Nivelurile de citokine din cavitatea orală sunt mai

mult legate de nivelurile de plasmă si ARN-ul HIV-1

oral decât de numărul de celule T CD4 + la
persoanele cu HIV
Joseph M. Rocco,, Zachary York, Chengli Shen, Caroline Shiboski, Jennifer Cyriaque-Webster, Janet McLaughlin, Luann Borowski,
Huichao Chen, Judith A. Aberg, Dirk P. Dittmer, Mahmoud Ghannoum, Charles R. Rinaldo, and Bernard Macatangay
University of Pittsburgh, Pittsburgh, Pennsylvania, USA, University of Wisconsin-Madison, Madison, Wisconsin, USA, University of California San
Francisco, San Francisco, California, USA,
University of North Carolina at Chapel Hill, Chapel Hill, North Carolina, USA, Harvard T.H. Chan School of Public Health, Boston, Massachusetts, USA,
Icahn School of Medicine at Mount Sinai, New York, New York, USA, and Case Western Reserve University, Cleveland, Ohio, USA

Background: Am determinat nivelurile de 11 mediatori imunizabili solubili în spălările orale ale

SIDA Clinical Trials Group A5254 participanți cu diferite grade de viremie plasmatică și număr
de celule T CD4 pentru a caracteriza răspunsul imunitar al mucoasei la diferite stadia ale
infecției cu HIV-1.
Metode: A5254 a fost un studiu transversal multicentric la persoanele cu HIV (PWH) recrutate
în 4 straturi pe baza numărului de CD4 și niveluri de viremie plasmatică: strat (St) A: CD4 ≤200
celule / mm3, ARN HIV-1 (sarcină virală [VL])> 1000 cps / mL; St B: CD4 ≤200, VL≤1000; St
C: CD4> 200, VL> 1000; St D: CD4> 200, VL ≤1000. Spălaturile orale / ale gâtului au fost
obținute de la toți participanții. Markerii solubili au fost testați în spălături orale / gât folosind o
platformă fluorescentă multibead și au fost comparați între straturi. Regresia liniara a fost
utilizata pentru a determina asocierile dintre citokine și HIV-1 în plasmă și lichid oral.
Rezultate: Participanții St A au avut un nivel mai ridicat de interleukină (IL) -1β, IL-6, IL-17,
factorul de necroză tumorală alfa (TNFα) și interferon gamma (IFNγ), comparativ cu St B și D
(P = .02; P <.0001), dar nu au fost diferite de St C. IL-8, IL-10 și IL-12 au fost crescute în St A
comparativ cu celelalte 3 straturi (P = .046; P <.0001). Regresia liniară a demonstrat că nivelurile
orale ale HIV-1 au fost asociate cu producția de IL-1β, IL-6, IL-8 și TNFα (R> .40; P <.001),
atunci când se controlează numărul de CD4 și infectiile oportuniste.
Concluzii: Rezultatele noastre arată că nivelurile ridicate de HIV-1 oral, mai degrabă decât
numărul scăzut de CD4, au fost legate de producerea de mediatorii orali imuni. Participanții cu
SIDA și viremie necontrolată au demonstrat niveluri mai mari de mediatori orali solubili pro si
anti-inflamatori, în comparație cu participanții cu ARN HIV-1 mai scăzut. Interacțiunea HIV-1 și
a acestor mediatori imuni ar putea fi importanta în sănătatea orală a PWH.
Cuvinte cheie: HIV-1; citokine; oameni; răspuns imun; salivă.
 Infecția cu HIV-1 perturbă imunitatea mucoasei orale, dar patogeneza acestei dregregări
imune rămâne neclară. Infecția progresivă cu HIV-1 și deficiența imunitară ulterioară, crește
sensibilitatea la o varietate de oportunități orale infecții (OI), inclusiv candidoză orală,
leucoplazie păroasă, și sarcomul lui Kaposi. La indivizii sănătoși, imunitatea orala mucozala este
menținută de o combinație de componente celulare și moleculare. Celulele epiteliale mențin
mucoasa barieră, receptorii de recunoaștere a modelului expres, secretand citokine și peptide de
apărare a gazdei ca răspuns la stimulii patogeni. O varietate de celule imune ajută, de asemenea,
la întreținerea imunității mucoasei și a microbiomului oral
În timpul infecției cu HIV-1, saliva este cunoscută ca particule virale portale, citokine și
anticorpi anti-HIV-1. Infecția cu HIV-1 este considerata că poate provoca o imunizare
semnificativă orală prin modificarea expresiei citokinei locale, conducând la modificări în
imunitatea înnăscută locală și, ulterior, un răspuns imun slab la expunerile infecțioase. Multiple
variabile s-au dovedit a avea impact asupra producției orale de mediatori solubili imunitari
în timpul infecției cu HIV-1, inclusiv utilizarea ART, numarul celulelor T CD4, sarcina virală
HIV-1 (VL), fumatul, infectii oportuniste și timpul de la diagnosticul HIV-1. In orice caz,
contribuția relativă a acestor factori la răspunsul oral al citokinei rămâne nedefinit.
Ne-am propus să evaluăm efectele viremiei HIV-1
și celulele T CD4, privind imunitatea orală, folosind probele din spălaturile orale / ale gâtului,
plasma HIV-1 VL, numărul de celule T CD4 și datele demografice obținute prin intermediul
grupului de studii clinice SIDA (ACTG) Protocolul A5254. Acest studiu transversal a urmarit
dacă specialiștii nonprofesionali în domeniul sănătății orale ar putea diagnostica cu exactitate
leziunile orale comune la această populație.
Un studiu asemanator ca cel de mai susm realizat de Dittmer și colab. folosind aceeași
populație de pacienti a prezentat rate crescute de detectare a citomegalovirusului (CMV) și
virusul herpes simplex – 1 (HSV-1), dar nu Epstein- Virus Barr (EBV) sau herpesvirus uman 8
(HHV8, precum Kaposi) herpesvirus asociat cu sarcom) în cavitatea orala a celor cu SIDA și un
VL HIV-1> 1000 exemplare / ml [13]. Doar secretia orala de CMV a fost direct asociată cu
plasma HIV-1 VL când s-a realizat controlul pentru celelalte variabile.
În studiul de față, folosind datele clinice obtinute anterior și probele de spălaturi orale /
ale gâtului crioprezervate de la ACTG A5254, am determinat asocierea între nivelurile de plasmă
și ARN HIV-1 orale și numarul de celule T CD4 din expresia mediatorilor solubili orali de
interleukină (IL) -1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, interferon gamma
(IFNγ) și factorul de necroză tumorală alfa (TNFα). Pentru a furniza o evaluare cuprinzătoare,
am măsurat atât citokinele pro, cat si cele anti-inflamatorii, care sunt asociate cu imunitatea
înnăscută și diferite răspunsuri ale celulelor T-helper (Th1, Th2, Th17), astfel putand observa
mai bine efectele acestor variabile asupra imunitatii locale ale mucoasei orale. De asemenea, am
evaluat impactul oral ale co-infecției cu Candida, CMV, EBV, HSV-1 și HHV-8 pe nivelurile de
mediatori solubili.
METODE

