CURS 11 COMPLEMENUTL continuareFactorul C3 -reprezinta factorul central al sistemului complementului => activeaza in ambele cai ale complementului (clasica

a si alterna) => concentratia plasmatica cea mai mare: 0,5 1,5mg/ml (ceilalti sunt in micrograme) Structura si functia factorului C3 -factorul inactiv (zimogen): etero!imer cu greutate moleculara !e apro"imativ 1#0 $%a -constituit !in asocierea a !oua lanturi !iferite, alfa (110 $%a) si beta (&0 $%a) -lanturile alfa si beta sunt antiparalele (capatul ' al unuia corespun!e capatului ( al celuilalt) si sunt unite prin punti !isulfurice )antul alfa -prezinta, inspre capatul (-terminal, un buzunar i!rofob care realizeaza o internalizare relativa a unei grupari tiolesterice (internalizarea este relativa pentru ca !esc i!erea buzunarului este larga) -se leaga printr-o punte !isulfurica !e lantul beta )antul beta -prezinta, inspre capatul '-terminal, o secventa !e ** care fi"eaza, in cursul reactiei complementului, factorul (5 -in stare inactiva a (+, secventa ** este internalizata Activarea factorului C3 -se realizeaza enzimatic (!e aceea se poate activa prin ambele cai), !ar si non-enzimatic (realizata !oar in calea alterna) *ctivarea enzimatica a factorului (+ -realizata !e catre (+-convertazele generate prin caile clasica si alterna -(+-convertazele cliveaza !oar la nivelul capatului '-terminal al lantului alfa => se !esprin!e un mic fragment (,$%a) !enumit (+a, care ramane in faza flui!a, si un fragment mare, !enumit (+b, care nu ramane in faza flui!a (ten!inta crescuta !e !epozitare pe membranele non-self a-(+a e"ercita + efecte proinflamatorii locale 1- vaso!ilatatie .- iperpermeabilizarea vaselor locale +- efect c emoatractant si activator leucocitar (mai ales neutrofile si monocite) b- (+b se ataseaza !e membrane non-self -> se face prin interme!iul gruparii tiolesterice -> clivarea genereaza semnale activatoare cu caracter orto!romic ('-terminal spre (terminal), care a/ung la nivelul buzunarului i!rofob, !eterminan! e"teriorizarea gruparii tiolesterice -> gruparea tiol-esterica este electronofila, anga/an! legaturi cu structuri nucleofile ('0. !in proteine, 10 !in gluci!e) ale membranelor non-self, care ce!eaza electroni => apare !epozitarea (+b pe membrane (opsonizare) -> !epozitarea se realizeaza !oar pe membranele non-self, care nu sunt prote/ate anticomplement

->atasarea (+b !e membrana non-self !etermina mo!ificari conformationale transmise catre lantul beta, ceea ce !etermina e"teriorizea secventei ** (care poate fi"a (5 => creste afinitatea (+b pentru (5), urmata !e atasarea (5 la nivelul lantului beta *ctivarea non-enzimatica a (+ -nu con!uce nicio!ata la proteoliza limitata a factorului (+ -activarea se face prin moleculele !e 0.1 care au ten!inta !e a patrun!e in buzunarul i!rofob -buzunarul ofera o oarecare rezistenta trecerii moleculelor !e apa (fiin! i!rofob), !ar avan! !esc i!erea foarte larga, moleculele !e 0.1 patrun! constant, !ar in cantitati mici in buzunarele i!rofobe => (+ i!ratat -intrarae moleculelor !e apa !etermina scin!area gruparii tiol-esterice intr-o grupare 20. si o grupare (110 -scin!area gruparii tiol-esterice !etermina mo!ificari conformationale anti!romice ((terminal -> '-terminal), ceea ce !etermina e"teriorizarea unei secvente !e ** !e pe lantul alfa, care poate atasa factorul 3 al complementului -atasarea factorului 3 la (+ i!ratat !etermina !eclansarea casca!ei complementului pe calea alterna -calea alterna se !esfasoara constant, la o intensitate mica (!oar putine molecule (+ se i!rateaza) Factorul C4 -activeaza strict in calea clasica -are concentratii plasmatice me!ii (400 500 ug/ml) -ca zimogen este un eterotrimer alfa, beta, gamma !e .00$%a, lanturile fiin! paralele si legate prin punti !isulfurice Structura si functiile C4 )antul alfa: in apropierea (-terminal prezinta un buzunar i!rofob care realizeaza o internalizare stricta a unei grupari tiol-esterice )antul beta: rol !e sustinere )antul gamma: prezinta o secventa !e ** care poate fi"a factorul (.5 in starea inactiva, secventa este internalizata Activarea C4 -lantul alfa este atacat !e (1s (serin-esteraza (1), care elibereaza un mic fragment !inspre capatul '-terminal ((4a), care ramane in faza flui!a si nu are activitate importanta -restul factorului ((4b) nu ramane in faza flui!a, !epozitan!u-se pe membranele non-self cu a/utorul gruparii tiol-esterice (printr-un proces asemanator (+) -atasarea (4b !etermina invelirea membranelor cu acesta, !ar nu reprezinta opsonizare (pentru ca nu con!uce la fagocitoza) si nici recunoastere imunologica nespecifica -consecintele atasarii: apar mo!ificari conformationale !e ansamblu transmise alfa -> beta -> gamma, care in final se sol!eaza cu e"teriorizarea secventei ** !e pe lantul gamma care fi"eaza (. (factor enzimatic proteaza-) => (4b /oaca rol !e cofactor (fi"eaza o enzima pe o membrana celulara) Factorul C -activeaza strict in calea clasica -constituit !intr-un singur lant polipepti!ic -functie: proteaza ce intra alcatuirea celor !oua comple"e enzimatice ale caii clasice ((+convertaza si (5-convertaza)

