CAPITOLUL 6

VARIABILITATEA GENETIC
Transmiterea informaiei genetice la o generaie la alta se face cu mare exactitate,
determinnd asemnrile dintre prini i copii; variabilitatea este cea care creaz diferenele
dintre generaii. Aceste diferene fenotipice sunt datorate modificrii materialului ereditar, dar
i factorilor de mediu. Astfel, variabilitatea genetic reprezint totatilitatea fenomenelor care
produc diferenele genetice dintre indivizii unei populaii i dintre diferite populaii.
Modificarea informaiei ereditare permite pe de o parte, diversificarea ei (variaiile
fenotipice normale), o adaptare mai bun a indivizilor la condiiile de mediu, dar poate
produce direct i o stare de boal.
Diversificarea informaiei ereditare este realizat prin recombinare genetic i
mutaii. Recombinrile din gametogenez i fecundare produc un amestec al genelor
parentale, realiznd combinaia nou a descendentului, iar mutaiile produc modificri ale
structurii materialului genetic.

6.1. Recombinarea genetic

Fenomenul recombinrii genetice conduce la apariia unor combinaii genetice noi
(recombinani) prin rearanjarea (reasortarea i redistribuirea) materialului genetic de la doi
genitori diferii. Procesul este foarte larg rspndit, asigurnd, n limite naturale, variabilitatea
informaiei ereditare.
Recombinarea genetic are loc n
perioadele preconcepional i concepional i
este de dou tipuri: cromozomial i genomic.
1. Recombinarea cromozomial are
loc n gametogenez i poate fi intra- i
intercromozomial.
Recombinarea intracromozomial
(omoloag) este reprezentat prin procesul de
crossing-over cromozomial, care se realizeaz
n profaza primei diviziuni meiotice (vezi

Fig. 6. 1. Gen hibrid (fuziune genic) prin

crossing-over egal intragenic

Gametogeneza), n urma cruia are loc un amestec de gene ntre cromozomii omologi paterni
i materni. Aceast recombinarea intragenic produce o gen hibrid (fuziune genic) ce
conine fragmentul terminal dintr-o alel i restul de secven din cealalt alel (fig. 6.1.).
1

 Recombinarea intercromozomial se realizeaz ca urmare a segregrii bivalenilor

din tetrad n anafaza meiozei primare, repartizarea unei perechi de omologi n celulele-fiice
fiind ntmpltoare i independent de celelalte perechi. Consecina segregrii ntmpltoare
i independente o reprezint faptul c fiecare gamet dobndete o combinaie diferit de
cromozomi paterni i materni.
2. Recombinarea genomic are loc n fecundare prin reasortarea (amestecarea)
cromozomilor (genomilor) din cei doi gamei (de la doi indivizi diferii), determinnd apariia
unor descendeni care difer genetic att de cei doi genitori, ct i ntre ei: pentru fiecare
gamet exist 223= 8.388.608 variante de combinaii cromozomiale, iar pentru fiecare zigot
exist 246 posibiliti (246 = 70.368.744.177.664).
Cele trei tipuri de recombinare au loc secvenial, permind amplificarea diversificrii
genetice a indivizilor dintr-o specie.
Recombinarea genetic duce, n timp, la diversificarea fondului genetic al speciei prin:
creterea spectrului de genotipuri individuale, creterea gradului de heterozigoie i apariia
indivizilor mai viabili i mai fertili.
Fiecare individ este un unicat genetic (la nivel molecular, celular, fiziologic,
morfologic i psiho-comportamental). Individualitatea genic explic, printre altele,
capacitatea difereniat de adaptare, predispoziia diferit la diversele boli, rspunsul diferit al
indivizilor la administrarea unui medicament, compatibilitatea sau incompatibilitatea grefelor
etc.

6.2. Mutaiile
Mutaiile sunt modificri accidentale (nenaturale), permanente i ereditare
(transmisibile n succesiunea generaiilor) ale secvenei de nucleotide din ADN. Aceste
modificri produc variante alelice ale secvenei de ADN (genic sau extragenic).

6.2.1. Clasificarea mutaiilor

a) n funcie de mrimea materialului genetic interesat, se deosebesc trei categorii
de mutaii: genice, cromozomiale i genomice.
Mutaiile genice intereseaz secvena de nucleotide a unei gene. Mutaiile
cromozomiale produc modificri ale structurii cromozomilor i, implicit ale ordinii genelor n
cromozomi (rearanjri sau remanieri cromozomiale). Mutaiile genomice sunt modificri ale
numrului diploid al cromozomilor: aneuploidie cnd sunt afectate 1-2 perechi, sau
poliploidie cnd sunt afectai toi cromozomii.
2

b) Dup tipul celular afectat: mutaii somatice i germinale. Mutaiile somatice sunt
mai frecvente; nu se transmit la urmai, ci numai de la o celul la alta, formnd o clon
celular (populaie celular) anormal mozaicism somatic; sunt rspunztoare de apariia
cancerului i de accelerarea procesului de mbtrnire. Mutaiile germinale sunt mai rare i
nu afecteaz individul, dar se transmit la urmai (sunt ereditare);.
c) n funcie de cauz, mutaiile se clasific n spontane i induse. Mutaiile spontane
sunt mutaii ale cror factori cauzali (de cele mai multe ori naturali) nu pot fi identificai (se
consider adesea a fi rezultatul unor erori de copiere n cursul procesului de replicare).
Mutaiile induse sunt mai frecvente i sunt produse sub aciunea unor factori fizici (radiaii
ionizante), chimici sau biologici.
Modificarea informaiei genetice nu este, obligatoriu, nsoit de modificarea
fenotipului. Majoritatea mutaiilor germinale ale ADN extragenic nu se exprim fenotipic, ele
fiind neutre; sunt responsabile de producerea unor variante alelice care formeaz
polimorfismul ADN. Mai rar, mutaiile pot avea efecte benefice (avantajoase), determinnd o
adaptare mai bun la mediu, la diferite agresiuni din mediul extern sau creterea fitness-ului.
Alterori ele sunt dezavantajoase (detrimentale, patogene), implicate n producerea unor boli;
mutaiile reprezint, de altfel, cea mai important cauz de boal la om.

6.2.2. Mutaiile genice

Mutaiile genice sunt mutaii care afecteaz regiuni mici din genom. Mutaiile genice
sunt mprite n dou mari clase:
Macroleziuni, rearanjri genice sau mutaii extinse (length mutations), care
intereseaz secvena de nucleotide a unei gene - o parte din gen sau ntreaga gen;
Microleziuni sau mutaii punctiforme (point mutations), care intereseaz una sau
cteva nucleotide.
Mutaiile pot interesa secvenele codante (exoni) sau necodante (introni, secvene
reglatoare) ale genei.

A) Mecanismele de producere a mutaiilor genice

Se deosebesc trei mari categorii de producere a mutaiilor genice: substituii, deleii i
inserii de nucleotide.
1. Substituia - nlocuirea unei singure baze azotate - reprezint cel mai frecvent tip
de mutaie la om i poate fi de dou tipuri:

tranziia, constnd n nlocuirea unei baze purinice (A sau G) sau pirimidinice

(C sau T) cu o baz de acelai tip;
3

transversia, mai rar ntlnit, n care o baz purinic (A sau G) este nlocuit
cu o baz pirimidinic (C sau T) i invers.

