REVISTA

2008 Vol. 9 Nr. 1

Numr editat n cadrul proiectelor:

CEEX nr. 78/2006
Constituirea unei reele naionale privind studiul unor zoonoze
parazitare i implicaiile lor n sigurana alimentelor
i
CEEX nr. 151/2006
Constituirea unei reele naionale de cercetare
a dermatofitozelor la om i animale

Director de proiecte, Prof. Dr. Vasile Cozma



COPERTA 1. _______ (foto: _______)
COPERTA 2. _________ (foto: ________)
COPERTA 3. _______ (foto: ________)
COPERTA 4. ________ (foto: __________)





Autorii i asum responsabilitatea pentru textele publicate.






All rights reserved. No parts of this publication may be reproduced or distributed in any form or
by any means, or stored in a database, without the written permission of the publisher.

Toate drepturile rezervate. Nici o parte din aceast lucrare nu poate fi reprodus sub nici o
form, prin nici un mijloc mecanic sau electronic, sau stocat ntr-o baz de date, fr acordul n
prealabil, n scris, al editurii.





Tehnoredactor: Andreea CUTCAN

Copyright 2008

ISSN 1582-1366




EDITURA !!!
Adresa
Tel., fax
E-mail
Coperta















COLECTIVUL REDACIONAL



Prof. Dr. Eronim UTEU
Prof. Dr. Vasile COZMA
Prof. Dr. FAZAKAS Bla
Prof. Dr. Bertrand LOSSON
Prof. Dr. Iustin COSOROAB
Prof. Dr. Virginia ZANC
Prof. Dr. Monica JUNIE
Cercet. princ. II Dr. Zoe COROIU
Conf. Dr. Clin GHERMAN
Dr. Menelaos LEFKADITIS



REFERENI TIINIFICI



Prof. Dr. Eronim UTEU
Prof. Dr. Vasile COZMA
Prof. Dr. Gheorghe DRBU
Prof. Dr. Virginia ZANC
Prof. Dr. Monica JUNIE









Editat cu sprijinul
Fundaiei SCIENTIA PARASITOLOGICA PRO VITA
n colaborare cu
FACULTATEA DE MEDICIN VETERINAR
i
Centrul de Cercetare Supravegherea,
diagnosticul i controlul zoonozelor
Cluj-Napoca


CUPRINS

SINTEZE

Importana identificrii dermatofiilor pentru diagnosticul i terapia dermatofitozelor
Monica JUNIE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9

Importana determinrii patternului de sensibilitate la antimicotice al speciilor de
Candida i Dermatofii izolate din diverse produse patologice
Monica JUNIE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
Metode de studiu al biofilmelor i hipermutabilitii
Ioana COLOSI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
Noi tendine n epidemiologia infeciilor fungice invazive
Amanda RADULESC U, Monica JUNIE, Doina ULESCU . . . . . . . . 25
Principii de baz n aplicarea topic a medicamentelor n medicina veterinar
J. COSOROAB, R.T. CRISTINA, Lidia CHIIMIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36

Echinococoza alveolar. O posibil zoonoz emergent n Romnia (Sintez)
S. SIK BARABSI, V. COZMA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48


ARTICOLE ORIGINALE

Species distribution and antifungal susceptibility of Candida isolates collected
from hospitalised patients in Romania and Greece
Myrto CHRISTOFIDOU, Anastasia SPILIOPOULOU, Sofia
VAMVACOPOULOU, Vassiliki STAMOULIS, George
DIMITRACOPOULOS, Evangelos ANASTASSIOU, Lia Monica JUNIE,
Carmen COSTACHE, Ioana COLOSI, P.T. CIOBANCA . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61

Specii de Candida izolate din infectiile micotice
Carmen COSTACHE, Ioana COLOSI, Monica JUNIE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 68
Metoda difuzimetric n testarea sensibilitii de antifungice
Carmen COSTACHE, Ioana COLOSI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 74
Infestaia cu Demodex folliculorum n dermatologie
Patricia CRISTODOR, Smaranda Rodica GOIA, Marinela POPOVICI,
Smaranda Laura GOIA, Argentina VIDRACU, Oana JUROVITS,
Doina NIU, Caius SOLOVAN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 79
The etiology and clinic of cutaneous mycosis
Monica JUNIE, Carmen COSTACHE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 84
Fungemiile produse de levuri: rezultatele unui studiu multicentric efectuat pe o perioad
de 4 ani n Iai (Romnia)
M. MARE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87
Evoluia tricofiiei ntr-o ferm de taurine n condiiile vaccinrii specifice i/sau
nevaccinrii
I.L. MITREA, V. NICA, Mariana IONI, Gh. SOLCAN, Elena NICA,
Carmen SOLCAN, M.C. BUZATU . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 101
Aspecte clinice i terapeutice n malasezioza la cine
Gh. SOLCAN, I.L. MITREA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107

Contribuii privind rolul patogen al formelor adulte de Linguatula serrata, la nivelul
mucoasei rinosinusale la cine
O. NEGREA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 112

The therapeutic value of avermectins (Dectomax) in struggle against linguatulosis
in carnivorous
O. NEGREA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 115







RECENZIE

ELEMENTE DE CRIOPARAZITOLOGIE de Eronim uteu
I. GHERMAN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 119


LAUDATIO

Domnului Profesor Dr. D.H.C. Eronim UTEU,
cu ocazia acordrii Premiului CNCSIS OPERA OMNIA
V. COZMA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 121


CONTENTS

SYNTHESIS

Importance of the identification of the dermatophytes in the diagnostic and therapy of
the dermatophytoses
Monica JUNIE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
Importance of the determination of the pattern of sensibility to antimycotic of the Candida
and dermatophyte species isolated from various pathologic products
Monica JUNIE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
Methods of studying biofilms and hipermutability
Ioana COLOSI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
New tendencies in the epidemiology of the invasive fungus infections
Amanda RADULESCU, Monica JUNIE, Doina ULESCU . . . . . . . . 25
Basic principles in topic applications of drugs in veterinary medicine
J. COSOROAB, R.T. CRISTINA, Lidia CHIIMIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
The alveolar echinococcosis. A possible zoonosis emergent in Romania (Synthesis)
S. SIK BARABSI, V. COZMA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48

ORIGINAL WORKS

Species distribution and antifungal susceptibility of Candida isolates collected from
hospitalised patients in Romania and Greece
Myrto CHRISTOFIDOU, Anastasia SPILIOPOULOU, Sofia
VAMVACOPOULOU, Vassiliki STAMOULIS, George
DIMITRACOPOULOS, Evangelos ANASTASSIOU, Lia Monica JUNIE,
Carmen COSTACHE, Ioana COLOSI, P.T. CIOBANCA . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61
Candida species isolated from the mycotic infections
Carmen COSTACHE, Ioana COLOSI, Monica JUNIE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 68
The difusimetric method in testing the sensibility to antifungus products
Carmen COSTACHE, Ioana COLOSI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 74
Demodex folliculorum infestation in dermatology
Patricia CRISTODOR, Smaranda Rodica GOIA, Marinela POPOVICI,
Smaranda Laura GOIA, Argentina VIDRACU, Oana JUROVITS,
Doina NIU, Caius SOLOVAN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 79
The etiology and clinic of cutaneous mycosis
Monica JUNIE, Carmen COSTACHE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 84
Fungemia due to yeasts: results of a four-year multicenter study done in Iasi (Romania)
M. MARE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87
The evolution of the trichophytosis in a cattle farm in the conditions of specific
vaccination and/or unvaccination
I.L. MITREA, V. NICA, Mariana IONI, Gh. SOLCAN, Elena NICA,
Carmen SOLCAN, M.C. BUZATU . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 101
Clinical and therapeutical aspects in Malassezia dermatitis in dog
Gh. SOLCAN, I.L. MITREA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107

Contributions regarding the pathogenic role of Linguatula serrata adult forms at
rhino-sinus mucosa level in dog
O. NEGREA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 112

The therapeutic value of avermectins (Dectomax) in struggle against linguatulosis
in carnivorous
O. NEGREA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 115







REVIEW

Elements of cryo-parasitology [Elemente de crioparazitologie] by Eronim uteu
I. GHERMAN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 119

LAUDATIO

To Mr. Professor Dr. D.H.C. Eronim UTEU,
with the occasion of granting the CNCSIS Prize: OPERA OMNIA
V. COZMA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 121



Scientia Parasitologica, 2008, 1, 9-16
9
SI NTEZE
Importana identificrii dermatofiilor pentru
diagnosticul i terapia dermatofitozelor

Monica JUNIE

Catedra de Microbiologie, Universitatea de Medicin i Farmacie Cluj-Napoca


I nt r oduc er e
Dup o apreciere global se estimeaz c exist
peste 100.000 specii diferite de ciuperci
microscopice, dar se pare c aproximativ 100
sunt patogene pentru om. Infeciile micotice sunt
din ce n ce mai frecvente, fiind favorizate de
utilizarea crescnd a antibioticelor, a
corticosteroizilor i a terapiei imunosupresoare.
Pe de alt parte condiiile igienice precare,
cltoriile, faciliteaz diseminarea ciupercilor,
modificndu-se n acelai timp repartizarea
geografic a speciilor.
Importana i frecvena actual a micozelor,
impune tuturor medicilor de diverse specialiti
cunotine minime asupra acestui capitol devenit
semnificativ n patologie.
Dermatofitozele dein o pondere semnificativ n
patologia dermatologic, fiind responsabile de
15% din totalul consultaiilor dermatologice.
n prezent, dermatofiiile picioarelor sunt
prezente la 30% dintre soldai i 75% dintre
personalul care lucreaz n industria cauciucului.
Este necesar cunoaterea proprietilor
biologice ale fungilor, pentru nelegerea
manifestrilor clinice, a diagnosticului i a
aplicrii corecte a terapiei.
Exist multiple propuneri de clasificare a
ciupercilor, dar practic din punct de vedere
medical se disting:
ciuperci levuriforme,
ciuperci filamentoase: dermatofii,
Aspergillus
ciuperci dimorfice
ciuperci oportuniste: ciuperci n general
nepatogene, capabile ns de a deveni
patogene n prezena unor factori
favorizani.
MORFOLOGIA I CLASIFICAREA
DERMATOFIILOR
Clasificare
Dermatofiii au fost considerai mult timp fungi
imperfeci, capabili doar de reproducere
asexuat. Ulterior unii autori (Nannizzi, Griffin)
au descris la unii dermatofii o form de
reproducere sexuat, care permite ncadrarea lor
n ascomicete, unii fiind considerai fungi
perfeci, datorit formei sexuate.
Dup o prim clasificare (Sabouraud - 1910),
dermatofiii se mpart n patru genuri:
1. Achorion agentul favusului
2. Microsporum
3. Trichophyton
a. Trichophyton endotrix
b. Trichophyton ectotrix: microides
(cu spori mici) i megaspores
(cu spori mari)
4. Epidermophyton
n 1934 Emmos sugereaz s se reduc numrul
genurilor la trei:
1. Trichophyton
2. Microsporum
3. Epidermophyton
Van Creuseghem consider clasificarea
incomplet, adugnd genurile Microides i
Keratinomyces.
Epidemiologie
Afeciunile cutanate produse de dermatofii sunt
universale, existnd diferene n repartizarea
geografic a diverselor specii. Speciile existente
n Europa sunt T. rubrum, T. mentagrophytes, T.
tonsurans, T. interdigitale, care sunt
cosmopolite, dar au o frecven crescut n
Europa. Tricofiton rubrum este specia cea mai
frecvent ntlnit, reprezentnd mai mult de 65%
dintre dermatofiii izolai. Tricofiton
mentagrophytes varianta interdigitalis este a
doua specie izolat n ordinea frecvenei. T.
megnini sunt izolate mai frecvent n Italia i
Portugalia. T. violaceum, T. schenleinii se
ntlnesc n bazinul Mediteranian i n Europa de
Est, dar i n Orientul apropiat i n Africa de
Nord. Alte specii sunt izolate mai frecvent n
Africa (T. gourvilii T. yaoundei i T.
soudanense). T.violaceum i schenleinii sunt
frecvent izolate de la persoane din Africa de
Nord, iar T.soudanense, de la persoane din
Africa neagr. Alte specii cum ar fi
T.concentricum exist n Asia, Australia,
Indonezia.
Contaminarea interuman, explic frecvena n
cretere a dermatofitozelor i difuzia masiv n
Europa a unor specii de dermatofii, cum ar fi T.
rubrum inexistent naintea celui de al II-lea
rzboi mondial, precum i apariia n Europa a
dermatofitozelor produse de T. soudanense i a
altor dermatofii anterior strict africani.
Rezervorul natural al dermatofiilor este solul i
keratina. Au afinitate pentru keratin, i
capacitatea de a se adapta la substane i condiii
de mediu diverse. Numeroase specii triesc ca i
saprofite. Unii dermatofii sunt adaptai strict la
viaa parazitar, nemaifiind ntlnii n stare de
saprofitism.
Patogenez
Contaminarea tegumentelor umane nu este
nsoit ntotdeauna de producerea dermatofiiei.
Dermatofiii ptrund n piele n cazul unei leziuni
cutanate. Se multiplic dintr-un spor sau dintr-un
fragment de miceliu. n cazuri rare se pot asocia
mai muli dermatofii n aceai leziune.
Se formeaz filamente, care progreseaz
centrifug, producnd o leziune eritematoas. Pot
fi afectate secundar firele de pr de pe cap i
corp. Invazia se face de la nivelul foliculului
pilos, cu o propagare descendent spre bulb.
Modul de multiplicare este diferit dup specie,
existnd specii de tip endotrix (cu multiplicare n
interiorul prului) i endo-exotrix (cu
multiplicare la exteriorul prului).
La nivelul unghiilor, dermatofiii penetrez cel
mai frecvent, prin marginea liber a unghiei i
progreseaz n direcia matricei, fr a o distruge.
n condiii normale, pielea intact posed un grad
de rezisten natural. Dezvoltarea unei micoze
depinde de natura dermatofiiilor i intensitatea
infeciei, precum i de capacitatea de a reaciona
a persoanei infectate, intervenind factori
favorizani generali i locali. Macerarea pliurilor
prin obezitate sau igien necorespunztoare,
favorizeaz dermatofiiile pliurilor, care sunt
frecvente la adult, dar sunt rare la copii.
Tulburrile endocrine, n special ovariene,
favorizeaz tricofiia cronic a adultului dar
tricofiiile uscate ale pielii capului se pot vindeca
spontan la pubertate. Diabetul, tulburrile
circulatorii periferice (insuficien arterial sau
venoas, acroceanoz) favorizeaz dermatofiiile
picioarelor.
Aspectul clinic al dermatofiiilor depinde de:
structura anatomic parazitat (strat cornean al
epidermei de suprafa, foliculi, pr, unghii) i de
intensitatea reaciei inflamatorii.
Dermatofiii antrofili rmn localizai n keratina
din stratul cornos din unghii sau pr, fr a
provoca reacie inflamatorie dermoepidermic
semnificativ, nici reacie alergic, nici
imunitate. IDR la tricofitin este negativ i sunt
posibile reinfecii.
Dermatofiii zoofili i geofili se localizeaz de
asemenea n keratin, dar fiind slab adaptabili
speciei umane, vor declana prin metaboliii lor,
care penetreaz n straturile mai profunde, o
reacie inflamatorie. Metabolii produi sunt
antigenici, determinnd apariia alergiei tradus
prin IDR la tricofitin pozitiv i a imunitii,
care se manifest prin tendina de vindecare
spontan i prin rezistena la reinfecie.
Se delimiteaz dermatofiii superficiale i
profunde.
Speciile genului Tricofiton afecteaz pielea,
ungiile, prul capului i al corpului.

10
Dermatofiiile superficiale cuprind dermatofiii
piliare (pilomicoze), ale pielii netede (nepiloase)
i ale unghiilor (onicomicoza)
1. Grupul dermatofiiilor piliare (pilomicoze)
a) Microsporia (Tinea microsporic,
Teignes tondantens, Teine de Gruby Sabourraud)
b) Tricofiia cronic a adultului:
Tricofiton violaceum, T. verrucosum
c) Tricofiia uscat a pielii capului:
Tricofiton violaceum , T. tonsurans, T.
soudanense, T. yaundei
d) Favus: Tricofiton schnleinii, T.
guinckeanum
e) Dermatofiia blefarociliar
2. Micoze ale pielii netede (nepiloase)
a) Dermatofiia extremitilor:
dermatofiia picioarelor (Tricofiton tonsurans, T.
soudanense, T. rodhaini, T. Erinacei);
dermatofiia minilor (Tricofiton verrucosum);
dermatofiia picioarelor i a minilor (Tricofiton
rubrum, T. interdigitalis, T. mentagrophytes).
b) Herpes circinat: Tricofiton tonsurans,
T. soudanense, T. megnini, T. schnleinii, T.
interdigitalis, T. rodhaini, T. mentagrophytes, T.
verrucosum, T. erinacei, T. equinum, T.
guinckeanum, T. simii, T. ajelloi.
c) Eczema marginat: Tricofiton rubrum,
T. interdigitalis, T. mentagrophytes, T.
verrucosum.
d) Tinea imbricat
3. Micoza unghiilor (onicomicoza): Tricofiton
rubrum, T. violaceum, T. tonsurans, T.
soudanense, T. megnini, T. schnleinii, T.
concentricum, T. interdigitalis, T.
mentagrophytes, T. verrucosum, T. erinacei,
Dermatofiiile profunde pot fi acute, supurate
(Kerion Celsi, sicozis tricofitic sau foliculite) sau
cronice (granulom tricofitic, dermatofiia
folicular i perifolicular granulomatoas a
gambelor Wilson, dermatofiia granulomatoas
extensiv, boala dermatofitic, micetom
dermatofitic).
Kerion Celsi: Tricofiton rubrum, T.
megnini, T. mentagrophytes, T.
verrucosum (T.ochraceum), T. erinacei,
T. equinum, T. simii
foliculita gambelor: Tricofiton rubrum
dermatofiii profunde: Tricofiton
rubrum, T. tonsurans, T. schnleinii
granulomul dermatofitic (tricofitic):
Tricofiton violaceum, T. terrestre
Dermatofiii se mpart n trei grupe: antropofili,
zoofili i geofili (telurici).
1. Speciile antropofile sunt parazii umani
exclusivi, care se transmit prin contact interuman
direct sau mai frecvent indirect, prin intermediul
unui obiect infectat (lenjerie, vestimentaie,
plrii, piepten, pantofi, echipament sportiv,
picin, baie, du, mocheta camerelor de hotel i
sli de gimnastic, de sport), pe care dermatofiii
pot supravieui luni i chiar ani de zile.
Sunt specii antropofile: Tricofiton rubrum,
Tricofiton mentagrophytes - varianta
interdigitalis, T. violaceum, T. schenleinii, T.
soudanense, T. tonsurans, T. megnini, T.
yaoundei, T. concentricum.
Tricofiton rubrum este o specie foarte
bine adaptat la om. Produce
dermatofiia picioarelor, dermatofiia
minilor, onicomicoza, eczem
marginat, foliculita gambelor,
dermatofiii profunde, Kerion Celsi.
Tricofiton violaceum produce tricofiia
uscat a pielii capului, tricofiie cronic a
adultului, onicomicoz, granulomul
dermatofitic.
Tricofiton tonsurans produce tricofiia
uscat a pielii capului, herpes circinat,
dermatofiia picioarelor, onicomicoz,
dermatofiii profunde.
Tricofiton soudanense este implicat n
producerea tricofiiei uscate a pielii
capului, a herpesului circinat, a
dermatofiiei picioarelor i a
onicomicozei.
Tricofiton megnini produce Herpes
circinat, Kerion Celsi, onicomicoz
Tricofiton yaundei produce Tricofiie
uscat a pielii capului
Tricofiton schnleinii produce Favus,
Herpes circinat, Onicomicoz,
Dermatofiie profund

11
Tricofiton concentricum produce
Onicomicoz
Tricofiton Interdigitalis produce
Dermatofiia picioarelor, Dermatofiia
minilor, Onicomicoz, Herpes circinat,
Eczem marginat
Tricofiton rodhaini (este probabil
varianta african a T. rubrum) produce
Herpes circinat, Micoza picioarelor.
2. Speciile zoofile se transmit la om prin
contactul direct cu un animal parazitat sau prin
intermediul pieilor parazitate. Animalele
contaminate pot fi bovideele, pisica, cinele,
roztoare mici (oareci de laborator, cobai),
iepuri, cabaline. Contaminarea uman se poate
realiza prin firele de pr parazitate existente pe
mobil sau pe sol i pot contamina populaia
rural sau persoane cu risc profesional.
Sunt dermatofiii zoofili: T. mentagrophytes, T.
verrucosum (T.ochraceum), T. erinacei, T.
equinum
Tricofiton mentagrophytes poate fi
transmis de la cai, roztoare mici
(oareci de laborator), iepuri, bovidee i
produce Kerion Celsi, Eczem
marginat, Herpes circinat, Dermatofiia
picioarelor i a minilor, Onicomicoz.
Tricofiton verrucosum (T.ochraceum)
poate fi transmis de la bovidee i
produce Kerion Celsi, Herpes circinat,
Eczem marginat, Micoza minilor,
Onicomicoz, Tricofiia cronic a
adultului.
Tricofiton erinacei poate fi transmis de
la roztoare, iepuri i produce Kerion
Celsi, Herpes circinat, Micoza
picioarelor, Onicomicoz.
Tricofiton equinum poate fi transmis de
la cal i produce Kerion Celsi, Herpes
circinat.
Tricofiton guinckeanum produce Favus,
Herpes circinat.
3. Speciile telurice (T. simii, T. ajelloi, T.
terrestre, T. phasediforme).
Contaminarea prin sol este ntlnit n cazul
dermatofiilor geofili sau zoofili. T.
mentagrophytes este o specie zoofil dar se
gsete i pe sol. Solul conine frecvent
dermatofii provenii de la animalele infectate,
devenind surs de contaminare animal sau
uman. Sunt implicate rar n patologia uman
Tricofiton simii produce Kerion Celsi,
Herpes circinat.
Tricofiton ajelloi produce Herpes
circinat (rar).
Tricofiton terrestre produce Granulom
tricofitic.
Tratamentul dermatofiiilor
Genul Tricofiton se caracterizeaz prin
macroconidii pluriseptate, de form cilindric,
fuziforme, cu perete subire. Aceste macroconidii
pot fi rare, chiar absente pe mediul de cultur
uzual.
Microconidiile sunt rotunde sau piriforme,
ovalare, dispuse n cruce sau n ciorchine.
Tratamentul pilomicozelor
Se aplic un tratament dublu:
1. General cu Griseofulvin per os: 15-20
mg/kg/zi.
2. Local: antifungic imidazolic n loiune;
decapajul crustelor prin pomad keratinolitic.
Tratamentul trebuie continuat cel puin 6 sptni.
Se impune ancheta epidemiologic pentru
ndeprtarea sursei de infecie (persoana
contagioas sau animalul contaminat).
Tratamentul kerionului
Tratamentul pilomicozelor se completeaz cu un
antiinflamator i un antiinfecios.
Tratamentul onixului necesit asocierea:
1. Tratament general cu Griseofulvin sau
Fulcidin, fie cu Nizoral timp de 6 luni -1 an. Nu
se asociaz cele dou antimicotice din cauza
hepatotoxicitii lor.
2. Tratamentul local care const n aplicarea unei
creme antifungice de 2 ori pe zi cu tocirea la
intervale regulate a unghiilor. O alt tehnic
urmrete decaparea unghiei cu o crem pe baz
de uree, urmat de aplicarea local a unui
antifungic.

12
Tratamentul leziunilor cutanate
n epidermofiiile circinate ajunge un tratament
local timp de 3-4 sptmni. n leziunile foliculare
produse de T. rubrum sau n leziunile
hiperkeratozice ale plantelor i podului minii,
tratament antifungic general i local timp de 2 luni.
Medicamente antimicotice folosite in
tratamentul dermatofiiilor
1. Griseofulvina (Biogrisin) este un antibiotic
fungistatic, activ fa de Tricofiton, Microsporon
i Epidermofiton. Acioneaz ca toxic micotic,
afectnd microtubulii din componena fusului
celulelor fungice. n dermatofiiile superficiale
ameliorarea simptomatic ncepe dup 2-4 zile
de tratament, culturile se negativeaz n 1-6
sptmni i leziunile dispar dup 2-8 sptmni.
Griseofulvina, administrat oral, se absoarbe
bine cnd este preparat n form micronizat.
Grsimile i cresc disponibilitatea digestiv,
barbituricele o scad. Concentraiile plasmatice
realizate de dozele terapeutice sunt de 0,5-1,5
g/ml. Timpul de njumtire plasmatic este de
circa 1 zi. Medicamentul este n parte
metabolizat, n parte se depoziteaz n piele, n
keratina celulelor precursoare, pe care le
protejeaz de infecia fungic. Se administreaz
oral 500 mg - 1 g/zi, fracionat n 3 prize, la
mesele principale, cteva sptmni n
dermatofiiile regiunilor proase - favus,
tricofiie, microsporie, sicozis parazitar i n
epidermomicoze (unde se asociaz obligatoriu cu
un antifungic local), 3-5 luni n micozele
unghiilor minii i 8-12 luni n cele ale unghiilor
picioarelor (este ineficace n onicomicozele
produse de Candida).
Griseofulvina este n general bine suportat.
Provoac relativ frecvent (15 %) cefalee, mai rar
grea, vom, diaree, febr, erupii cutanate
alergice, leucopenie, reacie de tip boala serului,
hepatit toxic. Sarcina, porfiria i alergia la
griseofulvin reprezint contraindicaii.
2. Nizoral (Ketoconazol) este un antimicotic
din grupa derivaiilor de imidazol, eficace oral n
micozele sistemice. Este activ, n vitro, fa de
numeroi fungi i mucegaiuri, dar rezultatele nu
pot fi transpuse terapeutic. Aciunea se datoreaz
afectrii membranei ciupercilor sensibile ca
urmare a modificrii biosintezei sterolilor.
Nizoralul este indicat n diferite infecii micotice
sistemice i de organ: histioplasmoz,
blastomicoz, coccidiodomicoz,
paracoccidiodomicoz. De asemenea poate fi util
n candidoze (cutaneo-mucoas, oral, vaginal) i
n micoze ale pielii, prului i mucoaselor care nu
rspund la tratament local. Deoarece rspunsul
este lent, Nizoralul este avantajos n formele
cronice, mai puin n infecii acute, grave.
Se administreaz oral, obinuit o singur doz a
200 mg/zi crescnd la nevoie la 400 mg/zi.
Tratamentul se continu pn cnd testele clinice
i de laborator indic terminarea infeciei. n
infeciile sistemice sunt necesare deseori 6 luni
de tratament sau mai mult. Nizoralul se absoarbe
limitat i inegal dup administrare oral,
hipoaciditatea gastric, respectiv tratamentul cu
antiacide sau cimetidin i micoreaz
biodisponibilitatea. Timpul de njumtire este
de 3,3 ore, cu variaii individuale mari. Nizoralul
poate fi utilizat i local sub form de crem 2%,
cte 1-2 aplicaii/zi timp de 2 sptmni n
infeciile fungice uoare ale pielii.
Provoac grea i vom n circa 3% din cazuri.
Alte efecte nedorite sunt: prurit, anorexie, dureri
epigastrice, cefalee, parestezii, sngerri
gingivale, trombocitopenie, erupii cutanate,
ginecomastie, creterea nivelului enzimelor
hepatice, rareori hepatit toxic acut i
colestaz. Este contraindicat la bolnavii cu
hepatit i insuficien hepatic.
3. Miconazol este un derivat imidazolic cu
proprieti fungicide cu spectrul larg. Toxicitatea
fa de ciuperci se datoreaz permeabilizrii
membranei celulare a acestora. Este eficace n
candidoze, dermatofiii nefoliculare (ca adjuvant
al tratamentului general cu Griseovulvin,
pitiriazis al pielii capului, pitiriazis versicolor). De
asemenea este activ fa de bacteriile Gram
pozitive, fiind indicat n dermoepidermite
provocate de aceti germeni. Proporia
vindecrilor este de circa 90%. Aplicat pe piele
ptrunde n stratul cornos unde persist 4 zile sau
mai mult, cantitatea absorbit nu depete 1%,
ceea ce explic lipsa efectelor sistemice. Se
administreaz topic sub form de crem, gel,
loiune sau pudr, coninnd Miconazol nitrat 2%
cte 1-2 aplicaii/zi timp de 2-4 sptmni.
Provoac rareori iritaie i macerarea pielii. Este
indicat i n candidoza vulvovaginal sub form
de creme i comprimate vaginale. Pe cale oral
este utilizat n vederea profilaxiei i tratamentului

13
candidozelor digestive, candidozelor sistemice i a
diferitelor micoze profunde. Provoac rareori
grea, diaree, prurit i erupii cutanate. Nu trebuie
folosit n acelai timp cu anticoagulantele
cumarinice, deoarece le poteniaz efectul.
4. Clotrimazol, derivat de imidazol nrudit cu
Miconazolul, are proprieti asemntoare. Este
activ fa de dermatofii, Candida i alte levuri,
Corynebacterium minutissima i bacteriile Gram
pozitive. Proporia de vindecri semnalat este
de 60 - 100%. Asocierea cu glucocorticoizi topici
grbete beneficiul terapeutic. Ca i ceilali
derivai de imidazol, aplicat pe piele persist
cteve zile, se absoarbe n proporie de 0,5%. Se
administreaz sub form de crem, loiune sau
pudr 1%, cte 2 aplicaii/zi 2-4 sptmni.
Provoac uneori fenomene de iritaie local. Este
utilizat local i n candidoza vaginal
(comprimate a 100 mg). Administrat local, poate
fi eficace n candidozele tubului digestiv, n
candidoza pulmonar i urinar.
5. Econazol, este un alt derivat de imidazol, este
de asemenea un fungicid de spectru larg. Este
indicat n toate dermatomicozele, inclusiv n cele
suprainfectate cu bacterii Gram pozitiv, realiznd
proporii mari (peste 90%) de vindecare. Se
administreaz topic sub form de creme, emulsii,
sau spray-uri, coninnd Econazol 1%. Provoac
rareori iritaie local.
6. Pimafucin (Natamicin), un antibiotic
macrolidic, are proprieti antifungice cu spectru
larg, incluznd levuri i dermatofii. Este de
asemenea activ fa de Aspergillus i
Trichomonas. Se folosete sub form de crem
2%, dou - trei aplicaii pe zi, fiind indicat n
infecii candidozice i infecii fungice acute ale
pielii. Este foarte bine suportat.
7. Fluconazol (Diflucan), este un bistriazol. Este
mai activ n infeciile fungice provocate la
animalele de laborator - mrete supravieuirea n
cazul unui inocul letal de Candida, Cryptococus,
Aspergillus, Blastomyces, Coccidoides,
Histoplasma. Ca i n cazul derivailor de
imidazol, aciunea antimicotic se datoreaz
mpiedicrii sintezei sterolilor membranari
specifici, datorit inhibrii enzimelor
citocromului P 450.
Fluconazolul se absoarbe bine dup administrare
local, avnd o biodisponibilitate mai mare de
90%. Absorbia nu este modificat de alimente,
antiacide sau cimetidin. Doza de 100 mg i 400
mg realizeaz o concentraie plasmatic maxim de
1,9 g, respectiv 6,7 g/ml; dup un tratament de
6-10 zile nivelele plasmatice cresc de 2,5 ori.
Fluconazolul se administreaz obinuit pe cale
oral. Este indicat n candidoza digestiv superioar
- dup o doz iniial de 200 mg se recomand 100
mg o dat pe zi timp de cel puin 2 sptmni
pentru localizarea orofaringian i cel puin 5
sptmni pentru cea esofagian. Rezultatele
obinute la bolnavii cu SIDA i cadidoz
orofaringian asociat, au artat o vindecare clinic
a micozei n 80-100% din cazuri i negativarea
culturilor n proporie de 50-90%, eficacitatea fiind
similar cu cea a ketoconazolului.
Fluconazolul este relativ bine suportat. Frecvena
global a reaciilor adverse este n jur de 16%; n
1,5 % din cazuri ele fac necesar ntreruperea
tratamentului. Se pot produce grea, vom,
diaree, dureri abdominale, cefalee, erupii
cutanate, pozitivarea testelor hepatice. Rareori
apar fenomene hepatotoxice, favorizate de starea
general alterat sau de asocierea cu alte
medicamente potenial hepatotoxice.
8. Lamisil. Conine clorhidrat de terbinafin, o
alilamin cu aciune antifungic. Are efecte
fungicide asupra dermatofiilor, a mucegaiurilor i
a unor fungi dimorfici i efecte fungicide sau
fungistatice asupra levurilor, n funcie de specie.
Terbinafina intervine n metabolismul
ergosterolului fungic, mpiedicnd biosinteza
acestuia n stadiile iniiale. Lamisilul este eficace
n combaterea infeciilor fungice cutanate cauzate
de dermatofii, n infeciile provocate de
Microsporum canis i Epidermophyton
floccosum. Preparatul cu administrare oral se va
folosi pentru tratarea infeciilor ntinse i severe.
Infeciile tegumentelor cauzate de genul Candida
vor fi tratate oral atunci cnd acest gen de terapie
este considerat corespunztoare, n funcie de
locul infeciei, de gravitatea sau ntinderea
acesteia. Lamisil oral nu este eficace n
tratamentul candidozei vaginale i nici n
tratamentul pitiriazisului.
Dozele uzuale sunt: la adult 250 mg/zi n doz
unic sau sub forma a 2 comprimate de 125 mg.
La copii, administrarea oral de Lamisil este bine
tolerat peste vrsta de 2 ani. Posologia la pacieni
cu insuficien renal sau hepatic sever
(clereance-ul creatininei mai mic de 50 ml/min.
sau concentraia seric a creatininei mai mare de
300 mol/l) se va administra o doz cu 50% mai

14
mic dect cea recomandat n mod obinuit.
Reacii adverse, n cazul n care survin, au caracter
tranzitoriu. Ele sunt: gastrointestinale: balonare,
grea, dureri abdominale uoare, diaree i
pierderea apetitului care pot surveni n cca. 5%
din cazuri; cutanate: erupii i urticarie, care pot
aprea n 3% din cazuri. Au fost descrise
manifestri nespecifice ca cefalee, etc.
Contraindicaiile se rezum la hipersensibilitatea
la terbinafin. Precauii sunt necesare n caz de
insuficien renal sau hepatic.

Bi bl i ogr af i e

1. Macura A. Dermatophytes, pathogens or
saprophytes. Int. J. Dermatol. 1995;34:529-530.
2. Berger AR. Common superficial fungal infections
in patient with AIDS. Clin. Infect. Dis.
1996;22:128-132.
3. Pontn J, Rchel R, Clemonds K and cols.
Emerging pathogens. Med. Mycol. 2000;38:225-
236.
4. Ray MC, Gately LE. Dermatology manifestations
of HIV infection in AIDS. Infect. Dis. Clin. North.
Am. 1994;94:583-605.
5. Agut J, Palacn C, Sacristn A, y cols. Inhibition of
ergosterol synthesis by sertaconazole in Candida
albicans. Arzn. Forsch. 1992;42:718-720.
6. Carrillo-Muoz AJ, Tur-Tur C. Comparative study
of antifungal activity of sertaconazole, terbinafine
and bifonazole against clinical isolates of Candida
spp., Cryptococcus neoformans and
dermatophytes. Chemother. 1997;43:387-392.
7. National Committee for Clinical Laboratory
Standards. Reference method for broth dilution
antifungal susceptibility testing of filamentous
fungi: approved standard. NCCLS document M38-
A. National Committee for Laboratory Standards,
Wayne, Pa. 2002.
8. Fernndez-Torres B, Vzquez-Veiga H, Llovo X y
cols. In vitro susceptibility to itraconazole,
clotrimazole, ketoconazole and terbinafine of 100
isolates of Trichophyton rubrum. Chemotherapy.
2000;46:390:394.
9. Fernndez-Torres B, Carrillo AJ, Martn E y cols.
In vitro activities of 10 antifungal drugs against
508 dermatophyte strains. Antimicrob. Agents.
Chemother. 2000;45:2524-2528.
10. Fernndez-Torres B, Cabaes FJ, Abarca L y cols.
Collaborative evaluation of optimal antifungal
susceptibility testing conditions for dermatophytes.
Journal of Clinical Microbiology. 2002;40:3999-
4003.
11. Brega EF, Gonzlez G, Fothergill AW y cols. An
in vitro evaluation of the new triazole antifungal
agents against clinical isolates of dermatophytes in
comparison with terbinafine, itraconazole, and
fluconazole, abstr. J205, p. 354. In Abstract of the
40th Intersciencie Conference on Antimicrobial
Agents and Chemotherapy. American Society for
Microbiology, Washington, D.C. 2000.
12. Butty P, Lebecq JC, Malli M y cols. Evaluation
of the susceptibility of dermatophytes to antifungal
drugs: a new technique. J. Med. Vet. Mycol.
1995;33:403-409.
13. Jessup CJ, Warner J, Isham N y cols. Antifungal
susceptibility testing of dermatophytes:
Establishing a medium for inducing conidial
growth and evaluation of susceptibility of clinical
isolates. J. Clin. Microbiol. 2000;38:341-344.
14. Meletiadis J, Meis JF, Mouton JW y cols.
Comparison of NCCLS and 3-(4,5-dimethyl-2-
thiazyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide
(MTT) methods of in vitro susceptibility testing of
filamentous fungi and development of a new
simplified method. J Clin Microbiol
2000;38:2949-2954.
15. Mock M, Monod M, Baudruz-Rosselet F y cols.
Tinea capitis dermatophytes: susceptibility to
antifungal drugs tested in vitro and in vivo.
Dermatology. 1998;197:361-367.
16. Norris HA, Elewski BE, Ghannoum MA. Optimal
growth conditions for the determination of the
antifungal susceptibility of three species of
dermatophytes with the use of a microdilution
method. J. Am. Acad. Dermatol 1999;40: S9-S13.
17. Wildfeuer A, Seidl HP, Paule I y cols. In vitro
evaluation of voriconazole against clinical isolates
of yeasts, moulds and dermatophytes in
comparison with itraconazole, ketoconazole,
amphotericin B and griseofulvin. Mycoses
1998;41:309-319.
18. Grau MT, Romero A, Sacristn A y cols. Dermal
tolerance and phototoxicity studies of
sertaconazole. Arzn Forsch. 1992;42:746-7.
19. Agut J, Tarrida N, Sacristan A y cols.
Antiinflammatory activity of topically applied
sertaconazole nitrate. Methods Find Exp Clin
Pharmacol. 1996;18:233-4.
20. Belkys Fernandez-Torres, Carrillo-MunozA,
Inza I, Guarro J. Effect of culture medium on the
disk diffusion method for determining antifungal

15
susceptibilities of dermatophytes. Antimicrob.
Agents.Chemother. June 2006; 50(6): 22224.
21. Arikan S, Lozano-Chiu M, Paetznick V, Nangia S,
Rex J H.Microdilution
susceptibility testing of amphotericin B,
itraconazole, and voriconazole against clinical
isolates of Aspergillus and Fusarium species. J.
Clin. Microbiol.1999;37:39463951.
31. Meletiadis, J., J. F. G. M. Meis, J. W. Mouton, and
P. E. Verweij.Analysis of growth characteristics of
filamentous fungi in different nutrient media. J.
Clin. Microbiol. 2001;39:478484.
22. Arikan, S., V. Paetznick, and J. H. Rex.
Comparative evaluation of disk diffusion
with microdilution assay in susceptibility testing of
caspofungin against Aspergillus and Fusarium
isolates. Antimicrob. Agents Chemother.
2002;46:30843087.
23. Esteban, A., M. L. Abarca, and F. J. Cabanes.
2005. Comparison of disk diffusion method and
broth microdilution method for antifungal
susceptibility testing of dermatophytes. Med.
Mycol. 43:6166.
24. Fernandez-Torres, B., A. Carrillo-Munoz, M.
Ortoneda, I. Pujol, F. J. Pastor, J. Guarro.
Interlaboratory evaluation of the E test for
antifungal susceptibility testing of dermatophytes.
Med. Mycol. 2003;41:125130.
25. Fernandez-Torres, B., I. Inza, and J. Guarro.
2005. Evaluation of disk diffusion method for
determining eberconazole susceptibility of
dermatophytes and influence of culture medium.
Antimicrob. Agents Chemother.49:21162118.
26. Kane, J., R. Summerbell, L. Sigler, S. Krajden, and
G. Land.Laboratory handbook of dermatophytes: a
clinical guide and laboratory handbook of
dermatophytes and other filamentous fungi from
skin, hair, and nails. Star Publishing Co., Belmont,
Calif. 1997.
27. Liebowitz, L. D., H. R. Ashbee, E. G. V. Evans, Y.
Chong, N. Mallatova, M. Zaidi, D. Gibbs, et al.. A
two-year global evaluation of the susceptibility of
Candida species to fluconazole by disk diffusion.
Diagn. Microbiol. Infect.Dis. 2001;4:2733.
28. Llop, C., J. Sala, M. D. Riba, and J. Guarro. 1999.
Antimicrobial susceptibility testing of
dematiaceous filamentous fungi: effect of medium
composition at different temperatures and times of
reading. Mycopathologia 148:2531.
29. Manavathu, E. K., U. Nune, K. Kanuri, P. H.
Chandrasekar, and O. C.Abraham. Effect of test
medium on in vitro susceptibility testing results
For Aspergillus fumigatus. Rev. Iberoam. Micol.
2000;17:107110.
30. Matar, M. J., L. Ostrosky-Zeichner, V. L.
Paetznick, J. R. Rodriguez, E.Chen, and J. H. Rex.
2003. Correlation between E-test, disk diffusion,
and microdilution methods for antifungal
susceptibility testing of fluconazole and
voriconazole. Antimicrob. Agents Chemother.
47:16471651.
32. Mock, M., M. Monod, F. Baudraz-Rosselet, and R.
G. Panizzon. Tineacapitis dermatophytes:
susceptibility to antifungal drugs tested in vitro and
in vivo. Dermatology 1998;197:361367.
33. Muller, F.-M. C., O. Kurzai, J. Hacker, M.
Frosch, and F. Muhlschlegel.Effect of the growth
medium on the in vitro antifungal activity of
Micafungin (FK-463) against clinical isolates of
Candida dubliniensis. J. Antimicrob.Chemother.
2001; 48:713715.
34. National Committee for Clinical Laboratory
Standards. Method for antifungal disk diffusion
susceptibility testing of yeasts. Approved guideline
M44-A. National Committee for Clinical
Laboratory Standards, Wayne, Pa. 2004.
35. Odds, F., J. Ausma, F. Van Gerven, F.
Woestenborghs, L. Meerpoel,J. Heeres, H. Vanden
Bossche, and M. Borgers. In vitro and in vivo
activities of the novel azole antifungal agent
R126638. Antimicrob. Agents Chemother.
2004;48:388391.
36. Pfaller, M. A., S. A. Messer, A. Karlsson, and A.
Bolmstrom. Evaluation of the Etest method for
determining fluconazole susceptibilities of 402
clinical yeast isolates by using three different agar
media. J. Clin. Microbiol. 1998; 36:25862589.
37. Tatsumi, Y., M. Yokoo, H. Senda, and K. Kakehi.
Therapeutic efficacy of topically applied KP-103
against experimental tinea unguium in guinea pigs
in comparison with amorolfine and terbinafine.
Antimicrob. Agents Chemother. 2002;46:3797
3801.
38. Tortorano, A. M., E. Dannaoui, M. Cogliati, M. A.
Piens, A. L. Rigoni, R. Grillot, M. A. Viviani, and
E. Network. Evaluation of different in vitro
procedures for testing amphotericin B and
itraconazole susceptibility of Aspergillus
fumigatus. J. Mycol. Med. 2000;10:123127.
39. Vandenbossche, I., M. Vaneechoutte, M.
Vandevenne, T. De Baere, and G.Verschraegen.
Susceptibility testing of fluconazole by the
NCCLS broth macrodilution method, E-test, and
disk diffusion for application in the routine
laboratory. J. Clin. Microbiol. 2002;40:918921.
40. Venugopal, P.V., and T.V. Venugopal. Disk
diffusion susceptibility testing of dermatophytes with
allylamines. Int. J. Dermatol. 1994; 33: 730732.


