Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Facultatea de Medicină,
Fiziopatologie II, INBI ,,Prof. Matei Balș”
Metabolismul proteic
Enzimele
2018-2019
CUPRINS
1. Definiție – Generalități
2. Localizarea enzimelor
ttp://biology200.gsu.edu/houghton/2107%20%2713/lecture18.htm l
2. LOCALIZAREA ENZIMELOR
Enzimele sunt localizate specific: organite celulare, citoplasmă, localizare
mixtă (organite celulare și citoplasmă), sânge.
Exista izoenzime (sunt enzime cu secvența aminoacizilor diferită, care însă
catalizează aceeași reacție) cu specificitate pentru anumite țesuturi.
Cunoașterea localizarii lor este utilă în orientarea asupra funcționalității unor
organe, având valoare diagnostică.
ttp://biology200.gsu.edu/houghton/2107%20%2713/lecture18.html
2. LOCALIZAREA ENZIMELOR
! O leziune celulară ce determină eliberarea din celule a
enzimelor mitocondriale este mai gravă decât o leziune limitată
la membrana celulară ce determină doar ieșirea enzimelor
citoplasmatice.
În mod fiziologic, există gradiente de concentrație enzimatică:
pe de o parte între diferite organe și țesuturi,
pe de altă parte între acestea și plasmă.
ttp://biology200.gsu.edu/houghton/2107%20%2713/lecture18.html
3. INDICAȚIILE DIAGNOSTICULUI
ENZIMATIC
a ) Scop diagnostic
Denisa Mihele. Biochimie clinica. Editia aII-a. Editura medicala. Bucuresti, 2010.
5. CLASIFICAREA STRUCTURALĂ A
ENZIMELOR
Enzime:
- cu structură unitară (alcatuite numai din aminoacizi):
tripsina, chemotripsina, pepsina, lipaza
- cu structură binară alcatuite dintr-o parte proteică
(apoproteina) și o parte neproteică (cofactor)
Cofactorii- substanțe de natură neproteică ce conferă activitate enzimatică
apoproteinei (ex: ioni metalici, vitamine, coenzime).
http://notesforpakistan.blogspot.ro/2010_12_13_archive.html
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.1 ENZIMELE PLASMATICE FUNCȚIONALE
Enzime sintetizate în ficat cu rol activ în plasmă (se mai numesc și proteine
intrinseci).
Plasma este locul lor de acțiune și se găsesc aici la un nivel mai ridicat decât în restul
țesuturilor.
Exemple:
pseudocolinesteraza,
lipoproteinlipaza,
Lecitin-colesterol-acil-transferaza (LCAT),
ceruloplasmina.
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.1 ENZIMELE PLASMATICE FUNCȚIONALE
Colinesteraza serică
Rol:
Acetilcolinesteraza (hematii, țesut nervos) - în terminaţiile nervoase rol în
transmiterea influxului nervos;
Pseudocolinesteraza (colinesteraza plasmatică) - în hepatocite; rol în
metabolismul proteic.
Metode de dozare:
metoda rapidă - virajul de culoare produs de acidul acetic eliberat de enzimă
prin hidroliza acetilcolinei;
metoda Michel sau macrometoda - utilizează acetilcolina ca substrat eliberând
acidul acetic titrabil cu soluţie NaOH N/100;
metoda colorimetrică sau micrometoda - în hidroliza butiril-tiocolinei.
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.1 ENZIMELE PLASMATICE FUNCȚIONALE
Colinesteraza serică
Valori normale:
- afecțiuni hepatice,
Colinesteraza serică
Valori crescute:
obezitate
(în special, obezitatea viscerală – există lipoliza indusă de stimulii adrenergici cu
eliberarea de acizi grași liberi care stimulează sinteza de lipide și proteine în hepatocit)
sindrom nefrotic
(crește prin accelerarea sintezei hepatice de proteine, cu caracter compensator, ca
răspuns la pierderea lor pe cale urinară; are greutate moleculară mai mare comparativ
cu albumina)
miastenia gravis
(colinesteraza hidrolizează acetilcolina din placa neuromusculară reglând transmiterea
impulsurilor nervoase; lipsa legării acetilcolinei de receptorii specifici determină
creșterea consecutivă a activității colinesterazei)
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.1 ENZIMELE PLASMATICE FUNCȚIONALE
Colinesteraza serică
Valori scazute:
deficit congenital: - deficit enzimatic :
Succinilcolina - relaxant muscular (anestezic)- inhibă reversibil acetilcolinesteraza
- hidrolizată de colinesteraza serică
- medicamentul nu este metabolizat rapid - apnee prelungită
deficit de aport – malnutriție
deficit de sinteză:
- insuficiența hepatică (din hepatite acute severe, ciroze hepatice decompensate)
Enzime care nu prezintă funcții fiziologice în plasmă (sunt denumite și proteine extrinseci).