Consecinele substituiei asupra informaiei genetice

Substituia unui nucleotid poate avea consecine diferite n funcie de localizarea
mutaiei: secvene codante, necodante sau secvene reglatoare ale genei.
(1) n regiunile codante (exoni), substituia poate interesa un codon sens sau nonsens.
Substituia ntr-un codon sens poate produce:
a) un codon sens sinonim, care codific acelai aminoacid; poplipeptidul codificat
rmne neschimbat, deci mutaia este neutr din punct de vedere fenotipic i evolutiv i se
numete mutaie silenioas (mut) (silent mutation) sau sinonim; circa 25% din mutaiile
punctiforme sunt silenioase.
GUU AAG GCU GCU Val Lys Ala Ala
GUU AAA GCU GCU Val Lys Ala Ala
b) un alt codon sens care va codifica un aminoacid diferit; aceste mutaii sunt
nesinonime, deoarece modific sensul unui codon i sunt denumite mutaii cu sens greit
(missense mutations).
Substituiile cu sens greit pot fi clasificate n:
- conservative - cnd aminoacidul este nlocuit cu altul similar din punct de vedere
chimic i funcional (de exemplu, arginina i lizina), astfel c efectul asupra funciei proteinei
este minim;
- neconservative - nlocuirea unui aminoacid cu un altul diferit din punct de vedere
chimic i funcional i care modific funcia proteinei; aceste mutaii sunt cele mai frecvente
n patologia uman (50%).
GUU AAG GCU GCU Val Lys Ala Ala
GUU AAG GAU GCU Val Lys Asp Ala
ex. HbS din anemia drepanocitar (mutaia GAGGTG duce la nlocuirea acidului
glutamic cu valina).
c)

un codon non-sens sau stop, care nu codific nici un aminoacid; urmarea o

constituie terminarea prematur a procesului traducerii, cu formarea unui ARNm mai scurt,
iar dac acesta este stabil, va rezulta o protein de dimensiuni mai reduse, nefuncional (de
obicei instabil, mai alesa dac mutaia se produce la nceputul genei); aceste mutaii, numite
mutaii fr sens (nonsens mutation), reprezint circa 12% din mutaiile produse la om; de
exemplu n talasemii (anemii hemolitice datorate producerii insuficente fie de lanuri , fie de
lanuri ale globinei).
4

GUU AAG GCU GCU Val Lys Ala Ala

GUU UAG GAU GCU Val stop
Substituia ntr-un codon nonsens poate produce:
a) un codon sens, care codific un aminoacid; astfel transcripia va continua pn la
urmtorul codon stop, formndu-se un ARNm i un poplipeptid anormal de lungi.
b) un alt codon stop (foarte rar), mutaia fiind fr efect asupra proteinei.
(2) n regiunile necodante intragenice mutaia intereseaz cel mai frecvent intronii
(10-15% din mutaii). Substituia se produce la nivelul situsurilor de clivare (splicing) a
intronilor (splice site mutation), adic situsul donor 5-GT sau acceptor AG-3; mutaia acestor
situsuri poate avea urmtoarele efecte:
- abolirea (pierderea) situsurilor de clivare a unui intron; clivarea se produce la
urmtorul exon i astfel n ARNm matur se va gsi o secven intronic sau va lipsi un exon
(exon skipping), n funcie de situsul afectat;
- activarea unor situsuri criptice de clivare (secvene similare unui situs autentic); n
ARNm matur va fi prezent un fragment de intron sau va lipsi o parte din exon.
n ambele situaii produsul matisrii este nefuncional.
(3) Mutaiile secvenelor reglatoare conduc la o funcionare anormal a
mecanismelor de control ale expresiei unei gene normale. Astfel, gena se poate exprima ntrun esut neadecvat (unde n mod normal gena ar trebui s fie represat exprimare ectopic)
sau la un moment nepotrivit. Aceste mutaii afecteaz cantitatea de protein sintetizat.
Mutaiile promotorului modific rata transcripiei, iar cele ale situsului de poliadenilare
influeneaz stabilitatea moleculei de ARNm.
2. Deleii i inserii mici (microdeleii, microinserii)
Deleia (pierderea) sau inseria (introducerea) unuia sau a mai multor nucleotide
reprezint circa 25% din totalul mutaiilor la om.
Dac deleiile sau inseriile sunt un multiplu de trei nucleotide, se produce pierderea
sau adugarea unor aminoacizi n protein.
GUU AAG GCU GCU Val Lys Ala Ala
GUU ----

GCU GCU Val Ala Ala

De exemplu, la europeni, circa 70% din cazurile de fibroz chistic sunt produse de
mutaia F508del (prin deleia a trei nucleotide din gena CF se pierde fenilalanina din poziia
508 a proteinei CFTR)

 Dac deleiile sau inseriile nu sunt un multiplu de trei nucleotide, se produce o

decalare a cadrului de citire al genei de la locul n care s-a produs deleia sau inseria. Aceste
mutaii, numite mutaii cu modificarea cadrului de citire (frameshift mutations), altereaz
ntreaga secven de aminoacizi n aval de locul mutaiei.
GUU AAG GCU GCU Val Lys Ala Ala
GUU AGG CUG CU Val Arg Leu
3. Leziuni extinse (remanieri genice aberante)
Leziunile extinse se produc prin schimburi ntre dou secvene alelice sau nealelice de
ADN i sunt mai rare n patologia uman. Cel mai important mecanism este recombinarea
omoloag nealelic (RON) produs ntre secvene similare situate n regiuni diferite ale
cromozomilor. Ea se produce cel mai frecvent n profaza meiozei primare (cnd are loc
mperecherea omologilor) i const ntr-un schimb reciproc inegal - crossing-over inegal (fig.
6.2.), prin care se modific ambele cromatide (unul dintre cromozomi va avea o duplicaie a
unei secvene, iar cellalt o deleie a aceleiai secvene).
1 2 3

1 2 3

1 2 3

1123

2 3

1 2 3
Fig. 6.2. Crossing-over inegal

4. Mutaii dinamice (instabile)

Conform conceptului clasic, mutaiile sunt modificri permanente, stabile, care se
transmit nemodificate la descendeni. Dup 1991 a fost descoperit o nou clas de mutaii,
complet diferit de mutaia clasic, denumit mutaie dinamic (instabil, extensia sau
amplificarea repetrilor trinucleotidice)
Mutaiile dinamice sunt reprezentate de creteri ale numrului unor secvene repetitive
trinucleotidice (CAG, CTG, CGG sau GAA) dispuse n tandem n exoni, introni sau la
capetele genei. Caracteristica fundamental a acestor mutaii o constituie instabilitatea lor,
6

exprimat prin creterea, cu ocazia diviziunilor celulelor purttoare, a numrului de copii ale
respectivelor secvene repetitive. Pn a deveni manifeste, se numesc premutaii,
caracterizate doar prin instabilitate; odat depit numrul critic de repetri, mutaia este
complet, se manifest fenotipic i se accentueaz pe msura creterii repetrilor.
Ca urmare a extensiei (creterii) progresive a repetrilor pe msura diviziunii celulelor
liniei sexuale, bolile produse de mutaii dinamice, transmise de obicei dominant, se
caracterizeaz prin fenomenul de anticipaie: debuteaz mai precoce i prezint
simptomatologie mai sever n succesiunea generaiilor. Formele cele mai severe se transmit
mai des prin unul din prini efect parental.
n majoritatea lor, variaiile numerice ale repetrilor trinucleotidice sunt lipsite de
efecte fenotipice. Sunt cunoscute, pn n prezent, mai multe excepii, reprezentative fiind:
- expansiunea CGG la nivelul promotorului genei FMR1 (Frax Mental Retardation)
de pe cromozomul X (Xq27.3) (6-50 repetri n gena normal, 50-200 n premutaie) de la
230 la peste 1000. Mutaia produce o metilare anormal a repetiiilor CGG i apariia situsului
fragil pe Xq, asociat cu inhibarea expresiei genei FMR1 i instalarea sindromului X fragil,
transmis XR.
- expansiunea CAG la nivelul exonului 1 al genei umane HD (codific huntingtina) de
pe cromozomul 4p16.3; gena normal conine un numr de repetri mai mic de 26; o cretere
a repetrilor peste 37 la nivelul genei produce boala Huntington, transmis AD; expansiunea
modific funcia proteinei, genernd o secven poliglutamic anormal
- repetarea ntre 50 i cteva mii de ori a secvenei CTG din regiunea 3 netradus a
genei DMPK (codific o protein-kinaz) (alela normal conine ntre 5 i 30 de repetri)
determin apariia distrofiei miotonice Steinert, transmis AD.
Mecanismul de producere a expansiunii nu este cunoscut exact; se presupune c este
rezultatul alinieri greite i mperecheri decalate a repetrilor trinucleotidice - glisare
replicativ.

