Medii de cultur

Cultivarea bacteriilor: creterea bacteriilor pe medii de cultur n condiii in vitro. Medii de cultur: complex de substane care permite creterea i multiplicarea bacteriilor (conin substane nutritive, au pH corespunztor, umiditate corespunztoare, sunt sterile, trebuie asigurat aero/anaerobioza)

Clasificare Dup consisten: lichide (repartizate n eprubete) solide (geloza dreapt, nclinat, n plac) semisolide (n eprubete)

Dup coninutul de substane nutritive: I) Medii naturale: conin substane nutritive n forma lor natural, fr a fi prelucrate n prealabil: - mediul cu bil, mediul cu lapte, mediul cu ou (Dorset), ser coagulat de bou (Lffler) II) Medii artificiale: A) Medii de baz pentru germeni nepretenioi 1) bulion simplu macerat de carne, pepton, NaCl 0,5% 2) apa peptonat pepton i NaCl 0,5% 3) geloza simpl bulion + agar-agar (un extract de alge care asigur consistena solid, nu are proprieti nutritive) B) Medii compuse 1) Medii complexe: mediu de baz + substane organice (snge, ser, glucoz), sunt folosite pentru cultivarea germenilor pretenioi - geloza snge, geloza ser - bulion snge, bulion ser, bulion glucozat 2) Medii de mbogire: conin ageni selectivi, care inhib dezvoltarea unor bacterii dar permit creterea altora - sunt folosite pentru izolarea selectiv a anumior germeni din produse contaminate cu germeni din flora normal mediul hiperclorurat pentru mbogirea stafilococilor: bulion + NaCl 7,5% mediu cu selenit pentru mbogirea salmonelelor mediul OCST pentru bacilul difteric: ou, cistin, ser, telurit de potasiu

3) Medii speciale: au compoziie special, permit cultivarea unor bacterii pretenioase

mediul Lwenstein-Jensen pt. cultivarea micobacteriilor ou, cartofi, verde malachit, asparagin, glicerin mediul Sabouraud pt. cultivarea levurilor: geloz + maltoz/glucoz + antibiotice mediul Schaedler pt. anaerobi geloz chocolat neisserii, hemofili: geloz baz suplimentat cu factori de cretere, dup adugarea sngelui mediul se ocolatizeaz la 80 C timp de 10 minute

4) Medii selective i difereniale: substane selective (inhib creterea unor bacterii) + zaharuri/polialcooli + indicator; sunt folosite pentru izolare i identificare mediul Leifson (ADCL agar dezoxicholat citrat, lactoz)- pt. enterobacterii: sruri biliare + lactoz + rou neutru; mediul SS (Salmonella Shigella) sruri biliare + verde briliant + lactoz + rou neutru + sruri de fier mediul Chapman - pt. stafilococi: NaCl 7,5% + manitol + rou fenol mediul ABE (agar bil esculin) pentru enterococi 5) Medii difereniale: permit identificarea bacteriilor pe baza unor procese biochimice geloza lactozat: lactoz + albastru de bromtimol se studiaz fermentarea lactozei SIM (hidrogen sulfurat, mobilitate, indol): agar semisolid pentru studiul mobilitii, bogat n triptofan pentru studiul producerii de indol i coninut de sruri de fier pentru detectarea producerii de hidrogen sulfurat TSI (triple sugar iron) conine glucoza, lactoza, zaharoza pentru studiul fermentrii acestora, sulfat de Fe pentru detectarea produceii de hidrogen sulfurat Simmons mediu cu citrat pentru studiul folosirii citratului ca unica surs de carbon mediul cu uree (Christensen agar): uree + rou fenol pentru detectarea activitii ureazice

Metode de nsmnare
nsmnare: punerea n contact a unei culturi bacteriene sau a unui produs patologic cu mediile de cultur. Izolare: repicarea unei singure colonii pe alte medii de cultur cu scopul de a obine cultur pur Cultur bacterian: totalitatea bacteriilor crescute n/pe suprafaa unui mediu de cultur Colonia bacterian: bacteriile ce iau natere n cursul incubrii prin multiplicarea unei singure bacterii ajunse pe suprafaa unui mediu solid, ce formeaz o grmad vizibil cu ochiul liber

Tehnica nsmnrii prin epuizare: Scop: obinerea coloniilor izolate

2.

3.

4.

5.