UNIVERSITATEA DUNREA DE JOS GALAI FACULTATEA TIINA I INGINERIA ALIMENTELOR

TEZ DE DOCTORAT
STUDII I CERCETRI PRIVIND REPRODUCEREA I CRETEREA IHTIOFAUNEI EXOTICE N CONDIII DE CAPTIVITATE

DOCTORAND, Ing. Adriana CHIOREAN

CONDUCTOR TIINIFIC, Prof. Dr. Ing. Soare STNCIOIU

GALAI, 2011

Educaia este soluia necesar pentru a face fa oricrei situaii de via Dr. John G. Hibben MULTUMIRI, Doresc s exprim mulumirile mele, dar este dificil s stabilesc o ordine a lor! In primul rnd Ii mulumesc lui DUMNEZEU, care mi-a dat sntate i putere de munc. Consider ca fr ajutorul Lui nimic nu se poate realiza n via. Mulumiri i recunotin D-lui Profesor Dr. Ing. STNCIOIU Soare, n primul rnd pentru c m-a acceptat ca doctorand i care pe tot parcursul perioadei de doctorat, m-a ncurajat, m-a nvat lucruri noi i m-a ndrumat cu nalt demnitate profesionl i nelegere. Mulumesc tuturor profesorilor mei de la Catedra de Acvacultur, tiina Mediului i Cadastru, domului Profesor Dr. Ing. CRISTEA Victor, Prorector la Universitatea Dunrea de Jos i ef la catedra de Acvacultur, tiina Mediului i Cadastru. Deasemeni, doresc s mulumesc i s-mi exprim ntreaga recunotii Domnei Profesor Dr. Ing. CRISTEA Veronica, care cu mult rbdare i mult profesionalism m-a cluzit i n permanen mi-a dat sugestii i mi-a mprtit din vasta experien a domniei sale. in s mulumesc deasemni domnilor Profesor Dr. Ing. OPREA Lucian, Dr. Ing. RU Mircea, Profesor Dr. Ing. VASILESCU George, Profesor Dr. Ing. MUNTEANU Gabriela, care cu cldur i dragoste pentru frumos mi-au sdit n suflet meseria care n-am trdat-o niciodat. Mulumesc conducerii Complexului Muzeal de Stiine ale Naturii Constana, care m-a angajat imediat dup terminarea facultii i mi-a acordat toat ncrederea n activitatea profesional. Calde mulumiri Doamnei Director PLOTOAG Gabriela, Domnului Director FGDU Decebal, Domnului Director MNSTIREANU Adrian M., Domnului Director tiinific Dr. PAPADOPOL N.C. i Doamnei Dr. ERBNESCU Elena. Mulumesc colegilor i prietenilor mei, ntregului personal de la Acvariu. Toi m-au ajutat i sprijinit pe perioada doctoratului. Alturi de ei am obinut cele mai importante rezultate tiinifice i tehnice. Mulumesc din suflet Domnului Dr. Profesor BREZEANU Ghe. att pentru susinere i ncredere, ct i pentru sugestiile i ideile pline de substan oferite. Mulumesc conducerii Institutului Naional de Cercetare Dezvoltare Marin Grigore Antipa Constana pentru suportul tiinific acordat, pentru posibilitatea documentrii i dezvoltrii aplicaiilor practice, dar i pentru prietenia i ajutorul oferit. Calde mulumiri specialitilor de aici, de la care am nvat cele mai importante lucruri, Dr. ing. ALEXANDROV Laura, Dr. ing. DUMITRESCU Elena, Dr. ing. ZAHARIA Tania i Dr. ing. RADU Gheorghe. Mulumesc prietenilor mei, care mi-au fost alturi i care m-au ajutat s depesc multitudinea de probleme inerente ale acestui frumos i dificil domeniu de activitate: de la Muzeul Naional de Istorie Natural Grigore Antipa, Domnului Dr. POPA Luis, Doamnei Dr. POPA Oana, care au avut rbdare n a-mi explica i mprti multe din propriile cunotiine. Calde mulumiri domnilor BRICARIU Vladimir i CORBU Eugen, prieteni deosebii, care mi-au fost alturi i m-au sprijinit n momente dificile i fr de care multe din lucrurile obinute poate nu s-ar fi ridicat la un nivel tiinific. Domnului CHESLER Alexandru, deasemeni mii de mulumire pentru ajutorul necondiionat oferit. Nu n ultimul timp doresc s-mi exprim adnca recunotiin familiei mele. Mamei i mulumesc pentru iubirea, ajutorul i susinerea necondiionat n momentele dificile de ndoieli. Soului meu pentru ntelegerea fa de efortul personal depus i timpul consumat n detrimentul familiei i fiului meu, pentru faptul c exist i face ca viaa noastr s aib mai mult sens. Mulumesc este prea puin pentru a exprima sprijinul lor att n viata personal, ct i n carier!

ii

CUPRINS PARTEA A I- A CRETEREA PETILOR DE ACVARIU 1. INTRODUCERE 1.1. 1.2. 1.3. Istoricul acvaristicii Acvariul Constana Acvaristica i legtura ei cu alte domenii 1 2 2 2 3 3 3 4 4 5 6 6 7 7 8

2. SPECII DE PETI EXOTICI CRESCUTE N CAPTIVITATE 2.1. Definirea cuvntului exotic 2.2. Sistematica speciilor de peti exotici 2.3. Principalele grupe sistemice i specii de peti exotici, specifice acvaristicii 2.4. Factori mediali 3. REPRODUCEREA PETILOR DE ACVARIU 3.1. Influena factorilor externi i interni asupra maturrii celulelor sexuale i a reproducerii 3.2. Utilizarea acvariilor pentru reproducerea i creterea speciilor exotice 3.3. Aspecte fiziologice ale reproducerii petilor de acvariu 3.4. Etapele dezvoltrii i maturrii celulelor sexuale 3.5. Dezvoltarea embrionar 3.6. Dezvoltarea larvar 4. CRETEREA IHTIOFAUNEI EXOTICE N CONDIII DE CAPTIVITATE 4.1. Metabolismul i factorii care influeneaz metabolismul 4.2. Efectele deficitului de vitamin C 5. HRANIREA PESTILOR DE ACVARIU 5.1. Importana alimentaiei petilor 5.2. Tipuri de hran utilizate 5.2.1. Hrana natural 5.2.2. Hrana artificial 5.3. Tehnologii de obinere a hranei naturale. Nevertebrate vii 5.3.1. Alimentele planctonice 5.3.2. Infuzorii 5.3.3. Cultivarea i meninerea rotiferilor Brachionus plicatilis, nfometai la temperaturi sczute. Regenerarea populaiei. 5.3.4. Cultivarea nematodului Anguilla silusiae 5.3.5. Cultivarea grindalului Enchitraeus albidus 5.3.6. Utilizarea ca hran a viermilor Tubifex tubifex 5.3.7. Cultivarea cladocerului Daphnia sp. 5.3.8. Cultivarea crustaceului Artemia sp. 5.3.9. Alte tipuri de alimentare cu hran vie 5.3.10. Larve de nevertebrate mari. Crustacei 5.3.11. Peti mruni 5.4. Raia alimentar 6. DATE PRIVIND BIO-ECOLOGIA SPECIILOR STUDIATE: Corydoras aeneus (Gill, 1858) I Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) 6.1. Habitatele naturale 6.2. Studii i cercetri privind caracteristicile morfologice, anatomice i fiziologice ale speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858) 6.3. Studii i cercetri privind caracteristicile morfologice, anatomice i fiziologice ale speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904)

8 9 9 9 10 10 10 10 10 11 11 11 11 12 13 13 13

13 14 16

iii

PARTEA A II- A CONTRIBUIA PERSONAL 7. ACTIVITATE EXPERIMENTAL 7.1. Organizarea experimentelor-pregtirea acvariilor i a materialului biologic 7.1.1. Pregtirea spaiilor i condiiilor de cretere 7.1.2. Pregtirea materialului biologic 7.2. Dezvoltarea embrionar i creterea larvar la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) 7.2.1. Material i metod 7.2.2. Dezvoltarea i creterea stadiilor timpurii la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) 7.3. Reproducerea, dezvoltarea embrionar i postembrionar la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) 7.3.1. Reproducerea speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) 7.3.2. Material i metod 7.3.3. Dezvoltarea embrionar i larvar 7.4. Identificarea speciilor de peti din genul Ancistrus (Pises; Loricariidae). Analize genetice 7.4.1. Material i metod 7.4.1.1. Tehnica ADN barcoding 7.5. Analize hematologice la Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) 7.5.1. Date generale 7.5.2. Material i metod 7.5.3. Rezultate obinute privind elementele figurate ale sngelui la petii supui experimentului 7.6. Analize privind stresul la petii exotici 7.6.1. Stresul i factorii de stres la petii de acvariu 7.6.2. Experimente de dezvoltare a stadiilor timpurii la speciile luate n studiu, supuse unor factori stresani-temperatur, pH, luminozitate 7.6.2.1. Material i metod 7.6.2.2. Rezultate obinute 7.6.3. Studiu comparativ al dinamicii activitii superoxid dismutazei i catalazei la nivel branhial n condiii de hipoxie la speciile Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858) 7.6.3.1. Date generale 7.6.3.2. Material i metod 7.6.3.3. Rezultate i discuii 7.7. Patologia petilor exotici 7.7.1. Date generale 7.7.2. Material i metod 7.7.3. Diagnosticarea mbolnvirilor-experimentri de profilaxie i terapia ale acestora 7.7.3.1. Boli provocate de bacterii 7.7.3.2. Boli provocate de microciuperci 7.7.3.3. Boli parazitare 7.7.3.4. Msuri generale de terapia i profilaxie ale mbolnvirilor 8. CONCLUZII GENERALE I CONTRIBUII PERSONALE 8.1. Concluzii generale 8.2. Contribuii personale adiionale studiilor i experimentrilor anterioare 9. BIBLIOGRAFIE SELECTIV

17 18 18 18 18 19 20 21 21 21 24 24 24 25 25 26 26 27 27 27 27 28 29 29 30 30 32 32 32 33 33 34 34 35

36 39 42

iv

STUDII I CERCETRI PRIVIND CRETEREA IHTIOFAUNEI EXOTICE N CONDIII DE CAPTIVITATE 1. INTRODUCERE Scopul lucrrii de doctorat l reprezint mbogirea cunotinelor privind cele dou specii de peti exotici crescute n Acvariul Constana, cu date referitoare la biologia, starea fiziologic evaluat i testat n diferite condiii de via, rspunsul lor la diferii factori stresani, mbolnvirile acestora nregistrate n condiii de captivitate, folosind metode tehnologice experimentale i de analiz speciale, moderne, de nalt finee i complexitate: analize morfologice, fiziologice, histologice, citologice, hematologice, genetice. Abordarea speciilor din cele dou familii n cadrul lucrrii de doctorat s-a datorat accesibilitii i ateniei acordate n domeniul acvaristicii att de profesioniti, ct i de amatori. Selecia fcut n timpul experimentelor realizate a fost ndreptat spre specii reprezentative ale acestei categorii de peti exotici-Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858). Alegerea fcut s-a dovedit oportun i obiectiv, rezultatele obinute fiind similare celor menionate de literatura de specialitate de nivel internaional. Pe plan naional, cercetaile efectuate sunt o contributie semnificativa la dezvoltarea activitilor tiinifice ale Acvariului Constana, acvariu care este o poart spre un univers specific, diferit, real, viu, reprezentat de plante i animale avcatice. Att specialitii ct i publicul larg, cu toii i doresc peti i decoruri deosebite, fascinante, cunoscute sau enigmatice, pentru a satisface pasiunea i preferina fireasc, uman pentru frumos.

1.1. ISTORICUL ACVARISTICII

Acvaristica n lume Acvaristica nu a fost o tiin independent, separat, ea constituindu-se o component a acvaculturii. Acvaristica nu este o ndeletnicire nou. Ea i are nceputurile n cele mai ndeprtate timpuri ale istoriei omeneti, lucru dovedit de descoperirile arheologice din Egiptul antic, Grecia, China, Mexic, Imperiul Roman, ulterior din multe alte ri i a fost dezvoltat att n scop estetic ct i economic. n antichitate, n urm 5000-6000 ani, egiptenii aveau n locuina lor bazine n care erau crescute specii ornamentale de peti, existente i azi n acvariile noastre, ca: Haplochromis sp., Chromis nilotica, Bagrus schilbeides, Mormyrus sp. i altele. Vechii romani construiau n jurul palatelor piscine speciale pentru creterea petilor de ap dulce sau marin. La grecii antici, Aristotel, recunoscut unanim ca fiind printele ihtiologiei, cu 300 ani .e.n., cunotea i descria peste 115 specii de peti, multe dintre acestea avnd si un rol decorativ (BNRSCU, G., 1964). In prezent, pe plan internaional i naional, n prezent acvaristica cunoate o mare dezvoltare, iar literatura de specialitate este din ce n ce mai divers, oferind o important baz de informare i documentare. Acvariile publice din ziua de astzi, sunt adevrate muzee vii, n care mediul de via creat artificial se apropie tot mai mult de biotopul natural. Lista muzeelor i acvariilor lumii cuprinde un numr impresionant de astfel de uniti, cele mai importante aparinnd rilor dezvoltate cu ieire la oceanele planetei. Astfel sunt Centrul Oceanopolis din Brest, Centrul Naional Marin Boulogne-sur-Mer, Acvariul Muzeului de Zoologie din Nancy, Acvariul din Tourain (BUD, 2002).

1.2. ACVARIUL CONSTANA In ara noastr, acvarisica are un trecut ndelungat (Fig.nr.1), astfel c n 1958 Acvariul constnean (Fig.nr.2) din cadrul Complexului Muzeal de Stiine ale Naturii i-a nceput activitatea pornind de la simple colecii de peti exotici ornamentali, prezentai publicului n bazine de sticl de mici dimensiuni.

Fig.nr.1

Acvariile i poziionarea lor pe teritoriul Romniei

Fig.nr.2 Cldirea ACVARIULUI din Constana

Astzi, sectorul peti exotici , cuprinde 4 secii, cu specii de peti aparinnd ecosistemelor acvatice din America de Nord, Sud i Central, din Africa i din Asia de SudEst. In cadrul lucrrii de doctorat, s-au luat n studiu dou specii de peti exotici, Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858), aparinnd familiilor Loricariidae i respectiv Callichthyidae.

Acvaristica, prin complexitatea ei, i-a format relaii cu multe alte domenii de activitate: cu ecologia, care guverneaz natura, cu etologia, oferind posibilitatea studierii comportamentului diferitelor specii de peti, n acvarii, unde observaiile se fac mai eficient i organismul viu este mai uor de urmrit i studiat. Acvaristica nu are o importan numai tiinific, ci este cunoscut i ca un hobby. Eforturile reunite ale acvariofililor, cercettorilor, furnizorilor i valorificatorilor, promit pentru viitorul apropiat satisfacerea interesului uman mereu crescnd pentru acest hobby pasionant. Acvaristica are o strns legtur i cu medicina uman, dovedindu-se tiinific efectul benefic al acvariilor n diferite terapii psihice. Acvaristica este foarte important pentru copii, deoarece pe lng fascinaia produs de mirifica lume acvatic, ea dezvolt responsabilitatea, curiozitatea, pasiunea, cromatica, etc.

1.3. ACVARISTICA I LEGTURA EI CU ALTE DOMENII

2. SPECII DE PETI EXOTICI CRESCUTE N CAPTIVITATE 2.1. Definirea cuvntului exotic

Speciile cultivate n domeniul acvaristic sunt specii cu valene estetice i datorit originii lor sunt definite ca specii exotice. In conformitate cu dicionarul explicativ al limbii romne, definiia termenului exotic este urmtoarea: - Exotic - organismul care apare ntr-o regiune foarte ndeprtat de locul de origine i care poate impresiona prin aspecte i caracteristici noi, neobinuite, ciudate pentru zona de acomodare i dezvoltare; provine dintr-o regiune exotic, creia i aparine sau i este proprie. Denumirea provine din latin: exoticus i din limba francez exotique.

Termenul de peti exotici a fost introdus tocmai pentru a sublinia caracteristicile deosebite ale speciilor care se ncadreaz n descrierea prezentat mai sus. Cel mai mare numr de specii de peti studiate i cultivate n captivitate, introduse experimental pentru aclimatizare, aparin familiilor Cichlidae (38 specii), Cyprinidae (36 specii), Salmonidae (18 specii), Centrarchidae (12 specii), iar familiilor Erythrinidae, Cobitidae, Bagridae, Siluridae, Loricariidae, Cyprinodontidae, Oryziatidae, Percichthydae, Chanidae (GAVRILOAIE, I.C., 2008) le revine cte o specie. In iftiofauna actual se menioneaz 31 200 specii de peti exotici. Dup unii autori, numrul acestora este mai mare. Referitor la ncadrarea sistematic s-au facut n timp diferite clasificri innd cont de anumite criterii. Prima ncadrare sistematic este cea a lui Grasse (1958), conform creia, exist 4 ordine i 13 familii. Cea mai nou este considerat clasificarea realizat de Frose R si Pauly D, n 2003 i revizuit permanent, ultima fiind efectuat n anul 2011, n luna februarie. Conform acestei ncadrri, n prezent sunt 4 ordine, fiind cu mult mai mare numrul de familii. Indiferent de ncadrarea sistematic, speciile Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), fac parte din Ordinul Siluriformes, Familia Callichthyidae, respectiv Ordinul Siluriformes, Familia Loricariidae. Pentrul genul Corydoras, n lume se ntlnesc un numr de 186 specii, iar pentru genul Ancistrus, n lume se ntlnesc un numr de 104 specii.