B. Consecinele mutaiilor genice

Majoritatea mutaiilor genice intereseaz ADN nuclear, mai ales cel extragenic, i
produc polimorfismele ADN, lipsite de efecte fenotipice.
Totui, nici mutaiile ADN mitocondrial (ADNmt) nu sunt rare i pot avea urmtoarele
explicaii:
- lipsa nveliului protector histonic face ca ADNmt s fie deosebit de sensibil la
aciunea agenilor mutageni, mai ales a radicalilor liberi de oxigen (foarte agresivi), care sunt
produi n cantiti mari chiar n matricea mitocondrial;
7

- ADN-polimeraza (enzima replicrii ADNmt, localizat n mitocondrie) acioneaz

cu fidelitate inferioar celei a ADN-polimerazelor nucleare ( i ), acceptnd mperecheri
greite sau alunecnd peste unul sau mai multe nucleotide;
- datorit lipsei eficienei sistemelor de reparare, erorile de replicare (mperechere) i
leziunile produse de ageni genotoxici se fixeaz sub form de mutaii.
a) Consecinele asupra informaiei i expresiei genice depind de tipul mutaiei i de
localizarea mutaiei n structura genei.
(1) Efectul n funcie de tipul de mutaie (vezi Mecanisme de producere a mutaiilor
genice).
(2) Efectul n funcie de localizarea intragenic a mutaiei
Mutaiile n regiunile codante determin sinteza unei proteine cu structur anormal,
a crei funcie este redus sau chiar pierdut (rar crescut sau diferit de funcia iniial).
Mutaiile care afecteaz matisarea ARNm precursor determin sinteza unei proteine
anormale, iar cele care afecteaz stabilitatea ARNm matur produc modificarea catitii de
protein normal sintetizat.
Mutaiile care afecteaz dozajul genic (deleii, duplicaii) sau reglarea procesului de
transcripie determin scderea sau creterea sintezei de proteine sau o expresie inadecvat ca
timp i spaiu.
b) Consecinele fenotipice ale mutaiilor patogene
Mutaiile reprezint cea mai frecvent cauz de boal sau predispoziie la boal.
Mutaiile patogene pot avea urmtoarele efecte asupra funciei proteinei codificate de gena
mutant:
(1) Pierderea funciei st la baza producerii majoritii bolilor recesive, dar i a unor
boli dominante n care heterozigoii sunt mai puin sever afectai dect homozigoii (de
exemplu, hipercolesterolemia familial), la care pierderea a 50% din funcia genei este
suficient pentru a produce boala.
(2) Ctigul de funcie este mult mai rar i se manifest fie prin creterea expresiei
proteinei (de exemplu, prin creterea dozajului genic), fie prin creterea capacitii acestei de
a efectua funcia ei normal (de exemplu, activarea permanent a unui receptor n absena
ligandului).
(3) Dobndirea unor proprieti noi:
- modificarea proprietilor structurale i tendina de polimerizare sau agregare (de
exemplu, mutaia genei -globinei n anemia drepanocitar);

- dobndirea unor funcii noi (de exemplu, varianta Pittsburg a 1-antitripsinei nu mai
acioneaz ca un inhibitor al elastazei, ci ca inhibitor al factorilor de coagulare);
- producerea unei proteine toxice (de exemplu, mutaia genei care codific precursorul
amiloidului produce forme precoce de boal Alzheimer).
(4) Expresia inadecvat a genei ca timp sau spaiu (de exemplu, persistena ereditar
a hemoglobinei fetale).

C. Cauzele mutaiilor genice

Mutaiile genice se pot produce spontan, natural (cel mai frecvent prin erori ale
procesului de replicare) sau pot fi induse de ageni din mediul extern sau intern numii
mutageni. Aceste cauze, spontane sau induse, determin leziuni ADN, definite ca fiind orice
modificare a structurii normale a ADN. Leziunile ADN reprezint semnalul pentru intrarea n
activitate a mecanismelor reparatorii; n lipsa refacerii structurii normale (reparrii),
respectivele modificri se fixeaz sub form de mutaii. Principalele tipuri de leziuni ADN
sunt:
-

modificri ale bazelor purinice sau pirimidinice: dezaminri spontane, metilri,

adiii, substituii sau pierderi de baze i crearea de situsuri abazice (apurinice sau
apirimidinice);

formarea de puni intracatenare sau intercatenare;

rupturi monocatenare i bicatenare.

Mutaii spontane. Cele mai importante mecanisme de producere a mutaiilor

spontane sunt:
(1) Erori ale procesului de replicare
Modificri spontane de tipul formelor tautomere ale bazelor. Formele cetonic
(C=O) i aminic (C-NH2) sunt mai stabile, adic mai normale din punct de vedere genetic,
dar pentru perioade scurte de timp bazele pot exista i n formele enolic (C-OH), respectiv
iminic (C=NH), mult mai instabile; de exemplu,

forma imino a adeninei nu formeaz legturi de

G
Dezaminarea C

hidrogen cu timina, ci cu citozina.

(2) Leziuni spontane pot apare prin

G
Replicare

dezaminare sau depurinare a bazelor.

Citozina sufer adesea o dezaminare
spontan, transformndu-se n uracil (baz

anormal pentru ADN) i astfel perechea de baze

CG este transformat ntr-o pereche AT (U se

Fig. 6.3. Dezaminarea

citozinei

aseamn structural cu T), deci s-a produs tranziia CT (fig. 6.3.). Aceast tranziie este
frecvent la nivelul dinucleotidul CG din regiunea promotoare a genelor. Dezaminare
spontan poate suferi i adenina, guanina sau 5-metilcitozina, transformndu-se n
hipoxantin, xantin, respectiv timin.
La temperaturi crescute sau scderea pH-ului celular, legtura N-glicozidic dintre o
baz purinic i dezoxiriboz poate fi scindat prin hidroliz - depurinare spontan, rezultnd
un situs apurinic.
Mutaii induse
Mutaiile induse sunt produse de ageni mutageni din mediul extern sau intern.
(1) Factorii mutageni din mediul extern (radiaii ultraviolete, radiaii ionozante,
ageni chimici) produc diferite alterri ale structurii ADN.
Cele mai frecvente sunt radiaiile ultraviolete (componente ale radiaiei solare) care
produc dimerizarea pirimidinelor adiacente (n special a
timinelor adiacente) (fig. 6.4.).
Agenii carcinogeni - fum de igar, poluani
atmosferici (ageni alchilani sau metilani, hidrocarburi
policiclice

produii

de

combustie),

gudroane,

medicamente antitumorale, difeite metale produc adiii

ale unor radicali chimici.

