Spectroscopia n UV-VIS

Spectrofotometria se bazez pe determinarea i interpretarea spectrelor care pot fi studiate n absorbtie

sau emisie. Spectrele de absorbie se obin la trecerea unei radiaii continue, provenit de la o surs
luminoas, prin substana de cercetat, care absoarbe din spectru linii sau benzi ( absorbie selectiv) sau
poriuni mai mari (absorbie continu) . Cantitatea de energie depinde de structura molecular (E) i de
numrul de molecule (C) care interactioneaz cu radiaia electromagnetic, acesta fiind caracterizat
prin lungimea de und (A), frcvent (V), numr de und (V) .
Substanele din clasa beta-blocantelor pot reaciona cu diferi reactivi, dnd coloraii specifice.n
majoritatea reaciilor de acest tip este implicat gruparea amin secundar, dar i gruparea eteric,
alcoolic sau nucleul aromatic. Principiul metodei se bazeaz pe obtinerea unui compus colorat, n urma
interaciunii substanei beta-blocante cu un reactiv ( sau amestec de reactivi) ntr-un mediu dat ( acid
sau bazic). Acest compus colorat prezint un maxim de absorbie o anumit lungime de und; deci se
determin Amax. Se studiaz condiiile n care se formeaz compusul colorat (stoichiometria ,durata
reaciei, stabilitatea culorii, condiiile de temperatur, solvent, pH, etc ).
Beta-blocantele prezint spectre de absorbie n domeniul UV fiind caracteristice pentru fiecare
reprezentant al clasei Aceast metod are avantaje majore cum ar fi, rapiditatea reproductivitatea.
sensibiliatea ceea ce permite determinarea cantitativ a substanelor din aceast gup ca atare i dinn
forme farmaceutice.n literature sunt indicate valorile absorbantei la lungimi de und specifice
fiecrei substane n parte., dar determinri strict spectrofotometrice se aplic doar n cazul formelor
farmaceutice att n vitro ct i n vivo .
Cromatografia pe strat subtire CSS
Cromatografia este o metod fizico-chimic modern de separare, identificare i de dozare a
componentelor dintr-un amestec complex pe baza adsorbiei diferite a componentelor ( cu afiniti
diferite fa de dou faze n contact ) de-a lungul unei coloane cromatografice nchise sau deschise. Cele
mai utilizate metode cromatografice n vederea determinrii beta-blocantelor sunt cromatografia n
strat subire i cromatografia de lichide la nalt performant.
CSS n analiza calitativ a blocantelor
Cromatografia pe strat subire fiind o metod analitic rapid, se poate utiliza pentru identificarea
preliminar a blocantelor, extrase din forme farmaceutice sau medii biologice. n literatura de
specialitate se citeaz identificarea -blocantelor, utiliznd ca i faz mobil amestecul de
cloroform:dietilamin (90:10) pentru atenolol, acebutolol, oxprenolol i metoprolol . Astfel in tabelul
11.9 sunt redate sistemele de eluenti utilizate n vederea identificrii unor -blocante (valorile Rf
obfinute fiind cuprinse intre 0,26 i 0,82 ). Identificarea -blocantelor se realizeaz:
prin compararea valorilor Rr obinute pentru analiii din prob, cu valorile corespunztoare etalonului:
prin compararea valorilor Rr, obinute prin raportul Rr/Rf,

Metoda cromatografic CSS se aplic i la dozarea -bIocantelor ca atare, din forme farmaceutice
dozate, medii biologice, fiind o metod accesibil i economic, care nu necesit aparatur
sofisticat.n literatura de specialitate se descrie aplicarea CSS la identificarea, separarea i dozarea
simultan a unor -blocante dup derivatizarea prealabil. prin tratare cu clorura de
Cromatografia de lichide de nalt performan HPLC
Cromatografia de lichide de nalt performa (hight performance liquid chromatography) este o
micrometod modern de separare romatografica oficializat n monografiile beta-bocantelor din
farmacoopeile n vigoare ct i n cataloagele analitice. Datorit faptului c majoritatea beta-blocantelor
(atenolol, metoprolol i propranolo, se prezint sub form de amestec racemic. prin HPLC s-au putut
separa i identifica fiecare enantiomer n parte att n cazul unui singur beta-blocant ct i pentru un
amestec de beta-blocante . HPLC este aplicat la dozarea - blocantelor att in vitro ct i din fluide
biologice .