Design-ul studiului

ACTG A5254 este un studiu transversal multicentric care s-a înscris in PWH de 18 ani
sau mai mult, cu sau fără utilizarea prealabilă a acestora ART pe 5 site-uri clinice din Statele
Unite și 1 din Haiti. Participanții au avut plasmă cu ARN HIV-1 VL și un număr de celule T
CD4 obținut în timpul înscrierii. Cei care primeau ART trebuiau să fie pe același regim cu cel
puțin 12 săptămâni înainte de înscriere.
Participanții care nu iau in acest moment ART trebuie să fi oprit toate acestea cu cel puțin
30 de zile înainte de intrarea în studiu. Profilaxia OI nu a fost inclusă în criteriile de incluziune,
insa utilizarea terapiei antifungice sistemice în termen de 90 de zile de la înscriere a fost un
criteriu de excludere. Comisia instituționala de revizuire sau comitetul de etică al fiecărui
participant a aprobat studiul și fiecare pacient a dat informații scrise si a semnat un
consimţământ. Informații detaliate despre acest studiu și caracteristicile populatiei au fost
publicate anterior.
Participanții au fost împărțiți în 4 straturi în funcție de depistarea numărului de celule T
CD4 și VL ARN HIV-1 indiferent de indiferent dacă erau pe ART ( Tabelul 1 ).