Radiaiile

ionizante

cuprind

undele

GC
|
|
T=A
|
|
T=A
|
|
A=T

UV

GC
|
|
T A
|
|
T A
|
|
A=T

Figura 6.4. Dimer de timin

elecromagnetice cu lungime de und foarte mic (raze X i raze gama) i particule cu energie
nalt (particule alfa i beta, neutroni). Sursele de radiaii la care sunt expuse populaiile
umane sunt naturale (radiaii cosmice, materiale radioactive) i artificiale (radiologie
diagnostic sau terapeutic, expunere profesional, expunere accidental). Cantitatea

de

radiaii ptruns n esut se numete doz de radiaii i se msoar n doz absorbit de

radiaii rad (radiation absorbed dose). Deoarece oamenii sunt expui la mai multe surse, se
folosete unitatea rem (roentgen equivalent for man). Un rem de radiaie este doza absorbit
ce produce acelai efect biologic ca 1 rad de raze X. 100 rem echivaleaz cu 1 Sievert (Sv).
Doza medie de radiaii primit de gonade este de 2,4 Sv pe an i 72 Sv pe perioad
reproductiv (30 de ani) sau 6-7 rem pe an i 30-80 rem pe 30 de ani.
Radiaiile ionizante (X, gama) produc mai ales rupturi mono- sau bicatenare ale
ADN-ului, dar dozele sunt foarte sczute, permind sistemelor de reparare s remedieze
leziunile. Uneori, acestea sunt lipsite de eficien, putnd aprea mutaii, care sunt, de obicei,
sub form recesiv.
10

Radiaiile ionizante au efect cumulativ n timp, care depinde de doza total ncasat.
Riscul este mic la nivelul populaiei generale, dar mai crescut la persoanele expuse
profesional.
O serie de substane chimice au efect mutagen prin:
- interferare cu sinteza ADN: analogii bazelor azotate (au structur similar bazelor
normale, putnd fi ncorporate accidental n ADN): de exemplu 5-bromouracil, cofeina
(analogi ai timinei), 2-aminopurina (analog al adeninei)
- alterarea structurii ADN: azot iperita, acridinele, epoxizii
Dintre factorii biologici, cei mai importani sunt virusurile:
- virusurile oncogene produc modificri structurale la nivelul cromozomilor (sesizat
pentru viruii rubeolei, parotiditei epidemice, herpetici).
- la unii virui, efectul mutagen const n inseria lor n genomul celulei gazd i
decalarea cadrului de citire.
(2) Factorii mutageni din mediul intern. Cei mai importani sunt speciile reactive de
oxigen (peroxizi de hidrogen, radicali hidroxil) i produii de peroxidare a lipidelor
(acroleina, malodialdehida). Dac sistemele antioxidante de reparare nu sunt eficiente, aceti
ageni produc substituii de baze i rupturi monocatenare.

D. Frecvena mutaiilor genice

Rata mutaiei unei gene se exprim ca numr de mutaii noi/locus/generaie ntr-o
populaie dat. Frecvena mutaiilor variaz n limite foarte largi: 104 - 107/ locus / generaie
(media de 106). Fiecare om este purttor a cel puin 3-8 mutaii (circa 5-8 alele mutante
recesive letale sau semiletale, care n stare homozigot ar avea efecte detrimentale serioase;
aceste alele mutane reprezint balastul genetic al fiinei umane).
Mutaiile noi se pot produce n spermatogenez sau ovogenez, rata mutaiilor diferind
la cele dou sexe prin timpul de producere i numrul de diviziuni celulare.
n ovogenez, fiecare gamet rezult dup 22 diviziuni mitotice i 1 diviziune meiotic;
cu ct ovocitele rmn mai mult n timp n meioza I (reproducerea se produce mai trziu),
crete riscul non-disjunciei meiotice.
n spermatogenez, fiecare spermatozoid rezult, n medie dup 200 diviziuni
(numrul crete cu vrsta), gameii fiind produi pn la vrste avansate; conforma unor
calcule, circa 1 din 10 spermatozoizi va avea o mutaie patogen (la o frecven a erorii de
replicare de 1010/genom/diviziune).
Rezult c frecvena neomutaiilor paterne prin erori de replicare este mai mare dect a
celor materne i crete odat cu vrsta tatlui. Acest fapt a fost observat n neurofibromatoz,
11

acondroplazie sau hemofilie B. De asemenea, metilarea citozinei din dimerul CG este mai
frecvent n celulele germinale masculine, determinnd transversiile CT sau GA.
Expansiunea repetrilor trinucleotidice este, de asemenea, mai frecvent la sexul masculin.

E. Mecanismele reparrii leziunilor ADN

Supravieuirea unei specii pe termen lung este favorizat de modificrile survenite n
materialul genetic; supravieuirea pe termen scurt necesit, ns, meninerea exact a
informaiei genetice.
Leziunile ADN au drept consecin alterarea informaiei genetice; n marea lor
majoritate, leziunile sunt tranzitorii, fiind nlturate printr-un proces de corectare denumit
reparare ADN, care asigur conservarea informaiei i stabilitatea celulei.
Procesul de reparare poate fi definit, astfel, prin procesele celulare implicate n
refacerea i meninerea integritii structurale i funcionale a ADN. Sistemele de reparare nu
sunt specifice unui anumit tip de leziune, ci recunosc numeroase tipuri de anomalii structurale
ale moleculelor de ADN; acestea reprezint semnale pentru intrarea n activitate a
mecanismelor reparatorii, care implic interaciunea mai multor gene cu funcii diverse.
Mecanisme de reparare al ADN nuclear
1. Repararea erorilor de mperechere
Obinuit, n cursul procesului de replicare ADN-polimerazele poziioneaz
nucleotide activate pe baza complementaritii. Uneori, ns, se produce o mperechere
greit, necomplementar (mai ales G-T) (cu o probabilitate de 1:10.000), care creaz
distorsiuni ale dublului helix, acestea acionnd ca semnal pentru ndeprtarea bazei inserate
greit.
ADN-polimerazele pot interveni i printr-un alt mecanism important de
autocorectare (proofreading). Enzimele verific dac la captul 3OH nu s-a produs o
mperechere greit; dac a aprut o eroare, ndeprteaz nucleotidul necomplementar prin
capacitatea 3-5 exonucleazic (ruperea legturii fosfodiester de la captul 3) pe care o
posed ADN-polimerazele i .
Puinele erori care apar n ciuda acestor mecanisme sunt supuse dup replicare unor
mecanisme de reparare a erorilor de mperechere MMR (mismatch repair). Cele mai
importante enzime din sistemul MMR sunt codificate de genele Mut H, Mut L i Mut S (la om
MLH1, MSH2, MSH6, PMS1 i PMS2). Produii acesor gene recunosc mperecherile greite
(care produc o distorsiune a catenei nou sintetizate); procesul de reparare const n clivarea i
degradarea exonucleazic a fragmentului (de peste 1-2 Kb) ce conine eroarea i refacerea

12

secvenei normale (n care sunt implicate ADN-polimerazele i ). Mutaiile genelor din

sistemul MMR sunt implicate n producerea cancerului non-polipozic colorectal ereditar.
2. Repararea bazelor modificate dup replicare
Bazele azotate pot fi modificate postreplicativ sub aciunea unor ageni exogeni sau
endogeni.
(1) Mecanismul de reparare prin excizia bazei (base excision repair BER) (figura
6.5)intervine n cazul leziunilor produse de
ageni endogeni. O baz modificat chimic

(cel mai frecvent prin dezaminare spontan)

este ndeprtat sub aciunea unei ADN-

un

situs

abazic

(apurinic/apirimidinic) care este recunoscut

de

ctre

endonucleaza

(apurinic/apyrimidinic

APE1

endonuclease

1),

ADN-polimeraza

ndeprteaz

reziduul

care

5-dezoxiribozo-

fosfat, introduce nucleotidul corespunztor,

endonucleaz
APE1

la om. Enzima cliveaz catena ADN la

intervine

T G C T A
A
T G A C G A T
| | | | | | |

enzima esenial pentru acest tip de reparare

captul 5 al situsului abazic, dup care

ADN - glicozilaz

dintre baza azotat i dezoxiriboz. Se

astfel

A U T G C T A
T G A C G A T
| | | | | | |

glicozilaze, care cliveaz legtura N-glicozil

produce

A
T G C T A
T G A C G A T
| | | | | | |

iar continuitatea catenei este refcut de

ADN - polimeraz +
ADN - ligaz

ctre o ligaz.
(2) Reparare fr excizia bazei sau
repararea direct monoenzimatic (base

excision repair BER) (figura 6.6) intervine

n cazul leziunilor produse de ageni
alchilani (endogeni sau exogeni). Agenii
alchilani

transfer

gruparea

metil

A C T G C T A
T G A C G A T
| | | | | | |

situsurile reactive ale bazelor azotate, de

Figura 6. 5. Reparare prin excizia bazei (BER)

exemplu n cel al guaninei rezultnd o guanin metilat (care se poate mperechea cu timina).
Modificrile produse de agenii alchilani sunt reparate direct, fr a ndeprta bazele azotate,
de o enzim specific numit metilguanin metil-transferaza (MGMT); aceasta transfer
gruparea metil de la nivelul metilguaninei pe un reziduu propriu de cistein formnd
13

metilcisteina (care inactiveaz enzima). Astfel la

fiecare reparare este distrus o ntreag enzim,
iar mecanismul de reparare nu poate face fa
atunci cnd leziunile sunt produse de ageni