-actiune: este fi"at pe membranele non-self prin interme!iul (4b si este activat prin proteoliza limitata !e catre (1s Factorii C!" C#" C$ -alcatuiesc secventa terminala a sistemului complementului -functie: activeaza (# (enzimatic polimeraza-), acesta activan! (, Factorul C% -un singur lant polipepti!ic -se organizeaza in placute mici, care sub actiunea (# se asambleaza, in prezenta ionilor !e (a, forman! mici structuri tubuliforme (M&C) care se insera in membranele non-self, con!ucan! intr-un final la liza osmotica a particulelor Calea clasica a co'(le'entului -parcurge intot!eauna + etape: generarea (+-convertazei, generarea (5-convertazei, generarea 6*( Generarea C3-convertazei 2c ema !e principiu -con!itionata !e prezenta comple"elor imune membranare -incepe prin asamblarea componentelor (1 (7,r,s), care formeaza un comple" trimolecular ((1 activat) -(1s activeaza, !istinct si in etape !iferite, factorul (4 (scin!at in (4a si (4b) si, ulterior, factorul (. (scin!at in (.a si (.b) -fragmentele mari ale (4 si (. se !epoziteaza pe membrane, forman! un comple" bimolecular (4b-(.b !enumit (+-convertaza caii clasice a complementului -(.b are rol enzimatic, iar (4b este cofactor 2c ema !e !etaliu -antigenele membranare pot fi constitutive sau atasate ( aptenele) => sunt recunoscute !e catre anticorpi (8g9 sau 8g6), care isi e"pun secventele !e activare a complementului !e pe !omeniul (0. (!atorita unor mo!ificari conformationale :ab -> :c ale lanturilor 0) -secventele !e activare sunt recunoscute !e (17, care anga/eaza legaturi cu acestea => apar mo!ificari conformationale in (17 => se e"pun secvente ** care permit atasarea (1r => (1r atasat permite atasarea (1s -(1s cliveaza initial (4, la nivelul capatului '-terminal al lantului alfa => eliberarea (4a si generarea !e mo!ificari conformationale care e"pun gruparile tiol-esterice prin care se ataseaza !e membrana celulara, in apropierea comple"elor imune => atasarea !etermina mo!ificari transmise alfa-beta-gamma, care se finalizeaza cu e"punerea ** capabili sa lege (., crescan! afinitatea (4b pentru (. =>(. este rapi! atasat lantului gamma al (4b, neavan! initial contact cu membrana -(1s activeaza ulterior (., scin!an!u-l in (.a si (.b5 (.b este atasat !e (4, !ar si !e membrana => se formeaza (+-convertaza

Generarea C5-convertazei 2c ema !e principiu -(+ convertaza scin!eaza (+ in (+a si (+b -(+b poate sa intre in contact cu comple"ul (4b-(.b, forman! un comple" trimolecular (4b(.b-(+b !enumit (5-convertaza, partea enzimatica fiin! reprezentata !e (.b -atasarea (+b !etermina comutarea specificitatii !e substrat, astfel incat (.b nu mai actioneaza pe (+, ci pe (5 -(+b se poate atasa in!ivi!ual pe membrana bacteriana => opsonizare Generarea MAC 2c ema !e principiu -(5-convertaza cliveaza, prin proteoliza limitata, fragmentul (5 => (5a (ramane flui! si are efecte proinflamatorii mai intense !ecat cele ale (+a) si (5b -(5b se ataseaza rapi! la (; si (&, forman! un comple" trimolecular (5b-(;-(&, care activeaza (# -(# activat !evine polimeraza, !eterminan!, in prezenta (a, polimerizarea (,, care formeaza structuri tubulare ce perforeaza membrana 2c ema !e !etaliu -(5 se ataseaza la secventa ** !e pe lantul beta al (+b si este clivat !e catre (.b -(5b se !etaseaza !e (5-convertaza si !e membrana, revenin! in faza flui!a (pentru ca (5b nu are grupare tiol-esterica) -(5b ataseaza (;, iar (; leaga (& => formeaza un comple" trimoleculara in faza flui!a, care in final se ataseaza !e membrana non-self -atasarea se face prin interme!iul (&, care are proprietati lipofile => (& sufera mo!ificari conformationale care ii permit atasarea (# => comple" tetramolecular -(# se ataseaza si !e comple"ul trimolecular, !ar si !e membrana, !evenin! o polimeraza membranara => polimerizeaza (in prezenta (a) placutele !e (, -se formeaza structuri tubulare care perforeaza membrana, permitan! intrarea 'a si apei => iper i!ratare supraacuta (liza osmotica) -in cazul caii clasice, liza osmotica porneste !e la o recunoastere imunologic-specifica a *g membranare (realizata !e 8g) -in cazul caii alterne, liza osmotica porneste !e la o recunoastere imunologic-nespecifica -nomenclatura: unii autori !enumesc (.a fragmentul mare si (.b fragmentul mic