Antigenele si structura aparatului imun

Prof. Univ. Dr. Victor Stoica Spitalul Clinic Dr. I. Cantacuzino

Antigenele si structura aparatului imun

IMUNITATEA =ansamblul fenomenelor prin care organismul recunoste si neutralizeaza structuri agresoare sau straine acestuia. RASPUNSUL IMUN = se declanseaza ca urmare

a patrunderii in organism a unui Ag

PROPRIETATILE GENERALE ALE ANTIGENELOR Imunogenicitatea: capacitate inascuta de a induce un R.I. specific: - selectie clonal de L Ag specifice - activarea clonei - expansiunea clonei (proliferarea L) Antigenicitatea: capacitatea de a induce un R.I. si de a reactiona cu Ac solubili sau receptori celulari

Epitopii determinantii antigenici Conformatie :

a) secvential

b) conformational

- Localizare : - topografici - criptici - Functii: - specificitate - Ag - imunoreactivi - Paratopul Ac se combina cu epitopul (conformatie complementara suprafetei epitopului)

-Valena Ag nr. de epitopi -Monotonia repetitiv imunogen: Ag carbohidrat nr. de epitopi de acelai tip

CLASIFICAREA ANTIGENELOR
I. Marimea moleculei II. Complexitatea moleculei (chimica)

III. Relaia gazd - Ag

I. Marimea moleculei
a)

Ag complete/imunogene: macromolecule
40 kDa

Nr. i varietatea epitopilor crete proportional cu

moleculei de Ag

b) Ag. incomplete/neimunogene: < 5 kDa

- Haptenele: - nu induc un R.I. - reacioneaz cu produsele R.I. - hapten + transportor = imunogene se formeaz LB Ac anti-hapten TCR Ac anti-transportor

II. Complexitatea chimic

a) Intens imunogene:

- proteinele - glicoproteinele

b) Polizaharidele i lipidele devin imunogene numai dupa legare cu un substrat proteic (LPZ) Adjuvanii: molecule nespecifice organice/minerale care

amplific R.I. al unui Ag, la administrarea concomitent

c) Ag nucleare citoplastmatice ( Ag celulare)

ADN nuclear catenar ( ADN ds): - antigenicitate slab - antigenicitate prin alipire la histone 2) Histonele:

- proteine mici bazice 1, 2a, 2b , 3, 4

- antigenicitatea ADN

ADN

3) Antigenele nucleolare: - polipeptide - RNP U1.6

4) Proteinele nehistonice: - ARN polimeraza 1 ( SD ) - ADN topoizomeraza 1 ( Scl 70) - aminoacil transferaza

5) Ag citoplasmatice: - ribonucleoproteine mici

c) Superantigenele:
- nu sunt fagocitate sau prelucrate de Mcf

- fixare MHC- II i TCR

- activeaz pan la 10% din LT periferice - hipersecreie de limfokine implicate n PR, LES, ocul endotoxinic (toxine bacteriene) - nu secreie Ig specifice/ limfocite sensibilizate

III. Relaia gazd - Ag

1) Ag autologe numai la un individ (autogrefa) 2) Ag. sinergice la indivizi identici genetic din cadrul unei familii 3) Ag allogene ( homologe) la indivizi diferii genetic din cadrul aceleiai specii ( ex. mam/copil = R.I.) 4) Ag. xenogene ( heterologe) la specii diferite (intens imunogene; ex. maimu om)

5) Ag. heterofile epitopi comuni; aparaia reaciei ncruciate

cu Ac specifici ( ex. T. pallidum + ag. cardiolipinic din miocard)

6) Ag. specifice de esut /de organ: - tireoglobulina (Ty. autoimuna) - mielina (encefalita alergic p. vaccinare)
x Ag sechestrate specifice de organ; nu intr n contact cu sistemul imun n mod obinuit

Ag de histocompatibilitate: - HLA
(Ag limfocitare/leucocitare umane)

