CURS 6 Receptorii cu rol accesor in activarea LT Receptorul CD28 -exprimat pe membranele LTh si LTc -structura: homodimer de 50kDa =>

doua lanturi identice si asociate intre ele -fiecare lant are in partea extramembranara, in apropierea capatului N-terminal, un domeniu domeniile sunt situate simetric! -se"mentul intracelular are rol important in acti#are -rol: cooperarea intre LTh, LTc si $%& cooperare oca'ionala, in cadrul pre'entarii si recunoasterii anti"enului! -&D() an"a*ea'a le"aturi cu un contrali"and de pe $%& profesionale &D)0 sau &D)+! => cooperarea initia'a semnale care contribuie la maturarea functionala a limfocitelor si stimulea'a cresterea numarului de celule,clona acti#ata -in ca'ul LTh se stimulea'a sinte'a di#erselor tipuri de interleukine care amplifica,re"lea'a raspunsul imun! -in ca'ul LTc se stimulea'a productia si eliberarea de citokine cu rol distructi# Receptorul CD45 -pre'ent pe membranele tutror limfocitelor aflate in san"ele periferic -ocupa cel putin -0. din suprafata membranei LT -pe LT se afla atasat mereu la complexul T&/-&D0 se atasea'a la lanturile 'eta-'eta ale &D0! => se acti#ea'a de fiecare data cand are loc recunoasterea anti"enica => apar semnale acti#atoare care se transmit din lant in lant, pana la &D15 T&/ -> &D0 -> -prin lanturile 'eta'eta- &D15! -odata acti#at, &D15 incepe sa functione'e ca o en'ima de tipul protein-tiro'in-fosfata'a => defosforilea'a di#ersele tiro'ine -&D15 acti#at formea'a un cuplu cu protein-tiro'in-kina'ele Receptorii de adeziune intercelulara ai LT -rol esential in cooperarea dintre $%& si LTh = prima etapa a oricarui tip de /2 fata de anti"enele timodependente -contactul dintre membranele $%& si LTh se reali'ea'a prin cupluri de ade'iune intercelulara ( cupluri! &uplul de linia 2 -primele le"aturi care se stabilesc sunt cele prin cuplul de ade'iune de linia 2 &D( 3 L4$0! -&D( este exprimat pe toate LT receptor panT! => "licoproteina monomerica transmembranara de 50kDa ce pre'inta doua domenii extramembranare si un se"ment intracelular lun"5 an"a*ea'a le"aturi prin complementaritate cu L4$0 leucoc6te function anti"en! -L4$0 este de asemenea un monomer care are spre capat doua domenii -cuplul este numit de linia 2 pentru ca afinitatea dintre &D( si L4$0 este foarte mare => la contactul dintre LTh si $%& se formea'a multe cupluri &D(-L4$0 mii, chiar 'eci de mii!, cupluri care sunt stabile pentru o lun"a perioada de timp

&uplul de linia a 22-a -le"aturile se fac intre L4$- si 2&$7 -L4$- se afla pe LTh5 se afla de asemenea si pe L8 si pe monocite5 este un heterodimer alfabeta care pre'inta in se"mentul extramembranar cate ( domenii situate simetric5 se"mentele intracelulare sunt lun"i5 lantul alfa se numeste &D--a, iar lantul beta se numeste &D-)5 an"a*ea'a le"aturi cu mai multi contrali"an'i din cate"oria 2&$7 intercelular adhesion molecules! -afinitatea dintre cele doua molecule este mai mica, deci se stabilesc mai tar'iu si au o contributie mai sca'uta 4unctiile cuplurilor de ade'iune -fa#ori'ea'a net recunoasterea anti"enica => pentru ca mentin membranele celulare dispuse paralel in contact intim, permitand mentinerea contactului dintre $%& si limfocit pentru un timp suficient difu'iunii moleculelor 79& si T&/ in toate planurile pentru ca acestea doua sa a*un"a la un moment dat in contact una cu cealalta! Mecanismele activarii limfocitelor T Principiile de baza ale activarii limfocitelor T -:acti#area limfocitelor T are loc strict in or"anele limfoide secundare si repre'inta momentul central al oricarui raspuns imun impotri#a anti"enele timodependente (:necesita doua actiuni reali'ate la ni#elul si prin intermediul "an"lionilor loco-re"ionali: -! drena*ul continuu al lichidelor interstitiale pentru ca aferentele limfatice se deschid beant in interstitiul "an"lionar, fa#ori'and accesul anti"enelor tisulare in "an"lioni! si (! concentrarea intensa a limfocitelor in parenchimul "an"lionar 0:acti#area si cooperarea $%& 3 limfocit trebuie sa fie bidirectionala /olul drena*ului continuu -anti"enele pot a*un"e in