16
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 17-21
17

Importana determinrii patternului de
sensibilitate la antimicotice al speciilor de Candida
i Dermatofii izolate din diverse produse patologice

Monica JUNIE

Catedra de Microbiologie, Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu Cluj-Napoca


I nt r oduc er e
Un aspect important n terapia candidozelor i a
dermatomicozelor const n apariia tulpinilor
rezistente fa de antifungicele utilizate i chiar
faa de cele recent descoperite.
Obi ec t i ve
Scopul lucrrii de fa este de a elucida patternul
de sensibilitate al tulpinilor de Candida albicans
i Dermatofii izolate din diverse produse
patologice. Au fost testate 105 tulpini izolate de
Candida albicans fa de urmtoarele
antimicotice:, Nystatin, Ketoconazole,
Econazole, Miconazole, Clotrimazole,
Bifonazolul, Lamisil, Pimafucina, Ancontilul,
Griseofulvina. Speciile de Candida i Dermatofiti
au fost furnizate de Departamentul de Micologie
Moleculara i Medical, Universitatea de
Medicin Grenoble, Frana, iar testarea
sensibilitii la antifuncice, s-a realizat prin
metoda prin metoda difuzimetric, interpretarea
rezultatelor efectuindu-se prin raportarea zonelor
de inhibiie la valorile standardizate, existente in
tabele, conform NCSL.
Rezul t at e
Testnd sensibilitatea tulpinilor fa de
Clotrimazol se constat c Clotrimazolul este
activ asupra Candidei albicans, Candidei kefyr i
mai puin asupra altor specii de Candida:
Candida krusei, Candida glabrata precum i
asupra altor fungi ca Tricofiton i Tricosporon.
Miconazolul este activ asupra Candidei
albicans, Candidei glabrata, Candidei kefyr,
Tricofitonului i mai puin activ asupra
Tricosporonului, Candidei krusey.
La Fluconazol sunt sensibile Tricofitonul,
Tricosporonul, Candida albicans), dar sunt
intermediar sensibile sau chiar rezistente alte
specii de Candida:Candida glabrata, Candida
krusei, Candida kefyr.
Potrivit rezultatelor obinute Nistatinul este activ
asupra tuturor speciilor de Candida, n special
asupra Candidei glabrata, Candidei kefyr, dar i
asupra Candidei albicans, Candidei krusei i
Candidei tropicalis. Este mai puin activ asupra
Tricofitonului i Tricosporonului.
Fa de Lamisil sunt sensibile Tricofitonul,
Candida albicans i Tricosporonul. Alte specii
de Candida sunt intermediar sensibile sau
rezistente la Lamisil: Candida krusei, Candida
kefyr, Candida glabrata, Candida tropicals.
Potrivit rezultatelor obinute este sensibil la
Pimafucin doar Tricofitonul. Ali fungi sunt
intermediar sensibili fa de Pimafucin:
Candida albicans, Candida glabrata, Candida
krusei, Candida kefyr, Candida tropicalis i
Trocosporon.
Lamisil se dovedete a fi cel mai activ
antimicotic, n special asupra Candidei albicans,
a Candidei tropicalis i a Tricofitonului. Sunt de
asemenea sensibile la aciunea Nizoralului i alte
specii de Candida: Candida glabrata, Candida
kefyr, precum i Tricosporonul. Nizoralul este
mai puin activ asupra Candidei krusei.
Fa de Econazol sunt sensibile tulpini de
Candida albicans, Candida glabrata, Candida
kefyr i intermediar sensibile tulpini de
Tricofiton, Tricosporonul i Candida krusei.
Ancotilul se dovedete puin eficient, majoritatea
tulpinilor testate (83,9%) fiind rezistente. O
explicaie posibil a acestor rezultate rezid din
faptul c pentru acest antifungic nu s-au gsit n
literatura de specialitate condiiile standardizate
de testare.
Patternul de sensibilitate al tulpinilor de
Candida albicans izolate din secreie
faringian
n terapia candidozelor orale sunt eficiente,
potrivit rezultatelor obinute, urmtoarele
antifungice, n ordinea procentului de
sensibilitatea a tulpinilor izolate, testate: Nistatin
(100%), Nizoral (92,9%), Clotrimazolul (85,7%),
Fluconazol (Fungata) (71,4%) i ntr-o proporie
mai mic Miconazolul (50%). Fa de
Pimafucin sunt sensibile doar 14,3% dintre
tulpini, fa de Lamisil doar 7,1% , iar fa de
Ancotil doar 6,3%. Se remarc numrul crescut
de tulpini IS la Miconazol (42,9%) i R la
Lamisil (78,6%), Ancotil (68,7%), motiv pentru
care aceste antimicotice trebuie evitate n terapia
candidozelor orale, la fel ca i Bifonazolul i
Griseofulvina, la care majoritatea sau toate
tulpinile izolate sunt rezistente (Grafic 1).
Patternul de sensibilitate al tulpinilor de
Candida albicans izolate din sput
Se menine procentul crescut al tulpinilor
sensibile la Nistatin (100%), Nizoral (75%),
Clotrimazolul (85,7%), Fluconazol (Fungata)
(75%) dar crete procentul tulpinilor sensibile la
Miconazolul (75%), Pimafucin (25%), dar i a
tulpinilor IS la Pimafucin (75%) i R la Nizoral
(25%), Fluconazol (25%), Lamisil (90,9%),
Ancotil, Bifonazolul i Griseofulvina, la care
majoritatea sau toate tulpinile izolate sunt
rezistente. (Grafic 2).
Patternul de sensibilitate al tulpinilor de
Candida albicans izolate din secreie vaginal
Se menine procentul crescut al tulpinilor
sensibile la Nistatin (100%), dar scade procentul
tulpinilor sensibile la Nizoral (83,3%),
Clotrimazolul (66,7%), Fluconazol (Fungata)
(50%), antifungice fa de care crete procentul
tulpinilor IS i R: Nizoral (16,7% R), Fluconazol
(33,3% IS; 16,7%R), Clotrimazol (16,7%IS;
16,7%R). La Miconazol 33,3% dintre tulpini
sunt IS; 66,7 R), iar la Pimafucin 33,3% sunt IS
i 66,7%R, la Lamisil 50,% sunt IS i 50% R. La
Ancotil, Bifonazolul i Griseofulvina,
majoritatea sau toate tulpinile izolate sunt
rezistente. (Grafic 3).
Patternul de sensibilitate al tulpinilor de Candida
albicans izolate din urin
Toate tulpinile de Candida albicans izolate din
urin sunt sensibile la Nistatin (100%), Nizoral
(83,3%), o mare pa rte a lor la Fluconazol
(45,5%), Clotrimazol (33,3%), n proporie mai
mic la Miconazol (25%), Ancotil (9,1%),
Pimafucin (9,1%). Se constat existena
tulpinilor IS sau R la Clotrimazol (50%IS;
16,7%R), la Fluconazol (36,4%IS, 18,2%R), la
Miconazol (66,7%is, 8,3%R) i procentul crescut
de tulpini rezistente la Pimafucin (18,2% IS,
72,7%R) Bifonazol, Griseofulvin (100%),
Lamisil (81,8), Ancotil (90,9%) (Grafic 4)..
Compararea patternul de sensibilitate al
tulpinilor de Candida albicans izolate din
diferite produse patologice
Nistatinul este activ asupra majoritii tulpinilor
izolate din diverse produse patologice.
Nizoralul este activ asupra majoritii tulpinilor
izolate din candidozele orale (92,9%), urin
(100%), sput (75%), secreii vaginale (83,3&)
dar apar tulpini rezistente n sput (25%) i
secreiile vaginale (16,7%).
La Fluconazol sunt sensibile majoritatea
tulpinilor izolate din cavitatea bucal (71,4%), i
sput (75%), secreii vaginale (50%), urin
(45,4%) dar exist i tulpini IS sau R izolate din
cavitatea bucal (7,2% IS; 21,4% R), sput (25%
R) i din secreiile vaginale (33.3% IS;16,7% R)
urin (36,4% IS; 18,2% R).
La Clotrimazol sunt sensibile majoritatea
tulpinilor izolate din cavitatea bucal (85,7%),
secreii vaginale (66,7%) i sput dar crete
procentul tulpinilor R sau IS izolate din secreiile
vaginale (16,7% IS; 16,6% R) i mai ales din
urin (50% IS; 16,7 R).
Miconazolul este activ asupra tulpinilor izolate
din sput (75%), din cavitatea bucal (50%),
secreii vaginale (50%) i n procent sczut
asupra celor izolate din urin (25%),
remarcndu-se apariia tulpinilor IS sau R izolate
din cavitatea bucal (42,9% IS; 7,1% R), sput
(25% IS), secreie vaginal i n special din urin
(66,7% IS; 8,3% R).

18
La Ancotil sunt sensibile n procent sczut
tulpini izolate din cavitatea bucal (6,3%) i
urin (9,1%) dar este crescut procentul tulpinilor
R sau IS izolate din secreiile vaginale (16,7%
IS; 83,3% R) i mai ales din urin (90,9% R) i
sput (100%).
Pimafucina este activ asupra unui procent mic
de tulpini izolate din sput (25%), cav. bucal
(14,3%), i n procent sczut asupra celor izolate
din urin (9,1%), remarcndu-se apariia
tulpinilor IS sau R izolate din cavitatea bucal
(78,8% IS), sput (75% R), secreie vaginal
(66,7%) i n special din urin (72,7% R).
La Griseofulvin sunt IS n procent sczut
tulpini izolate din cavitatea bucal (6,3%) dar
sunt rezistente tulpinile izolate din secreiile
vaginale (100%), din urin (100%) i sput
(100%).
La Lamisil sunt sensibile n procent sczut tulpini
izolate din cavitatea bucal (7,1%), i sput
(9,1%) dar este crescut procentul tulpinilor R sau
IS izolate din secreiile vaginale (50% IS; 50% R)
i mai ales din urin (18,2% IS; 81,8% R).

N
y
s
t
a
t
i
n
K
e
t
o
c
o
n
a
z
o
l
e
C
l
o
t
r
i
m
a
z
o
l
e
F
l
u
c
o
n
a
z
o
l
e
M
i
c
o
n
a
z
o
l
e
N
a
t
a
m
y
c
i
n
e
T
e
r
b
i
n
a
f
i
n
e
F
l
y
c
y
t
o
s
i
n
e
G
r
i
s
e
o
f
u
l
v
i
n
B
i
f
o
n
a
z
o
l
e
S
I S
R
S 1 0 0 9 3 , 8 8 7 , 5 8 1 , 3 5 3 , 1 1 2 ,5 6 , 5 4 , 8 0 0
IS 0 3 , 1 6 , 2 3 , 1 4 0 , 6 8 4 ,4 2 9 1 1 ,3 1 6 ,1 0
R 0 3 , 1 6 , 3 1 5 , 6 6 , 3 3 , 1 6 4 ,5 8 3 ,9 8 3 ,9 1 0 0
N y s ta t i n K e t o c o na z o le C lo t ri m a z o le F luc o na z o le M i c o na z o le N a ta m y c i ne T e rb i na f i ne Fly c y t o s i ne G ri s e o f ulv i n B i f o na z o le
C o m p a r e d s e n s i t i v i t y o f C . a l b i c a n s s t r a i n s t o d i f f e r e n t
a n t i m yc o t i c d r u g s


Grafic 1
Patternul de sensibilitatea/rezistenta al tulpinilor de Candida albicans la diferitele antimicotice


N
y
s
t
a
t
i
n
C
l
o
t
r
i
m
a
z
o
l
e
M
i
c
o
n
a
z
o
l
e
T
e
r
b
i
n
a
f
i
n
e
G
r
i
s
e
o
f
u
l
v
i
n
S
R
Antimycotic sensitivity of C.albicans strains isolated from
pharyngeal exudates
S 100 92,9 85,7 71,4 50 14,3 7,1 6,3 0 0
IS 0 7,1 7,2 7,2 42,9 78,6 14,3 25 6,3 0
R 0 0 7,1 21,4 7,1 7,1 78,6 68,7 93,7 100
Nystatin
Ketoconazol
e
Clotrimazol
e
Fluconazole Miconazole Natamycine Terbinafine Flucytosine Griseofulvin Bifonazol


Grafic 2
Patternul de sensibilitate al tulpinilor de Candida albicans izolate din secreie faringian

19
N
y
s
t
a
t
i
n
C
l
o
t
r
i
m
a
z
o
l
e
K
e
t
o
c
o
n
a
z
o
l
e
F
l
u
c
o
n
a
z
o
l
e
M
i
c
o
n
a
z
o
l
e
N
a
t
a
m
y
c
i
n
e
T
e
r
b
i
n
a
f
i
n
e
F
l
u
c
y
t
o
s
i
n
e
G
r
i
s
e
o
f
u
l
v
i
n
B
i
f
o
n
a
z
o
l
S
IS
R
Antimycotic sensitivity of C.albicans strains
isolated from sputum
S 100 100 75 75 75 25 0 9,1 0 0
IS 0 0 0 0 25 75 0 0 0 0
R 0 0 25 25 0 0 100 90,9 100 100
Nystatin Clotrimazole Ketoconazole Fluconazole Miconazole Natamycine Terbinafine Flucytosine Griseofulvin Bifonazol


Grafic 3
Patternul de sensibilitate al tulpinilor de Candida albicans izolate din sput



N
y
s
t
a
t
i
n
K
e
t
o
c
o
n
a
z
o
l
e
C
l
o
t
r
i
m
a
z
o
l
e
F
l
u
c
o
n
a
z
o
l
e
M
i
c
o
n
a
z
o
l
e
N
a
t
a
m
y
c
i
n
e
T
e
r
b
i
n
a
f
i
n
e
F
l
u
c
y
t
o
s
i
n
e
G
r
i
s
e
o
f
u
l
v
i
n
B
i
f
o
n
a
z
o
l
e
S
I S
R
A n t i m y c o t i c s e n s i t i v i t y o f C . a l b i c a n s s t r a i n s
i s o l a t e d f r o m v a g i n a l d i s c h a r g e
S 1 0 0 1 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0
I S 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 6 6 , 7 1 6 , 7 0 0
R 0 0 0 0 0 0 3 3 , 3 8 3 , 3 1 0 0 1 0 0
N y s t a t i n
K e t o c o n a z o l
e
C l o t r i m a z o l e F l u c o n a z o l e M i c o n a z o l e N a t a m y c i n e T e r b i n a f i n e F l u c y t o s i n e G r i s e o f u l v i n B i f o n a z o l e


Grafic 4
Patternul de sensibilitate al tulpinilor de Candida albicans izolate din secreie vaginal



20
N
y
s
t
a
t
i
n

K
e
t
o
c
o
n
a
z
o
l
e
C
l
o
t
r
i
m
a
z
o
l
e
F
l
u
c
o
n
a
z
o
l
e
M
i
c
o
n
a
z
o
l
e
N
a
t
a
m
y
c
i
n
e
T
e
r
b
i
n
a
f
i
n
e
F
l
u
c
y
t
o
s
i
n
e
G
r
i
s
e
o
f
u
l
v
i
n
B
i
f
o
n
a
z
o
l
S
I S
R
A n t i m y c o t i c s e n s i t i v i t y o f C . a l b i c a n s s t r a i n s
i s o l a t e d f r o m u r i n e
S 1 0 0 1 0 0 6 0 8 0 4 0 2 0 2 0 0 0 0
I S 0 0 2 6 , 7 0 3 0 5 5 4 2 , 5 0 0 0
R 0 0 1 3 , 3 2 0 3 0 2 5 5 7 , 5 1 0 0 1 0 0 1 0 0
N y s t a t i n K e t o c o n a z o l e C l o t r i m a z o l e F l u c o n a z o l e M i c o n a z o l e N a t a m y c i n e T e r b i n a f i n e F l u c y t o s i n e G r i s e o f u l v i n B i f o n a z o l


Grafic 5
Patternul de sensibilitate al tulpinilor de Candida albicans izolate din urin



Conc l uzi i
Antifungicele cele mai indicate n terapia
candidozelor sunt Nistatinul, Nizoralul,
Clotrimazolul, Fluconazolul, fa de care
majoritatea tulpinilor testate sunt sensibile.
Miconazolul, Pimafucina i Lamisilul sunt mai
puin eficiente, dat fiind proporia crescut a
tulpinilor IS i rezistente, iar Bifonazolul,
Ancontilul i Griseofulvina nu sunt indicate n
terapia candidozelor, datorit procentului crescut
de tulpini rezistente. Pimafucina i Lamisilul se
dovedesc mai eficiente asupra tulpinilor
vaginale, dect asupra tulpinilor izolate din alte
situsuri.
Our results establish the antimycotic
spectrum of different antimycotic drugs and
can be used as an orientative guide in
antimycotic therapy.On the other hand the
changing in sensitivity pattern of the strains
isolated from patients with a diversity of
mycotic disease in relation with standard
strains, impose the performing of
antimycotic sensitivity test for each isolated
strains and the establishment of therapy
according with sensitivity.
SUMMARY
Importance of the determination of the
pattern of sensibility to antimycotic of the
Candida and dermatophyte species
isolated from various pathologic
products








21
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 22-24
22

Methods of studying biofilms and hipermutability
Metode de studiu al biofilmelor i hipermutabilitii

Ioana COLOSI

Universitatea de Medicin i Farmacie, Cluj-Napoca


Biofilmele sunt o asociere structurat de
microorganisme nconjurate de o matrice
polizaharidic extracelular, matrice care este
produs de aceste microorganisme.
Biofilmele pot fi produse de bacterii, fungi,
protozoare.
Biofilmele pot fi produse de bacterii Gram
pozitive i Gram negative. Att fungii
filamentoi ct i fungii levuriformi i
dermatofiii pot forma biofilme: Microsporum
canis i alte specii de Microsporum;
Trichophyton spp.: T. rubrum i T.
mentagrophytes, Candida albicans, C.
parapsilosis, C. glabrata, C. tropicalis (i alte
specii de Candida, inclusiv specii rezistente la
antifungice), Epidermophytonfloccosum,
Malassezia furfur (Pityropsporon orbiculare,P.
ovale), Cryptococcus neoformans, Aspergillus
fumigatus i alte specii de Aspergillus,
Zygomicete (Rhizopus, Mucor),
Paracoccidioides brasiliensis, Blastomyces
dermatitides, Histoplasma capsulatum,
Coccidioides immitis i Sporothrix schenckii.
Organizarea microorganismelor, bacterii sau fungi,
sub form de biofilme, este cea mai complex
form de rezisten a indivizilor gzduii n reeaua
polizaharidic. Aceast rezisten se manifest fa
de agenii antimicrobieni (antibiotice, antifungice)
i fa de agenii dezinfectani. Matricea
extracelular n care se gsesc incastrate
microorganismele din biofilm le protejeaz de
expunerea la UV, deshidratare, fagocitoz,
antibiotice, ageni antimicrobieni.
Microbiologii i-au bazat cunotinele despre
microorganisme (bacterii, fungi) pe baza
comportamentului celulelor provenite de la
coloniile obinute n urma cultivrii pe mediile
de cultur. Aceste celule, numite celule
planktonice, sunt utilizate pentru studiul
sensibilitii/rezistenei microbiene la antibiotice;
dar studierea acestor colonii microbiene, a
celulelor planktonice nu ofer informaii despre
comportamentul microorganismelor din biofilme.
Dar n natur, 99% dintre microorganisme cresc
sub form de biofilme, asociindu-i resursele
pentru a rezista s fie distruse de antibiotice,
antifungice, ageni dezinfectani.
Odat ataat de o suprafa, ntr-un mediu umed,
orice bacterie sau fung poate s produc biofilm.
Celulele planktonice i celulele din interiorul unui
biofilm, chiar dac provin de la aceeai specie
bacterian/fungic, exprim gene diferite, deci vor
prezenta activiti diferite. Studii genetice au
confirmat aceast exprimare a unor gene diferite
n funcie de proveniena microorganismului:
biofilm sau celule planktonice (free-floating
microbes). Pn la 40% dintre proteinele din
peretele celular difer la celulele prezente n
biofilm fa de cele planktonice, datorit expresiei
diferite a genelor. Astfel, unele inte de aciune
pentru diverse antibiotice pot s nici nu fie
exprimate la nivelul biofilmului. De asemenea,
zonele cu activitate metabolic de la nivelul
biofilmelor corespund cu zonele de sensibilitate
antimicrobian. Majoritatea antibioticelor sunt
active pe celulele aflate n cretere, deci celulele
din interiorul biofilmului vor fi protejate
mpotriva acestor antibiotice.
S-a descoperit c microorganismele, atunci cnd
formeaz un biofilm i n interiorul biofilmului,
comunic ntre ele. Prima dat s-a observat la un
microorganism marin, Vibrio fischeri; n 1998
microbiologul David Davies a anunat c
bacteriile din specia Pseudomonas aeruginosa
comunic ntre ele cu ajutorul unor semnale
chimice numite homoserin lactone cnd formeaz
biofilme. Termenul utilizat pentru a descrie acest
sistem de semnalizare intercelular este quorum
sensing. Acest proces permite microorganismelor
s monitorizeze mediul nconjurtor pentru
prezena altor bacterii, fungi, le permite s
rspund la fluctuaiile ca numr i/sau specii
prezente prin modificarea expresiei genelor pentru
a obine un comportament coordonat, particular, al
populaiei microbiene prezente n biofilm.
S-a observat c microorganismele care, datorit
unor mutaii, prezint alterri ale sistemului de
comunicare interbacterian, nu pot s produc
biofilme. Astfel, au fost testate numeroase
substane care acioneaz ca inhibitori de quorum
sensing, blocnd astfel formarea de biofilme. Cei
mai bine studiai pn acum sunt furanonele
halogenate, mai ales Nitrofurazon. Rezultatele
trialurilor randomizate au demonstrat c
utilizarea cateterelor urinare impregnate cu
Nitrofurazon reduce incidena apariiei
bacteriemiei i fungemiei i reduce necesitatea
prescrierii de tratament antibiotic la pacienii
care necesit catetere, fa de pacienii la care s-
au utilizat catetere urinare standard, din silicon.
Numeroase laboratoare au observat c dei
majoritatea populaiei microbiene dintr-un
biofilm a fost ucis de agenii antimicrobieni, o
mic parte din populaia biofilmului rmne
viabil, n ciuda unei expuneri prelungite la
antibiotic sau n ciuda creterii dozelor de
antibiotic. Aceste celule au fost numite
persisters. Astfel, proprietile biofilmelor
contibuie la rezistena antimicrobiana: este
afectat penetrarea agenilor antimicrobieni,
activitatea metabolic nu este uniform la nivelul
biofilmelor, de asemenea variabilitatea genetic
i fenotipic joac un rol important n rezistena
la agenii antimicrobieni.
Biofilmele sunt responsabile de peste 80% din
infeciile microbiene umane. Biofilmele ader de
suprafee naturale sau artificiale: metale, dini,
catetere urinare, intravenoase; de asemenea pot
adera de lentilele de contact, dispozitivele
intrauterine, pacemakere, stenturi, diverse
implante de la nivelul articulaiilor. Biofilmele se
formeaz n aproximativ 2 zile. Infeciile
rezultate (bacteriemie, pneumonie, meningit,
osteomielit, endocardit, sinuzit, artrit,
infecii de tract urinar etc.) necesit de cele mai
multe ori doze mari de antibiotice, n unele
cazuri fiind necesar ndeprtarea chirurgical a
dispozitivului implantat (proteza de sold,
pacemaker etc.). Biofilmele sunt implicate i n
etiologia infeciilor nosocomiale. Conform
studiului SCOPE (Supravegherea i Controlul
Patogenilor de Importan Epidemiologic),
realizat n USA privind infeciile nosocomiale,
49% din septicemiile nosocomiale au aprut la
pacieni din seciile de terapie intensiv, care au
frecvent un sistem imunitar slbit i frecvent sunt
dependeni de ventilaie asistat i/sau catetere,
pe suprafaa crora se formeaz biofilme
(Wenzel et al., 1999).
n concluzie, biofilmele sunt populaii de
microorganisme care ader de suprafee i produc
o matrice extracelular polizaharidic, prezentnd
rezisten crescut la aciunea agenilor
antimicrobieni. Acest principiu microbiologic
poate fi benefic n nelegerea unor infecii
produse de dermatofii, care sunt refractare la
tratamentul standard. Cercetarea i studierea
biofilmelor ar putea duce la gsirea unor noi inte
pentru terapia antifungic, inclusiv gsirea unor
substane care s reduc ataarea
microorganismelor, care s mpiedice sinteza
matricei extracelulare i care s ptrund mai bine
prin acest material extracelular pentru a ucide
microorganismele din interiorul biofilmului.



REFERINE 43rd ESCMID post-graduate course, Bacterial adaptation mechanisms: biofilms,
hypermutability, and antibiotic resistance (BAMBHAR), workshop Methods of studying biofilms and
hypermutability 7-9 November 2007, Palma de Mallorca, Spain.

Organizatori: ESGB=ESCMID (European Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases)
STUDY GROUP FOR BIOFILMS.

1. Anatomy and physiology of biofilms Soren Molin, Biocentrum, Infection Microbiology Group,
Technical University of Denmark, Denmark
2. Clinical impact of biofilms Niels Hoiby, Department of Clinical Microbiology, University Hospital,
Rigshospitalet, Copenhagen, Denmark
23
3. Staphylococci in foreign-body biofilms Holger Rohde, Institute of Infectious Medicine,
Universitatklinikum Hamburg- Eppendorf, Hamburg, Germany
4. Biofilms and the immune system - Niels Hoiby, Department of Clinical Microbiology, University
Hospital, Rigshospitalet, Copenhagen, Denmark
5. Biofilms and antibiotics Oana Ciofu, Department of International Health, Immunolgy and
Microbiology, Faculty of Health Sciences, University of Copenhagen, Denmark
6. Animal models of biofilm Claus Moser, Department of Clinical Microbiology, University Hospital,
Rigshospitalet, Copenhagen, Denmark
7. Characterization of hypermutable strains Antonio Oliver, Department of Microbiology, Hospital Son
Dureta and University of the Balearic Islands, Palma de Mallorca, Spain
8. Technical workshop AV presentation of the major techniques used to study biofilms.

24
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 25-35
25

Noi tendine n epidemiologia infeciilor fungice
invazive

Amanda RADULESCU, Monica JUNIE, Doina ULESCU

Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu, Cluj-Napoca


Atenia adresat infeciilor fungice sistemice se
justific prin frecvena in cretere, dificultile
terapeutice i prin intentia de optimizare a
profilaxiei lor la pacieni cu risc crescut. Exist
mai multe clasificri ale fungilor pe baza
criteriilor morfologice i de cultur precum i a
entitilor clinice induse.
Morfologic, se disting:
fungi (yeast-like) - structuri rotunde sau
ovalare care se reproduc prin nmugurire,
formeaz colonii netede i plate (ex.
Candida spp.),
fungi filamentoi - mucegaiuri (mold,
mould) structuri tubulare denumite
hyphae (septate sau neseptate) care se
reproduc prin filamente cu extensie
longitudinal, formeaz colonii cu aspect
pufos (ex. Aspergillus spp.),
fungi dimorfi in vivo au aspect de fungi
i in vitro de fungi filamentoi
(Histoplasma capsulatum, Coccidioides
immitis, Blastomices dermatidis),
neclasificabili distinct Pneumocystis
jirovecii -- structur rotund care se
reproduce prin diviziune cu formare de
spori interni.
Fungii cauzeaz trei tipuri de mbolnviri:
1. Alergii la antigene fungice Stachybotrys
chartarum - astmul bronic epidemic al
copiilor (1997-SUA), aspergiloza alergic
bronhopulmonar,
2. Intoxicaii - micotoxicoze ingestie de
alimente coninnd toxine (ex. aflatoxine)
sau ciuperci otrvitoare,
3. Micoze invazia esuturilor de ctre un
fung:
Superficiale - dermatomicoze, cu
afectarea pielii i fanerelor:
Tricophyton - tinea pedis,
Malassezia furfur - tinea versicolor,
Candida spp. - candidoza oral i
genital,
Subcutanate afecteaz pielea i
esutul subcutanat cu interesare
local i afectare limfatic:
sporotricoza - Sporothrix schenkii,
micetomul - Madurella mycetomatis,
Sistemice (invazive) - implic
invazia esuturilor profunde sau
fungemie acompaniat de
simptomatologie compatibil cu
microorganismul incriminat.
Infeciile fungice sistemice se
identific n condiie de
imunosupresie, mai ales la
transplantai hematologici sau de
organe solide sau pacieni critici din
serviciile de terapie intensiv.
Confirmarea diagnosticului de
infecie fungic sistemic (invaziv)
se face pe baza:
o evidenierii la nivel tisular (din
prelevate aspirate sau bioptice)
prin cito-histochimie a prezenei
hifelor (expresia fungilor
filamentoi) sau a formelor
ovalare sau a pseudohifelor -
mnunchi de celule nmugurite
produse de majoritatea speciilor
de Candida - (expresia fungilor)
asociat cu leziuni tisulare nete
sau culturi pozitive din prelevate
obinute steril de la nivelul unui
situs obinuit steril dar sugestiv
clinic sau radiologic pentru
prezena infeciei,
o evidenierii fungemiei pentru
specii de Candida sau a altor
fungi la pacieni cu
simptomatologie sugestiv
pentru un anumit
microorganism. Fungemia este o
raritatate n infeciile cu
Aspergillus spp. (descris numai
pentru Aspergillus niger) i
Penicillium spp. (exceptnd P.
marneffei) acompaniat de
simptomatologie sugestiv
pentru microorganismul
incriminat.
Infeciile fungice sistemice sunt clasificate la
rndul lor:
A. Infeciie fungice sistemice endemice sau cu
afectare pulmonar care, n contrast cu fungii
oportuniti pot apare i la persoane
imunocompetente fcnd parte dintre bolile
infecioase autohtone. Micozele endemice
includ: histoplasmoza, blastomicoza,
sporotrichoza, coccidioidomicoza,
paracoccidioidomicoza i penicilioza fiecare cu o
alocare geografic distinct. Confirmarea
diagnosticului se face pe criterii clinice i de
laborator (histopatologic, prin cultivare i/sau
serologic).
B. Infecii fungice sistemice oportuniste
Clasificarea nu este cu totul adecvat pentru c
exist un grad de suprapunere ntre diferitele
tipuri de boli prezentate: de exemplu, n micozele
sistemice se pot produce leziuni cutanate i
subcutanate, iar micozele cutanate i subcutanate
pot deveni sistemice. Consens exist pentru
infeciile fungice oportuniste care sunt n esen
sistemice.
Candidoza sistemic - Candida spp.
Aspergilloza invaziv cu manifestare
pulmonar - Aspergillus spp.
Zygomicoze- infecii cauzate de
Zygomycete,
Criptococoza cu manifestare pulmonar
sau meningian Cryptococcus
neoformans
Hyalohyphomicoza (fungi filamentoi
productori de colonii de culoare
deschis) cu manifestri sistemice
specii de Penicillium, Scedosporium,
Fusarium
Phaeohyphomicoza (fungi filamentoi
productori de colonii de culoare
nchis) cu manifestri sistemice specii
de Cladosporium, Alternaria
Neobinuite, cu manifestri sistemice
Trichosporon spp., Malassezia furfur
Pneumonia cu Pnecumocystis jiroveci.
Candidozele reprezint cele mai frecvente
infecii oportuniste n intreaga lume. Genul
Candida include 154 de specii, dintre care, ase
specii reprezint comensali ubicuitari capabili s
declaneze infecii atunci cnd rezistena local
sau sistemic sunt compromise.. Candida
albicans este specia cea mai important dar sunt
implicate tot mai frecvent n infecii sistemice: C.
tropicalis, C. glabrata, C. parapsilosis, C. krusei
i C. lusitaniae. Candidozele sistemice (invazive)
includ candidemii, candidoza diseminat,
endocardita, meningita i endoftalmita. n
ultimii 20 de ani Candida a devenit unul dintre
cei mai importani patogeni nosocomiali n
ntreaga lume. Clasic, diagnosticul se bazeaz pe
hemocultura pentru fungi care ns se pozitiveaz
in aproximativ trei zile i are o rat de fals
negativitate de 30-50% limitndu-i utilitatea. Se
completeaz cu examinri histopatologice care
evideniaz celule nmugurite, pseudohife i hife
septate. Alturi de identificarea de rutin (n
sistem API) cu teste biochimice i medii speciale
pentru izolarea i identificarea fungilor
(CHROMagar); sunt utilizate noi metode non-
culturale care permit diagnostic rapid i de
incredere:
Test imunoenzimatic de identificare a unui
component al peretelui celular al fungilor,
(1,3)-beta-D glucan (sensibilitatea i
specificitatea sunt de 70% i 87%,
respectiv),
O tehnic de hibridizare in situ care
permite diferenierea speciilor de C.
albicans de cele nonalbicans utiliznd un
primer de acid nucleic marcat cu
fluorescein care se fixeaz pe 26S rARN
a C. Albicans,
Utilitatea metodelor PCR nu a fost nc
suficient demonstrat.
26
testul ELISA- Platelia Aspergillus
detecteaz galactomananul, component a
peretelui celular (sensibilitatea i
specificitatea sunt de peste 90% i 85%,
respectiv); dei validat pentru utilizare
clinic valoarea diagnostic rmne nc
de evaluat,
Aprecierea susceptibilitii la antifungice
se face doar n anumite cazuri refractare la
tratamentele convenionale.
Tratamentul de prim intenie al candidozelor
sistemice documentate sau probabile se face cu
fluconazol, dac nu s-au utilizat azoli anterior,
manifestarea bolii este moderat i pacientul nu
se afl la risc nalt de infecie cu C. glabrata
(vrstnici, neoplazici, diabetici). Rezultatele
terapeutice mai bune cu echinocandine, evaluate
n numeroase studii clinice, fac posibil
schimbarea strategiei terapeutice i profilactice.
Pacienii neutropenici, cu boal sever, eventual
cu afectare valvular i miocardic necesit
tratament iniial cu echinocandine (caspofungin,
micafungin, anidulafungin) sau cu noile
formulri de amphotericin B (lipozomal sau
lipidic). n afectarea cerebral se impune
utilizarea amphotericinei B datorit penetrrii
modeste a echinocandinelor n SNC.
Echinocandinele sunt uor de administrat, au
puine interaciuni medicamentoase i activitate
foarte bun fa de toate speciile de Candida.
Noii triazoli (voriconazol i posaconazol) au
demonstrat activitate excelent fa de
majoritatea speciilor de Candida, inclusiv C.
glabrata i C. krusei, apreciindu-se utili i pentru
tranziia la tratament oral a pacienilor stabili. i-
au demonstrat eficacitatea i n profilaxie la
transplantaii de celule stem hematopoietice.
testul PCR singur sau mpreun cu
identificarea galactomannanului par a fi
utile ca markeri diagnostici precoce.
Clasic, amphotericina B sau formulrile lipidice
reprezentau tratamentul de elecie pentru
aspergiloza invaziv. Trialurile clinice cu
voriconazol sau posaconazol demonstreaz o mai
bun eficacitate, mai puine reacii adverse dect
orice preparat de amphotericin B.
Echinocandinele au un rol limitat n aspergiloz
rmnnd ca terapie de salvare la pacieni cu
intoleran la medicaia de prima linie.
Clasa Zygomycete
Clas de fungi care include trei ordine:
Mucorales (specia Rhizopus cea mai frecvent
implicat), Mortierellales i Entomophthorales.
Zygomicozele se manifest mai ales ca sinuzite
i infecii rinocerebrale invazive sau ca boal
gastrointestinal, pulmonar i diseminat.
Diagnosticul este histopatologic, se bazeaz pe
evidenierea hifelor de form neregulat, fr
septe sau minim septate, cu ramurile n unghi
drept. Cultivarea de fragmente bioptice, are
sensibilitate modest iar tehnicile PCR sau
serologice nu au o eficacitate demonstrat.
Tratamentul este dificil i implic intervenie
chirurgical cu debridare extensiv a tuturor
situsurilor invadate i tratament cu
Amphotericin B. Dintre noile triazole,
posaconazolul este util la pacienii cu boal
invaziv rezistent la amphotericin.
Aspergillus
Genul Aspergillus include peste 185 specii dintre
care doar 20 au fost implicate n infecii
oportuniste la om. Aspergillus fumigatus este cel
mai frecvent identificat n patologie, de la
manifestri alergice pn la aspergiloza invaziv.
Cea mai sigur metoda de diagnostic este
examenul histopatologic din piese bioptice urmat
de cultivare. Aspectul tipic este de hife septate,
nguste, cu ramuri n unghi ascuit. Aspectul
complementar radiografic este de leziuni
nodulare nconjurate de o zon de halou sau de
infiltrat cu aspect de semilun. Testele non-
culturale utilizate n prezent sunt:
Importana epidemiologic a acestor infecii se
desprinde din indicatorii de frecven i gravitate
alturi de evaluarea etiologic dinamic. Date
exacte asupra incidenei i mortalitii atribuibile
infeciilor fungice sistemice oportuniste sunt
dificil de obinut datorit a numeroi factori
ncepnd cu subdiagnosticarea i subraportarea i
terminnd cu diferenele n cerinele de
confirmare a diagnosticului i raportare precum
i neraportarea datorit diagnosticului secundar.
test imunoenzimatic de identificare a unui
component al peretelui celular al fungilor,
(1,3)-beta-D glucan (sensibilitatea i
specificitatea sunt de 70% i 87%,
respectiv),

27


Grafic 1


Evaluarea epidemiologic a cauzelor de sepsis
dup 1980 demonstreaz, indiferent de continent,
creterea frecvenei infeciilor fungice sistemice.
Studiul multicentric efectuat de Martin i col.
asupra cazurilor de sepsis raportate la totalul
spitalizrilor efectuate n SUA ntre 1979-2000,
22 de ani, (10.319.418 cazuri raportate la 750 de
milioane de spitalizri) demonstreaz creterea
infeciilor fungice, cu 207%, precum i
predominena bacteriilor Gram pozitive.
Creterea incidenei cazurilor de sepsis n
perioada studiului a fost de 13,7% pe an, de la
82,7/100.000 la 240,2/100.000 persoane, dup
standardizare la structura populaiei din anul
2000.
ntr-unul dintre cele mai largi studii multicentrice
studiul efectuat n SUA de ctre Wisplinghoff i
col. asupra sepsisului nosocomial n perioada
1995-2002 nsumnd 24.179 de cazuri de sepsis
provenite din 49 de spitale (studiu naional
prospectiv de supraveghere), s-a evideniat c
infeciile fungice ocup poziia a III-a cu o
proporie de 9,5%, dup infeciile cu coci Gram
pozitivi (65%) i cele cu bacili Gram negativi
(27%), rata infeciilor nosocomiale cu
bacteriemie/fungemie documentate (BSI) fiind
de 60 la 10.000 de internri. De menionat c
incidena infeciilor fungice cu Candida spp. a
fost semnificativ mai mare la pacieni
neutropenici. Mortalitatea brut a fost 27%, iar
pentru infecii fungice sistemice 39% (dar 47%
n serviciile de terapie intensiv).
n Europa, studiul multicentric prospectiv SOAP,
efectuat cu scopul evalurii sepsisului n uniti
de terapie intensiv (cazuri consecutive colectate
n perioada 1-15 mai, anul 2002), cu evaluarea
prognosticului pn la 60 de zile demonstreaz
frecvena nalt a sepsisului, cu rate de peste
35%, proporia deceselor fiind 27% i peste 50%
(n prezena ocului). Unui numr de 1.177
(37%) pacieni li s-a stabilit etiologia infeciei:
proporii aproape egale de coci Gram pozitivi
(40%) i bacili Gram negativi (38%), etiologia
fungic a fost de 17% (Candida albicans
dominant, cu 13% din totalul cazurilor). ntr-un
alt studiu multicentric european, efectuat sub
auspiciile European Confederation of Medical
Mycology n perioada 1997-1999, evaluarea
incidenei candidozelor sistemice n 7 ri
europene (din peste 100 de spitale),
demonstreaz rate de 0,20- 0,38 la 1.000 de
internri cu o mortalitate la 30 de zile de la
diagnostic de 37,9%. Condiiile morbide
predispozante au fost dominate de patologia
chirurgical i de terapie intensiv (85% dintre
cazuri) urmat de cancere solide sau
hematologice (15,8% dintre cazuri), infecia cu
HIV acoperind 3% din proporia cazurilor (unii
pacieni au avut mai mult de o condiie condiie
predispozant). Dei a predominat Candida
albicans (56%), incidena speciilor nonalbicans
le confirm importana: Candida glabrata i
Candida parapsilosis cu peste 13% din cazuri
fiecare, Candida tropicalis cu 7,2% din cazuri.
Etiologia a fost pregnant asociat cu bolile
preexistente:
- n cancerele hematologice au predominat
speciile nonalbicans - 65% (C.
28
tropicalis, parapsilosis, krusei, glabrata,
guilliermondii, kefyr),
- Candida parapsilosis a fost izolat cu
cea mai mare frecven la nou-nscui
(36 din 125, 28,8%),
- Candida glabrata a fost identificat cel
mai frecvent n servicii chirurgicale i la
pacieni cu cancere solide (152/933-
16,3% i 75/471-15,9%, respectiv),
- Infeciile cu Candida glabrata cresc cu
vrsta ( de la 3% la 19%),
- Candidemii cu dou sau mai multe specii
identificate n 2,4% a cazurilor.
A fost apreciat colonizarea de la nivelul
mucoasei tractului digestiv cu dou sptmni
nainte de candidemie la pacieni aparinnd
condiiilor de risc (hematologie, nou-nscui,
secii de terapie intensiv) demonstrnd
implicarea aceleiai specii de Candida n
proporie de peste 80% pentru C. albicans i C.
glabrata, 68% pentru C. tropicalis dar numai
30% pentru C. parapsilosis. Existena unui
cateter venos in situ i antibioterapia anterioar
au fost prezente la aproximativ 80% dintre cazuri
sugernd implicarea florei endogene intestinale
ca i infecia de cateter ca surse primare i de
ntreinere a candidemiei.
ntr-un alt studiu, cel mai larg din America Latin,
efectuat n nou orae din Brazilia n perioada
2003-2004, se evideniaz rate de 2-15 ori mai
mari dect ri din emisfera nordic: 2,49 cazuri la
1.000 internri i 0,37 episoade per 1.000
pacieni-zile fa de: Statele Unite ale Americii
(0,28 la 0,96 per 1.000 internri), Canada (0,45
per 1,000 internri), Frana (0,17 per 1,000
internri), Norvegia (0,17 per 1.000 internri),
Ungaria (0,20 to 0,40 per 1.000 internri), Elveia
(0,27 per 1.000 internri), Italia (0,38 per 1.000
internri) i Spania (0,76 la 0,81 per 1.000
intrnri). Mortalitatea la 30 de zile a fost 54% i,
n contrast, cu alte studii implicaia etiologic
apare diferit: C. Albicans - 40,9%, C. tropicalis
i C. parapsilosis reprezentnd cte 20% dintre
cazuri sugernd diferene geografice ale
distribuiei fungilor. Valorile mai mari ale
infeciilor fungice invazive se coreleaz cu ratele
mai mari ale sepsisului nosocomial sugernd
limitele profilaxiei i controlului acestora.
Diferene nete apar i in ceea ce privete vrsta,
mediana - 40 ani, rezultnd din ponderea mare a
copiilor cu neoplazii.
Aspergillus, cel mai important fung micelial, este
cauz de mortalitate atribuibil infeciei la
primitorii de celule stem hematopoietice i la
animite transplantai de organe solide (inim,
plmn). Aprecierea incidenei aspergilozei este
dificil din cauza diagnosticului invaziv, bazat pe
decoperirile histopatologice i pe tehnicile de
identificare a anticorpilor fa de galactomannan
(n mai mult de o prob datorit rezultatelor fals
pozitive). Percepia general este de cretere a
incidenei aspergilozei, Studiile efectuate n SUA
(Fraser et al., Reingold et al.) demonstreaz
creterea de la 1,87, la 4,82 i 8,4 cazuri per
1.000.000 persoane n anii 1970, 1976 i 1982. n
anii 1996, n SUA, se estimeaz peste 10.000 de
cazuri anual cu o inciden de 38 la 1.000.000 de
persoane sau 0,035% din totalul spitalizrilor.
Dei raportrile difer, este evident creterea de
aproximativ 8 ori a spitalizrilor asociate
aspergilozei. Pe baza consensului privind
definiiile de caz i a mbuntirii raportrii
aspergilozei la transplantai de celule stem i de
organe solide n perioada 2001-2002, CDC
Atlanta evalueaz incidena cumulativ n
primul an dup transplant la 4.621 transplatai cu
celule stem, rate de 0,5-3,9% (dependent de tipul
de transplant, autolog, alogenic, cu potrivire
HLA), valori mai mici dect n rapoarte
anterioare, corelabile cu modificarea medicaiei
imunosupresive i a strategiei n transplantologie.
Mortalitatea prin aspergiloz la 3 luni de la
apariia manifestrilor a fost de 53,8% pn la
85%, ratele cele mai mari fiind corelate cu
transplantul hematologic. Incidena cumulativ a
aspergilozei dup transplant de organe solide n
primele 12 luni, evaluat la 4.110 pacieni a fost
cea mai mare pentru cel de plmn de 2,4%, i
cea mai mic dup transplant de rinichi, 0,1%.
Mortalitatea la 3 luni dup apariia aspergilozei a
fost mai mic dect posttransplant hematologic,
ntre 20% pentru transplant pulmonar i 66%
pentru de cel cardiac.
Momentul apariiei infeciilor fungice a suferit o
deplasare a riscului de boal din perioada
neutropenic pretransplant, n faze tardive
postransplant, corelabil cu boala gref-contra-
gazdei. A. fumigatus rmne cel mai frecvent
implicat n aspergiloza invaziv dar cu o pondere
mai mic (56%) dect n anii 1990 cnd reprezenta
peste 90% din cazuri, urmat de A. flavus (19%) i
A. terreus (16%) i A. niger (8%).
ntr-un studiu autopsic efectuat ntr-un spital de
nivel teriar german s-au documentat 200 de
29
cazuri de infecii fungice sistemice raportat la
11.000 de autopsii efectuate n perioada 1978-
1992, demonstrnd declinul candidozelor
sistemice i creterea semnificativ a
aspergilozei invazive i a altor fungemii
considerate rare. Un alt studiu autopsic efectuat
ulterior, tot n Germania n perioada 1994-2003,
se identific candidoza i aspergiloza n proporie
de 8% din totalul autopsiilor efectuate. Tendina
n ultimii 5 ani a fost de cretere prin creterea
candidozei sistemice, aspergiloza rmnnd cu
inciden constant.
n ansamblu, se poate aprecia c speciile de
Candida i Aspergillus acoper etiologia
infeciilor sistemice fungice n proporie de 90%.
Diferenele depind n principal de factorii de risc.
Fungii miceliali din speciile Rhizopus,
Scedosporium i Fusarium reprezint 80% dintre
micozele sistemice considerate rare, sunt n
cretere fa de anii 1990 fiind identificai n 6,8%
autopsii. Fungii miceliali se manifest variat, fiind
cel mai frecvent identificate la trasplantaii
hematologici, cu excepia mucormicozei cel mai
frecvent evideniat la diabetici.
Epidemiologie i ecologie
Factorii epidemiologici obligatoriu participani n
determinismul infeciilor fungice sistemice sunt
reprezentai de:
Rezervor i surse de infecie mediul
nconjurtor, surse extraumane i - extrem de rar
- omul bolnav (sunt transmisibile numai
micozele cutanate). Cum majoritatea fungilor
sunt ubicuitari, prezeni n sol, aer, ap, pe
obiecte, alimente, mediu spitalicesc, obiecte,
vegetaie n descompunere, animale, i psri, se
contureaz o miriad de posibiliti de realizare a
infeciei fungice sistemice, dar numai n condiii
de imunosupresie. Aa cum reiese din studii
recente proveniena speciilor de Candida este
endogen, tractul intestinal. Fungii filamentoi ca
Aspergillus i Fusarium sunt prezeni n aer,
suprafee umede i ap. Mai pot fi regsii pe
fibrele sintetice ale mbrcminii de spital, n
unele ape minerale i n capsulele de probiotice
cu coninut de Saccharomyces boulardii.
Transmiterea poate fi:
aerian, de exemplu inhalarea de aerosoli
coninnd conidii sau ap contaminat cu
Aspergillus spp. urmat de apariia de mici
izbucniri epidemice asociate unor riscuri
de mediu spitalicesc sau proxim,
digestiv, prin ingestia unor alimente
mucegite (pine) cu apariia de cazuri
sporadice de mucormicoz, descrise
excepional chiar la persoane
imunocompetente,
de contact, cel mai frecvent asociat cu
transmiterea n colectiviti a micozelor
pielii i a fanerelor, rar, asociat
bandajelor n coccidiodomicoz,
prin instrumentar medical, mucormicoza
sugarilor asociat depresoarelor de limb
(din material lemnos) sau
cateterizri prelungite i nutriie
parenteral total - Candida spp.
Malassezia furfur, Tricophyton spp.
Receptivitatea condiionat este cel mai important
factor implicat n determinismul infeciilor fungice
sistemice, justificnd terminologia de infecii
oportuniste. Condiia de imunosupresie se regsete
n cele cinci mari grupuri de risc: pacieni cu
cancere hematologice i solide, transplantaii
hematopoietic i de organe solide, pacienii critici
sau cu intervenii chirurgicale laborioase spitalizai
n secii de terapie intensiv, nou-nscuii din
servicii de terapie intensiv i infectaii cu
HIV/SIDA. Riscul de infecii fungice n secii de
terapie intensiv se asociaz cu: antibioterapia,
prezena unui cateter venos central, nutriia
parenteral total, hemodializa, interveniile
chirurgicale majore, pancreatita, corticosteroizii,
medicaie imunosupresoare nonsteroidic.
Afectarea uneia sau mai multor bariere de aprare
creaz condiiile de oportunism pentru infeciile
sistemice. ntr-o detaliere i ierarhizare acceptat de
ctre majoritatea autorilor, cel mai mare risc de
infecii fungice se descrie la pacienii transplantai
medular sau cu transplant de celule stem
hematopoietice iar la acetia, dependent de tipul de
celule stem transplantate, cel mai mare risc de
infecii fungice fiind descris la primitorii de celule
heterologe HLA compatibile. La acetia predomin
infeciile cu fungi filamentoi (Aspergillus
fumigatus i non-fumigatus, Scedosporium spp,
Fusarium spp., Rhizopus spp. i alii), fa de care,
indiferent de etiologie, supravieuirea la un an este
la fel de modest, 20%. Infeciile fungice sistemice
survin precoce posttransplant, mai mult de jumtate
n primele 60 de zile i sunt responsabile de 20-
30
50% dintre cauzele de deces la transplantaii de
celule stem hematopoietice.
Alte categorii de risc pentru infecii fungice
sistemice sunt:
transplantai de organe solide cu o
inciden a infeciilor fungice de 5-45%,
dominat de Candida spp.
neutropenia profund i prelungit,
cateterizrile prelungite i cateterele
fabricate din polietilen,
corticoterapia prelungit,
tratamentele prelungite cu antibiotice,
boala acut i cronic - gref contra gazd
- i imunosupresia,
infecia cu HIV avansat,
pacieni din secii de terapie intensiv
(chirurgie cardiac, abdominal i
neurochirurgie),
nou-nscui din secii de terapie intensiv,
politraumatizai i mari ari.
Candida spp.:
Sunt prezente n sol, animale, mediu
spitalicesc (rareori sunt contaminani de
laborator), obiecte i alimente,
Sunt microorganisme comensale prezente pe
piele, n tractul gastrointestinal, tractul
genital feminin, sput. Patogenitatea
condiionat se valideaz prin factori de
gazd i iatrogeni de rupere a barierelor de
aprare ale gazdei. Dintre factorii de gazd
cel mai important este diabetul zaharat,
predispozant pentru candidoze superficiale,
dar nu pentru cele sistemice. Factorii
iatrogeni corelai cu candidoza sistemic
sunt: antibioterapia prelungit care modific
structura microbiocenozelor n favoarea
fungilor comensali, factori de favorizare a
ptrunderii n snge a fungilor cum sunt
consumul de droguri iv., nutriia parenteral
total, cateterele de polietilen, implantele de
msurare tensional i implantele protetice
cardiace. Identificarea n proporie de peste
80% a aceleiai specii de Candida la nivel
intestinal i ulterior n snge la categoriile de
mare risc demonstreaz proveniena
endogen.
Transmiterea interuman este posibil
(candidoza bucal a nou nscuilor ctigat
n timpul pasajului prin canalul pelvian
matern). Candidoza oral
pseudomembranoas este o complicaie
frecvent a mucositei induse terapeutic prin
iradiere pentru cancere localizate la cap i
gt, demonstrnd rolul factorilor de risc n
declanarea unei infecii endogene, n acest
caz afectarea barierei cutaneo-mucoase.
Aspergillus spp.
Microorganisme ubicuitare, prezente n sol,
ap, alimente, aer i n particular n materia
vegetal n curs de degradare. Doza
infectant nu este cunoscut, dar se apreciaz
c o persoan cu mecanismele de aprare de
la nivelul tractului respirator normale nu va
face aspergiloz n ciuda expunerii
inevitabile prin inhalare de aerosoli
coninnd conidii, condimente contaminate
inhalate (piperul) i altele. n contrast,
persoanele cu neutropenie accentuat i
prelungit sau tratate cu corticoizi (reduc
activitatea fagocitar a macrofagelor
alveolare) au susceptibilitate crescut. Cel
mai nalt risc pentru aspergiloz se descrie la
transplantaii medular i transplantaii de
organe solide (mai ales de plmn) n
perioada de imunosupresie, asociat mai
vechilor terapii imunosupresive, dar i celor
recent introduse aa cum este tratamentul cu
infliximab (antagonist de TNF alpha),
alemfuzumab - anticorpi monoclonali cu
efect profund LT depletiv
S-au descris mici izbucniri epidemice
nosocomiale asociate defectelor arhitectonice
sau unor riscuri de mediu din mediul proxim
spitalicesc (inclusiv prin aerosoli de ap
contaminat),
Infectiile sunt exogene, dar pot fi i
endogene prin reactivarea unei infecii
anterioare sau colonizare, descrise la
transplantaii pulmonar,
Rar, infecia invaziv poate urma celei
localizate la nivel de plag chirurgical sau
prin catere intravenoase centrale
contaminate,
Ali fungi micelial oportuniti:
Reprezentanii ordinului Mucorales (specia
Rhizopus cea mai frecvent implicat), i
31
Entomophthorales sunt ubicuitari, prezeni n
materia n curs de degradare, frecvent
prezeni n alimente mucegite. Produc
conidii n cantiti mari, ceea ce presupune
expunere cotidian, dar boala este
excepional la persoane imunocompeteni,
Au fost descrise cazuri disparate i mici
agregri de cazuri asociate depresoarelor de
limb din material lemnos sau forme
cutanate asociate benzilor adezive
contaminate,
Manifestarea rinocerebral este asociat
diabetului zaharat dezechilibrat, iar formele
sistemice, pulmonar, gastrointestinal i a
sistemului nervos central se descriu la
transplantai hematopoietic i de organe
solide.
n ultima decad frecvena infeciilor fungice
oportuniste a crescut i spectrul patogenilor
implicai s-a modificat. Predomin n continuare
speciile de Candida i Aspergillus, cu meniunea
creterii importante a speciilor de Candida
rezistente la azoli, a speciilor de Aspergillus non-
fumigatus i a fungilor miceliali rari. Tendina de
evoluie este variabil descris, dependent de
fiecare patogen, de subsetul de pacieni
imunocompromii i de schimbrile n
tratamentul de fond imunosupresiv sau
chirurgical.
Profilaxia antifungic a fost evaluat in
trialuri clinice pentru mai multe categorii de
persoane imunosupresate:
1. Pacienti cu neutropenie prelungit:
- Profilaxia se aplic pe durata neutropeniei,
cel mai adesea la pacieni cu leucemii
acute, sindroame mielodisplazice,
- Clasic, profilaxia cu fluconazol a redus
semnificativ incidena infeciilor fungice
invazive dar fr beneficii n sensul
ameliorrii supravieuirii,
- Itraconazolul pare cel puin la fel de
eficace dar reaciile adverse sunt mai
numeroase,
- Echinocandinele (Caspofungin) par
eficace, similar itraconazolului, cu rate
similare ale efectelor adverse,
- Profilaxia cu doze mici de amphotericin B
lipozomal a demonstrat reducerea
semnificativ a infeciilor fungice invazive
fr a exista reacii adverse severe,
- Regimurile profilactice cu posaconazol
comparate cu profilaxia standard
(fluconazol) s-au dovedit benefice nu
numai n reducerea incidenei infeciilor
fungice dar i n ameliorarea supravieuirii
(reacii adverse comparabile cu
fluconazolul i itraconazolul).
2. Pacieni critici din secii de terapie
intensiv
- Numeroase evaluri demonstreaz
creterea incidenei infeciilor fungice
invazive la foarte variatele categorii de
persoane aflate n stare critic n secii de
terapie intensiv,
- Studiile anterioare au demonstrat c
profilaxia cu fluconazol a redus
semnificativ incidena infeciilor fungice
invazive dar fr beneficii n sensul
ameliorrii supravieuirii,
- n ultimii ani s-au efectuat numeroase
trialuri clinice pentru aprecierea
oportunitii profilaxiei i dou strategii s-
au dovedit benefice: decontaminarea
selectiv a tubului digestiv i profilaxia
antifungic cu un singur antifungic:
profilaxia antifungic se adreseaz mai
ales categoriilor de risc nalt, n timp ce
decomtaminarea selectiv se aplic
pacienilor n stare critic,
- Fiecare strategie a redus semnificativ
colonizarea digestiv i riscul de infecie
candidozic sistemic.
3. Transplantai de organe solide
- Incidena infeciiilor fungice invazive
posttransplant este foarte variabil, 5-42%
(cele mai mari rate pentru transplantul
hepatic i pulmonar),
- Candidemiile sau aspergiloza invaziv apar
precoce dup transplant,
- Profilaxia clasic cu fluconazol nu pare s
reduc mortalitatea cu excepia
transplantailor hepatic unde fluonazolul,
itraconazolul sau amphotericina B
lipozomal reduc semnificativ infeciile
fungice sistemice (OR- 0,28, CL= 0,13-
0,58),
32
Creterea ncidenei infeciilor fungice
oportuniste reflect abiliti diagnostice mai
bune, schimbri n strategia profilactic i
terapeutic n entiti clinice marcate de
imunosupresie, dar i creterea notabil a tuturor
acestor categorii de pacieni. Astfel, elementele
care justific schimbrile evideniate sunt:
- La transplantaii renal sau cardiac
eficacitatea fluconazolului nu pare
evident,
- Profilaxia antifungic se recomand
categoriilor de transplantai cu risc:
disfuncie renal sau hepatic, transfuzii
repetate, spitalizare prelungit n servicii
de TI, intervenii chirurgicale
posttransplant, colonizare fungic
evideniat pretransplant, antibioterapie cu
antibiotice cu spectru larg,
Creterea numrului de gazde
susceptibile,
O mai bun identificare a fungilor prin
alert crescut, noi metode diagnostice,
- Datele recente susin:
O mai bun raportare a cazurilor pe baza
definiiilor de consens i a reelelor de
supreveghere sentinel din serviciile de
mare risc
utilizarea de amphotericin B
form lipidic inhalant sau
itraconazol pentru transplantul
pulmonar,
Noi modaliti de transplant a celulelor
stem hematopoietice (ex. transplantul
autolog periferic de CD
34
se asociaz cu
infecii fungice i cu CMV mai frecvente
dect alte tipuri de transplant),
fluconazol pentru transplantaii
hepatic, de intestin subire i
pancreas,
Itraconazol pentru transplantaii
pulmonar sub tratament cu
micofenolat mofetil i
tacrolimus.
Chirurgia de transplant de organe solide
(reducerea numrului de uniti de snge
i tehnici chirurgicale de evitare a
manoperelor cu risc crescut de infecie),
4. Transplantai hematologic
Utilizarea de regimuri terapeutice de
imunosupresie mai puin agresive,
- Reprezint categoria cu riscul cel mai nalt
de infecii fungice invazive, candidemii i
aspergiloza invaziv,
Utilizarea de noi ageni de
imunosupresie,
- Clasic, profilaxia cu fluconazol reduce
incidena infeciilor fungice de la 18 la 7%,
Introducerea regimurilor profilactice
antibacteriene, antivirale i antifungice.
- Administrarea se face n perioada celor
100 de zile de dup transplant, nu numai n
perioada neutropenic,
Conc l uzi i
Infeciile fungice invazive au o importan
excepional la pacieni critici i cu
imunosupresie prelungit. Noile metode
diagnostice precum i introducerea unui sistem
de scoruri asupra riscului de infecie fungic
asigur aplicarea unui tratament precoce,
condiie esenial pentru succesul terapiei.
Apariia noilor clase de antifungice cu profiluri
de siguran mai bune dect amphotericina B
cresc rata succeselor clinice. Introducerea
profilaxiei antifungice trebuie justificat de
aprecierea riscului cu scopul evitrii apariiei
rezistenei la antifungice i a toxicitii.
- Rezultate mai bune se pot obine cu
itraconazol (dar mai multe reacii adverse),
- Micafungin (echinocandin) este aprobat
pentru profilaxie antifungic (trial de faz
3 cu micafungin 50 mg/zi versus
fluconazol 400 mg/zi) dovedindu-se mult
mai eficace dect fluconazolul i cu efect
favorabil i fa de Aspergillus.
Posaconazol, un nou antifungic triazolic
(200mg de 3 ori/zi s-a dovedit i el mai
eficace dect fluconazolul reducnd
semnificativ mortaliataea de toate cauzle la
100 i 180 de zile posttransplant.