2.2. Sistematica speciilor de peti exotici

2.3. Principalele grupe sistematice i specii de peti exotici, specifice acvaristicii

Familiile Callichthyidele i respectiv Loricariidele, crora le aparin speciile de peti luai n studiu n aceast tez, cuprind un numr total de 198 specii i au 186 specii numai din genul Corydoras i respectiv un numr total de 818 specii, cu 104 specii din genul Ancistrus, ambele cu rspndire pe continentul America de Sud. Se apreciaz c exist numeroase specii de peti exotici care impresioneaz prin aspectul i coloristica lor, pretabile pentru acvaristic. Caracterul tiinific, dar i exotic al speciilor prezentate n Acvariul din Constana este dat n principal de faptul c acestea provin din cu totul alte zone geografice dect arealul apelor Romniei. 2.4. FACTORII MEDIALI Factorii mediali sunt deosebit de importani n creterea i reproducerea petilor, formnd cu acetia o unitate indestructibil, unitate marcat de schimbul reciproc permanent de substan i energie. Factorii abiotici decisivi n funcionarea unui acvariu, sunt reprezentai, n principal, de: temperatura, pH-ul, duritatea apei, oxigenul i bioxidul de carbon, nutrienii, turbiditatea, la care se adaug iluminarea acvariului, filtrarea apei. Factorii biotici prezint, n general un mare interes, fiind factori de relaie cu alte organisme, putnd declana mbolnviri grave, care se pot exinde uneori cu rapiditate. Agenii patogeni sunt extrem de numeroi i variai: bacteriile i viruii, paraziii vegetali i animali, microalgele, plantele acvatice, molutele i crustaceele ornamentale. Apariia unei pelicule pe suprafaa pereilor acvariilor, dar i pe fundul bazinelor demonstreaz prezena unor specii de microalge fixatoare pe substrat. In urma studiilor efectuate, s-a constatat c speciile dominante, responsabile de apariia peliculelor gelatinoase, sunt Nitzschia rigida i Chlorellidiopsis separabilis (PETERFI, IONESCU, 1976). Microalgele rspund rapid la modificrile parametrilor care caracterizeaz un bazin acvatic (natural sau artificial) ca urmare a ratei rapide de cretere i dezvoltare ce caracterizeaz acest grup de

organisme. Densitatea cea mai mare a fost dat de speciile de diatomee, specia dominat, ca biomas i densitate, de pn la 100% a fost Nitzschia rigida (Fig.nr.3). Fig.nr.3 Colonii de Nitzchia rigida (foto original) Aceast specie de alge, a atins n bazinele experimentale, densitatea de pn la 2650x103cel/l. Dezvoltarea ei a fost avantajat de condiiile optime de cretere meninute constant n mod artificial. 3. REPRODUCEREA PETILOR DE ACVARIU

Factorii externi, care exercit un rol important n viaa petilor n perioada acumulrilor i modificrilor de tip endocrin pentru declanarea i succesul reproducerii sunt la toate speciile factorii fizici, ambientali, stimulativi, precum: temperatura, lumina, circulaia apei, substratul, prezena indivizilor de sex opus sau chiar de acelai sex, etc (BREZEANU,GHE. i co., 1973). Dintre factorii interni cu rol important n dezvoltarea organismului, influena principal o are activitatea glandelor endocrine. Cunoscut fiind legtura strns dintre procesul maturrii i activitatea hormonal, au fost ntreprinse numeroase cercetri privind stimularea ciclului sexual cu ajutorul diferitelor produse stimulative, unele cu rezultate pozitive, fr a putea fi ns folosite la scar industrial (BREZEANU,GHE. i co., 1973).

3.1. Influena factorilor externi i interni asupra maturrii celulelor sexuale i a reproducerii

Bazinul de reproducere are dotri tehnice special instalate n funcie de necesitile speciei cultivate i este destinat reproducerii i eventual creterii descendentilor viabili. Petii prefer intimitatea, icrele supravieuiesc mai uor i un acvariu mic este, n general, mai uor de controlat. In experimentrile noastre de reproducere, s-au luat n consideraie toate aspecte bio-fiziologice ale speciilor de peti exotici, precum i datele tehnice i tehnologice cunoscute. - La speciile din familia Osphronemidae, se folosesc bazine de 40-50 litri, cu o nlime a coloanei de ap de 20-25 cm. Pe suprafaa apei se lanseaza cteva plante plutitoare din genul Ceratopteris care sunt folosite de ctre mascul la construirea cuibului de spum. Masculul construiete acest cuib folosind bule de aer, dispuse pe suprafaa apei. Dup depunerea icrelor, femela este scoas din acvariu i masculul rmne n continuare doar pn la eclozarea icrelor, dup care se scoate i acesta. - Pentru speciile vivipare din familia Poeciliidae este bine ca bazinul de reproducere s fie dotat cu plante, pentru ca puii s aib zone adpostite, ascunziuri. Dup terminarea actului reproductiv genitorii sunt parcai n alt acvariu, de ntreinere. - La speciile de peti din familia ciclidelor sud-americane, pentru reuita reproducerii, trebuie s cretem mpreun un numr mare de exemplare, care la maturitate sexual i aleg singure partenerul, iar perechea odat format rmne stabil toat viaa. Bazinul de reproducere coincide cu cel de ntreinere, deoarece speciile acestei familii, fiind foarte teritoriale i agresive, masculul i canalizeaz toat atenia asupra celorlalte exemplare concurente din acelai bazin (Fig.nr.4), descendenii rmnnd astfel n grija femelei/mamei.

3.2. Utilizarea acvariilor pentru reproducerea i creterea speciilor exotice

Fig.nr.4. Mascul din specia Astronotus ocellatus (Agassiz, 1831), cichlid american, n perioada reproducerii, cu gura larg deschis semn de agresivitate (foto original). - La familia Cyprinidae, perechile de reproductori se selecteaz singure, se scot din acvariul de parcare i se introduc n bazinul de reproducere, care are rol i de bazin de cretere a larvelor. Familia Characidae este reprezentat ndeosebi de specii de dimensiuni mici. Dup alegerea perechii de reproductori, se populeaz bazinul de reproducere, care are un volum mic, de circa 15-20 litri. Bazinul este pregtit cu tufe de plante i o plas deasupra substratului pentru protecia icrelor. - La familia Loricariidae, reproducerea poate avea loc direct n acvariul comun, de ntreinere, dar este indicat totui ca perechea s se reproduca ntr-un bazin separat. Speciile din aceast familie, au nevoie pentru reproducere de spaii nchise, grote din ceramic nesmluitpentru c icrele ader mai bine pe suprafaa acestora. - Speciile familiei Callichthyidae, pentru reproducere se scot din acvariu comun de ntreinere, ntr-un bazin destinat acestui act. Aici femelele ncep curarea unui loc ales pentru depunerea pontei, care ulterior urmeaz a fi fecundat de mascul. Genitorii, imediat dup reproducere sunt scoi i introdui n acvariul de ntreinere. Se precizeaz n concluzie, c acvariile au diferite dimensiuni, fiind dotate corespunztor pentru a fi utilizate ca acvarii de ntreinere, de reproducere, de cretere, carantin, etc. Un rol nsemnat l au plantele, rocile sau substratul artificial, care trebuie s ncnte att privirea vizitatorului i n acelai timp s constituie refugiile necesare pentru depunerea pontei, dezvoltarea embrionar i creterea petilor. -

Comportamental, cea mai mare parte a speciilor de peti se grupeaz n vederea reproducerii. Petii exotici n captivitate nu au perioadele de reproducere din mediul natural, depunnd icre aproape pe tot cursul anului, cu pauze mici. Majoritatea petilor au fecundaie extern, femela depunnd icre n masa apei, pe un substrat, pe care masculul ulterior le fecundeaz (OPREA M. i colab, 2000). La peti, n timpul reproducerii apar o multitudine de modificri fiziologice. Astfel pigmentaia corpului se modific, datorit existenei unui centru n creierul posterior, care prin extirpare determina pigmentaia petilor, iar prin excitare determin o depigmentare. Excitabilitatea este o trstur biologic a organismelor vii. Strile de excitaie constau n modificri interne biofizice i biochimice reversibile. Dimorfismul sexual se accentueaz n perioada reproducerii, masculii fiind mai intens colorai dect femelele. Aceast intensificare a coloraiei este explicat prin creterea cantitii de hormoni sexuali i a cantitii de intermedin, care excit eritroforii (ROSCA, I., D., 1977). Este vorba de reprezentani ai familiilor de peti exotici, din familii precum: Cyprinidae, Cyprinodontidae, Characidae, Osphronemidae, Loricariidae. La familia Loricariidae, la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), dimorfismul sexual este evident, masculul prezentnd pe cap nite excrescene, bifurcate, de diferite lungimi, iar acestea lipsesc n totalitate la femel. La familia Callichthyidae, la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), dimorfismul sexual nu este evident, masculul deosebindu-se de femel doar prin dimensiune, aceasta din urm fiind ceva mai mic, iar n perioad de reproducere avnd abdomenul mult mrit. 5

3.3. Aspectele fiziologice ale reproducerii petilor de acvariu

Cunotinele privind durata ciclului sexual la peti sunt nc limitate. Spre deosebire de petii vivipari, petii ovipari au o prolificitate mult mai mare. Referitor la participarea la procesul reproducerii, care depinde de durata activitii sexuale, speciile de peti au reproducerea: - unic, specific petilor monociclici, la care dup depunerea pontei indivizii mor. In cazul peciilor de peti tropicali i subtropicali nu exist astfel de cazuri. - repetat, specific petilor policiclici, care particip la reproducere de mai multe ori n timpul vieii. Majoritatea speciilor fac parte din acest categorie. Dac unei perechi i s-a format un ciclu de reproducere, perechea va continua s depun n permanen. Dac perechea nu este scoas n mod regulat din acvariu pentru reproducere, ea devine agitat, produsele seminale se pot aglomera n zona genital formnd un dop. In acest mod se pierd multe femele apte pentru o urmtoare reproducere.

Gametogeneza, sau dezvoltarea celulelor sexuale, reprezint un proces ndelungat care poate ncepe nc din stadiile imediat urmtoare reproducerii anterioare i anume odat cu resorbia elementelor maturate dar nedepuse i nefecundate. Se poate spune mai simplu c gametogeneza, reprezint procesul prin care sunt formate spermatozoidul i ovulul. Procesul de formare a ovulelor prin diviziuni succesive ale unor celule din ovar reprezint ovogeneza. Oule sau icrele sunt de diferite forme, de diferite dimensiuni care variaz de la o specie la alta. Intre dimensiunile icrelor i condiiile de dezvoltarea ale speciei exist o strnsa corelaie. Astfel, diametrul icrelor este cu att mai mare, cu ct arealul de rspndire al speciei este, geografic vorbind, n zone cu temperatur sczut, sau la specii la care mrimea icrelor este legat de creterea cantitii de rezerve viteline acumulate, care asigur hrana pe perioada embriogenezei i imediat dup eclozare, aceasta perioad fiind de obicei mult mai ndelungat ca la alte specii (BREZEANU,GHE. i co., 1973). Spermatogeneza, reprezint procesul de formareal spermatozoizilor. Acetia, diferii morfologic i structural, au corpul format din 3 pri distincte: capul, zona intermediar i coada. Lungimea total a spermatozoidului este de circa 50 (Ghinzburg, 1968). Spermatozoizii teleosteenilor au o structur mai simpl, dar ca dimensiuni se apropie se sturioni. Unul dintre factorii de baz care influeneaz intensitatea i durata micrilor spermatozoizilor, de care depinde capacitatea lor de fecundare, este temperatura. Cu ct temperatura este mai mare, intensitatea micrilor este mai mare.

3.4. Etapele dezvoltrii i maturrii celulelor sexuale

Dezvoltarea embrionar ncepe din momentul fecundrii i se ncheie odat cu eclozarea embrionului. In procesul de embriogenez, icra parcurge cu strictee o serie de procese, care se desfoar dup o ordine strict : segmentarea i formarea morulei, a blastulei, gastrulaia, formarea celor trei foie embrionare, conturarea i dezvoltarea embrionului, diferenierea principalelor sisteme i aparate, etc. Aceast segmentare se desfoar ntr-un mod particular la peti deoarece tipul de icr telolecit conine o cantitate mare de vitelus (NICOLAU, A., 1973). Segmentarea nu cuprinde ntreg oul, ci doar polul animal. La nivelul polului animal, calota de citoplasm este mai srac n vitelus i se evideniaz un nucleu. Vitelusul existent n zona extraembrionar (polul vegetativ) servete la hrnirea embrionului i furnizeaz materialul necesar structurrii. Polul animal sufer o serie de diviziuni succesive n diferite planuri rezultnd o aglomerare de celule mici, numite blastomere, care ntr-o prim faz se prezint sub forma unei mase celulare, cu aspect de mur, ce se numete morul. Segmentarea continu iar noile blastomere au un volum mai diminuat i se ordoneaz pe un singur rnd rezultnd blastula. Blastoderma tinde s nvelesc treptat masa vitelin (prin epibolie), pn ce marginile se apropie foarte mult nct aria

3.5. Dezvoltarea embrionar

extraembrionar capt aspectul unui dop, de unde i denumirea stadiului, de stadiul de dop vitelin. Gastrulaia continu la nivelul butonului embrionar, producndu-se micri convergente ctre linia median i micri de extensie, prin care embrionul capt form alungit precum a masei viteline de care este lipit. Se schieaz corpul embrionului, care la nceput pare o dung ngroat, alungit, mai lat spre polul animal i mai ngust spre polul vegetativ.

Perioada larvar este cea mai complex n dezvoltarea ontogenetic. Aceast perioad se declaneaz odat cu eclozarea embrionilor. Larvele prezint nc sacul vitelin pentru hrnirea endogen i mixt n cursul primelor etape de dezvoltare postembrionar. Dac condiiile de mediu sunt optime, dezvoltarea larvar se caracterizeaz prin modificarea i dezvoltarea formelor externe, continuarea proceselor de difereniere (histogenez i organogenez) pentru realizarea funciilor specifice. In perioada larvar se evideniaz caracteristici specifice: - Condiiile optime de temperatur, oxigen solvit n ap trebuie asigurate i meninute la parametri optimi, - Factorii de mediu poteniali negativi, trebuie permanent monitorizai i amintim suspensiile, agenii patogeni, epizotiile cu impact asupra ritmului de dezvoltare larvar, - Sistemele i organele interne sunt nc slab dezvoltate, sacul vitelin asigurnd alimentele nutritive necesare pn la trecerea spre hrnirea exogen, - Caracteristic este imobilitatea larvelor, cel puin n primele stadii, - Respiraia este asigurat iniial de reeaua sanguin de la suprafaa sacului vitelin, - In stadiile timpurii postembrionare se dezvolt n timp toate organele interne i externe. Cnd procesul de morfogenez s-a ncheiat, larva trece n stadiul de pui, care i continu creterea hrnindu-se activ. Maturitatea sexual se atinge n stadiul de adult. In concluzie, se precizeaz c ciclul vital al petilor este mprit n patru mari perioade: perioada embrionar (care cuprinde timpul de la fecundare pn n momentul eclozrii embrionului), perioada larvar (care cuprinde timpul de la eclozarea embrionului pn la apariia solzilor), perioada de pui (care cuprinde timpul de la dispariia total a caracteristicilor larvare i apariia solzilor, pn la formarea organelor sexuale i a primei reproduceri) i perioada adult (care cuprinde tot restul vieii, de la prima reproducere pn la moarte).

3.6. Dezvoltarea larvar

4. CRETEREA IHTIOFAUNEI EXOTICE N CONDIII DE CAPTIVITATE

Principalele aspecte urmrite privind creterea ihtiofaunei exotice au fost: metabolismul, efectele vitaminei C, importana alimentaiei, tipuri de hran utilizate, raia alimentar.

Metabolismul este dependent att de un complex de factori interni ct i de condiiile mediului extern. Procesul de metabolism este coordonat de sistemul nervos central i de sistemul endocrin a crui parte component se poate considera. Avnd activitate specific, metabolismul ihtiofaunei se manifest diferit ca intensitate sub influena unor importani factori externi, legai n primul rnd de temperatura apei, concentraia oxigenului din ap, salinitatea apei, pH-ul i factori interni, precum dimensiunea corpului, consumul zilnic de energie, vrsta, gradul de maturitate sexual, nivelul hrnirii, tipul de activitate, etc. 7

4.1. Metabolismul i factorii care influeneaz metabolismul

4.2. Efectele deficitului de vitamina C

Vitamina C s-a dovedit a fi vital pentru dezvoltarea corespunztoare a esuturilor osoase i conjunctive i exist numeroase date privind impactul acestei vitamine care produce deformri morfologice. La petii hrnii cu o diet deficitar n vitamina C, aceste deformri au fost evidente la dimensiunea pedunculului caudal, dimensiunea botului, respectiv a maxilarelor, care sunt mai scurte dect la petii hrnii normal. Studiile referitoare la plasticitatea fenotipic a diferitelor pri corporale, maxilar, craniu, precum i asupra formei ntregului corp la vertebrate au fost realizate de mai muli cercettori (COLLINS i CHEEK, 1983; WITTE, 1984; WIMBERGER, 1991). Deficitul de vitamina C provoac scolioz, lordoz, hiperplazia cartilagiilor i a maxilarului, anomalii ale operculelor, hemoragie intern (HALVER, 1984). Minimul recomandat zilnic pentru peti este de 50-150 mg/kg corp (HALVER, 1984). Mai multe studii care au demonstrat plasticitatea la peti au plecat de la ideea c diferenele n modul n care petii proceseaz hrana sunt singurele cauze sau cauzele primare ale plasticitii morfologice a maxilarului (WIMBERGER PETER H., 1993). Rezumnd importana metabolismului la peti, se evideniaz c acesta este reprezentat de totalitatea proceselor fizico-chimice i reaciilor biochimice de transformare a substanelor nutritive, n strns legtur cu mediul ambiant, n vederea asigurrii creterii i dezvoltrii organismului, ct i a energiei necesare ntreinerii proceselor vitale. S-a sublinit n mod deosebit rolul i importana vitaminei C n dieta petilor de acvariu (mult timp asociat cu activitile ovariene ale femelelor) i n dezvoltarea corespunztoare a esuturilor osoase i conjunctive ale acestora.

5. HRNIREA PETILOR DE ACVARIU

Hrana care este oferit petilor, este asimilat i utilizat ca energie necesar activitilor vitale, incluznd energia necesar creterii. Coninutul relativ al hranei n hidrai de carbon, lipide, proteine, vitamine i oligoelemente are o importan capital. Natura alimentelor absorbite mpreun cu coeficientul de conversie reprezint transformarea hranei ingerate n carne de pete, care poate s difere foarte mult, funcie de perioada sezonier, calendaristic i de stadiul de dezvoltare i cretere al petelui. Hrnirea depinde n mod esenial de factorii externi i acest lucru este evident la nivel ecosistemic unde competiia pentru hran, intraspecific sau interspecific, poate conduce att la ncetinirea creterii i la nfometare, ct i la eliminarea speciei din lanul trofic. In consecin, studiile asupra nutriiei in cont de un complex foarte important de factori interni i externi, de caracteristicile ecologice i etologice ale speciei, n care sunt cuprinse n primul rnd obiceiurile alimentare ale speciilor luate n studiu, mai ales cnd se urmrete transferul cunotinelor din mediul natural, n condiii de captivitate. In studiile privind dezvoltarea digestiei i a metabolismului, tehnicile histologice i biochimice au fost folosite cu succes n stabilirea parametrilor calitativi ai larvei i a concentraiei proteinelor sau caracteristica ultrastructural a ficatului. Aceti parametrii au o mare importan pentru o evaloare mai complet a valorii nutriionale a dietelor, oricum ei reprezentnd metode descriptive primare i nu analitice. Aplicaiile pentru msurtorile specifice histologice i biochimice n nutriia larvei de peti exotici rmn tehnic dificile, din punct de vedere al hrnirii (determinarea consumului de hran, corpul fiind foarte mic). In prezent, cea mai viabil abordare n definirea cerinei psihologice a larvelor pentru nutrienii specifici, pare a fi metoda manipulrii i producerii planctonului viu (SEGNER,
H.1995).