Strat A: CD4 ≤200 celule / mm3, plasmă HIV-1 VL> 1000 nr / ml

Strat B: CD4 ≤200 celule / mm3, plasmă HIV-1 VL ≤1000 nr / ml
Strat C: CD4> 200 celule / mm3, plasmă HIV-1 VL> 1000 nr / ml
Strat D: CD4> 200 celule / mm3, plasmă HIV-1 VL ≤1000 nr / ml

O spălare orală / gât de 1 minut folosind 10 ml de soluție salină sterilă a fost colectata și
congelata în alicote la -80 ° C. Probele din spălarile orale / ale gâtului au fost utilizate pentru a
măsura ARN-ul oral HIV-1 și mediatorii imuni solubili. Număr CD4 și niveluri de ARN HIV-1
în ambele plasme și fluidul oral au fost măsurate în Laboratorul Clinic de Imbunatarire a
Modificarilor (CLIA) - laboratoare verificate individual de laboratorul care participă la ACTG în
A5254.

Evaluarea mediatorilor imuni solubili orali, a infecțiilor și a OI

Au fost decongelate probele de spălare orală / gât crio-prezervate, și concentrațiile de

citokină orală de IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6. Au fost analizate IL-8, IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, IFNγ
și TNFα folosind o platformă electrochemiluminiscență (Meso Scale Discovery, Rockville, MD,
SUA). Cantitativ, în timp real reacția în lanț a polimerazeim a fost utilizată pentru a detecta
multiple herpesvirusuri (CMV, EBV, KSHV, HSV-1), așa cum este descris anterior. De
asemenea, a fost efectuat un examen oral OIs (de exemplu, candidoză, leucoplakia păroasă) de
către specialisti in sănătate orală la fiecare centru clinic ACTG participant. La toti participantii
s-a prelevat 2,5 ml din spălarile orale / ale gâtului si cultivat pentru prezența Candideim descries
anterior.

Analize statistice

Diferențele de citokine între fiecare strat au fost evaluate folosind testul Kruskal-Wallis
cu post-testul Dunn ajustat pentru comparații multiple pentru acomodarea distribuției non-
normale a datelor. Un software de analiză statistică GraphPad Prism a fost utilizat pentru a
efectua aceste analize și pentru a genera cifre.
Analiza de regresie liniară a fost utilizată pentru modelarea relației între producția de
citokine și VL oral sau plasmatic HIV, cu numarul celulelor CD4, candidozei orale și
herpesvirusurilor umane.
VL și citokinele au fost transformate în jurnalul acestei analize. Au fost luate în
considerare valorile P <.05 și valorile R ≥.40 semnificativ.

REZULTATE

Caracteristicile eșantionului

Dintre cei 328 de participanți care au fost înscriși în A5254, 288 participanți cu
exemplare disponibile și ARN HIV-1 oral au fost inclusi în această analiză (tabelul 1 ). Vârsta
medie a fost de 44 de ani, cu un raport de sex feminin: bărbat de ~ 2: 1. Participanții identificati
predominant ca rase negre, non-latino (72%), și nu au raportat niciun istoric de consum de
droguri intravenoase (85%). Majoritatea participanților au primit ART (67%) la intrarea in
studio și doar 8% au raportat un istoric al unei boli SIDA. Mai puțini participanți au fost înscriși
în straturile C și D (CD4> 200), întrucât scopul studiului inițial a fost recrutarea celor cu risc mai
mare de OI orale. Numărul total de OI orale cu HIV-1 a fost mare în rândul tuturor
participanților, cu rate de candidoză orală la 47%, leucoplakia păroasă la 12% și Sarcomul lui
Kaposi la 10%.