5
3

me-O6

G
C

alchilani exogeni.
(3) Reparare prin excizia nucleotidelor
(nucleotide excision repair NER) (figura 6.7).
Aceast cale este utilizat pentru corectarea

me

leziunilor care produc distorsiunea dublului helix,

ca de pild dimerii de pirimidin produi de

radiaiile ultraviolete sau modificrile chimice

produse de aflatoxin sau benzpiren. Sistemul de

reparare este complex i cuprinde mai multe gene

Figura 6. 6. Reparare fr excizia bazei

(ale cror mutaii au fost identificate n dou

(reparare direct monoenzimatic)

afeciuni rare: Xeroderma pigmentosum i sindromul Cockayne).

Modul de localizare a leziunii nu este pe deplin cunoscut. Dup recunoatere, este
blocat activitatea helicazelor i se formeaz un complex mare proteic care va produce incizia
dubl a catenei ce conine leziunea; dup ndeprtarea fragmentului cu leziune, este
resintetizat ADN-ul (cu ajutorul ADN-polimerazei sau ) i sunt legate capetele de ctre
ligaz.
Mecanismele MMR, BER, NER reprezint variante ale unui mecanism general de
reparare prin excizie-resintez (figura 6.8), care difer prin tipul leziunii, modul de
recunoatere i prin moleculele reparatoare, i care se realizeaz n mai multe etape:
-

recunoaterea leziunii de ctre enzime specifice;

desfacerea dublului helix de ctre o helicaz;

excizia fragmentului lezat i a unui segment nvecinat sub aciunea unei

endonucleaze;

ndeprtarea i degradarea fregmentului de ctre exonucleaze;

resinteza componentelor lacunei, folosind ca matri catena complementar de

ADN, de ctre ADN-polimeraze;

formarea legturii fosfodiester ntre fragmentul nou sintetizat i capetele libere ale
catenei de ADN de ctre o ADN-ligaz.

14

3.

Repararea

rupturilor

Recunoaterea leziunii i blocarea

activitii helicazelor

ADN
Rupturile

monocatenare

(single strand break) ale

ADN-ului sunt produse de
radiaii

X,

oxigenului,

radicali

ai

inhibitori

ai

| | | | | | | | | | | |
T G C G C A T=T C G A A
A C G C G T A

A G C T T

Incizia dubl a catenei cu leziune

+ ndeprtarea leziunii (complex
proteic)

topoizomerazei I i sunt
reparate de ctre enzimele
care intervin n etapele finale

| | | | | | | | | |
G C G C A T=T C G A

ale reparrii prin excizia

bazei.
Rupturile bicatenare

(double strand break) ale

ADN-ului sunt mai rare i

|
T

| 3
A

A C G C G T A A G C T T

pot s apar spontan (n

cursul

proceselor

Resinteza catenei (polimeraza

sau ) + legarea capetelor
(ligaza)

de

replicare sau recombinare)

sau pot fi induse de radiaii
gama,

inhibitori

ai

topoizomerazei II. Rupturile

bicatenare sunt reparate n
mai multe etape:
-

recunoaterea
rupturii

| | | | | | | | | | | |
T G C G C A T T C G A A
A C G C G T A A G C T T

Figura 6.7. Reparare prin excizia nucleotidelor (NER)

activarea unor proteine importante pentru repararea propriu-zis sau blocarea

ciclului celular n punctul de restricie

repararea prin recombinare omoloag, care folosete o caten de ADN intact

de pe cromatida sor sau de pe cromozomul omolog.
Mutaiile genelor care codific proteine care intervin n repararea rupturilor ADN sunt

implicate n producerea unor boli: sindromul Bloom, ataxia teleangiectazia, anemia Fanconi,
cancerul mamar ereditar.
n general, leziunile ADN sunt reparate rapid i eficient. Orice defect sau saturare a
mecanismelor de reparare face ca modificarea s devin permanent, rezultnd o mutaie.

15

ADN
bicatenar

ADN deformat
de dimerul de
timin

Endonucleaz

nceput
sintez
ADN

Exonucleaz

Ligaz

Figura 6. 8. Reparare prin excizie - resintez

III. ANOMALIILE CROMOZOMIALE

Cnd modificrile cantitative sau calitative ale materialului genetic implic regiuni
cromozomiale suficient de mari pentru a fi vizibile la microscopul optic de rutin folosind
tehnici de analiz citogenetic (cariotiparea, bandarea, autoradiografia etc.), ele sunt denumite
mutaii sau anomalii cromozomiale.
Anomaliile cromosomiale sunt modificri ale structurii sau numrului cromozomilor.
16

1. Clasificarea anomaliilor cromozomiale

a) Dup momentul producerii lor, se mpart n constituionale i dobndite.
Anomaliile constituionale se produc n cursul gametogenezei unuia din prini sau n primele
etape ale embriogenezi, fiind prezente la natere. Anomaliile dobndite apar n cursul vieii,
sub form de clone celulare anormale.
b) Dup modul de afectare a cromozomilor, se mpart n structurale i numerice.
Anomaliile cromozomiale structurale se caracterizeaz prin modificarea structurii
normale a cromozomilor. n funcie de efectul lor fenotipic, sunt mprite n anomalii
structurale echilibrate i neechilibrate. Anomaliile echilibrate (translocaii i inversii) sunt
caracterizate prin modificarea poziiei unuia sau a mai multor segmente cromozomiale, deci
fr afectarea cantitii de material genetic i fr efecte fenotipice (n majoritatea cazurilor).
Anomaliile neechilibrate (deleii, duplicaii, cromozomii inelari, cromozomii dicentrici i
izocromozomii) sunt caracterizate prin prezena suplimentar (trisomie parial) sau absena
(monosomie parial) a unei pri din cromozom.
Anomaliile cromozomiale numerice sunt modificri ale numrului de cromozomi fa
de numrul normal diploid (2n = 46). Ele se clasific n poliploidii prezena n plus a unuia
sau mai multor seturi haploide de cromozomi i aneuploidii prezena n plus sau absena
unuia sau a mai multor cromozomi.
c) n funcie de numrul de celule afectate, se mpart n omogene i n mozaic.
Anomaliile omogene se caracterizeaz prin prezena anomaliei n toate celulele individului,
iar cele n mozaic prin prezena a dou sau mai multe linii celulare diferite prin numrul de
cromozomi (provenite din acelai zigot).
d) n funcie de tipul de cromozom afectat, se clasific n autozomale (intereseaz
cromozomii somatici), gonozomale (intereseaz cromozomii sexuali X sau Y) i mixte (sunt
implicai i autozomi i cromozomi sexuali).
e) n funcie de tipul de celul afectat, se mpart n somatice (care modific
fenotipul individului afectat) i germinale (care nu modific fenotipul individului afectat, dar
se pot transmite prin gamei la descendeni).

2. Anomaliile cromozomiale structurale (mutaii cromozomiale)

Modificrile structurale sunt consecina ruperii cromozomilor i reunirii anormale a
capetelor cromozomiale.