5.1. Importana alimentaiei petilor

Hrana necesar petilor exotici poate fi natural sau artificial. Hrana natural poate fi proaspt, conservat sau congelat. Hrnirea petilor exotici, crescui n condiii de captivitate, trebuie s se fac la ore fixe, cu raia alimentar mprit n dou mese: o mas de diminea i una la sfritul zilei, cu 1-2 ore nainte de stingerea luminii n acvariu pentru asigurarea regimului zi/noapte, similar celui natural de 16 ore lumin i 8 ore ntuneric. Pentru stadiile timpurii de dezvoltare (alevini, juvenili), hrana trebuie s fie de dimensiuni corespunztoare i distribuit n cantiti mici, de mai multe ori pe zi (4-5 mese). 5.2.1. Hrana natural Dup eclozare, pe parcursul creterii, hrnirea exogen are mai multe faze de hrnire funcie de stadiul de dezvoltare morfo-fiziologic. 1. Prima faz de hrnire este perioada resorbiei sacului vitelin cnd organismul continu s consume rezervele proprii, specifice perioadei embrionare. Este perioada n care se trece la hrnirea exterioar i pentru o scurt perioad de timp hrnirea este mixt, alevinii acomodndu-se att la noile condiii de mediu ct i la cele de hran. 2. Faza a doua de hrnire este perioada larvar sau post-embrionar, cnd sacul vitelin s-a resorbit n totalitate, iar hrnirea petelui este exclusiv din mediul exterior. Pentru o scurt perioad de timp, toate speciile de peti consumnd aceiai hran i anume alge din mediul biologic i nevertebrate mrunte. Urmeaz apoi o diversificare a hrnirii cu crustacee i larve de chironomide. Incet-ncet alevinii cresc i necesarul de hran al acestora se schimb i se apropie de cel al adultului. 3. Faza a treia de hrnire corespunde stadiului de adult. In aceast etap, se difereniaz petii ierbivori, omnivori sau carnivori. Totui aceast mprire nu este absolut, deoarece petii consum diferite tipuri de hran, dar n particular prefer un anumit tip de hran. 5.2.2. Hrana artificial Hrana artificial este comercializat n magazinele specializate i se gsete sub diferite forme: deshidratat, granule sau comprimate. Pentru a acoperi ct mai bine nevoile nutriionale ale petilor, aceasta trebuie s fie bogat n vitamine i n sruri minerale. Gama alimentelor artificiale este adaptat vrstei i nevoilor diferitelor grupuri de peti. Aceste alimente trebuie s aib un procent ridicat de proteine (40 pn la 50% n general) pentru a asigura necesarul de energie. Se folosesc pe scar larg, produsele unor fabrici specializate n hran uscat (sub form de fulgi sau granule) pentru peti, sub diferite denumiri: TETRAMIN, TETRARUBIN, TETRAPHILL, TETRADISCUS, HIKARI TROPICAL pentru genul Ancistrus (care are n componen alge) i pentru genul Corydoras (tabel nr.1 i tabel nr.2). Tabel nr.1 Compoziia biochimic i ponderea hranei artificiale HIKARI TROPICAL ALGAE (fulgi) administrate genului Ancistrus
Protein min.42% Grsime min.4% Fibr max.5% Cenu max.12% Umiditate max.10% Ulei 7,8% Cenu 10% Fosfor 1,4%

5.2. Tipuri de hran utilizate

Vitamina A 8,7 IU/kg

Vitamina C 45 mg/kg

Vitamina D3 1,7 IU/kg

Vitamina E 900 mg/kg

Tabel nr.2 Compoziia biochimic i ponderea hranei artificiale HIKARI TROPICAL ALGAE (fulgi) administrate genului Corydoras 9

Protein min.38%

Grsime min.5%

Fibr max.3% Vitamina C 45 mg/kg

Grad de umezeala max.10%

Cenu max.21,3% Vitamina D3 1,7 IU/kg

Fosfor min.2,1%

Ulei 8,1%

Vitamina A 8,7 IU/kg

Vitamina E 900 mg/kg

In prima etap de via pestii se hrnesc cu substane nutritive din sacul vitelin, ulterior trecnd la o hrnire exogen. Avnd n vedere dimensiunile reduse ale gurii alevinilor n aceast etap de via, hrana trebuie s aib dimensiuni mici, astfel nct s poata fi consumat de puiet. Hrana trebuie s fie suficient pentru toi puii, dar nu trebuie administrate cantiti mari de hran o singur dat, resturile ducnd la degradarea calitii apei. Se recomand administrarea hranei de cteva ori pe zi (4-5 ori), astfel i ntreinerea bazinului fiind mai uor de fcut. 5.3.1. Alimente planctonice sunt organismele vegetale sau animale care triesc n plancton. Planctonurile de ap dulce sau marine conin numeroase organisme puin vizibile cu ochiul liber (de la 0,1 la 1 cm), dar interesante pentru alimentaia petilor notri, mai ales pentru alevini. Unele organisme planctonice sunt vndute n comer ca produse congelate. 5.3.2. Infuzorii sunt animale unicelulare microscopice. In acvariu ele exist ntr-o cantitate mic. Pentru puietul cruia i s-a retras sacul vitelin, hrana principal const din infuzorii, n principal din parameci. Parameciul aparine Increngaturii Ciliophora, Clasa Ciliatea, Ordin Hymenostomatida, Familia Parameciidae, Genul Paramecium. Exist descrise 4 specii cultivabile: P. auralia, P. bursaria, P. caudatum, P. tatraurelia. (ITIS, 2007) 5.3.3. Cultivarea i meninerea rotiferilor, Brachionus plicatilis, nfometai la temperaturi sczute. Regenararea populaiei Rotiferii au cteva specii care pot fi cultivate: Brachionus quadridentatus, Br. angularis, Br. rubens, Rotatoria rotatoria i altele, n ap dulce. Rotiferul marin Brachionus plicatilis, cunoate cea mai larg utilizare n domeniul acvaculturii i acvaristicii datorit dimensiunilor mici (123-292), capacitii de acomodare n limite largi de salinitate, rat de reproducere nalt, posibilitatea de a se menine n masa apei, mare mobilitate, etc. Este dup Artemia cel mai rspndit i cel mai utilizat organism cultivabil la nivel industrial, utilizat n hrana stadiilor timpurii ale tuturor speciilor de peti din zona costier i marin. Tehnologia de cretere n vase speciale, n sisteme cascad sau n serie, este partea secundar a platformelor exploatabile de hran vie, alturi de cultura algelor. Contribuie prin administrare n bacuri de alevinaj, la declanarea deprinderilor de hrnire, ingerare i digestie a larvelor nedezvoltate morfologic i fiziologic. 5.3.4. Cultivarea nematodului Anguillula silusiae Auguillula silusiae, sau viermii nematozi, sunt cunoscui n acvaristic i sub denumirea de viermi micro (microviermi). Odat cu creterea, dezvoltarea i mrirea taliei puilor de peti exotici, se folosete un alt tip de hran, care este reprezentat de aceti viermi, cu talie mic, de circa 1 mm. Pentru a se forma o cultur de microviermi, se folosete o tav de plastic cu capac, pe fundul creia, se pune pmnt sau pietri unde se realizeaz o scobitur i n care se aeaz pine nmuiat n lapte/iaurt. Se iau viermi din alt cultur, se

5.3. Tehnologii de obinere a hranei naturale. Nevertebrate vii

10

aez pe substratul organic i apoi se d ca hran puin iaurt. Se acoper totul cu un geam, avnd grij ca iaurtul s fie sub nivelul geamului. Dup10-16 ore, la o temperatur de 1825C, viermii se urc pe geam, nmuliindu-se foarte repede. Acest geam care este acoperit de viermi, se cltete n apa acvariului unde sunt puii. Se pune din nou puin iaurt i astfel ciclul se reia. 5.3.5. Cultivarea grindalului - Enchitraeus albidus Viermele de ap dulce Enchitraeus, face parte din Increngtura Annelida, Clasa Oligochaeta (ITIS, 2007) i este vierme oligoghet, cu o lungime de 2-3 mm i un diametru = 0,2-0,5 mm. Se gsete mai ales pe plajele marine, sub resturi de alge i sub pietre, dar i n ape dulci. Grindalul se administreaz, cam la 3 sptmni de la hrnirea cu infuzori i microplancton, a petilor. Cultivarea acestui vierme se poate realiza n diferite moduri, dar cea mai uzual este urmtoarea tehnologie: n ldie lungi de 50 cm, late de 25 cm i nalte de 10 cm, se pune pmnt de grdin, apoi se introduc viermii i se acoper cu un geam. Pentru hrnirea lor se folosete pine nmuiat n lapte, cartofi fieri sfrmai sau fulgi de ovz. Nu se pune ntr-un singur loc ntreaga cantitate, ci n 5-6 cuiburi formate i completetate pe msur ce se consum. Temperatura optim este de 17-20C, iar cultura se ine la loc ntunecos. 5.3.6. Utilizarea ca hrana a viermilor Tubifex tubifex Viermii Tubifex sunt viermi care se aseamn cu rmele, din punct de vedere al aspectului i sunt comuni praielor de la noi din ar, unde se observ n mlul de sub ap, n plcuri roii de mii i mii de indivizi mici. Stau infipi cu extremitatea anterioar n ml, iar extremitatea posterioar, rmas afar, este n continu micare de oscilaie. Viermii Tubifex tubifex sunt viermi oligochei, de forma filiforma si dimensiuni mici, avnd de la 2,5 pn la 8,5 mm lungime. Corpul este rou din cauz c sngele lor conine hemoglobin. Este adaptat la apele poluate, ape care conin foarte puin oxigen. Cu ajutorul hemoglobinei, ei pot ns s foloseasc i aceste mici cantitti de O2. In natur, se gsesc n mlurile noroioase, bogate n substane organice, fiind deseori purttori de boli, pe care le transmit organisemelor vii din acvariile n care sunt folosii ca hran. Inainte s fie administrai n hrana petilor, ei trebuie curai, splai foarte bine, astfel: se aeaz viermii ntr-un vas cu o suprafa mai mare, puin adnc i se las un jet subire de ap proaspt i curat s curg peste ei. Dup 4-5 zile viermii au eliminat tot nmolul din tubul digestiv, i sunt buni de administrat ca hran. Este bine ca dup curare i splare (cele 4-5 zile de stat n ap), tubifexul s fie congelat. 5.3.7. Cultivarea cladocerului Daphnia sp. Daphnia magna, numit i puricele de balt, triete n ap dulce fiind cladocerul cel mai des cultivat i totodat cel mai mare, ca talie, ajungnd pn la 2,5 mm; Daphnia pulex Leyding, 1860, este de asemenea des cultivat. (ITIS, 2007) Dezavantajul este c Daphnia triete tot prin bli ncrcate cu substan organic i poate fi purttoare de germeni patogeni. De aceea se recomand cultivarea i nu colectarea ei masiv din mediul natural pentru administrarea n hrana petilor. Deoarece Daphnia se poate reproduce repede, culturile sunt uor de ntreinut, adesea aceste culturi fiind inute ntr-un amestec de ap, ngrmnt sau gunoi de grajd i pmnt de grdin. Dispozitivele utilizate pentru creterea asa numitului purice de balt sunt similare celor folosite pentru culturile de rotiferi. 5.3.8. Cultivarea crustaceului Artemia sp. 11

Cel mai des cultivat animal ca hran pentru peti, este Artemia. Se cultiv de mult timp, dei importana sa pentru acvacultur a fost recunoscut doar n ultimii 50 de ani. Artemia aparine Increngturii Arthropoda, fiind descrise 6 specii: A.salina (Linnaues, 1758), A. tunisiana, A.franciscana, A. persimilis, A. urmiana si A. monica. (ITIS, 2007) Fig.nr.5 Artemia salina Artemia are numeroase i foarte importante caliti(ALEXANDROV
LAURA 1998, ALEXANDROV LAURA&CHIOREAN ADRIANA 2008, CHIOREAN ADRIANA&STANCIOIU S. 2009):

deine cel mai eficient sistem osmoregulator i triete n medii cu diferite saliniti, are abilitatea de a produce ou de rezisten (chiti), are un ciclu de via uor de reprodus i se adapteaz uor la condiii de cultivare,este filtrator ne-selectiv de materie particulat organic i de organisme foarte mici, este uor digerabil i conine elemente nutritive corespunztoare necesitilor unei liste largi de specii de peti, este rezistent la puternicele micri ale apei din lacurile hipersaline, suport bine manipularile i diferitele procese tehnologice (dezinfectare, uscare, hidratare, etc.) Calitile Artemiei din lacul Techirghiol, comparabile cu cele ale celor mai bune populaii exploatabile din lume, au impus studierea posibilitilor de recoltare, conservare i depozitare a chitilor din mediul lor natural, dezinfectarea, decapsularea i incubarea n condiii de laborator, urmate de utilizarea naupliilor ca hran pentru larvele de peti (Tabel nr.3 i Tabel nr.4). Tabel nr.3 Calitatea biochimic a Artemiei de Techirghiol (I.N.C.D.M. Constana) Proteine Glucide Lipide Proteine Amino Compui Indice de Fosfo g / 100 g / 100 g/ Hidrosol acizi stearici umiditate lipide SU SU 100 %g din liberi nr.echiv.acid %g din SU prot.tot % din mg proba lipide tot SU 54,50 19,40 11,10 23,50 0,12 8,70 0,11 1,15 Subst uscat (%) 10,00

Tabel nr.4 Prezentarea comparativ a aminoacizilor eseniali din compoziia Artemiei salina1 din lacul Techirghiol i Artemiei franciscana 2 din San Francisco Bay (I.C.D.M. Constana) 1 TRY ARG CYS LEU GLY VAL THR LYS PHE MET ALA PRO 2 GLU ASP LEU LYS ALA ARG VAL GLY PRO SER PHE THR TYR MET CYS HIS TRP Tehniciile de cultivare a crustaceului Artemia salina, sunt foarte variate, dar cea mai uzual este colectarea chitilor de Artemia din mediul natural i ulterior eclozarea acestora la o temperatur a apei din acvariu de 26-28C. Apa trebuie s aib o anumit salinitate, funcie de salinitatea apei de unde provin oule de Artemia (din lacul Techirghiol, Cojocna, etc). Naupliile se recolteaz prin sifonare uoar de pe substrat, ntr-un vas cu ap srat (pentru a evita moartea lor). 5.3.9. Alte tipuri de alimentare cu hran vie Daphnia, rotiferii, copeopodele i Artemia sunt cele mai des cultivate ca hran vie, separat, uneori mpreun, ns s-au mai folosit i alte specii. In unele cazuri, cnd nici una din variantele standard nu este satisfacatoare, trebuie ncercate i alte variante. Acest lucru include i organisme nrudite, similare cu cele menionate mai sus. Printre cele similare se 12

numr i Moina, un cladocer ca i Daphnia. Aceasta poate fi colectat n cantiti mari i chiar s-a ncercat i reuit cultivarea ei. Ca i hran vie de dimensiuni mici, cu potenial mare sunt protozoarele, deoarece se pot reproduce foarte repede i nu au exoschelet chitinos similar cu cel al crustaceilor. Crustaceul Mysopodopsis a fost i el crescut n tancuri pe o diet de nauplii de Artemia proaspat eclozai. i culturile de amfipozi au avut succes, mai ales Gammarus i Corophium, care s-au dezvoltat folosindu-se algele Rhodomonas i Isochrysis. Un alt vierme oligochaet similar, este Branchiura, care crete bine ntr-o cultur realizat din amestec de pmnt i noroi activ. Un alt tip de hran l reprezint creterea musculiei de oet, Drosophyla melanogaster, care este foarte apreciat ca hran vie de petii de acvariu. 5.3.10. Larve de nevertebrate mari. Crustacei Crustaceii de apa dulce sunt rareori comercializai n stare vie, dar exist sub forma liofilizat. Dintre crustacei, copepodele sunt deasemenea extrem de hrnitoare (Fig.nr.6). Fig.nr.6 Crevei n cultur la I.N.C.D.M. Constana Pentru petii carnivori crescuti n acvariu, care refuz alimentele artificiale sau petii mari de ap dulce, se pot administra n hran petii mruni, n stadii adulte sau de alevini. 5.3.11. Petii mruni Pentru speciile de peti carnivore crescute n acvariu care refuz alimentele artificiale sau petii mari de ap dulce, se pot administra n hran petii mruni, n stadii adulte sau de alevini. In acest scop, unii acvariofili cu mai mult experien cresc specii prolifice, a cror reproducere se face uor n acvariu, precum Poeciliidele, de exemplu.

5.4. Raia alimentar

Exist tendina de supraalimentare a petilor, producnd astfel creterea grsimilor n esuturile adipoase. Un peste adult nu mnnc dect 1 pn la 2% din greutatea corpului sau pe zi, i dublu dc este juvenil. Plantele, sunt foarte uoare, nu reprezint riscul de supradozaj, n schimb celelalte alimente pot crea probleme. E preferabil ca raia s fie mprit pe zi, astfel: de dou ori pentru aduli, de mai multe ori pentru alevini dac este posibil. Petii suport cu uurin foamea de scurt durat, fiind foarte probabil ca n mediul lor natural s nu se alimenteze tot timpul. Unii acvariofili impun dealtfel o zi fr mncare pe sptmn, compensnd astfel o eventual supra-alimentaie n celelalte zile. Totui, privarea de hran e uneori greu acceptat de alevini, putnd provoca o ntrziere de cretere, o slbire a organismului, cu urmri dintre cele mai neplcute pentru viitorul adult.

6. DATE PRIVIND BIO-ECOLOGIA SPECIILOR EXOTICE STUDIATE, Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904)
6.1. Habitatele naturale Speciile de peti luate n studiu, Corydoras aeneus (Gill, 1858), (PISCES: Siluriformes; Callichthyidae, cuprinde 198 specii) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), (PISCES: Siluriformes; Loricariidae, cu 818 specii, i au biotopul natural n America de Sud i anume n bazinul hidrografic al fluviului Amazon (Fig.nr.7).

