2.

Colorati prin metoda Z-N un frotiu din sputa

Coloratia ZEIHL-MEELSEN
pentru microorganismele cu o alta structura a peretelui
bacterian fata de celelalte
au in perete ceruri (acizi micolici)
se acopera lama cu sol. FUXINA BAZICA conc. 10 min
in aceste 10 min lama se incalzeste pana la emiterea de
vapori de cel putin 3 ori, pentru a solubuliza cerurile si a
permite colorantului sa intre in celula
se spala cu apa
se acopera lama cu sol de ALCOOL-ACID (alcool 96o + HCl),
care decoloreaza frotiul. Timpul depinde de grosimea frotiului
intre 1-3 min
trebuie decolorat complet (devine alb)
se spala cu apa
se acopera lama cu sol. ALBASTRU DE METILEN 3-5 min
se spala cu apa
se usuca la toC camerei
se examineaza la MO cu imersie
se utilizeaza in suspiciunea de tuberculoza
In urma acestei colorari,la examinare trebuie observat:
tip coloratie
tip frotiu (din cultura bacteriana pe mediu solid/ prelevat
clinic)
se pot vedea bacilli rosii pe fond albastru (frotiu +)

! ALCOOLUL-ACID nu decoloreaza bacilli acid-alcolo

rezistenti (BAR) => se coloreaza in rosu si apoi nu se mai
decoloreaza. Fondul albastru este necesar pentru o evidentiere
mai buna.
 3. Insamantati un produs patologic cu geloza

Medii de cultura= subtratul solid/ semisolid/ lichid pe care

cresc si se inmultesc bacteriile
Compozitie mediu de cultura:
apa 1l
sare (NaCl) 3,5 g
peptone= fragmente mici de protein,pana la aminoacizi
10 g
=> bulion simplu / bullion nutritive (mediu lichid de culoare
usor galbuie)
+ geloza (agar-agar) : - se combina cu o cantitate mare
de apa si apoi se solidifica
- NU are capacitate nutritiva
=>
=> geloza simpla / geloza nutritiva (mediu solid

4. Antibiograma difuzimetrica

Principiu: Prin depunerea de discuri cu antibiotic pe suprafata

unui mediu de cultura insamantat anterior,antibioticele din
discuri vor difuza in mediu si vor determina o zona de inhibitie
a cresterii bacteriene in jurul fiecarui disc,direct proportional cu
sensibilitatea bacteriei testate la acel antibiotic
Citirea:
 se masoara cu rigla/sublerul electronic a diametrului zonei
de inhibitie a cresterii bacteriene din jurul fiecarui disc in
mm
se interpreteaza in SIR utilizand tabelele din ghiduri
( EUCAST, BREAKPOINTS)
S sensibil
I intermediar
R rezistent

5. Reactia ASLO

ASLO( = antistreptolizina O)
test care identifica daca pacientul este infectat cu streptococ
-hemolitic
titrul ASLO > 200 unit international/l => infectie cu
streptococ -hemolitic
se pune intr-un tub ser de la pacient
se adauga antigen SLO= streptolizina O
se adauga eritrocite de oaie
reactia se lasa pentru a se dezvolta
citire:
eritrocite adunate in buton la fundul tubului: ASLO +
(exista anticorpi ASLO)
hemoliza: ASLO

6. Reactia de aglutinare pentru identif antigeneulor de

suprafata

Principiu:
Ub AG in suspensie formeaza prin cuplare cu AC omolog un
aglutinat, o aglomerare vizibila care se depune si lasa
supernatantul liber.
- calitativa

Executie:
Se realizeaza o suspensie f densa a tulpinii de testat in sol
salina izotona
Se depun pe o lama de microscop cate o picatura din
suspensia bacteriana si din serul de referinta
Se amesteca cele 2 picaturi

Interpretare:
Citire dupa 1 minut: tulpina de testat + serul de referinta =
martor pozitiv
tulpina de testat + sol salina = martor
aglutinare

7. Reactia de fixare a complementului

RFC = Reactia prin fixarea complementului

se depisteaza anticorpii din sangele pacientului
prin fierbere se elimina complementul din ser
pas 1:
se pune intr-un tub serul pacientului
se adauga antigen
se adauga complement
rezultat:
 complex antigen-anticorp: complementul este fixat de
acest complex
fara complex: complement liber,capabil de alte reactii
pas 2:
se adauga : eritrocite de oaie sia nticorpi anti eritrocite de
oaie
Se vizualizeaza reactia:
complement nefixat in etapa 1: se activeaza complexul
anticorpilor din eritrocitele de oaie => eritocite aglutinate
in buton (RFC +)
hemoliza (RFC -)