- MHC ( Complex Major de Histocompatibilitate)

- Ag structurale, specific individuale, pe S2 celulelor - confer specificitate antigenic esuturilor - rol major in acceptarea respingerea grefelor de organ/ esut

Structura : - lanurile grele specifice( A, B, C) - lanuri uoare beta 2 microglobuline

Genele grupate n 2 regiuni distincte pe bratul scurt al cr. 7 - 6 locusuri: - A, B, C, . . . - cifra (alela varianta structural), w - 4 cifre HLA- B2705

Categoriile de Ag HLA/MHC
a) HLA/MHC I: A, B, C
= localizare pe S 2 cel. nucleate ( L, McF ), Tr., nu hematii = amplificate de IFN , IFN

= legare CD8; Ag endogene, virale

b) HLA/MHC II: DR, DP, DQ = localizate pe LB, LT, Mcf, cel. endotaliale, cel. epiteliale, (Tr. Digestiv, Tr. Respirator ) = amplificate de IFN , TNF, IL-13 = deprim expresia PGE2 = legare CD4; Ag exogene captate de APC

Gene/proteine HLA III

Codifica C2, C4, B (complement) Citokine (TNF)

Proteine de oc termic (HSP-70)

Hidrolaza P450

STRUCTURA APARATULUI IMUN

Sistemul limfoid = organe/esuturi loc de maturizare/difereniere a

celulelor limfocitare originare

A. Organe limfatice primare Timusul involuie dupa natere - populare cu pro-T numai n viaa intrauterin (fereastra de populare timotaxina) Maduva osoas - specializate numai n geneza de LT si LB - nu au capacitate de R.I. - sursele prenatale ale precursorilor celularii: - ficatul - splina - maduva osoas

B. Organele limfatice secundare

Componente - ggl limfatici - splina - TLAM digestiv/respiratorie Locul de inducere a R.I.

Difereniere anatomic n ggl/splin: R.I. cel. / R.I. um.

1. Ggl limfatic:
a) zona B - dependent ( corticala):

LB ------ foliculi limfoizi

Pl ----- c. germinativi b) zona timodependent (paracortex) domin LT c) zona medular: vase sanghine/limfatice LT, LB, Pl, Mcf,

cel. dendritice

2. Splina:
LT = n jurul a. trabeculare LB = foliculi limfoizi, peste manonul de LT (pulpa splenic)

APC = Mcf, cel. dentritice n periferia foliculilor limfoizii

3. TLAM
Amigdale (palatine/faringiene/linguale) Placi Payer, apendicele cecal Ag patrunse prin mucoase

C. Circulaia limfocitelor
Sngele 70% - 80 % = LT

10% = LB
cca. 10% = cel. nule

 Circulaie:

- 90% - intravascular
- 10% prsesc patul vascular n . periferice nelimfatice --- ggl.
limfatici --- canal toracic VCS - ciclu circulator : 24-48 h

- sunt ocolite timusul i maduva osoas

- LT circul cel mai mult (viata lunga) - ecotaxie/homing: migrarea L ctre anumite esuturi locurile

de iniiere a raspunsului imun

D. Celulele implicate n R.I. I. Limfocitele T

origine timic = 2/3 din L circulante

pro-T provin din M.O.

durata de viata : luni/ani maturizarea : apariia pe S2 a TCR echipament enzimatic markeri de difereniere celulari ( CD4/CD8 glicoproteine)

Maturizarea LT n timus
cel. suport pentru pro T LT (timocite) cel. reticulare reea de sustinere LT i timocite LT = proliferare + maturizare/difereniere expresie CD4+CD8 + i TCR selecie : + = pstrare CD4+/CD8+ - = eliminare cele autoreactive

TCR:

-molecul transmembranar, specific pentru un Ag -TCR 1 (,) 5% CD4 -, citotoxicitate (muc.intest.) -TCR 2 (, ) 95%