13

Specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) se gsete n America de Sud, n Brazilia, n laguna fluviului Dos Patos, iar specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) este rspndit n America de Sud, n Columbia i Trinidad pn la rul La Plata, la est de Munii Anzi (OPREA, M. i colab, 1996).

a. b. c. d. Fig.nr.7- Rspndirea geografic speciilor luate n studiu

e.

a.-harta geografic a Americii de Sud, cu cele mai importante fluvii; b.-harta bazinului hidrografic al Amazonului; c.-fluviul Amazon; d.i e.-imagini din bazinul hidrografic al fluviului Rio Negro (foto www.wikipedia.ro i foto original prof. dr.Romanescu Ghe.)

6.2. Studii i cercetri privind caracteristicile morfologice, anatomice i fiziologice ale speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858)
Familia Callichthyidae cuprinde 198 specii i 186 specii din genul Corydoras, specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), numit popular sanitar, fiind una dintre cele mai uzuale specii crescute n acvariu (Tabel nr.5 i Fig.nr.8). In legtur cu hrana sa, considerm c este fals ideea conform creia, acest pete ar consuma resturile organice ale celorlalte specii din acvariu. Tabel nr.5 Incadrarea sistematic a speciei Clasa: Actinopterygii Ordinul: Siluriformes Familia: Callichthyidae Subfamilia: Corydoradinae Genul: Corydoras Specia: C.aeneues (Gill,1858) Sinonime: Callichthys aeneus (Gill,1858), Corydoras aeheus (Gill,1858), Corydorae aenaeus (Gill, 1858), Corydoras macrosteus (Regan,1912), Corydoras microps (Eigenmann&Kennedy,1903), Corydoras schultzei (Holly,1940), Corydoras schulzei (Holly,1940). Specii ale aceluiai gen: Corydoras sp. - 186

a. b. c. Fig.nr.8 Exemplare de Corydoras aeneus (Gill, 1858) (foto original) a.-forma clasic; b.- distribuia geografic a speciei; c.-forma albinoas Analiza anatomic i morfologic a speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858) arat c este un pete de talie mic, masculul atingnd 6 cm, femela fiind puin mai mare, de 7-7,5 cm lungime. Gura este poziionat ventral, cu buza superioar, mai mare, ndreptat n jos i adaptat pentru scurmat/spat n pietri. Gura este mrginit de dou perechi de mustti, cu

14

lungimi de civa cm, aezate la extremitile ei. Pe buza inferioar are o singur pereche de musti, de dimensiuni mult mai mici, poziionat n mijlocul acesteia. La forma albinoas (Fig.nr.9, c.), ochii sunt de culoare roie. Corpul, comprimat lateral, cu linia spatelui uor arcuit, este acoperit n loc de solzi subiri, cu plci osoase, care se ncalec unul pe cealalt, cea ce confer aspecul unei armuri, de unde vine i etimologia denumirii speciei: cory = coif, doras = piele. Pe partea lateral a corpului sunt n numr de 23-24 plci osoase, iar ventral 19-21. Coloritul corpului este gri-verde pn la gri-maro, spre abdomen este ocru. Pe acest fond general are pete i puncte nchise, neregulate, care pot fi albastru-verde, violet, nottoarele glbui cu rnduri de pete mici nchise la culoare. Inottoarele pectorale i dorsal prezint spini, care ns nu sunt periculoi,deoarece petele nu posed glande veninoase. La capatul dorsalei, petele are o pinul (Fig.nr.9 c.).

a. b. c. Fig.nr.9 Exemplar adult de Corydoras aeneus (Gill, 1858) (foto original) a.-vedere lateral; b.-seciune abdominal;c.-parte posterioar pinul Reproducerea speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858) se realizeaz relativ uor dup ce atinge maturitatea sexual n jurul vrstei de 1 an. Raportul sexual la reproducere este de 1 femel () la 3 masculi (). Reproductorii se lanseaz separat ntr-un bazin de reproducere, care nu trebuie s aib un volum mai mare de 40 litri. Aerarea apei se realizeaz cu ajutorul sistemelor de aerare i filtrare, ambele existente n bazin. Dac petii nu pot depune ponta, pentru urmtoarele 2 sptmni li se nrutesc dirijat condiiile de via (de exemplu diminund hrana, neschimbnd apa o perioad de timp mai ndelungat, scznd temperatura apei). Dup trecerea acestei perioade, se revine la sistemul optim de cultivare, schimbnd apa din ce n ce mai des, cu ap proaspt, ridicnd temperatura apei la circa 22-23C i hrnind petii cu hran vie din belug. Primul semn de reabilitatare a procesului de reproducere este dat de femel, care cu abdomenul plin de icre, ncepe s i pregteasc locul de depunere a pontei, curnd un loc din acvariu selectat de ea, pe un anumit substrat preferat (geamul acvariului, tubulatura filtrului), prin raclri continui, n sus i jos (Fig.nr.10) Fig.nr.10 Reproductori n momentul alegerii locului de depunere a pontei (foto original) Intreg procesul de depunere a pontei i de fecundare a icrelor poate dura ore, timp n care toate ouale fecundate sunt depuse, aezate unele lng altele. Polificitatea medie este de 300 icre pe femela, n funcie de vrst i experiena reproductiv. Scoaterea prinilor din acvariu dup depunerea i fecundarea pontei se face pentru a-i impidica s-i consume propriile icre. Eclozarea icrelor are loc pe parcursul unei perioade de 6 zile, la temperatura apei de 22-23C, iar resorbia sacului vitelin are loc dup 4 zile. 15

Calculul raportului gonadosomatic se face conform urmtoarei formule de calcul: IGS = gr ovar x 100/gr corp. Msuratorile efectuate la un exemplar de femel au prezentat urmtoarele date: gr ovar = 0,32 gr ; gr corp = 2,80 gr (la o dimensiune a petelui L = 6,5 cm) (Fig.nr.11). Fig.nr.11. (foto original) Seciune intern abdominal pentru evaluarea strii de maturare a gonadelor

Ca urmare, n cazul nostru, IGS are valoarea de 11,4, ceea ce demonstreaz c se nscrie n limitele generale admise pentru peti.

6.3. Studii i cercetri privind caracteristicile morfologice, anatomice i fiziologice ale speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904)
Familia Loricariidae este cea mai bogat n specii dintre toate siluriformele (circa 23% din toate speciile) i a cincea n ierarhia familiilor cu cele mai multe specii dintre toi teleosteenii (circa 3% din toate speciile), coninnd 818 specii, peste 104 specii din genul Ancistrus (NELSON, 2006) (Tabel nr.6 i Fig.nr.12). Membrii acestei familii sunt de asemenea caracterizai prin nia trofic pe care o ocup. Majoritatea se adapteaz condiiilor de captivitate, dar reproducerea este mai dificil n aceste condiii, realizndu-se prin stimulare hormonal sau artificiala la unele dintre specii. Specia exotic Ancistrus sp. a ptruns n Romnia n primvara anului 1984 i a fost reprodus pentru prima dat n anul 1985. Aceast specie a fost importat din Republica Democrat Germania, alturi de alte specii de peti exotici, precum Poecilia sphenops (Valenciennes, 1846) i Symphysodon aequifasciatus (Pellegrin, 1904). Tabel nr.6 Incadrarea sistematic Clasa: Actinopterygii Ordinul: Siluriformes Subfamilia: Ancistrinae Genul: Ancistrus Sinonime: Xenocara brevipinnis Regan, 1904 Specii ale aceluasi gen: Ancistrus sp. - 104 Familia: Loricariidae Specia: A. brevipinnis (Regan, 1904)

a. b. c. Fig.nr.12 Exemplare de Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) (foto original) a.- mascul; b.-distribuia geografic a speciei; c.- femel Specia luat n studiu, Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), este o specie tropical, bentonic, continental i de ap dulce. Denumirea genului Ancistrus deriv de la grecescul agkistron = crlig, care face referire la acele interoperculare, cu care se poate aga i nepa (Fig.nr.13-a). 16

Din punct de vedere morfologic, capul este mai mare dect restul corpului. Este o specie bental, cu activitate intens noaptea i din acest motiv ochii se gsesc n partea de sus a capului pentru a distinge ceea ce este n jur i pe ntuneric. Toate Loricariidale prezint o gur ventral, mare ca un aspirator, care le permite s se fixeze pe suprafee netede, dar s se i hrneasc, morfologia sa evolund ca rspuns necesitilor trofice printr-un instrument specific roztoarelor (Fig.nr.13-b). Folosirea acestuia n hrnire pentru a mruni alge nu este ns obligatoriu, nu apare la toate speciile, din moment ce n dieta loricariidelor s-a gsit o varietate mare de componente, asociate vieii pe substrat (ARANHA et al., 1998). Fig.nr.13 Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) (foto original)

a. b. a.- mascul din specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), la care epii interoperculari sunt foarte bine dezvoltai; b.- structura gurii unui adult de Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) Ca dimensiuni, att masculul acestei specii, ct i femela, au 13 cm lungime. Corpul este acoperit lateral i dorsal cu plci osoase, (Fig.nr.14-a i 14-c), care formeaz exoschetul, ce l apr de mucturile altor peti. Plcile osoase lipsesc de pe partea ventral a corpului, abdomenul fiind moale ceea ce se simte i la pipit. Culoarea de fond a corpului este gri-maro, cu nuane de pn la verzui-maro la exemplarele juvenile, n timp ce la exemplarele mature culoarea de baz poate fi negru-albstrui. Pe corp are pete nchise la culoare, iar nottoarele sunt negre albstrui. In spatele nottoarei dorsale, petele prezint o pinul (Fig.nr.14-b).

b. c. Fig.nr.14 Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) (foto original) a. i b.- vedere lateral (a.- se observ plcile osoase cu care corpul este acoperit dorsal i lateral; b.- pinul); c.- exoschelet al unui adult din specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904)

a.

PARTEA a-II-a. CERCETRI PROPRII

7. ACTIVITATE EXPERIMENTAL 7.1. Organizarea experimentelor. Pregtirea acvariilor i a materialului biologic Investigaiile cuprinse n acest capitol s-au desfurat n perioada 20062010. Experimentele si cercetrile specifice s-au realizat n acvarii i bazine de la sediul Acvariului din Constana, de la Muzeul de Istorie Natural Grigore Antipa Bucureti, n laboratoarele Institutului Naional de Cercetare, Dezvoltare Marin Grigore Antipa Constana i n laboratoarele Facultii de tiina i Ingineria Alimentelor Galai. Au fost aplicate metode de lucru specifice.

17

7.1.1. Pregtirea spaiilor i condiiilor de cretere In Acvariul Constana, cercetrile au fost derulate pe o perioad de patru ani, n patru acvarii de 160 l (1,00 x 0,40 x 0,40 m) capacitate. Incintele de cretere sunt dotate cu instalaie de filtrare (exterioar), instalaie de oxigenare (linii de aer independente), de iluminat (neon - 40 W) i materiale ambientale similare celor din mediul natural de origine, n acord cu cerinele speciilor cultivate (pietre, adpost de tip grot, cu sau fr substrat). Pregtirea bazinelor i operaiunilor de populare cu material biologic s-au efectuat dup cum urmeaz: dou bazine au fost amenajate pornind de la cunoaterea habitatului de origine i a biologiei speciilor luate n studiu. Astfel, ntr-un bazin s-a introdus ca substrat, pietri cu granulaie fin (1-3mm), pentru a evita rnirea mustilor exemplarelor test. S-au introdus buci de lemn i tuburi de ceramic pentru reproducere i s-au plantat plante (Cryptoconina gigantea) pentru asigurarea spaiilor umbroase. Pentru determinarea modificrilor aprute ca urmare a instalrii unor factori de stres, celelalte dou acvarii s-au lsat lipsite de substrat, de plante, de pietre i materiale lemnoase, fiind iluminate n permanen fr a crea regimul zi-noapte, similar celui natural de 16 ore lumin i 8 ore ntuneric, crend astfel un stres permanent. 7.1.2. Pregtirea materialul biologic Materialul biologic a constat n exemplare mature i juvenile ale celor dou specii luate n studiu. S-au realizat experimentri de cretere, reproducere, de evaluare a influenei unor factori stresani asupra strii fiziologice a petilor alturi de analize hematologice, analize genetice de identificare a speciilor din genul Ancistrus, analize de evaluare a mbolnvirilor i experimentri de profilaxie i terapie ale acestora. 7.2. Dezvoltarea embrionar i creterea larvar la specia Corydoras

aeneus (Gill, 1858)

7.2.1. Material i metod Reproducerea speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858), a fost descris n capitolul 2.1. S-au folosit 50 exemplare stadii juvenile (L=1,5cm), procurate din comer (magazin de specialitate). Temperatura mediului a fost 25-28C, pH-ul-8 i dG-18. Iniial, bazinul de cretere a fost lipsit de substrat pentru a evita creterea concentraiei substanelor organice i azotoase din substrat i n consecin mbolnvirea puietului. Odat cu creterea i dezvoltarea exemplarelor, bazinul a fost amenajat i cu substrat (nisip i pietri cu granulaie fin). Petii au fost hrnii, n stadiul de pui de 3-4 ori/zi, cu hran vitaminizat sub forma de fulgi (TETRAMIN). La maturitate, dup vrsta de 14-18 luni de via, au atins lungimea L= 4,55,5cm. Din cele 50 exemplare ale experimentului, 32 s-au dovedit a fi masculi.

a.

b.

c.

Fig.nr.15 Ponta exemplarelor de Corudoras aeneus (Gill, 1858), depus pe tubul filtrului (a) i geamul acvariului (c); b.- detaliu privind dimensiunea icrei

18

Ajunse la etapa maturitii sexuale, perechile reproductoare s-au ales singure, dup care au fost scoase pentru reproducere ntr-un acvariu cu volum mai mic (40 litri). Aici, pe linia de filtru a avut loc prima reproducere a perechii alese (Fig.nr.15). Femela a depus un numr mic de icre (n jur de 50 icre) fiind la prima reproducere. 7.2.2. Dezvoltarea i creterea stadiilor timpurii la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) (Tabel nr.7 i Fig.nr.16-20) Pentru a urmri i nelege, n condiii de captivitate, asimilarea hranei (artificial i vie), s-a efectuat un experiment, pe o perioad calendaristic de trei luni, noiembrie 2009 ianuarie 2010. Hran artificial a fost prelucrat i administrat sub form de fulgi, iar hrana vie folosit a fost viermele Tubifex tubifex. Exemplarele, n vrst de 6 sptmni, au fost introduse separat, n cte un acvariu, cu un volum de 5 litri fiecare, astfel nct s se poat urmri greutatea i lungimea fiecrui exemplar n parte. Msurtorile au fost fcute initial si la interval de o lun (Tabel nr.10).Variantele de hrnire au fost: I. hran artificial vitaminizat; II. hran mixt, artificial i natural; III. hran natural (Tubifex) Tabel nr.7 Dimensiunile exemplarelor de Corydoras aeneus (Gill, 1858) la debutul experimentului Variante experimentale Hran Hran Hran artificial mixt natural Lungime (cm) Min. 1,0 1,1 1,0 - Max. 1,4 1,4 1,4 - Med. 1,20 1,25 1,20 Greutate (g) Min. 0,4 0,5 0,5 - Max. 0,8 0,8 0,9 - Med. 0,60 0,65 0,70 - In prima lun de cretere experimental, nu s-au observat diferenieri semnificative de cretere n cele trei variante (fig.nr.16).

Fig.nr.16 - Dimensiunile speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858) (lungime - cm; greutate - g) nregistrate dup o lun de cretere experimental - In a doua lun de cretere experimental, s-au evideniat dimensiuni mai mari pentru petii crescui n variantele I i III.

19

Varianta III Varianta II Varianta I 0 1 2 3

Med. (cm) Max. (cm) Min. (cm)

Fig.nr.17 - Dimensiunile speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858) (lungime - cm; greutate - g) nregistrate dup dou luni de cretere experimental - Dup a treia lun de cretere experimental, s-au meninut aceleai dimensiuni, mai mari pentru petii din variantele I i III.