Tabelul 1. Demografia participanților la studiu

N = 288 A (n=148) B (n=82) C (n=29) D (n=29)

Varsta, medie, y 44 41 47 38 45
Sex %
Masculin 193 (67) 83 (56) 70 (85) 20 (69) 22 (75)
Feminim 95 (33) 65 (44) 12 (15) 9 (31) 7 (25)
Rasa %
Neagra, non-latino 207 (72) 132 (89) 48 (59) 18 (62) 12 (42)
Alba, non-latino 49 (17) 7 (5) 6 (7) 7 (24) 5 (17)
Latino 26 (9) 6 (4) 26 (32) 4 (14) 11 (38)
Alta 6 (2) 3 (2) 2 (2) 0 (0) 1 (3)
Cosum de droguri i.v. %
 Consumator 245 (85) 133 (90) 63 (77) 24 (83) 23 (79)
Neconsumator 3 (1) 2 (1) 1 (1) 0 (0) 1 (3)
Consumator in trecut 40 (14) 13 (9) 18 (22) 5 (17) 5 (18)
Terapie curenta cu antiretrovirale % 193 (67) 77 (52) 80 (89) 6 (21) 29 (100)
Istoric de boala SIDA % 23 (8) 7 (5) 10 (12) 3 (10) 2 (7)
ART = terapie antiretrovirala

Diferențele în producția orală a mediatorilor imunitari dintre straturi

Mediatorii imunitari pro-inflamatori TNFα, IL-1β, IL-6 și IL-8 au fost semnificativ mai
mari în stratul A comparative cu stratul B sau stratul D (P <.001) ( figura 1A – D ). Straturile A
și B erau formate din participanți cu CD4 ≤200 și au fost diferențiate doar de un ARN HIV-1 cu
plasmă> 1000 exemplare /mL în stratul A și ≤ 1000 exemplare / ml în stratul B. În schimb,
stratul D include doar acei participanți la studio CD4> 200 și plasmă ARN HIV-1 ≤ 1000
exemplare / ml. Producție IL-8 a fost, de asemenea, semnificativ crescut în stratul A comparativ
cu stratul C (P = .045), care ambele au avut viremie de> 1000, dar au fost diferențiate de un CD4
≤200 în stratul A și CD4> 200 în stratul C. În ciuda diferențelor de numar ale celulelor CD4, nu
există diferențe observate între straturile B și D, ambele având viremie <1000 cps / ml.

Figura 1. Diferențele de producție orală a factorului de necroză tumorală alfa (TNFα), interleucinei (IL)
-1β, IL-6 și IL-8 între straturi.
Au existat niveluri crescute atât de IL-12, cât și de IFNy în strat A comparat cu stratul B
(ambele P <.001) sau stratul D (P = .03 și respectiv P <.001) (figura 2A, B). În mod similar,
producția IL-12 a fost mai mare în stratul A comparativ cu stratul C (P = .002). IFNy a fost
singura citokină cu niveluri mai mari în stratul B și stratul C în comparație cu stratul D (P = .004
și respectiv P = .039) (figura 2B). IL-17, un lucru important a fost, de asemenea, citokină în
menținerea imunității mucoasei intestinale crescut în stratul A comparativ cu stratul B (P = .004)
sau stratul D (P = .021) (figura 2C). Între timp, nivelurile de IL-10, o citokină antiinflamatoare,
au crescut semnificativ în stratul A în comparație cu celelalte 3 straturi (P <.001) (Figura 2D).
Nu au fost observate diferențe substanțiale între straturile în niveluri de IL-2, IL-4 sau IL-13
(datele nu sunt prezentate).

Relația dintre plasmă HIV-1 VL și productia de mediator imun oral

Diferențele de markeri solubili între straturi, sugerează că Viremia HIV-1 influențează

mai mult decât regregarea citokinei diferențele în numărul de celule T CD4. Prin urmare, am
folosit modelarea regresiei liniare pentru a evalua relația dintre plasma HIV-1 VL și nivelurile
mediatorului imun oral pe parcursul controlului pentru numărul de celule T CD4, candidoză
orală și herpesvirus uman. Cele mai puternice asociații au fost observate între ARN HIV-1
plasmatic și TNFα (R = .53), IL-1β (R = .38), IL-6 (R = .42) și IL-8 (R = .42), toate cu valori P
<.001 (Figura 3A – D). Nu s-au găsit asociații semnificative între plasmă HIV-1 VL și IL-12,
IFNγ, IL-17, IL-10, IL-4, IL-13 sau IL-2 (datele nu sunt prezentate).