Se găsesc în plasmă în concentrații mult mai mici decât concentrația lor din țesuturi.
În multe cazuri plasma este deficitară în cofactori necesari pentru activarea optimă a acestor enzime.
- apariția unor perturbări a proceselor energetice celulare (citokine, acidoză și sepsis) asupra
membranei celulare, determină scăderea concentrației de ATP din celule și se repercută asupra
permeabilității membranei celulare;
- aceasta explică creșterea nivelului plasmatic al unor enzime (ex.: creatinkinaza) în cursul
efortului fizic intens;
4.obstrucție
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.1 Enzimele excreto-secretorii
Sunt sintetizate la nivelul unui organ (ex: pancreas) și au acțiune la distanță (ex: la
nivelul tubului digestiv).
Se secretă în cantități ridicate și sunt eliminate rapid și complet, prin canalele excretoare.
Activitatea enzimatică va crește atunci când:
- calea de excreție este blocată
- rata de producere este crescută
În afecțiuni pancreatice activitatea plasmatică a enzimelor secretorii este crescută (există
depozite la nivelul pancreasului, din care enzimele se eliberează în funcție de prezența
unor stimuli specifici).
Exemple:
amilaza pancreatică (scindează carbohidrații)
lipaza (scindarea trigliceridelor)
tripsina (scindarea proteinelor)
pepsinogenul (scindarea proteinelor)
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.1 Enzimele excreto-secretorii
Amilaza serică
Valori normale: 25-125 UI/l
Localizare: salivă, pancreas, ficat, intestin subțire și în cantități mici, în organele
genitale
Rol: catalizează degradarea hidrolitică a hidraților de carbon (poli- și oligozaharidelor)
Structura : două forme izoenzimatice principale:
- amilaza salivară (60% din amilaza serică normală)
- amilaza pancreatică (40% din amilaza serică normală)
Valori crescute – pancreatita acută:
- crește la 3-6 ore de la debutul afecțiunii (apariția durerii)
- atinge un nivel maxim la 20-30 de ore și se normalizează după 2-8 zile
- poate crește până la 30-40 de ori peste valoarea normală (pancreatita acută cu
necroză extinsă)
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.1 Enzimele excreto-secretorii
Lipaza serică
Valori normale: 20-160 UI/l
Localizare: pancreas
Rol: în prezența sărurilor biliare, transformă grăsimile în acizi grași și glicerol
Structura: nu are izoenzime
Valori crescute – pancreatita acută:
-crește la 3-6 ore, atinge un nivel maxim la 24 ore de la debutul afecțiunii și poate
persista până la 2 săptămâni
- specificitate mai mare pentru pancreas decât amilaza
- nivelurile crescute persistente peste 3 săptămâni reflectă prezența de complicații
(pseudochist) sau neoplasm pancreatic
Creșterile amilazemiei și lipazemiei sunt concomitente și se asociază cu
creșterea nivelului urinar al acestor enzime.
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.1 Enzimele excreto-secretorii
1. Afecțiuni pancreatice:
2. Alte afecțiuni:
Enzime sintetizate în celule, unde îndeplinesc un rol activ
Ajung în plasmă prin modificarea permeabilității membranei
celulare sau prin distrucție celulară (citoliză)
Unele au specificitate pentru un anumit tip de țesut deci
modificarea activității lor plasmatice poate orienta asupra sediului
de organ al unei leziuni
Exemple:
- Fosfatazele alcaline
- Lactatdehidrogenaza – LDH;
- Leucinaminopeptidaza – LAP;
- Creatinkinaza - CK;
- Troponina, - 5 Nucleotizada - 5 NT;
- Aspartat aminotransaminaza - AST; - Fosfatazele acide
- Alanin aminotransaminaza – ALT;
- Gama glutamiltranspeptidaza – GGT;
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Lactatdehidrogenaza (LDH)
Rol:
• enzimă a glicolizei, care catalizează reacția reversibilă piruvat-lactat
http://proteopedia.org/wiki/index.php/User:Kelly_Roark/Sandbox1
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Lactatdehidrogenaza (LDH)
Lactatdehidrogenaza (LDH)
Valori crescute:
arată o liză celulară, fără a ne putea orienta pentru localizarea leziunii
Afecțiuni cardiace - LDH total crescut prin creșterea LDH1 și LDH2 (LDH1>LDH2);
Afecțiuni hematologice - LDH total crescut prin creșterea LDH1 și LDH2
(LDH1<LDH2);
Afecțiuni hepatice sau musculare - LDH total crescut prin creșterea LDH4 și
LDH5.
stări de șoc –LDH total crescut prin creșterea tuturor izoenzimelor
Dozarea LDH total din sânge nu poate fi folosită ca indicator specific pentru nici o
afecțiune, din cauza răspândirii largi a enzimei.