Fig.nr.18 - Dimensiunile speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858) (lungime - cm; greutate - g) nregistrate dup trei luni de cretere experimental O apreciere mai clar a creterii petilor n cele trei variante s-a evideniat prin analiza sporului de cretere (n lungime cm., i greutate g) (Fig.nr.19 i nr.20).
2.5

1.5

A treia luna A doua luna Prima luna

0.5

0 Varianta I Varianta II Varianta III

Fig.nr.19 - Sporul de crestere (n cm) a speciei C. aeneus (Gill, 1858) pe perioada experimental

Fig.nr.20 - Sporul de cretere (n g) a speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858)

In concluzie, se apreciaz c cea mai eficient hran n creterea speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858), este hrana vie, bogat n proteine i bine asimilat. Sporul de cretere n lungime i greutate a petilor la care s-a utilizat hran vie a fost mai mare cu cca 16% i respectiv 9,5% fa de cei la care s-a utilizat hran artificial vitaminizat i cu 37% i respectiv 21% fa de petii la care s-a utilizat hrana mixt (artificial i natural). Cel mai redus spor de cretere s-a nregistrat la lotul de peti hrnii cu hran mixt, petii acceptnd mai uor hrana vie fa de hrana artificial. 7.3. Reproducerea, dezvoltarea embrionar i postembrionar la specia

Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904)

20

7.3.1. Reproducerea speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) La specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), dimorfismul sexual este evident prin diferena ntre masculul la care protuberanele capului sau corniele sunt puternic dezvoltate i bifurcate, n timp ce la femel lipsesc, sau n unele cazuri apar, dar sunt subiri i nebifurcate i se gsesc numai pe buze. (Fig.nr.21, a i b). Coarnele apar n jurul vrstei de 7-8 luni, uneori mai trziu (n jurul vrstei de 10 luni), depinznd foarte mult de tipul de hrnire i de diet. Maturitatea sexual este atins n jurul vrstei de 14-18 luni.

a.- mascul b.- femel Fig.nr.21 Pereche de Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) (foto original) 7.3.2. Material i metod Materialul biologic utilizat n studiul de fa a fost reprezentat de 100 exemplare pui de Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), cu o lungime L=1,5 cm, n vrst de 2 luni, achiziionate din comert. Numrul mare de exemplare a fost necesar pentru obinerea unor rezultate certe. Puietul a fost hrnit de 3-4 ori/zi cu alimente vegetale constnd din castravete verde (Cucumis sativus L.), dovleac comun sau bostan (Cucurbita pepo L.), salat verde (Lactuca sativa L.) (Fig.nr.22)

a. b. c. Fig.nr.22 Pui de Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) n timpul mesei de castravete (a) Aspect al salatei i al castravetelui la sfritul mesei (b i c) (foto original) Exemplarele care au avut prima reproducere la vrsta de 10 luni, au depus un numr mic de icre (circa 50), spre deosebire de exemplarele care s-au reprodus la vrsta deplinei maturiti sexuale (14-18 luni) i care au depus un numr dublu de icre. Icrele au avut diametrul mai mare, = 2,5-3mm, comparativ cu celelalte ( = 1,5-2 mm), iar reproducerea s-a desfurat n tuburi de ceramic nesmluit sau nuci de cocos, pentru o aderare mai bun a icrelor (Fig.nr.23). 7.3.3. Dezvoltarea embrionar i larvar Am realizat observaiile asupra embriogenezei la specia A.brevipinnis (Regan, 1904) la microscop prin prelucrarea probelor (icre embrionate i larve eclozate), la I.N.C.D.M. Grigore Antipa Constana i n laboratoarele catedrei Facultii de tiina i Ingineria Alimentelor Galai. Am realizat observaiile asupra embriogenezei la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) la microscop prin prelucrarea probelor (icre embrionate i larve

21

eclozate), la I.N.C.D.M. Grigore Antipa Constana i n laboratoarele catedrei Facultii de tiina i Ingineria Alimentelor Galai. Fig.nr.23 Mascul de A. brevipinnis (Regan, 1904) aernd i pzind ponta. Detaliu dimensiunea icrei de A. brevipinnis (Regan, 1904) (foto original) Analiza microscopic s-a realizat pe lotul de icre embrionate al unei perechi de Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), crescut, maturat i reprodus n acvariu, n condiii de captivitate (mediu total controlat). Etapele embrionare s-au succedat ntro ordine strict, celule ou (zigotul) trecnd obligatoriu prin procesele de segmentare, gastrulare i neurulare. In momentul nceperii procesului reproductiv i pe tot parcursul procesului de dezvoltare embrionar, temperatura apei n acvariul de reproducere a fost de 23C i a rmas constant. Protocolul de lucru privind fixarea icrelor, observaii i imagini fotografice asupra stadiilor de evoluie Pentru fixarea stadiilor embrionare i larvare, iniial, s-au utilizat mai multe metode i solutii de fixare i s-au nregistrat la fiecare avantaje i dezavantaje diferite. Enumerm: - Soluia fixatoare Bouin; - Soluia Bouin mbuntit conform rezultatelor literaturii de specialitate, s-a ncercat o nou metod de transparentizare fixand icrele n formol neutru (10%) unde se in timp de 10 ore; - Metoda internaional de fixare i transparentizare Horvth Lszl (2005). Observaiile i fotografierea probelor fixate cu aceasta soluie s-au efectuat la microscopul NOVEX HOLLAND, obiectiv SP4 i cu un aparat digital de fotografiat marca HP R17 Photosmart. Etapele diviziunii icrelor fecundate au fost nregistrate fotografic. Exemplificam n Fig.nr.24 (foto original).

a.

b. c. d. Fig.nr.24 Etapele diviziunii celulelor (foto original) a.- stadiul de morul, la 12 ore de la fecundare; b.- stadiul de blastul; c.- stadiul de gastrul; d.- se schieaz corpul embrionar.

Neurularea marcheaz constituirea tubului neural i totodat nceputul histogenezei i a diferenierii primordiilor de organe vitale (organogeneza). Se observ mai nti carena neural, care se formeaz din proliferarea pe linia mediodorsal a ectoblastului neural. Ulterior, de pe prile sale latero-dorsale se desprind grupe de celule care reprezint creste neurale (ganglionare).

22

Extremitetea cefalic este distinct, apar somitele, ochii i circulaia sanguin (Fig.nr.25-a), apoi are loc separarea progresiv a embrionului de masa vitelin (Fig.nr.25- b i c).

a. b. c. Fig.nr.25 - Stadii de dezvoltare specifice embrionrii i eclozrii (foto original) a.- vedere lateral; b. i c.- vedere din profil Larvele eclozate au intrat apoi ntr-un proces specific de cretere i dezvoltare (fig. 26).

a.

b.

c.

d.

e.

f. g. Fig.nr.26 Dezvoltarea larvelor i formarea puiului.

h.

a. larvele eclozate stau grupate n interiorul adpostului artificial, iar masculul cu gura prehensil consum exuviile icrelor eclozate i cur larvele de eventualii parazii; b. larvele stau grupate i-i folosesc ventuza bucal pentru fixare imediat ce-i prsesc adpostul; c. larvele au sacul vitelin de culoare galben i primordiile cordului (sistem circulator central); d. ncepe slaba pigmentare dorsal a corpului; e. pui n vrsta de 5 zile, au sacul vitelin resorbit complet i cu caracteristici morfologice asemntoare adultului; f. i g.- stadiile juvenile prsesc adpostul; h.- masculul reproductor continu sa pzesc cuibul nc o period de timp, deii puii au nceput prsirea acestuia. Maturitatea sexual la Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) este atins la vrsta de 12 luni, ns pentru reproducere se recomand reproductori n vrst de 14-18 luni. Incubarea icrelor, n care se manifest foarte clar dezvoltarea embrionar cu cele trei stadii principale, morula, blastula, gastrula i formarea larvelor dureaz 6 zile la temperatura apei de 23C. Dup incubare, larvele stau grupate n interiorul adpostului n care a avut loc incubaia, unde masculul le ventileaz.

23

7.4. Identificarea speciilor din genul Ancistrus (Pisces: Loricariidae).

Analize genetice
Literatura de specialitate amintete despre un numr de peste 104 specii de peti din genul Ancistrus, care triesc n habitate diferite, din zone cu climat tropical pn la temperat. Unele specii ale genului sunt crescute n captivitate ca peti de acvariu i cunoscui ca fiind consumatori de fitoplancton. Iniial s-a considerat c specia introdus n ara noastr este Ancistrus dolichopterus Kner, 1854, dar n prezent exist dubii c aceast specie ar fi fost introdus vreodat n Romnia. Datorit dificultilor ridicate n determinarea morfologic a speciilor din genul Ancistrus, s-a ncercat o analiz de determinare genetic a speciilor studiate prin aplicarea tehnicii ADN barcoding destinat identificrii speciei printr-o metod molecular. 7.4.1. Materiale i metode 7.4.1.1. Tehnica ADN barcoding Tehnica ADN barcoding folosit se refer la identificarea speciilor animale prin secvenierea unor regiuni genice standard i utilizarea secvenelor obinute pentru compararea cu baze de date ce conin secvene ADN de referin. Identificarea speciei se poate deci realiza doar dac exist acele secvene de referin pentru specia studiat. In forma sa cea mai rspndit la vertebrate, tehnica presupune utilizarea regiunii 5COX I de la nivelul ADN mitocondrial ca secven de tip ADN barcode. Schema general a tehnicii este prezentat n Fig.nr.27. Fig.nr.27 Schema general a tehnicii ADN barcoding. Materialul biologic analizat

Pentru analiza genetic am prelevat fragmente de nottoare caudal de la patru exemplare de Ancistrus sp. crescut n Acvariul Constana. Cele patru exemplare au fost doi masculi i dou femele. Probele au fost pstrate n alcool etilic 96% pn la prelucrarea n laborator (CHIOREAN ADRIANA, POPA L., 2009). Rezultate i discuii Pentru materialul analizat au fost obtinute 11 secvente de ADN: 3 secvene pentru regiunea 16S de la nivelul ADN mitocondrial 4 secvene pentru regiunea citocrom B de la nivelul ADN mitocondrial 4 secvene pentru regiunea COI de la nivelul ADN mitocondrial Secvenele ADN obinute au fost editate manual cu ajutorul aplicaiilor software eSeq 3.0 i AlignIR. Ulterior, prelucrate cu ajutorul aplicaiei BioEdit 7.0.1. Secvenele ADN obinute au fost introduse n aplicaia BLAST pentru a se interoga baza de date GenBank i pentru a se obine secvenele ADN omoloage care conduc la identificarea speciilor studiate. Tot pentru identifiarea speciei cu ajutorul secvenei ADN barcode obinut au fost folosite bazele de date BOLD Identification System (IDS), i NCBI The National Center for Biotechnology Information.

24

Prin folosirea interfeei web Barcode of Life Data Systems, secvenele obinute au fost comparate cu 696,388 de secvene ADN de referin. Similaritatea cea mai ridicat a fost constatat cu specia Ancistrus brevipinis (90,43%), iar similariti mai mici au fost nregistrate cu speciile A. cirrhosus, A. ranunculus, A. chagresi . Scorul maxim obinut este considerat destul de mic pentru identificarea corect a speciilor prin tehnica ADN barcoding, iar n cazul nostru acest lucru se datoreaz cel mai probabil lipsei de secvene de referin pentru gena COX I de la mai multe specii ale genului Ancistrus. Problema ar fi putut fi depit prin utilizarea altor secvene ADN (16S i citocrom B) pentru care ar fi existat secvene de referin i pentru alte specii ale genului. Markerii respectivi s-au dovedit ns a fi concludeni pana la nivel de gen, din acelai motiv al lipsei de secvene de la speciile genului Ancistrus. Fig.nr.28 Interogarea bazei de date Barcoding of Life pentru secventa de COI obinut de la proba de Ancistrus sp. 1F

Fig.nr.29 Interogarea bazei de date Barcoding of Life pentru secventa de Cyt B obinut de la proba de Ancistrus sp. 1F Fig.nr.30 Interogarea bazei de date Barcoding of Life pentru secventa de 16S obinut de la proba de Ancistrus sp. 1F In concluzie, se apreciaz c tehnica ADN barcoding este eficient pentru determinarea speciilor de peti, cu condiia existentei de secvene de referin n baze de date publice.

In cazul speciilor genului Ancistrus se impune generarea i folosirea ca secvene ADN barcode, att a regiunii 5COI ct i a altor regiuni genice (16S, CYTB) pentru a maximiza ansele de identificare a speciilor introduse n Romnia. Cu datele existente n GenBank, specia cea mai probabil utilizat n studiul prezent este Ancistrus brevipinis (Regan, 1904). 7.5. Analize hematologice la Corydoras aeneus (Gill, 1858) i

Ancistru brevipinnis (Regan, 1904)

7.5.1. Date generale Sngele se poate defini ca esut mezenchimal, format dintr-o component celular (elementele figurate ale sngelui) i dintr-o component de substan fundamental (plasma sanguin). Fiziologia sngelui poate fi considerat un indicator important pentru starea general a organismului, n cazul a numeroase specii de pesti (LARSSON, A., 1973; SPRAGUE, J., B., 1971; 25

1976; WEDEMEYER, G., A. s.a., 1977; WEDEMEYER and McLEAY, 1981; WEPENER, 1997; NUSSEY, 1998). Indicii hematologici sunt utilizai, n ultimii ani, pentru a realiza examenul chimic al

petilor n raport cu aciunea unor stersori. Modul de apariie al sistemului circulator i al elementelor figurate ale sngelui la peti, constituie o caracteristic prin care teleosteenii se deosebesc de celelalte cordate, la care elementele figurate i vasele sanguine se formeaz n aria extraembrionar. 7.5.2. Material i metod S-au realizat analize hematologice la petii exotici luai n studiu, n vederea determinrii strii lor fiziologice generale i a indentificrii unor stri de stres sau de boal. S-a recoltat snge i s-au efectuat analize biochimice i imunologice la un numr de 40 exemplare Corydoras aeneus (Gill, 1858) i 37 exemplare Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904). Speciile de peti supuse experimentului au fost procurate n urm cu 6 luni, din comer, de la un magazin specializat din Constana. Pn n momentul sacrificrii lor, petii au fost inui n condiii de acvariu i hrnii cu hran sub form de pastile i fulgi, marca JBL (NOVOGRAND, NOVOVERT, NOVOTAB). Toate exemplarele folosite au atins vrsta maturitii n momentul sacrificrii lor. Analizele au fost lucrate n laboratoarele de la I.N.C.D.M. Grigore Antipa Constana i n cabinetul veterinar Univet Constana. Recoltarea sngelui s-a realizat prin tierea peduncului caudal (Fig.nr.31 i Fig.nr.32), aceasta fiind una dintre tehnicile recomandate de literatura de specialitate.

Fig.nr.31 Msurarea petilor i recoltarea sngelui la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) (foto original)

Fig.nr.32 Msurarea petilor i recoltarea sngelui la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) (foto original) La final, s-a obinut fia cu rezultatele hematologice ale speciilor supuse experimentului i au fost comparate cu cele din literatura de specialitate de la diferite specii de peti de ap dulce. Astfel s-a constatat ca valorile se ncadreaz n gama valorilor cunoscute pentru speciile de ap dulce. 7.5.3. Rezultate obinute privind elementele figurate ale sngelui la petii supui experimentului

26

Cantitatea mic de snge recoltat datorita dimensiunilor mici ale pestilor, au fcut aproape imposibil studierea acestuia la analizoare. S-a reuit totui la cteva exemplare de aduli, avnd cteva reproduceri, care aparent preau intr-o bun stare fiziologic, s se fac analize sanguine. La specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), dup mai multe ncercri, s-a reuit determinarea hematocritului de 15,1% i a hemoglobinei 5,1% (Fig.nr.33).

Fig.nr.33 Fia analitic a sngelui la specia Fig.nr.34 Valorile principalilor indicatori Corydoras aeneus (Gill, 1858) (foto original) hematologici la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) (foto original) La specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), s-au determinat urmtoarele valori pentru principalii indicatori hematologici (Fig.nr.34): - nr.globule albe 85 930/ul - nr.globule roii 1 940 000/ul - hemoglobina 6,3% - hematocrit 24% 7.6. Analize privind stresul la petii exotici 7.6.1. Stresul i factorii de stres la petii de acvariu Condiiile stresante sunt foarte numeroase: oscilaiile de temperatur, chimismul necorespunztor, oboseala petilor prin transport, manipulri repetate, tratament repetat, densitatea mare de populare a bazinelor, viaa pe suprafee mici, popularea acelorai bazine cu peti de diferite dimensiuni, carene alimentare, traumatismele, iluminarea necorespunztoare, etc. Aceti factori pot aciona izolat, dar de obicei ei acioneaz asociat. Exist situaii cnd intervania lor lent i prelungit determin o acomodare, dar stresorii au de obicei influene negative. 7. 6.2. Experimente de dezvoltare a stadiilor timpurii la speciile luate n studiu, supuse unor factori stresani temperatura, pH , luminozitate 7.6.2.1. Material i metod Pentru studiul creterii speciilor de peti exotici supui unor condiii stresante (CHIOREAN ADRIANA, STANCIOIU S., DUMITRESCU ELENA, ALEXANDROV LAURA, 2011), legate de temperaturi anormale , modificri ale pH-ului i ale luminozitii s-au utilizat: - 80 exemplare Corydoras aeneus (Gill, 1858) , n greutate medie de cca 1,5 g/ex - 80 exemplare Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), n greutate medie de cca 0,3 g/ex

27

Exemplarele de Corydoras aeneus (Gill, 1858) i de Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) au fost distribuite cte 20 exemplare pe lot, 20 exemplare au reprezentat i lotul martor (M). Loturile experimentale au fost supuse unor schimbri ale parametrilor mediului de cretere, timp de 30 zile, reprezentnd factori stresani, care au evoluat dup cum urmeaz: - un lot a fost expus la temperatur ridicat (32C) - un lot la pH acid (pH = 4,5-5,5) - un lot supus la lumin zi/noapte, fr ntrerupere, 30 zile. Temperatura, pH-ul i lumina sunt unii dintre cei mai importani factori abiotici. Prin uoara lor variaie, n timp, organismului animalelor acvatice i este posibil acomodarea i funcionarea lui, fr a avea de suferit. Fluctuaia brusc, pe o anumit perioad de timp a acestor factori abiotici, supune organismul la un oc, astfel c supravieuirea, creterea sau reproducerea animalelor acvatice au mult de suferit. 7.6.2.2. Rezultate obinute Referitor la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), la nceputul experimentului s-au nregistrat greuti individuale ntre 1,020 g/ex. i 1,250 g/ex. (Tabel nr.8). Tabel nr.8 Corydoras aeneus (Gill, 1858) utilizat n experimentrile de stres Nr.crt./ Proba Greutatea minim (g) Greutatea maxim (g) Greutatea medie(g) 1. Martor 1,250 2,250 1,522 2. pH 1.020 2,560 1,555 3.Temperatura 1,130 2,400 1,635 4. Lumina 1,080 2,440 1,639 Dup o lun de cretere n condiii stresante s-au evideniat dimensiuni mai reduse la exemplarele supuse unui pH acid i temperaturi mult peste limita maxim admis (Fig.nr.35).
2.5 2 1.5 Greutatea init.(g) 1 0.5 0 Martor pH Temperatura Lumina Greutatea fin.(g)

Fig.nr.35. - Creterea speciei C.aeneus (Gill, 1858) n condiii de stress (valori medii)

Fig.nr.36 - Sporul de cretere nregistrat la specia C. aeneus (Gill, 1858) supus unor factori stresani

Sporul de cretere n variantele experimentale, la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), a nregistrat cea mai mare valoare la petii care au crescut n condiii normale(lotul martor) i mult mai redus, ndeosebi la exemplarele inute la un pH acid i la cele la care temperatura apei a fost de peste 30C.(Fig.nr.36). Referindu-ne la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), la nceputul experimentului valorile greutilor individuale au fost cuprinse ntre 0,120 g/ex. i 0,230 g/ex.(Tabel nr.9).