Relația dintre orală HIV-1 VL și producția orală de cytokine

Ca ARN HIV-1 oral corelat puternic cu HIV-1 cu plasma viremia (R = .76; P <.001), am
stabilit dacă nivelurile de HIV-1 în lichidul oral sunt, de asemenea, asociate cu nivelurile
mediatori imuni. Cele mai puternice asociații s-au remarcat între VOL HIV-1 oral și producția de
TNFa (R = .60), IL-1β (R = .45), IL-6 (R = .46) și IL-8 (R = 0,52) la control pentru numărul de
celule T CD4, OI și co-infecții (toate P <.001) (figura 3E – H). Deși asociațiile erau similare,
corelații ale nivelurilor mediatorului imun solubil cu HIV-1 oral ARN-ul a fost mai mare decât
cu ARN-plasmatic HIV-1. Fara importanta, asociații au fost identificate între V-HIV-1 VL și IL-
12, IFNγ, IL-17, IL-10, IL-4, IL-13 sau IL-2 (datele nu sunt prezentate).
 Figura 2. Diferențele de producție orală de interferon gamma, interleukin (IL) -12p70, IL-10 și IL-17 între
straturi.

Figura 3. Modelarea regresiei liniare demonstrează o asociere pozitivă între ARN-1 și plasmă HIV-1 și
producția de interleukină (IL) -6, IL-1β, necroză tumorală actor alfa (TNFa) și IL-8 atunci când se controlează
numărul de CD4 și infecțiile oportuniste.
Relația dintre numărul de celule T CD4, coinfecții și OIs și producția orală de cytokine
 Analize de regresie liniară suplimentare au fost efectuate pentru a evalua asocieri între
numărul de celule T CD4 și productia de citokină orală ce controlează HIV-1 VL, coinfectii și
OIs. Nu au fost identificate asociații între acești 3 parametri. De asemenea, am evaluat dacă OI
(candidoză orală) și herpesvirusul uman (CMV, EBV, HHV-8, HSV-1) au fost semnificativ
crescute de producerea de citokine specifice. Liniar, au fost efectuate regresii comparand fiecare
OI sau coinfecție cu citokine individuale, controland HIV-1 VL și numarul de celule CD4, dar nu
au fost găsite asocieri specifice (datele nu sunt prezentate). Apoi am efectuat aceeași analiză
folosind doar straturile B și D, deoarece majoritatea acestor participanți au fost la ART (terapie
antivirala) - (98% –100%) și, prin urmare, a reprezentat un exemplu mai pertinent
până la momentul actual de tratament HIV. Cu toate acestea, din nou, nu există candidoze orale
sau s-a se fi constatat boli asociate în mod semnificativ cu o producție semnificativa de citokine
din această populație (datele nu sunt prezentate).

