispoziia /
vulnerabilitatea la boal;
efectele medicamentelor (farmacogenomica);
memoria, creativitatea, abilitile .a.

39
 U.M.F IAI

GENOMIC STRUCTURAL (1900-2005)

3. Descifrarea secvenei
GU i identificarea Ce se va ntmpla n
genelor nu explic: epoca postgenomic
cum e structurat i (2006?) ?
funcioneaz o fiin
uman;
se va stabili funcia
rolul genelor n
precis a fiecrei gene
starea de sntate i Se vor descifra relaiile
boal.
funcionale dintre gene:

GENOMIC FUNCIONAL 40
 U.M.F IAI

4. Care vor fi consecinele descifrrii GU

asupra medicinii clinice ?

MEDICINA GENOMIC

...publicarea schiei GU va schimba cu siguran

practica medical n urmtoarele decenii;
medicina genomic va transforma profund medicina
clinic

(Getting Ready for Gene-based Medecine

H. Varmus, N.Engl.J.Med, 2002)
41
MEDICINA GENOMIC/ MOLECULAR
O nou TAXONOMIE
Subtipuri genotipice

DIAGNOSTIC MOLECULAR
(presimptomatic; predispoziie genetic)
Elucidarea
mecanismelor
moleculare ale NOI INTE I METODE TERAPEUTICE
bolilor

TERAPIE INDIVIDUALIZAT
(farmacogenomic)

PREDICIE I PROFILAXIE PERSONALIZAT

(riscul individual)
42