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
• Lactatdehidrogenaza (LDH)
Valori crescute:
• Raportul LDH1/LDH2 peste 0,75 are specificitate și sensibilitate de peste 90% pentru
necroza miocardică
http://www.smartdraw.com/examples/view/cardiac+enzyme+graph+of+the+cardiovascular+system/
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
. Creatin-kinaza (creatin-fosfokinaza, CK)
Valori normale:
• bărbat : 55-170 U/l
• femeie: 30-135 U/l
Rol:
- catalizează reacția
creatina+ATP=creatinafosfat+ADP CK-
CK-MB CK-BB
MM
Structura - dimer cu 3 izoenzime în Mușchi
99 1 0
funcţie de combinarea celor 2 tipuri de scheletic
lanțuri M (muscle) și B (brain) Miocard 77 22 1
Creier 4 0 96
http://www.medbio.info/Horn/Time%206/muscle_metabolism_april_2008.htm
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Creatin-kinaza (creatin-fosfokinaza, CK)
Izoenzima CK MB
Valori crescute:
http://ww2.odu.edu/~czemlin/heartattacks.html
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Creatin-kinaza (creatin-fosfokinaza, CK)
Izoenzima CK MM
Valori crescute:
o Distrofia musculară progresivă =afecțiune genetică determinată de lipsa distrofinei (proteină citoscheletală cu rol în stabilizarea
sarcolemei); caracterizată prin deficit motor și amiotrofii progresive generalizate;
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Creatin-kinaza (creatin-fosfokinaza, CK)
Izoenzima CK BB
edem cerebral,
accident vascular cerebral,
traumatisme cranio-cerebrale,
tumori cerebrale,
anestezie generală,
Intoxicații cu somnifere,
electroşoc
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Troponina
Valori normale : TnT < 0,1 ug/L, TnI< 0,1 ug/L
Structura: 3 tipuri: I, T, C
Troponina
Valori crescute – afecțiuni ce implică un grad de necroză miocardică, indiferent de cauză
(anoxie, contuzie , inflamație)
• diagnosticul IMA
• estimarea dimensiunilor IMA
• evaluarea pacienţilor cu angină pectorală
instabilă
• detectarea reperfuziei coronariene
• detectare IMA apărut perioperator
• determinări în dinamică ca indicator al
rejetului allogrefei cardiace
• traumatisme cardiace
http://odlarmed.com/?p=3314
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Troponina – Izoenzima Tn I
Valoare normală < 0.1 ug/L
Rămâne crescută mai mult timp decât CK MB și are specificitate mai mare pentru
leziunile cardiace
Valori crescute:
• Afecțiuni cardiace: infarctul miocardic acut, angina instabilă, miocardita,
pericardita, tahicardie
• traumatisme cardiace: contuzii miocardice, angioplastie coronariană, cardioversie,
by-pass coronarian,
• Afecțiuni ale musculaturii striate
http://pro2services.com/lectures/Fall/CardEnz/cardenz.htm
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Troponina– Izoenzima Tn T
Valoare normala < 0.1ug/L
Mai puțin specifică în IMA
decât troponina I
Valori crescute:
• Afecțiuni cardiace: infarctul miocardic acut,
angina instabilă, miocardita, pericardita,
tahicardie
• traumatisme cardiace: contuzii miocardice,
angioplastie coronariană, cardioversie,
by-pass coronarian
• Afecțiuni ale musculaturii striate
Interpretarea testelor de diagnostic, Jaques Wallach, editia a VIIa, Editura Stiintelor Medicale, 2007
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Alanin-amino-transaminaza (ALT)
[glutamat-piruvat-transaminaza (GPT)]
Valoare normala: 7-50 UI/l
Localizare: intracitoplasmatică în musculatura scheletică, ficat şi cord
Rol : catalizează transferul unei grupari amino de la alanină la α-cetoglutarat; produșii acestei
reacții de transaminare reversibilă fiind piruvat și glutamat: (alanina + α cetoglutarat =
piruvat + glutamat).
Structura: nu are forme izomere conformaționale
Valori crescute:
• marcat - în afecțiuni însotite de necroză extinsă hepatică (ex: hepatita acută virală
forma fulminantă) – valori de 100xN!
Un nivel seric crescut al transaminazelor oferă o gamă largă de posibile cauze, aceasta poate fi micșorată
prin corelarea cu nivelele serice ale altor enzime (ex. fosfataza alcalină în afecțiuni de căi biliare, CK în
miopatii).
!Valorile crescute ale transaminazelor nu înseamnă așadar o doar afectare hepatică, evaluarea
trebuie facută în contextul tuturor analizelor și manifestarilor bolii.