Complexul CD4/CD8 TCR CD3= -TCR + epitop -MHC II + CD4 / MHC I +CD8
MHC
CD8

CD4

TCR CD3

Markeri celulari de suprafra:

CD 4 MHC II CD 8 MHC I CD molecule costimulatoare

Clasele i funciile LT
1. LTc CD8+ = liza cel. int
2. LTh prezentatoare de Ag

CD4+ = colaborare LB, Mcf (R.I. u) / LTc (R.I.c) LTh1 = citotoxicitate (LTc), activ.Mcf, aparare v. Ag. i.cel,
r.inflamatorie IFN- = deprim LTh2; IL-2

LTh2 = secreie IgE, A, G1, proliferare Eoz, ef.antiparazitar

IL-10 deprim LTh1; IL-4, 5, 13

LTh17 = IL-17,r.inflam.ac(PMN): AR, psoriazis, B.Crohn

3. LT inductoare CD4 + = stimuleaz activarea Mcf 4. LTreg CD4 + = supresor/regulator, previn autoimunitatea(10%), IL-10 5. LT cu memorie CD4 + = TCM-centrala/TEM-efectoare, via lung (10-40 a) 6. LT CD4 + CD8 + = autoreactive

II. Limfocitele B

origine in M.O. implicate n secreia de Ig (Pl) durat scurt de via ( 5-7 z)

- Markeri celulari de S2:

a) RCB : - m Ig = receptor specific pentru Ag fixare RFc de S2 LB - mIg: M primul RCB D apare ulterior R.I. primar

G
- distribuie insulara, mobil pe S2 - RCB + Ag ----plasmocit

R.I. secundar

CD79a si CD79b: transmit semnalul de activare a LB

b) RFc pentru Ig c) receptori pentru C3, C4, C1q

d) MHC-I i MC II
e) receptori pentru hormoni f) molecule de adeziune (LFA-1): CD20, CD40, CD45,

Clasificarea funcionala a LB
1. LB primare (B2CD5-): majoritatea la individul neimunizat, domin RCB IgM, rar IgD 2.LB CD5+: - rar RCB IgD - nu cel. cu memorie secret mult IL-10 (ef. autocrin) - C% mari de IgM = Ac naturali polireactivi cu afinitate - apar n LLC 3. LB cu memorie: pastreaz specificitatea v.Aggenereaz clone de LB secundare 4. LB reg: produc Ac cu efect supresor

III. Celulele prezentoare de Ag (APC)

capteaz i prelucreaz Ag elibereaz substane activatoare ale LT i stimulante ale sintezei moleculelor de adeziune

1. Macrofagele cel. principal a APC cel. fixata tisular/circulant (MO) dimensiuni mari, bogat in lizozomi SRE: histocit, osteoclast, sinoviocit, Kuppfer,

microgliale, alveolare, seroase

Functiile Mcf
a) Apararea antimicrobiana: chemotaxia = C5a, PGE 2 aderarea = receptori de S 2 imuni (Fc): IgG, IgE, C3b, C3d

- nonimuni: proteine degradate glicoproteine

endocitoza = fagocitoz/pinocitoz + lizozomi = fagolizozomi

digestia = fragmente eliminate/nglobate

b) Secreia : - enzime (elastaze, colangenaze, etc.) - mediatori cel. (IFN , IL-1, TNF , NO, factori de coagulare) c) Participant n procesul imun: - captare/prelucrare Ag - exprim epitopi + MHC II - LTh = C % optima R.I. - LTreg = C % minima/max - LB = R.I. - conserv epitopi = toleran imun/R.I. prelungit d) Cel. efectorie: ef. bactericid/tumoricid (RLO, TNF, proteze)

2. Alte APC
cel. dentritice Langerhans : piele, ggl.

cel. dentritice foliculare : ggl. fixeaza CIC

LB MHC II+ :

capteaz/prelucreaz Ag + MHC II
LTh

IL 2 (limitat)