33
Bi bl i ogr af i e


1. Abbas J, Bodey GP, Hend A et al Candida
krusei fungemia. An escalating serious
infection in immunocompromised patients.
Arch Intern Med 2000; 160: 2659-64.
2. Ahmed J, Ditmars DM, Sheppard T et al.
Recurrence of Scedosporium apiospermum
infection following re-transplantation. Am J
Transplant. 2004; 4: 1720-4.
3. Angus DC, Linde-Zwirble WT, Lidicker J, et
al: Epidemiology of severe sepsis in the
United States: Analysis of incidence,
outcome, and associated costs of care. Crit
Care Med 2001; 29:13031310.
4. Arnaldo L. Colombo, Marcio Nucci,
Benjamin J. Park, et al. and for the Brazilian
Network Candidemia Study. Epidemiology
of Candidemia in Brazil: a Nationwide
Sentinel Surveillance of Candidemia in
Eleven Medical Centers J Clin Microbiol.
2006; 44(8): 28162823.
5. Ascioglu S, Rex JH, de Pauw B et al.
Defining Opportunistic invasive fungal
infections in immuncompromised patients
with cacer and hematopoietic stem cell
transplants: an international consensus. CID
2002; 34: 7-14.
6. Belazi M, Velegraki A, Koussidou T et al.
Oral Candida isolates in patients undergoing
radiotherapy for head and neck cancer:
prevalence, azole susceptibility profiles and
response to antifungal treatment. Oral
Microbiol Immunol 2004; 19: 347-51.
7. Bennett JE. Introduction to mycoses. In:
Mandell GL, Douglas JE, Dolin R eds.
Mandell, Douglas, and Bennetts Principles
and Practice of Infectious Diseases 6
th
ed.
Philadelphia: Churchill Livingstone; 2005:
2935-2938.
8. Bigley VH, Duarte RF, Gosling RD et al.
Fusarium dimerum infection in a stem cell
transplant recipient treated succesfully with
voriconazole. Bone Marrow Transpant:
2004: 34: 395-9.
9. Brandt ME, Warnock DW. Epidemiology,
clinical manifestations and therapy of
infections caused by dematiaceous fungi. J
Chemother. 2003; 15 suppl 2: 36-47.



10. Edwards JE. Candida species. In: Mandell
GL, Douglas JE, Dolin R eds. Mandell,
Douglas, and Bennetts Principles and
Practice of Infectious Diseases 6
th
ed.
Philadelphia: Churchill Livingstone; 2005:
2938-2957.
11. Enoch DA, Ludlam HA, Brown MN.
Invasive fungal infections: a review of
epidemiology and management options. J
Med Microbiol 2006; 55: 809-818.
12. Garber G. An overview of fungal infections.
Drugs 2001; 61: suppl 1: 1-12.
13. Gauzit R, Cohen Y, Dupont H et al.
Infections by Candida sp. in intensive care.
Survey of French Practices. Press Med 2003;
32: 440-9.
14. Groll AH, Shah PM, Mentzel C, et al. Trends
in postmortem epidemiology of invasive
fungal infections at a university hospital. J
Infect 1996; 33: 23-32.
15. Gudlaugsson O, Gillespie S, lee K, et al.
Attributable mortality of nosocomial
candidemia, revisited. CID 2003; 37: 1172-
78.
16. Hamza NS, Ghannoum MA, Lazarus HM.
Choices aplenty: antifungal prophylaxis in
hematopoietic stem cell transplant recipients.
Bone Marrow Transplant. 2004; 34: 377-89.
17. Imhof A, Balajee SA, Fredericks DN,
Englund JA, Marr KA. Breakthrough fungal
infections in stem cell transplant recipient
receiving voriconazole CID 2004; 39: 743-6.
18. Jantunen E, Nihtinen A, Anttila VJ.
Changing landscape of invasive aspergillosis
in allogenic stem cell transplant recipients.
Transpl Infect Dis 11 feb. (ahead of print).
19. Kontoyiannis DP, Torres HA, Chagua M, et
al. Trichosporonosis in a tertiary care cancer
center: risk factors, changing spectrum and
determinants of outcome. Scan J Infect Dis.
2004; 36: 564-9.
20. Marr KA, carter RA, Crippa F, Wald A,
Corey L. Epidemiology and outcome of
mould infections in hematopoietic stem cell
transplant recipients. CID 2002; 34: 909-17.
21. Martin GS, Mannino DM, Eaton S, Moss M.
The epidemiology of sepsis in the United
States from 1979 through 2000. N Engl J
Med. 2003; 348: 1546-54.
34
22. Morgan J, Wannemuehler KA, Marr KA, et
al. Incidence of invasive aspegillosis
following hematopietic stem cell and solid
organ transplantations: interim results of a
prospective multicenter surveillance
program. Med Mycol 2005; 43 (suppl.1):
S49-S58.
28. Tortorano AM, Peman J, Bernhardt H et al.
Epidemiologz of Candidaemia: Results of
28-month European Confederation of
Medical Mycology (ECMM) Hospital-Based
Surveillance Study. Eur j Clin Microbiol
Infect Dis 2004; 23: 317-322.
29. Ullman A. Review of the safety, tolerability
and drug interactions of the new antifungal
agents caspofungin and voriconazole. Curr
Med Res Opin. 2003; 19: 263-71.
23. Patterson F. T. Aspergillus species. In:
Mandell GL, Douglas JE, Dolin R eds.
Mandell, Douglas, and Bennetts Principles
and Practice of Infectious Diseases 6
th
ed.
Philadelphia: Churchill Livingstone; 2005:
2958-2973.
30. Vigouroux S, Morin O, Moreau P et al.
Zygomycosis after prolonged use of
voriconazole in immunocompromised
patients with hematologic disease: attention
required. CID 2005; 40: e35-e37.
24. Rocco TR, Reinert SE, Simms H. Effect of
fluconazole administration in critically ill
patients. Arch Surg 2000; 135: 160-5.
31. Vincent, Jean-Louis MD, PhD, FCCM; Sakr,
Yasser MB, BCh, MSc; Sprung, Charles L.
MD; on behalf of the Sepsis Occurrence in
Acutely Ill Patients Investigators Sepsis in
European intensive care units: Results of the
SOAP study. Critical Care Med. 2006, 34(2):
344-353.
25. Schwesinger G, Junghans D, Schroder G et
al. Candidosis and aspergillosis as autopsy
findings from 1994to 2003. Mycoses 2005;
48: 176-180.
26. Singh N. Trends in the epidemiology of
opportunistic fungal infections: predisposing
factors and the impact of antimicrobial use
practices. CID 2001; 33: 1692-96.
32. Warnock D. Trends in the epidemiology of
invasive fungal nfections. Jpn J Med Mycol.
2007; 48: 1-12.
27. Sugar A. Agents of Mucormycosis and
related species. In: Mandell GL, Douglas JE,
Dolin R eds. Mandell, Douglas, and
Bennetts Principles and Practice of
Infectious Diseases 6
th
ed. Philadelphia:
Churchill Livingstone; 2005: 2973-2984.
33. Wisplinghoff H, Bischoff T, Tallent S et al.
Nosocomial bloodstream infections in US
hospitals: analysis of 24,179 cases from a
prospective nationwide surveillance study.
CID 2004; 39: 309-17.

Autori:

Dr. Amanda Radulescu, PhD
Confereniar universitar, Catedra de Epidemiologie
Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu
13 Emil Isac, 40023 Cluj-Napoca
Tel: + 40 264 597256
Fax: : + 40 264 597257
e-mail: aradulescu@umfcluj.ro

Dr. Monica Junie, PhD
Profesor universitar, Catedra de Microbiologie
Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu
13 Emil Isac, 40023 Cluj-Napoca
Tel: + 40 264 597256
Fax: + 40 264 597257

Dr. Doina ulescu, PhD
Profesor universitar, Catedra de Boli Infecioase
Universitatea de Medicin i Farmacie Iuliu Haieganu
13 Emil Isac, 40023 Cluj-Napoca
Tel: + 40 264 597256
Fax: + 40 264 597257

35
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 36-47
36

Principii de baz n aplicarea topic a
medicamentelor n medicina veterinar

J. COSOROAB
1
, R.T. CRISTINA
1
, Lidia CHIIMIA
2

1
Facultatea de Medicin Veterinar, Timioara, E-mail: cosoroaba@yahoo.com, rtcristina@yahoo.com
2
College of Veterinary Medicine, Guanghzu, China


REZUMAT. Sinteza alctuit cuprinde descrierea stucturii pielii la diverse animale de
interes veterinar comparativ cu pielea omului. S-au folosit informaii bibliografice din lucrri
capitale, teze i reviste de specialitate pentru a se evita extrapolrile tale quale ntre specii,
care pot duce la confuzii. Se subliniaz importana stratului cornos al epidermei i a nveliului
pilos, mult deosebite de histoarhitectura pielii omului. n partea a doua a sintezei sunt trecute n
revist avantajele i dezavantajele aplicrilor topice n medicina veterinar i mecanismele
pasajului transcutanat al medicamentelor.
Cuvinte cheie: piele, structur, pasaj transcutat, topice.


n medicina veterinar, aplicaiile topice ale
agenilor medicamentoi sunt o alternativ
comod la rutele tradiionale de administrare ale
medicamentelor. Avantajele aplicrii topice sunt:
- reducerea fazelor metabolizrii n ficat;
- invazivitatea redus;
- evitarea rutei gastrice, care va reduce
potenialul de degradare a medicamentului i
iritaia gastric, i
- creterea ncrederii proprietarilor n
privina medicamentaiei
(29)
.
Aceste avantaje stau la baza creterii numrului
produselor medicamentoase nregistrate i
comercializate pentru practica veterinar curent,
dei din informaiile disponibile n domeniul
ptrunderii percutanate a medicamentelor i a
vehiculelor n care sunt nglobate, informaiile
legate de specificitate sunt nc srace, mai ales
dac se au n vedere particularitile morfo
funcionale ale pielii diferitelor specii de animale
la care veterinarul intervine.
Fiecare preparat medicamentos destinat aplicrii
topice ar trebui s fie realizat n funcie de
particularitile speciei creia i se adreseaz.
Preparatele nensoite de prescripii de utilizare,
care se vnd la solicitarea proprietarului, ar
trebui s fie ct mai reduse, iar cele mprumutate
din dermatologia uman ar trebui s aib
informaii privind penetrarea drogului (sau a
vehiculului) prin pielea animalului la care se
ntrebuineaz.
Din motivele expuse, credem c este necesar o
prezentare succint a structurii tegumentului la
cteva mamifere de interes economic, care fac
obiectul practicii veterinare.
I. Structura de baz a nveliului cutanat
Pielea, denumit i sistem tegumentar, este un
ansamblu morfofuncional heterogen conexat,
compus din mai multe suborgane. tiinele
biomedicale au ntotdeauna nevoie de modele
animale pentru obinerea informaiilor necesare
n dermatologia uman, cu toate c, pe lng
structurile de baz exist diferene remarcabile.
Pielea tuturor animalelor permite organismului
s triasc ntr-un mediu specific, de care l
separ i, n aceelai timp, l leag pstrndu-i
homeostazia. Deci, pielea separ i unete
incomplet, dar eficient, ansamblul organic
(spaiul ontologic) de factorii ecologic (spaiul
ecologic)
(11)
.
Pielea este organul cel mai ntins (10% din masa
corporal) i mai versatil al corpului. Gama
produselor i modificrilor cutanate la reptile,
psri i mamifere este foarte mare, dar, totui,
limitat n funcie de optimizarea relaiei individ
- mediu. Adaptrile animalelor la diverse medii
de via se pstreaz ntre anumite limite,
sistemul tegumentar fiind solicitat printre
primele. Structurile care alctuiesc pielea, de la
exterior spre interior, sunt: epidermul, dermul i
hipodermul.
Epidermul. Viaa unui animal se desfoar n
interiorul unui nveli epidermic, cea mai
important parte a pielii
(37)
. Ca prim barier
ntre individ i mediu, epidermul a suferit
schimbri adaptative mai intense dect orice alt
parte a pielii, mai ales la animalele cu un nveli
pilos mai srac; chiar la acelai individ grosimea
epidermului variaz de la o regiune corporal la
alta.
Investigaiile asupra pielii umane au relevat ca
principala rezisten la ptrunderea
medicamentelor este dat de stratul cornos al
epidermului.
Epidermul este un epiteliu stratificat squamos,
aflat ntr-o continu renoire. Prin activitatea
mitotic din stratul bazal sunt generate noi celule
iar, la suprafa, celule moarte, solzoase sunt
exfoliate. La cele mai multe specii, epidermul
este alctuit din straturile: bazal, spinos,
granulos i cornos. Stratul lucidum, descris la
om, nu este regsit la animale dect n Planum
nasale de la bovine i n perniele digitale de la
cine
(58)
.
Celulele epidermului pot fi clasificate ca fiind
cheratinocite i necheratinocite, acestea din urm
cuprinznd melanocite, celule Langerhans
(celule dendritice: prezentatoare de antigene) i
celule Merkel (gsite n stratul bazal i avnd
funcia de receptori senzitivi)
(33)
.
Stratul bazal sau germinativ este alctuit la cal,
cine, pisic i iepure din celule columnare
aezate pe o membran bazal. Fiecare celul se
divide n dou una rmnnd n continuare n
stratul bazal, iar cealalt diferenindu-se prin
mpregnare cu cheratohialin, se ndreapt spre
suprafaa epidermului, constituind, pe rnd,
straturile suprajacente, ultimul, cel cornos,
exfoliindu-se n permanen. n mod normal,
exist un echilibru ntre producerea de noi celule
n stratul bazal i moartea celulelor i exfolierea
lor la suprafaa epidermului. Exist o
heterogenitate morfofuncional printre
cheratinocitele bazale, unele servind, n primul
rnd, la ancorarea epidermului la derm (prin
semidesmozoni) i altele servind ca proliferante
i reparatoare (celulele stem). ntre ele,
cheratinocitele sunt legate prin desmozomi
(3)
.
Stratul spinos poate avea pn la 20 de rnduri
celulare, n zonele glabre (Planum nasale) i
pn la trei rnduri (axile, regiunile inghinale).
Indiferent de numrul straturilor, forma celulelor
spinoase evolueaz spre apalatizare, cu ct se
apropie de stratul granulos.
Stratul granulos este constituit din celule de
form rombic, pline cu granule de
cheratohialin. La cal, celulele sunt fuziforme.
La pisic, n perniele metacarpale se pot observa
4-8 rnduri de celule granulare.
Stratul cornos este cel mai cheratinizat i este n
continu exfoliere. El const din celule turtite,
anucleate, eozinofilice (corneocite) i mai gros n
zonele corporale glabre, dect n cele acoperite
cu pr
(51)
.
n timpul descuamrii, n care cheratinocitele
migreaz spre stratul cornos, fosfolipidele sunt
nlocuite cu sfigmolipide care constituie
majoritatea lanurilor lungi de acizi grai saturai.
Acetia creeaz o barier lipofilic care previne
pierderea excesiv de ap n mediul nconjurtor
i protejeaz mpotriva ptrunderii transdermice
a substanelor medicamentoase sau
nemedicamentoase
(59)
.
Factorii care influeneaz celulele bazale s se
divid i/sau s evolueze spre cornificare nu sunt
bine precizai: lumina, radiaiile, apa, tensiunea
oxigenului, unii hormoni. Dup ce o celul
bazal s-a divizat, celulele fiice intr n interfaz.
Celulele care evolueaz spre cheratinizare
complet devin din ce n ce mai puin active i,
n final, mor (autodistrugere ireversibil). Viteza
diviziunii i diferenierii epidermice trebuie s fie
egal cu cea a descuamrii. Turnover-ul total are
loc n dou-trei sptmni, cu variaii n funcie
de specie i de regiunea corporal
(33)
.
Cheratinocitele sunt nconjurate de lipide
aranjate bistratificat, compuse din colesterol
(27%), ceramide (41%) i din acizi grai liberi
(9%). Aceste sfingolipide se prezint ca structuri
multinucleare dispuse ntr-un aranjament de tip
crmizi i mortar. n timpul diferenierii i
migrrii celulelor epidermice spre stratul cornos,
fosfolipidele sunt nlocuite cu sfingolipide,
constituite, n mare parte, sub form de lungi
37
lanuri de acizi grai saturai. Aceste lipide
creeaz o barier puternic lipofilic care se
opune pierderii de ap n mediu i protejeaz
mpotriva ptrunderii transdermice a unor
substane chimice, ajunse voit sau ntmpltor,
pe piele
(59)
.
Dermul. Este o structur conjunctiv situat
imediat sub epiderm. Considerat ca un organ,
dermul conine un numr variabil de derivate
epidermice. Vasele, nervii, pigmentocitele i
adipocitele constituie suportul anatomic al
numeroaselor funcii. Dermul este o structur
proprie vertebratelor. Alctuirea sa este n
legtur att cu modul de via, ct i cu poziia
filogenetic a animalului
(11)
.
La mamifere, structura bilaminar este obinuit.
Stratul superficial, papilar la om, conine vase
limfatice, nervi, vase sanguine, glande, grsime;
stratul profund, reticular, cuprinde benzi dese de
fibre colagene, pe lng alte componente
(57)
.
Grosimea i calitatea stratului papilar i gradul
de vascularizare depind de grosimea i
complexitatea feei inferioare a epidermului, care
este, la rndul ei, legat de structura nveliului
pilos. La mamifere cu ct hirsutismul este mai
bine reprezentat, cu att epidermul este mai
subire i aproape plat, din cauza slabei
dezvoltri a stratului papilar al dermului. Situaia
este invers la speciile cu pr rar sau n zonele
corporale glabre
(11)
.
Stratul reticular al dermului este compus din
fibre de colagen sintetizat de fibroblaste. Este
asemntor la toate animalele, fibrele fiind
orientate aleator sau dup anumite reguli, mai
puin cunoscute
(37)
.
Grania dintre straturile dermice - papilar i
reticular nu este bine definit la animale. De
altfel, stratul papilar este vizibil doar n regiunile
corporale glabre.
Printre celulele stratului superficial al dermului
se observ: fibroblaste mastocite, macrofage,
melanocite. Fibroblastele produc esutul
conjunctiv. Ele au origine mezodermic, au fine
prelungiri dendritice sunt normal izolate ntre
ele, dar pot forma complexe joncionale
remarcabile.
Fibroblastele secret tropocolagenul, elastina,
mucopalizaharide acide i glicoproteine. La
animalele adulte, funcia secretorie a acestor
fibroblaste este mai redus, dar, n cazul
producerii unor leziuni fibrocitele se divid rapid
i crete coninutul n ADN, pentru a putea face
fa regenerrilor. Mastocitele dermice conin
granule de histamin, heparin i serotonin.
Numrul i distribuia lor variaz n funcie de
specie i de regiunea corporal
(4, 10)
.
La porc, mastocitele sunt mprtiate n tot
dermul, mai dense n stratul superficial i n jurul
vaselor sanguine.
La oaie, sunt grupate n jurul foliculilor piloi, al
glandelor sudoripare, al glandelor sebacee i al
piloarectorului.
La cal, iepure i cine, cromatoforele sunt
grupate mai ales n stratul superficial, imediat
sub epiderm, constituind rezerva din care
pornesc celulele pigmentare spre epiderm. La
animale, fibrele elastice sunt mai puine n
comparaie cu pielea omului. n pielea hirsut
fibrele elastice sunt mai rare
(11)
.
Hipodermul este stratul cel mai profund al pielii
i este alctuit din esut conjunctiv lax (fibre de
colagen, elastice, celule conjunctive i matricea
extracelular). n profunzimea hipodermului,
celulele conjunctive se ncarc cu grsimi i
devin adipocite
(36)
. Hipodermul este conectat la
muchii subjaceni prin fibre elastice i de
colagen n hipoderm se gsesc vase sanguine,
limfatice i nervi.
nveliul pilos este o caracteristic principal a
pielii mamiferelor, cu unele foarte rare excepii
(pangolin, tatu, balen, delfin, hipopotam).
Perii sunt derivai din epiderm la fel ca penele i
solzii. Ei sunt invaginaii tubulare epidermice, la
baza crora se gsete papila dermic. n linii
mari, structura foliculilor piloi la diversele
specii de mamifere domestice i slbatice se
aseamn, dar modul lor de grupare este extrem
de variat. Exist foliculi simpli care produc un
singur fir de pr i foliculi ramificai care dau
natere la mnunchiuri de fire.
Perii senzitivi cuprind vibrizele i perii tilotrichi.
Perii comuni sunt fie de acoperire (ln, blan),
fie de aprare (epi, coam).
38
Perii comuni i cei tilotrichi au o evoluie ciclic,
trecnd prin fazele: anagen, catagen i
telogen. Ciclurile piloase sunt n strns
legtur cu sezoanele anuale, influenele
endogene fiind slab precizate. Se pare c unii
hormoni pot influena, dar nu pot controla
mitozele cutanate, factorul de control fiind
localizat n esutul propriu, alonii
(5)
, difuzai
intratisular, manifestnd o activitate de inhibare a
mitozelor.
La majoritatea animalelor, nprlirea se petrece
sub form de valuri sezoniere, pe cnd la om i la
cobai ciclurile piloase sunt independente ntre
firele ce alctuiesc blana, nprlirea avnd loc
dup un model mozaic, continuu. Interaciunile
hormonale creeaz un sensibil echilibru n cadrul
unor moduri de cretere uor diferite prin
rspunsul la constrngerile selective de
supravieuire i perpetuare, cu schimbri ale
pilozitii
(11)
.
nveliul pilos al animalelor are un rol important
n protecia epidermului i n termoreglare.
Exemplul cel mai interesant este ursul polar, a
crui blan i permite s suporte, fr activarea
termogenezei, diferena de temperatur corp -
mediu ambiant de pn la 100
o
C.
Pentru practica veterinar, blana animalelor
poate fi considerat ca o barier n aplicarea
topic la multe specii, deoarece reduce contactul
medicament - piele.
Densitatea foliculilor piloi este foarte diferit.
Cinii au o densitate de 100-600 grupuri
foliculare pe un cm
2
, dar exist evidente
diferene n funcie de ras.
Oaia Merinos are pn la 10.000 de foliculi/cm
2
(50)
, bovinele, 890 foliculi/cm
2
. Aceste densiti
depesc cu mult pe cea de la om 40-70
foliculi/cm
2 (41)
. Cabalinele i bovinele au foliculi
cu un singur fir de pr
(54)
pisica, un folicul
primar nconjurat de 2-5 foliculi secundari cu
mai multe fire secundare fiecare
(52)
.
Glandele sebacee nsoesc fiecare fir de pr, cu
excepia unor peri secundari. Mrimea i
densitatea lor cresc n ordinea: iepure, cal, cine.
Exist i diferene n funcie de regiunea
corporal, cele mai dense gsindu-se n
conductul auditiv extern, n regiunea perianal i
n cea inghinal.
Glandele sebacee conin monoaminoxidaz i
colinestraz specific i nespecific, cu mari
variaii n funcie de specie
(22)
. Prin secreiile
sebacee epidermul este pstrat integru, funcia sa
de barier fiind conservat.
Glandele sudoripare sunt, dup modul de secreie
ecrine i apocrine. Spre deosebire de om, la
animale, majoritatea glandelor sudoripare sunt de
tip apocrin (epitrichiale).
Dintre animalele domestice, calul prezint cele
mai dezvoltate i mai active glande sudoripare,
rspndite pe toat suprafaa corpului
(11)
.
La pisic, glandele sudoripare apocrine, de form
sacular, se deschid n partea superioar a
canalului pilos. Ele nu produc sudoare sau, dac
o produc, aceasta este n cantitate foarte mic.
La cine, se observ dou tipuri principale de
glande sudoripare apocrine, ncolcite i simple.
La iepure, glandele sudoripare sunt mai reduse ca
numr sau chiar pot lipsi n unele regiuni.
La porc, glandele sudoripare apocrine sunt
prezente, dar au canalul excretor nfundat cu un
dop de cheratin.
La bovine, glandele sudoripare sunt mai mari la
masculi i cnd animalul este peste doi ani.
Densitatea glandelor sudoripare variaz cu specia
i rasa. La porc, exist 20-30 glande pe un cm
2
,
la oaie, cmil, capr sunt 200, la bivol, 400, la
zebu, 2000
(21)
.
Vascularizaia pielii are rol important n
termoreglare i hemodinamic.
Dispoziia vaselor sanguine cutanate variaz
destul de mult cu specia, rasa, sexul, regiunea i
gradul de acoperire cu pr. Se pot distinge trei
plexuri vasculare interconectate: superficial,
mijlociu i profund, vasele din reeaua profund
au pereii formai din cele trei straturi cunoscute
(adventicia, media i intima).
Pe msur ce se divizeaz, vasele rezultate au
pereii din ce n ce mai subiri. Glandele cutanate
sunt vascularizate destul de neuniform probabil
n funcie de activitate i de modul de secreie.
39
La cine i pisic vascularizaia glandelor
cutanate este destul de srac. Prezena unturilor
arterio-venoase asigur evitarea blocajelor i
previne pierderile de cldur n mediul rece.
Vasele limfatice asigur drenajul lichidului
tisular din derm.
II. Ptrunderea medicamentelor prin piele
nveliul cutanat al animalelor este o barier
fiziologic selectiv. Substanele aplicate pe
piele i vehiculele n care sunt nglobate trebuie
s aib anumite caracteristici, care s le permit
strbaterea straturilor tegumentare prezentate
pn acum.
Prin studii experimentale s-a stabilit c soluiile
difuzeaz prin straturile epidermice, ncepnd cu
cel cornos, printre celule, ntr-un mod sinuos,
calea fiind foarte ntortocheat
(6)
.
Modelul crmid i mortar, amintit anterior,
accept c medicamentele urmeaz calea
lipidelor dintre cheratinocite
(32)
. Viteza cu care
ptrund substanele prin piele, cunoscut ca
difuzibilitate, este influenat de punile dintre
cheratinocit, vscozitatea mediului intracelular
i sinuozitatea cilor
(42)
.
Transportul transcelular este mai puin important,
deoarece necesit ca substana s fie lipofilic i
hidrofilic i, n plus, s poat strbate matricea
intracelular a cheratinocitelor. S-a artat c
toate soluiile sunt transportate pe o cale lipidic
cu rezisten la trecerea soluiilor lipofilice din
derm, dar nu din cheratinocite
(44)
.
Permeabilitatea prin stratul cornos este aproape
constant pentru soluiile hidrofile, pe cnd
permeabilitatea pentru soluiile lipofile se
schimb dup gradul de lipofilie
(42)
.
Soluiile medicamentoase pot ajunge n derm i
pe calea anexelor epidermice (glande sudoripare
i foliculi piloi), evitnd bariera format de
stratul cornos. Diferenele dintre diferitele specii
de animale i om sunt remarcabile. Fluxul
transfolicular nu este considerat ca foarte
important, cel puin la om
(49)
. n schimb, la
animalele hirsute fluxul medicamentos spre derm
crete odat cu densitatea foliculilor piloi
(9, 33)
.
Ptrunderea prin epiderm este nsoit sau urmat
de unele metabolizri ale substanei active
iniiale. Intervin o serie de enzime metabolice,
cum sunt hidroxilaze, deetilaze, hidrolaze,
esteraze, peptidaze
(28)
. Activitatea acestor
enzime este mult difereniat dup specie i
individ. Activitatea metabolic a pielii poate fi
considerat util n cazul pro-farmaconilor care
pot fi preparai pentru maximizarea penetraiei
transdermice, cu formarea de molecule active n
circulaie.
Factorii care influeneaz fluxul
medicamentelor prin nveliul cutanat
Exist numeroi factori structurali i fiziologici
care influeneaz procesul traversrii nveliului
cutanat de ctre diverse substane aplicate pe
piele voit sau care au ajuns ntmpltor. Pe lng
acestea, este obligatoriu s avem n vedere
diferenele dintre diferite specii, rase i indivizi.
Factorii moleculari
Cu ct un farmacon are o greutate molecular
mai mic, ( 500 Da), cu att va penetra mai uor
straturile cutanate. Dac va dispune i de atomi
disponibili pentru cuplarea cu hidrogenul i dac
va avea o liposolubilitate 2,6 i un punct de
topire sczut atunci efectul ateptat va mai mare.
n afara acestor parametri, performanele de
penetrare scad sensibil, dei pentru
medicamentele puternice sau cele care intesc
foliculul pilos eliberarea medicamentelor este
realizabil.
Componena formulrilor topice
Se cunoate din farmaceutic necesitatea
nglobrii substanei active ntr-un vehicul sau
expient potrivit scopului terapeutic.
Se consider c doi factori ar fi responsabili de
cantitatea de substan activ mobilizat din
excipient. Primul este legat de solubilitatea
relativ i absolut a medicamentului n cele
dou faze, vehicul i piele. Al doilea factor este
difuzibilitatea.
Teoretic, atta timp ct nici medicamentul i nici
vehiculul nu vor afecta pielea, valoarea fluxului
maxim prin ea poate fi cuantificat pentru o
formulare care va conine orice gam de
excipieni saturai cu acel medicament.
40
Cu excepia soluiilor suprasaturate, valoarea
fluxului maxim transcutanat va putea fi crescut
doar prin schimbarea caracteristicilor pielii prin:
- creterea difuzibilitii prin stratul
cornos;
- modificarea coeficientului de partaj ntre
lipidele cutanate sau ntre ali constitueni ai
pielii;
- creterea solubilitii n lipidele
intercelulare.
Se cunoate c multe vehicule excipient nu
interacioneaz doar cu medicamentul aplicat, ci
acesta va interaciona i cu pielea, o penetrare
deficitar a medicamentului sau a vehiculului
fiind dependente de aceste interaciuni
(33)
.
Efectele datorate vehiculului legate de
modificarea coeficientului de partaj n sau asupra
difuzibilitii barierei cutanate, au putut fi
studiate prin folosirea membranelor inerte de tip
siliconic
(12)
sau prin pretratarea pielii cu
excipieni vehicul care au determinat creterea
gradului de penetrabilitate
(48)
.
Integritatea pielii
ntotdeauna este necesar s facem deosebirea
ntre absorbia prin pielea normal i cea prin
pielea lezionat.
Extragerea lipidelor intercelulare, cu ajutorul
diferiilor solveni, determin o reducere
semnificativ a funciei de barier a stratului
cornos
(38)
. In mod similar, degresarea pielii cu
ajutorul acetonei a crescut n mod semnificativ
penetraia in vivo a salicilailor msurat prin
microdializ
(2, 15)
.
Modificarea coninutului lipidelor i a fluiditii
poate fi considerat ca una din strategiile de
cretere a permeabilitii transdermale. De regul
n pielea bolnav se modific compoziia
lipoidelor i deci pasajul este modificat.
Corticoizii topici, sunt des folosii n bolile de
piele n care epidermul este modificat. De aceea
ptrunderea lor n straturile subjacente i n
circulaie vor determina reacii adverse pentru
acestea.
Stratul cornos poate fi afectat datorit aplicaiilor
cutanate care preced folosirea topicelor.
Folosirea preparatelor alcoolice modific
penetrarea epidermic. De exemplu, folosirea
alcoolului este cunoscut prin iritaia pe care o
determin prin degresarea membranei i
ntreruperea stratului cornos
(20, 40, 53)
. Studiile
recente au demonstrat c metodele uzuale de
curire a pielii sau de acoperire a unui loc al
pielii, incluznd aici brbierirea, aplicarea de
benzi de tip emplastru, aplicarea de clorhexidrina
alcoolic, toate pot crete penetraia transdermal
a metilsalicilatului
(33)
.
Circulaia sangvin a pielii
Prin circulaia sanguin, bine reprezentat n
structurile cutanate, substanele active difuzeaz
spre zone mai mult sau mai puin ndeprtate de
locul aplicrii
(7, 56)
.
Gradul de vascularizare nu este uniform pe
corpul animalului i de aceea trebuie s se in
cont de locul aplicrii.
Studiile asupra circuitului sangvin cutanat,
folosind tehnicile de laser Doppler au relevat
diferene marcante ntre diverse specii de
animale i, de asemenea, asupra aceluiai animal,
constatndu-se o circulaie mai mare sangvin
asupra vascularizaiei pielii abdominale
(30, 39)
.
De exemplu, un studiu a semnalat diferene
regionale semnificative n distribuia n esuturi
mai ndeprtate a piroxicamului aplicat topic,
situaie atribuit variaiilor specifice zonei n
circuitul cutanat al sngelui
(39)
.
In mod similar, modificrile n absorbia topic a
parathionului la porc a putut fi corelat cu
circuitul sangvin cutanat, n timp ce ocluzia
locului a negat diferene datorate circuitului
sangvin.
Concentraiile farmaconilor din circulaia
sistemic pot s predispun la toxicitate i reacii
adverse legate de doze. Este de notat c orice
interaciune a medicamentelor posibil de a fi
ntlnit datorit coadministrrii anumitor
medicamente, va putea determina apariia pentru
unul sau ambii ageni administrai topic si
sistemic.
Concentraia medicamentelor aplicate topic i a
metaboliilor din circulaia sistemic au fost
utilizate pentru un model matematic care s
prevad cinetica local a medicamentelor dup
locul aplicaiei. In mod similar, apariia i
41
prezena substanei analizate n snge i/sau urin
a fost considerat evidena subiectiv a
eficacitii.
n acest context se cunoate cu siguran faptul
c concentraiile medicamentului active n
sngele sistemic nu a reflectat, de exemplu,
distribuia local tisular a metilsalicilatului
aplicat pe piele deasupra articulaiei
coxofemurale de la cine
(34)
.
Locul aplicrii pe corp
Locul aplicrii poate fi determinat de necesitatea
aciunii in situ sau sistemic. Pentru atingerea
unuia sau altuia dintre aceste scopuri, sunt
necesare cunotine privind structura (grosimea
pielii, densitatea n foliculi piloi) i
vascularizarea nveliului cutanat, la care se
altur cunoaterea proprietilor preparatului
medicamentos. n plus la animale este necesar ca
locul de aqplicare s nu fie abordabil prin lingere
sau scrpinare
(39)
.
In acest sens trebuiesc subliniate diferenele ntre
pielea uman i cea a animalelor de interes
veterinar. La acestea din urm s-au realizat studii
pe diferite specii. Puine lucruri se cunosc n
legtur cu diferenele regionale n penetrarea
transdermal a medicamentelor la animale. Qiao
i colaboratorii
(43)
au observat diferene
semnificative n rata absorbiei parationului
aplicat pe diferite locuri la porc.
Intr-un alt studiu, s-au demonstrat diferene ale
penetrrii transdermale n funcie de locul
penetrrii a alcoolilor, hidrocortizonului i
testosteronului
(35)
prin pielea cinelui.
Intr-un alt studiu, s-a demonstrat c fentanilul
aplicat n regiunea coapsei la cine a penetrat
mult mai rapid i cu un timp de retenie mult mai
scurt n comparaie cu pielea gtului (unde
emplastrele de fentanil sunt aplicate n mod
normal) i a toraxului
(35)
.
Densitatea stratului pilos
Studiile iniiale legate de contribuia foliculilor
piloi, transpiraiei i glandelor sebacee la
penetrarea medicamentelor prin pielea oamenilor
a sugerat faptul c datorit procentului relativ
mic (0,1%) din suprafaa total a pielii, anexele
piloase sunt puin importante i contribuie
nesemnificativ la penetrarea transdermal a
medicamentelor. Studiile recente au demontat
aceast teorie, demonstrnd c anexele cutanate
pot ntradevr s acioneze ca o cale prescurtat
ctre straturile pielii pentru cteva substane
medicamentoase.
Hueber i colaboratorii
(19)
au artat c (anexele
pielii de natur epidermic) modific substanial
absorbia farmaconilor
(18)
.
In mod esenial, sebumul poate s ajute la
transportul transfolicular al agenilor lipofilici,
cum ar fi de exemplu hidrocortizonul i
testosteronul, prin creterea solubilitii acestora
n foliculul pilos.
Rol important l are activitatea sebumului n
dizolvarea moleculelor lipofile, aa cum este de
exemplu fipronilul (Frontline). Acumularea
acestuia n foliculii piloi prelungete activitatea,
n ciuda splrilor repetate.
Un alt mecanism propus pentru optimizarea
eliberrii medicamentelor transfolicular a fost
folosirea lipozomilor direcionai ctre sebum i
n jurul deschiderilor foliculare. In mod similar,
moleculele de medicament cu o greutate
molecular mare, pot s fie legate la molecule de
dextran pentru a inti diferitele niveluri ale
foliculilor dependent de mrimea moleculelor de
dextran care au fost alese ca suport
(55)
.
Unele vehicule de natur alcoolic s-au
demonstrat a fi amplificatori ai eliberrii
medicamentelor transfolicular, fapt care a fost
legat de natura solventului etanolic care
acioneaz asupra sebumului din folicul
(1)
.
Principalii determinani, totui, ai transportului
transfolicular par s fie: mrimea i ncrctura
electric a moleculelor de farmacon, foarte
asemntor ca i pentru stratul cornos
(27, 47)
.
Pn n prezent, nu se cunosc dect foarte puine
date privind transportul farmaconilor prin
foliculii piloi n funcie de faza ciclului folicular
(anagen, catagen, telogen) i de natura foliculilor
(pr de acoperire, peri tilotrichi, vibrize).
Hidratarea pielii
Pielea hidratat este de zece ori mai uor
penetrabil dect pielea uscat. Cheratocitele
gonfleaz i absorb apa n matrixul cheratinos
intracelular, determinnd ntreruperea straturilor
42
cornoase. mpiedicarea deshidratrii pielii este
un procedeu de amplificare a ratei de ptrundere.
Hidratarea contribuie la mecanismul prin care
sistemele de eliberare transdermal ating
concentraii sistemice acceptabile.
In medicina veterinar nu se cunosc foarte multe
emplastre pentru animale. De aceea, unele
emplstre din medicina uman au fost adoptate i
n medicina veterinar.
Eficacitatea i sigurana satisfctoare de la om,
nu pot fi asumate i la animale fr efectuarea
unor studii asupra acestora.
Dintre acestea, fentanilul este cel mai des folosit
emplastru la animale, la specia canin
(14, 24, 25)
,
pisic
(26)
i cal
(31)
. Totusi, eliberarea fentanilului
a fost de doar 72% din doza de 50g/h emplastru