28

Tabel nr.9 Ancistrusbrevipinnis (Regan, 1904) utilizat n experimentrile de stres Nr.crt./ Proba Greutatea minim (g) Greutatea maxim (g) Greutatea medie(g) 1.Martor 0,210 0,570 0,305 2.pH 0,230 0,870 0,302 3.Temperatura 0,120 0.640 0,225 4.Lumina 0,170 0.810 0,319 Dup o lun de crete n condiiile de stres prezentate, exemplarele supuse creterii la temperaturi de 320C au nregistrat cele mai mici dimensiuni, urmate de cele supuse creterii la un pH acid i apoi de cele supuse unei iluminri non-stop (Fig.nr.37).
0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 Martor pH Temperatura Lumina
Greutatea init.(g) Greutatea fin.(g)

Fig.nr.37 - Creterea speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), n condiii de stress (valori medii) Rezultatele acestor experimentri s-au evideniat analiznd sporul de cretere pentru fiecare categorie de experiment n parte (Fig.nr.38 )
0.25 0.2 0.15 0.1 0.05
Sporul de crestere(g)

Fig.nr.38 - Sporul de cretere nregistrat la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) supus unor factori stresani

In concluzie, se apreciaz ca principalii factori de mediu implicai n creterea speciilor luate n studiu, temperatura , pH-ul i lumina, atunci cnd se se menin la valori mai mari sau mai mici dect cele normale, acioneaz ca factori de stres, ncetinind creterea petilor. Astfel temperaturi ale apei de 32Celsius, pH diminuat la 5-5,5 (fa de valorile normale de 6-8), au avut influene evidente n reducerea creterii speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904). O influen ceva mai redus s-a dovedit a o avea iluminatul continuu, petii dei iubitori de ntuneric, au sesizat acest pericol, cantonndu-se pe la colurile bazinelor mai puin iluminate.
0 M artor pH Tem peratura Lum ina

7.6.3. Studiul comparativ al dinamicii activitii superoxid dismutazei i catalazei la nivel branhial n condiii de hipoxie la speciile Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) 7.6.3.1. Date generale Oxigenul este un aceptor universal de electroni care permite organismelor aerobe s utilizeze energia nmagazinat n carbohidrai, grsimi i proteine. Este larg acceptat i experimental dovedit, c n timpul acestui proces catabolic pot rezulta att radicali liberi ai oxigenului ct i diferite alte forme secundare de radicali. 29

Termenul de specii reactive ale oxigenului este un termen general care se refer nu numai la radicalul oxigen central ci include deasemenea i alte specii chimice reactive ale oxigenului denumite fali radicali (HALLIWELL et.al., 2007). Radicalii liberi ai oxigenului sunt: radicalul superoxid, radicalul hidroxil, radicalul peroxid de hidrogen (apa oxigenat). Teste efectuate pe mai multe esuturi indic faptul c SOD este larg distribuit n organismul vertebratelor, identificndu-se trei izoforme (Tabel nr.13). Tabel nr.13. Rezultatele analizelor biochimice efectuate Izoenzime Localizare Metal/ Masa (SOD) celular monomer molecular Citosol 1Cu,1Zn 32.5 kDa SOD1 Mitocondrie Spatial intermembranar Matrix 1Mn 24.7 kDa SOD2 mitocondrial Extracelular 1Cu,1Zn 30 kDa SOD3 Subuniti Dimer Inhibiie CN+(pozitiv) Inhibarea H2O2 +(pozitiv)

Tetramer Tetramer

-(negativ) +(pozitiv)

+(pozitiv) +(pozitiv)

7.6.3.2. Material i metod In acest experiment s-au folosit peti din specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858), care s-au introdus n acvarii de 50 l n biobaza Universitii Ovidius Constana. Loturile experimentale au fost: - Lotul martor (M) pentru cele 2 specii: animalele au fost inute n acvarii de 50 l, 6 exemplare/lot, temperatura apei a fost de 22C, iar concentraia de oxigen de 5mg/l. - Lotul experimental s-a pregtit astfel: au fost cantonate n acvarii identice cu cele pentru lotul martor, n plus, deasupra acvariilor a fost montat o foaie de sticl pentru a izola apa din acvarii de aerul atmosferic. Cu 24 ore nainte de nceperea experimentului, petii nu au fost hrnii. Dup 12 ore animalele au fost sacrificate i au fost prelevate probe de esut branhial din care s-au determinat SOD, CAT, proteinele totale. Concentraia oxigenului la terminarea experimentului a fost de 1mg/l. 7.6.3.3. Rezultate i discuii Aa cum s-a precizat mai sus, oxigenul genereaz radicali liberi n condiii normale sau patologice, radicali care au un puternic impact n alterri ulterioare fiziologice i/sau morfologice. Cu alte cuvinte, sub efectul radicalilor liberi ai oxigenului se poate ajunge ca peroxidrile lipidice s conduc la afectarea integritii membranare i n ultim instan, s se ajung la citolize. Monitorizarea a dou dintre enzimele implicate n neutralizarea acestor radicali liberi ai oxigenului (superoxid dismutaza i de catalaza) s-a fcut, comparativ, n condiii de normalitate, din punct de vedere al oxigenului dizolvat i n condiii de hipoxie. Dup cum se poate vedea din tabelul nr.11, n cele 12 ore, n care concentraia oxigenului a sczut de la 5mg/l la 1mg/l, activitatea SOD s-a redus semnificativ la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), n timp ce la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), ea a rmas n limite normal fiziologice.

30

Tabel nr.14 Activitatea SOD n esutul branhial, la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) n condiii normale (M) i de hipoxie (Eh)
Lot expeimental XES M n XES Eh n t p M% SOD la specia Corydoras aeneus U/mg proteina 3,130,06 6 2,270,23 6 3,65 0,01 -37,89 SOD la specia Ancistrus brevipinnis U/mg proteina 2,740,22 6 3,010,27 6 NS +9,85

In ceea ce priveste catalaza, aceasta a nregistrat o cretere semnificativ a activitii n condiii de hipoxie ( tabel nr.24 ) la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), n timp ce la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), ea a sczut semnificativ n aceleai condiii experimentale. Tabel nr.15. Activitatea CAT n esutul branhial, la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) n condiii normale (M) i de hipoxie (Eh) CAT la specia Corydoras CAT la specia Ancistrus brevipinnis Lot
expeimental XES M n XES Eh n t p M% 6 2,58 0,05 +214,06 6 2,76 0,01 -118,46 6 2,010,53 6 1,300,33 aeneus U/mg proteina 0,640,05 U/mg proteina 2,840,45

Dac se priveste dinamica celor doi parametrii monitorizai la nivel branhial, n lumina celor discutate, se apreciaza ca specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) a fost mai reactiv la scderea concentraiei de oxigen la nceputul experimentului, n timp ce specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) a reacionat mai ntrziat la radicalii liberi ai oxigenului. Cu alte cuvinte, specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) a fost mai pregtit enzimatic s neutralizeze primele cantiti de radicali liberi ai oxigenului care s-au generat. Din tabelul nr.13, se poate vedea c specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) a avut o activitate catalazic bazal mai mare, comparativ cu specia Corydoras aeneus (Gill, 1858). Din acest motiv ea a putut s reziste mai bine, un timp, la atacul acestor radicali. Specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) a avut nevoie de mai mult timp pentru a activa genele care codificau cele dou enzime, ca rspuns la modificrile de mediu. Tabel nr.13 Activitatea SOD i CAT n esutul branhial, la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) n condiii bazale
Lot expeimental XES Corydoras aeneus n SOD U/mg protein 2,080,26 6 CAT U/mg protein 0.640,05 6

31

XES Ancistrus brevipinnis n t p M%

2,740,22 6 NS -31,73

2,840,45 6 4,51 0,001 +343,75

In concluzie, se precizeaz c s-a urmrit monitorizarea a doi radicali liberi ai oxigenului, superoxid dismutaz i catalaz. Dimensiunile mici ale petilor din cele dou specii nu au permis recoltarea de esut branhial suficient pentru a determina i ali parametri implicati n stres-ul oxidativ (glutation redus, malonil dialdehida, peroxidaza). Analiznd dinamica celor doi parametrii monitorizai la nivel branhial, se apreciaz c specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) a fost mai reactiv la scderea concentraiei de oxigen la nceputul experimentului, n timp ce specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) a reacionat mai ntrziat la radicalii liberi ai oxigenului. Nivelul bazal al catalazei fost semnificativ mai crescut la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) comparativ cu specia Corydoras aeneus (Gill, 1858). Acest lucru a permis speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) s recioneze mai rapid la generarea de radicali liberi ai oxigenului neutralizndu-i i astfel, rezistnd mai bine stres-ului oxidativ n prima parte a experimentului. Specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) s-a dovedit mai puin adaptat fa de stres-ul oxidativ n primele ore de hipoxie, ea activindu-i mecanismele de aprare cu ceva ntrziere. 7.7. Patologia petilor exotici 7.7.1. Date generale Bolile reprezint unul dintre cei mai importani factori limitativi n creterea petilor, acestea putnd produce mortaliti de pn la 90%. Chiar dac nu ntodeauna strile de boal declaneaz mortalitate, prin profundele modificri morfologice i fiziologice produc mari neajunsuri petilor, printre care se evideniaz: scderea rezistenei organismului petilor la diveri factori de mediu, ntrzieri n cretere, scderea prolificitii, etc. In timp ce n condiiile naturale de via apariia i rspndirea mbolnvirilor sunt mai puin frecvente i mai puin duntoare, cu excepia cazurilor de poluare, n condiii de cretere dirijat sunt cu mult mai periculoase, condiiile artificiale de via favoriznd aciunea unei diversiti mai mari de ageni patogeni, abiotici i biotici specifici. 7.7.2. Material i metoda de lucru Materialul biologic folosit a constat din 260 exemplare Corydoras aeneus (Gill, 1858) i 250 exemplare Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904). Analizele s-au efectuat n laboaratoarele I.N.C.D.M.Constana (CHIOREAN ADRIANA, STANCIOIU S., DUMITRESCU
ELENA, 2007, 2008).

Pentru stabilirea diagnosticului la peti, s-a realizeazat un examen macroscopic, nsoit de cel microscopic. Examenul microbiologic s-a fcut pentru determinarea bolilor infecioase. Din principalele organe i esuturi ale petilor s-au efectuat nsmnri n diluii pe medii de cultur uzuale (geloz, bulion simplu) i selective (mediu Mac Konkeypentru germeni din genul Aeromonas, mediu Meitert Istratipentru germeni din genul Pseudomonas, BSA pentru germeni din genul Vibrio). Petii de ap dulce, att din zonele temperate, ct i din zonele tropicale i subtropicale, sunt afectai n general de bacterioze, care au ca ageni etiologici bacteriile din genurile Aeromonas, Pseudomonas i mai rar Nocardia.

32

Microciupercile s-au identificat prin observaii directe asupra petilor, prin analiza la microscop a organelor i esuturilor afectate i izolarea acestora pe medii speciale de cultur (Sabouraud). Speciile au fost determinate dup caracteristicile de cultur i fructificaie (morfologia miceliului, forma hifelor, modalitile de dispunere a sporilor, forma i mrimea acestora). 7.7.3. Diagnosticarea mbolnvirilor - experimentri de profilaxie i terapie ale acestora 7.7.3.1 Boli provocate de bacterii SEPTICEMIA HEMORAGIC BACTERIAN Boala a fost semnalat la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) Septicemia hemoragic bacterian (SHB), este o boal a petilor de ap dulce, a crei etiologie este complex, dar insuficient clarificat. Boala are o larg rspndire pe glob, fiind prezentat n literatura de specialitate i sub denumirea de septicemia provocat de specii mobile de Aeromonas.

Fig.nr.39 - Corydoras aeneus (Gill, 1858), cu semnele clinice evidente de SBH ochi exoftalmici, sngerri la baza pectoralelor (foto original) Tratarea mbolnvirii s-a fcut cu antibiotice. Dup declanarea bolii (Fig.nr.39), s-a aplicat un tratament cu oxitetraciclin, administrat n hran, n doz de 100 mg/kg corp, timp de 7 zile. Rezultatele au fost mulumitoare, mortalitatea nregistrat la cele 50 exemplare Corydoras aeneus afectate de septicemie a fost de 10%. NOCARDIOZA Dup o perioad de o lun de zile, la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) au aprut primele simptome de boal: petii au nceput s stea grupai pe la colurile bazinului, s fie apatici n timpul zilei, s stea nemicai pe fundul acvariului sau n colurile acestuia, dar au continuat s fie apeteni. Cu timpul s-a constat c nottoarele pectorale, caudal i dorsal ncep s se distrug, petele ajungnd s nu mai aib cu se deplasa (Fig.nr.40). Fig.nr.40 - Exemplar de Corydoras aeneus (Gill, 1858), care prezint semne clinice ale nocardiozei (foto original) Experimentrile de tratare a bolii s-au fcut cu oxitetraciclin. Antibioticul a fost administrat n hrana, n doze de100 mg/kg corp, timp de 7 zile . Rezultatele au fost mulumitoare, vindecarea fiind vizibil numai la exemplarele mai putin afectate. Fig.nr.41 - Nocardia spp (foto original) a. filamente ramificate b. filamente fragmentate Msurile de prevenire includ n general msurile generale de asigurare a condiiilor normale de via pentru aceste specii de peti.

33

7.7.3.2 Boli provocate de microciuperci Bolile provocate de microciuperci au fost semnalate la specia de pete Corydoras aeneus (Gill, 1858). Microciupercile identificate au fost cele aparinnd genurilor Aspergillus, Trichophiton, Trichoderma i Penicillium (Fig.nr.42 i Fig.nr.43). Aceste specii se dezvolt n general pe un substrat organic aflat n degradare. Fig.nr.42 - Microciuperci parazite pe tegumentul de Corydoras aeneus (Gill, 1858) (Aspergillus, Penicillum, Trichophiton, Trichoderma) (foto original) Fig.nr.43 - Aspergillus spp.-detaliu (foto original) Pentru prevenirea i combaterea mbolnvirilor provocate de microciuperci s-au avut n vedere toate msurile de mbuntire a condiiilor de via a pestilor. Petii au fost scoi din acvarii, acestea fiind apoi dezinfectate cu clorur de var. Suplimentar, s-a administrat albastru de metilen, n doze de 3-5 mg/l apa, prin mbieri ale petilor timp de 36 ore. 7.7.3.3 Boli parazitare TRICHODINIOZA Trichodinioza a fost ntlnit la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858). Este una dintre cele mai rspndite parazitoze att la petii de ap dulce, marin i de acvariu. Agentii provocatori ai parazitozei sunt reprezentai de un grup de ciliate aparinnd familiei Urceolariidae, cele mai comune specii ntlnite fiind: Trichodina domerguei, T. pediculus, T. nigra, T. sp.(Fig.nr.44)

Fig.nr.44 - Trichodina sp. (foto original) Profilaxia i tratamentul bolii sunt destul de greu de realizat. Numai msurile de tratare a petelui infestat nu sunt suficiente n combaterea bolii. De aceea sunt necesare msuri profilactice riguroase, care vizeaz att petele ct i condiiile sale de via. Sunt eficiente bile de scurt durat n soluie de clorur de sodiu, n concentraie de 1-1,5%, timp de 20-30 minute i dezinfectarea acvariilor cu clorur de var, n doze de 1 ml/l ap. Hepaticoloza (Fig.nr.45)s-a ntlnit la puietul speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904). Aceasta este o boal provocat de viermele nematod Hepaticola petruschewskii Schulman, 1948. (syn. Capillaria petruschewskii Schulman, 1948), care paraziteaz n ficatul petilor ce le servesc drept gazd definitiv. Au fost infestate 250 exemplare Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) n urma hrnirii acestora cu hran vie, luata din mediul natural (Tubifex). Fig.nr.45 - Hepaticola spp. a-imagine general b-imagine n detaliu (ou de parazii (foto original)

HEPATICOLOZA

34

Profilaxia i terapia n aceast boal includ numai msurile de profilaxie general. In literatura de specialitate, nu sunt notate msuri de tratament. Ca msura imediat de profilaxie i terapie a constituit-o controlul riguros al hranei vii i ndeprtarea hranei utilizat n hrnirea petilor, infestat cu acest parazit. S-a experimentat de asemenea cu succes tratamentul cu rombendazol F, reuindu-se vindecarea exemplarelor bolnave de Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904). Ca doz s-a folosit 10 mg/kg pete/zi, administrat n hrana petilor de acvariu. Tratamentul a durat 5 zile, urmat de o pauz 10 zile i ulterior s-a repetat doza timp de nc 3 zile. In urma analizelor de laborator repetate petilor dup acest tratament, la un interval de o lun, s-a constat c acetia nu mai erau infestai cu ou sau aduli de Hepaticola. 7.7.3.4. Msuri generale de terapie i profilaxie ale mbolnvirilor. Pornind de la rezultatele obinute din cercetrile i experimentrile efectuate pentru identificarea bolilor, profilaxia i terapia acestora la cele dou specii de peti de acvariu, precum i de cunotinele acumulate n acest domeniu n literatura de specialitate, rezult o serie de msuri necesare n prevenirea i combaterea mbolnvilor la aceste specii de peti. Imbolnvirile care se manifest la petii de acvariu sunt numeroase i pot produce pierderi nsemnate prin mortaliti. Ele constituie astfel un factor limitativ deosebit de important n creterea petilor. Apariia i declanarea n masa a mbolnvirilor sunt determinate de calitatea mediului de cultura i starea fiziologic a petilor, stare direct subordonat mediului. Mediul acvatic actioneaz asupra petilor prin nsuirile sale fzico-chimice i agenii patogeni pe care i conine. Pentru ca bolile s se declanseze este necesar ca i organismul petilor s fie sensibil, sensibilitate generat de condiiile de via sau transmis ereditar. Profilaxia bolilor petilor de acvariu se poate asigura, n general, prin: - asigurarea igienei acvariilor, prin dezinfectarea periodic cu una din substanele: formalin 10 cmc/l ap, clorur de var 3-5 g/100 cmc ap, cloramin 10-12 g/10 cmc ap, timp de 2-3 ore, dup care bazinul se spal cu ap curat i se las 2-3 zile la zvntat; - utilizarea pentru cretere n acvarii a exemplarelor de peti fr semne evidente de mbolnviri, pentru a nu se introduce diveri ageni patogeni; - asigurarea condiiilor optime de via, specifice speciilor alesecondiii fzico-chimice ale apei, spaii adecvate, hran corespunzatoare cu toate elementele nutritive necesare speciei i n cantiti suficiente; atunci cnd se administreaz hran vie se face un control foarte atent pentru ca aceasta s nu fie contaminat cu diveri agenti patogeni (Ex. Tubifex contaminat cu bacterii sau parazii precum Hepaticola petruschewskii); - la introducerea plantelor acvatice decorative se asigur c acestea s nu fie contaminate cu organisme prdtoare/ duntoare speciilor de peti din acvarii; - trierea sever i separarea exemplarelor la care apar semne de mbolnviri; - administrarea periodic a unor tratamente antiparazitare i antiinfecioase, prin mbieri cu albastru de metilen, n doze variabile funcie de durata de mbiere 60 mg/l ap, timp de 5 minute, 20 mg/l ap, timp de 15 minute, 3 5 mg/l ap, timp de 3 6 ore; - manevrarea cu atenie a petilor la populare, transfer n alte acvarii, tratamente, precum i mpiedicarea apariiei unor variaii brute a factorilor de mediu specifici, a nlocuirii brute, totale, a hranei pentru prevenirea strilor de stres i a scdereii rezistenei petilor la mbolnviri. Terapia bolilor se realizeaz mai nti prin identificarea surselor de infecie sau de infestare pentru a le putea nltura, apoi prin aplicarea tratamentului, funcie de boal i organul sau esutul afectat. o Pentru combaterea ectoparaziilor se utilizeaz mbieri n soluii antiparazitare: sare de buctrie 5% timp de 35 minute (Trichodina, Saprolegnia, Gyrodactylus, Dactylogyrus, etc.); 35