DISCUTII

Prezentam o evaluare completa ale efectelor patogene a plasmei si HIV-1 VL orala

asupra citokinei bucale in cazul productiei diferite a numartului de celule T CD4. Am evaluat
mucoasa orala dupa producerea a 11 mediatori imunizabili solubili diferiți, precum și
administrarea orală de HIV-1 VL, candidoză orală și 4 herpesvirusuri umane (CMV, EBV, HSV-
1, HHV-8). La participanții cu infecție cu HIV-1 slab controlată (stratul A: CD4 ≤200, HIV-1
VL> 1000), a existat o creștere semnificativă a productiei orale la majoritatea citokinelor testate,
cuprinzand IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, IFNy și TNFa. Aceste citokine sunt asociate
atat cu raspunsurile imune pro- cât și antiinflamatorii si multe dintre ele corespund diferitelor
răspunsuri ale celulelor T de ajutor CD4, cuprinzand Th1 (IL-12, IFNγ), Th2 (IL-10) și Th17
(IL-17).
Această creștere aberanta atât pro- cat și antiinflamatoare a citokinelor apar
contraintuitiv, dar probabil reflectă severul grad de regregare a imunității mucoasei la acest
pacient din populatie. IL-10, o citokină antiinflamatoare, servește ca reglator critic al inflamației
și producerea acesteia este stimulate de mulți dintre aceiași receptori de recunoaștere a modelului
(PRR) care determină reacții imunitare pro-inflamatorii precoce. Această producție orală de
citokine oferă un potential risc ridicat de OI orale și coinfectii din acest grup.
Diferențele dintre straturi sugerează că HIV-1 VL este factorul semnificativ în
determinarea acestei producții de citokine. Acest lucru a fost demonstrat de scăderea dramatică a
nivelurilor de citokine de la stratul A la stratul B. Participanții la aceste straturi au avut numărul
de CD4 ≤200; cu toate acestea, cei din stratul B au fost, în esență, toți (adică 98%) pe ART
„eficace” cu viremie plasmatică controlată <1000 cps / mL. Această scădere semnificativă a
producției de citokine între stratul A și stratul B a fost observată la toate citokinele, care au fost
crescute în stratul A (IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, IFNγ , TNFa). O scădere similară a
producției a fost observată la fiecare dintre aceste citokine între stratul A și stratul D. Toți
participanții la stratul D au fost, de asemenea, bine controlați la ART, cu viremie plasmatică
<1000 cps / mL și număr de CD4> 200.
 Comparațiile noastre privind nivelurile de citokină orală, numărul de celule T CD4 și atât
V-ul HIV și sângele VI-1 în timpul ART „efective” au o importanță deosebită. Un studiu recent
în secțiune transversală realizat de Elizondo și colaboratorii, a comparat producția de citokine de
fluid crevicular gingival bazată pe durata ART (non-ART, ARTnaïve [ART <1 an], ART pe
termen scurt [> 1 an și <6 ani] și ART pe termen lung [> 6 ani ]) și a găsit IL-6, IL-7, IL-10 și
IL-12 crescute în lichidul crevicular gingival al grupului non-ART comparativ cu celelalte. Spre
deosebire de rezultatele noastre, nu au fost gasite diferențe ale citokinelor pro-inflamatorii (IL-
1β, IL-8, IL-17, TNFα, IFNγ) între aceste grupuri. Ei au ajuns la concluzia că viremia HIV-1 și
ART sunt factori importanți în exprimarea citokinei orale.
Lomeli-Martinez și colaboratorii au arătat că participanții cu un număr mai mic de CD4
(CD4 ≤200) care nu erau pe ART aveau niveluri mai mari de IFNγ, IL-10, IL-6 și IL-4,
comparativ cu cei cu număr de CD4> 200 pentru ART. De asemenea, au descris producția orală
crescută de TNFa, IFNγ, IL-10 și IL-4 la participanții cu număr de CD4 ≤200, comparativ cu cei
cu CD4> 200, chiar și atunci când ambele grupuri au fost pe ART. Au existat diferențe în VL
plasmatic HIV-1 între aceste grupuri, dar nu au evaluat asociațiile dintre viremia plasmatică și
producția orală de citokine. Studii similare transversale realizate de Nittayanta și colaboratorii
compara producția de mediatori imunitari orali între PWH si durata ART. Spre deosebire de
studiile anterioare, aceștia au arătat o producție crescută de IL-8 și β-defensină umană la
participanții la ART pe termen scurt și lung, comparativ cu niciun ART; cu toate acestea, nu au
raportat nicio diferență în producția de TNFa sau IL-6. De asemenea, nu au găsit nicio diferență
în producția de citokine la indivizii cu HIV-1 VL plasmatic <50 cps / ml în comparație cu cei cu
HIV-1 VL ≥50 cps / mL.
Aceste studii anterioare combinate cu rezultatele noastre evidențiază implicarea
complexă a mai multor variabile în producerea mediatorilor imunitari orali; cu toate acestea,
ART și HIV-1 VL par a fi cruciale în acest proces. Alte variabile, cum ar fi infecțiile cu Candida
și herpesvirus, s-au dovedit în mod constant că afectează imunitatea mucoasei orale. Prin urmare,
pentru a evalua mai eficient asocierea între V-1 și plasma cu HIV-plasmă în termeni de producție
individuală de citokine, am efectuat o analiză de regresie liniară pentru a controla variabilele
cheie precum numărul de CD4, OI (candidoză) și infecțiile cu herpesvirus (CMV, EBV , HSV-1,
HHV-8).
Regresia liniară a identificat TNFa, IL-1β, IL-6 și IL-8 ca având cele mai puternice
asocieri cu V-1 VL și cu plasmă orală și folosind un R valoare> .40 la fel de semnificativă. IL-