(25)
, studiile artnd c analgezia la cine
consecutiv operaiei de ovariohisterectomie a
fost comparabil cu analgezia determinat de
oximorfon, dar cu o faz de sedaie mai redus

(24)
.
In mod similar, analgezia nregistrat a fost
superioar administrrii morfinei n cadrul
operaiilor majore ortopedice la cine
(46)
. Studiile
efectuate ulterior au demonstrat c exist
diferene de absorbie regional a fentanilului n
cadrul administrrilor in vitro cu perioad de
remanen scurt i cu o rat a penetrrii nalt,
care a fost observat atunci cnd emplastrele au
fost aplicate pe pielea din regiunea coapselor, n
comparaie cu regiunile toraxului i gtului de la
cine
(16)
.
Metode de amplificare a penetraiei
transcutanate
Amplificatorii penetraiei chimice
Similar cu hidratarea, amplificatorii de penetraie
sunt posibil de a interaciona cu unele
componente ale pielii pentru creterea fluiditii
n lipidele intercelulare, prin gonflarea
cheratocitelor i/sau prin extragerea
componentelor structurale, reducerea funciei de
barier a stratului cornos
(17)
.
S-a sugerat c amplificatorii de penetraie pot
crete de pn la 100 de ori permeabilitatea pielii
la macromolecule (ntre 1-10 kDa), incluznd
heparina, hormonul luteotrop (LHRH) i
oligonucleotidele fr a induce iritaia pielii
(23)
.
Amplificatorii timpurii ai penetrrii au tendina
de a fi ageni disruptivi cheratolitici care distrug
stratul cornos cu activitate non-specific in
activitatea lor de amplificare.
Acest grup include dimetilsulfoxidul (DMSO) i
dimetilsulformamida, care accelereaz penetraia
a numeroase medicamente, incluznd antibiotice,
steroizi i anestezice locale, dar care au multe
neajunsuri practice, cum ar fi toxicitatea
crescut, iritaii i mirosul neplcut.
De atunci s-au formulat amplificatori noi ai
penetrrii, cu mult mai puine dezavantaje din
care amintim propilenglicolul, alcoolii i
surfactanii.
Mijloacele fizice pentru amplificarea
penetraiei transdermale
Se cunosc cteva tehnici n care curentul electric
sau cmpul energetic poate s favorizeze
penetrarea transcutanat a medicamentelor.
Valoarea acestor tehnici este legat de
amplificarea penetrrii transdermice a
moleculelor mari, polare, care n mod normal nu
sunt potrivite pentru aplicaii topice i prin
reducerea perioadei de remanen a produselor
aplicate topic, cum ar fi, de exemplu,
anestezicele locale.
Ultrasunetele
Ultrasunetele favorizeaz penetrarea
transdermic a medicamentelor datorit faptului
c undele de joas frecven afecteaz stratul
cornos n virtutea fenomenului de cavitaie.
Studiile iniiale au utilizat unde cu frecven
folosite n fizioterapie, constatndu-se c cele
care au determinat creterea gradului de
penetrare pn la 1000 de ori au fost cele care
foloseau ultrasunete de joas frecven (20kHz).
De asemenea s-au mai nregistrat unele rezultate
favorabile prin folosirea ultrasunetelor pentru
amplificarea penetrrii insulinei, eritropoetinei i
interferonilor la pielea de om i la cea de iepure

(33)
.
Iontoforeza
Iontoforeza folosete microcureni electrici
(0,5mA/cm
2
) aplicat ntre doi electrozi, n
contact cu pielea pentru a conduce molecule
ncrcate electric (de altfel moleculele neutre pot
fi amplificate prin electroosmoz) prin bariera
43
pielii
(13)
. Eficiena iontoforezei depinde de:
polaritatea, valena, mobilitatea moleculelor de
medicament, ciclul electric i formularea
medicamentului.
Un dezavantaj al iontoforezei este acela c
foliculul pilos are cea mai mic rezisten i
curentul electric poate s afecteze ireversibil
creterea prului.
Electroporaia
Electroporaia este reprezentat de aplicarea unor
pulsuri electrice foarte scurte (ms) (100-
1000V/cm) asupra pielii. Acest procedeu creeaz
micropori apoi prin stratul cornos, care vor
permite medicamentului s penetreze mai bine.
Electroporatia a fost folosit pentru transportul
vaccinurilor, lipozomilor i microsferelor
(33)
.
Sisteme de eliberare particulo-mediate
In ultima vreme n medicina uman i cea
veterinar exist un interes crescnd n legtur
cu uzul tehnicilor de imunizare fr ac datorit
consideraiilor practice i rolului epidermei ca
organ imunitar
(8)
.
Eliberarea epidermic mediat a particulelor
(Particle mediated epidermal delivery = PMED)
folosete particule din aur ncrcate cu ADN sau
protein care sunt accelerate n interiorul
epidermei cu ajutorul unui dispozitiv similar
celui care este folosit pentru disponibilizarea
ADN-ului sau a vaccinurilor proteice
(8)
. Aceste
particule fac contactul cu reeaua dens a
antigenelor epidermice. Cheratocitele locale vor
fi transferate, la rndul lor i vor secreta antigeni
care vor fi captai de ctre celulele APCs
rezidente. PMED a fost deja utilizat cu succes
n medicina veterinar n protecia porcilor
mpotriva virusului influenei A, pentru a
determina imunitate ndelungat la bovine
mpotriva herpes virusului i pentru a transfera
ADN citokine la cine n cadrul imunoterapiei
cancerului
(33)
.
Conc l uzi i
Uurinta administrrii formulrilor topice
ncurajeaz acordarea dozajului prescris la om i
la speciile de animale. Totusi exist diferene
semnificative n penetrarea transcutanat ntre
specii, ceea ce nseamn c produsele topice vor
trebui s fie formulate pentru fiecare specie int,
studiile de eficacitate i toxicitate neputnd s fie
adoptate de la alte specii.
In particular, tipul i n general densitatea mai
mare a foliculilor piloi de la speciile de animale,
pot contribui la diferene specifice de penetrare
transdermic ntre om i animale, de la o specie
la alta i de la o regiune topografic cutanat la
alta.
Important este interesul crescnd pentru
metodele fizice sau chimice de amplificare a
penetraiei transdermice a medicamentelor care
probabil vor crete gama medicamentelor
disponibile pentru aplicri topice i/sau n
creterea eficacitii medicamentelor care sunt
folosite n mod curent ca i formulri topice.
Este important ca veterinarii s recunoasc
limitele aplicrii formulrilor medicamentoase pe
piele ntelegnd avantajele poteniale al acestui
domeniu n plin dezvoltare care este cel al
sistemelor de eliberare a medicamentelor.
SUMMARY
Basic principles in topic applications of
drugs in veterinary medicine
Synthesis presents the description of
coetaneous organ in differed animal species
of veterinary interest. A large documentation
basis was used from capital scientific works,
theses to up to date scientific papers to
avoid tale quale extrapolations between
animal species that can lead to confusions.
The importance of stratum corneum (SC)
and of the skin, which is very different, from
human skin histoarhitecture is underlined
also. In the second part of synthesis is
rewieved booth the advantages and
dissadvanges of topic applications in
veterinary medicine and the transferral
passage of the drugs.
Key words: skin, structure, transdermal
passage, topics


44
Bi bl i ogr af i e


1. Bamba, F.L., Wepierre, J., 1993. Role of the
appendageal pathway in the percutaneous
absorption of pyridostigmine bromide in various
vehicles. European Journal of Drug Metabolism
and Pharmacokinetics 18, 339-348.
2. Benfeldt, E., Serup, J., Menne, T., 1999. Effect
of barrier perturbation on cutaneous salicylic acid
penetration in human skin: in vivo
pharmacokinetics using microdialysis and non-
invasive quantification of barrier function. British
Journal of Dermatology 140, 739-748.
3. Borradori, L., Sonnenberg, A., 1999. Structure
and function of hemidesmosomes: more than
simple adhesion complexes. Journal of
Investigative Dermatology 112, 411-418.
4. Braun R.P., Babiuk, L.A., Loehr, B.I., van
Drunen Littel-van den, H., 1999. Patricle-
mediated DNA immunization of cattle confers
long lasting immunity against bovine
herpesvirus-l. Virology 265, 46-56.
5. Bulough, W.S., 1962 The control of mitotic
activity in adult mammalian tissues. Biol. Rev.,
37: 307-342.
6. Bunge, A.L., Guy, R.H., Hadgraf, J., 1999. The
determination of a diffusional pathlength through
the stratum corneum. International Journal of
Pharmacy 188. 121-124.
7. Caron, D., Queille-Roussel,C., Shah, V.P.,
Schaefer, H., 1990. Correlation between the drug
penetration and the blanching effect of topically
applied hydrocortisone creams in human beings.
Journal of the American Academy of
Dermatology 23, 458-462.
8. Chen, D., Maa, Y.F., Haynes, J.R., 2002.
Needle-free epidermal powder immunization.
Expert Review of Vaccines 1, 265-276.
9. Clarys, P., Alewaeters, K., Jadoul, A., Barel,
A., Manadas, R.O., Preat, V., 1998. In vitro
percutaneous penetration through hairless rat
skin: influence of temperature, vehicule and
penetration enhancers. European Journal of
Dermatology 100, 635-640.
10. Combs J.W., 1966. Maturation of rat mast cells.
An elextron microscope study. Journal of Cell
Biology 31, 563-575.
11. Cosoroab, I., 1977 Vascularizaia i inervaia
musculaturii pilo- i plumoarectoare. Tez
doctorat. IAT.Timioara.
12. Cross, S.E., Pugh, W.J., Hadgraft, J., Roberts,
M.S., 2001. Probing the effect of vehicules on
topical delivery: understanding the basic
relationship between solvent and solute
penetration using silicone membranes.
Pharmaceutical Research 18, 999-1005.
13. Cross, S.E., Roberts, M.S., 1995. Importance of
dermal blood supply and epidermis on the
trandermal iontophoretic delivery of monovalent
cations. Journal of Pharmaceutical Sciences 84,
584-592.
14. Egger, C.M., Duke, T., Archer, J., Cribb, P.H.,
1998. Comparison of plasma fentanyl
concentrations by using theree transdermal
fentanyl patch sizes in dogs. Veterinary Sugery
27, 159-166.
15. Franz, T.J., 1975. Percutaneous absorption on
the relevance of in vitro data. Journal of
Investigative Dermatology 64, 190-195.
16. Grond, S., Radbruch, L., Lehmann, K. A.,
2000. Clinical pharmacokinetics of transdermal
opioids: focus on transdermal fentanyl. Clinical
Pharmacokinetics 38, 59-89.
17. Hirvonen, J., Rajala, R., Vihervaara, P.,
Laine, E., Paronen, P., Urtti, A., 1994.
Mechanism and reversibility of penetration
enhancers in the skin a DSC study. European
Journal of Pharmacy and Biopharmaceutics 40,
81-85.
18. Hueber, F., Schaefer, H., Wepierre, J., 1994.
Role of transepidermal and transfollicular routes
in percutaneous absorption of steroids:in vito
studies on human skin. Skin Pharmacology 7,
237-244.
19. Hueber, F., Wepierre, J., Schaefer, H., 1992.
Role of transepidermal and transfollicular routes
in percutaneous absorption of hydrocortisone and
testosterone: in vivo study in the hairless rat. Skin
Pharmacology 5, 99-107.
20. Inamori, T., Ghanem, A.H., Higuchi, W.I.,
Srinivasan, V., 1994 Macromolecule transport in
and effective pore size of ethanol pretreated
human epidermal membrane. International
Journal of Pharmaceutics 105, 113-123.
21. Jenkinson,D.Mc.E., 1972. The skin structure of
Britsh Deer. Res.vet.Sci., 13: 70-73.
22. Jenkinson,D.Mc.E., Blackburn, P.S., 1986. The
distribution of nerves, monoamineoxidase and
cholinesterase in the skin of the cat and dog. Res.
Vet. Sci., 9: 521-528.
23. Karande, P., A., Mitragotri, S., 2004.
Discovery of transdermal penetration enhancers
by high-throughput screening. Nature
Biotechnology 22, 192-197.
45
24. Kyles, A.E., Hardie, E.M., Hansen, B.D.,
Papich, M.G., 1998 Comparasion of transdermal
fentanyl and intramuscular oxymorphone on post-
operative behaviour after ovariohysterctomy in
dogs. Research in Veterinary Science 65, 245-
251.
25. Kyles, A.E., Papich, M., Haridie, E.M., 1996.
Disposition of trandermally administered fentanyl
in dogs. American Journal of Veterinary
Research 57, 715-719.
26. Lee, D.D., Papich M.G., Hardie, E.M., 2000.
Comparasion of pharmacokinetics of fentanyl
after intravenous and transdermal administration
in cats. American Journal of Veterinary Research
61, 672-677.
27. Lieb, L.M., Liimatta, A.P., Bryan, R.N.,
Brown, B.D., Krueger, G.G., 1997. Description
of the intrafollicular delivery of large molecular
weight molecules to follicles of human scalp skin
in vitro. Journal of Pharmaceutical Sciences 86,
1022-1029.
28. Liu, P., Higuchi, W.I., Ghanem, A.H., Good,
W.R., 1994. Transport of beta-estradiol in freshly
excised human skin in vitro: diffusion and
metabolism in each skin layer. Pharmaceutical
Research 11, 1777-1784.
29. Magnusson, B.M., Walters, K.A., Roberst,
M.S., 2001. veterinary drug delivery: potenial
for skin penetration enhancement. Advanced
Drug Delivery Reviews 50, 205-227.
30. Manning T.O., Monteiro-Riviere, N.A.,
Bristol, D.G., Riviere, J.E., 1991. Cutaneous
laser-Doppler velocimetry in nine animal species.
American Journal of Veterinary Research, 52,
1960-1964.
31. Maxwell, L.K., Thomasy, S.M., Slovis, N.,
Kollias-Baker, C., 2003. Pharmacokinetics of
fentanyl following intravenous and transdermal
administration in horses. Equine Veterinary
Journal, 35, 484-490.
32. Menon, G.K., Elias, P.M., 1997. Morphologic
basis for a porepathway in mammalian stratum
coreneum. Skin Pharmacology ,10, 235-246.
33. Mills, P.C., Cross, S.E., 2006 . Transdermal
drug delivery: Basic principles for the
veterinarian. Veterinary Journal. 172: 218-233
34. Mills, P.C., Magnusson, B.M., Cross, S.E.,
2005
a
. Penetration of a topically applied non-
steroidal anti-inflammatory drug into local tissues
and synovial fluid of dogs. American Journal of
Veterinary Research 66, 1128-1132.
35. Mills, P.C., Magnusson, B.M., Cross, S.E.,
2004
b
Investigation of in vitro transdermal
absorption of fentanyl from patches placed on
akin samples obtained from various anatomic
regions of dogs. American Journal of Veterinary
Research 65, 1697-1700.
36. Mircean, V., Cozma, V., 2007. Ghid practic de
dermatologie canin. Ed. Risoprint, Cluj-Napoca.
37. Montagna, W., 1971. Cutaneous comparative
biology. Arch. Dermatology 104: 577-591
38. Monteiro-Riviere, N.A., Bristol, D.G.,
Manning, T.O., Rogers, R.A., Riviere, J.E.,
1990. Interspecies and interregional analysis of
the comparative histologic thickness and laser
Doppler blood flow measurements at five
cutaneous sites in nine species. Journal of
Investigative Dermatology 95, 582-586.
39. Monteiro-Riviere, N.A., Inman, A.O., Riviere,
J.E., McNeill, S.C., Francoeur, M.L., 1993.
Topical penetration of piroxicam is dependent on
the distribution of the local cutaneous
vasculature. Pharmaceutical Research 10, 1326-
1331.
40. Peck, K.D., Ghanem, A.H., Higuchi, W.I.,
1994. Hindered diffusion of polar molecules
through and effective pore radii estimates of
intact and ethanol treated human epidermal
membrane. Pharmaceutical Research 11, 1306-
1314.
41. Pitman, I.H., Rostas, S.J., 1981. Topical drug
delivery to cattle and sheep. Journal of
Pharmaceutical Sciences 70, 1181-1194.
42. Potts, R.O., Guy, R.H., 1992. Predicting skin
permeability. Pharmaceutical Research 9, 663-
669.
43. Qiao, G.L., Chang, S.K., Riviere, J.E., 1993.
Effects of anatomical site and occlusion on the
percutaneous absorption and residue pattern of
2,6 (ring-14C) parathion in vivo in pigs.
Toxicology and Applied Pharmacology 122, 131-
138.
44. Roberts, M.S., Anderson, R.A., Swarbrick, J.,
Moore, D.E., 1978. The percutaneous absorption
of phenolic compounds: the mechanism of
diffusion across the stratum corneum. Journal of
Pharmacy and Pharmacology 30, 486-490.
45. Roberts, M.S. Cross, S.E., Pellet, M.A., 2002.
Skin transport. In: Walters, K.A. (Ed.),
Dermatological and Transdermal Formulations.
Marcel Dekker, New York. p. 89-196.
46. Robinson, T.M., Kruse-Elliott, K.T., Markel,
M.D., Pluhar, G.E., Massa, K., Bjorling, D.E.,
1999. A comparison of transdermal fentanyl
versus epidural morphine for analgesia in dogs
undergoing major orthopedic surgery. Journal of
the American Animal Hospital Association 35,
95-100.
46
47. Rolland, A., Wagner, N., Chatelus, A., Shroot,
B., Schaefer, H., 1993 Site-specific drug delivery
to pilosebaceous structures using polymeric
microspheres. Pharmaceutical Research. 10,
1738-1744.
48. Rosado,C., Cross,S.E., Pugh, W.J., Roberts,
M.S., Hadgraf, J., 2003. Effect of vehicule
pretreatment on the flux, retention, and diffusion
of topicaly applied penetrants in vivo.
Pharmaceutical Research 20, 1502-1507.
49. Rougier, A., Lotte, C., Maibach, H.I., 1987. In
vivo percutaneous penetration of some organic
compounds related to anatomic site in humans:
predicative aaessment by the stripping method.
Journal of Pharmaceutical Sciences 76, 451-454.
50. Ryder, M.L., 1957. A surnal of the follicle
populations in range of British breeds of shep.
Journal of Agricultural Science 49, 275-279.
51. Scott D.W., Miller W.H. Griffin C.E., 1995.
Muller and Kirks small Animal Dermatology 5
th

Edition. W.B. Saunders Company Philadelphia.
52. Strickland J.H. Calhoun, M.L., 1963. The
intregumumentary system of the cat. American
Journal of Veterinary Research 24, 1018-1029.
53. Surber, C., Wihelm, K.P., Maibach, H.I., 1991.
In-vitro skin pharmacokinetics of acitretin:
percutaneous absorption studies in intact and
modified skin from three diffrent species using
different receptor solutions. Journal of Pharmacy
and Pharmacology 43, 836-840.
54. Talukdar, A.H., Calhoun. M.L., Stinson, A.W.,
1972 Microscopic antaomy of the skin of the
horse. American Journal of Veterinary Research
33, 2365-2390.
55. Tur, E., Maibach, H.I. Guy, R. H., 1991.
Percutaneous penetration of mehyl nicotinate et
three anatomic sites: evidence for an appendageal
contribution to transport. Skin Pharmacology 4,
230-234.
56. Wallace, S.M., Falkenberg, H.M., Runkis, J.O.
Stewart, W.D., 1979. Skin levels ans and
vasoconstrictor assay of topically applied
hydrocortisone: Archives of Dermatology 115,
440-441.
57. Waterman, A.J., 1970. Chordate structure and
function. Macmillan Co., New York.
58. Web, A.J., Calhoun, M.L., 1954. The
microscopic anatomy of Mongrel Dogs. Am. J.
vet. Res. 15: 234-259.
59. Yardley, H.J., Summerly, R. 1981. Lipid
composion and metabolism in normal and
diseased epidermis. Pharmacological
Therapeutics. 13, 357-383.




47
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 48-60
48

Echinococoza alveolar.
O posibil zoonoz emergent n Romnia
(Sintez)


S. SIK BARABSI, V. COZMA

1
Asociaia ECHINO-NEWS ROMANIA, 520036 Sf.Gheorghe, Strada Ciucului nr. 149, Romnia, E-mail:
sikobsandor@yahoo.com
2
Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar Cluj-Napoca, Facultatea de Medicin Veterinar,
Parazitologie i Boli Parazitare, Strada Mntur, nr. 3-5, 400372 Cluj-Napoca, Romnia, E-mail:
cozmavasile@yahoo.com


Introducere
Echinococoza alveolar prin caracterul su
pseudotumoral cu tendin de metastazare este
una dintre zoonozele parazitare cu letalitatea cea
mai mare n rndul populaiilor umane din
emisfera nordic, iar prin expansiunea sa din
ultimii 10 ani tinde s devin o boal emergent
n numeroase regiuni din Europa i Eurasia.
Agentul cauzal al echinococozei alveolare este
stadiul larvar (metacestodul) al teniei
Echinococcus multilocularis.
Sursa de infecie i ciclul biologic n Europa
central este preponderent de natur silvatic
incluznd n principal vulpea rocat european
(Vulpes vulpes) i o serie de specii de roztoare
ca gazde intermediare.
Creterea populaiilor de vulpi i extinderea ariei
lor de via ctre teritoriile urbane constituie un
factor de risc mrit pentru om.
Echinococoza alveolar se caracterizeaz prin
apariia unei formaiuni pseudotumorale cu
caracter extensiv primordial n ficatul gazdelor
intermediare, inclusiv al omului. Formaiunea
tumoral are un caracter pronunat malign, poate
induce metastaze, diagnosticul este greoi,
tratamentul aproape exclusiv chirurgical prin
extirpare (CANDA i col., 2003).
Dei cazurile umane de echinococoz alveolar
sunt relativ rare (media n Europa fiind de 0,02-
1,4 cazuri pe 100.000 locuitori) ele reprezint o
importan deosebit din punct de vedere al
sntii publice ntruct procentul de letalitate
poate ajunge la 94-100% la pacienii
diagnosticai trziu, netratai sau tratai
necorespunztor. Perioada de incubaie a bolii
este foarte lung (10-15 ani), costurile de
spitalizare considerabile (17.800
USD/pacient/an), iar tratamentul foarte dificil de
realizat, ce poate costa 300.000 USD per pacient
(ECKERT, 1997; DEPLAZES i ECKERT,
2001).
Rata sczut de supravieuire, caracterul
expansiv al ariei de rspndire, creterea
numrului de cazuri umane de la an la an i
persistena parazitului n natur sunt suficiente
argumente pentru ca echinococoza alveolar s
fie considerat ca una dintre bolile parazitare
de prim urgen n Europa (DEPLAZES i
ECKERT, 2001; ECKERT i DEPLAZES, 1999;
ECKERT i col., 2000; SRTER i col., 2003-a.
i 2003-b).
Scurt istoric
Primul caz de echinococoz alveolar a fost
descris la om nc n 1852 n sudul Germaniei, ca
fiind o tumor hepatic. Apoi, n 1855
VIRCHOW o descrie ca o leziune
multilocular i tumor echinococic
ulcerativ. n 1901 POSSELT este primul care
gsete n intestinul cinelui un cestod foarte
asemntor cu Echinococcus granulosus, i
totui diferit, pe care l descrie sub numele de
Taenia echinococcus alveolaris. Peste 50 de ani
a inut disputa despre concepia unichistic a lui
DV i ceea polichistic descris de cei
amintii, pn cnd n 1954 RAUSCH n Alaska
i n 1957 VOGEL n Germania demonstreaz
independent unul de cellalt i fr echivoc
existena a dou specii diferite de echinococ:
E.granulosus i E.multilocularis (ECKERT i
DEPLAZES, 1998, 1999).
Astfel denumirea final a teniei a devenit:
Echinococcus multilocularis (denumirea anglo-
saxon - RAUSCH, 1962), sau Alveococcus
multilocularis (denumire dat de ABULADZE
n 1960, cunoscut mai mult n literatura de
specialitate srb i ruseasc).
Aspecte morfologice i fiziologice
Echinococcus multilocularis este un cestod de
dimensiuni foarte mici, lungimea total a
corpului fiind cuprins ntre 1,2 i 4,5 mm i are
n medie cinci segmente (2-6), principalele fiind:
scolexul, gtul i strobila (Fig. 1) (ECKERT i
DEPLAZES, 2004).



Figura 1
Echinococcus multilocularis
(dup ECKERT i DEPLAZES, 2004)


Stadiul larvar al teniei Echinococcus
multilocularis este o formaiune cu aspect
tumoral, o manifestare polichistic, policefalic,
care la exterior se aseamn cu conopida, iar pe
seciune cu miezul de ca sau de pine.
Prin proliferarea membranei germinale,
component vie a stadiului larvar, ia natere o
formaiune multilocular alctuit din foarte
muli chiti de dimensiune mic. Aceste
microvezicule au de obicei diametrul cuprins
ntre 1-10 mm, rar ajung la 20-30 mm (OIE
2005). Formaiunea are caracter invaziv.
Echinococcus multilocularis necesit pe
parcursul ciclului su de dezvoltare prezena
gazdelor definitive i a celor intermediare (Fig. 2).
n cursul ciclului su biologic, Echinococcus
multilocularis ajunge la maturitate sexual dup
25-40 zile i elimin prin ultimul segment, cel
gravid, sute de ou. Acetia conin embrionii
hexacani.
Proglotele gravide ale cestodului ajung n mediul
nconjurtor odat cu fecalele gazdelor definitive.
Avnd micri proprii ele pot iei i n mod activ,
fornd sfincterul anal. Unele se opresc n cutele
perianale provocnd un prurit destul de intens care
face ca animalul s se scarpine, frecnd regiunea
perianal de pmnt etc.
Proglotele conin un numr mare de ou foarte
rezistente la condiiile de mediu. Oule eliberate
ca atare sau cele din proglote ajung pe iarb,
zarzavaturi, fructe de pdure, ape stttoare sau
curgtoare, de unde pot fi ingerate de ctre gazde
intermediare de obicei roztoare slbatice din
genul Microtidae, mai rar de animale ierbivore,
omnivore sau accidental omul, n timpul
consumului de iarb, legume, fructe sau ap
infectat.
49
Pentru a ncheia ciclul biologic oul trebuie s
ajung n tractusul digestiv al unei gazde
intermediare. Din oncosferele ingerate, embrionii
trec prin circulaie n organele gazdei,
dezvoltarea formei larvare pentru E.granulosus
fcndu-se foarte lent. n opoziie cu aceasta,
dezvoltarea la E.multilocularis se face mult mai
repede, dar numai la roztoare (150-170 zile),
dezvoltare ce are loc, n primul rnd n ficat.





Figura 2
Ciclul biologic comparativ al speciilor: Echinococcus granulosus i Echinococcus multilocularis
(dup PARASITOLOGY INFORMATIK, 2007)


Ajungnd n stomacul i respectiv n duodenul
gazdei intermediare, se produce liza membranei
cheratinoase embrionul hexacant rmnnd de
obicei acoperit doar de embriofor. Sub aciunea
mediului umed i alcalin, a sucului biliar, i a
enzimelor din intestinul subire embrionul se
activeaz, rupe peretele embrioforului i se
elibereaz (THOMPSON i LYMBERY, 1995;
ECKERT i col., 2002). Cu ajutorul celor ase
crlige se fixeaz i apoi traverseaz peretele
intestinal de regul n 1-3 minute. Strbtnd
mucoasa intestinal, embrionul ptrunde n
lumenul unor venule din corionul mucoasei i de
aici, este angrenat n circuitul portal sau limfatic
fiind transportat n organele viscerale, n mod
particular n ficat.
La nivelul organelor la care se fixeaz, sufer o
degenerare chistic, transformndu-se ntr-o
vezicul numit chist alveolar, care reprezint
metacestodul, adic forma larvar a parazitului
(Fig. 3).
n gazdele intermediare adecvate ncepe
dezvoltarea rapid a metacestodului i n 40-45
de zile de la de la infestaie din membrana
proliger a chistului iau natere pe cale
asexuat - prin nmugurire vezicule denumite
capsule proligere, n interiorul crora, tot prin
nmugurire, apar protoscolecii, elementele
continurii ciclului biologic al parazitului
(ISHIKAWA i col., 2003; PARASITOLOGY
INFORMATIK, 2007) (Fig. 4).
Prin consumul organelor contaminate cu chiti
fertili, protoscolecii ajung i se fixeaz ntre
criptele Liberkhn din intestinul gazdelor
definitive. nainte de ingerare ns, regiunea
apical a protoscolexului (ventuze, crlige,
rostrul) este invaginat n zona bazal a
50
membranei protoscolexului tapetat cu
mucopolizaharide, avnd ca scop protejarea
protoscolexului pn la evaginare.
Faza de dezvoltare complet a viermelui adult,
perioada prepatent, dureaz n medie 28-35 zile,
iar pn la eliminarea embrioforilor sau a
proglotelor ovigere 30-49 zile, dar n funcie de
gazda intermediar poate dura i pn la 42-112
zile (THOMPSON i LYMBERY, 1995;
DEPLAZES i ECKERT, 2001).






Figura 3
Chist alveolar din ficat de oaie (original dup SIK B.S.)






Figura 4
Imagine microscopic capsule proligere cu protoscoleci - din ficat de oaie.
Col. HEA, OB x 40 (original dup SIK B.S.)


51

52
Nu se cunoate modalitatea n care adultul n
timpul dezvoltrii migreaz n intestinul gazdei
definitive, totui n momentul maturrii complete
E. granulosus se va localiza n partea superioar
a intestinului subire, n timp ce E.
multilocularis prefer segmentul distal. Aceste
aspecte in probabil de diferenele ntre
necesitile metabolice oferite de medii diferite
ale segmentelor intestinale (IACOBICIU, 2001;
KASSAI, 2003).
Formele adulte de Echinococcus multilocularis
triesc aproximativ 5 luni (DEPLAZES i
ECKERT, 2001).
Omul se infecteaz accidental, fiind o gazd
aberant sau accidental (ECKERT i col.,
2002). Prin transmiterea la om, parazitul i
ncheie ciclul biologic, omul, ca purttor al
stadiului larvar nefiind o surs de rspndire a
parazitului n natur. n cazul infeciei umane,
parazitul ajunge ntr-o situaie denumit de
QUILICI (1982) impas parazitar.
Epidemiologia echinococozei
alveolare
Sursa de infecie i ciclul biologic n Europa
central este preponderent de natur silvatic
incluznd n principal vulpea rocat european
(Vulpes vulpes) i o serie de specii de roztoare
ca gazde intermediare. Dup LABHARDT
(1990) vulpile infectate pot dispersa oule pe un
teritoriu de peste 18 hectare i la distane de
peste 15-16 km. De asemeni, de la un singur
excrement ce conine oncosfere, acetia n 10 zile
se pot dispersa la distane de 80 m de la
excrementul n cauz (ECKERT, 1998).
Dei cu o prevalen mult sczut fa de cele
constatate la vulpi, n multe ri au fost descrise
cazuri de infestaie la raton, cine i pisica
domestic, care i ele sunt consumatoare de
roztoare gazde intermediare.
Aceste dou specii din urm prezint o
importan epidemiologic cu att mai mare cu
ct ele trind n imediata apropiere a omului,
mresc riscul contaminrii acestuia.





Figura 5
Dezvoltarea i capacitatea infectant a lui Echinococcus multilocularis la diferite specii de gazde definitive
(dup ECKERT i DEPLAZES, 2004; KAPEL i col., 2006).







53
Vulpea prin stilul ei de via i de hrnire este un
pion important n inerea sub control a
populaiilor de roztoare. HELTAY (1989) arat
c n cursul unui an o vulpe are un necesar total
de 312 kg hran, ceea ce nseamn c zilnic
consum ntre 0,8-1,0 kg. Din acest necesar
aproape jumtate se asigur prin consumul de
roztoare mici.
Peste 40% din biomasa tractusului digestiv al
vulpilor examinate este compus din roztoare, iar
27-37% din timpul afectat procurrii hranei este
dedicat vnrii acestora.
Aceast biomas de roztoare mici se mparte
astfel: Microtus arvalis/argestis 26,3%,
Clethryonomis glareolus 7,9%, Arvicola
terrestris 2,8%, Apodemus spp. 2,7%,
Microtus oeconomus 1,3% (BALTRNAIT,
2004).
n ultimii ani au fost descrise forme de
echinococoz alveolar la gazde intermediare
mai puin specifice cum ar fi: bovinele (Bos
taurus), porcul domestic (Sus scrofa domesticus),
mistreul (Sus scrofa ferrus), marmota
(Marmotta marmotta), castorul european (Castor
fiber),maimua macac (Macaca
fascicularis),maimua rhesus (Rhesus mulattus
rhesus), pavianul cu guler (Comopithecus
hamadryas), nutrie (Ondatra zibethica) castorul
american (Myocastor coypus) cal (Equus
caballus) yac tibetan (Bos Pophagus grunniens)
iepure tibetan (Lepus oiostolus).
Fecalele vulpilor pline cu elemente infestante pot
fi dizolvate de ploi, embrionii hexacani din ele
ajung cu uurin pe sol, pe zarzavaturi, fructe,
iarb ori n apele izvoarelor i a prurilor.
Contaminarea are loc pe cale indirect prin
consumarea fructelor de pdure sau al ierbii
contaminate.
Rezisten embrionilor hexacani de
Echinococcus multilocularis este foarte mult
influenat de temperatur i umiditate
(GOTTSTEIN, 2007). Cele mai frecvente cazuri
de infestaie cu Echinococcus multilocularis
apare la vulpi n zonele situate la 400-900 m
altitudine, cu temperatura medie anual ntre +10
- +11C i cu precipitaii medii anuale de 600-
800 mm (SIK-1996).
Longevitatea i capacitatea infectant a
formaiunilor alveolare prin pstrarea
protoscolecilor vii n gazdele intermediare se
pstreaz de regul toat viaa lor.
Potenialitatea infectant al unui chist depinde de
fertilitatea acestuia. VUITTON i BRESSON-
HADNI (2007) arat c n medie 15% dintre
formaiunile larvare alveolare multiloculare sunt
fertile.
Distribuia geografic a teniei
Echinococcus multilocularis i a
cazurilor de echinococoz
alveolar
n Europa de pn 1980 au fost cunoscute doar
patru ri (Austria, Frana, Germania i Elveia)
n care forma adult de Echinococcus
multilocularis a fost descris.
n 1999 numrul acestor ri a ajuns la 10 (prin
completare cu Norvegia, Belgia, Luxemburg,
Lichtenstein, Polonia i Cehia) i este n continu
cretere ntr-un ritm alarmant (ECKERT i col.,
2000).
Prezena parazitului se raporteaz tot mai
frecvent din Europa de Est (Slovacia, Ungaria,
Romnia, Ukraina, Bulgaria), din Turcia, din
Asia (Rusia, Kazakhstan i China), din Amedica
de Nord (statul Dakota) i din Japonia.
n majoritatea rilor echinococoza alveolar a
cptat deja un caracter endemic i este n curs
de extindere continu cu o rapiditate alarmant
(ECKERT i DEPLAZES, 1999). Astfel, pn n
anul 2000 au fost diagnosticate numai n Europa
559 de cazuri de echinococoz alveolar la om.
Dac n 1982 extinderea se limita la Frana i o
mic parte din Europa Central, n 2003 ea se
extinde pe toat Europa Central i de Est
(EurEchinoReg, 2003) (Fig. 6).








Figura 6
Evoluia distribuiei echinococozei alveolare n Europa
(sursa: http://www.eurechinoreg.org/map01.html)


n Anglia primul caz de echinococoz alveolar
la om a fost semnalat de COOK (1991).
Examenul a 604 de vulpi n perioada octombrie
1999- noiembrie 2000 nu a confirmat prezena
teniei la gazda definitiv (REPORT E.U. and
NORVEY, 2001).
n Norvegia, WELZEL i col. (1995) examinnd
426 vulpi n perioada de iarn noiembrie 1991
martie descrie o prevalen a lui Echinococcus
multilocularis de 36,9%. Prezena
metacestodului n roztoare gazde intermediare a
fost descris n Insulele Spitzbergen i Svalbard
cu un procent de prevalen cuprins ntre 51-
96% (REPORT E.U. and NORVEY, 2001;
DEFRA, 2005).
Prevalena cestodului adult n vulpile din
districtul Limburg din Olanda a ajuns la 12,6%
(CRLP, 2007).
n Danemarca perioada 1997-2002 dup un
studiu epidemiologic pe un numr de 1.040 vulpi
SAEED i col. (2006) descriu o prevalen de
0,3%. DEFRA (2005) consider c echinococoza
alveolar este endemic la om.
n Lichtenstein 34,9% din efectivele de vulpi
examinate s-au dovedit a fi infestate (EWALD,
1993).
n Estonia i Finlanda prima raportare a
depistrii cestodului adult la vulpea roie a fost
n 2003, apoi n 2005 infestaia deja a ajuns la
29,4% (MOKS i col., 2005, FUGLEI i col.,
2008).
n Lituania (RAOUL i col., 2001 i HOFER i
col., 1999) descriu o prevalen de 57,3% la
vulpi cu o intensitate a infestaiei cuprins ntre 1
20.924 de viermi. BRUZINSKAITE i col.
(2007) menioneaz o infestaie asemntoare la
vulpi, de 9,7% la raton i o prevalen de 0,4% la
porcii sacrificai. n perioada 1997 iulie 2006
au fost diagnosticate prin teste serologice ELISA
i Western blot 80 cazuri de echinococoz
alveolar la om.
n perioada 1998-2002 LOSSON i col. (2003)
arat c efectivele de vulpi din zona de sud a
Belgiei sunt infectate pn la 20,2%. Primul caz
la om a fost diagnosticat n 2002, apoi au mai
fost diagnosticate nc trei cazuri n 2004.
54
Infestaia vulpilor n Luxemburg n perioada
1990-1992 dei a fost de 5,1%, DEFRA (2005)
consider c ea este endemic la om (ECKERT
i col., 2002).
n nord-estul i sud-estul Franei, n zonele
endemice, efectivele de vulpi sunt infestate pn
la 75% (ECKERT i DEPLAZES, 1999).
Prezena parazitului a fost descris la 3,7% din
pisicile domestice i la 16,66% din cinii
examinai din zona Auvergne (PETAVY i col.,
2000; DEFRA, 2005). n regiunea Franche-
Comte unde incidena anual a cazurilor umane
este de 1,4/oooo, gazdele definitive au fost
pozitive n proporie de 27,77% la vulpi, 7,63%
la cini i 8,33% la pisici (AUGOT i col.,
2004).
n Elveia, considerat a fi printre rile cu cel
mai mare grad de infestaie, n perioada 1996-
1998 s-a constatat c 47-67% din vulpile care se
regsesc n teritoriile urbane, parcuri, zone verzi,
sunt infectate cu E.multilocularis (DEPLAZES i
col., 1998). n cantonul Friburg de exemplu,
exist o zon hiperendemic, unde prevalena
parazitului ajunge pn la 47-56% la vulpi, 7-
12% la cini, 3% la pisici, 9-39% la oarecele de
ap (Arvicola terrestris), 10-23% la oarecele de
cmp (Microtus arvalis) (GOTTSTEIN i col.,
1996; 2001).
Forma metacestoid a fost descris la 10% din 90
de porci ngrai i tiai, i la 2,9% din 522
scroafe de reproducie (serologic) (DEPLAZES
i ECKERT, 2001).
Incidena medie a cazurilor noi de echinococoz
alveolar la om n 2001 ajunge la 1,4/oooo pe
an. ECKERT i col. (2002) arat c n total pe
teritoriul rii au fost nregistrate 104 cazuri.
La finele anului 2004 n regiunile vestice ale
Austriei prevalena echinococozei alveolare la
vulpi a ajuns la 35% (CRLP, 2007). Incidena
cazurilor de echinococoz alveolar la om este
de 0,024 /oooo, cu 2,4 - 14 cazuri noi anuale
(AUER i ASPCK, 1993; GOTTSTEIN, 2000;
CRLP-2007). n total au fost nregistrate un
numr de 33 cazuri umane (ECKERT i col.,
2002).
n Germania, pe teritoriul ntregii ri 67-75%
din efectivul de vulpi sunt purttori de
Echinococcus multilocularis, ceea ce nseamn 8
(20,5%) landuri hiperendemice i 10 (25%)
endemice (ROMMEL, 1992; ROMIG i col.,
1999 i 2004; ECKERT i col., 2002). De la
nregistrarea primului caz de echinococoz
alveolar la om, i pn n 2002 au fost
diagnosticate 102 cazuri (ECKERT i col.,
2002).
O prevalen ridicat, cuprins ntre 6,6% i
63,6% se menioneaz la vulpi i de 5,8-16,7% la
cini n Cehia. ntr-o zon endemic din
districtul Klatovy, MARTINEK i col. (2001-b.)
descriu o prevalen de 1,8-8,0% la cini i de
3,75% la pisici. n acelai zon ei subliniaz
prezena de E.multilocularis i la unele gazde
intermediare mai puin obinuite ca la jder
(Martes martes), hermin (Mustela erminea),
viezure (Meles meles) i pisic domestic. n
1979 se descrie primul caz de echinococoz
alveolar la un bolnav provenind din acelai
district Klatovy (MARTINEK i col., 2001).
n perioada 2000-2004 LETKOV i col. (2006)
examinnd 302 vulpi n regiunea din jurul
oraului Kosice din Republica Slovac constat
o prevalen care varia ntre 9,4% n 2000, i
12,4% n 2004.
n Polonia prezena teniei la vulpe a fost
semnalat pentru prima dat n 1998, prevalena
lui E.multilocularis n vulpile examinate n 2003
ajungndu-se la 29,4% (MALCZEWSKI i col.,
2004). Au fost semnalate 7 cazuri de
echinococoz alveolar uman (ECKERT i col.,
2002).
Dei n Ungaria primul caz de echinococoz
alveolar la om a fost descris nc n 1988 de
JAKAB i FALLER, dar parazitul responsabil nu
a fost identificat pe teritoriul rii pn n 2003,
cnd SRTER i col. (2003-a, b) public apariia
primelor cazuri de infestaie cu Echinococcus
multilocularis la vulpe.
n Italia s-a demonstrat existena prevalenei de
4,6-4,8% la vulpile din zona nordic a rii, n
special n regiunea Bolzano unde echinococoza
alveolar la om a fost semnalat nc din a doua
jumtate a secolului XIX (CASULLI i col.,
2005; MANFREDI i col., 2006).
Echinococoza alveolar a fost diagnosticat la om
i n Grecia (ECKERT i col., 2002).
n Turcia i Orientul Mijlociu ntre anii 1934-
1983 au fost semnalate 157 cazuri de
55
echinococoz alveolar uman, adic 3,1 cazuri
anual (BOZDAG i col., 2000). O singur
referire face ALTINTAS i col. (2004) la
prezena teniei la vulpile din Turcia. Prevalena
infestaiei n Iran a fost de 22,9% la vulpile
examinate i 16% la acali. ntre 1993-1997 au
fost diagnosticate 37 cazuri umane
(ZARIFFARD, 1997).
n Rusia prima semnalare se dateaz din 1971
(LUKASHENKO, 1971). Se menioneaz 9
specii de carnasiere ca gazde definitive, dintre
care cele mai importante sunt vulpea roie
(Vulpes vulpes), cu o infestaie de 26-76% i
vulpea polar (Alopex lagopus), cu o infestaie
de 15-24% n zonele Chukotka i Kamchatka.
Infestaia cinilor din sudul Siberiei i
Kazakhstan variaz ntre 14-39% (BESSONOV,
1998). Dei nu exist date concrete, incidena
medie multianual a cazurilor umane depete
10/oooo (MIKHAILCHENKO i col., 2000).
SHIMALOV (2001 i 2002) semnaleaz
prezena Echinococcus multilocularis la
carnasierele slbatice n Belorusia cu o
prevalen de 7,5% la vulpe.
n Kazakhstan SHAIKENOV i col. (2007)
semnaleaz o infestaie de 6-11% la cinii
ciobneti, 2,1-6,8% la cinii din curile
gospodreti, 25,3% la vulpe i 13% la vulpea de
step (Canis corsac). Metacestodul a fost
depistat la 2,1-2,7% din roztoarele (Microtus
gregalis i Microtus arvalis) examinate. n ce
privete frecvena chitilor alveolari la om, 0,39-
0,78% din interveniile chirurgicale pentru
echinococoz sunt de natur alveolar.
Primul caz de echinococoz alveolar la om a
fost descris n China n 1965. n regiunea
Xinjiang Uygur, n munii Altai i Tianshan la
populaiile seminomade, unde rata infeciei
variaz ntre 2,8-19,2% cu o morbiditate de 2,4-
5,0% (JIANG-1998; ZHOU i col., 2000).
Platoul Tibetan este una dintre cele mai mari
zone hiperendemice pentru echinococoza
alveolar. Ea poate ajunge n unele zone chiar
pn la 50% din populaiile umane (SCHANTZ,
2005). La gazdele definitive infecia este de
44,4% la vulpea tibetan (Vulpes ferrilata), 12,1-
25,0% la cinii comunitari i 12% la cinii de
pstor, iar la gazdele intermediare prevalena este
de 25% la oarecele tibetan de platou (Microtus
irene) i de 7,1% la iepurele tibetan (Lepus
oiostolus) (WANG i col., 2006).
Primul caz de echinococoz alveolar la om n
Japonia a fost raportat n 1965 de pe insula
Hokkaido. n oraul Otaru de pe insula Hokkaido
YIMAM i col. (2002) relateaz despre o
prevalen de 56,7% la vulpile examinate
(Vulpes vulpes schrencki) i de 23,1% la ratoni
(Nyctereutes procyonoides albus).
n Statele Unite HILDRETH i col. (2000)
descriu o infestaie de 74,5% la vulpi i de 44%
la coioi n nordul rii. DEFRA (2005) consider
c echinococoza alveolar este endemic n 13
state.
Prevalena cestodului la cinii i pisicile de
ferm din Alaska este de 12% i respectiv 1-5%
(DEFRA, 2005). n perioada 1947-1990
incidena cazurilor umane era foarte ridicat, ea
ajungnd de la 7/oooo la chiar 98/oooo n unele
zone din Dakota i Alaska (SCHANTZ i col.,
1995; VUITTON i col., 2007).
n Romnia primele cazuri de echinococoz
alveolar au fost descrise de SIK n 1991 la
bovine (0,01%) i la roztoarele slbatice
Microtus Chionomis nivalis ulpius Brehm (0,4%)
(21). Apoi, n 1992-1993 sunt descrise aspectele
morfologice detaliate ale EA, fiind semnalate i
la alte specii de microtidae ca Arvicola terrestris,
Microtus arvalis i Clethrionomys glareolus cu o
prevalen de 0,57% la animalele examinate
(SIK, 1992, 1993, SIK i col., 2002).
n 1996 sunt prezentate primele investigaii
privind ecologia parazitului n Romania (SIK,
1996).
n 1998 IONESCU descrie primul caz de
alveococoz hepatic la o oaie provenit din
judeul Ilfov.
PANAITESCU i POP (1999) prezint primul
caz de HA cu localizare hepartic la om. Cazul a
fost confirmat serologic n Institutul Cantacuzino
din Bucureti i reconfirmat serologic n Frana
i Elveia prin ELISA ca fiind intens pozitiv.
SAVLOVSCHI i col. (2000) descriu o
formaiune chistic multilocular cu ocazia unei
intervenii chirurgicale pe splina unei paciente de
49 ani.
56
n 2004 MOLDOVEANU i col. menioneaz
primul caz de echinococoz alveolar cu
localizare exclusiv hepatic la cabalin depistat
la Laboratorul Sanitar Veterinar din Teleorman.
Att cazurile umane, ct i cele animale au fost
de origine autohton. Se pune ntrebarea: dac
exist cazuri confirmate de echinococoza
alveolar unde este forma adult a cestodului?
Studiile recente efectuate n zone cu condiii
ecologice prielnice dezvoltrii parazitului
confirm existena lui Echinococcus
multilocularis n Romania (SIK, 1994, 1996,
SIK i col. 2002, 2007).