17

a) Anomalii structurale intracromozomiale

(1) Deleiiile (del) sunt anomalii cromozomiale neechilibrate, care constau n
pierderea unui fragment cromozomial.
Prezena unei singure rupturi determin apariia
unei deleii terminale (figura 6.9a); fragmentul acentric se
pierde, iar la captul rupt se formeaz un nou telomer;
deleia terminal poate fi observat doar prin tehnici de
bandare (deleie
molecular

microscopic) sau de citogenetic

(FISH)

(deleie

submicroscopic

a.

sau

microdeleie)
Deleia interstiial (figura 6.9b) se produce n
prezena a dou rupturi pe acelai bra cromozomial, cu
eliminarea

segmentului

intermediar

reunirea

extremitilor; deleiile interstiiale sunt mai frecvente

b.

dect deleiile terminale, deoarece nu implic formarea de

noi telomere (necesare pentru stabilizarea cromozomului).
Toate deleiile produc o monosomie parial

Fig. 6. 9. Deleie:
terminal (a) i intercalar (b)

(haploinsuficien) pentru genele situate n regiunea cromozomial absent. n funcie de

dimensiunea fragmentului absent, deleia permite sau nu supravieuirea. Atunci cnd
fragmentul absent depete 2% din mrimea setului haploid, monosomia este incompatibil
cu viaa postnatal. Deleiile submicroscopice (microdeleiile) determin sindroame ale
genelor contigue, n care manifestrile fenotipice sunt datorate pierderii mai multor gene
nvecinate.
Cele mai frecvente deleii ntlnite n practic sunt sindromul Wolf-Hirschhorn
(del4p), sindromul cri du chat (del5p), sindromul velo-cardio-facial DiGeorge (del22q11),
sindroamele Prader-Willi i Angelman (del 15q11-12) .a.
(2) Cromozomii inelari (r) sunt consecina a dou rupturi produse pe brae diferite ale
cromozomului; prin reunirea extremitilor fragmentului cu centromer (centric) se formeaz
un cromozom inelar (figura 6.10.), iar fragmentele
acentrice (terminale) se vor pierde. Aceast anomalie
realizeaz o deleie i monosomie parial a segmentelor
terminale cromozomiale; cromozomii inelari, de exemplu
r(21), r(X), sunt mai rari n practic, deoarece sunt
instabili.

18

Fig. 6. 10. Cromozom inelar

(3) Inversiile (inv) sunt determinate de prezena a dou rupturi; nainte ca procesul de
reunire s aib loc, segmentul dintre cele dou puncte de ruptur sufer o rotaie de 180 o.
Atunci cnd ambele rupturi sunt localizate pe acelai bra al cromozomului, iar fragmentul
rotit nu conine centromerul, inversia este denumit paracentric (figura 6.11a). Inversiile
pericentrice includ i centromerul, fiind produse prin rupturi pe ambele brae (figura 6.11b).
Inversiile paracentrice nu pot fi recunoscute cu ajutorul tehnicilor clasice de coloraie,
deoarece nu modific forma cromozomului; ele pot fi ns identificate prin metodele de
bandare, deoarece succesiunea benzilor este evident alterat. Inversiile pericentrice pot fi
detectate i cu ajutorul tehnicilor uzuale, atunci cnd rupturile sunt localizate la distane
diferite fa de centromer, deoarece se modific poziia centromerului.

Fig. 6. 11. Inversie: paracentric (a) i pericentric (b)

Inversiile sunt anomalii cromozomiale echilibrate, care nu determin modificri ale

cantitii de material genetic, ci doar n ordinea genelor de pe segmentele cromozomiale
inversate. Ele produc, n schimb, tulburri ale procesului de crossing-over, gameii formai
fiind neechilibrai.
(4) Duplicaia (dup) reprezint dublarea unui segment
cromozomial, care se poate ataa n tandem (pstrnd succesiunea
genelor) sau se rotete cu 180 inversnd ordinea genelor
(duplicaie n tandem invers). Consecina o reprezint apariia unei
trisomii pariale pentru segmentul duplicat. Duplicaia poate avea
ca origine un crossing-over inegal (cel mai frecvent), o translocaie
echilibrat sau un izocromozom.
La om, duplicaia este mai frecvent ntlnit comparativ cu
deleia, iar consecinele sale fenotipice sunt mai puin severe;
duplicaiile produse la nivel molecular pot avea un important rol n
evoluie, prin diversificarea genic. Cele mai frecvente duplicaii
Fig. 6.12. Izocromozomi

19

sunt: dup12q i dup17q, care produc sindromul Pallister, respectiv sindromul Charcot-MarieTooth.
(5) Izocromozomul (i) se formeaz prin clivarea anormal, transversal a
centromerului. In acest caz, rezult un cromozom telocentric instabil, care poate fi transformat
ntr-un cromozom metacentric, ale crui brae au un coninut genetic identic, denumit
izocromozom (alctuit numai din brae scurte sau numai din brae
lungi) (figura 6.12).
Prezena unui izocromozom presupune existena unei
monosomii pentru braul pierdut i a unei trisomii pentru braul
implicat

formarea

izocromozomului.

Cel

mai

frecvent,

izocromozomul a fost identificat la circa 20% din cazurile de

sindrom Turner i(Xq): pacientele prezint, alturi de un cromozom X
Fig. 6.13. Sindrom
Turner i(Xq)

normal, un izocromosom pentru braul lung al celuilalt cromosom X

(figura 6.13).

b) Anomalii structurale intercromozomiale

(1) Translocaiiile constau n transferul unui fragment cromozomial ntre doi
cromozomi. Translocaiile pot fi reciproce, robertsoniene i nereciproce (inserii).
Translocaia reciproc (t) se caracterizeaz printr-un schimb reciproc de segmente
cromozomiale ntre doi cromozomi neomologi, care au suferit rupturi (figura 6.14a). In
funcie de lungimea segmentelor cromosomiale schimbate, translocaiile reciproce pot fi
egale sau inegale. Translocaiile reciproce au o importan deosebit pentru patologia uman,
deoarece purttorii unei translocaii echilibrate, normali fenotipic, pot da natere unor
descendeni cu o constituie cromozomial anormal (translocaie, trisomie sau monosomie
parial).

Fig. 6.14. Translocaie: reciproc (a) i robertsonian (b)

20

 Translocaia robertsonian (rob) sau fuziunea centric este o translocaie reciproc

ntre doi cromozomi acrocentrici (excepie cromozomul Y), omologi sau neomologi, care
sufer rupturi la nivelul braelor scurte. In majoritatea cazurilor, rupturile se produc la nivelul
centromerelor sau pe braele scurte, foarte aproape de centromer, rezultnd un cromozom
monocentric sau dicentric i dou fragmente acentrice (ce conin ambele brae scurte, care se
pierd) (figura 6.14b); pierderea braelor scurte (conin genele pentru ARN ribozomal) este
lipsit de efecte fenotipice, deoarece sunt suficiente genele rmase pe cromozomii
acrocentrici normali. Numrul de cromozomi din celul se reduce de la 46 la 45.
Fuziunea centric a cromozomilor 13 i 14 rob(13q14q) este cea mai frecvent de
translocaie la om, fiind urmat, ca frecven, de fuziunea centric a cromozomilor 14 i 21 rob(21q14q). Purttorii unei translocaii robertsoniene sunt normali fenotipic, dar pot da
natere unor descendeni anormali; de exemplu, n cazul translocaiei rob(21q14q), prin
fecundare cu gamei normali pot rezulta ase tipuri de zigoi: normal, cu translocaie
robertsonian, cu trisomie 14, cu monosomie 14, cu trisomie 21 i monosomie 21.

Inseria

(ins)

este

translocaie

nereciproc ce const n inseria unui segment

+

cromozomial

regiunea

interstiial

unui

cromozom neomolog; este condiionat de prezena a

trei rupturi (dou pe un cromozom i una pe cellalt
cromozom) (figura 6.15.), fiind astfel o anomalie
rar. Din nou, purttorul inseriei este sntos, dar
descendenii si pot fi neechilibrai genetic (cu

Fig. 6.15. Inserie

monosomie sau trisomie parial).