formol, n concentraie de 2 ml/l ap, timp de 15 minute (Ichthiophthirius, Trichodina, Gyrodactylus, Dactylogyrus , Saprolegnia, etc); soluie de albastru de metilen 10-30 mg/l ap, timp de 30 minute (Chillodonella, Costia, Saprolegnia,etc); permanganat de potasiu, n doze de 10 mg/l ap, folosit timp de 30 minute (Trichodina, Costia, Chilodonella, Ichthiophthirius, etc); sulfat de cupru, n concentraie de 0,1 g/l ap, timp, de 10-30 minute (Gyrodactylus, Dactylogyrus , Saprolegnia, etc). o Pentru parazitozelor interne se pot utiliza : rombendazol F,10 mg/kg peste/zi, administrat timp de 5 zile (Hepaticola petruschewskii); niclosamid, n doze de 100-200 mg/Kg pete/zi , timp de 3-5 zile ( Botrocephalus, Ligula, etc). o Pentru combaterea bolilor infecioase sunt recomandate tratamentele cu antibiotice, administrate n hran, timp de 7-10 zile: cloramfenicol racemic50mg/Kg pete/zi, oxitetraciclina n doze de 50-100 mg/Kg pete/zi, etc. Din experimentrile fcute a reieit c aceste dou antibiotice sunt cele mai eficiente n tratamentul infeciilor la peti. In utilizarea subsanelor medicamentoase trebuiesc avute n vedere cteva aspecte de prim importan. Imbierile antiparazitare s se realizeaz la petii care nu au fost hrnii cel puin 12 ore nainte. Unii parametrii fzico-chimici ai apei influenteaz aciunea produselor utilizate n profilaxia i terapia bolilor la peti (creterea temperaturii apei mreste gradul de toxicitate al formolului i permanganatului de potasiu, scderea pH-ului mrete activitatea sulfatului de cupru i o reduce pe cea a permanganatului de potasiu, iar creterea pH-ului mrete toxicitatea sulfatului de cupru, prezena materiilor organice i a suspensiilor reduc activitatea sulfatului de cupru si mresc toxicitatea formolului i reduc efectul oxidativ al permanganatului de potasiu). In profilaxia i terapia bolilor, elemental cel mai important l reprezint prevenia, aceasta fiind ntotdeauna mult mai uor de realizat, asigurndu-se astfel eliminarea pierderilor prin mortaliti cauzate de boli. In concluzie, se apreciaz ca n conditii de stres, petii de acvariu sunt supui aciunii unor diveri factori n schimbare, ncepnd cu condiiile de mediu i terminnd cu agenii patogeni, incluznd bacterii, microciuperci, protozoare i viermi. Cele mai importante afeciuni ntlnite n condiii de stres n experimentele noastre au fost: septicemia hemoragic bacterian (SHB) provocat de bacterii din genul Aeromonas i Pseudomonas, infecia cauzat de Nocardia sp, afeciunile provocate de microciupercile din genurile Aspergillus, Penicillum, Trichophiton,Trichoderma i parazitoza provocat de viermele Hepaticola spp. Msurile generale de profilaxie ca i cele de tratament experimentate, prin administrarea unor substane medicamentoase, au avut rezultate pozitive diminund considerabil pierderile prin mortaliti datorate acestor boli. Astfel pentru combaterea infeciilor au fost eficace tratamentele cu oxitetraciclin, administrat n hran, n doz de 100 mg/kg corp, timp de 7 zile, iar pentru terapia infestrii cu Hepaticola tratamentul cu rombendazol F, 10 mg/kg pete/zi, administrat n hrana petilor de acvariu timp de 5 zile. 8. CONCLUZII GENERALE I CONTRIBUII PERSONALE 8.1. CONCLUZII GENERALE 1. Piscicultura ornamental sau acvaristica, ramur important a pisciculturii contemporane, a cunoscut n ultimul timp un progres remarcabil, constituindu-se astfel ca o tiin independent i n egal msur ca un hobby, acvariul fiind un excelent mediu pentru cercetare tiinific a ihtiologilor, hidrobiologilor, geneticienilor, etc.

36

2. Scopul acestei lucrrii de doctorat l reprezint mbogirea cunotinelor privind dou specii de peti exotici, acomodai la condiiile locale, specii de talie mic, mai puin studiate att de acvaritii profesioniti ct i de amatori, Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858), aparinnd familiilor Locariidae i respectiv Callichthyidae, cu date referitoare la reproducere i cretere, starea lor fiziologic n diferite condiii de via, stresul i mbolnvirile acestora n captivitate. 3. Acvaristica a contribuit i contribuie la dezvoltarea cercetrii tiinifice n domeniul acvaculturii, avnd o strns legtur cu multe alte tiine, printre care, ecologia, ndeosebi n ceea ce privete observarea i cunoaterea biologiei speciilor invazive, n vederea stabilirii posibilitilor de control i de limitare a acestora acolo unde cauzeaz dezechilibre ecologice i cu alte tiine, precum etologia (etologia captivitatii i a reproducerii), multe studii de comportament la peti desfurandu-se n acvarii, unde observaiile se fac mai eficient i animalele sunt mai uor de manipulat. 4. Exist numeroase specii de peti exotici care impresioneaz prin aspectul i coloristica lor, pretabile pentru acvaristic, caracterul exotic al speciilor prezente n Acvariul din Constana, unde s-au derulat i experimentrile de cretere i reproducere a speciilor Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858), fiind dat n principal de faptul c acestea sunt originare din cu totul alte zone geografice dect arealul apelor Romniei. Speciile de peti luate n studiu i duc viaa n bazinul hidrografic al fluviului Amazon, trind mai mult pe lng maluri, n lacurile inundabile, deci n zone linitite i ferite de curentul puternic al fluviului. Sunt specii cu activitate mai mult nocturn, nepretenioase la concentraia apei n oxigen, caracteristici biologice care au condus la adaptarea relativ uoar la creterea n captivitate. Au fost evaluate aspectele morfologice, anatomice i fiziologice ale ambelor specii luate n studiu. 5. Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858), cele dou specii luate n studiu, prezint caracteristici morfo-fiziologice tipice, fiind specii de talie mic, au un colorit de la gri-verde pn la maron, cu abdomen ocru la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) i gri-maron pn la negru-albstrui la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904). Coridoras aeneus (Gill, 1858), specie nocturn, prefernd zonele ntunecate din acvarii, atinge maturitea sexual la vrsta de 1 an. In condiii de captivitate depune icrele pe geamurile acvariului i incubaia dureaza 6 zile la 22C. Dup resorbia sacului vitelin, puii sunt hrnii cu hran natural de talie mic, apoi cu hran vegetal mrunit i mai trziu cu hran animal caracteristic i hran artificial vitaminizat. Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), este o specie bentonic, cu un aspect deosebit, avnd capul mai mare dect corpul i lungimi de 1013 cm. Depune ponta n adaposturi artificiale, vase de ceramic brut sau nuci de cocos, incubaia durnd aproape o sptmn. Dup resorbia sacului vitelin, puii sunt hrnii timp de dou sptmni numai cu hran vegetal, apoi i cu hran animal. 6. Petii ntrein relaii foarte strnse cu mediul ambiant, un rol important n creterea i reproducerea petilor de acvariu avndu-l factorii abiotici i factorii biotici, printre care se evideniaz: temperatura, pH-ul, duritatea, oxigenul dizolvat, turbiditatea, lumina, produsele azotoase, bacteriile, viruii i microalgele. Pentru creterea petilor sunt necesare ape curate, oxigenate, cu un pH de 6,5-7,5, cu o duritate normal, bine iluminate, fr substane periculoase precum cele azotoase, lipsite de bacterii patogene i parazii. Iluminatul, care trebuie s asigure lumina necesar creterii petilor, dar s creeze i un aspect foarte plcut acvariilor, alturi de filtrarea apei, constituie unele dintre cele mai importante probleme de rezolvat n creterea petilor. 7. Urmrirea mediului ambiant, prin valorile principalilor factori abiotici i biotici i meninerea acestora n limitele normale prin metodele i tehnicile specifice acvaristicii 37

(nclzirea bazinelor, aerarea apei, iluminarea acvariilor, filtrarea apei prin filtre speciale), au constituit obiective majore n activitatea de cretere a speciile luate n studiu. 8. Acvariile utilizate n experimentrile efectuate, au avut diferite dimensiuni i forme, fiind dotate corespunztor pentru a fi utilizate ca acvarii de ntreinere, reproducere, cretere, carantin, etc. Un rol nsemnat l reprezint plantele, rocile sau substratul artificial din materiale plastice, care trebuie s ncnte att privirea vizitatorului i n acelai timp s constituie refugiile necesare pentru depunerea pontei, dezvoltarea embrionar i creterea petilor. 9. O analiz a ciclului vital al petilor arat c acesta este mprit n patru mari perioade: perioada embrionar (care cuprinde timpul de la fecundare pn n momentul eclozrii embrionului), perioada larvar (care cuprinde timpul de la eclozarea embrionului pn la apariia solzilor), perioada de pui (care cuprinde timpul de la dispariia total a caracteristicilor larvare i apariia solzilor, pn la formarea organelor sexuale i a primei reproduceri) i perioada adult (care cuprinde tot restul vieii, de la prima reproducere pn la moarte). 10. Reproducerea petilor de acvariu i incubaia difer de la o specie la alta, fiind influenate de o serie de factori interni (gradul de maturare, activitatea hormonal,etc.) i externi (factori abiotici i biotici). Depunerea icrelor n acvarii se face diferit de la o specie la alta. Spre exemplu reprezentani ai familiilor Loricariidae depun icrele, care sunt lipicioase, i ader bine, pe vase din ceramic brut, nesmluit, Cichlidele depun icrele pe decorul din acvariu, pe frunze, pe eava filtrului, etc. In dezvoltarea embrionar se ntlnesc trei faze principale, morula, blastula i gastrula, larvele eclozate trecnd printr-o serie de transformari morfo-fiziologice (dispariia sacului vitelin, trecerea la respiraia branhial, formarea sistemului circulator,etc) pn ce ajung la faza de pui i apoi de adult. S-a realizat reproducerea n captivitate, evideniindu-se caracteristicile speciale, dimorfismul sexual, etapele maturrii i dezvoltarii gonadelor, raportul gono-somatic, depunerea pontei, fecundarea. Incubaia i dezvoltarea embrionar au fost umrite i nregistrate etapizat i imagistic la fiecare specie n parte, utilizndu-se diferite soluii de conservare, pentru analize biochimice, citologice/hematologice, histologice, genetice, patologice (Partea a II-aContribuia personal). Creterea larvelor a fost descris n relaie cu etapele de dezvoltare i cu regimul de hran selectiv administrat. Au fost instalate variante experimentale pentru evaluri morfometrice, de cretere i dezvoltare. 11. O caracteristic a speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), o reprezint dimorfismul sexual care este foarte evident, masculul prezentnd pe cap excrescene, bifurcate, de diferite lungimi, care lipsesc n totalitate la femel. La specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), dimorfismul sexual nu este evident, masculul deosebindu-se de femel doar prin dimensiune, aceasta din urm fiind ceva mai mic, iar n perioad de reproducere are abdomenul mult mrit. 12. In capitolul privind hrnirea petilor de acvariu, se face precizarea ca o importan deosebit o reprezint metabolismul, care nsumeaz totalitatea proceselor fizicochimice i reaciilor biochimice de transformare a substanelor nutritive, n vederea asigurrii creterii i dezvoltrii organismului, ct i a energiei necesare ntreinerii proceselor vitale. Metabolismul, dirijat de sistemul nervos central, este dependent de o serie de factori interni i de condiiile mediului extern (dimensiunea petelui, temperatura apei, gradulul de maturitate sexual, concentraia oxigenului din ap, salinitatea apei, pH-ul, nivelul hrnirii, etc.). S-a prezentat i s-a analizat n mod deosebit rolul i importana vitaminei C n dieta petilor de acvariu (mult timp asociat cu activitile 38

ovariene ale femelelor), n dezvoltarea corespunzatoare a esuturilor osoase i conjunctive, deficitul de vitamina C provocnd scolioz, lordoz, hiperplazia cartilagiilor i a maxilarului, anomalii ale operculelor, hemoragii interne. 13. Hrana petilor trebuie s conin cantiti optime de hidrai de carbon, lipide, proteine, vitamine i oligoelemente. Hrana distribuit poate fi proaspat sau congelat, artificial sau natural. Hrana artificial este astfel realizat nct s conin toate elementele nutritive necesare creterii petilor i se gsete n comer. Hrana natural asigur o cretere sntoas i o dezvoltare armonioas a petilor de acvariu i este reprezentat de diverse specii de infuzori, crustacee mici i viermi, pentru care s-au prezentat i tehnologiile de cultivare (Paramecium caudatum, Brachionus plicatilis, Auguillula silusiae, Enchitraeus albidus, Tubifex tubifex, Daphnia pulex, Artemia salina). 14. Regimul de hran n condiii de captivitate, se impune s se fac la ore fixe, cu hrana zilnic mprit n dou, o mas de diminea i una la sfritul zilei, cu 1-2 ore nainte de stingerea luminii n acvariu. Pentru stadiile timpurii de dezvoltare, hrana trebuie s fie de dimensiuni corespunztoare i distribuit n cantiti mici, de mai multe ori pe zi (4-5 mese). 8.2. CONTRIBUII PERSONALE ADIIONALE STUDIILOR I EXPERIMENTRILOR ANTERIOARE 1. Contribuiile personale se regsesc n rezultatele care au fost prezentate, privind reproducerea, creterea stadiilor timpurii a speciilor luate n studiu, Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858), eficiena hrnirii cu hran artificial vitaminizat, hran mixt (natural i artificial) i hran natural (Tubifex), identificarea speciei Ancistrus sp. prin analize genetice, analize hematologice pentru cunoaterea strii lor fiziologice, efectul unor factori stresani (temperatura, pH, luminozitate) asupra creterii, dinamica activitii superoxid dismutazei i catalazei la nivel branhial n condiii de hipoxie, identificarea mbolnvirilor n captivitate, profilaxia i terapia acestora. 2. Principalii factori de mediu implicai n creterea speciilor luate n studiu, temperatura, pH-ul i lumina, meninute la valori mai mari sau mai mici dect cele normale, acioneaz ca factori de stres, ncetinnd creterea petilor. Astfel, temperaturi ale apei de 32C (normal fiind 23-28C), ph diminuat la 5-5,5 (fa de valorile normale de 6-8), au avut influene evidente n reducerea creterii speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858) i Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904). O influen mai redus s-a dovedit a o avea iluminatul continuu, petii, dei iubitori de ntuneric, au sesizat acest pericol, cantonndu-se pe la colurile bazinelor mai puin iluminate. La Corydoras aeneus (Gill, 1858), cea mai mare influen asupra creterii a avut-o aciditatea apei, urmat de temperatur i iluminare. Valorile medii ale sporurilor de cretere obinute ntr-o lun de cretere experimental, au fost fa de lotul martor cu 0,172 g mai mici la petii crescui la pH redus, cu 0,152 g mai mici la petii crescui la temperatur ridicat i cu 0,058g mai mici la petii crescui cu lumin continu. i la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) n cele trei variante experimentale, s-au nregistrat sporuri de cretere mai reduse, creterea fiind ncetinit de stresul cauzat de un pH acid, o temperatur mult mai ridicat dect maxima normal pentru aceast specie i lumin non-stop (specia fiind iubitoare de ntuneric). Sporurile medii de cretere au fost: 0,215g/ex la proba martor, 0,108g/ex la proba cu pH acid, 0,135 g/ex la proba cu temparatur ridicat, i de 0,1705g/ex la proba n care petii au fost supui unei iluminri continui. 3. Pentru reproducerea speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858), s-au utilizat 50 exemplare stadii juvenile, introduse ntr-un acvariu cu un volum de 160 litri (1,00 x 0,40 x 0,40 m), cu filtru exterior, cu linie de aerare. Temperatura mediului a fost 25-28C, pH-ul - 8 i dG - 18. Bazinul de cretere a fost lipsit de substrat pentru a evita creterea concentratiei 39

4.

5.

6.

7.