***

Epidemiologia echinococozei alveolare n Romnia constituie o tem de cercetare sub coordonarea
Asociaiei ECHINO-NEWS ROMANIA i n colaborare cu:
- WHO Informal Working Group on Echinococcosis ECHINONET, Frana Prof. Dr. Dominique
VUITTON;
- European Network for Concerted Surveillance of Alveolar Echinococcosis, Zrich, Elveia Prof. Dr.
Peter DEPLAZES;
- Facultatea de Medicin Veterinar Lige, Belgia Prof. Dr. Bernard LOSSON;
- Parasitic Diseases Division, Bureau of Epidemiology,

CDC, Atlanta, Georgia, USA Prof. Dr. Peter
SCHANTZ;
- USAMV Cluj-Napoca, Facultatea de Medicin Veterinar Prof. Dr. Vasile COZMA;
- Direciile Sanitare Veterinare i pentru Sigurana Alimentelor i gestionarii fondurilor de vntoare din
judeele: Alba, Bistria, Braov, Cluj, Covasna, Harghita, Maramure, Mure, Satu Mare, Slaj, Sibiu,
Suceava.



Referine bibliografice


1. Altintas N., Pektas B., Gottstein B.,
Akpolat N., Karababa A.O. (2004) -
Investigation of alveolar echinococcosis in
human under high risk infection in Turkey.
Int. Archiv.of the Hydatidosis, 35, 159;
2. Auer H. i Aspck H. (1993) - Die
epidemiologische Situation der
Echinokokkosen im Sdosten sterreichs.
Mitt.sterr.Ges.Tropenmed.Parasitol., 15,
16-71;
3. Augot D., Boucher J.M., Boue F.,
Piarroux R., Giroudoux P., Guillou N.,
Vuitton D.A., Cliquet F. (2004) -
Echinococcus multilocularis and pets
animals: a synantrophic cycle in France?
Int.Archiv.of the Hydatidosis, 35, 134;
4. Baltrnait L. (2006) - Diet and winter
habitat use of the red fox, pine marten and
raccoon dog in Dzkia National Park,
Lithuania. Acta Zoologica Lituanica, 16, 1,
46-53;
5. Bessonov A.S. (1998) - Echinococcus
multilocularis infection in Russia and
neighbouring countries. Helminthologia, 35,
73-78;
6. Bozdag A.D., Nazh O., Peker Y., Tansung
T., Kaymak E., Uluc E. (2000) - Alveolar
echinococcosis of the pancreas. Surgey, 128,
1, 109-110;
7. Bruzinskaite R., Marcinkut A., Deplazes
P., Mathis A., Eddi C., arkunas M.
(2007) - Epidemiology of Echinococcus
multilocularis in Lithuania. XXII Int.Congr.
of Hydatidology, Athens, Abstract OP 35;
8. Canda ., Graj M., Canda T.,
Astarcioglu H. (2003) - The Pathology of
Echinococcosis and the Current
Echinococcosis Problem in Western Turkey.
A report of pathologic features in 80 cases.
Turk.J.Med.Sci., 33, 369 374;
9. Casulli A., Manfredi M.T., La Rosa G., Di
Cerbo A.R., Dinkel A., Romig T., Deplazes
P., Genchi C., Pozio E. (2005) -
Echinococcus multilocularis in red foxes
(Vulpes vulpes) of the Italian Alpine region:
is there a focus of autochtonus transmission?
Int.J.for Parasitology, 35, 10, 1079-1083;
10. Cook B.R. (1991) - Echinococcus
multilocularis infestation acquired in UK.
Lancet, 337, 8740, 560-561;
57
11. CRLP (Community Reference Laboratory
for Parasites (2007) - Second Workshop of
National Reference Laboratoires for
Parasites. Technical Report. Instituto
Superiore di Sanita. Rome, 1-23;
12. DEFRA (2005) - Qualitative Veterinary
Risk Assessment: Introduction of Exotic
Diseases in the UK.
http://www.defra.gov.uk/animalh/diseases/no
tifiable/ rabies/pdf/appendix5.pdf;
13. Deplazes P., Hofer S., Gloor S., Gottstein
B., Eckert J. (1998) - Urban cycle of
Echinococcus multilocularis and risk
assessment of infections in domestic dogs
and cats. Parasitol.Int., 47, 1635;
14. Deplazes P. i Eckert J. (2001) - Veterinary
aspects of alveolar echinococcosis a
zoonosis of public health significance.
Vet.Parasitol., 98, 65-87;
15. Eckert J. (1997) - Epidemiology of
Echinococcus multilocularis and
E.granulosus in Central Europe.
Parassitologia, 39, 4, 337-344;
16. Eckert J. (1998) - Alveolar echinococcosis
(Echinococcus multilocularis) and other
forms of echinococcosis (Echinococcus
vogeli and Echinococcus oligarthrus). In
Zoonoses, ed. by Palmes,Soulsby, Simpson,
Oxford Med.Publ., 689-716;
17. Eckert J. i Deplazes P. (1998) - Actual
aspects in the epidemiology of
echinococcosis in Europe. VPH Repports,
ISS/WHO/ FAO, 29;
18. Eckert J. i Deplazes P. (1999) Alveolar
echinococcosis in humans: the current
situation in Central Europe and the need for
countermeasures. Parasitol. Today, 15, 315-
319;
19. Eckert J., Conraths F.J., Tackmann K.
(2000) - Echinococcosis:an emerging or
reemerging zoonosis? Int.J.for Parasit., 30,
12-13, 1283-1294;
20. Eckert J., Gemmell M.A., Meslin F.X.,
Pawlowski Z.S. (2002) - WHO/OIE Manual
on Echinococcosis in Humans and Animals:
a Public Health Problem of Global Concern;
Ed. World Org. for Anim. Health, WHO/OIE,
Paris, France;
21. Eckert J., Deplazes P. (2004) - Biological,
epidemiological, and clinical aspects of
echinococcosis, a zoonosis of increasing
concern. Clin.Microbiol.Rev., 17, 1, 107-
135;
22. Eurechinoreg (2003) -
http://www.eurechinoreg.org;
23. Ewald D. (1993) - Prvalenz von
Echinococcus multilocularis bei Rotfchsen
(Vulpes vulpes L.) in der Nord-, Ost- und
Sdschweiz sowie im Frstentum
Lichtenstein. Dissertation, Phil.II., Univ.of
Zrich, 1-110;
24. Fuglei E., Stien A., Yoccoz N.G., Ims R.A.,
Eide N.E., Prestrud P., Deplazes P.,
Oksanen A. 2008) - Spatial Distribution of
Echinococcus multilocularis, Svalbard,
Norway. E.I.D.Journ., 14, 1, 73;
25. Gottstein B., Saucy F., Wyss C.,
Siegenthaler M., Jacquier P., Schmitt M.
(1996) - Investigations on a Swiss area
highly endemic for Echinococcus
multilocularis. Appl.Parasitol., 37, 2, 129-
136;
26. Gottstein B. (2000) - Epidemiologie und
Systematic der cystischen und alveolaren
Echinokokkose. Der Chirurg Zeitschrift, 71,
1, 1-8;
27. Gottstein B. (2007) - Risk of
Echinococcosis related to food. In CRLP
(Community Reference Laboratory for
Parasites. Second Workshop of National
Reference Laboratoires for Parasites.
Technical Report. Instituto Superiore di
Sanita. Rome, 2007,15-16;
28. Heltay I. (1989) - A rka kolgija s
vadszata. Mezgazdasgi knyvkiad,
Budapest;
29. Hildreth M.B., Sriram S., Gottstein B.,
Wilson M., Schantz P.M. (2000) - Failure
to identify alveolar echinococcosis in
trappers from South Dakota in spite of high
prevalence of Echinococcus multilocularis in
wild canids. J.of parasitology, 86, 1, 75-77;
30. Hofer S., Gloor S., Mller U., Mathis A.,
Hegglin D., Deplazes P. (1999) - High
prevalence of Echinococcus multilocularis in
urban red foxes (Vulpes vulpes) and voles
(Arvicola terrestris) in the city of Zrich,
Switzerland. Parasitology, 20, 135-142;
31. Iacobiciu I. (2001) - Echinococoza-
hidatidoza (E/H) - parazitozoonoz cu largi
implicaii medico sociale. Ed. Mirton,
Timioara;
32. Ionescu V. (1998) - Alveococcosis in Sheep.
J.of Romanian Parasitology VIII, 1., 73;
33. Ishikawa H., Ohga Y., Doi R. (2003) - A
model for the transmission of Echinococcus
multilocularis in Hokkaido, Japan. Biology,
Microbiology & Immunology, Okayama
Univ., http:// escholarship.lib.okayama-
u.ac.jp/microbiology_and_ immunology/3;
58
34. Jiang C. (1998) - Alveolar echinococcosis in
China. Chinese Med.J., 111, 5, 470-475;
35. Kapel C.M., Torgerson P.R., Thompson
R.C., Deplazes P. (2006) - Reproductive
potential of Echinococcus multilocularis in
experimentally infected foxes, dogs,
racoondogs and cats. Int.J.Parasitol., 36, 1,
79-86;
36. Kassai T. (2003) - Helmintolgia. Az llatok
s az ember freglskdk okozta
bntalmai. Medicina ed., Budapest, 30-101;
37. Labhardt F. (1990) - Der Rotfuchs. Paul
Parey Ed., Hamburg;
38. Letkov V., Lazar P., Curlik J., Goldov
M., Kosicov A., Kosuthov L., Mojzisov
J. (2006) - The red fox (Vulpes vulpes L.) as
a source of zoonoses. Veterinarski Arhiv., 76,
S73-S81;
39. Losson B., Kervyn T., Detry J., Pastoret
P.P., Mignon B., Brochier B. (2003) -
Prevalence of Echinococcus multilocularis in
the red fox (Vulpes vulpes) in southern
Belgium. Vet.Parasitol., 117, 1-2, 23-28;
40. Lukashenko N.P. (1971) - Problems of
epidemiology and prophylaxis of
alveococcosis (multilocular echinococcosis)
a general review, with particular references
in the USSR. Int.J.Parasitol., 1, 125-134;
41. Malczewski A., Gawor J., Malczewska M.
(2004) - Epidemiological situation of
Echinococcus multilocularis in red foxes
(Vulpes vulpes) in Poland. XXIst Int. Congr.
of Hydatidology Nairobi-Kenya, Int.Arch. of
the Hidatidosis, XXXV, 132;
42. Manfredi M.T., Casulli A., La Rosa G., Di
Cerbo A.R., Trevisiol K., Genchi C., Pozio
E. (2006) - Echinococcus multilocularis in
north Italy. Parassitologia, 48, 1-2, 43-46;
43. Martinek K., Kolarova L., Cerveny J.
(2001) - Echinococcus multilocularis in
carnivores from the Klatovy district of the
Czech Republic. J.Helminthol., 75, 1, 61-66;
44. Mikhailchenko V.V., Fesenko V.N., Aletin
R.R. (2000) - Alveolar Echinococcus
(alveococcus) of the kidney. Vestnik
Chirurgii imeni, 159, 1, 97-99;
45. Moks E, Saarma U, Valdmann H. (2005) -
Echinococcus multilocularis in Estonia.
Emerg Infect Dis., 11, 12, 1973-4;
46. Moldoveanu D. (2004) - Echinococoza-
Hidatidoza la cabaline n Romnia (2001-
2003). Rev.Rom. de Parazitologie, XIV, 1,
41-42;
47. Panaitescu D. i Pop M. (1999) -
Alveococcosis in man. J.of Romanian
Parasitology, IX., 2., 55;
48. Parasitology informatik (2007) -
Echinococcosis.
http://parasitology.informatik.uni-
wuerzburg.de/login/n/h/0422.html;
49. Petavy A.F., Tenora F., Deblock S.,
Sergent V. (2000) - Echinococcus
multilocularis in domestic cats in France.
Vet.Parasit., 87, 2-3, 151-156;
50. Quilici M., Dunan S., Dumon H., Franck
J. (1982) - Hydatidose et leishmaniose
viscerale dans la Sud-Est de la France.
J.Medic., 3, 59-64;
51. Raoul F., Defaut R., Michelat D.,
Montadert M., Ppin D., Qur J.P.,
Tissot B., Delattre P., Giraudoux P. (2001)
- Landscape effects on the polulations
dynamics of small mammal communities: a
preliminary analysis of prey-resource
variations. Rev.Ecol.-Terre Vie, 56, 339-352;
52. Report EU and Norvey (2001) - Report on
Trends and sources of zoonotic agents in the
European Union and Norvay
http://ec.europa.eu/food/biosafety/
salmonella/ 09_echinococcus_2001.pdf;
53. Romig T., Kratzer W., Kimmig P., Frosch
M., Gaus W., Flegel W.A., Gottstein B.,
Lucius R., Beckh K., Kern P. (1999) - An
epidemiologic survey of human alveolar
echinococcosis in southwestern Germany.
Romerstein Study Group.
Am.J.Trop.Med.Hyg., 61, 4, 566-573;
54. Romig T., Knig A., Kellermann K.,
Weible A., Thoma D., Dinkel A., Schrder
W., Tourneux F., Giraudoux P.,
Mackenstedt U. (2004) - Southern Bavaria,
Germany: a newly recognised high
endemicity area for Echinococcus
multilocularis. Int.Archiv.of the Hydatidosis,
35, 130;
55. Rommel M. (1992) - Environmental
hygienic aspects of echinococcosis.
Dtsch.Tierarztl. Wochenschr., 99, 7, 292-
295;
56. Saeed I., Maddox-Hyttel C., Monrad J.,
Capel C.M. (2006) - Helminths of red foxes
(Vulpes vulpes) in Denmark. Vet.Parasitol.,
139 (1-3), 168-179;
57. Savlovschi C., Oprescu S., Serban D.,
Sabu M. (2000) - On case with splenic
hydatidosis. J.of Romanian Parasitology, X.,
1., 16-17;
59
58. Schantz P.M., Chai J., Craig P.S., Jenkins
D.J., Macpherson C.N.L., Thakur A.
(1995) - Epidemiology and control of
hydatid disease. (in Echinococcus and
hydatid disease. R.C.A.Thompson &
A.J.Lymbery eds.). CAB International,
Wallingford, Oxon, 233-331;
59. Schantz P.M. (2005) - The burden of
echinococcosis. AM.J.Trop.Med.Hyg., 73, 1,
1-2;
60. Shaikenov B.S., Masenov B.B.,
Rysmukhambetova A.T., Torgerson P.R.
(2007) - The transmission of echinococcosis
in synantropic biocoenosis in Kazakhstan.
XXII Int.Congr. of Hydatidology, Athens,
Abstract OP 88;
61. Shimalov V.V. (2001) - Alveolar
echinococcosis in Belorussian polesie.
Parazitologiia, 35, 2, 145-148;
62. Shimalov V.V. i Shimalov V.T. (2002) -
Helminth fauna of the red fox (Vulpes vulpes
Linnaeus, 1758) in southern Belarus.
Parasitology Research, 89, 1, 77-78;
63. Sik B.S. (1991) - Cercetri n problema
alveococozei la animale n judetul Covasna.
Simp. Nat. de Parazitologie, Sf.Gheorghe,
17-18 mai;
64. Sik B.S. (1992) - Unele aspecte
morfopatologice n hydatidoza alveolar la
animale. Rev.Rom.Med.Vet., 2, 151-155;
65. Sik B.S. (1993) - Unele aspecte
morfologice privind hydatidoza alveolar la
roztoarele slbatice. Rev.Rom.Med.Vet., 3
(2-4), 214-216;
66. Sik B.S. (1995) - Alveococoza-o
parazitozoonoz prezent dar puin
cunoscut n Romania. Rev.Rom. de
Parazitologie, V., 1., 54;
67. Sik B.S. (1996) - Aspecte privind ecologia
parazitului Echinococcus multilocularis.
Rev.Rom. de Parazitologie, 6, 1-2, 94;
68. Sik B.S. i Iacobiciu I. (2002) - New cases
of alveolar hydatidosis in Romania. Vet.
Med. Symposium, Iai, 6-7 June.
69. Siko B.S., Iacobiciu I., tefnoiu V.,
Coroiu Z. (2005) - Epidemiologia
echinococozei-hidatidozei. Consideraii
asupra epidemiologiei E/H n Romnia.
Ed.Asoc.ECHINO NEWS;
70. Siko B.S., Sndor Zs. (2007) Cestodozele
intestinului subire la vulpe (Vulpes vulpes
L.) cu referire special la Echinococcus
multilocularis. Rev.Rom. de Parazitologie,
XVII, suppl.2007, 167;
71. Srter T., Szll Z., Egyed ZS., Varga I.
(2003-a) - Az alveolris echinococcosisrl az
Echinococcus multilocularis fertzttsg
els hazai megllapitsa kapcsn. Magyar
llatorv.Lapja, 125, 6, 370-378;
72. Srter T., Szell Z., Egyed Zs., Varga I.
(2003-b) - Echinococcus multilocularis: an
emerging pathogen in Hungary and Central
Eastern Europe? www. CDC Past Issue,
Emerging Infectious Diseases, 9, 3, 384-386;
73. Thompson R.C.A. i Lymbery A.J. (1995)
- Echinococcus and Hydatid Disease. CAB
International Wallingford UK;
74. Vuitton D.A. i Bresson-Hadni S. (2007) -
Echinococcosis. eMedicine.
http://www.emedicine.com/med/TOPIC326.
HTM;
75. Wang Q., Vuitton D.A., Xiao Y., Budke
C.M., Campos-Ponce M., Schantz P.M.,
Raoul F., Yang W., Craig P.S., Giraudoux
P. (2006) - Pasture Types and Echinococcus
multilocularis, Tibetan Communities. CDC,
Emerg. Inf.Dis., 12, 6, 190;
76. Welzel A., Steinbach G., Keyserlingk M.,
Stoye M. (1995) - Zur Helminthenfauna des
Rotfuchses (Vulpes vulpes L.) in
Sdniedersachsen. Teil 2: Zestoden.
Zeitschrift fr Jagdwiss., 41, 2, 1100-109;
77. Zariffard M.R. (1997) - Observation on
E.multilocularis in Iran. Arch. Int.Hydatid.,
32, 243;
78. Zhou H.X., Chai S.X., Craig P.S., Delattre
P., Qur J.P., Raoul F., Vuitton D.A.,
Wen H., Giraudoux P. (2000) -
Epidemiology of alveolar echinococcosis in
Xinjiang Uygur autonomus region, China: a
preliminary analysis. Ann.Trop.Med.and
Parasit., 94, 7, 715-729;
79. Yimam A.E., Nonaka N., Oku Y., Kamiya
M. (2002) - Prevalence and intensity of
Echinococcus multilocularis in red foxes
(Vulpes vulpes schrencki) and racoon dogs
(Nyctereutes procyonoides albus) in Otaru
City, Hokkaido, Japan. Japn.J.Vet.Res., 49,
4, 287-296;

60
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 61-67
61
ARTI COLE ORI GI NALE
Species distribution and antifungal susceptibility of
Candida isolates collected from hospitalised patients
in Romania and Greece

Myrto CHRISTOFIDOU
1
, Anastasia SPILIOPOULOU
1
, Sofia VAMVACOPOULOU
1
,
Vassiliki STAMOULIS
1
, George DIMITRACOPOULOS
1
, Evangelos ANASTASSIOU
1
,
Lia Monica JUNIE
2
, Carmen COSTACHE
2
, Ioana COLOSI
2
, P.T. CIOBANCA
2

1. Department of Microbiology, School of Medicine, University of Patras, Patras, Greece
2. Department of Microbiology, University of Medicine and Pharmacy, Cluj Napoca, Romania


The incidence of fungal infections has increased
substantially over the past 2 decades, and this
increase is likely associated with the growing
population of patients undergoing chemotherapy,
transplant surgery, and intensive care support.
Human candidiasis is increasing now in
incidence and in clinical manifestation, due to
the high frequency of prolonged antibiotic
therapy, the invasive procedures and immune
deficiencies. The immunosuppression by
transplant, the drug therapy for cancer and AIDS
favor the disseminated infections. Knowledge of
clinical manifestations and predisposing factors
is profitable in order to establish the proper
prophylaxis and treatment. Species of the genus
Candida are the agents most frequently
implicated in invasive fungal infections, and they
now rank as the fourth most common cause of
bloodstream infections. Several surveillance
programs have produced data documenting these
increases and have documented trends in species
distribution and antifungal susceptibility. These
may be due to differences in antifungal
prescription and infection control practices.
Candida species is one of the most common
causes of hospital acquired bloodstream
infections. Although Candida albicans remains
the most frequent cause of Candida infections,
longitudinal surveillance in the USA (where
Candida spp. constitute the fourth most common
bloodstream isolate) and also in the Europe have
detected an increase in the prevalence of
bloodstream infections caused by Candida non
albicans. Nosocomial candidemia has emerged
during the past two decades as a frequent cause
of morbidity and mortality in hospitalized
patients. Despite the availability of effective
antifungal therapy, the mortality rate associated
with candidemia remains high due mainly in
immunocompromised hosts, in fungal virulence
and in drugs resistant Candida strains.
Objectives: Patients hospitalized for clinical
assumption of candidiasis were assessed. The
aim of this study was to evaluate species
distribution and antifungal susceptibility of
Candida isolates recovered from pathological
products, at some hospitals. The isolation and
distribution rate of Candida species from
different infections was investigated and the
susceptibility of isolates to various antifungal
agents was determined in Cluj-Napoca and in
Patras Hospitals.
Mat er i al and met hods
Clinical data were recorded and included age,
sex, clinical diagnosis, predisposing factors and
clinical outcome.
In Cluj Napoca hospitals, in a period of 2 years,
338 Candida isolates were collected. in the
Department of Microbiology, University of
Medicine and Pharmacy, Cluj Napoca, Romania,
all isolates of Candida spp. were identified by the
germ tube test and the API test (Biomerieux),
Auxacolor 2, Fongiscreen, Candifast and
CandiSelect 4.
In Greece, strains of Candida were isolated from
blood at a care hospital. In the department of
Microbiology, School of Medicine, University of
Patras, Patras, Greece, positive blood cultures
(BacT/Alert, Organon Teknika) were examined
microscopically directly for yeasts or
pseudohypha and subcultured on Sabouraud agar
(Difco). Candida isolates were screened by germ
tube test and identified using API 20CAUX
(Biomerieux). A small portion of material from
positive blood culture vials (Bact/Alert, Organon
Teknika) was examined microscopically for
yeast cells or pseudohypha and pseudomycelium.
Another portion was cultured on Sabouraud
dextrose agar (Difco, USA). All Sabouraud agar
plates were incubated at 35
o
C for 72h and yeast-
like colonies were isolated. Germ tubes
formation is indicative of Candida albicans.
The preparation was examined under direct
microscopy. Germ tubes negative Candida
isolates were identified by their biochemical
characteristics which include the assimilation of
carbohydrates according to API 20 AUX
(Biomerieux).
The susceptibility test to antifungal agents was
carried out by E-Test (AB Biodisk) a
macromethod which defines the minimum
inhibitory concentration (M.I.C) of antifungals as
described in NCCLS M27-A2, with readings
after 24 and 48 h of incubation. Antifungal M.I.C
was carried out by E-test (AB Biodisk) on
RPMI-2% glucose agar, for the following
antifungals, in Greece: amphotericin B, 5-
fluorocytocin, itraconazole, ketoconazole and
fluconazole, voriconazole. The interpretive
breakpoints for flucytosine, itraconazole, and
fluconazole were those of the NCCLS.
In Romania, the susceptibility test to antifungal
agents was carried out to: amfotericin B,
nistatin, ketoconazol, econazol, miconazol and
clotrimazol, nistatine, using diffusimetic methods
on Mueller-Hinton media with GAM (supliment
glucosis and blue metilen) and Casiton. The
antimycotic activity of Clotrimazole,
Miconazole, Fluconazole, Ketoconazole,
Bifonazole, Nystatin, Griseofulvin, Flucytosine,
Terbinafine, and Natamycine, on collection
strain of C.albicans and on 105 different strains
isolated from patients with mycosis was studied,
by performing a standard antimycotic sensitivity
test (Kirby-Bauer method) on Sabouraud
medium The results are read by measurement of
inhibition diameters and associate them with the
appropriate kind of sensitivity from tabels:
sensitive (S), intermediately sensitive (IS) and
resistant (R).
Resul t s di sc ussi on
In Greece from blood culture samples were
positive 142 (2%) isolates. From 142 patients, 94
patients were males and 50 females. Eleven of
them were neonates from intensive care unit
while the other 131 were adults, aged 28-80
years old. All patients with fungemia were
immunocompromised, having haematologic
malignancies (leukemia, lymphoma,
granulocytopenia) or other conditions which
predispose for candidemia as are therapy with
antimicrobial agents (IV) for concomitant
bacterial infection, vascular catheters and large
surgical treatment including transplantations.
The predisposing factors and underlying diseases
observed in this study are comparable to those
observed by others. Among these, central venous
lines are an important risk factor for candidemia
and failure to perform catheter exchange was
strongly associated with the persistence of
infection.
In Greece, a total of 144 cases of candidiasis
were reported during the course of this study.
Candida albicans was the most commonly
isolated species, accounting for 59% of the
isolates, followed by Candida glabrata (11%),
Candida parapsilosis (9%), Candida tropicalis
(9%), C.lipolytica (4%), C. guilliermondii (3%),
Candida krusei (1%), C.stellatoida 1 (1%),
C.humicola (2%) and C. lusitaniae (1%). Both
C.glabrata and C. krusei were isolated for the
first time during 2001. Two patients had non
Candida fungemia due to Trichosporon spp.


62


C.glabrata
11%
C.parapsilosis
9%
C.tropicalis
9%
C.stellatoida
1%
C.guillermondii
3%
C.krusei
1%
C.humicola
2%
C.lucitaniae
1%
C.lipolytica
4%
C.albicans
59%
C.albicans
C.glabrata
C.parapsilosis
C.tropicalis
C.krusei
C.guillermondii
C.stellatoida
C.humicola
C.lipolytica
C.lucitaniae













Candida species (n=144) isolated from blood cultures during seven years (1997-2004) Number of isolated Candida
species isolated in Greece /years of study


Candida species (n=144) isolated from blood cultures during seven years period (1998-2004)

No of isolates
Candida
1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004
Total
(%)
C.albicans 7 10 2 9 23 14 20 85 (59)
C.glabrata 6 6 2 2 16 (11)
C.parapsilosis 2 4 3 2 2 13 (9)
C.tropicalis 2 3 1 3 3 1 13 (9)
C.krusei 2 2 (1)
C.guillermondii 1 1 1 1 4 (3)
C.stellatoida 1 1 (1)
C.humicola 2 1 3 (2)
C.lipolytica 2 2 2 6 (4)
C.lucitaniae 1 1 (1)
Total 9 15 11 22 37 25 25 144 (100)





In Romania, the candidiasis etiology was
established in 338 patients. 70% of the
candidiasis was nosocomial infections, 5%
occurred in patients hospitalized in an intensive
care unit, 25% in patients hospitalized for cancer
therapy. Mucosal candidiasis prevails (63,1%)
followed by cutaneous candidiasis (25,2%) and
disseminated candidiasis (10,8%).
In Romania the overall species distribution was:
41% C.albicans, 22.3% C. parapsilosis, 12.4%
Candida glabrata, 12% Candida tropicalis, 2%
C. krusei, 0.7% C. guilliermondii, and 5.8%
others Candida spp. Although C. albicans
remains the most common species recovered
(59% of isolates, in Greece and 41% of isolates,
in Romania), the frequency of non-C. albicans
species has increased over the last decade (41%
of isolates, in Greece and 59% of isolates, in
Romania). A comparable distribution rate was
observed, in other study with C. albicans being
recovered from 55% of patients, followed by C.
glabrata (17%), C. parapsilosis (11%), C.
tropicalis (7%), C. lusitaniae (3%), and C. krusei
(3%). However, the distribution of species varied
markedly by country. In the United States, 43.8%
of nosocomial infections were due to non-C.
albicans species. C. glabrata was the most
63
common non-C. albicans species in the United
States. The proportion of non-C. albicans
nosocomial infections was slightly higher in
Canada (47.5%), where C. parapsilosis, not C.
glabrata, was the most common non-C. albicans
species. C. albicans accounted for 40.5% of all
nosocomial infections in South America,
followed by C. parapsilosis (38.1%) and C.
tropicalis (11.9%).
Susceptibility profile of Candida species to
antifungal agents
1. Candida spp. exhibited different
susceptibility profile to antifungal agents as
follows: C. albicans strains isolated in
Greece were most sensitive (S) to
Voriconazole (98%), Amphotericin (98%)
followed in descending order of sensitivity
by 5-Fluorocytocin (92%), Fluconazole
(87%), Ketoconazole (81%), and
Itraconazole (73%).
2. When performed by disk diffusion method,
from all isolated strains, 100% are S to
Nystatin, 93.8% to Ketoconazole, 87.5% to
Clotrimazole and 81.3% to Fluconazole. The
rest of strains are either IS (3.1% for
Ketoconazole, 6.2% for Clotrimazole and
3.1% for Fluconazole) or resistant (R): 3.1%
for Ketoconazole, 6.3% for Clotrimazole and
15.6% for Fluconazole. The majority of
strains (84.4%) are IS for Natamycine and
only 12.5% of the tested strains were S. Only
6.5% of tested strains are S to Terbinafine,
29% were IS strains and 64.5% of strains
were R. There were 4.8% S strains to
Flucytosine, 11.3% IS strains and 83.9%
were R strains.


N
y
s
t
a
t
i
n
K
e
t
o
c
o
n
a
z
o
l
e
C
l
o
t
r
i
m
a
z
o
l
e
F
l
u
c
o
n
a
z
o
l
e
M
i
c
o
n
a
z
o
l
e
N
a
t
a
m
y
c
i
n
e
T
e
r
b
i
n
a
f
i
n
e
F
l
y
c
y
t
o
s
i
n
e
G
r
i
s
e
o
f
u
l
v
i
n
B
i
f
o
n
a
z
o
l
e
S
IS
R
S 100 93,8 87,5 81,3 53,1 12,5 6,5 4,8 0 0
IS 0 3,1 6,2 3,1 40,6 84,4 29 11,3 16,1 0
R 0 3,1 6,3 15,6 6,3 3,1 64,5 83,9 83,9 100
Nystatin Ketoconazole Clotrimazole Fluconazole Miconazole Natamycine Terbinaf ine Flycytosine Griseof ulvin Bif onazole
Compared sensitivity of C.albicans strains to different
antimycotic drugs



3. From all isolated strains of C.glabrata,
isolated in Greece, 100% were sensitive to
Voriconazole, 81% of strains to 5-
Fluorocytocin, 81% to Amphotericin, 69% to
Ketoconazole and 56%, to Fluconazole and
only 31% to Itraconazole. The rest of strains
are either IS or resistant (R) for 5-
Fluorocytocin, to Amphotericin,
Ketoconazole, and Fluconazole and 69% for
Itraconazole. From all isolated strains of C.
tropicalis 100% were sensitive to
Voriconazole. The majority of strains were
sensitive to Amphotericin (86%),
Ketoconazole 86%, Fluconazole 78%, 5-
Fluorocytocin 78%, and only 64% of the
tested strains were sensitive to Itraconazole.
From all isolated strains of C. parapsilosis
100% were sensitive to Voriconazole. The
majority of strains were sensitive to
Amphotericin (92%), 5-Fluorocytocin
(92%), Ketoconazole (92%), Itraconazole
(85%), Fluconazole (85%). 100% of
C.lipolytica isolated strains were sensitive to
Amphotericin, Ketoconazole and
64
Voriconazole, 67% of them were.
Susceptibility profile of others Candida
species to antifungals agents was:
C.guillermondii: 100% of the strains were
sensitive to Amphotericin, 5-Fluorocytocin,
Ketoconazole, Itraconazole, Voriconazole
and 75% of them to Fluconazole. 100% of
the isolated strains of C.humicola were
sensitive to Amphotericin, Ketoconazole,
Fluconazole, 5-Fluorocytocin, 67% of them
were sensitive to Voriconazole, and only
34% of them were sensitive to Itraconazole.
100% of the isolated strains of C.krusei were
sensitive to Amphotericin and Voriconazole,
67% to Itraconazole and only 34% were
sensitive at 5-Fluorocytocin, Ketoconazole,
Fluconazole. All the isolated strains of C.
stellatoida were sensitive to all antifungal
drugs: Amphotericin, 5-Fluorocytocin,
Ketoconazole, Itraconazole, Fluconazole,
Voriconazole.

Sensitivity rates % of different Candida species to antifungal drugs

Amphotericin Fluorocytocin Ketoconazole Itraconazole Fluconazole Voriconazole
C.albicans 98 92 81 73 87 98
C.glabrata 81 81 69 31 56 100
C.tropicalis 86 78 86 64 78 100
C.parapsilosis 92 92 92 85 85 100
C.lipolytica 100 67 100 50 67 100
C.guillermondii 100 100 100 100 75 100
C.humicola 100 67 100 34 100 100
C.krusei 100 34 34 67 34 100
C.stellatoida 100 100 100 100 100 100


0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
100%
amphotericin B flucytocine fluconazole ketoconazole itraconazole voricionazole
C.albicans Candida spp

Sensitivity of C. albicans vs Candida spp to antifungal agents


Candida spp. exhibited different susceptibility
profile to antifungal agents as follows:
1. To Amphotericin were sensitive all the
strains of C. lipolytica, C guillermondii,
C. humicola C. krusei, C. stellatoida,
98% of C. albicans strains, 92% of C.
parapsilosis strains, 86% of C. tropicalis
strains and 81%, of C. glabrata strains.
2. To 5-Fluorocytocin were sensitive all the
isolated strains of C. guillermondii and
C. stellatoida, 92% of C. albicans
strains, 81%, of C. glabrata, 78% of C.
tropicalis, 92% of C. parapsilosis, 67%
65
of C. lipolytica and C. humicola and
only 34% of C. krusei.
3. To Ketoconazole were sensitive all the
isolated strains of C .humicola, C.
stellatoida, C. lipolytica, C.
guillermondii, the majority of the
isolated strains of C. parapsilosis
(92%), of C. tropicalis (86%), of
C.albicans (81%), 69% of C. glabrata
and only 34% of the C.krusei isolated
strains.
4. To Itraconazole were sensitive 100% of
the C. guillermondii and C.stellatoida
isolated strains. The percentage of
sensitivity for others Candida spp. was
lower: 85% for C.parapsilosis, 73% for
C.albicans, 67% for C.krusei, 64% for
C. tropicalis, 50% for C. lipolytica. Only
34% of C. humicola and 31% of C.
glabrata isolated strains were sensitive.
5. To Fluconazole were sensitive 100% of
the isolated strains of C .humicola and
C. stellatoida, 87% of C.albicans, 85%
of C.parapsilosis, 78% of C.tropicalis,
75% of C. guillermondii, 67% of C.
lipolytica, 56% of C. glabrata, and only
34% of C.krusei isolated strains.
6. To Voriconazole were sensitive all the
isolated strains of others Candida
species (C.glabrata, C.tropicalis, C.
parapsilosis, C. lipolytica, C.
guillermondii, C.humicola, C.krusi, C.
stellatoida and 98% of C.albicans
isolated strains.

Susceptibility profile to antifungal agents (E-Test, M.I.C.)
of 62 strains C.albicans and 60 strains Candida non albicans

Candida No of strains Amphotericin B Flucytocine Fluconazole Ketoconazole Itraconazole Voricanazole
C.albicans 45 S S S S S S
5 S S S S R S
4 S S S R R S
3 S S R R R S
5 S R R R R S
Candida spp 33 S S S S S S
8 S S S S R S
7 S S R S R S
2 S R R S R S
8 S R R R R S
2* R R R R R S
* C. parapsilosis, C. tropicalis


There is a good sensitivity to Voriconazole,
Amphotericin, Ketoconazole of Candida
albicans and others Candida species.
Itraconazole is efficient against C.stellatoida,
C.guillermondii, C.albicans and less efficient
against C. glabrata, C. humicola, and C.
lipolytica. We found the following species to be
sensitive at Fluconazole: C. stellatoida, C.
humicola, C. albicans, C.parapsilosis,
C.tropicalis. Some others species are
intermediary sensitive (IS) or resistant: C.
glaberata and, C. krusei. According to our
results Ketoconazole is efficient against all
Candida species, especially on C.lipolytica,
C.humicola, C.stellatoida, but also on C.
albicans strains, C. tropicalis and. C. krusei it is
less effective on C. kefyr.
Among azoles the highest degree of resistance is
observed to itraconazole (33%), fluconazole
(20%) and ketoconazole (18%) whereas
voriconazole was very active against Candida
species. The degree of resistance to amphotericin
B is low (1%) whereas in flucytocin is higher
(13%).


66
Sensitive strain*
MIC (g/ml)
Resistant strain*
MIC (g/ml)
Flucytocine <4 >32
Itraconazole <0,125 >1
Amphotericin B <0,5 >1
Fluconazole <8 >64




High percent of C. albicans isolates were
resistant to amphotericin B 1 g/ml) flucytosine
(32 g/ml). Resistance to itraconazole (1
g/ml) and fluconazole (64 g/ml) was
observed, respectively, in C. albicans, C.
glabrata and was not found for C. tropicalis, C.
parapsilosis and C. lusitaniae isolates.
Clotrimazol was activ on Candida albicans and
Candidei kefyr isolated strains in Romania, and
less active on Candida krusei and Candida
glaberata. Miconazol was activ on Candidei
albicans, Candida glaberata, Candidei kefyr, and
les activ on Candida krusey and some Candida
albicans strains. Fluconazole has been activ on
Candida albicans, and less sensitive on others
Candida species: Candida glaberata, Candida
krusei, Candida kefyr. Nistatin was activ on all
Candida species, especialy on Candida
glaberata, Candida kefyr, Candida albicans,
Candida krusei and Candidei tropicalis. Nizoral
was activ on C. albicans, C. Tropicalis and
others Candida species: C. glaberata, Candida
kefyr and less activ on Candidei krusei.
Conc l usi on
1. Our results show that C. albicans remains
the Candida species most frequently
implicated in candidiasis, with an overall
frequency of 59% in Greece and 41 % in
Romania. Candidiasis are predominantly
caused by C.albicans.
2. The frequency of isolation of non-C.
albicans species was significantly higher in
Greece. Candida glabrata was the second
most frequent isolate, in Greece followed by
C. tropicalis and C.parapsilosis, but in
Romania, the second most frequent isolate
was C. parapsilosis, followed by Candida
glabrata, Candida tropicalis, C. krusei, C.
guilliermondii, and others Candida spp. The
findings emphasize the need for further
clinical investigational studies.
3. The change in the pattern of candidemia to
more non albicans cases is associated with
higher antifungal resistance.
4. The highest degree of resistance was
observed to ketoconazole, itraconazole and
fluconazole whereas voriconazole was very
active against Candida.
5. An increased understanding of antifungal
drug resistance should allow the
development of new diagnostic strategies to
identify resistant clinical isolates,
introduction of new treatment and prevention
strategies to treat these resistant infections.
One fact is clear: as strategies emerge to treat
resistant fungal infections, the fungal cells
will continue to develop new mechanisms of
antifungal drug resistance.


67
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 68-73
68

Specii de Candida izolate din infectiile micotice

Carmen COSTACHE, Ioana COLOSI, Monica JUNIE

Catedra de Microbiologie, UMFIuliu Haieganu, Cluj-Napoca


Introducere
Acest studiu si-a propus stabilirea:
celor mai frecvente specii de fungi
izolate din produse patologice
spectrului de sensibilitate la antifungice
a tulpinilor izolate
celor mai utile metode de identificare i
testare a sensibilitii tulpinilor izolate
Material i metod
Materialul luat n studiu a fost reprezentat de 169
tulpini recoltate de la pacieni din diverse
produse patologice:
134 - Centrul de Diagnostic i Tratament
35 - Clinica de Boli Infecioase
Identificarea speciilor de Candida a fost realizat
cu ajutorul urmtoarelor kit-uri comerciale i cu
ajutorul mediului CandiSelect 4:
Auxacolor 2
- Kit de identificare bazat pe teste de
fermentare.
- Poate identifica 8 specii de Candida.
Fongiscreen
Candifast
Fongiscreen
Cele 65 de tulpini preluate din baza de date au
fost identificate folosind Fongiscreen.
Fongiscreen este un kit de identificare bazat pe
teste de asimilare. Testul poate identifica toate
speciile patogene de Candida, plus speciile
Cryptococcus neoformans i Saccharomyces
cerevisiae. Testul poate preciza i dac tulpina
studiat face parte din genurile Trichosporon,
Geotrichum sau Rodothorula, dar fr putea
preciza specia.
CandiSelect 4
Toate cele 104 tulpini analizate au fost
identficate folosind mediul CandiSelect 4. Acest
mediu de identificare poate diferenia 4 specii de
Candida n funcie de culoarea i aspectul
coloniilor dup cum urmeaz:





Culoare Colonii Specie
Violet-Indigo C. albicans
Verde nchis S C. tropicalis
Verde deschis S C. glabrata
Verde deschis R C. krusei

Speciile care nu se regsesc n list nu pot fi
identificate folosind CandiSelect 4, ele confundndu-se
cu unele dintre speciile colorate n verde. Candida
albicans este singura specie colorata violet.


Candifast
Dintre tulpinile analizate, 12 tulpini au fost
identificate i cu Candifast. Candifast este un kit
de identificare bazat pe teste de fermentare i pe
determinarea prezenei ureazei. Acest test poate
identifica 8 specii de Candida i poate preciza
dac tulpina testat face parte din genurile
Trichosporon, Geotrichum sau Rodothorula, dar
fr a putea preciza genul sau specia. Candifast
conine i un kit de testare a sensibilitii.
Pot fi identificate urmatoarele tulpini de
Candida:
Candida albicans
Candida tropicalis
Candida glabrata
Candida krusei
Kitul de identificare este bazat pe:
Teste de asimilare
Teste enzimatice
Morfologie
Teste de fiziologie
Poate identifica toate speciile patogene de
Candida.
Testarea sensibilitii la antifungice a fost
efectuat cu:
Candifast
Toate speciile identificate cu Candifast au fost i
testate pentru rezistena la antifungice. Candifast
cuprinde teste calitative pentru aprecierea
sensibilitii la urmtoarele antifungice:
amfotericin B, nistatin, ketoconazol, econazol,
miconazol, fluconazol i flucitozin.
Fungitest
Dintre tulpinile analizate, 5 tulpini au fost testate
folosind FungiTest. FungiTest este un kit care
testeaz sensibilitatea la urmtoarele antifungice:
amfotericina B, ketoconazol, miconazol,
itraconazol, fluconazol i flucitozin. Testul
poate preciza dac tulpina este sensibil,
intermediar sensibil sau rezistent prin testarea
sensibilitii la dou concentraii diferite pentru
fiecare antifungic.




Testarea rezistenei cu Fungitest


Metoda difuzimetric dii la antifungice
a fost realizata pe mediile:
Casiton
Prin metoda difuzimetric pe mediu Casiton a
fost testat rezistena la urmtoarele antifungice:
amfotericin B (34 de tulpini), nistatin (36 de
tulpini), ketoconazol (36 de tulpini), econazol
(34 de tulpini), miconazol (34 de tulpini) si
clotrimazol (36 de tulpini).
Mueller-Hinton
Prin metoda difuzimetric pe mediu Mueller-
Hinton cu GAM (supliment de glucoz i
69
albastru de metilen) a fost testat rezistena la
urmtoarele antifungice: amfotericin B (32 de
tulpini), nistatin (35 de tulpini), ketoconazol (35
de tulpini), econazol (32 de tulpini), miconazol
(32 de tulpini), clotrimazol (36 de tulpini),
voriconazol (12 tulpini) i fluconazol (11
tulpini). Mediul Mueller-Hinton nu a fost aprobat
de CLSI (Clinical Laboratory Standards
Institution, vechiul NCCLS) dect pentru
voriconazol i fluconazol. n aceast lucrare a
fost folosit cu caracter experimental i la testarea
altor antifungice dar rezultatele nu au fost
folosite la aprecierea sensibilitii tulpinilor
studiate.
Microcomprimatele folosite au fost urmtoarele:
amfotericin B de 100 g, nistatin de 100 UI,
ketoconazol, econazol, miconazol si clotrimazol
50 g, voriconazol de 1 g i fluconazol de 25
g.
Controlul calitii
Exactitatea rezultatelor la testele de identificare
i sensibilitate a fost verificat folosind tulpinile
de control ATCC 10231 Candida albicans i
ATCC 15126 Candida glabrata. Toate kiturile i
microcomprimatele folosite au dat rezultate n
limite normale, mai puin microcomprimatele de
flucitozin care au fost excluse din studiu.
Rezultate
Frecvena speciilor (Grafic 1)
C. albicans este specia cea mai frecvent
ntlnit n secreiile linguale, faringiene
i vaginale.
C. albicans este cauza a 80% din
infeciile urinare de etiologie micotica
C. albicans produce rareori candidemie.
C. glabrata, C. krusei i C. tropicalis
apar artificial mrite din cauza limitrilor
mediului Candiselect 4.
C. albicans este specia cea mai frecvent ntlnit
n secreiile linguale, faringiene i vaginale ale
pacienilor cu diagnostic prezumtiv de infecie
micotic (Grafic 2).