Comunicare intercelular
Molecule de adeziune (liganzi): contact i.c. direct

- caderine, superfamiliaIgG, integrine,

selectine, proteoglicani, mucinele Citokine: reglez creterea, diferenierea, funcii L, Mcf - acioneaz: autocrin/ paracrin/ endocrin -IL, TNF, IFN, F.stimulare colonii, F.cretere, Chemokine

RASPUNSUL IMUN
In funcie de : calitatea Ag calea de patrundere a Ag

felul liniei de cel. angajate

R. I. - mediat celular - mediat umoral

R.I. mediat umoral

declanarea n condiiile dispersarii Ag n organism desfaurarea la distan de locul patrunderii Ag n organism

implic formarea de Ac circulani specifici

activ n infecii viro-bacteriene

R. aberant = R. de hipersensibilitate imediat

I. Activarea LB cu Ag timodependente

Stimulare:
1. unirea Ag cu RCB = stimul slab 2. contactul LTh2 activat i/sau Mcf cu LB = stimul puternic

Ag

LB Pl Ig Mcf Ag + MHC II LT

Il 1

Fazele R.I.
A. R.I. primar - apare dupa prima expunere la Ag a cel. imune reactive inocente = cel. efectorii + cel. cu memorie

Pl Ac

STOP

- Ac apar la 10-14 zile de la contact - iniial IgM -- rapid a C%

B. R.I. secundar: apare la expuneri ulterioare la acelai Ag prompt, rapid activeaz LB cu memorie care au RCB LB cu memorie = APC Ac: apar precoce IgG pastreaz specificitatea v. Ag

C% mari, pe durata mare de timp

afinitate v. Ag (1000x)

II. Activarea LB cu Ag timoindependente

Ag. : epitopi multiplii repetitivi LPZ bateriene, flagelina, polimeri micti,

polipeptide cu a-ac levogiri

captate prin endocitoz (cel. parenchim.) persisten ndelungat eliberare n cantitai mici = R.I. prelungit

Activarea LB:
a) Ag specific (1)

b) direct (nespecific-2)
(fraciune de molecul Ag) Caracteristici: - absena cel. cu memorie i LTh - absena R.I. secundar - secreie excesiv IgM (luni, ani) - fagocitarea CI= eliberarea Ag cu

reluarea
ciclului

ANTICORPII
Ig: glicoproteine = 20% din proteinele plasmei Monomerul de Ig: 2 lanuri grele H: - clasa/subclasa - comportament Ag diferit - 5 tipuri - IgG () - IgA () - IgM() - IgD () - IgE () 2 lanuri usoare L: - K ( cr. 2 ) = 2/3 - - ( cr. 22 ) = se gasesc la toate Ig dar numai K sau

MONOMERUL TIP
4 LANURI POLIPEPTIDICE:

- lungime diferit
- grupate n 2 perechi diferite - dispunere spaiala buclat simetric a lanurilor

puni S=S ( pastreaz coeziunea)

Lanul polipeptidic:
A) extremitate aminoterminal ( domeniul

variabil) se combin cu Ag;

3 regiuni complementardeterminante hipervariabile B) extremitate carboxiterminal ( domeniul constant)

Poriune variabil ( H+L)

Fab: - recunote i se uneste cu Ag

Domeniul constant al H Fc: - difereniaza cls./subcls. Ig ( 9 ) - fixeaz/ activeaz C3 - fixeaz pe R celulari specifici - transportul transplacentar Ig

Clasele imunoglobuline
1. IgG = 70-90% (10-13g/l) Structura: 2 K/+ 2 H 4 subtipuri : - IgG1 (70%) = traverseaz placenta, C3 (++) - IgG2 = C3 (+)

- IgG3 = C3 (+++)
- IgG4 (4%) = C3 (0), activitate reaginic

- eficiena maxim apararea antimicrobian ( IgG1) . aglutinare + liza germenilor + activare C3