8.

substanelor azotoase i afectarea puietului prin intoxicare, apoi odat cu creterea i dezvoltarea exemplarelor, bazinul a fost amenajat i cu substrat (nisip i pietri cu granulaie fin). Petii au fost hrnii, de 3-4 ori/zi cu hran vitaminizat sub forma de fulgi, au atins maturitatea sexuala, i-au ales singuri perechile reproductoare, fiind apoi scoase pentru reproducere ntr-un acvariu cu volum mai mic (50 litri). Femela, la prima reproducere, a depus un numr mic de icre (n jur de 50 icre), pe geamul acvariului, evoluia embrionar derulndu-se pe o perioad de 6 zile, evideniindu-se principalele stadii de dezvoltare embrionar: morula, blastula i gastrula. Din experiena acumulat mai bine de 15 ani n cadrul Acvariului Constana, se apreciaz ca cea mai eficient hran n creterea speciei Corydoras aeneus (Gill, 1858), este hrana vie, bogat n proteine i bine asimilat. Sporul de cretere n lungime i greutate a petilor la care s-a utilizat hrana vie a fost mai mare cu cca 16% i respectiv 9,5% fa de cei la care s-a utilizat hran artificial vitaminizat i cu 37% i respectiv 21% fa de petii la care s-a utilizat hran mixt (artificial i natural). Cel mai redus spor de cretere s-a nregistrat la lotul de peti hrnii cu hran mixt, petii acceptnd mai uor hrana vie n detrimentul celei artificiale. Hrana natural, dei asigur o accelerare a ritmului de cretere a petilor, prezint dezavantajul c poate fi contaminat cu diveri ageni patogeni transmisibili, astfel nct exist permanent pericolul declanrii unor mbolnrivi la petii hrnii cu astfel de hran. Pentru nlturarea pericolului declanrii unor boli i obinerea de peti sntoi i buni pentru reproducere se recomand tratarea hranei naturale pentru anihilarea eventualior ageni patogeni sau utilizarea hranei artificiale vitaminizate. In ceea ce privete reproducerea, incubaia, creterea larvar i a stadiilor timpurii la specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), se apreciaz c maturitatea sexual este atins la vrsta de 12 luni, ns pentru reproducere sunt preferai reproductori n vrst de 14-18 luni. Incubarea icrelor, n care se manifest foarte clar dezvoltarea embrionar cu cele trei faze principale, morula, blastula, gastrula i formarea larvelor, dureaz 6 zile la temperatura de 23C. Dup eclozare, larvele stau grupate n interiorul adpostului n care a avut loc incubaia, unde masculul le ventileaz. La 48 de ore (2 zile) de la eclozare, se pot distinge, pe sacul vitelin, vasele sanguine, iar dup 96 de ore (4 zile) sacul vitelin este resorbit complet, larvele atingnd 6 mm. Dup 120 de ore (5 zile) larvele capat pe deplin forma prinilor i au o lungime de cca 10 mm. Dup 144 de ore (6 zile) puietul ncepe s se disperseze n cutarea hranei, la 2 luni atingnd n jur de 14-16 mm. Pentru analizele genetice s-au studiat tehnicile utilizabile la peti incluznd tehnica ADN barcoding, extracia ADN folosind kitul NucleoSpin Tissue, estimarea concentraiei ADN prin spectrofotometrie, reacia de amplificarea a regiunii 5COX I /16S/Cyt B din ADN mitocondrial, electroforeza n gel de agaroz a produilor de reacie, extracie ADN din gel de agaroz folosind kitul Jena Bioscience Agarose, Gel Extraction, secveniere PCR folosind kitul Jena Bioscience DNA Cycle Sequencing Kit (Fig.nr.27-30). Secvenele ADN obinute au fost editate manual cu ajutorul aplicaiilor software e-Seq 3.0 i AlignIR, ulterior, prelucrate cu ajutorul aplicaiei BioEdit 7.0.1. Secvenele ADN obinute au fost introduse n aplicaia BLAST pentru a se interoga baza de date GenBank i pentru a se obine secvenele ADN omoloage care conduc la identificarea speciilor studiate. Tot pentru identifiarea speciei cu ajutorul secvenei ADN barcode obinut au fost folosite bazele de date BOLD Identification System (IDS), i NCBI The National Center for Biotechnology Information. Prin folosirea interfeei web Barcode of Life Data Systems, secvenele obinute au fost comparate cu 696,388 de secvene ADN de referin. Similaritatea cea mai ridicat a fost constatat cu specia Ancistrus brevipinis (90,43%), iar similariti mai mici au fost nregistrate cu speciile A. cirrhosus, A. ranunculus, A. chagresi. Deci, specia cea mai 40

probabil utilizat n studiul prezent este Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904). Scorul maxim obinut este considerat ns destul de mic pentru identificarea corect a speciilor prin tehnica ADN barcoding. Problema poate fi depit prin utilizarea altor secvene ADN (16 S i citocrom B) pentru care exist secvene de referin i pentru alte specii ale genului. 9. Rezultatele privind analizele hematologice realizate la speciile Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858) au fost comparate cu cele din literatura de specialitate de la diferite specii de peti de ap dulce evideniidu-se valori apropiate de cele cunoscute, astfel c la specia Corydoras aeneus (Gill, 1858), hematocritul 15,1%, hemoglobina 5,1%; iar la Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904), numr globule albe 85.930/l, numr globule roii 1.940.000/l, hemoglobina 6,3%, hematocritul 24%. 10. Din studiul comparativ al dinamicii activitaii superoxid dismutazei i catalazei la nivel branhial n condiii de hipoxie la speciile Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858), se apreciaz ca specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) a fost mai reactiv la scderea concentraiei de oxigen la nceputul experimentului, n timp ce specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) a reacionat mai ntrziat la radicalii liberi ai oxigenului. Cu alte cuvinte, specia Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) a fost mai pregtit enzimatic s neutralizeze primele cantiti de radicali liberi ai oxigenului care s-au generat avnd o activitate catalazic bazal mai mare semnificativ, comparativ cu specia Corydoras aeneus (Gill, 1858). Acest lucru a permis speciei Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) s recioneze mai rapid la generarea de radicali liberi ai oxigenului neutralizndu-i i astfel, rezistnd mai bine stres-ului oxidativ n prima parte a experimentului; Specia Corydoras aeneus (Gill, 1858) s-a dovedit mai puin adaptat fa de stres-ul oxidativ n primele ore de hipoxie, ea activindu-i mecanismele de aprare cu ceva ntrziere. Totui, cele 12 ore de hipoxie s-au dovedit nocive pentru esutul branhial la ambele specii. 11. In condiii de stres, petii de acvariu au fost supui aciunii unor diveri ageni patogeni, incluznd bacterii, microciuperci, protozoare i viermi. 12. Cele mai importante afeciuni patologice semnalate la speciile Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858) au fost septicemia hemoragic bacterian (SHB) provocat de bacterii din genul Aeromonas i Pseudomonas, infecia cauzat de Nocardia sp, afeciunile provocate de microciupercile din genurile Aspergillus, Penicillum, Trichophiton, Trichoderma i parazitoza provocat de viermele Hepaticola sp. 13. Msurile generale de profilaxie ca i cele de tratament experimentate, prin administrarea unor substane medicamentoase, au avut rezultate pozitive diminund considerabil pierderile prin mortaliti datorate acestor boli. Astfel pentru combaterea infeciilor au fost eficace tratamentele cu oxitetraciclin, administrat n hran, n doz de 100 mg/kg corp, timp de 7 zile, iar pentru terapia infestrii cu Hepaticola tratamentul cu rombendazol F, 10 mg/kg pete/zi, administrat n hrana petilor de acvariu timp de 5 zile. 14. Intruct o surs de infecie (Nocardia) i de infestare cu parazii (Hepaticola sp.) a speciilor de peti studiate, a constituit-o hrana vie administrat (viermii Tubifex), tratarea acesteia nainte de a fi administrat pentru distrugerea agenilor patogeni constituie o necesitate absolut. 15. Dezvoltarea acvaristicii la nivel mondial a dus i la mbogirea literaturii de specialitate, existnd astzi numeroase studii care relev aspecte variate privind creterea unor specii de peti de acvariu, de la crearea condiiilor de via specifice pn la studii privind hrnirea, reproducerea, genetica, selecia, particularitile genetice, mbuntirea spectrului trofic, etc.

41

16. In acest context, rezultatele obinute prin observaiile, cercetrile i experimentrile realizate pe parcursul a peste cincisprezece ani n Acvariul Constana, asupra speciilor Ancistrus brevipinnis (Regan, 1904) i Corydoras aeneus (Gill, 1858), specii mai puin studiate, au urmrit obinerea de date i informaii biologice i tehnologice, care s mbogeasc cunotiinele privind creterea petilor de acvariu i s vin n sprijinul att a iubitorilor aspectelor acvaristice, publicului larg ct i a specialitilor din domeniul acvaculturii, cercetrii tiinifice, elevilor i studenilor care iubesc sau se pregtesc pentru acest domeniu, parte component a tradiiilor i activitilor litorale, extrem de important n context european al dezvoltrii durabile i gospodririi integrate a zonei costiere.
9. BIBLIOGRAFIE SELECTIV
1. ALEXANDROV LAURA, 2002, Utilizarea nevertebratelor mrunte n hrana stadiilor timpurii ale speciilor de peti cu valoare economic i ecologic la litoralul romnesc, tez de doctorat, Universitatea Dunrea de Jos, Galai. 2. ALEXANDROV LAURA, CHIOREAN ADRIANA & alii, 2008, Cultivarea altor grupe de nevertebrate marine mrunte, capitol al crii OBINEREA HRANEI VII N ACUACULTURA Scheme tehnologice pentru cultivarea nevertebratelor marine mrunte-organisme zooplanctonice Editura Punct Ochit, Constana, ISBN 978-606-8035-02-4, pp.84-95. 3. ANTONESCU C.S., 1938, Elemente nou n fauna apelor dulce din Romnia, volunul jubiliar Grigore Antipa, hommage son ouvre, Bucureti, pp.85-91. 4. ANTONESCU C.S., 1957, Petii din apele R.P.R., Editura Agro-Silvic de Stat, pp.7. 5. BALL S.L., i ARMSTRONG K.F., 2005, A DNA-based identification system for insect pests: a test case with the Lymantriidae. Can.J.For.Res.35. 6. BALL S.L., HEBERT P.D.N., BURIAN S.K. i WEBB J.M., 2005, Biological identification of mayflies (Ephemeroptera) using using DNA barcodes. JNABS 24. 7. BASIL J.A., RAJEE M., KUMARAGURU A.K., 1995, Larviculture & Artemia Newsletter-Culture of Artemia using market waste, California, pp.34-36. 8. BAZZOLI N. i GODINHO H.P., 1991, Reproductive biology of the Acestrorhynchus lacustriis (Reinhand, 1874) (Pisces, Characidae) from Trs Marias Reservoir Brazil. Zool. Anz. 226:285-299. 9. BNRSCU P., 1964, Fauna R.P.R. PISCES OSTEICHTHYES (PETI GANOIZI I OSOI) vol.XIII, Editura R.P.R., Bucureti, pp.25-40; 960. 10. BEUTLER E., 1984, Red cell metabolism: Manual of Biochemical Methods. Grune and Stratton, Inc., New York. Thirded. 11. BOGATU D., MUNTEANU GABRIELA, 2003, Tratat de ihtiopatologie, Editura Excelsior Art, Timioara, ISBN 973-592-085-9, pp.815. 12. BUD I., 2002, Acvaristica, Edituta Academia-Press Cluj Napoca, pp.1-204. 13. BREZEANU GH., NICOLAU AURELIA, CALOIANU-IORDCHEL MARIA, BUNI A., 1973, Reproducerea artificial i dezvoltarea la peti, Editura Academiei R.P.R., pp. 11-40,38,212-215. 14. BREZEANU GH., 1977, Influena hranei asupra dezvoltrii intestinului speciilor Cyprinus carpio (L.), Leucaspius delineatus (Heckel) i Stizostedion lucioperca (L.) n perioada larvar, Hidrobiologa, tomul 15, pp. 309-320. 15. BYUNG PAL YU, 1994, Cellular defenses against damage, from reactive oxygen species, vol 74, no.1. 16. CHIOREAN ADRIANA, STNCIOIU S., DUMITRESCU ELENA, 2007 Observaion and treatment in the case of falling ill of some species in Constana, revista Oltenia. Studii i comunicri. tiinele Naturii, cotat CNCSIS B+, indexat ISI, vol. XXIII. Edit.Fevrodest Agora: 139-141 17. CHIOREAN ADRIANA, DIMA LIGIA, 2007, Educaia ecologic n muzeele de tiintele naturii, Sesiunea de Comunicri tiinifice Piteti. 18. CHIOREAN ADRIANA, STNCIOIU S., ELENA DUMITRESCU, 2008 Diseases of Corydoras aeneus specie in captivity/ Bolile speciei Corydoras aeneus n captivitate, revista Oltenia. Studii i comunicri. tiinele Naturii, cotat CNCSIS B+, indexat ISI,vol. XXIV. Edit. Sitech: 143-146 19. CHIOREAN ADRIANA, STNCIOIU S., ALEXANDROV LAURA, 2009, Importana studiilor asupra alimentaiei petilor, Editura Bioflux, Cluj-Napoca. ISBN 978-606-92028-1-4. 20. DABROWSKI K., CIERESZKO A., BLOM J., 1995, Larviculture & Artemia Newsletter Ascorbic acid function in fish gametogenesis and fertility, California, pp.49. 21. DARLING J.A., BLUM M.J., 2007, DNA-based methods for monitoring invasive species: a review and prospectus. Biological Invasions 9(7): 751.

42

22. DAVIES M.J., WANG H., DEAN R.T., 1999, Stable markers of oxidant damage to proteins and their application in the study of human disease, Free Radic. Biol. Med. 27: 1151-1163. 23. FROESE R., PAULY D., 2008, Fishbase www.fishbase.org. 24. GILBERT M.A. & GRANATH W.O.jr., 2003, Whirling disease and salmonid fish: life cicle, biology and disease-Journal of Parasitology, 89(4), pp.658-667. 25. HALLIWELL B., GUTTERIDGE B. J., 2007, Free Radicals in Biology and Medicine, Oxford, UK: Oxford Univ.Press. 26. HAN D., LOUKIANOFF S., McLAUGHKIN L., 2000, Oxidative stress indices: analytical aspects and significance. In Handbook of Oxidants and Antioxidants in Exercise, Edited by Sen CK, L Pacher, O. Hanninen, Amsterdam: Elservier, pp. 433-483. 27. HAZEN T.K., ESCH G.W., GLASSMAN A.B., GIBBONS J.W., 1978, Relationship of Season, thermal loading and Redhore disease with various haematological parameters in Micropterus salmoides, J. of Fish, Biol., 12: 491-498. 28. HEBERT P.D.N., CYWINSKA A. i alii, 2003, Biological identification through DNA barcodes, Proc. R. Soc. London. B.270: 313-321. 29. HOLLINGSWORTH, 2007, DNA barcoding: potential user in Genomics, Society and Policy, vol 3, nr.2, pp.44-47. 30. HORVTH LSZL, 2005, Petele i cresctoriile de pete, M.A.S.T. 31. HUYSENTRUYT F., 2008, Early development of Corydoras aeneus (Siluriformes, Callichthyidae): a case study for understandind the evolutionary basis of loricarioid ontogenetic patterning, tez de doctorat, Belgia. 32. HWANG E.S., KIM G.H., 2007, Biomarkers for oxidative stress status of DNA lipids, proteins in vivo cancer research, Toxicology 229:1-10. 33. IACOB M., PETRESCU-MAG V., 2008, Inventarul speciilor non-native de peti din apele dulci ale Romniei, Editura BioFlux Cluj Napoca, pp.31, 33-34. 34. ITEGRATED TAXONOMIC INFORMATION SYSTEM, accessed on may 2007. 35. IWAMA G.K., MORGAN J.D., BARTON B.A., 1995, Larviculture and Artemia Newsletter Simple field methods for monitoring stress and general condition of fish, California, pp.12 36. JONES D.P., 2006, Redefining oxidative stress. Antioxid Redox, Signal 8: 1865-1879. 37. KAHAN D., 1993, Larviculture & Artemia Newsletter Studies on high population density cultures of copepods, California, pp.67. 38. LANDAU MATTHEW, 1991, Introduction to aquaculture, pp.325,339,341,344. 39. LOWRY O.H.N., ROSEBROUGH J., FARR A.L., RANDALL R.J., 1951, Protein measurement with the folin phenol reagent, Biol. Chem 193: 265-275. 40. MARINESCU AL.G., KUNEMANN H., DRGHICI O., BARBU L., ANDREU S., CRCIUN N., 1997, Seasonal oxygen consumption in the goldfish Carassius auratus gibelio (Bloch), Rev. Roum. BoilBoim. Anim., 42 (1): 107-116. 41. MISIL R.E., MISIL C., COMNESCU G., 1998, Civa parametrii hematologici, biochimici i histologici ai eritrodermatitei sngerului, Simpoz. Aquarom, Galai, pp.299-301 42. NELSON J.S., 2006, Fishes of the World, New York, pp.600. 43. OPREA M. i colab., 2000, Acvaristica practic, Editura Vocea romniei, Bucureti. 44. OPREA M., GEORGESCU RODICA, 2000, Nutriia i alimentaia petilor, Editura Tehnic ISBN 973-311483-9, pp.71-77. 45. OEL V., CONSTANTIN GH.,1989, Ghid ihtiopatologic pentru piscicultura din Delta Dunrii, Buletinul de Cercatri Piscicole Supliment II, pp26-28. 46. PETERFI St ., IONESCU Al., 1976, Tratat de algologie, vol.I, Editura Academiei R.S.R., Bucureti. 47. PETRESCU-MAG V., 2007, Manipularea sexelor n guppycultur, Editura Academiei Press, pp.24, 50. 48. RDULESCU I., LUSTUN L., VIOCAN V., 1976, Bolile petilor, Editura Ceres, Bucureti. 49. RDULESCU I., LUSTUN L., VIOCAN V., 1983, Bolile petilor de acvariu i alte altor animale acvatice, Editura Ceres, Bucureti, pp.237, 239. 50. ROBERTS L.J., MORROW J.D., 2000, Measurement of F2-isoprostanes as an index of oxidative stress in vivo, Free. Radic. Biol. Med 28: 505-513. 51. ROCA I.D., 1977, Fiziologie animal, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti, pp. 244. 52. SACHDEV S., DAVIES K.J., 2008, Production, detection, adaptative responses to free radicals in exercise, Free. Radic. Biol. Med. 44: 215-223. 53. SALVADOR A., SOUSA J., PINTO R.E., 2001, Hydroperoxyl, superoxid and pH gradient in the mitochondrial matriz: a theoretical assessement, Free. Radic. Biol. Med. 31: 1208-1215. 54. SANDERS B.M., 1993, Stress proteins in aquatic organisms: an environmental perspective, Crit. Rev. Toxicol. 23: 49-75. 55. SEGNER H., VERRETH J., 1958, Larviculture & Artemia Newsletter Histological and biochemical methods in nutrition studies with fish larvae, California, pp.22-23.

43

56. SIES H., 1985, Oxidative stress, London: Academic. 57. SEGNER H., VERRETH J., 1958, Larviculture & Artemia Newsletter Histological and biochemical methods in nutrition studies with fish larvae, California, pp.22-23. 58. WEDEMEYER G.A., YASUTAKE W., 1977, Clinical methods for assessment of the effects of environmental stress on fish health, Technical Papers of the US Fish and Wildlife Service, 89:18. 59. WEDMEYER G.A. and McLEAY, 1981, Methods for determining the tolerance of fishes to environmental stressors, a.d. Pickering (ed.), Stress and fisf, pp.247-275. 60. WEPENER V., 1997, Metal ecotoxicology of the Olifants River in the Kruger National Park and the affect there of fish haematology, PhD-Thesis, RAU. 61. WONG CHEE CHYE, 1993, Larviculture of Bronze catfish, INFOFISH International 62. xxx, 1996, Textbook of Fish Culture, California. 63. literature web: www.fishboard; www.wikipwedia.org; www.doctorfungus.org; www.sfatulmedicului.org; www.boldsystems.org; www.aqua-net.org; www.aquarium-answer.com; www.americanaquariumproducts.com; www.friendsofwarnhamlnr.org; www.elacuarista.com; www.hlasek.com

44