Alte specii
4%
Candida kefyr
2%
Candida glabrata
9%
Candida albicans
64%
Candida tropicalis
11%
Candida krusei
7%
C. parapsilosis
3%



Grafic 1



70

0% 20% 40% 60% 80% 100%
Sange
Urina
Secretie vaginala
Materii fecale
Secretie otica
Sputa si aspirat bronsic
Secretie faringiana
Secretie linguala
Candida albicans
Candida glabrata
Candida tropicalis
Candida krusei
Candida parapsilosis
Candida kefyr
Alte specii



Grafic 2
Prevalena diverselor specii n produsele patologice testate





Comparaie ntre testele de identificare
Rezultatele Candifast i Auxacolor 2 au
corespuns n 100% din cazuri.
Rezultatele CandiSelect 4 au corespuns
cu celelalte dou teste n doar 47% din
cazuri, n principal datorit limitrilor
acestui mediu de identificare.
Toate tulpinile C. albicans au fost
identificate corect.
Toate tulpinile C. glabrata au fost
identificate corect.
Dac se cultiv pe CandiSelect
tulpini ale altor specii dect cele 4
identificabile, majoritatea iau
aspectul C. glabrata.
Sensibilitatea la antifungice (Grafic 3)
Rezultatele obinute pe Casiton i
Mller-Hinton sunt asemntoare, dar nu
identice.
Sensibilitatea raportat de
Fungitest/Mller-Hinton sunt
comparabile
Fungitest nu a identificat nici o tulpin
rezistent.
Candifast raporteaz foarte multe tulpini
sensibile.O parte din ele sunt dose
dependent.
Referitor la relaia dintre diferitele specii de
candida i antifungicele testate am obinut
urmtoarele rezultate (Grafic 4)
Sensibilitatea in vitro la Ketoconazol
este de 100%.
Amfotericina B, nistatina i
voriconazolul sunt eficiente n peste 90%
din cazuri.
Econazolul si clotrimazolul au o
eficien bun, mai puin pe Candida
albicans.
Fluconazolul are eficien medie.
Miconazolul are efect n doar 2/3 din
cazuri.




71

100,0% 97,1% 2,9% 0,0% 0,0%
100,0% 100,0% 0,0% 0,0% 0,0% 0,0%
100,0% 94,4% 0,0% 0,0% 5,6%
88,6% 0,0% 11,4%
100,0% 100,0% 0,0% 0,0% 0,0%
80,0% 82,9% 20,0% 8,6% 0,0% 8,6%
100,0% 82,4% 17,6% 0,0% 0,0%
75,0% 18,8% 6,3%
91,7% 67,6% 29,4% 8,3% 2,9%
40,0% 59,4% 60,0% 34,4% 0,0% 6,3%
83,3% 13,9% 2,8%
75,0% 11,1% 13,9%
91,7% 8,3% 0,0%
60,0% 40,0% 0,0%
100,0% 0,0%
80,0% 72,7% 20,0% 9,1% 0,0% 18,2%
100,0% 0,0%
80,0% 20,0% 0,0%
Legend
Candifast
Fungitest
Casiton
Mueller-Hinton
Clotrimazol
Voriconazol
Fluconazol
Flucitozin
Itraconazol
Nistatin
Ketoconazol
Econazol
Miconazol
Sensibil Intermediar Rezistent
Amfotericin



Grafic 3
Comparaia ntre sensibilitatea la antifungice testat prin diferite metode (Candifast, Fungitest, difuzimetric pe
Casiton i Mueller-Hinton cu GAM)
72
Sensibilitatea
la:
Candida
albicans
Alte
specii
Global
Amfotericina B 90,9% 100,0% 97,1%
Nistatina 91,7% 95,8% 94,4%
Ketoconazol 100,0% 100,0% 100,0%
Econazol 72,7% 87,0% 82,4%
Miconazol 54,5% 73,9% 67,6%
Clotrimazol 75,0% 87,5% 83,3%
Voriconazol 100,0% 87,5% 91,7%
Fluconazol 66,7% 75,0% 72,7%



Grafic 4
Sensibilitatea diverselor specii la antifungice

Concluzii
1. Cea mai frecvent specie izolat n
infeciile fungice este Candida albicans.
Aceast specie reprezint aproape 2/3 din
cazuri.
2. Candifast i Auxacolor sunt la fel de
exacte n a identifica tulpinile de Candida.
3. CandiSelect 4 are limitri majore n ceea
ce privete speciile pe care le poate
identifica. Practic, doar diagnosticul
etiologic Candida albicans poate fi pus
folosind CandiSelect 4, restul speciilor
patogene de Candida putnd fi confundate
cu Candida glabrata dac este folosit
acest test.
4. Testarea sensibilitii prin metoda
difuzimetric pe mediile Casiton i
Mueller-Hinton cu GAM duce la rezultate
asemntoare, dar nu identice, mediul
Mueller-Hinton nefiind recomandat pentru
testarea altor antifungice dect voriconazol
i fluconazol.
5. Fungitest, dei raporteaz foarte puine
tulpini rezistente, poate determina tulpinile
sensibile cu o exactitate comparabil cu
cea a metodei difuzimetrice pe mediu
Mueller-Hinton, cu meniunea ca acest
mediu nu este aprobat de CLSI.
6. Candifast nu este un test de ncredere
pentru determinarea rezistenei la
antifungice, sensibilitatea acestui test fiind
foarte redus.
7. Ketoconazolul i amfotericina B sunt
antifungicele cele mai eficace in vitro.
Sensibilitatea la aceste antifungice a fost
de 100% pentru ketoconazol i, n medie,
de 97.1% pentru amfotericina B. Conform
testelor difuzimetrice, nici o tulpin dintre
cele studiate nu a fost rezistent la
ketoconazol sau amfotericina B i doar
foarte puine au fost intermediar-sensibile.
8. Dup ketoconazol i amfotericina B,
nistatina i voriconazolul sunt cele mai
eficiente antifungice. Au efect n peste
90% din cazuri.
9. Miconazolul are efecte reduse pe Candida
albicans n aproape 50% din cazuri,
sensibilitatea celorlalte specii fiind de
74%.
73
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 74-78
74

Metoda difuzimetric n testarea sensibilitii de
antifungice

Carmen COSTACHE, Ioana COLOSI

Universitatea de Medicin i Farmacie, Cluj-Napoca


Introducere
Folosirea medicamentelor antifungice este n
continu cretere n ultimele decenii datorit
apariiei pe pia a unor antifungice noi i mai
eficiente ca reacie la creterea incidenei
infeciilor fungice.
Apariia de tulpini rezistente subliniaz din nou
necesitatea unei terapii ghidate de antifungigram
(AF). Lipsa unui test standardizat, usor de efectuat
n laboratoarele de diagnostic, cum ar fi de
exemplu un test bazat pe metoda difuzimetric,
deschide posibilitatea spre prea multe greeli n
interpretarea AF. CLSI (fostul NCCLS) M44-A
Guideline este standardizat doar pentru speciile de
Candida, testnd sensibilitatea acestora doar fa
de anumite antifungice. Pe de alt parte EUCAST
ncearc trasarea unor linii proprii de efectuare a
AF, care s se bazeze pe MIC nregistrate la nivel
european, ns metodele efectuate n mediu lichid
nu sunt la ndemna tuturor laboratoarelor de
diagnostic datorit costului i complexitii lor.
Nu cunoastem situaia pe ntreg teritoriul
Romniei, dar n Transilvania se comanda
discuri pentru efectuarea AF, dar fr a se cere
mediul corespunztor pentru realizarea ei.
Studiul nostru i-a propus s determine rata de
concordan ntre rezultatele obinute la AF
aplicat unor izolate clinice identificate ca levuri,
realizat prin metod difuzimetric pe trei medii
diferite.
Material i metod
Pentru realizarea AF am folosit urmtoarele
medii:
- Casitone agar (mediul standard pentru discurile
Bio-Rad);
- Muller-Hinton agar;
- Sabouraud cu Chloramphenicol.
Tulpinile izolate au fost testate la 6 antifungice, 2
din grupa polienelor i 4 aparinnd clasei de
azoli: Poliene: Amphotericin B (AB) 100 g,
Nystatin (NY) 100 UI, Azoli: Ketoconazole
(KET), Econazole (EC), Miconazole (MCZ),
Clotrimazole (CTR) - 50g.
Identificarea tulpinilor s-a realizat cu ajutorul
testelor Auxacolor (Bio-Rad ).
Inoculul a fost preparat din cultur pur de 24 de
ore, cu o opacitate de 0.5 MF.
Cele 44 de tulpini studiate au fost izolate din
diferite produse patologice, de la pacieni tratai
ambulator i spitalizai. Citirea rezultatelor s-a
efectuat la 24 i 48 de ore nregistrnd nivelul
concordanei diametrelor zonelor de inhibiie pe
cele 3 medii i clasificarea lor clinic: S, IS, R.
Controlul de calitate a fost realizat cu ajutorul
unei tulpini Candida albicans (C. albicans)
ATCC 10231.
Rezultate
C. albicans a reprezentat 59 % din speciile
identificate, C. glabrata, 18.2%, C. krusei 9.1%.
iar alte specii (C. tropicalis, inconspicua,
parapsilosis, zeylanoides, S. cerevisiae) au fost
prezente n proporie 13,7% (Fig. 1).



The percentage of candida species in
the etiology of mycotic infections
59%
18%
9%
14%
C.albicans
C.glabrata
C.krusei
other species


Figura 1



Toate cele 44 de tulpini au prezentat acelai
diametrul al zonei de inhibiie pentru o anumit
tulpin, pe Casitone i Muller-Hinton, la testarea
polienelor (AB i NY). Concordana rezultatului
AF ntre aceste dou medii a fost de 100%.
La interpretarea rezultatelor (S/R) obinute pe
Casitone i Sabouraud, concordana a fost de
91%, chiar dac diametrul zonelor de inhibiie a
fost mult diferit pe cele dou medii. Acest fapt
este explicabil prin limitele largi ale diametrelor
ncadrate n cele 3 categorii clinice (S/ I / R).
Concordana pentru KET a fost de 81.8% pentru
Casitone vs.Muller-Hinton i 86.36% pentru
Casitone vs. Sabouraud.
Acelai nivel de concordana s-a obinut la
testarea EC pe Casitone i Sabouradud, dar a fost
mult mai redus (73%) cnd testarea s-a efectuat
pe Casitone vs. Muller-Hinton.
Pentru MCZ nivelul concordanei a fost 82% pe
Casitone vs. MullerHinton i doar 41% pentru
Casitone vs. Sabouraud, deoarece 18.2% dintre
tulpini au fost IS pe Casitone n timp ce pe
Sabouraud apreau ca fiind S (Fig. 2).
Testarea CTR a condus la un nivel de
concordan de 77.37% pentru Casitone vs
Muller-Hinton, cu 4.54% dintre tulpini fiind S pe
Casitone, dar aprnd ca R pe Muller-Hinton i 9
% fiind IS pe Casitone i aprnd ca S pe Muller-
Hinton (Fig. 3).
Concordana ntre Casitone i Sabouraud a fost
doar de 63.7% n cazul CTR.
Pe parcursul realizrii acestui studiu am observat
fenomenul de antagonism ntre poliene i azoli
ca i o aplatizare a zonei de inhibiie produse att
de AB ct i de NY, datorit interferenei cu
zonele de inhibiie ale KET i respective ale CTR
(Fig. 4).









75

Discordant interpretation on
Sabouraud vs Casitone for MCZ
0
5
10
15
20
25
30
Sabouraud Casitone
Strains
IS
S


Figura 2




Discordant interpretation on Muller-
Hinton vs Casitone for CTR
30
32
34
36
38
40
42
Muller-Hinton Casitone
Strains
R
S

Figura 3

76



Figura 4



Discuii
Absena unei metode economice, rapide i uor
de interpretat pentru testarea sensibilitii la
antifungice i concordana redus a testelor
comerciale existente cu CMI i cu relevana
clinic, deschid posibilitatea introducerii de noi
metode pentru realizara AF (1).
Pe de alt parte folosirea discurilor, testate i
interpretate de productor pe un anumit mediu,
pe un alt mediu poate conduce la erori de
interpretare a rezultatelor, chiar dac pentru
anumite clase de antifungice aceste erori sunt
minime.
Antagonismul observat ntre poliene i azoli este
explicat prin natura fungistatic a celor din urm
i natura fungicid a polienelor. Inhibarea
sintezei de ergosterol de ctre azoli determin
apariia unui perete celular modificat, AB
pierzndu-i inta de aciune: ergosterolul, ceea
ce conduce la reducerea activitii sale fungicide.
In acest sens, asocierea poliene-azoli, vzut ca
i o posibil soluie la depirea fenomenului de
rezisten, nu pare a fi soluia ideal (2).
Concluzii
1. Dei C.albicans continu s fie agentul
etiologic predominant n infeciile fungice, s-a
observat o cretere a incidenei infeciilor
produse de C.glabrata, C.krusei i alte specii de
candida.
2. Pentru poliene (AB i NY) exist o rat
ridicat a concordanei ntre antifungigrama
realizat pe Casitone i cea realizat pe Muller-
Hinton, att n ceea ce privete diametrele
zonelor de inhibiie ct i interpretarea clinic
(S/R); de asemenea exist o bun concordan
77
ntre Casitone i Sabouraud , n ciuda
diferenelor ntre diametrele zonelor de inhibiie.
3.Pentru azoli rata concordanei ntre
antifungigrama realizat pe Casitone i Muller-
Hinton, respectiv ntre antifungigrama realizat
pe Casitone i Sabouraud a fost sczut att n
ceea ce privete diametrul zonelor de inhibiie
ct i interpretarea clinic a rezultatelor, datorit
existenei unor tulpini intermediari sensibile
(dose dependent).
4. Mediul Sabouraud poate fi folosit n anumite
situaii pentru realizarea AF, mai ales datorit
avantajului unei creteri mai rapide i a unei zone
de inhibiie clar delimitate.
5. Fenomenul de antagonism ntre poliene i
azoli a putut fi demonstrat pe toate cele 3 medii
ca i o aplatizare (tiere) a zonei de inhibiie la
punctul de interferen.

MULUMIRI
Adresm mulumiri Laboratorului Clinicii de Boli Infecioase i Laboratorului CDT care ne-au furnizat
majoritatea tulpinilor studiate, cu scopul testrii sensibilitii lor la antifungice.

Referine


1. Druetta A, Freydiere A, Guinet R, Gille
Y Evaluation of five commercial
antifungal susceptibility testing systems,
Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 1993
May; 12 (5): 336-42
2. Murray, Patrick R., Ellen Jo Barron,
James H. Jorgensen, Michael A,Pfaller,
Robert H. Yolken - Manual of Clinical
Microbiology, 8e, 2003, vol.2, pg.1659-
1877


78
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 79-83
79

Infestaia cu Demodex folliculorum n dermatologie

Patricia CRISTODOR*, Smaranda Rodica GOIA*, Marinela POPOVICI*,
Smaranda Laura GOIA*, Argentina VIDRACU**, Oana JUROVITS***,
Doina NIU***, Caius SOLOVAN*

* UMF Victor Babe Timioara
** UMF Iuliu Haieganu Cluj
*** Spitalul Clinic Municipal Nr. 2 Timioara


Introducere
Demodecidoza este o infestaie parazitar
comun a tegumentului animalelor, simptomele
obinuite incluznd alopecia, pruritul i
inflamaia. Parazitul este ntlnit n special la
cini, dar i la alte animale domestice sau
slbatice.
Infestaiile similare la om sunt produse practic de
dou specii: Demodex folliculorum i Demodex
brevis
[1]
i pot mbrca, pe lng aspectele
amintite, manifestri acneiforme sau
rozaceiforme
[2]
(eritem, descuamare, papulo-
pustule), keratoze (dopuri) foliculare
[3]
(aa-
numitul pityriasis folicular), posibil rareori
abcese faciale
[4]
sau tuberopustule
[5]
.
Localizarea preferenial a paraziilor este la
nivelul tegumentului feei (pe obraji, n special n
anurile nazogeniene, n regiunea sprncenoas
i glabel, pe nas mai ales pe faa dorsal, n
zona perioral
[6]
,n conductul auricular extern), i
la nivelul foliculilor piloi, ceea ce explic
simptomele clinice i depistarea paraziilor la
nivelul genelor, sprncenelor i, mai rar, a
scalpului
[7]
. Manifestrile oculare uzuale se
limiteaz la blefarite trenante, dar uneori apar i
iritaia ocular, inflamarea conjunctivei,
disfuncia glandelor Meibomius, scderea vederii
la care, rareori, se asociaz i manifestri
corneene: vascularizaie superficial, infiltrare
cornean marginal, leziuni flictenulare, opaciti
superficiale i cicatrici nodulare
[8,9]
.
n raport cu severitatea manifestrilor clinice,
Karincaoglu et al. propun o clasificare a
infestaiei cu Demodex n "pityriasis folliculitis",
"rosacea-like demodicidosis" i "demodecidoza
gravis" asemntoare rozaceei granulomatoase
(granulomatous rosacea-like demodicidosis
gravis
[10]
).
Pacienii cu imunitatea sczut din diferite
motive (ca urmare a distrugerii de celule
Langerhans prin fototerapie
[11]
sau bolnavii
hemodializai cronic
[12]
) au o predispoziie
crescut pentru contractarea parazitului i pentru
formele clinice severe de boal.
Tratamentul clasic se bazeaz pe scabicide, dat
fiind nrudirea parazitului cu Sarcoptes scabiei,
dar se dovedete de multe ori lung i anevoios.
Dac n cazurile uoare vindecarea se obine n
25-30 de zile, n cele severe poate ntrzia mai
multe luni, sau chiar 1-2 ani.
Material i metod
Au fost investigai 56 pacieni, 32 de sex feminin
i 24 de sex masculin, cu vrstele cuprinse ntre
23 i 82 de ani.
Principalele simptome care au stat la baza
seleciei pacienilor au fost: prurit facial, pe
marginile nasului, frunte, obraji, mai ales seara i
noaptea, acnee, prurit palpebral, n special pe
marginea ciliar, prurit i leziuni
eritematoscuamoase la nivelul sprncenelor,
alopecia ciliar i sprncenoas, eritem pe
marginile nasului, frunte, obraji.
Examenul clinic obiectiv a a evideniat: faa
intens eritematoas, leziuni pustuloase,
veziculoase, escoriaii, cruste, blefarit
(scuamocruste i eritem periciliar).
Pacienii cu suspiciunea clinic de infestare cu
Demodex folliculorum au fost investigai n
Laboratorul de Micologie al Clinicii
Dermatologice Timioara. Din regiunea
periferic a leziunilor cutanate faciale localizate
cu predilecie n anul nazo-labial, obraji, frunte,
gt, s-au recoltat scuame prin raclare fin. Peste
proba recoltat pe o lam de microscop s-a
aplicat o soluie de 20% hidroxid de potasiu
(pentru disocierea cheratinei i a celulelor) i
aceasta s-a acoperit apoi cu o lamel. Genele
recoltate cu o penset fin au fost prelucrate n
aceeai manier. Frotiurile au fost examinate
dup 10-20 minute, la microscopul optic, cu o
magnitudine de 40-60. S-au notat prezena sau
absena parazitului, sau a oulor i densitatea pe
o suprafa de 1 cm
2
. Testul s-a considerat
pozitiv la o densitate de peste 5 parazii/ cm
2
.
Examinrile micologice s-au efectuat nainte i
dup nceperea tratamenului pe un interval de 1-
3 luni.
S-a obinut acordul pacienilor pentru
fotografierea zonelor afectate, iniial i pe
parcursul terapiei.
La pacienii peste 50 ani s-au evideniat paraziii
pe fa, dar i la nivelul genelor. Infecia cu
Demodex folliculorum s-a asociat cu infecia
gastric cu Helicobacter pylori la 10% din
pacienii vrstnici.
S-a instituit tratament injectabil cu Ivermectin
0,2 mg/kg corp, la interval de 5 zile, asociat cu
aplicaii topice de Amitraz, urmate imediat de
aplicaii topice de Ivermectin.
Controlul microscopic al prezenei paraziilor s-a
realizat iniial dup 20 de zile de tratament, apoi
din 10 n 10 zile.
Rezultate
La 49 (87,5%) dintre pacienii investigai, 28
femei i 21 brbai, s-a depistat prezena
parazitului n scuamele recoltate. La 12 dintre
acetia, leziunile i parazitul au fost remarcate la
nivelul genelor i sprncenelor (Fig. 1,2).
Exemplificm i aspectul clinic i microscopic
din localizarea facial a parazitului (Fig. 3).



Figura 1
Pacienta A.P. 82 ani, Blefarit cu Demodex folliculorum aspect clinic
(colecia Prof. Dr. Goia Smaranda).




Figura 2
Pacienta A.P. 82 ani, Blefarit cu Demodex folliculorum aspect microscopic. Se observ parazitarea firului de pr
i prezena unui ou ntre cei doi parazii din dreapta (colecia Prof. Dr. Goia Smaranda).
80


Figura 3
Pacient P.M. 73 ani, Dermatit facial cu Demodex folliculorum
(colecia Prof. Dr. Goia Smaranda).


La pacienii peste 50 ani s-au evideniat paraziii
pe fa, dar i la nivelul genelor. Infecia cu
Demodex folliculorum s-a asociat cu infecia
gastric cu Helicobacter pylori la 10% din
pacienii vrstnici.
Ca urmare a tratamentului, toi pacienii au
raportat o ameliorare a pruritului i o diminuare a
scuamelor nc dup prima injecie (primele 5
zile), eradicarea parazitului obinndu-se, la
intervale variabile, de asemenea, la toi pacienii.
Mai exact, 14 pacieni (28,6%) s-au negativat
dup 5 injecii, ali 14 (28,6%) dup 6 injecii, 10
pacieni (20,4%) dup 7 injecii, 9 pacieni
(18,36%) dup 8 injecii, 1 pacient (2,04%) dup
9 injecii i 1 pacient (2,04%) dup 10 injecii.
Discuii
Paraziii au dimensiuni cuprinse ntre 0,1 i 0,4
mm, aceast talie explicnd simptomele
subiective pe care le resimt muli pacieni i pe
care le descriu ca senzaia c le umbl ceva pe
fa, scalp sau decolteu, exprimri adesea de
natur s orienteze medicul n mod fals spre o
apreciere a acestora ca aparinnd sferei
psihiatrice (nevroze, psihoze cu zoopsii).
Demodex folliculorum i desfoar ntreg ciclul
vital la nivelul gazdei pe care o paraziteaz.
Femelele depun 20-24 de ou la nivelul
foliculului pilos, din care vor ecloza larvele i
nimfele (protonimfe, deutonimfe). Acestea vor fi
purtate de fluxul sebaceu ctre gura foliculului,
unde se vor matura, ncheindu-i ciclul de via
la 15-25 de zile.
Demodex folliculorum hominis triete n
vecintatea firelor de pr, pe cnd Demodex
brevis la nivelul ductelor secretoare secretoare
ale glandelor sebacee, regsindu-se pe toate
teritoriile unde aceste cutanate sunt prezente.
Parazitul i extrage hrana din bulbul firului de
pr, distrugnd peretele celular. Dup fecundare,
femela i sap un an n piele pentru a depune
ou, introducnd astfel diferite bacterii i
provocnd infecii cutanate. De-a lungul celor 5
etape ale ciclului lor de via, paraziii distrug
nveliul cutanat prin excretarea de deeuri sau
prin diverse secreii, prin depunerea de ou sau
prin remanena i descompunerea la acest nivel a
paraziilor decedai.
Demodex folliculorum hominis este condiionat
patogen. Incidena infestrii crete odat cu
vrsta (chiar i n studiul nostru lipsesc vrstele
mai tinere, n schimb avem infestri la pacieni
de 82 de ani). Acest fapt se coreleaz mai
degrab cu o scdere a imunitii, tiind c odat
cu naintarea n vrst, att secreia sebacee, ct
i pilozitatea factorii de care depinde creterea
i multiplicarea parazitului sunt n scdere. Ar
fi interesant de iniiat studii privind eventualele
corelaii ntre statusul imun al pacienilor i
infestarea cu Demodex, pe de o parte, i ntre
statusul imun i secreia sebacee sau pilozitatea
acestora, pe de alt parte. De asemenea, ntre
statusul imun i intensitatea simptomelor clinice,
tiut fiind faptul c prezena parazitului nu este n
mod necesar simptomatic.
Stimularea fizic, chimic i mecanic a
tegumentului de ctre aceti parazii poate
provoca reacii imune de la inflamaia local, la
eritem, papule i pustule, zona cea mai iritat
fiind cea centrofacial (aa-numita T zone) i
alte zone cu abundena glandelor sebacee.
Manifestrile clinice comune pot mbrca, pe
lng aspectul rozaceiforme, i pe cel de
dermatit perioral sau de acnee a adultului. n
81
alte cazuri, n acest tip de erupii, Demodexul
reprezint doar un factor agravant, nu cauzal.
Din cazuistica noastr reiese c majoritatea
pacienilor cu erupii faciale simptomatice au
prezentat aceast infestaie parazitar.
Cunoscnd ciclul de via al parazitului, vom
nelege de ce tratamentul, care nu acioneaz
dect asupra adulilor, fiind inofensiv pentru
larvele i nimfele protejate de o cuticul
impermeabil, trebuie administrat continuu pe o
perioad de timp acoperitoare pentru mai multe
etape de via (peste minim 5), n care se vizeaz
eclozarea oulor i surprinderea parazitului ntr-o
etap vulnerabil.
Pn n prezent, tratamentul rmne ndelungat i
nu rareori se nsoete de recidive, pacienii tineri
rspunznd cel mai bine la tratament.
Localizarea la nivelul genelor este i ea
ndeobte mai dificil de tratat.
n cazul nostru, strategia aplicat a fost cea a
unui tratament continuu, acoperitor pentru minim
cele 5 etape de via ale parazitului, cumulnd
efectul terapiei interne cu cea extern, situaie n
care am obinut deparazitarea totalitii
bolnavilor. Ca o noutate semnalm aplicaiile
topice combinate de Amitraz i Ivermectin.
Amitrazul fiind hidrosolubil, iar Ivermectina
liposolubil, am ntrunit astfel condiiile unei
penetrri optime a barierei cutanate lipoacide i a
accesrii paraziilor de ctre agenii terapeutici.
Notm faptul c dispariia simptomelor a fost n
general mai precoce dect dispariia parazitului
din leziuni. De aceea, nainte de a decide
ntreruperea tratamentului, este necesar s avem
confirmarea microscopic a vindecrii.
Concluzii
Considerm c n prezent infestaia cu Demodex
este subdiagnosticat, fiind indicat ca indicele de
suspiciozitate fa de aceasta s fie mult mai
crescut n cazul pacienilor cu erupii faciale
acneiforme, rozaceiforme sau chiar numai
eritematoase.
Tratamentul combinat, sistemic cu Ivermectin,
i topic, cu Amitraz i Ivermectin, a avut
rezultate foarte bune, ducnd la vindecarea
microscopic a tuturor bolnavilor din lotul
studiat.
Pacienii trebuie prevenii asupra necesitii
duratei mai crescute a tratamentului, chiar dac
simptomele faciale au cedat, pn la confirmarea
microscopic a vindecrii.
Sunt necesare cercetri ulterioare pentru
nelegerea corelaiei dintre infestaia cu
Demodex i statusul imun al pacienilor.


Bibliografie


1. Raszeja-Kotelba B, Jenerowicz D,
Izdebska JN, Bowszyc-Dmochowska M,
Tomczak M, Dembiska M. [Some aspects
of the skin infestation by Demodex
folliculorum], Wiad Parazytol.
2004;50(1):41-54. Links
2. Lacey, N.; Delaney, S.; Kavanagh,
K.; Powell, F.C., Mite-related bacterial
antigens stimulate inflammatory cells in
rosacea: British J Dermatol, 157, 3, 2007:
474-481(8)
3. Dominey A, Tschen J, Rosen T, Batres E,
Stern JK. Pityriasis folliculorum revisited. J
Am Acad Dermatol. 1989 Jul;21(1):81-4.
4. Schaller M, Sander CA, Plewig G,
Demodex abscesses: clinical and therapeutic
challenges. J Am Acad Dermatol. 2003
Nov;49(5 Suppl):S272-4.
5. Grossmann B, Jung K, Linse R. [Tubero-
pustular demodicosis] Hautarzt. 1999
Jul;50(7):491-4.
6. Rufli T, Mumcuoglu Y, Cajacob A,
Bchner S. Demodex folliculorum:
aetiopathogenesis and therapy of rosacea and
perioral dermatitis; Dermatologica.
1981;162(1):12-26
7. Garca-Vargas A, Mayorga-Rodrguez
JA, Sandoval-Tress C: Scalp
demodicidosis mimicking favus in a 6-year-
old boy - Case Report, Available online 16
July 2007.
8. Kheirkhah A, Casas V, Li W, Raju VK,
Tseng SC. Corneal manifestations of ocular
demodex infestation. Am J Ophthalmol. 2007
May;143(5):743-749. Epub 2007 Mar 21.
82
9. Gotia, S.R., Solovan, C., Ghitulescu, P.,
Sisak, A., Gotia, S.L., Radici, V., Darie,
O., Cristodor, P., Crestescu, M. (2005).
Particular forms of Demodex folliculorum
infection. 3rd Spring Symposium, Sophia
Dermatologica, EADV, Sofia 19-22 May
2005, Book of abstracts, P 01.2, Posters p.
56.
10. Karincaoglu Y, Bayram N, Aycan O,
Esrefoglu M. The clinical importance of
demodex folliculorum presenting with
nonspecific facial signs and symptoms. J
Dermatol. 2004 Aug;31(8):618-26.
11. Kulac M, Ciftci IH, Karaca S, Cetinkaya
Z; Clinical importance of Demodex
folliculorum in patients receiving
phototherapy, Int J Dermatol 47;1, 2008: 72-
77
12. Yagdiran Dzgn, O; Aytekin, S:
Comparison of Demodex folliculorum
density in haemodialysis patients with a
control group : J Eur Acad of Dermatol &
Venereol 21; 4, 2007: 480-483.



83
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 84-86
84

The etiology and clinic of cutaneous mycosis

Monica JUNIE, Carmen COSTACHE

University of Medicine and Pharmacy Iuliu Haieganu Cluj-Napoca, Romania


SUMMARY. Human mycoses represent infections with an increasing incidence and
location due to the increasing number of favourable factors of occurrence such as prolonged
and intensive antibiotherapy, cytostatic therapy, corticotherapy and suppressed immunity.
Our study led to important conclusions regarding the incidence of different mycoses
among different groups of age and between the two sexes, their location and their etiology.


Mat er i al and met hod
Patients admitted to The Clinic of Dermatology
and Pediatrics Clinic I Cluj-Napoca for
cutaneous and mucosal infections were evaluated
in order to establish the incidence of fungal
etiology, especially candidiasis and
dermatophytosis.
The diagnosis was based on symptoms and
mycological examination of patient samples: skin
scrapings, skin swabs, nail scrapings, exfoliated
skin.
The laboratory diagnosis used microscopic
examination of wet preparations, gram and
Giemsa stained smears, culture on specific
media. Identification of Candida albicans and
dermatophytes was based on the macroscopic
characteristics of the culture; microscopic
morphology; biochemical reactions (the
auxonographic method for carbohydrates
assimilation and fermentation of carbohydrates);
germ tube test.
Resul t s and di sc ussi on
Using the tests above, 209 patients were
diagnosed with fungal infections. The fungal
infections have the following distribution: 132
patients (63.2%) had cutaneous mycosis and 77
patients (36.8%) had mucosal mycosis.




2,3% 5,3%
92,4%
DERMATO PHYTOSES
CUTANEOUS CANDIDIASES
PITYRIASIS VERSICOLOR



85
Only 84 patients (40.2%) had candidiasis, 7 of
them (5.3%) with cutaneous location wherea 125
patients (59.8%) had cutaneous mycosis with
other etiology: 122 patients (58.4%) had
dermatophytosis and 3 patients (1.4%) had
pityriasis versicolor.


1,6%
1,6%
1,6%
3,3%
4,9%
7,4%
15,6%
63,9%
TINEA PEDIS
TINEA UNGUIUM
TINEA CRURIS
KERION CELSI
TRICHOPHYTIC SYCOSIS
OF THE FACE
TINEA CORPORIS
HAND EPIDEMOPHYTOSIS
FAVUS



The incidence and prevalence of the
dermatophytosis is increasing, especially that of
tinea pedis, responsible for 63.9% of
dermatophytoses. Other dermatophytoses have
low incidence: tinea unguium (15.6%), tinea
cruris (7.4%), kerion celsi (4.9%), tinea barbae
(3.3%); tinea corporis (1.6%), tinea manus
(1.6%) and favus (1.67%).
The incidence of cutaneous mycosis (132 cases)
is slightly higher in women (52.2%) than in men
(47.7%). The greatest difference is for cutaneous
candidiasis where the incidence in women is
4.5% as compared to 0.8% in men. Pityriasis
versicolor is also more frequent in women
(1.5%) than in men (0.8%), but dermatophytoses
are equally distributed between the two sexes
(46.2%). The dermatophytoses in men are: tinea
pedis (31.1%), tinea unguium (5.7%), tinea cruris
(4.1%), kerion celsi (3.3%), tinea barbae (2.5%),
tinea manus (1.6%). The frequency of
dermatophytosis in women is higher than in men
for tinea pedis (32.8%) and tinea unguium
(9.8%) and almost the same as in men for tinea
cruris (3.3%), kerion celsi (1.6%), tinea barbae
(2.5%), tinea manus (1.6%), tinea corporis
(0.8%) and favus (0.8%).

1,5%
1,5%
5,3%
2,3%
18,2%
0,8%
3,8%
65,2%
1,5%
0
10
20
30
40
50
60
70
80
Small
children
Teenagers Adults
(over 40)
PITYRIASIS VERSICOLOR
DERMATOPHYTOSES
CUTANEOUS CANDIDIASES

Cutaneous candidiasis occurs in adults (2.4%)
and small children (1%) while dermatophytosis
occurs in adults (52.7%), teenagers (1.4%),
school-age children (3.3%), small children (1%).




16,7%
1% 1%
2,9%
3,3%
3,8%
1,4%
3,3%
11,5%
0,5%
10%
2,4%
41,2%
1%
0
10
20
30
40
50
60
SMALL
CHILDREN
TEENAGERS ADULTS
(OVER 40)
PITYRIASIS
VERSICOLOR
DERMATOPHYTOSES
CUTANEOUS
CANDIDIASES
MUCOSAL
CANDIDIASES



The incidence of dermatophytosis starts
increasing, from 1.6% in neonates and small
children to 5.7% in school-age children, it
declines in teenagers to 2.5% and reaches a peak
in adults (90.2%), especially after forty years of
age (70.5%). Tinea pedis is responsible for
61.5% cases in adults, 1.6% cases in teenagers
and 0.8% cases in school-age children. Tinea
unguium and tinea cruris occur only in adults
(15.6% and 7.4%). Kerion celsi occurs in small
children (1.6%) and school-age children (3.3%).
Tinea barbae occurs both in school-age children
(0.8%) and in adults (2.5%). Tinea corporis has
the same incidence in teenagers and adults
(0.8%); tinea manus is common only in adults
(1.6%) and favus occurs both in school-age
children (0.8%) and in adults (0.8%).
The 3 patients with pityriasis versicolor indicate
that there is a low incidence of this disease both
among mycotic diseases (1.4%) and cutaneous
mycosis (2.3%). It occurs only in adults, it is
more frequent in women (66.7%) than in men
(33.3%) and it has a constant distribution among
different stages of age.
Conc l usi ons
1. Our study indicates a high incidence for
cutaneous mycosis.
2. The most common among cutaneous mycoses
are dermatophytosis, less common candidiasis
and pityriasis versicolor, which occurs
occasionally.
3. Dermatophytosis occurs in different clinical
forms, it is more frequent in adults and equally
distributed between sexes.
4. Cutaneous candidiasis and pityriasis versicolor
are more frequent in adult women and have a
variable distribution among different stages of
age.
5. The knowledge of different clinical forms of
mycosis and of the favourable factors is useful in
order to relate them with the condition of
occurrence, age and sex, for a better therapy and
prophylaxis.

86
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 87-100
87

Fungemiile produse de levuri: rezultatele unui
studiu multicentric efectuat pe o perioad de 4 ani n
Iai (Romnia)

M. MARE

Laboratorul de Micologie-Micotoxicologie, Departamentul de Sntate Public al USAMV Ion Ionescu de la
Brad i Catedra de Microbiologie a Universitii Petre Andrei, Bld. Stefan cel Mare si Sfant nr.10, 700063, Iai,
Romania, e-mail: mycomedica@gmail.com


REZUMAT. Scop: Articolul de fa prezint rezultatele unui studiu privind fungemiile
efectuat n trei spitale universitare ieene ntre 2001-2005. Material i metod: Studiul s-a
efectuat pe un numr de 32 pacieni internai n serviciile de chirurgie sau terapie intensiv i
ale cror hemoculturi au indicat fungemie produs de levuri. Tulpinile izolate au fost
identificate pe baza caracteristicilor morfologice i biochimice, iar sensibilitatea la antifungice s-
a apreciat prin intermediul galeriilor ATB fungus 2 i a discurilor cu voriconazol. Semnificatia
concentraiilor minime inhibante a fost apreciat conform standardelor CLSI. Rezultate:
Frecvena speciilor implicate n apariia fungemiei a fost urmtoarea: Candida albicans 31,25%,
C. parapsilosis 12,50%, C. tropicalis 9,38%, C. pelliculosa 9,38%, C. krusei 6,25%, C. sake
6,25%, C. dubliniensis 3,12%, C. norvegiensis 3,12%, C. norvegica 3,12%, C. kefyr 3,12%, C.
intermedia 3,12%, C. valida 3,12%, Rhodotorula glutinis 3,12%, Trichosporon asahii 3,12%.
Rata de rezisten la antifungice a variat ntre 0,00% n cazul amfotericinei B i voriconazolului,
i 12,50% pentru itraconazol. Mortalitatea la pacienii diagnosticai cu fungemie indus de levuri
a fost de 38%. Discuii: Se remarc frecvena relativ sczut a tulpinilor de C. albicans i
emergena fungemiilor produse de specii non-albicans, similar tendinelor existente pe plan
mondial. Rata rezistenei la antifungice este relativ sczut, fluconazolul putnd fi folosit ca
antifungic de elecie n combaterea fungemiilor. Amfotericina B lipozomal i voriconazolul pot
fi utilizate cu succes ca terapie alternativ n cazul infeciilor refractare la azoli.
Cuvinte cheie: fungemie, etiologie, levuri, antifungice, rezisten.


Introducere
Progresele incontestabile nregistrate n
chirurgie, medicin intern i terapie intensiv,
care permit actualmente terapii considerate cu
dou decenii n urm cvasi-irealizabile, au un
adversar redutabil care uneori le anuleaz orice
ans de finalizare cu reale beneficii pentru
pacient infeciile. Se estimeaz c 30% dintre
decesele chirurgicale intraspitaliceti se
datoreaz unei cauze septice (1).
Studii recente efectuate att n SUA, ct i n
Europa, obiectiveaz incidena crescnd a
infeciilor fungice nosocomiale, subliniind i rata
ngrijortor de ridicat a mortalitii care poate
atinge 40-70% din cazuri (2-4). Fungemiile
datorate diverselor specii ale genului Candida se
plaseaz pe locul al-IV-lea ca inciden n topul
infeciilor nosocomiale sistemice, fiind surclasate
de stafilococii coagulazo-negativi, enterococi i
Staphylococcus aureus (2). Datorit faptului c
majoritatea fungemiilor survin la pacieni n stare
critic, adeseori imunocompromii sau supui
unor manopere terapeutice invazive nsoite de
antibioticoterapie cu spectru larg, un procent
relativ ridicat dintre acestea se transform n
sepsis urmat de insuficien multiorganic i
exitus.
n ceea ce privete frecvena izolrii diverselor
specii de levuri din episoadele de fungemie, se
constat tendina diminurii proporiei tulpinilor
de Candida albicans i creterea frecvenei
speciilor non-albicans ale genului Candida i a
celor aparinnd altor genuri: Trichosporon,
Cryptococcus, Malassezia etc. n SUA de pild,
n decursul ultimelor dou decenii, frecvena
fungemiilor datorate tulpinilor de Candida
albicans s-a diminuat de la 80% la aproximativ
50% (5-7). Speciile a cror implicare n apariia
fungemiilor nregistreaz un trend ascendent
Candida glabrata, Candida parapsilosis,
Candida krusei .a., se caracterizeaz printr-un
pattern de sensibilitate la antifungice diferit de
cel al tulpinilor de C. albicans, proporia
tulpinilor rezistente fiind n continu cretere .
Cei mai importani factori de risc pentru apariia
fungemiilor sunt:
cateterele intravasculare (implantate n
vederea hemodializei sau nutriiei
parenterale)
arsurile (datorit posibilitii de translocare
a levurilor n patul vascular prin
compromiterea rolului de barier a pielii i
atrofia mucoasei gastrointestinale
subsecvent rspunsului inflamator
sistemic sever declanat de injuriile
termice)
strile de imunodepresie (consecutive
interveniilor chirurgicale majore,
traumatismelor, diabetului, terapiei cu
corticosteroizi, deficitelor imunitare
congenitale sau dobndite prin terapia
imunosupresoare post-transplant)
antibioticoterapia / profilaxia cu spectru
larg
vrsta (vrstele extreme sunt
predispozante: btrnii, nou-nscuii
prematur)
interveniile chirurgicale pe intestin,
peritonita manifest clinic, pancreatita
acut.
n majoritatea cazurilor, infeciile candidozice
invazive sunt de sorginte endogen, dar i sursele
exogene - persoanele purttoare, dispozitivele
medicale sau soluiile perfuzabile contaminate,
pot reprezenta factori epidemiologici importani
(7).
Managementul infeciilor sistemice presupune
intervenia terapeutic prompt i susinut,
iniiat ct mai precoce dup precizarea
etiologiei fungice a acestora. Spre deosebire de
agenii antibacterieni, arsenalul terapeutic
antifungic utilizabil n infeciile sistemice este
extrem de redus. Alturi de amfotericina B
(AMB) - formularea clasic i formularea
modern-lipozomal), 5-flucitozin (5FC) i
caspofungin (CAS), doar civa compui azolici
ntrunesc rigorile impuse de terapia infeciilor
fungice sistemice: fluconazolul (FCA),
itraconazolul (ITR) i voriconazolul (VOR).
Utilizarea celorlali compui antifungici de
ultim generaie (anidulafungin, posaconazol,
ravuconazol) se afl nc n faz de studiu clinic.
Alegerea agentului antifungic n astfel de situaii
este dependent de o multitudine de factori a
cror importan este major prin influena pe
care o exercit asupra succesului terapiei:
agentul etiologic cunoscut sau suspectat;
strategia terapeutic;
spectrul de aciune;
calea de administrare;
farmacocinetica i farmacodinamia
compusului;
toxicitatea;
interaciunile medicamentoase;
profilul de rezisten al tulpinilor diverselor
specii.
Rezistena la antifungice reprezint o problem
actual, din ce n ce mai acut, n special pentru
clinicieni, datorit noilor tendine de cretere
semnificativ a frecvenei tulpinilor levurice
rezistente, responsabile de infecii sistemice. Pe
lng rezistena genetic fa de unii ageni
antifungici (C.lusitaniae la amfotericin B, C.
krusei la fluconazol), actualmente se constat o
emergen a tulpinilor cu rezisten dobndit
fa de agenii antifungici n general i fa de
derivaii azolici n special. Aceast rezisten
este important n cazul speciilor non-albicans
ale genului Candida (C. glabrata, C. krusei, C.
tropicalis) i aproape nesemnificativ n cazul C.
albicans (8).
ntr-un studiu relative recent efectuat n SUA de
Ostrosky-Zeichner et al. (9) pe 2000 tulpini
izolate din fungemii, este semnalat o rat relativ
ridicat de rezisten la derivai azolici (FCA i
ITR) a izolatelor aparinnd speciilor non-
albicans ale genului Candida, comparativ cu cele
de C. albicans. Astfel, 8 % dintre tulpinile de C.
88
glabrata, 8% dintre cele de C. tropicalis i 34%
dintre cele de C. krusei prezentau rezisten la
FCA, n timp ce rata rezistenei la acelai
antifungic a tulpinilor de C. albicans era de doar
5% (9). Fenomenul se manifesta la fel de
pregnant i n cazul ITR, fa de care 51% dintre
tulpinile de C. glabrata, 12% dintre cele de C.
tropicalis i 20% dintre cele de C.krusei erau de
asemenea rezistente, spre deosebire de cele
aparinnd speciei C.albicans la care rata
rezistenei era de 8% (9).
n Europa, studii multicentrice ale
susceptibilitii la FCA a tulpinilor de C.
albicans implicate n apariia fungemiilor indic
o rat mai redus a rezistenei (2,0-2,7%)
comparativ cu situaia existent n SUA (8, 10).
n prezentul studiu am urmrit spectrul etiologic
al fungemiilor levuro-dependente, frecvena
speciilor implicate la diferite categorii de
pacieni i determinarea pattern-ului de
sensibilitate la antifungice al tulpinilor izolate
prin evaluarea CMI
50
, CMI
90
i a ratei de
rezisten a acestora.
Material i metod
Studiul a fost efectuat n perioada iulie 2001-
iulie 2005, pe un lot de 32 pacieni cu vrste
cuprinse ntre 12 zile i 74 ani, internai n
serviciile de chirurgie sau terapie intensiv ale
Centrului de Cardiologie Iai, Spitalului Clinic
de Urgene pentru Copii Sf. Maria Iai i
Spitalului Clinic de Boli Infecioase Sf.
Parascheva Iai, ale cror hemoculturi au
indicat fungemie produs de levuri. Numrul
total al hemoculturilor investigate n acest
interval a fost de 1087. Simptomul primar care a
justificat practicarea hemoculturilor la aceti
pacieni cu risc a fost starea febril.
Contextul clinic care a impus efectuarea
hemoculturilor, numrul acestora, prezena
antibioticoterapiei cu spectru larg i evoluia
incidentului infecios sunt prezentate n tabelul 1.
Pentru hemoculturi, s-au utilizat flacoanele cu
medii de cultur pentru microorganisme aerobe
i facultativ anaerobe, special destinate acestui
scop: Hemoline Performance Duo (bioMrieux,
Frana) i BacT/ALERT

FA (bioMrieux,
Frana).
Flacoanele au fost inoculate cu volume diferite
de snge prelevat de la pacieni n condiii de
asepsie i antisepsie riguroase, prin puncie
venoas. n doar 3 cazuri, prelevarea s-a realizat
prin cateterul intravascular preexistent.
n cazul copiilor, volumul de snge nsmnat a
fost de cca. 10 ml sau mai mic, utiliznd
flacoanele BacT/ALERT

FA, iar interpretarea

pozitivrii hemoculturilor s-a realizat cu ajutorul
sistemului automatizat BacT/ALERT Microbial
Detection System. n cazul multiplicrii
microbiene, n mediul de cultur crete
concentraia dioxidului de carbon care determin
schimbarea culorii senzorului gaz-permeabil aflat
la baza flaconului, din verde-albstrui n galben.
n cazul adulilor, volumul de snge recoltat a
fost de cca. 30 ml, acesta transferndu-se n
flacoane Hemoline Performance Duo pentru
microorganisme aerobe. Dup nsmnare,
flacoanele cu hemoculturi au fost incubate la
37C, iar dup pozitivare am efectuat frotiuri i
am practicat subculturi pe Agar Sabouraud cu
cloramfenicol. Plcile nsmnate au fost
meninute 48-72 ore la 361C, pentru
dezvoltarea coloniilor de levuri. Tulpinile izolate
au fost apoi identificate utiliznd galeriile ID 32
C i reader-ul miniAPI (bioMrieux, Frana).
Pentru testarea susceptibilitii la antifungice s-
au utilizat 5FC, AMB, FCA, ITR (incluse n
galeria ATB Fungus2) i VOR (discuri de 1g
Neo-Sensitab). Antifungigrama pe galeriile ATB
Fungus2 s-a realizat utiliznd tehnica
recomandat de firma productoare, iar
interpretarea rezultatelor conform
recomandrilor EUCAST i CLSI. Pentru
testarea sensibilitii la VOR am folosit metoda
difuzimetric Kirby-Bauer, utilizat curent n
cazul testrii sensibilitii bacteriilor, adaptat
pentru antifungice (standard CLSI M44-A). n
acest scop, am folosit ca mediu de testare Agarul
Meller-Hinton aditivat cu 2 % glucoz (ca agent
de stimulare a creterii) i 0,5 g/ml albastru de
metilen (pentru evidenierea optim a conturului
zonelor de inhibiie), volumul repartizat n placa
Petri fiind de aproximativ 25 ml.