. opsonine . neutralizarea exotoxinelor bacteriene - caracteristici R.I. secundar - mic = strbat endoteliul difuzeaz extravascular
= traverseaz planceta ( imunitate

2. IgM ( 3%-10% / 0,8-1,2g/l)

Macroglobulin = pentamer Structura: 2 K/ + 2 H(), fr zona balamalei Proprietai:
mare = nu traverseaz placenta, greu endoteliu vascular fixare intensa pe R de membran (Mcf, L, PMN) sunt mIg caracteristice R.I. primar valoare diagnostic aglutinare bacterian difereniaz grupele ABO (hemaglutinine)

3. IgA : (5%-25% / 1 4g/ l)

Structura: 2 K/ + 2 (1 si 2) = IgA1 + IgA2 forme : IgA seric (monomer 90%) IgAs = dimer, in secreii (digestiv, saliv, j colostru, lacrimal, bronic)
s

Proprietai: - protecie antibacterian pe mucoase: inhib aderena germenilor limiteaz patrunderea Ag exogene

4. IgD : (0,03 g/L)

Structura : domin lanurile (4X) v. K + 2 mIg cu rol de RCB

5. IgE : (500ng/ml)
Structura: 2 + 2K/ Proprietai: NU traverseaz placenta/Nu activeaz C3 fixare pe RFc de pe S2 Baz, Mas = R reaginic rol in apararea antiparazitar

fixarea pe alte cel. (Mcf, E, Tr) =

captarea i clearanceul Agpoteneaz R.I.

Eliminarea Ag
Fagocitoz: CIC + legare de Mcf (RFc) Liz: CIC + fixarea/ativare C3

Rolul antigenic al Ac
structuri proteice cu valoare imunogen induc formarea de Ac anti-Ig determinani antigenici = poriune variabil H/L

Epitopi 1. Izotipuri = specificitatea de specie (H) : - difereniaz speciile ntre ele - cls. de Ig sunt antigenic identice la toi indivizii speciei 2) Allotipuri = specificitate individual / specie - Ig difera antigenic de la un individ la altul - reacie posttransfuzional de Tr (purpur) 3) Idiotipuri = specifici numai pentru Ig elaborate de o anumita clon celular - fiecare familie de molecule de Ig exprim un idiotip diferit

Reglarea R.I. umoral

a) C% de Ag prin epurarea de ctre Ac stimulul de activare a LB i secreia Ig specifice

Administrarea simultan de Ag puternic/ Ag slabe

b) Rolul inhibitor al LTreg ( Ag specifice) v. proliferare

excesiv LB stimulate

- stimularea LTreg apare la C% foarte mici/mari de Ag.

c) Intervia Ac :

- blocani
- anti-idiotipici

d) Factori supresori nespecifici:

- PGE2
- PAF - RLO
Eliberai de APC

LTreg = IL 2
LTh1 = IFN - RLO LTh2 = IL 10

R.I. mediat celular

Funcii eliminarea cel. infectate cu virusuri/bacterii cu dezvoltare i.c.

apararea antitumoral
respingerea allogrefelor Ag ramane cantonat la poarta de intrare/fixat pe cel. gazd derulare la locul de cantonare a Ag constituire lent ( R.I. ntarziat) direcionare preponderent v. celule care exprim Ag mediat de cel. citotoxice specifice ( LTcCD8+) / nespecifice (NK, K) i APC