(2) Cromozomii dicentrici (dic) rezult din deleia regiunilor telomerice de la doi
cromozomi,

urmat

de

fuzionarea

lor

telomeric (figura 6.16.). Numrul de

cromozomi din celul se reduce la 45. Dac
cei

doi

centromeri

sunt

suficient

de

ndeprtai unul de cealalt, unul dintre ei se

inactiveaz

rezultnd

un

cromozom

pseudocentric, care se poate menine pe

parcursul a mai multe generaii celulare.
Cromozomul

dicentric

cu

ambele

centromere active este instabil i va fi

eliminat n timpul diviziunii.

Fig. 6.16. Cromozom dicentric

21

2. Anomalii cromozomiale numerice

La om, celulele somatice normale sunt diploide (2n = 46 de cromozomi), iar celulele
sexuale normale sunt haploide (n = 23 de cromozomi). Anomaliile numrului de cromozomi
sunt de dou tipuri: poliploidii i aneuploidii, care pot fi omogene sau n mozaic.
a) Poliploidia reprezint multiplicarea setului haploid (n) de cromozomi, de exemplu
3n, 4n, 5n etc. Singurele poliploidii identificate la om sunt triplodia i tetraploidia.
(1) Un set haploid de cromozomi suplimentari determin apariia unei celule triploide
(3n = 69 cromozomi); formula genetic pentru o astfel de celul este 69,XXX, 69,XXY (cea
mai frecvent) sau 69,XYY.
Triploidia este incompatibil cu viaa postnatal, fiind observat frecvent la embrionii
avortai n primele sptmni de sarcin. Majoritatea produilor de concepie triploizi care au
supravieuit o anumit perioad de timp au avut o constituie cromozomial n mozaic 3n/2n,
cu prezena unui numr mare de celule diploide.
Triploidia poate fi consecina unor defecte din timpul:
meiozei: lipsa diviziunii unuia din precursorii celulelor sexuale, ducnd la apariia
unui gamet diploid; este frecvent lipsa eliminrii globulului polar din ovocitul II, urmat de
fecundarea cu un spermatozoid normal (diginie).
mitozei: n cazul mozaicurilor (3n/2n)
fecundrii: fertilizarea ovulului de ctre doi spermatozoizi (dispermie);
Cercetrile efectuate cu ajutorul tehnicilor de bandare sugereaz c factorii paterni, i
ndeosebi dispermia, sunt sursa predominant a triploidiei la specia uman.
(2) Tetraploidia (4n = 92 cromozomi), multiplicarea de 4 ori a numrului haploid de
cromozomi (92,XXXX, 92,XXYY etc.), este extrem de rar i ntotdeauna letal. Poate fi
consecina fuzionrii a doi gamei anormali, neredui (2n), dar acest mecanism este
improbabil (sunt menionate doar cteva cazuri n literatur). Este mai plauzibil ipoteza
suprimrii primei diviziuni de clivare a unui zigot diploid, dup diviziunea cromozomilor, dar
nainte de diviziunea citoplasmei (absena citokinezei).
Poliploidia poate apare i n decursul vieii adulte, datorit unui accident mitotic absena citokinezei (endomitoza): cromozomii se comport normal pn n stadiul de telofaz,
dar citokineza nu se produce, rezultnd o celul tetraploid cu 4n cromozomi
monocromatidieni.

22

Celule poliploide se ntlnesc n unele esuturi i n condiii normale; astfel,

megacariocitele din mduva osoas au de 8-16 ori numrul haploid de cromozomi. Celule
tetraploide sunt prezente, de asemenea, i la nivelul ficatului n regenerare, ca urmare a
absenei citokinezei.
b) Aneuploidiile
Aneuploidia este modificarea numrului de cromozomi din una sau mai multe perechi;
pot exista unul sau mai muli cromozomi n plus sau n minus fa de numrul normal.
Aneuploidia este nregistrat n populaia uman mai frecvent comparativ cu
poliploidia, iar consecinele sale sunt importante pentru patologia uman. Aneuploidia implic
modificri numerice att la nivelul autozomilor, ct i a cromozomilor sexuali (X sau Y).
Nulisomia este anomalia n care ambii cromozomi ai unei perechi sunt abseni
(2n2); nulisomia este incompatibil cu viaa postnatal, fiind ntlnit doar la embrionii
umani avortai timpuriu.
Trisomiile se caracterizeaz prin prezena ntr-o celul a unui cromozom
suplimentar la o pereche de omologi (2n+1). Majoritatea trisomiilor complete sunt neviabile
la specia uman, ntlnite doar printre produii de concepie avortai spontan (cel mai frecvent
sunt avortai spontan embrionii cu trisomie autozomal 16); singurele excepii sunt trisomiile
autozomale 8, 13, 18, 21 i gonozomale (XXX, XXY, XYY)
Monosomiile constau n lipsa cromozomului unei perechi (2n-1). Singura
monosomie complet viabil la om este monosomia X
n cazul gonozomilor sunt posibile i tetrasomii (48,XXXX; 48,XXYY; 48,XXXY)
sau chiar pentasomii (49,XXXXX; 49,XXXXY).
Cauzele aneuplodiei
1. Cauzele principale ale aneuploidiei omogene sunt erori produse n cursul meiozei:
non-disjuncia (nedisjuncia) i pierderea de cromozomi datorit procesului de retardare
anafazic (figura 6.17.).
a) Non-disjuncia meiotic
Non-disjuncia reprezint lipsa separrii cromozomilor unei perechi de omologi n
anafaza meiozei I (non-disjuncia cromozomial) sau a cromatidelor surori ale unui
cromozom meioza II (non-disjuncia cromatidian); datorit acestei erori, ambele elemente
(cromozomul sau cromatida) trec n una din celulele-fiice i vor lipsi n cealalt celul-fiic.
Non-disjuncia poate interesa cromozomii somatici sau cromozomii sexuali.

23

Metafaz

Non-disjuncia
din

gametogenez

determin

apariia

unor gamei anormali,

avnd

consecine

diferite la brbai i la
femei,

din

cauza

particularitilor
gametogenezei la cele
Disjuncie
anafazic

Non - disjuncie

Retardare
anafazic

dou

sexe

6.18).

Astfel,

brbat,

Fig. 6.17. Cauzele principale ale aneuploidiei

(figura
la

dintr-un

spermatocit

primar

rezult patru spermatozoizi funcionali (figura 6.18).

Din acest motiv, la brbat, nondisjuncia n decursul primei meioze va determina apriia unor
spermatozoizi disomici (n+1) i nulisomici (n-1), n timp ce nondisjuncia care survine n
decursul meiozei II va produce i gamei normali, alturi de gamei disomici i nulisomici
X
X

MEIOZA I
MEIOZA II

(figura 6.19.).

Ovoocit I

La femeie, dintr-un ovocit

Ovoocit II i
globul polar

primar rezult un singur ovul

funcional, fiecare diviziune

Preovul i
globuli polari

meiotic

fiind

nsoit

de

eliminarea unui globul polar;

X

non-disjuncia survenit fie n

Ovul

decursul primei, fie a celei de

X
Y

MEIOZA I

a doua meioze, nu poate

Spermatocit I

Spermatocite II

MEIOZA II
X

produce

dect

anormale,

disomice

sau

nulisomice (figura 6.20.).

X

Spermatide

Dup fecundarea cu un
gamet

ovule

Spermatozoizi

normal,

gameii

disomici i nulisomici vor

forma un zigot trisomic sau

Fig. 6.18. Spermatogeneza i ovogeneza normal

monosomic. Posibilitatea ca
un

24

zigot

anormal

fie

consecina unei anomalii survenite n timpul ovogenezei este astfel mai mare dect cea a unei
anomalii similare aprute n decursul spermatogenezei.
X
Y
X
Y
X
Y

X
Y

X
Y

X
Y

X
X

Y
Y

Fig. 6.19. Consecinele non-disjunciei () n decursul

primei i celei de a doua diviziuni meiotice la brbat.

X
X

X
X
0

X
X
0

X
X

x
x

x
x

x
x

X
X

X
X
x

X
X
X
X

X
X
x

x
x

Fig. 6. 20. Consecinele non-disjunciei () n decursul primei i

celei de a doua diviziuni meiotice la femei.