interstitiul "an"lionar sub doua forme distincte: -! ca anti"ene transportate de catre $%& => iau rapid calea limfaticelor aferente si sunt ulterior pre'entate limfocitelor T din parenchimul "an"lionar se pre'inta defapt un mic fra"ment 3epitopulre'ultat din prelucrarea $", fra"ment care este recunoscut de T&/!5 (! ca si anti"ene ca atare, acestea nefiind insa identice cu anti"enul ori"inal sunt modificate de procesul inflamator acut aparut la intrarea $" in corp 3protea'e si radicali liberi eliberati de macrofa"ele locale-! /olul concentrarii limfocitelor -lifmocitele circulante a*un" in parenchim, unde stationea'a un timp indelun"at => pot sa aiba contact cu anti"enul a*uns la acest ni#el -in ca'ul in care limfocitele nu sunt stimulate anti"enic, acestea parasesc "an"lionul respecti# si se intorc in circulatie, intrand ulterior in alt "an"lion -in "an"lioni, acti#area limfocitelor T nu poate a#ea loc decat in conditiile unei cooperari cu $%&, pentru ca ele nu pot fi stimulate niciodata direct de catre anti"enul nati# fie modificat, fie nemodificat , fie opsoni'ate, fie neopsoni'ate!, pentru ca nu pre'inta receptori de captare a anti"enelor si nici nu pot recunoaste anti"enele nati#e, ci doar epitopi $cti#area si cooperarea -cooperarea si acti#area necesare unui raspuns imun eficient trebuie sa fie bidirectionale => $%& si limfocitele trebuie sa se stimule'e reciproc -sensul acti#arii este antero"rad dinspre $%& care pre'inta catre LT care recunosc $"!

-la finalul acti#arii antero"rade apare acti#area limfocitelor T, care se poate reali'a pe doua cai: principala T&/-&D0! si accesorie &D() de pe LT 3 &D)0 de pe $%&! -prin transmiterea semnalelor prin cele doua cai re'ulta 0 modificari importante ale clonei LT, care sunt o conditie sine ;ua non al initierii /2: -: acti#area metabolica a LT $&T2<$/=$! (: stimularea di#i'iunilor celulare =>%$N?2@N=$! => creste numarul de celule,clona acti#ata 0: maturarea functionala a LT 7$T@/$/=$! => produc si eliberea'a interleukine daca sunt LTh! sau citokine cu rol distructi# daca sunt LTh! $cti#area retro"rada -se exercita dinspre LT de*a acti#ate catre $%& -se numeste retro"rada pentru ca se exercita in sens opus pre'entarii si recunoasterii anti"enice -se reali'ea'a prin intermediul unor interleukine produse de catre limfocitul T acti#at, cea mai importanta fiind 2L1, care are mai multe efecte acti#atoare asupra $%&: -: stimulea'a intens sinte'a si expresia membranara a moleculelor 79& => stimulea'a pre'entabilitatea anti"enului => A 79& => A acti#are LT5 aceasta amplificare are loc pana cand este atins chiar depasit! pra"ul declansarii raspunsului imun practic pentru a se declansa un /2 apare doar cand LT sufera modificarile acti#atoare 3$, =, 7-! Mecanismul activarii limfocitelor T -trece prin doua etape mari: etapa anti"en-nespecifica si ulterior etapa anti"en-specifica acti#area propriu-'isa! =tapa anti"en-nespecifica -consta in stabilirea de le"aturi prin cuplurile de ade'iune intercelulara #e'i mai sus! -aceste le"aturi se pot reali'a indiferent de pre'enta epitopului pe 79& => $"-nespecifica -are loc permanent in or"anism, in or"anele limfoide secundare => fie $%& a*un" cu 79& fara epitop, fie a*un" cu 79& cu epitopi care nu sunt recunoscuti, fie a*un" cu 79& cu epitopi care sunt recunoscuti =tapa anti"en-specifica -se initia'a doar cand 79& pre'inta un anti"en care este si specific -$" este recunoscut de T&/, la care se asocia'a &D0 cu lanturile mici alfa-beta-delta si lanturile lun"i 'eta-'eta!, la acesta din urma le"andu-se, prin punti ?-? cu lanturile 'eta-'eta, &D15 -la 79& se asocia'a un coreceptor &D1 in ca'ul LTh , &D) in ca'ul LTc!, care an"a*ea'a le"aturi cu domeniul monomorf al moleculei 79& -in citoplasma, &D1 si &D) se afla in contact cu o en'ima %TB %5+ sau L&B! -in centrul catalitic al en'imei %TB exista o tiro'ina cu rol re"ulator tiro'ina din po'itia 505! -cand are loc recunoasterea anti"enica apar doua semnale succesi#e: -: semnalul declansat pe calea &D1,&D): apare in urma contactului &D1,&D) cu domeniul monomorf al moleculelor 79&5 este un semnal inhibitor, care acti#ea'a %TB cu care &D1,&D) sunt in contact => %TB isi schimba conformatia, aducand la suprafata tiro'ina din po'itia 505, care fixea'a o molecula macroer"ica de fosfat => apare inhibitia protein-tiro'in-kina'ei => rol protecti# impotri#a acti#arii limfocitare in ca'ul in care iau contact cu molecule 79& "oale exista molecule "oale chiar si pe un $%& care au atasat un epitop! => se pre#ine reactia imuna impotri#a $%&