89
Tabel 1
Prezentarea lotului de studiu

Nr.
crt.
Contextul clinic
Nr.
hemoculturilor
efectuate
Nr.
hemoculturilor
pozitive
Tratament
administrat
Evoluie
1.
Protezare valv aortic
pentru o dubl leziune
aortic cu predominana
stenozei, sepsis postoperator.
2 2 Ceftriaxon
Insuficien
multiorganic,
exitus
2.
Defect septal atrial cu unt
dreapta-stnga (operat)
2 2
Ceftriaxon
Amikacin
Favorabil
3.
Pseudoanevrism arter
femural (operat)
2 2
Vancomicin
Ciprofloxacin
Favorabil
4. Endocardit septic (operat) 2 2
Ceftriaxon
Amikacin
Favorabil
5.
Sindrom febril, pacient
neoperat, insuficien
cardiac
2 2 Tienam Ameliorat
6.
Protezare valv aortic
pentru insuficien valvular
aortic reumatismal sever
3 3 Ciprofloxacin Favorabil
7.
Arteriopatie obliterant
(operat)
1 1 Amikacin Favorabil
8.
Pericardotomie pentru
pericardit constrictiv,
pacient intubat
1 1 Pefloxacin
Insuficien
multiorganic,
exitus
9.
Anevrism disecant de aort
(operat) pacient intubat
1 1 Tienam Favorabil
10.
Carcinom hepato-celular
metastazat pulmonar
1 1
Chimioterapie
cu citostatice
Insuficien
multiorganic,
exitus
11.
Arsur gr. II / III (60 % din
suprafaa corporal)
1 1
Vancomicin,
Imipenem,
Ciprofloxacin,
Netilmicin
Favorabil
12. Bronhopneumonie acut 1 1
Meropenem,
Teicoplanin,
Ciprofloxacin
Favorabil
13. Arsur gr. II / III 1 1
Imipenem,
ciprofloxacin
Favorabil
14. Arsur gr. II / III 1 1
Imipenem,
Teicoplanin,
Ticarcilin,
Ac. clavulanic
Favorabil
15.
Politraumatism prin accident
rutier
1 1
Imipenem,
Ticarcilin,
Ac. clavulanic
Favorabil
16. Plgi mucate 2 2
Imipenem,
Teicoplanin,
Ticarcilin,
Ac. clavulanic
Exitus
17. Osteomielit 1 1
Fortum,
Amikacin
Favorabil
90
18. Arsur gr. III / IV 2 2
Ciprofloxacin,
Linezolid
Exitus
19. Sindrom febril prelungit 1 1
Cefoperazon-
sulbactam,
Gentamicin
Favorabil
20.
Pseudochist de pancreas
(operat)
1 1
Meropenem,
Amikacin,
Linezolid
Exitus
21. Megacolon (operat) 1 1
Meropenem,
Teicoplanin
Favorabil
22. Atrezie de esofag (operat) 1 1
Teicoplanin,
Cefoperazon-
sulbactam,
Ciprofloxacin
Favorabil
23. Arsur de gradul II / III 1 1
Amikacin,
Ciprofloxacin
Favorabil
24.
Pancreatit post-traumatic
(operat)
1 1
Imipenem,
Linezolid
Favorabil
25.
Megacolon congenital, ocluzie
intestinal (operat)
1 1 Amikacin Favorabil
26.
Pseudochist de pancreas
(operat)
1 1 Fortum Favorabil
27.
Diabet insulino-dependent
decompensat,
bronhopneumonie fungic,
sepsis
1 1 Ceftriaxon
Insuficien
multiorganic,
exitus
28. Sepsis postoperator 1 1 Imipenem
Insuficien
multiorganic,
exitus
29. Defect septo-atrial (oprerat) 2 1 Ceftriaxon Favorabil
30. Boala Hodgkin, HIV pozitiv 1 1
Linezolid,
Imipenem
Insuficien
multiorganic,
exitus
31.
Insuficien aortic
(neoperat)
3 2
Ceftriaxon,
Amikacin
Ameliorat
32. Limfom malign 1 1
Linezolid,
Meropenem
Ameliorat


Mediul a fost inoculat cu 200 l suspensie
levuric 0,5 McFarland distribuit uniform prin
strieri n 3 direcii cu ajutorul unui tampon steril.
Suprafaa plcilor astfel nsmnat a fost uscat
la fluxul de aer laminar al unei hote
microbiologice, apoi s-a etalat n centrul acestora
cte un disc de VOR. Plcile au fost incubate 20-
24 ore la 36C1C, dup care s-a msurat
diametrul zonei de inhibare creterii. S-a
considerat c procentul de 80% inhibare a
creterii este aplicabil i n cazul VOR, acesta
fcnd parte tot din grupul derivailor azolici, de
aceea microcoloniile aprute la limita sau
interiorul marginii zonei de inhibiie nu au fost
luate n considerare. Pentru interpretarea
semnificaiei diametrului zonei de inhibiie a
creterii am utilizat recomandrile CLSI, potrivit
crora un diametru mai mare sau egal cu 14 mm
indic sensibilitate.
Rezultate
Majoritatea hemoculturilor s-au pozitivat n
intervalul 48-120 ore, prelungirea incubrii pn
la 6-7 zile fiind necesar doar n cteva cazuri.
Frotiurile executate din hemoculturi dup o
perfect omogenizare a acestora, au relevat n
general prezena levurilor, ns existena n
91
Se observ c agenii etiologici implicai n
apariia fungemiilor la pacienii lotului studiat
aparin unei game largi de specii levurice. Rata
de izolare a speciilor a cror implicare n
producerea fungemiilor a fost mai rar semnalat
n ultimele decenii, este destul de semnificativ
(12/32). Acest fapt confirm tendina general de
augmentare a incidenei infeciilor cu specii
oportuniste, pe fondul diversificrii condiiilor de
receptivitate accentuat a organismelor gazd.
suspensie a particulelor de crbune activ a
ngreunat foarte mult examinarea microscopic i
interpretarea rezultatelor datorit frecvenei mari
a artefactelor, mai ales pe frotiurile necolorate
(figura nr. 1).
n urma efecturii subculturilor pe Agar
Sabouraud, am izolat 32 tulpini levurice care au
fost identificate ulterior prin teste morfologice i
biochimice (tabelul 2).



Figura 1
Hemocultur pozitiv pentru levuri (sgeata indic o celul levuric burjeonat)


Tabel 2
Frecvena speciilor identificate n hemoculturi

Specia identificat
Frecvena
absolut
(n)
Frecvena
relativ
(%)
C. albicans 10 / 32 31.25
C. parapsilosis 4 / 32 12.5
C. tropicalis 3 / 32 9.38
C. pelliculosa 3 / 32 9.38
C. krusei 2 / 32 6.25
C. sake 2 / 32 6.25
C. dubliniensis 1/ 32 3.12
C. norvegiensis 1/ 32 3.12
C. norvegica 1/ 32 3.12
C. kefyr 1/ 32 3.12
C. intermedia 1/ 32 3.12
C. valida 1/ 32 3.12
Rhodotorula glutinis 1/ 32 3.12
Trichosporon asahii 1/ 32 3.12

92

93
Rata hemoculturilor pozitive pentru levuri n
perioada studiat a fost de 2,94% (32
hemoculturi pozitive din 1087 practicate), iar
rata mortalitii la pacienii cu fungemie levuro-
dependent a atins nivelul de 38% fiind
comparabil cu cea semnalat de unele studii (4,
11, 12) sau mai redus n comparaie cu cea
indicat de altele (13, 14).
n ceea ce privete comportamentul fa de
antifungice al tulpinilor izolate, datele prezentate
n tabelul nr. 3 indic CMI
90
-uri plasate n zona
de sensibilitate pentru 5FC, AMB i FCA. n
schimb, n cazul ITR, tulpinile testate au
exprimat CMI
90
de 1g/ml valoare ce aparine
zonei de rezisten.
Analiznd frecvena cumulativ a valorilor CMI,
putem observa c fa de AMB toate tulpinile
testate s-au manifestat ca sensibile (tabelul 4)
ceea ce recomand AMB, n special formulrile
lipozomale

cu nefrotoxicitate redus n terapia de
prim intenie a fungemiilor i altor infecii
invazive levuro-dependente.
Variabilitatea procentului de tulpini inactivate
depinde de concentraia AMB n proporie de
68,10 %, coeficientul de corelaie multipl avnd
valoarea R
2
= 0,681 (figura nr.2). Regresia
procentului de tulpini inactivate dependent de
concentraia antifungicului are urmtoarea
ecuaie: y = 0.4503Ln(x) + 0.2953 .




Tabel 3
Sensibilitatea in vitro a celor 32 tulpini la
5FC, AMB, FCA, ITR (sinteza datelor)
Agent
antifungic
Intervalul
concentraiilor
(g/ml)
Media
geometrica
(g/ml)
CMI
50
(g/ml)
CMI
90
(g/ml)
5FC 0,5-64 1,163 0,5 8
AMB 0,5-16 0,533 0,5 0,5
FCA 0,25-128 0,822 0,5 8
ITR 0,125-4 0,205 0,125 1




Tabel 4
Frecvena CMI ale AMB pentru cele 32 de tulpini testate

Concentraia
antifungicului
(g/ml)
0,5 1 2 4 8 16
Frecvena
absolut (n)
29 3 0 0 0 0
Frecvena
cumulativ(%)
90.62 100 100 100 100 100




Figura 2
Frecvena cumulativ a CMI i valoarea coeficientului de corelaie multipl (R
2
) n cazul AMB


n cazul 5FC (tabelul 5), rata de sensibilitate
determinat a fost de 93,73%, doar 2 tulpini (C.
krusei i C. norvegensis) manifestndu-se ca
rezistente. ns, datorit faptului c rezistena
apare rapid cnd 5FC este folosit ca unic agent
terapeutic, n general ea nu este recomandat ca
atare n terapie. Asocierea sa cu AMB a
demonstrat un efect terapeutic salutar, ns nu
exist studii care s indice dac aceast
combinaie este superioar ca efect
fluconazolului, amfotericinei B sau
amfotericinei B lipozomale (15).
Variabilitatea procentului de tulpini inactivate
depinde de concentraia 5FC n proporie de
89,57%, coeficientul de corelaie multipl avnd
valoarea R
2
= 0,8957 (figura nr. 3). Regresia
procentului de tulpini inactivate dependent de
concentraia antifungicului are urmtoarea
ecuaie: y = 0.4068Ln(x) + 0.1749 .
Fa de FCA antifungicul de elecie cel mai
utilizat, 90,62% dintre tulpini au exprimat CMI-
uri care aparin zonei de sensibilitate (tabelul 6).
Dintre tulpinile sensibile, nici una nu a prezentat
CMI-ul plasat n zona de SDD (sensibilitate
dependent de doz, aic, 16-32 g/ml), toate
CMI-urile determinate avnd valori cuprinse n
intervalul 0,25-8 g/ml, ceea ce indic
posibilitatea obinerii unui efect terapeutic
favorabil cu doze reduse de antifungic (figura nr.
4).


Tabel 5
Frecvena CMI ale 5FC pentru cele 32 de tulpini testate

Concentraia
antifungicului
(g/ml)
0,5 1 2 4 8 16 32 64
Frecvena
absolut (n)
19 5 2 0 3 1 1 1
Frecvena
Cumulativ
(%)
59.37 75.00 81.25 81.25 90.62 93.75 96.87 100



94


Figura 3
Frecvena cumulativ a CMI i valoarea coeficientului de corelaie multipl (R
2
) n cazul 5FC



Tabel 6
Frecvena CMI ale FCA pentru cele 32 de tulpini testate

Concentraia
antifungicului
(g/ml)
0.25 0.5 1 2 4 8 16 32 64 128
Frecvena
absolut (n)
15 6 4 1 2 1 0 0 2 1
Frecvena
cumulativ(%)
46.87 65.62 78.12 81.25 87.50 90.63 90.63 90.63 96.87 100


Variabilitatea procentului de tulpini inactivate
depinde de concentraia FCA n proporie de
92,59 %, coeficientul de corelaie multipl avnd
valoarea R
2
= 0,9259 (figura nr. 4). Regresia
procentului de tulpini inactivate dependent de
concentraia antifungicului are urmtoarea
ecuaie: y = 0.3775Ln(x) + 0.1522 .
Spre deosebire de FCA, n cazul ITR s-a
observat c valorile CMI se plaseaz n intervalul
de sensibilitate doar pentru 28 tulpini, celelalte 4
tulpini manifestndu-se ca rezistente (tabelul 7).



Figura 4
Frecvena cumulativ a CMI
i valoarea coeficientului de corelaie multipl (R
2
) n cazul FCA
95
Tabelul 7
Frecvena CMI ale ITR pentru cele 32 de tulpini testate

Concentraia
antifungicului
(g/ml)
0.125 0.25 0.5 1 2 4
Frecvena
absolut (n)
22 2 4 3 1 0
Frecvena
Cumulativ
(%)
68.75 75.00 87.50 96.87 100 100


Variabilitatea procentului de tulpini inactivate
depinde de concentraia ITR n proporie de
89,46%, coeficientul de corelaie multipl avnd
valoarea R
2
= 0,8946 (figura nr. 5). Regresia
procentului de tulpini inactivate dependent de
concentraia antifungicului are urmtoarea
ecuaie: y = 0.4899Ln(x) + 0.1579.
Rata rezistenei la FCA a tulpinilor testate a fost
de 9,38% (tabelul 8), comparabil cu cea
semnalat n alte studii (10). Tulpinile rezistente
au aparinut urmtoarelor specii: C. krusei (2
tulpini) i C.norvegensis (1 tulpin). Important
de subliniat este faptul c toate tulpinile de C.
albicans au manifestat sensibilitate fa de FCA.





Figura 5
Frecvena cumulativ a CMI
i valoarea coeficientului de corelaie multipl (R
2
) n cazul ITR



Tabel 8
Rezistena la antifungice a tulpinilor izolate din hemoculturi

Agent
antifungic
5FC AMB FCA ITR
Nr. tulpini
rezistente
5 0 3 4
Frecvena
tulpinilor
rezistente
(%)
6.25 0 9.38 12.5


96

97
Rata rezistenei la ITR incumb aceleai aspecte
practice, ea fiind sensibil apropiat de cea a
rezistenei la FCA (figura nr. 6).
Analiza comparativ prin testul chi-ptrat a
gradului de rezisten a tulpinilor levurice izolate
din fungemii la antifungicele utilizate, a
demonstrat c nu exist diferene semnificative,
efectul exercitat de antifungicele testate fiind
comparabil (p > 0,05) tabelul 9.
Pentru VOR, n urma msurrii diametrului
zonei de inhibare a creterii pentru cele 32 de
tulpini testate, s-au obinut n toate cazurile
valori mai mari de 14 mm, deci plasate n zona
de sensibilitate. Principalii indicatori statistici ai
valorii diametrului zonei de inhibare a creterii
sunt prezentai n tabelul 10.
Pentru tulpinile non-Candida testate, dei nu
exist nc norme de interpretare a sensibilitii,
datorit valorii mari a diametrului zonei de
inhibare a creterii (peste 25 mm) le vom
considera sensibile.





Figura 6
Frecvena tulpinilor rezistente
n cazul fiecrui compus antifungic


Tabel 9
Analiza comparativ a rezistenei tulpinilor
izolate din infecii sistemice

Antifungicele
comparate

2
p
5FC vs. AMB 0,781 > 0,05
FCA vs. AMB 0,281 > 0,05
ITR vs. AMB 0,500 > 0,05



Tabel 10
Principalii indicatori statistici
ai diametrelor zonelor de inhibare a creterii

Media
aritmetic
(mm)
Intervalul de
ncredere al
mediei
(=0,05)
Deviaia
standard
34,34 32,245-36,435 6,04

Discuii
Frecvena redus a izolrii tulpinilor de Candida
albicans, semnalat n studiul de fa - 31,25%,
este raportat i de alte studii (6, 16, 17) i se
explic prin creterea incidenei folosirii
cateterelor intravasculare, a medicaiei
imunosupresoare, a intubrii endotraheale
prelungite i antibioticelor cu spectru larg care
predispun la multiplicarea levurilor comensale
sau epifite ajunse accidental n mediul intern al
organismului gazd imunocompromis.
Spre deosebire de majoritatea studiilor din SUA
i Europa, (10, 18, 19, 20) care plaseaz Candida
glabrata pe locul al-II-lea ca frecven a
implicrii n fungemii, n studiul efectuat nu s-a
identificat nici o tulpin de C. glabrata, tulpinile
de Candida parapsilosis succednd ca frecven
celor de C. albicans. Totui, alte studii
ntreprinse n Brazilia, Italia, respectiv Atlanta
(SUA), plaseaz C. parapsilosis pe locul al-II-lea
sau chiar pe primul loc ca frecven n
candidemii (14, 17, 21). Variaiile procentuale
care plaseaz fie C. glabrata, fie C. parapsilosis
pe locul al-II-lea depind de mrimea lotului
studiat, contextul clinic, patologia de fond,
regiunea unde s-au ntreprins investigaiile,
categoria de vrst a pacienilor. Cert este faptul
c aceste dou specii egaleaz sau uneori chiar
devanseaz prin frecvena implicrii lor n
apariia candidemiilor agentul etiologic tip
C. albicans.
Un aspect interesant care merit subliniat, este
faptul c cele 3 tulpini aparinnd speciei
Candida pelliculosa au fost izolate de la pacieni
internai n unitatea de terapie intensiv a
aceluiai spital, ceea ce poate indica un caracter
nosocomial al infeciei.
Fluconazolul rmne antifungicul de elecie n
infeciile invazive levuro-dependente produse de
C.albicans i alte specii ale genului Candida,
mai puin a celor produse de tulpini aparinnd
speciilor cu frecven crescut a rezistenei (C.
krusei, C. norvegensis, C. glabrata) unde se
recomand nlocuirea sa cu AMB. Datorit
faptului c exist specii cu rezisten genetic la
FCA (C.krusei) sau specii ale cror tulpini
manifest frecvent rezisten dobndit la FCA
(C. glabrata, C. norvegensis, C.famata,
Rhodotorula spp.), utilizarea acestuia ca agent
terapeutic de prim intenie va fi obligatoriu
precedat de identificarea speciei pentru a evita
eecurile terapeutice sau agravarea infeciei.
Terapia empiric cu FCA poate fi fatal
pacientului. n plus, nu se recomand utilizarea
FCA i a ITR n infecii sistemice produse de
specii non-C.albicans fr testarea prealabil a
sensibilitii la aceste antifungice a tulpinilor
implicate.
Datele obinute indic faptul c toate tulpinile
izolate din fungemii sunt sensibile la VOR, fapt
care recomand utilizarea VOR ca agent
terapeutic de rezerv n infecii levurice invazive,
n cazul n care tulpinile incriminate exprim o
rezisten la agenii antifungici de prim intenie
(FCA, AMB, ITR).
SUMMARY
Fungemia due to yeasts: results of a
four-year multicenter study done in Iasi
(Romania)
Aim: This paper presents the results of a
study regarding fungemia made in three
tertiary hospitals from Iai between 2001
and 2005. Material and method: The study
has included a total number of 32 patients
hospitalized in surgery or intensive care
departments and whose blood cultures
exhibited fungemia due to yeasts. The
clinical strains have been identified on the
basis of morphological and biochemical
features, while the antifungal susceptibility
testing has been performed using ATB
fungus 2 strips and voriconazole disks. The
significance of minimal inhibitory
concentrations has been interpreted
according to CLSI standards. Results: The
frequency of species implied in fungemia
etiology has been the following: Candida
albicans 31.25%, C. parapsilosis 12.50%, C.
tropicalis 9.38%, C. pelliculosa 9.38%, C.
krusei 6.25%, C. sake 6.25%, C.
dubliniensis 3.12%, C. norvegiensis 3.12%,
C. norvegica 3.12%, C. kefyr 3.12%, C.
intermedia 3.12%, C. valida 3.12%,
Rhodotorula glutinis 3.12%, and
Trichosporon asahii 3.12%. The resistance
rate to main antifungals has varied between
0.00% in case of amphotericin B and
voriconazole, and 12.50% for itraconazole.
The mortality in patients diagnosed with
yeast fungemia has been of 38%.
98
Disscusion: It can be noted a relatively low
frequency of C. albicans strains and the
emergence of fungemia due to non-albicans
species accordingly to worldwide trends.
The resistance rate to antifungals is still low,
the fluconazole being the first intention drug
recommended in fight against bloodstream
yeast infections. The liposomal amphotericin
B and voriconazole could be used as a
successfully alternative therapy in azoles
resistant infections.
Keywords: fungemia, etiology, yeasts,
antifungals, resistance.

Mulumiri
Doresc s-mi exprim i pe aceast cale ntreaga gratitudine doamnelor Prof. Dr. Gabriela Coman, Biol.
Dr. Maria Crlan, Dr. Maria Dan, Dr. Olivia Dorneanu i Dr. Daniela Bosnea pentru furnizarea tulpinilor
de studiu i excelenta colaborare.



Bibliografie


1. Purcaru F, Georgescu I, Ciurea P, Cupa A,
Sabetay C. Sepsis. oc septic. Disfuncii
multiorganice (MODS); Craiova: Ed.
Medical Universitar; 2000.
2. Richards M J, Edwards J R, Culver D H et al.
Nosocomial infections in medical intensive
care units in the United States; Critical Care
Medicine 1999; 27:887-892.
3. Rangel-Frausto M S, Wiblin T, Blumberg H M
et al. National epidemiology of mycoses
survey (NEMIS): variations in rates of
bloodstream infections due to Candida species
in seven surgical intensive care units and six
neonatal intensive care units; Clinical
Infectious Diseases 1999; 29:253-258.
4. Grillot R, Fricker-Hidalgo H, Lebeau B, Faure
O State of the art of the blood culture for
diagnosis of invasive fungal infections;
Mikologia Lekarska 2004; 11(Suppl.1):26.
5. Pfaller M A, Jones R N, Messer S A et al.
National surveillance of nosocomial blood
stream infection due to Candida species other
than Candida albicans: frequency of
occurrence and antifungal susceptibility in the
SCOPE program; Diagnostic Microbiology
and Infectious Disease 1998; 30:121-129.
6. Pfaller M A, Messer S A, Hollis R J et al.
Trends in species distribution and
susceptibility to fluconazole among blood
stream isolates of Candida species in the
United States; Diagnostic Microbiology and
Infectious Disease 1999; 33:217-222.
7. Richardson M D, Warnock D W. Fungal
infection-Diagnosis and Management; 3
rd

edn; Oxford: Blackwell Publishing Ltd; 2003.
8. Tortorano A M, Prigitano A, Biraghi E, Rigoni
A L, Viviani M A ECMM survey of
candidemia in Italy: in vitro susceptibility of
375 Candida albicans isolates and biofilm
production; Mikologia Lekarska 2004;
11(Suppl.1):46.
9. Ostrosky-Zeichner L, Rex J H, Pappas G P et
al. Antifungal susceptibility survey of 2000
bloodstream Candida isolates in the United
States; Antimicrobial Agents and
Chemotherapy 2003; 47(10):3149-3154.
10. Pfaller M A, Diekema D J Twelve years of
fluconazole in clinical practice: global trends
in species distribution and fluconazole
susceptibility of bloodstream isolates of
Candida; Clinical Microbiology and
Infection2004; 10(Suppl.1):11-23.
11. Petri M G, Konig J, Moecke H P et al.
Epidemiology of invasive mycosis in ICU
patients: a prospective multicenter study in 435
non-neutropenic patients; Intensive Care
Medicine 1997; 23:317-325.
12. Wey S B, Mori M, Pfaller M A, Woolson R F,
Wenzel R P Hospital acquired candidemia:
attributable mortality and excess length of
stay; Archives of Internal Medicine 1998;
148:2642-2645.
13. Wey S B, Mori M, Pfaller M A, Woolson R F,
Wenzel R P Risk factors for hospital-
acquired candidemia: a matched case-control
study; Archives of Internal Medicine 1989;
149: 2349-2353.
14. Smith A Identifying Candida species An
increasing cause of serious systemic
infections; European Clinical Laboratory
2004; 23(6):12-15.
99
15. Kujath P, Lerch K, Kochendorfer P et al.
Comparative study of the efficacy of
fluconazole versus amphotericin B/flucytosine
in surgical patients with systemic mycoses;
Infection 1993; 21:376-382.
16. Nguyen M H, Peacock J E Jr, Morris A J et al.
The changing face of candidemia:
Emergence of non-C. albicans species and
antifungal reyistance; American Journal of
Medicine 1996; 100:617-623.
17. Pasqualotto A C, Antunes A G V, Diaz M C et
al. Candidemia in a brazilian tertiary care
hospital: species distribution and antifungal
susceptibility patterns; Mikologia Lekarska
2004; 11(Suppl.1):43-44.
18. Kawecki D, Swoboda-Kopec E, Wroblewska
M et al. Parenteral nutrition as a risk factor
for development of fungal infections in
patients hospitalised in the surgical ward;
Mikologia Lekarska 2004; 11(Suppl.1):32-33.
19. Peres-Bota D, Rodriguez-Villalobos H,
Dimopoulos G et al. Potential risk factors for
infection with Candida spp. in critically ill
patients; Clinical Microbiology and Infection
2004; 10(6):550-555.
20. Swoboda-Kopec E, Kawecki D, Wroblewska
M et al. Characteristics of fungal strains
isolated from patients hospitalised in the
Department of Vascular Surgery and
Transplantation, Medical University of
Warsaw; Mikologia Lekarska 2004;
11(Suppl.1):33-34.
21. Cano M V, Perz J F, Craig A S et al.
Candidemia in pediatric outpatients receiving
home total parenteral nutrition; Medical
Mycology 2005; 43(3):219-225.





100
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 101-106
101

Evoluia tricofiiei ntr-o ferm de taurine n
condiiile vaccinrii specifice i/sau nevaccinrii

I.L. MITREA
1
, V. NICA
2
, Mariana IONI
1
, Gh. SOLCAN
3
,
Elena NICA
2
, Carmen SOLCAN
3
, M.C. BUZATU
1

1
Facultatea de Medicin Veterinar Bucureti
2
Agrozootehnica Dumbrava
3
Facultatea de Medicin Veterinar Iai


Introducere
Dermatofitoz contagioas, cu evoluie
enzootic, produs de diferite specii de
Tricophyton, tricofiia afecteaz mamiferele i
uneori i psrile, manifestndu-se prin
dermatoz crustoas, cronic, dermatit i
hiperkeratoz (4, 5, 8, 9). Cea mai mare
rspndire a tricofiiei este la bovine, boala la
aceast specie fiind determinat n majoritatea
cazurilor de Tricophyton verrucosum.
Prin evoluia sa benign i tratamentul de durat,
tricofiia determin pagube economice
nsemnate, n special la tineret categoria cea
mai afectat. Boala prezint, ns i o importan
social, prin aspectul zoonotic; se poate
transmite la personalul care vine n contact cu
animalele afectate (ngrijitori, medici veterinari).
n vederea combaterii bolii au fost concepute i
testate diverse formule terapeutice, utiliznd
substane din grupe diferite (antiseptice,
antifungice, antiinflamatoare, antibiotice),
utilizate singure sau n asocieri variate, n
tratamente topice sau sistemice (5, 8, 10).
Programele de control parazitologic a tricofiiei
includ ns, n ultima perioad, imunoprofilaxia
ca o msur important (2, 3, 6, 7). Au fost
produse i testate mai multe vaccinuri, utilizate
n scheme variate de prevenire sau chiar de
combatere a bolii, cu rezultate demne de luat n
consideraie.
n prezenta lucrare se prezint modul de evoluie
a tricofiiei, pe parcursul a 4 ani, ntr-o ferm de
vaci pentru lapte, n condiii de vaccinare i,
respectiv nevaccinare mpotriva tricofiiei.

Material i metode
Evoluia tricofiiei bovine n condiiile realizrii
imunoprofilaxiei cu un vaccin specific sau a
nevaccinrii, a fost monitorizat la o ferm
specializat de vaci pentru lapte (D), n care se
cresc vaci din rasa Holstein sau hibrizi. Efectivul
total al fermei este de 260 de animale, cu
urmtoarea structur:
- vaci de lapte 100,
- juninci gestante 20,
- juninci peste 12 luni 35,
- tineret 6-12 luni 20,
- viei 0-6 luni 85.
Sistemul de cretere i ntreinere este cel liber cu
aternut permanent pentru viei i tineret i pat n
boxe pentru vacile de lapte. Furajarea se
realizeaz cu reet unic, pentru fiecare categorie,
pe tot parcursul anului. Astfel, reeta unei vaci de
lapte include: 35 kg siloz, 4-5 kg fn, 4-5 kg
concentrate, 8-10 kg cartofi, 1 kg rot i 100 g
p.v.m. Pentru viei (categoria 0-6 luni), raia
include: lapte pn la 6 l/zi, fn i concentrate la
discreie, iar la tineretul trecut peste 6 luni, se
include i silozul. Acesta se tamponeaz cu
carbonat de calciu, n adaos de 0,5%.
Curenie i dezinfecie se realizeaz periodic,
conform tehnologiei, iar o dat pe an, se
realizeaz dezinfecie general a tuturor spaiilor
de cretere i exploatare (cu soluii de sod
caustic i formol). Animalele sunt
dehelmintizate periodic, primvara i toamna.
Imunoprofilaxia s-a realizat prin administrarea
unui vaccin specific (Tricovac), avnd un
coninut de 75% - suspensie n soluie fiziologic
tamponat de spori i fragmente de hife de
Tricophyton verrucosum, asigurndu-se 1x10
7

UFC/doz vaccinal. Administrarea vaccinului s-
a realizat conform instruciunilor de utilizare,
inoculndu-se i.m. cte 5 ml din vaccin, dup
rehidratare n diluantul corespunztor, la viei (0-
6 luni) i cte 10 ml, la animale mai mari de 6
luni. Vaccinarea s-a repetat cu aceeai doz, la 2
sptmni de la prima inoculare. Aciunea
imunoprofilactic s-a realizat n luna octombrie.
Evaluarea rezultatului imunoprofilaxiei s-a
realizat la viei i tineret, categoriile cele mai
sensibile i la care se consemneaz forme grave
de boal, inclusiv generalizate.
Vaccinarea s-a realizat n primul an la care
animalele din toate categoriile, cu meninerea
unor animale nevaccinate (martor), n al doilea
an nu s-a realizat vaccinarea, iar n anul 3 i 4
animalele au fost vaccinate din nou (v. schema
experimental).

Tabel 1
Schema experimental a imunoprofilaxiei n tricofiie la bovine

Viei (0-6 luni) Tineret (peste 6 luni) An/Perioad studiu
(oct. - sept.) Vaccinai (n) Nevaccinai (n) Vaccinai (n) Nevaccinai (n)
An I
(2003-2004)
25 5 10 2
An II
(2004-2005)
- 40 - 10
An III
(2005-2006)
50 10 10 2
An IV
(2006-2007)
50 5 10 2



Att animalele vaccinate, ct i cele nevaccinate
au fost ntreinute i furajate identic, urmrindu-
se evoluia leziunilor i eventuale manifestri
clinice, sptmnal, timp de 3 luni dup
vaccinare, iar ulterior, observaii lunare pe
parcursul unui an de studiu.
Rezultate i discuii
La debutul experimentului (oct. 2003), s-a
consemnat prezena bolii n efectivele luate n
studiu. Astfel, vieii (0-6 luni), dar i tineretul de
peste 6 luni, prezentau leziuni specifice (noduli i
cruste, placarde tricofitice), la majoritatea
animalelor (peste 95%). La vaci, s-au constatat
zone furfuracee cu calvescen difuz, prezente
pe prile laterale, toracice i abdominale.
Confirmarea bolii s-a realizat prin examen
microscopic direct i cultivarea pe mediul
Sabouraud, identificndu-se micetul Tricophyton
verrucosum.
Observaiile efectuate au consemnat o evoluie
exploziv, cu aspect invadant al leziunilor, cu
formarea de cruste groase i placarde tricofitice
specifice, ncepnd din luna noiembrie i
decembrie. Acest fapt poate fi pus pe seama
debutului hrnirii cu siloz, hrnire care determin
o modificare a pH-ului organismului, inclusiv al
pH-ului dermic, prin aciditatea produs de
furajul nsilozat, n pofida utilizrii carbonatului
de calciu, n scopul anihilrii acestuia.
Totodat, n lunile de iarn se realizeaz condiii
favorizante (n special umiditate excesiv n
adposturi) dezvoltrii masive a fungilor de
Tricophyton i evoluiei explozive a bolii.
La animalele vaccinate, nu s-a nregistrat acest
tip de evoluie a bolii. La acestea, s-a constatat
o extindere mult mai redus a leziunilor,
majoritar noduli i cruste reduse, suprafaa
acestora fiind de doar 10% din cea nregistrat
la animalele nevaccinate, n perioada evoluiei
maxime a bolii (noiembrie - decembrie).
Rezultatele evoluiei comparative a bolii la cele
dou categorii de animale (vaccinate i
nevaccinate), sunt prezentate n tabelul 2.

102




Figura 1
Placarde i noduli tricofitici la viel
Figura 2
Placarde i noduli tricofitici la tineret





103



Figura 3
Placarde tricofitice la viel nevaccinat


Figura 4
Evoluia placardelor tricofitice la 2 spt. post-vaccinare
104
Tabel 2
Evoluia tricofiiei la animale (viei i tineret taurin) vaccinate i nevaccinate


Evoluia leziunilor post-vaccinal An
studiu
Animale
vaccinate
Animale
nevaccinate 2 spt. 3 spt. 1 lun 2 luni 3 luni
Eficacitate
(%)
25 viei evoluie discret cu
noduli (< 1,5 cm)
reducerea
nr. i
mrimea
nodulilor
proces
regenerare
evident a
tegumentului;
2 viei - cruste
vindecare
complet
23 viei
92%
5 viei cretere nr. noduli;
formare cruste i
placarde tricofitice
cruste i placarde tricofitice
ntinse; 1 animal - aspect
generalizat al bolii
meninere
cruste,
placarde
0%
10 tineret evoluie cu formare
de noduli
reducere
nr. i
mrime
noduli
regenerare
tegument; 1
animal
noduli i
cruste
vindecare
complet
9 animale
90%
I
2 tineret cretere nr. noduli;
formare cruste i
placarde tricofitice
cruste i placarde tricofitice
ntinse cu aspect; 1 animal
- aspect generalizat al bolii
meninere
cruste,
placarde
0%
40 viei cretere nr. noduli;
formare cruste i
placarde tricofitice
cruste i placarde tricofitice
ntinse cu aspect; 5 animale
- aspect generalizat al bolii
meninere
cruste,
placarde
0%
II
10 tineret cretere nr. noduli;
formare cruste i
placarde tricofitice
cruste i placarde tricofitice
ntinse cu aspect; 1 animal
- aspect generalizat al bolii
meninere
cruste,
placarde
0%
50 viei evoluie discret cu
noduli (< 1,5 cm)
reducerea
nr. i
mrimea
nodulilor
proces
regenerare
evident a
tegumentului;
3 viei - cruste
vindecare
complet
47 viei
94%
10 viei cretere nr. noduli;
formare cruste i
placarde tricofitice
cruste i placarde tricofitice
ntinse; 1 animal - aspect
generalizat al bolii
meninere
cruste,
placarde
0%
10 tineret evoluie discret cu
noduli (< 1 cm)
reducerea
nr. i
mrimea
nodulilor
regenerare
evident a
tegumentului;
1 animal -
cruste
vindecare
complet
9 animale
90%
III
2 tineret cretere nr. noduli;
formare cruste i
placarde tricofitice
cruste i placarde tricofitice
ntinse cu aspect; 1 animal
- aspect generalizat al bolii
meninere
cruste,
placarde
0%
50 viei evoluie discret cu
noduli (< 1,5 cm)
reducerea
nr. i
mrimea
nodulilor
proces
regenerare
evident a
tegumentului;
2 viei - cruste
vindecare
complet
48 viei
96%
5 viei cretere nr. noduli;
formare cruste i
placarde tricofitice
cruste i placarde tricofitice
ntinse; 1 animal - aspect
generalizat al bolii
meninere
cruste,
placarde
0%
10 tineret evoluie discret cu
noduli (< 1 cm)
reducerea
nr. i
mrimea
nodulilor
regenerare
evident a
tegumentului;
vindecare
complet
toate
animalele
100%
IV
2 tineret cretere nr. noduli;
formare cruste i
placarde tricofitice
cruste i placarde tricofitice
ntinse cu aspect; 1 animal
- aspect generalizat al bolii
meninere
cruste,
placarde
0%

105
Comparnd modul de evoluiei a bolii la
animalele vaccinate i cele nevaccinate, se
evideniaz o diferen major ntre cele dou
categorii de animale. Astfel, vaccinarea previne
evoluia exploziv, invadant nregistrat la
nceputul sezonului rece (noiembrie-decembrie),
la animale nevaccinate. La 2 luni dup vaccinare,
s-a nregistrat un proces avansat de vindecare, la
puine animale (6-10%), meninndu-se crustele,
dar acestea erau subiri i reduse ca suprafa,
comparativ cu cele iniiale. La acest examen a fost
nregistrat procesul de regenerare a tegumentului,
prezent la toate animalele din loturile vaccinate.
La 3 luni, practic, la majoritatea animalelor
vaccinate (peste 90%) s-a nregistrat vindecarea
complet, un numr redus prezentnd cruste
subiri. Meninerea crustelor la acestea,
evideniaz necesitatea interveniei terapeutice
locale, cu medicaie specific, nsoit eventual de
ndeprtarea mecanic a crustelor.
Rezultatele obinute sunt n concordan cu cele
semnalate i de ali autori n utilizarea
vaccinurilor antitricofitice n imunoprofilaxia sau
imunoterapia bolii (1, 3, 7, 10)
La animalele nevaccinate s-a nregistrat evoluia
exploziv masiv, masiv a bolii, n toi anii, la
debutul sezonului rece (noiembrie-decembrie), cu
extinderea centrifug a leziunilor, cu organizarea
de mase paracheratozice masive, urmate de
procese de hipercheratoz. Drept consecin, s-au
format placarde tricofitice ntinse, mai ales n zona
capului, gtului, dar i alte regiuni: torace, crup,
membre, uger, scrotum. La examenele efectuate la
2 luni, 3 luni i ulterior, s-a constatat o limitare a
procesului hipercheratozic, cu circumscrierea
crustelor, iar la unele animale chiar o reducere a
procesului para- i hipercheratozic, cu subierea
crustelor i reducerea numeric a placardelor i
nodulilor. Leziunile s-au meninut ns i n
urmtoarele luni de observaie.
Concluzii
1. Analiza evoluiei tricofiiei ntr-o ferm de
cretere a vacilor pentru lapte, a evideniat
prezena i perenitatea acestei dermatofitoze n
efectivul de animale luat n studiu.
2. Vaccinul utilizat (Tricovac), administrat i.m.
n doz de 5 ml la viei (0-6 luni) i 10 ml la
animale peste 6 luni, repetat la 2 sptmni, a
asigurat o protecie de 92-96% la animale
vaccinate.
3. Administrarea vaccinului impune urmrirea
evoluiei bolii postvaccinal i eventuala
intervenie terapeutic la animalele la care nu s-a
realizat vindecarea complet.
4. Utilizarea vaccinului nu exclude, ci trebuie
nsoit de msuri generale de curenie i
dezinfecie n realizarea programului de
combatere a acestei dermatofitoze n fermele n
care evolueaz boala.

Bibliografie

1. Drbu Gh., Oprescu I., Morariu S., Radbea
Narcisa, Mate F., 2004. Cercetri terapeutice n
tricofiia vieilor, Scientia Parasitologica, 1-2:54-
58.
2. Gudding R, A Lund, 1995. Immunoprophylaxis of
bovine dermatophytosis. Can Vet J.; 36(5): 302
306.
3. Gudding R, Naess B., 1986. Vaccination of cattle
against ringworm caused by Trichophyton
verrucosum. Am J Vet Res.;47(11):2415-7.
4. Lungu Tr., Vartic N., Dulceanu N., Cosoroab I.,
uteu I., 1982. Patologia i clinica bolilor
parazitare. Editura Didactic i Pedagogic,
Bucureti.
5. Mitrea I.L., Gh. Solcan, 2006. Dermatopatologia
animalelor de ferm. Editura Medical Veterinar,
Bucureti.
6. Rybnikr A, Chumela J, Vrzal V, Krupka V.,
1991. Immunity in cattle vaccinated against
ringworm. Mycoses; 34(9-10):433.
7. Rybnikr A, Vrzal V, Chumela J., 1998. Protective
efficacy of vaccines against bovine dermato-
phytosis after double and single vaccination.
Mycoses., 41(1-2):83-6.
8. uteu I., Dulceanu N., 2001. Parazitozele cutanate
la animale. Ed. Risoprint Cluj-Napoca.
9. uteu i Cozma V., 2004. Parazitologie clinic
veterinar, vol. II, Ed. Risoprint Cluj Napoca
10. Trziu E., 1998. Profilaxia i combaterea tricofiiei
la taurine, Tez doctorat, Timioara.

106
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 107-111
107

Aspecte clinice i terapeutice
n malasezioza la cine

Gh. SOLCAN
1
, I.L. MITREA
2

1
Facultatea de Medicin Veterinar Iai, Aleea M. Sadoveanu 8, e-mail: gsolcan@univagro-iasi.ro
2
Facultatea de Medicin Veterinar Bucureti



Malasezioza (pitirosporoza) este o levuroz
datorat multiplicrii anormale la suprafaa
tegumentului i a conductului auditiv exten a
levurilor lipofile din genul Malassezia
(Pithyrosporum). Sunt levuri lipsite de capsul,
cu nmugurire unipolar din acelai loc, de form
globuloas, ovoid, elipsoid sau chiar cilindric,
msurnd 2-7 m, n raport de specie. Nu
formeaz n organism dect filamente foarte
scurte.
Pe baza cercetrilor de biologie molecular s-au
descris n cadrul genului Malassezia 7 specii: M.
furfur, M. sympodialis, M. pachidermatis, M.
globosa, M. obtusa, M. restricta i M. slooffiae,
dintre care M. furfur este mai frecvent la om i la
caprine (Yager i col., 1993), M. slooffiae
infecteaz suinele, M. pachidermatis, carnivorele
i n special cinii, M. symposialis i M. globosa,
felinele (Guillot i col., 1995, cit. de Paul, 2000).
Infeciile carnivorelor i n special ale cinilor
sunt cele mai frecvente i mai bine cunoscute.
Exist o predispoziie de ras, cel mai frecvent
fiind afectate rasele: Baset, West Higland White
Terrier, Coker Spaniel, Setter, Ciobnesc german
etc, indiferent de vrst i sex. Femelele i
masculii castrai prezint un risc crescut de
infecie. Prezena pliurilor cutanate este de
asemenea un factor predispozant (Guaguere i
Prelaud, 1996).
Miceii se localizeaz preferenial la nivelul
conductului auditiv extern, buzelor i pielii
interdigitale, mucoasei anale i a sacilor anali, de
unde i manifest agresivitatea numai secundar
unor factori favorizani. Fiind lipofili,
patogenitatea este favorizat de secreia excesiv
de cerumen sau sebum, umiditatea excesiv, stri
de imunodepresie (hipercorticism, hipotiroidie),
afeciuni congenitale, stri de hipersensibilizare
(atopii cronice), tratamente abuzive cu
antibiotice etc. Din experiena noastr infecia
este cel mai adesea secundar dermatitelor
seboreice cu etiologie divers, mai frecvent
alergice, tratate prelungit cu corticoizi.
Manifestarea clinic cea mai frecvent este otita
extern ceruminoas. Se ntlnete mai ales la
rasele de cini cu urechi lungi, la care
posibilitile de aerare a conductului auditiv sunt
mai dificile i ca atare acesta ofer condiii
optime pentru dezvoltarea lui M. pachidermatis
(4).
Inflamaia poate fi uni- sau bilateral i se
caracterizeaz prin eritem, tumefierea moderat a
pielii i hiperproducie ceruminoas maronie,
grsoas sau uscat, oxidat, deci cu miros
rnced (Fig. 1). n 42% din cazuri, umiditatea
local favorizeaz grefarea infeciilor secundare,
cele cu Staphylococcus intermedius situndu-se
pe primul plan, transformnd procesul ntr-o otit
supurativ. Eritemului i tumefierii pielii
conductului auditiv i se adaug hiperplazia pielii
asociat cu formarea de mici ulcere ale canalului.
n lumenul acestuia se constat exsudat cenuiu
glbui, uneori de aspectul albuului de ou.
Procesul se extinde adesea la urechea medie i
mai rar la cea intern (2). Otita cronic este
adesea hiperplazic, verucoas, foarte dificil de
tratat. Secundar otitei se poate ntlni uneori
dermatita piotraumatic la baza pavilionului
auricular (Fig. 3).
Diagnosticul se precizeaz prin examenul
cerumenului etalat pe lam i colorat Gram sau
May-Grnwald-Giemsa i cultivarea levurii pe
mediu Sabouraud cu adios de ulei de msline.
Dermatita seboreic se traduce prin alopecie
difuz, zone eritematoase (macule), papule i
cruste, cu marginile neregulate sau plci de
hipercheratoz, lichenizate i hiperpigmentate,
situate mai frecvent pe fa, regiunea cervical,
axilar, inguinal, ventroabdominal (Fig. 4) i
extremitile distale ale membrelor (2, 9).
Dermatita atopic se asociaz la 28% din cazuri,
iar Chermette i Bussiras (1993) au semnalat la
cinii din rasa West Higland White Terrier
existena unor inflamaii ale limfonodurilor
satelite.
Examenul histologic relev hipercheratoz
superficial i folicular cu numeroase levuri i
filamente PAS pozitive, situate n epidermul
superficial i infundibulul foliculilor piloi. Se
adaug spongioza epidermului cu formarea de
pustule bogate n eozinofile i neutrofile i
proliferarea celulelor bazale ale epidermului,
care ptrund sub form de muguri n stratul
superior al dermului. La nivelul dermului se
constat infiltrate limfocitare, plasmocitare,
mastocitare, eozinofilice i neutrofilice n
complexele glandulare perifoliculare (2, 8, 9).
Noi am constatat n otita extern prezena de
ulceraii i hipertrofia glandelor sebacee.
Dat fiind apartenena lui M. pachidermatis la
flora spontan a pielii se poate vorbi despre o
dermatit malasezian numai la cazurile la care
folosind metode citologice, histologice sau
culturale adecvate, miceii se constat n numr
mare la suprafaa pielii inflamate, (Morris i col.,
1998, Paul, 2000). i n acest caz examenul
scvamelor cutanate mai ales prin metoda PAS
dar i prin Giemsa, albastru de metil sau Diff-
Quick, ct i biopsiile cutanate i mai ales
cultivarea miceilor confirm diagnosticul.
Malassezia spp se difereniaz de alte levuri prin
mugurii cu baz larg de implantare (4).
Miceii cresc pe mediul Sabouraud-dextroz-
agar, la temperatura camerei (mai bine la 30-
35
o
C), izolarea fiind favorizat de adausul pe
mediu a unui strat fin de ulei de msline sau alt
ulei vegetal, n proporie de 2-10% (3, 9). n
leziuni miceii se asociaz frecvent cu
Staphylococcus spp, Streptococcus spp., Candida
spp etc (8, 9).