25

b) Retardarea (ntrzierea) anafazic (fig. 6.17.) const n deplasarea cu ntrziere a

unui cromozom (cromatid) n cursul anafazei meiozei I sau II i care, n momentul refacerii
membranelor nucleare, va rmne n afara celulelor-fiice. n consecin, apar gamei
nulisomici care, prin fecundare, vor forma zigoi monosomici.
2. Aneuploidiile n mozaic sunt de obicei consecina unei erori produse n cursul
mitozei zigotului.
a) Non-disjuncia zigotic. Rezultatul non-disjuniei zigotice este apariia unui
mozaic (mixoploid), a crui constituie cromozomial depinde de momentul n care a avut loc
accidentul mitotic. Astfel, dac non-disjuncia intereseaz prima diviziune de clivare a unui
zigot normal, va rezulta un produs de concepie care prezint dou linii celulare anormale: una
monosomic i una trisomic pentru cromozomul n cauz (figura 6.21a). Dac non-disjuncia
intereseaz a doua diviziune de clivare a zigotului va rezulta un blastocist mixoploid alctuit
din trei linii celulare: una normal (disomic), una trisomic i una monosomic (fig. 6.21b)

XX

XX

XX

XXX

XX

XX

XX

(a)

XXX

(b)

Fig. 6.21. Consecinele unei non-disjuncii zigotice interesnd prima (a) sau a doua
diviziune (b) de clivare a zigotului

b) Retardarea anafazic are drept rezultat apariia unor clone celulare cu 2n-1/2n
cromozomi.

3. Anomaliile cromozomiale dobndite

Dup natere, spontan sau sub aciunea unor ageni mutageni, n celulele somatice pot
apare anomalii cromozomiale dobndite.

26

n funcie de durata expunerii i de eficiena mecanismelor reparatorii, agenii

mutageni pot produce rupturi (cromozomiale sau cromatidiene) i uneori deleii, translocaii
sau cromozomi inelari.
O serie de afeciuni monogenice ereditare cu risc de cancerizare (Xeroderma
pigmentosum, anemia Fanconi, ataxia teleangiectazia .a.) sunt caracterizate prin instabilitate
cromozomial (rupturi, schimburi de fragmente sau alte defecte); modificrile nu sunt ns
clonale.
Diferite anomalii cromozomiale sunt prezente i n celulele maligne:
- cromozomii minusculi (double minutes) sau regiunile cromozomiale omogen colorate
(homogenously stained regions HSR) sunt manifestri citologice ale amplificrii genice
(creterea accentuat a numrului de copii ale unor protooncogene);
- n anumite tipuri de cancer se ntlnesc anomalii cromozomiale clonale, destul de
specifice; de exemplu, cromozomul Philadelphia este rezultatul unei translocaii t(9;22) i
este specific leucemiei mieloide cronice (dei a fost descris i n unele leucemii acute).

4. Consecinele fenotipice ale anomaliilor cromozomiale

n funcie de consecinele fenotipice, anomaliile cromozomiale se mpart n:
-

anomalii echilibrate, n care cantitatea de material genetic rmne nemodificat i

fenotipul este normal;

anomalii neechilibrate, n care cantitatea de material genetic se modific (n plus

sau minus) i fenotipul este anormal;

1) Consecinele anomaliilor cromozomiale echilibrate

Anomaliile echilibrate (translocaii reciproce, inversii) determin, n general, un
fenotip normal, dar au consecine asupra reproducerii:
- datorit prezenei anomaliei structurale, sinapsa ntre cromozomii omologi este
anormal i produce blocarea gametogenezei;
- producerea de gamei anormali care, dup fecundare, formeaz embrioni cu
monosomii sau trisomii pariale (uneori complete), care de multe ori sunt eliminai prin avort
spontan (circa 1 din 250 de persoane aparent sntoase are o anomalie cromozomial
echilibrat care poate da tulburri majore de reproducere).
2) Consecinele anomaliilor cromozomiale neechilibrate
Anomaliile neechilibrate (poliploidii, aneuploidii, deleii, duplicaii, cromozomi
inelari, izocromozomi) sunt modificri cantitative ale materialului genetic (anomalii de dozaj
27

genic); ntruct informaia genetic din cromozomii anormali nu este modificat calitativ,
fenotipul anormal este consecina excesului sau lipsei unei gene normale.
Anomaliile de dozaj genic se caracterizeaz printr-o serie de modificri comune:
tulburri de cretere pre- i postnatal, dismorfie facial, anomalii congenitale majore
multiple, alterri ale structurii i funciei sistemului nervos central (manifestate prin ntrzieri
n dezvoltarea psiho-motorie), modificri ale dermatoglifelor, anomalii ale funciei gonadelor.
Factorii care influeneaz gravitatea afectrii fenotipice sunt:
(a) Mrimea dezechilibrului genetic. Poliploidiile, trisomiile cromozomilor mari i
monosomiile autozomale sunt incompatibile cu viaa; cu ct dimensiunea cromozomului este
mai mare, cu att gravitatea trisomiilor autozomale este mai mare (tri 13 > tri 18 > tri 21).
(b) Tipul de anomalie. Monosomiile sunt mai grave dect trisomiile i sunt letale
pentru toi autozomii, dar i a majoritii cromozomilor X. Aneuploidiile cromozomilor
sexuali sunt mai puin grave dect cele ale autozomilor, datorit inactivrii pariale a
cromozomilor X suplimentari.
(c) Coninutul genic i cantitatea de eucromatin/heterocromatin a cromozomului
implicat. Anomaliile care intereseaz regiunile eucromatice sunt mai grave dect cele care
intereseaz regiunile bogate n heterocromatin.
(d) Numrul celulelor afectate. Aneuploidiile omogene sunt mai grave dect cele n
mozaic.

5. Frecvena anomaliilor cromozomiale

Anomaliile cromozomiale sunt frecvente la specia uman:
- circa 10% din gameii persoanelor normale;
- 50-60% dintre avorturile spontane precoce;
- 10% dintre nou-nscuii mori;
- 0,7-1% dintre nou-nscuii vii;
- 2% dintre sarcinile femeilor n vrsta de peste 35 de ani.

6. Cauzele anomaliilor cromozomiale

Cauzele aneuploidiilor produse prin non-disjuncie sau retardare anafazic sunt
nc neelucidate. Este ns cert asocierea dintre vrsta naintat a mamei n
momentul concepiei i incidena mare a trisomiilor la copii (corelat probabil cu
particularitile meiozei materne mai ales blocarea ovocitelor n profaza meiozei
pentru cteva zeci de ani). De exemplu, riscul de non-disjuncie este de:
28

- 1:1.000 pentru femeile cu vrsta sub 25 de ani;

- 1:100 pentru femeile n vrst de 37 de ani;
- 1:10 la vrsta de 45 de ani.
Rolul posibil al factorilor externi (radiaii, infecii virale, hormoni, medicamente,
contraceptive, cafea, fumat etc) nu a fost dovedit tiinific. De asemenea, non-disjuncia pare
s fie supus unui control genetic: existena unei predispoziii la non-disjuncie este sugerat
de concentrarea familial a unor aneuploidii (de exemplu, sindrom Klinefelter, sindrom
Turner i trisomie X la diferii membri ai unei anumite familii).
ntruct numrul descendenilor normali este mai mare dect cel al descendenilor
purttori de anomalii cromozomiale, se poate presupune c n decursul vieii intrauterine are
loc o selecie care favorizeaz supravieuirea produilor de concepie cu o constituie
cromozomial normal. Aceast ipotez este susinut de faptul c produii de avort prezint
n mod frecvent anomalii cromozomiale. O alt explicaie a predominanei indivizilor normali
printre descendenii purttorilor de anomalii cromozomiale este aceea c ovocitul secundar
anormal (disomic) poate fi supus unei nondisjuncii de normalizare, rezultnd un ovul
normal i un globul polar trisomic (nefuncional).

29