(: semnalul declansat de T&/: semnal acti#ator care apare la contactul 79&-epitop cu T&/5 semnalul se transmite la lanturile 'eta-'eta ale &D0, unde poate urma a! o cale scurta catre &D15 si b! o cale lun"a, in care este transmis catre se"mentele intracelulare ale &D0 caile se succed: cale scurta, apoi cale lun"a! a: calea scurta: &D15 se acti#ea'a si incepe sa functione'e ca o %T%, care preia fosfatul de pe tiro'ina 505 si se incarca cu el, indirect reali'and defosforilarea %TB, care se acti#ea'a di#erse en'ime cu rol in acti#area metabolica a limfocitelor T b: calea lun"a: lanturile 'eta isi schimba conformatia la ni#elul se"mentelor distale, care fa#ori'ea'a foarte mult atasarea locala a mai multor en'ime, cea mai importanta fiind C$%-D0 = C-chain associated protein5 C$% preia fosfatul de pe &D15 si il trece pe alte substraturi => il trece pe %L&, care se fosforilea'a si se acti#ea'a => declansea'a cascada fosfatidil-ino'itolbifosfatului, din care re'ulta D$E si 2%0 => se acti#ea'a di#erse "ene -2%0: substanta hidrosolubila care difu'ea'a in citoplasma pana la ni#elul /=N, stimuland receptorii specifici de la acest ni#el si eliberarea consecuti#a a unor cantitati mari de calciu => apare hipercalcitie A&a in citoplasma!, care stimulea'a calcineurina fosfata'a!, aceasta din urma acti#and un factor transcriptional N4-$T = nuclear factor of the acti#ated T l6mphoc6tes! cu rol in acti#area unor functii nucleare in mod normal este fosforilat => inacti#!5 N4-$T acti#at difu'ea'a usor in nucleu, unde stimulea'a marea ma*oritate a "enelor pentru interleukine,citokine => incepe maturarea functionala limfocitara -D$E: substanta liposolubila, care ramane atasat de membrana celulara si acti#ea'a %B&, care acti#ea'a un factor transcriptional N4-k8 = nuclear factor of the li"ht k chains of the B l6mphoc6te imuno"lobulins!5 N4-k8 este un polipeptid care este in mod normal cuplat cu un inhibitor proteic, deci inacti# => %B& fosforilea'a inhibitorul, care se desprinde => N4-k8 se acti#ea'a si difu'ea'a in nucleu, acti#and "ene pentru interleukine si, in mod particular, acti#ea'a "ena pentru 2L(5 7ito'a limfocitara -initierea mito'elor limfocitare se reali'ea'a prin kina'ele ciclin-dependente &DB!, care actionea'a la etapele ? si perioada dintre E( si 7 ale ciclului mitotic5 &DB cu efect in stadiul dintre E- si ? sunt stimulate de semnalele #enite prin calea &D(), semnale care au pe deasupra acti#arii cascadei 7$%-kina'elor -kina'ele care influentea'a trecerea de la E( la 7 sunt stimulate de semnalele #enite prin calea T&/-&D0 &onsecintele morfofunctionale ale acti#arii limfocitelor T -limfocitele T se modifica morfolo"ic si functional -limfocitul trece din etapa E0 in interfa'a E-, ?, E(!, moment in care apar modificarile morfolo"ice si functionale => de#ine mare si capata aspect relati# nere"ulat si citoplasma capata un surpuls de mitocondrii marker morfolo"ic al acti#arii LT! si pre'inta /=/ binede'#oltat -apar si modificari fenotipice ale expresiei receptoriale!, mai mult calitati#e decat cantitati#e => creste mult expresia receptorilor de ade'iune mai ales a L4$-! si a T&/ => se formea'a limfoblasti T -limfoblastii T care depasesc etapa E( a ciclului mitotic, trec in etapa 7 a di#i'iunilor mitotice propriu-'ise! => se formea'a limfocite T efectorii acestea #or fi utili'ate concret in derularea /2 3pot fi LTh sau LTc! si limfocite T cu memorie nu mai re#in niciodata la starea de repaus 3adica E0-, ramanand intr-un stadiu intermediar dintre E0 si E- => la un contact nou cu acelasi anti"en, /2 #a fi mult mai prompt!