Figura 1
Otit ceruminoas. Cine Collie 5 ani





108



Figura 2
Otit extern hiperplazic la cine






Figura 3
Dermatit piotraumatic secundar otitei externe

109


Figura 4
Dermatit atopic, complicat cu Malassezia




Tratamentul local se poate face cu miconazol,
nistatin, tiabendazol, ionofori sau clorhexidin.
Pe cale oral se utilizeaz antimicotice sistemice.
Ketoconazolul (Nizoral) este un antifungic
utilizat att n terapia sistemic, ct i sub form
de preparate topice. Este activ mpotriva
levurilor (Candida, Malassezia), mpotriva
fungilor dermatofii (Microsporum,
Trichophyton, Epidermophyton) ca i n
numeroase micoze sistemice: coccidioidomi-
coza, blastomicoza, histoplasmoza, paracocci-
dioidomicoz. n micozele sistemice severe se
poate utiliza n asociere cu amfotericina B.
Dozele obinuite, pe cale oral, sunt de 10-20
mg/kg/zi. n cazul utilizrii de durat poate
determina tulburri digestive, hepatice, nervoase,
i endocrine. Poate avea efect teratogen.
Derivatii triazolici: sunt antimicotice mai noi,
preferate fa de derivaii imidazolici, datorit
reaciilor adverse mult mai raduse.
Itraconazolul se administreaz exclusiv pe cale
oral, n doz de 10mg/kg/zi (1-2 prize) fiind
indicat att n tratamentul micozelor
sistemice,ct i a celor cutaneo-mucoase. Este
contraindicat asocierea medicamentului cu
astemizol (hismanal) i terfenadin, crora le
poteneaz cardiotoxicitatea precum i asocierea
cu ciclosporin, creia-i poteneaz
nefrotoxicitatea (Coman i Mare, 2000).
Identificarea i combaterea factorului
predispozant asigur succesul terapeutic. Avnd
n vedere portajul ridicat al micetului i
caracterul su lipofil, recomandm efectuarea de
mbieri periodice cu soluii antimicotice, la
toate cazurile de dermatit seboreic: Germostop
(clorhexidin), odat pe sptmn, 4 sptmni.
Dermatita atopic asociat necesit n plus un
tratament complex, antialergic.
SUMMARY
Clinical and therapeutical aspects in
Malassezia dermatitis in dog
Malasseziosis (former pithyirosporosis) is a
levurosis determined by abnormal
multiplication on the skin and into the
external ear chanell of lipophilic levurae from
Malassezia (Pithyrosporum) genus.
Infections are most common in carnivore,
especially in dogs. Being lipophilic, the
pathogenity of the levurae is favorized by
excessive cerumen or sebum secretion,
excessive humidity, immunosupression,
congenital disorders, hypersensitivity
diseases (chronic atopy), abusive treatment
with antibiotics and corticoids etc.
110
Most common clinical expression is external
otitis. Seborrheic dermatitis can be also
noticed, with diffuse alopecia, papulae,
crusts, hyperkerathotic plaques,
liquenification and hyperpigmentation on the
face, neck, axilla, inguinal and ventral
abdomenum, and distal parts of the limbs.
Atopic dermatitis is associated in 28% of the
cases.
Treatment is made with local and systemic
antimycotics but identification and control of
predisposant factors has an essential role.


Bi bl i ogr af i e


1. Chermette R. Les prelevements en mycologie
medicale et leur utilisation chez les carnivores
domestiques. Point. Vet., 1994, 26 (159), 67-70.
2. Chermette R., Bussieras J. Abrege de
Parasitologie Veterinaire Fasc. V., Mycologie
veterinaire. Ed. Service de Parasitologie, E.N.V.
Alfort, 1993.
3. Coman I., Mare M. Micologie medical
aplicat, Ed. Junimea, Iai, 2000.
4. Euzeby J. Mycologie Medicale Comparee,
tome II., Ed. Fondation Merieux, Lyon, 1994.
5. Guillot J., Gueho E., Mialot M., Chermette R.
Importance des levures du genre Malassezia en
dermatologie veterinaire. Point Vet., 1998, 29
(193), 691-701.
6. Lungu T., Brz H., Murgu I., Macarie I.,
Popoviciu A. Dermatologie veterinar. Ed.
Ceres, Bucureti, 1975.
7. Mitrea I.L. Bolile parazitare la animale, Ed.
Ceres, Bucureti, 2002.
8. Paul I. Etiomorfopatologie veterinar, vol. II,
Ed. Ion Ionescu de la Brad, Iai, 2000.
9. Scott D.W., Miller W.H., Griffin C.E. Muller
and Kirk's Small Animal Dermatology, 5
th
ed,
WB Saunders Co, Philadelphia, 1995.
10. Solcan Gh, Mitrea I.L., Miron L., Solcan
Carmen Dermatopatologia animalelor de
companie, Ed. Ion Ionescu de la Brad, Iai,
2003.
11. uteu I., Dulceanu N. Parazitozele cutanate la
animale, Ed. Risoprint, Cluj-Napoca, 2001.
12. Van Cutsem J., Rochette F. Mycoses des
animaux domestiques. Janssen Research
Foundation, 1992.

111
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 112-114
112

Contributions regarding the pathogenic role of
Linguatula serrata adult forms at rhino-sinus
mucosa level in dog

O. NEGREA

Facultatea de Medicin Veterinar, Cluj-Napoca


I nt r oduc t i on
Linguatulosis is a parasite disease which is
manifesting like a rhino-sinusitis, with usually
chronic evolution, produced by Linguatula
serrata (L. rhinaria) adults development at
nostrils, frontal sinuses and ethmoid volutes
level, in domestic and wild carnivorous (dog,
wolf, fox, etc.), sometimes in humans. It is
important the fact that in carnivorous, the
presence of adult parasites produces sometimes
grave troubles manifested by nasal pruritus,
respiratory difficulties, sometimes epistaxis,
nervous and behavior troubles.
Although rhino-sinus linguatulosis has an
increase incidence in carnivorous on Earth, the
specialty literature, abroad but mostly indigene,
offers to us extremely poor, sporadic data about
this. This fact has determined us to do this aetio-
patogenic study, following especially the local
modification character, produced by L. serrata
imagenal forms, in correlation with parasitism
intensity in dogs with linguatulosis.
Mat er i al and met hods
Morpho-pathological investigations were done
on 6 dogs effective with rhino-sinus
linguatulosis, diagnosis done by candler
sedimentation and necropsy methods. The
infested dogs have come from Transylvanian
rural localities, from Romanian Shepherd breed,
of 2-14 years aged, with different stages of
maintenance, companions and guardians of sheep
and goat flocks. In necropsy act of positive
linguatulosis dogs it was followed also
parasitism intensity in correlation with
pathogenic effects.
Resul t s and di sc ussi on
Local morpho-pathologic modifications aspect,
in dogs with rhino-sinus linguatulosis, natural
infestation, in correlation with parasitism level, is
presented in Table 1.

Table 1
Local modifications aspect, in dogs with rhino-sinus linguatulosis

Nr. of
examined
animal
Nr. of adult parasites
found
Location Local morpho-pathologic
modifications
1. 4 -1 female
-3 males
Nasal cornets,
ethmoidal volutes
Hemorrhagic and ulceration rhinitis
2. 1 female Ethmoidal volutes Ulcerous and necrotic ethmoiditis
3 3 females Nasal cornets and
ethmoidal volutes
Ulcerous rhinitis and ethmoiditis
osteomalacia
4. 1 female Nasal cornets Hemorrhagic and ulcerous rhinitis
5. 3 females Ethmoidal volutes Ulcerous and necrotic ethmoiditis
6. 1 female Nasal cornets Ulcerous rhinitis


Pathogenic role of adult parasites on dogs,
definitive host, is multiple: mechanical-irritant,
toxic, inoculation maker, etc., being correlated
with the degree of parasitism intensity, cuticule
aspect, hooks action and their location. If
spontaneous rhino-sinus linguatulosis in dog is
accompanied of a insidious and non concluding
picture of clinical manifestations (behavior
modifications, epistaxis, sometime rhino-rhagic,
snoring dyspnoea, at necropsy exam it is
observed with certitude the picture of local
modifications. It is evident the pathogenic
mechanism of L. serrata adult forms on
definitive hosts. This is correlated with
parasitism intensity degree, with their location
and in the same time is dependent of parasite-
host impact period.
From data presented in near by table (1) it can be
observed that it doesnt exists a direct
correlation, in all cases, between infestation
intensity and lesion gravity of tissues with
parasites. It is observed lesions of hemorrhagic
and ulcerous rhinitis (cases 1, 4 and 6) in which a
different number of parasites intervene (from 4
to one single parasite). Also, grave lesions of
ulcerous and necrotic ethmoiditis (cases 2, 3 and
5) are the consequence of one single L. serrata
female intervention (case 2) or contrary of 3
females (cases 3 and 5).
In the near by figure its reproduced the presence
of adult parasite of female L. serrata at the level
of ethmoidal volutes in dog.




Picture 1
Linguatula serrata (female adult parasite) located at the level of ethmoidal volutes, in dogs




That we consider interesting in our
establishments make reference to the lesional
area, which exceed the aerophore segment
occupied by parasites. In all the cases where is
made necropsy it is ascertained sinusitis lesions,
although to this level (frontal sinus) are not
found linguatula.
Conc l usi ons
Investigations done on 6 dogs effective , found
with linguatulosis (natural infestation) by candler
sedimentation method, regarding pathogenic
action of L. serrata adult forms on rhino-sinus
mucosa put in evidence the following aspects:
113
- pathogenic effect of L. serrata adult forms at
the level of nasal cavities, sinuses and ethmoidal
volutes in correlation with local modifications
picture, sometimes is in strong dependence with
infestation level and their location, sometimes it
doesnt exists this relation.
- rhinitis and hemorrhagic and ulcerous
ethmoiditis lesions are caused, in dogs, by a great
number of adult parasites (n = 3,4), in other cases
by a single exemplar. The same aspects of severe
lesions of rhinitis and ulcerous and necrotic
ethmoiditis are provoked by a single female or
by 3 L. serrata females.
- lesional area exeeds the tissue part occupied by
parasites, there are appearing sinusitis lesions,
although to the level of frontal sinuses the
parasites arent found.
REZUMAT
Contribuii privind rolul patogen al
formelor adulte de Linguatula serrata, la
nivelul mucoasei rinosinusale la cine
Investigaiile efectuate pe un efectiv de 6
cini depistai cu linguatuloz (infestaie
natural), provenii din localiti rurale
transilvane (prin metode ovoscopice de
sedimentatre), privind aciunea patogen a
formelor adulte de L. serrata asupra
mucoasei rinosinusale, evideniaz
modificri morfopalogice locale, n corelaie
sau nu cu nivelul parazitismului. Astfel
leziuni de rinit i etmoidit hemoragic i
ulceroas pot fi cauzate de un numr mare
de parazii aduli (n=3,4), alteori de un singur
exemplar. Aceleai aspecte lezionale severe
de rinit i etmoidit ulceroas i necrotic
sunt provocate fie de un parazit adult
singular, fie de mai muli parazii aduli. De
asemenea aria lezional depete cadrul
tisular ocupat de parazii i apar leziuni de
sinuzit, cu toate c nu s-au depistat
localizri ale paraziilor aduli la nivelul
sinusurilor frontali.

Bi bl i ogr aphy


1. Ehrenford F.A., Newberne J.W. 1981, An aid
clinical diagnosis of tongue forms (Linguatula
Serrata) in dogs. Laboratory Animals Science,
31, 1, 74-76.
2. Guche F., Aydemizoz M., 1966, The
prevalence of parasites Linguatula serrata in
the foeces of dogs, in Kongo.Veterinary
Bulletin, vol. 66, Nr. 12, 1257.
3. Riley J. 1996, The biology of Pentastomids.
Advances in Parasitology, vol. 25. Academic
Press. Inc. (London) Limited.
4. uteu I., Cozma V. 1988, Bolile parazitare la
animalele domestice. Edit. Academic,
Bucureti.
5. uteu I., Cozma V. 2004, Parazitologie clinic
veterinar. Edit. Risoprint, Cluj-Napoca.

114
Scientia Parasitologica, 2008, 1, 115-118
115

The therapeutic value of avermectins (Dectomax)
in struggle against linguatulosis in carnivorous

O. NEGREA

Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar, Cluj-Napoca


ABSTRACT. Researches regarding establishment of therapeutic efficiency of
avermectins (Dectomax, Pfizer), effected on a number of 5 dogs found with rhino-sinus
linguatulosis by rhino- and ovascopic methods have established that the use of avermectins
(Doromectin) in dose of 0,2 mg active substance /kg m.c. (1 ml/50 kg m.c.) in the therapy of
linguatulosis present a maximal efficiency. Testing the Doramectin efficiency in struggle against
linguatulosis was established by rhino- and coproscopic exams of sedimentation which put in
evidence a progressive diminishment till the disappearance of eggs elimination rate, in nasal
secretions and faeces, during the period of time taken in study, but also by necropsy exams.
Hematologic modifications in carnivorous linguatulosis present variations. So, the number of
erythrocytes decrease from 5,5 0,30 T/l (day 0) to 5,5 0,28 T/l (day 14 and 30), and the
quantity of hemoglobin presents increasing values from 104,4 5,66 g/l (day 0) to 109 5,28
g/l (day 14) and 115 5,11 g/l (day 30). Total leucocytes present an ascendant dynamic, from
15,7 2,50 g/l (day 0) to 11,6 1,24 g/l (day 14), respectively 11,2 1,36 g/l (day 30).
Biochemical modifications in rhino-sinus linguatulosis present significant variations: total
proteins in decreasing, from 71,3 3,05 g/l (day 0) to 58,5 1,37 g/l (day 14) and 60,3 1,47
g/l (day 30); albumins present initial values of 27,3 2,54 g/l (44,2 %) which increase to 28,7
1,40 g/l (48,6 % in day 14) and in day 30 decrease to 27,9 1,77 g/l (47,2 %) and the globulins
in progressive increasement from 8,2 2,89 g/l (14 % day 0) to 9,2 2,0 g/l (14 % day 30).


I nt r oduc t i on
Linguatulosis is a parasite antropozoonosis, with
a chronic evolution, produced by adults
development of Linguatula serrata (L.rhinaria) at
the level of nostrils, frontal and ethmoidal
sinuses, in domestic and wild carnivorous
(dog,wolf, fox), sometime human. The disease is
manifested by nasal pruritus, frequent gratage,
dyspnoea, sometime epistaxis. Also, it is possible
the presence of nervous and behavior troubles.
Due to the lack of some drugs with recognized
efficiency, in this work paper it were
experimented, from the group of avermectines,
Doramectina (Dectomax, Pfizer), in dogs
positive founded to linguatulosis, in a dose of 0,2
mg/a.s./kg, m.c. in subcutaneous injection, in
correlation with hematologic and serologic
modifications.

Mat er i al and met hod
Investigations regarding founding of some
efficient therapeutic means in struggle aganst
linguatulosis in dog were done on a number of 5
dogs Romanian Shepherd or common breed,
aged of 2 12 months, on a stock of 107 dogs
simultaneous controlled by rhinoscopic and
coproscopic methods. For rhinoscopic exam it
were prevailed nasal secretions, individual and it
were effected prearations between plate and thin
plate. Coproscopic it were used comparatively
sedimentation and floating methods (Willis).
Cases positive founded, in copro- and rhinoscopy
exams (5 animals),were treated with doramectine
(Dectomax, Pfizer), in draj of 0,2 mg a.s./kg.m.c.
(1 ml/50 kg m.c.) in subcutaneous injection.
Also, it were collected, ante-therapeutic (day 0),
and then at day 14, respectively 30 days post-
therapeutic, blood samples, for doing:
- hematologic determinations: total number of
erythrocyte (T/l) by turbidimetric method with
Gower solution, total number leucocyte (G/l)
with Trk camera, hemoglobin (g/l) by
colorimetric method with ammonia solution
(Ghergariu et al. 1985).
- serologic constants: total proteins (g/l) by
colorimetric method (Biuret-Gornal), albumins
(g/l) and gamaglobulins (g/l) by colorimetric
method (B.C.G.) and turbidimetric method with
sodium sulphate 18,5 %.
Resul t s and di sc ussi ons
Results of rhino- and coproscopic exams, post-
therapeutic, in dynamic during 7 days (from 2 in
2 days) are presented in Table 1.


Table 1
L. serrata eggs rhino- and copro-eliminations, post-therapeutic


Post-therapeutic results
Day 1 Day 3 Day 5 Day 7
Dog
category
Nr. of positive
samples
R % C % R % C % R % C % R % C %
Young
stock
1 + + - - - - - -
Adults 2 + + + + + - - -
3 + + - + - + - -
4 + + + + - + - -
5 + + - - - - - -
Total 5 5 100 5 100 2 40,0 3 60 1 20 2 40 - -
Legend
R = rhinoscopic exam
C = coproscopic exam


L. serrata egg eliminations rate, in nasal
secretions, decrease progressive in all cases,
post-terapeutic, from day 3, in 40,0% in nasal
secretions and 60,0 % in faeces. In day 5 this one
touches values of 20,0 % in nasal secretions and
of 40,0 % in faeces, and in day7 the elimination
rate ceases in totality (Picture 1).
Evolution of some hematological and blood
biochemical parameters, in dogs with rhino-sinus
linguatulosis, treated with Dectomax, during the
experimental period (30 days) is presented in
Table 2.



0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Ziua 1 Ziua 3 Ziua 5 Ziua 7
%
Examen rinoscopic
Examen coproscopic


Picture 1

116
Table 2
Dynamic of some hematological and blood biochemical parameters, in dogs with linguatulosis treated with
Dectomax

Statistic Leucocytes
(G/l)
Erythrocytes
(T/l)
Hemoglobin
(g/l)
Proteines
total

Albumions
(g/l)
Y-globulinis
(g/l)

Ante-therapeutic (Day 0)
Average 15,5 5,6 104,4 71,1 37,3
(46,2%)
7,2
(12,3%)
Standard dev. 2,50 0,30 5,66 3,06 2,54 2,89

Post-therapeutic (Day 14)
Average 11,6 5,5 109,4 58,5 28,7
(48,6%)
8,2
(12,3%)
Standard dev. 1,24 0,28 5,29 1,37 1,40 2,89

Post- therapeutic (Day 30)
Average 11,2 5,5 115,5 60,3 27,9
(47,2%)
9,2
(15,8%)
Standard dev. 1,36 0,30 5,12 1,48 1,77 2,08
Normal
values
after G.S.
1985
12,151,98 6,481,07 130-170 42-59 43-53% 10-17%



It is ascertained that the number of erythrocytes
presents an easy decreasement, from 5,6 0,30
T/l, to 5,5 0,27 T/l in day 14 and 5,5 0,30 T/l
in day 30, and the quantity of hemoglobin
presents increase values, from 104,4 5,66 g/l to
109,4 5,28 g/l in day 14 and 115,5 5,11 g/l in
day 30.
The descendent dynamics of total leucocytes,
from 15,5 2,50 g/l to 11,6 1,24 g/l day 14,
respectively 11,2 1,36 g/l day 30, reflects the
existence of a leucopeny process. Total proteins
present light variation, in decreasing from 71,1
3,05 g/l (day 0) to 58,5 1,37 g/l (day 14) and
60,3 1,47 g/l (day 30). Total seric protein
values are lightly increased facing normal values
cited by Ghergariu et al. (1985) reflecting the
existence of a hyperproteinemy.
Albumin has presented initial values of 27,3
2,54 g/l (46,2%) which have increase in control
of day 14 to 28,9 1,40 g/l (48,6%), so that in
day 30 to decrease to 27,9 1,77 g/l (47,2%), but
in all situations it is framed between normal
limits (43 53 %).
Gammaglobulins present initial values of 7,2
2,89 g/l (12,3%) which have increased
progressively to 8,2 2,85 g/l (14,0%) in day 14
and 9,2 2,07 g/l (15,8%) in day 30 and are
framed into normal limits (10 17 %).
From data presented, it can be observed that
hematologic and biochemic constant values
present some modifications. So, the number of
erythrocytes and the quantity of hemoglobin are
situated under normal values, showing the
existence of anemy syndrome, due to the
infestation such with L. serrata but also the
presence of some hematophagous nematode
(Ancylostoma sp., Trichocephalus sp., Toxocara
canis preimaging forms in blood migration).
Descendent dynamic of total leucocytes reflect
the existence of leucopeny process, and the
values lightly increased of seric total proteins
reflect the existence of a hyperproteinemy
process. Such the albumin as also the
gammaglobulins, although they have an
ascendant value dynamic, after therapeutic act, is
framed between normal limits.
Microscopic exams effected in dogs treated with
Dectomax, with the purpose to verify efficiency
of doramectine in rhino-sinus linguatulosis
therapy in day 30 post-therapeutic, reveal and
confirm the maximal efficiency of pharmaceutical
117
product used. It must be mentioned the fact that,
although the therapeutic efficiency of Dectomax
product in struggle against disease is maximal,
the lesion table persists, putting in evidence
rhinite ulcer and hemorrhagic-necrosis lesions
(ethmoiditis).
Conc l usi ons
Researches regarding establishment of
therapeutic efficiency of avermectins (Dectomax,
Pfizer), effected on a number of 5 dogs found
with rhino-sinus linguatulosis by rhino- and
ovascopic methods have established the
following:
1. Use of avermectins (Doromectin) in dose
of 0,2 mg active substance /kg m.c. (1
ml/50 kg m.c.) in the therapy of
linguatulosis present a maximal efficiency.
2. Testing the Doramectin efficiency in
struggle against linguatulosis was
established by rhino- and coproscopic
exams of sedimentation which put in
evidence a progressive diminishment till
the disappearance of eggs elimination rate,
in nasal secretions and faeces, during the
period of time taken in study, but also by
necropsy exams.
3. Hematologic modifications in carnivorous
linguatulosis present variations. So, the
number of erythrocytes decrease from 5,5
0,30 T/l (day 0) to 5,5 0,28 T/l (day 14
and 30), and the quantity of hemoglobin
presents increasing values from 104,4
5,66 g/l (day 0) to 109 5,28 g/l (day 14)
and 115 5,11 g/l (day 30). Total
leucocytes present an ascendant dynamic,
from 15,7 2,50 g/l (day 0) to 11,6 1,24
g/l (day 14), respectively 11,2 1,36 g/l
(day 30).
4. Biochemical modifications in rhino-sinus
linguatulosis present significant variations:
total proteins in decreasing, from 71,3
3,05 g/l (day 0) to 58,5 1,37 g/l (day 14)
and 60,3 1,47 g/l (day 30); albumins
present initial values of 27,3 2,54 g/l
(44,2 %) which increase to 28,7 1,40 g/l
(48,6 % in day 14) and in day 30 decrease
to 27,9 1,77 g/l (47,2 %) and the
globulins in progressive increasement from
8,2 2,89 g/l (14 % day 0) to 9,2 2,0 g/l
(14 % day 30).

Bi bl i ogr aphy


1. Clark J. N.,Plue R.E., Jerrigan D.D., Aliva R.,
Longhofer S.L., Cifelli S., Dario C.P.(1992). -
Field safety acceptability and efficacy of a
combination formulation of ivermectin and
pyrantel pamoate for the prevention in of heart
worm disease and control of intestinal
nematode infections.Canine Practice, 17, 3, 59.
2. Ghergariu S., Pop A.,Kadar L.,(1985) Ghidul
de laborator clinic veterinar, Editura Ceres,
Bucureti.
3. Ghergariu S., Al. Pop., L.Kadar, Marina
Spnu., (2000),- Manual de laborator clinic.
Edit. All. Bucureti.
4. Kadar L. (2002), - Investigaii biochimice n
laboratorul clinic veterinar. Editura Academic
Pres, Cluj-Napoca.
5. Riley J. (1986) The biology of Pentastomids
Advances in Parasitology, vol 25. Academic
pres. Inc. (London) Limited.
6. Robin B. (1983) Ivermectine: 22,23 -Dihydro-
avermectine B
1
, un nouvel antiparazitaire
trs large spectre.Revue Med. Vet. 134, 9-9,
495-498.
7. uteu I., V.Cosma., (2004). -Parazitologie
clinic veterinar, vol I-II, Editura Risoprint,
Cluj-Napoca.


118
Recenzie


ELEMENTE DE CRIOPARAZITOLOGIE
de Eronim uteu

Editura Risoprint, Cluj-Napoca, 2008


Parazitologia, n special n cadrul Facultilor de Medicin uman, trece ca o disciplin
minor i, din cauza aceasta, etiologia parazitar a unor boli ale omului este, nu de puine ori,
ignorat.
Or, n-ar trebui s se uite c morbiditatea i chiar mortalitatea prin unele boli determinate
de parazii, n multe cazuri din Africa, Asia sau America de Sud, o ntrece pe aceea de care se
nsoesc bolile microbiene, virotice sau micotice.
n prezent, patologia bolilor parazitare s-a complicat i prin rolul pe care l au aceste
cazuri n infecii HIV (IDS).
Pe de alt parte, asupra altor aspecte cu care se prezint parazitozele, att n medicina
uman, ct i n cea veterinar, ne atrage atenia coala de medicin veterinar din Cluj.
Astfel, nu demult, o personalitate de vrf a acestei coli veterinare din Cluj, Dl. Prof. Dr.
Eronim uteu face aceasta prin cartea Parazitica, pe care o public n 2005.
n aceast lucrare autorul vine cu suficiente argumente, care i permit s susin ideea
existenei anselor de valorificare a aciunilor unor parazii, prin substanele lor de secreie i de
excreie, din care unele cu efecte benefice ar putea s deschid i perspectiva valorificrii
paraziilor.
O alt fa i un alt aspect al parazitologiei, asupra creia ne atrage atenia tot Dl.
Profesor Eronim uteu, rezult din lucrarea Domniei Sale, Elemente de Crioparazitologie,
aprut recent n aceeai Editur RISOPRINT, din Cluj-Napoca.
Condiiile de criogenez, care au fcut ca numeroase cunotine din domeniul medical i
agroalimentar s se mbogeasc i s se aprofundeze, i dau dreptul autorului s se ocupe n
prima parte a lucrrii, printre altele, de crioconservarea produselor alimentare de origine animal
i de riscul infestrii celor care le consum, de problema att de important astzi a transplantu-
rilor de organe i de producere i pstrare a biopreparatelor.
Cunotinele temeinice de parazitologie general i acelea de criobiologie, pe care le
enun, i permit autorului ca n partea a II-a a lucrrii s se ocupe de Poluarea mediului
exterior cu elemente infestaionale i aciunea temperaturilor minime asupra acestora.
ntr-o asemenea problem de mare interes practic, autorul are n vedere, n primul rnd,
influena pe care o pot exercita asupra viabilitii formelor infestante ale paraziilor
(geohelmini), factori ca temperatura, umiditatea i radiaiile solare.
Cu o atenie asemntoare, autorul se ocup n cazul parazitozelor transmise i
rspndite prin gazde intermediare (biohelmini) de rolul ce revine factorilor ecologici.
Modul complex de a trata aceast problem i permite Domnului Profesor Dr. Eronim
uteu s susin c, cel puin n anumite regiuni, crioparazitologia poate oferi cunotine de
ecobiologie, de profilaxie i de combatere a parazitozelor, prin mijloace fizice, chimice i
biologice, din cele mai adecvate.
Cu mult contiinciozitate i cu suficiente date, autorul o face n cele cinci capitole din
partea a II-a a lucrrii, n care, dup evoluia i riscul polurii mediului exterior cu protozooze,
se ocup de trematodoze i cestodoze, de nematodoze i acahtocefaloze i n final de acarioze.

119
Bogat n figuri, scheme i tabele i nsoite de o bibliografie la zi, cartea scris ntr-un
stil clar i concis poate i merit s fie consultat, att de studeni, ct i de medici specialiti
(parazitologi). Pe lng medicii veterinari, multe lucruri bune pot gsi n aceast carte i medicii
umani, mai ales atunci cnd lucreaz ca organizatori de sntate public, medici colari, igieniti
sau epidemiologi.
Cartea ctig mult i prin condiiile superioare n care, cu sprijinul Fundaiei Scientia
Parasitologica Pro Vita i al D-lui Prof. Dr. Cozma Vasile, a aprut.
Principalul vinovat este ns Dl. Profesor Dr. Eronim uteu care, dup cum se vede i
cu aceast nou i reuit lucrare, contribuie la locul tot mai important care i se cuvine
Parazitologiei, printre disciplinele medicale umane sau veterinare.


Prof. Dr. doc. Ion Gherman


120
Laudatio

Domnului Profesor Dr. D.H.C. Eronim UTEU,

Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar, Cluj-Napoca
cu ocazia acordrii Premiului CNCSIS OPERA OMNIA




Cu deosebit stim, ne exprimm admiraia pentru una din personalitile de marc ale
nvmntului universitar romnesc, Profesorul Dr. D.H.C. Eronim UTEU.
Sunt recunoscute, pe plan naional, dar i peste hotare, contribuiile aduse de dnsul ca promotor
al progresului tiinelor parazitologice. Prin creaii i slujirea cu devotament a nvmntului universitar,
distinsul profesor E. uteu face parte din pleiada contemporan a aleilor profesiei.
nc din anii formrii liceale (1939-1947) i apoi cei universitari (1947-1952), la Facultatea de
Medicin Veterinar din Bucureti, nivelul pregtirii i rezultatele bune i excepionale prefigurau un
viitor medic veterinar cu deosebite caliti umane i mari disponibiliti profesionale.
Din activitatea profesional, complex i bogat, depind un semicentenar (1952-2008) i peste
patru decenii n nvmntul universitar clujean, vom releva fapte, momente, creaii, care relev aportul
i contribuiile profesorului consultant i, n special, ale omului, reprezentnd un model de druire i
angajare profesional i civic.

1. Activitatea profesional

nceput n 1952, n primii 12 ani activitatea profesional s-a desfurat n uniti de cercetare
(Institutul de Patologie i Igien Animal, Bucureti, secia Parazitologie; Institutul de Cercetri
Veterinare Pasteur, Bucureti, Centrul Zonal Cluj), dar i de producie (Circumscripia Sanitar Veterinar
din Valea Lung, jud. Alba; Circumscripia Sanitar Veterinar Glgu, jud. Slaj).
Din 1964 ncepe o nou etap profesional n nvmntul universitar, la Facultatea de Medicin
Veterinar din Cluj-Napoca, pe care o slujete cu abnegaie i n prezent, ca profesor consultant. Pe
parcursul anilor a strbtut toate funciile didactice, obinute prin concurs, de la asistent universitar, la ef
de lucrri, confereniar i apoi profesor universitar, iar din 1996 profesor consultant.
Rezultatele didactice i tiinifice de excepie au condus la obinerea titlului tiinific de doctor n
medicin veterinar n 1970 i apoi de conductor de doctorat (1990), reuind finalizarea a 14 teze.
Datorit calitilor deosebite colegiale, organizatorice, a deinut funciile de: secretar tiinific al
Facultii de Medicin Veterinar (1976-1981); eful catedrei de Patologie la aceeai facultate (1976-
1983); eful disciplinei de Parazitologie i Boli parazitare (1985-1996).
ntreaga activitate profesional a fost axat pe cercetare i contribuii aduse la dezvoltarea i
progresul parazitologiei i al medicinii veterinare, instruirea i educarea civic i profesional a
studenilor n medicina veterinar (31 promoii), perfecionarea i educarea continu prin nvmnt
postuniversitar a medicilor veterinari n 1970-1996, sprijinirea activitii de producie i a filialelor
Societii de Medicin Veterinar, predominant din Transilvania.

2. Activitatea didactic

Avansnd n ierarhia didactic pn la funcia de profesor al disciplinei de Parazitologie i boli
parazitare, s-a impus n viaa universitar i profesional prin rezultatele excepionale, prin rigoarea i
principialitatea n instruirea i educaia studenilor, a medicilor veterinari, iar n ultimele decenii prin
doctorantur. A contribuit esenial la mbuntirea calitii nvmntului universitar n domeniul
Parazitologiei i la perfecionarea medicilor parazitologi din ar.
121
Contribuia la progresul nvmntului s-a relevat i prin activitatea de elaborare, singur sau cu
colaboratori, a manualelor cursuri, ndrumtoare de lucrri practice care au acoperit complet sfera de
instruire, totaliznd 12 volume litografiate (la 7 este unic sau prim autor) i 16 cri editate.

3. Activitatea tiinific

Din nceput i pn n prezent, investigaiile de cercetare tiinific au deinut o pondere major a
activitii profesionale a Domnului Profesor E. uteu.
A obinut rezultate originale n special n urmtoarele domenii:
evidenierea rolului inoculator al paraziilor i importana acestora n evoluia unor boli
infecioase i medicale: s-a stabilit importana infestaiei cu Moniezia spp, n dizenteria cu
anaerobi la miei; Eimeria spp. n encefalomalacia puilor de gin; evoluia asociat a cenurozei
i listeriozei, a babesielozei i leptospirozei;
mbuntirea metodelor terapeutice prin introducerea de noi molecule medicamentoase de
import i indigene, n controlul celor mai grave parazitoze din ar i mai ales n Podiul
Transilvaniei s-au experimentat i introdus n producie diverse molecule chimice, printre care
amintim antiprotozoarienele: carbadoxul (Mecadox) n trichomonoza intestinal la purcei i n
eimerioz la miei (premier naional);
experimentarea de metode chimiopreventive antiparazitare la rumegtoare, n perioadele de
punat: s-a introdus n premier naional chimioprevenia cu Berenil i Acaprin, n focare
enzootice de babesieloz la taurine;
studiile complexe ale zoonozelor parazitare, finalizate prin mbogirea i aprofundarea
cunotinelor epizootologice, diagnostice i terapeutice n giardioz la animale i om, stabilind
experimental contagiozitatea i patogenitatea interspecific a speciilor: Giardia lamblia, G.
muris, G. cati; s-au mbuntit metodele de diagnostic i s-au stabilit caracteristicile
epizootologice n giardioz la carnivore, miei, iezi, viei i roztoare;
punerea bazelor cercetrilor experimentale de ontogenie parazitar, care s-au finalizat cu
descoperirea ciclurilor biologice i a numeroase specii de sporozoare. Rezultatele, n
cvasitotalitate, reprezint prioriti naionale (p.n.), iar cteva prioriti mondiale (p.m.). Astfel,
s-au identificat speciile de Sarcocystis cu gazde intermediare: taurine, ovine, caprine, cabaline,
suine, cprior, ale cror gazde definitive sunt fie cinele, fie pisica. S-au precizat biociclurile
evolutive facultative pentru G.I. ale unor specii de Cystoisospora, transmisibile de la
rumegtoare i roztoare; s-a stabilit biociclul la genul Hammondia (p.n.);
introducerea de metode coproscopice noi, mbuntite n diagnosticul giardiozei i
criptosporidiozei; s-a stabilit rolul poliparazitismului n apariia reaciilor fals-pozitive n
tuberculinarea bovinelor i s-a elaborat o schem original n deparazitarea animalelor
pretuberculinizant, cu efecte benefice;
stabilirea, n premier mondial, a aciunii antimicotice a derivailor benzimidazoli i conceperea
i realizarea unui produs original Femicozin, cu eficacitate foarte ridicat n tricofiie la viei,
produsul fiind brevetat. Rezultatele excepionale au condus la nfiinarea n cadrul disciplinei a
unui Laborator de microproducie (1986), n care s-au preparat i se prepar i n prezent:
Femicozin (derivai BZD + Cu), cu utilizare n ferme de taurine din ntreaga ar; Nilmiazol, n
terapia miazelor la ovine; TBF, antimicotic elaborat n colaborare cu Facultatea de Farmacie din
Cluj-Napoca. Colectivul disciplinei a experimentat valoarea diverselor molecule ale unei serii de
BZD i avermectine n parazitoze subclinice sau asociate (acarioze cutanate, entomoze i
nematodoze la animale de rent i la carnivore domestice).


Activitatea tiinific a fost valorificat prin publicarea a 250 de lucrri tiinifice, n reviste de
specialitate din ar i strintate, precum i n volumele unor manifestri tiinifice simpozioane
(inter)naionale i congrese. Din totalul lucrrilor publicate, la 157 este unic sau prim autor, la 93 este
colaborator. A participat la programe naionale de cercetare i a colaborat cu diferite instituii de
cercetare, precum: ICVB Pasteur, Bucureti, ICCF Bucureti, Ministerul nvmntului, Ministerul
Cercetrii i Tehnologiei, Institutul de Montanologie Cristian Sibiu, Centrul de Chimie, Timioara. A
122
participat la conferine, simpozioane, congrese: la toate manifestrile tiinifice organizate de USAMV
Cluj-Napoca i ale facultilor de profil veterinar din Bucureti, Iai i Timioara. A participat cu lucrri
la peste 25 simpozioane internaionale.
Colaborri internaionale: Programul COST 811, colaborare cu Facultatea de Medicin
Veterinar Lige (Belgia); The Natural History Museum, Londra (Anglia).
Ca un corolar al activitii tiinifice, menionm realizarea unor teze de doctorat deosebit de
valoroase, precum: Eimerioza mieilor: cercetri etiopatogenetice, diagnostice i profilactico-
terapeutice (Dr. V. Cozma); Cercetri etiopatogenetice i diagnostice n trichineloz la animale (Dr.
C. Gherman); Cercetri privind etiopatogenia, diagnosticul i tratamentul dermatomicozelor la
carnivore (Dr. Viorica Mircean).
Profesorul E. uteu deine un Certificat de inventator Nr. 84652 (1984) pentru: Compoziie
furajer pentru creterea petilor n sistem intensiv, acordat de Oficiul de Stat pentru Invenii i un
Brevet de invenie Nr. 109033 (1995) pentru Compoziie medicamentoas n tratamentul
dermatomicozelor la tineretul taurin, acordat de Oficiul de Stat pentru Invenii (n colaborare cu Dr. V.
Cozma).

4. Activitatea editorial

Realizrile sunt remarcabile i n acest domeniu: din cele 16 volume publicate la edituri
prestigioase, la 6 este unic autor i la 6 volume este prim autor. n primul rnd, evideniem titlul
Parazitologie clinic veterinar, Vol. 1 i 2 (665 pagini), de la Edit. Risoprint, Cluj-Napoca.
Menionm i ultimul volum aprut, Elemente de crioparazitologie (282 pagini). Celelalte
volume trateaz problematici din domeniul parazitologiei, de interes aplicativ i teoretic. Opera editorial
a contribuit esenial la diversificarea i mbogirea surselor de informare n parazitologie pentru studeni,
medici veterinari, medici epidemiologi, ecologi .a.
Sunt demne de evideniat, de asemenea, publicaiile culturale ale Domnului Profesor E. uteu i
anume crile: Veterinaria Napocensis XL Evocri i eseuri, Edit. AcademicPres, Cluj-Napoca, 159
pag. (2002) i Sub cer de iubire stihuri. Edit. Risoprint, Cluj-Napoca, 148 pag. (2006). n plus, a
publicat articole i n reviste culturale (15) Steaua, Renaterea, Coloana a Cincea apariii la Cluj-
Napoca.

5. Activitatea social

Pentru ndelungata activitate desfurat n cercetare, producie i nvmntul universitar,
domnul profesor E. uteu a fost distins cu:
- Medalia Meritul tiinific (Decret nr. 165/25.03.1970)
- Confereniar universitar evideniat (Ord. nr. 7626, 1987)
- Premiul Alexandru Locusteanu cl. a II-a, pentru activitate profesional deosebit Nr.
227 1993, acordat Asociaia Medicilor Veterinari din Romnia
- Premiul Traian Svulescu al Academiei Romne pentru cartea Boli parazitare la
ecvine (1996)
- Medalia Progresul Medicinii Veterinare Nr. 1800 din 1997, pentru volumul
Protozoozele abortigene i neonatale la animale, acordat de Asociaia Medicilor
Veterinari din Romnia
- Diploma pentru merite deosebite n dezvoltarea Parazitologiei, acordat de Asociaia
Parazitologilor din Romnia (1997)
- Diplom de fidelitate pentru contribuie remarcabil la ridicarea prestigiului
Universitii, acordat de Senatul USAMV Cluj (2003)
- Diploma i titlul de Doctor Honoris Causa pentru contribuii la progresul
Parazitologiei i conlucrarea interuniversitar, acordate de Universitatea de tiine
Agricole i Medicin Veterinar a Banatului, Timioara (2004)
- Medalia Ad Gloriam Agriculturae, acordat de Senatul USAMV Cluj-N. (2006)
- Premiul Paul Riegler pentru tratatul Parazitologie clinic veterinar, vol. 1-2, acordat
de Academia de tiine Agricole i Silvice Gh. Ionescu-ieti
123
- Diplom de excelen pentru contribuii la dezvoltarea parazitologiei romneti i
mondiale i progresul medicinii veterinare, acordat de Consiliul Facultii de Medicin
Veterinar, Cluj (2006).

Este membru fondator al Fundaiei Scientia Parasitologica Pro Vita i al Revistei Scientia
Parasitologica din Cluj-Napoca. De asemenea, este membru de onoare al Academiei de tiine Agricole
i Silvice din anul 1997.

Concluziile care se desprind din activitatea profesional multipl n uniti de cercetare i de
producie i n instituia universitar (U.S.A.M.V. Cluj-Napoca), de peste un semicentenar, ne profileaz
o personalitate deosebit, cu pasiune, competen, profesionalism i spirit creativ de excepie a
nvmntului veterinar romnesc. Contribuiile deosebite aduse dezvoltrii nvmntului i, n mod
aparte, a celui din domeniul parazitologiei s-au nscris, progresiv, ca acte remarcabile, cu efecte sociale i
civice exemplare.
n egal msur, a contribuit la progresul tiinei i practicii parazitologice din ara noastr, iar
operele create mbogesc tezaurul tiinei.
Pentru toate aceste realizri, universitarul, dasclul, intelectualul de aleas clas, Prof. Dr. E.
uteu considerm c merit cu prisosin acordarea Premiului CNCSIS OPERA OMNIA.

124
INFORMAII PUBLICITARE



Revista SCIENTIA PARASITOLOGICA ofer spaii publicitare pentru anunuri,
reclame sau prezentri de produse, la urmtoarele tarife:


coperta a 4-a
- policromie, dublu lcuit 600 lei
coperta a 2-a i a 3-a
- n 2 culori, dublu lcuite 400 lei
- policromie, dublu lcuite 500 lei
o pagin n interiorul revistei
- alb-negru 300 lei




Fundaia
SCIENTIA PARASITOLOGICA PRO VITA

Str. Mntur nr. 3, Cluj-Napoca, Cod 400372, Romnia
Tel.: 00 40 264 - 596.384
Fax: 00 40 264 - 593.792 sau 00 40 264 - 426.643
E-mail: scientia-paras@email.ro


Cont de virament: IBAN RO46 CBIT 1310 1100 6700 1000
deschis la Banca Comercial "Ion iriac" S.A.
Cod fiscal: 9718692





Revista se distribuie gratuit membrilor Fundaiei i simpatizanilor, care pltesc cotizaia anual de 40 lei.
Aceast cotizaie se vireaz n contul Fundaiei SCIENTIA PARASITOLOGICA PRO VITA.
Pentru abonamente, v rugm s ne scriei pe adresa Revistei.


INDICAII DE REDACTARE A LUCRRILOR



V RUGM S REDACTAI ARTICOLELE N NTREGIME N
LIMBA ENGLEZ SAU FRANCEZ, LA CARE SE ADAUG N LIMBA
ROMN DOAR TITLUL I REZUMATUL.

Scopul revistei. Este publicarea de: lucrri originale, referate tiinifice, scurte
comunicri, nouti din domeniul parazitologiei comparate; recenzii la cri de profil; probleme
de etiopatogenie, epidemiologie, diagnostic, terapia i controlul parazitozelor la om i animale.
Revista sprijin lucrrile de interdisciplinaritate: ecoparazitologie, cronoparazitologie,
imunoparazitologie etc.
Lucrrile vor fi expediate la secretariatul Revistei, pe adresa Fundaiei Scientia
Parasitologica Pro Vita sau pe adresele de e-mail: scientia-paras@email.ro sau
cozmavasile@yahoo.com.
Autorii vor garanta originalitatea articolului trimis spre publicare, c nu a mai fost
publicat sau trimis spre publicare altei reviste sau altor volume.
Lucrrile vor fi supuse aprobrii Colectivului redacional al Revistei, iar cele admise vor
fi publicate, cu eventuale observaii dup avizare.
Articolele vor fi redactate n Word. Este de preferat fontul Times New Roman,
dimensiunea 11 pt.
Coninutul lucrrilor:
- Titlul n limba englez (sau francez).
- Numele autorilor se va scrie imediat sub titlu, urmat de iniialele prenumelui (la
autoare v rugm s menionai prenumele ntreg). Pe rndul urmtor v rugm s
trecei denumirea instituiilor de care aparin autorii, mpreun cu adresa acestora. Nu
se vor trece titlurile tiinifice i funciile autorilor.
- Rezumatul n limba englez (sau francez) (de 10-15 rnduri).
- Introducere scurt, definind scopul lucrrii.
- Materiale i metode cu informaii suficiente pentru reconstituirea experimentelor.
- Rezultate i discuii care conin date exacte, concise i interpretate just, corelate
rezultatelor publicate i de ali autori.
- Concluzii care cuprind date eseniale, riguros expuse i concretizate.
- Titlul i rezumatul n limba romn.
- Bibliografie se va trece n ordine alfabetic, cuprinznd toi autorii citai.


Ateptm cu interes articolele Dumneavoastr.

Please enter my 2009 subscription to
REVISTA SCIENTIA PARASITOLOGICA
Check enclosed for Euro ____________
Banca Comercial "Ion iriac"
Sucursala Cluj
IBAN RO46 CBIT 1310 1100 6700 1000


Individual rate = 12 EUR
Institutional rate = 20 EUR


Charge my: VISA EUROCARD MASTERCARD
Card # ___________________________________________ Exp. ______________________________
Name ______________________________________________________________________________
Address _____________________________________________________________________________
City / State / Zip ___________________________________ Country ____________________________
Tel. ______________________ Fax ______________________ E-Mail __________________________
Signature ____________________________________________________________________________

Return to: REVISTA SCIENTIA PARASITOLOGICA
Facultatea de Medicin Veterinar, Str. Mntur nr. 3, 400372 Cluj-Napoca, ROMANIA, Europe
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------





















----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Anexez chitana de achitare abonamentului n
contul Fundaiei Scientia Parasitologica Pro Vita
Cont:
IBAN RO46 CBIT 1310 1100 6700 1000 (ROL)
Banca Comercial "Ion iriac" Sucursala Cluj
Doresc s m abonez pentru anul 2009 la
REVISTA SCIENTIA PARASITOLOGICA


Abonament individual = 40 lei
Instituii = 60 lei

Numele _____________________________________ Prenumele _______________________________
Specialitatea _________________________________________________________________________
Adresa
____________________________________________________________________________________
Tel. ______________________ Fax _________________________ E-Mail _______________________

Pentru abonament v rugm s trimitei prin pot buletinul de abonament completat integral i chitana.
Abonamentul este valabil pentru persoane i instituii din ar.