A) Recunoasterea cel. inta

a) cel. afectat = Ag + MHC I
b) alipirea precursorului LTcCD8+ la complexul Ag+MHC-I =

semnal 1 = activarea LTcCD8+ R.I. primar:

multiplicare/difereniere cel. cu memorie

cel. efectorii (efect citotoxic citolitic/antibacterian)

c) LTcCD8+ activat liza cel. tintad) IL 2 : - autocrin = proliferare LTc - paracrin = APC, LT

d) resturile de cel. lizata

Mcf Ag +MHC II

(Ag)
IL -2

LTh 1:
-IL - 2

LTcCD8+

-IFN Mcf:
- cel efectorie - stimularea fagocitozei

- citotoxicitate

Mecanismul imunitatii de tip citotoxic

Citotoxicitate de tip extracelular: mediatori citolitici solubili (perforine/granzine)

liganzi Fas ( molecule de S2)

1) legare de m. cel. tinta = - LTcCD8+ activat spaiul extracelular: - perforine: tubuli - moarte celular

- granzine: = apoptoz
- liganzii Fas: legare R Fas 2) detaarea LTc de cel.lizat = apoptoz

Celulele citotoxice MHC - nespecifice

A) NK: 2-5% din L periferice MHC independente citotoxicitate mediata celular dependent de Ac B) K: efect citotoxic v. cel. cu Ig specifice pe S2 lor 2 R = inhibitor recunoate MHC-I (E) cu dezinhibarea R. activator- elibereaz perforine/granzine

Factorii nespecifici participani la finalizarea R.I.

a. Factori celulari = cel auxiliare

1. Mastocitele:
- localizare tisular preferenial (piele, pulmon, orofarinx) - RFc pt. IgE si IgG - granule cu mediatori chimici: histamin, Lt B4, SRS-A, triptaz, etc.) - citokine( TNF-, IL-1,6)

2) PMN
rol fagocitant 4 faze : chemotactism aderen recunoaterea

ingestia deversare extracel.

puseu respirator = RLO: anion superoxid radical hidroxil peroxidul

3. Bazofilele:

- RFc - IgE
-granule: histamin, SRS-A, heparin

Apararea antiparazitar 4. Eozinofilele: - lizolecitin (cr-CH-Ly) - ef. fagocitant/citolitic (C% mari)

- RLO, proteine cationice, Lt-B4

5. Trombocitele:
- R - colagen, trombin, ADP
- adsorb: fibrinogen, f. V. IX, XII - granule: serotinin, catecolamine B. Factori serici: 1. complementul 2. kininele plasmatice 3. s. coagulrii fibrinolizei

4. derivaii ac. arahidonic

REACIA IMUNA
I. R. de hipersensibilitate imediata anafilactic Ag variat, cale respiratorie, digestiv, cutanat, inj. fixare pe Ac (mIg) prezeni pe cel. raspuns clinic rapid teren atopic (HLA-A2/40% din populaie)

LTh2 --- IL-4, 5, 13 + IgE

non-atopic : LTh1---IL 2 IgG

-Ac = IgE induse de Ag : - contact I fixare ca mIgE pe Baz - contact II Ag + mIgE degranulare Mas Baz = primari secundari teriari (cel. atrase) - Clinic : a) forma localizat (atopic) = rinita alergic, AB b) forma sistematic ---- oc anafilactic

II. R. citotoxic
Ag : - component structural m. cel. - hapten ataata pe m. cel. Ac : - IgM/IgG Ag + Ac = + C3 liz - fagocitare - cel. K = citotoxicitate mediat cel. dependent de Ac Tipuri de Ac: deprim fc. cel. (hormoni) stimuleaz fc. cel. (hiper-ty, miastenie) blocani

III. R prin complexe imune

CI: - formate in situ - circulante cu depunere ulterioar CI mari: fagocitare, ndepartare rapida (AG) CI mici: solubile, activeaz C 3, neepurate traverseaz endoteliul vascular, activare local a C 3 inflamaie Clinic: a) formare in situ (Arthus) :activ/pasiv b) boala serului 14 -21z de la administrare ser repetate = lez. glomerulare

IV. R imuna mediata celular

a) R de hipersensibilitate tardiv: dermatit de contact,

granulom inflamator b) R citolitic: ex. HAVB