- pacienții cu hepatită acută C au nivele moderat crescute ale transaminazelor, dar boala evoluează frecvent spre
hepatita cronică și ciroză hepatică
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Gama glutamil transpeptidaza (GGT)
Valorile normale: 8-40 U/L la bărbat
5-25 U/L la femeie
Localizare: localizată la nivelul membranei citoplasmatice a numeroase celule (în special
hepatocitele și celulele canaliculelor biliare).
Rol: catalizează transferul grupului γ–glutamil de la peptide către alți aminoacizi intervenind
astfel în transportul amino-acizilor prin membrană
Structura: proteină heterodimerică, fiecare subunitate fiind formată dintr-un singur lanț
polipeptidic.
Valori crescute: afecțiuni hepatice ce evoluează cu colestază:
- colestază mecanică (obstrucție/compresie de căi biliare: calculi, tumori, etc))
- hepatita acută (virală, alcoolică)
- hepatita cronică (virală, autoimună. alcoolică)
- ciroza hepatică (virală, alcoolică, autoimună – ciroza biliară primitivă)
- leziuni toxice hepatice:
- solventi organici,
- medicamente (clorpromazina, fenobarbital),
- alcool
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Gamaglutamiltranspeptidaza(GGT)
Valori crescute:
• Creșterea izolată se observă mai ales la marii consumatori de alcool chiar înainte ca alte teste
funcționale să fie modificate
• Creșterea activității plasmatice a GGT reprezintă cea mai importantă modificare din
colestază (10-50 de ori valorile normale)
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Enzimele de colestază
Colestaza = imposibilitatea curgerii bilei la nivelul canalelor biliare intrahepatice sau
extrahepatice
• Colestaza intrahepatică apare frecvent în afecțiuni ca:
- ciroza biliară,
- hepatita virală acută forma colestatică
- toxice (medicamente - fenitoina)
• Colestaza extrahepatică poate fi:
- intracanaliculară (calculi biliari, tumori, paraziți, etc),
- extracanaliculară (compresiuni prin adenopatii, aderențe, tumori, etc.)
Enzimele de colestază sunt:
- gamaglutamiltranspeptidaza (GGT)
- fosfatazele alcaline hepatobiliare
- 5-nucleotidaza (5-NT)
- leucinaminopeptidaza (LAP)
6.CLASIFICAREA FUNCȚIONALĂ A ENZIMELOR
6.2 ENZIMELE PLASMATICE NEFUNCȚIONALE
6.2.2 Enzimele celulare
Fosfatazele alcaline
Valoare normala: 42-98 UI/l la femei
53-128 UI/l la bărbați
Localizare: la nivel hepatic, tractului biliar, osului, mucoasei intestinale și placentei
Rol: catalizează hidroliza fosfaților organici la pH alcalin (pH=9) => se numesc fosfataze
alcaline
Fosfatazele acide
Valori normale :
Fosfataza acidă totală - 0,1-0,9 unități Bodanski (UB) sau
- 2-5 unități King-Armstrong (UKA)
- 4,5 -13,5 UI/l
Fosfataza acidă prostatică = 0,04 - 3,6 UI/l
- carcinom de prostată
- colon
- mamar
- cortico-suprarenal
- pulmonar
1. Mosby’s Manual of Diagnostic and Laboratory Tests, Kathleen Deska Pagana, Timothy j. Pagana,
Elsevier, third edition.
2. Analize de laborator si alte explorari diagnostice, Editura MedicArt, 2007.
3. Oxford Handbook of Clinical and Laboratory Investigation, Drew Provan, Oxford University Press,
third edition, 2010.
4. Differential Diagnosis by Laboratory Medicine , a quick reference for physicians, Marks V., Cantor Th.,
Mesko D., Pullman R., Nosalova Gabriela , Springer, 2002.
5. Fiziopatologie - Note de curs si lucrari practice, Daniela Adriana Ion.
6. Compendiu de fiziopatologie speciala, Badescu M., Ciocoiu M. , Editura Pim, 2001.
7. Curs de Fiziopatologie Generala , Marcela Dinu, Veronica Colev , Magda Badescu, editia a III-a,
litografia I.M.F. Iasi, 1988.
8. Pathologic basis of disease ,Cotran R.S., Kumar V., Collins T., eighth edition, Saunders Elservier, 2010.
9. Essential Pathology, Rubin E., Farber J.L., third edition. Emanuel Rubin, Lippincott Williams &
Wilkins, 2001.
10. Interpretarea testelor de diagnostic, Jaques Wallach, editia a VIIa, Editura Stiintelor Medicale, 2007.
11. Denisa Mihele. Biochimie clinica. Editia aII-a. Editura medicala. Bucuresti, 2010.