10, IL-12, IL-17 și IFNy au avut asocieri mult mai slabe cu HIV-1 VL, cu valori R în jur de 0,10.
Spear și colaboratorii a efectuat un studiu similar în 2005 și nu a găsit asocieri semnificative între
ARN saliva HIV-1 și producția orală de citokine (IL-1β, IFN-y, IL-10, IL-6, TNF-α). Cu toate
acestea, nu au efectuat o analiză de regresie liniară și nu au putut controla potențialii confuzi. De
asemenea, au avut o dimensiune mai mică a eșantionului și au detectat ARN HIV-1 salivă la doar
20 de participanți, explicând potențial discrepanța dintre rezultatele noastre.
Interacțiunile din cadrul rețelei de citokine sunt complexe, dar TNFa, IL-1β, IL-6 și IL-8
au caracteristici comune care ar putea explica asocierea lor puternică cu viremia HIV-1 în studiul
nostru. Sunt citokine relativ nespecifice, proinflamatorii, care sunt eliberate devreme în răspunsul
imun înnăscut. Acestea sunt secretate de celulele imune, împreună cu celulele epiteliale,
keratinocitele și fibroblastele. Astfel, estimăm că o povară virală ridicată a mucoasei bucale ar
stimula în mod persistent PRR-urile locale asupra celulelor epiteliale și imune, conducând la
producerea acestor mediatori pro-inflamatori timpurii.
O limitare notabilă a studiului nostru este că 52% dintre participanții la stratul A au fost
tratați cu ART, dar aveau VL HIV-1> 1000. Deși aceasta este o confuzie pentru rezultatele
noastre în stratul A, este important de menționat că straturile B și D oferă o reprezentare mai
precisă a participanților la ART „eficient”, cu> 98% pe ART și controlul viremiei HIV-1 ( <1000
cps / ml). Studiile descrise anterior demonstrează rezultate contradictorii privind utilizarea ART
și modificări în producția de citokine mucoase. Rezultatele noastre descriu diferențele pertinente
în mediatorii imunitari orali între participanții cu viremie necontrolată pe ART sau în afara (strat
A) comparativ cu cei care au tratat ART cu replicare eficientă a virusului HIV-1 (straturile B și
D). Pe baza acestor constatări și a rezultatelor de regresie liniară, producția plasmatică și orală de
HIV-1 VL are impact asupra mediatorilor imunitari. Studiile viitoare ar trebui să ia în
considerare nu numai starea ART, dar și controlul plasmei și al V-HIV-1 VL la evaluarea
imunității bucale.
În plus, îmbunătățirile producției de citokine mucoase între stratul A și stratul B sunt
susținute de observațiile clinice descrise în lucrarea inițială de Shiboski și colab. Prevalența
candidozei orale a fost de 71% în stratul A comparativ cu doar 22% în stratul B, ceea ce a fost
similar cu prevalența combinată a candidozei orale în straturile C și D (22%).
Alte limitări notabile ale studiului nostru includ dimensiunile mici ale eșantionului în
straturile C și D. Obiectivul principal al studiului inițial a fost evaluarea prevalenței OI orale și,
prin urmare, un număr mai mare de indivizi cu număr de CD4 ≤200 au fost înscriși în straturile
A si B. Evaluarea detaliată a sănătății parodontale nu a fost evaluată în mod obiectiv în studiul
nostru și nu am putut evalua efectul bolii parodontale asupra expresiei citokinei orale. Datorită
proiectării secțiunii transversale, datele clinice au fost disponibile doar dintr-o vizită și numai
probe de spălare orală / gât au fost colectate ca parte a protocolului de cercetare. În plus, conform
protocolului de cercetare inițial, a fost aleasă o întrerupere a plasmei HIV-1 VL> 1000 cps / ml
pentru a delimita straturile, mai degrabă decât suprimarea virală prin analize comerciale, ceea ce
ar putea limita generalizarea rezultatelor. În cele din urmă, un număr mare de participanți la
stratul A au fost înscriși în Haiti în comparație cu participanții la celelalte straturi, care au fost în
mare parte înscriși de pe site-urile interne din SUA; aceasta reprezintă un potențial confuz.
HIV-1 este asociat cu imunitatea mucoasei bucale compromise. Studiul nostru
demonstrează o regregare imună orală severă la participanții cu viremie slab controlată și număr
scăzut de CD4, ceea ce contribuie probabil la creșterea prevalenței OI orașului și la coinfecția cu
herpesvirusuri în această populație. Această disfuncție imunitară orală este asociată direct cu
cantitatea de virus HIV-1 prezent atât la nivel local, cât și sistemic, deși sunt implicate și alte
variabile, inclusiv numărul de CD4, OI și coinfectiile cu herpesvirus. S-a înregistrat o
îmbunătățire notabilă a degradării citokinei orale cu utilizarea ART și suprimarea viremiei HIV-
1, ceea ce a dus la restabilirea clinică a imunității mucoasei. Aceste îmbunătățiri au scăzut riscul
de candidoză orală și au redus vărsarea herpesvirusurilor umane. Cu toate acestea, este bine
stabilit că imunitatea sistemică nu revine la un nivel de referință cu suprimarea virală HIV-1 sau
normalizarea numărului de CD4. Deficitele imune subtile persistă la nivelul mucoasei bucale,
fapt dovedit de rate mai mari de boli parodontale și de infecții cu HPV, chiar și la cei cu infecție
HIV-1 controlată în ART. Studiile viitoare privind mecanismele inflamației cronice și impactul
acestora asupra microbiomului oral în infecția HIV-1 bine controlată sunt esențiale.

RECUNOASTERI

Am dori să exprimăm aprecierea noastră sinceră participanților la studiul A5254 și

echipelor de investigare ale site-urilor de cercetare clinică ACTG care au înscris participanții la
protocolul A5254.
Site-uri și contribuitori la protocolul A5254. Jean William Pape, MD, Patrice Sévère,
MD, Rode Secours, MD, Daphné Bernard, MD, și Maria Linda Aristhomène, RN — Les Centers
Gheskio (Gheskio-INLR) CRS (Site 30022; ACTG CTU Grant U01 AI069421). Caroline
Shiboski, DDS, MPH, PhD, Sivappiriyai Veluppillai, DDS, Amanda Hutton Parrott, DPT, NP și
Jay Dwyer, RN — UCSF AIDS CRS (Site 801) (ACTG CTU Grant UM1 AI069496). Judith A.
Aberg, MD, Karen Cavanagh, RN, Alexander Ross Kerr, DDS, MSD, Sonal S. Shah, DDS și
Manley Lammarre, RDH — New York University HIV / SIDA CRS (Site 401; ACTG CTU
Grant UM1AI069532). Jennifer Webster-Cyriaque, DDS, PhD, Jonathan Oakes, BA, Dirk P.
Dittmer, PhD și Lauren Patton, DDS — Chapel Hill CRS (Site 3201; ACTG CTU Grant UM1
AI069423-08, CTSA Grant 1UL1TR001111, Center for SIDA Research Grant P30 AI50410,
RO1 DE018304). Jeffrey Lennox, MD, Dale Maddox, RN și David A. Reznik, DDDS — Ctr-ul
Ponce de Leon. CRS (Site 5802; Grantul CTU al Universității Emory HIV / SIDA
5UO1AI069418, Centrul de finanțare pentru cercetarea SIDA P30 AI050409, Premiul pentru
științe clinice și translaționale UL1 RR025008). Michael Lederman, MD, Jane Baum, RN,
Mahmoud Ghannoum, doctorat, Nancy Isham și Richard Jurevic — Caz CRS (Site 2501; ACTG
CTU Grant AI069501).
Sprijin financiar. Acest studiu a fost susținut în parte de Institutele Naționale de
Sănătate (grant UM1-AI106701), de Institutele Naționale de Sănătate Acord de cooperare
U01AI068636 de la Institutul Național de Alergii și Boli Infecțioase și Institutul Național de
Cercetări Dentare și Craniofaciale și de către intern finanțare de la Departamentul de Medicină al
Universității din Pittsburgh School of Medicine.
Posibile conflicte de interese. Toți autorii: nu au fost raportate conflicte de interese. Toți
autorii au trimis formularul ICMJE pentru dezvăluirea conflictelor de interese potențiale. Au fost
dezvăluite conflictele pe care editorii le consideră relevante pentru conținutul manuscrisului.