LP1

SALIVA. RECOLTARE I PROPRIETI

SECREIA SALIVAR

Saliva din cavitatea bucal este un amestec al produsului de secreie a celor trei
perechi de glande salivare mari (parotida, sublingual i maxilar) i a numeroaselor
glande salivare mici.
Glanda parotid secret saliva de masticaie i digestie.
Glanda submaxilar secret saliva de gustare.
Glanda sublingual saliva secret saliva de deglutiie.
Saliva este un lichid incolor, transparent, insipid, translucid, fr miros care are
densitatea cuprins ntre 1,002 1,006, dar poate ajunge la 1,012g/cm 3, pH-ul este
n jurul valorii de 6,8 care ajunge sau trece spre alcalin n momentul masticaiei.
Volumul salivar mediu zilnic este de 800ml
RECOLTAREA SALIVEI
n clinic se face n dou moduri: prin drenaj sau prin suciune.
Drenajul const n colectarea salivei ce se scurge peste buza inferioar timp de 5
minute la un pacient care are nrile pensate.
Suciunea presupune recoltarea salivei prin aspiraie cu ajutorul unei pompe de vid.
EXAMENUL MACROSCOPIC AL SALIVEI
Saliva total de repaus, este un lichid incolor, transparent / translucid cu gust fad i
aproape inodor.
DEBITUL SALIVAR
Secreia salivar este continu la om. n stare de veghe exist o permanent
stimulare care este minim. Aceasta este realizat de agenii psihici sau anumii
excitani chimici.
Debitul salivar poate fi: de repaus 0,3 0,5 ml/min
de somn - 0,05 ml/min
de digestie 20-300 ml/min
Debitul salivar variaz cu vrsta, sarcin, febr, calitatea alimentelor, consum de
anumite medicamente.
Cantitatea salivei zilnice: 1-1,5l
n anumite condiii cantitatea mai mare dect normal = sialoreea
Sialoreea este secreia de saliv n exces care are drept cauz intoxicaia cu unele
elemente chimice: bismun, mercur, plumb, zinc, dup administrarea de
medicamente, n meningite, migrene, n toate tipurile de excitaii bucale.
Hiposialia cantitate mic de secreie salivar i aceasta apare n dezhidratare
puternic, administrarea unor medicamente, unele afeciuni locale sau generale
care afecteaz glandele salivare.
Asialie lipsa secreiei salivare.
pH-ul salivar este uor acid i poate varia ntre: 5,75 7,5.
Densitatea salivar 1,002 1,006g/cm2 este mai mic dect densitatea plasmei
sanguine 1,02g/cm2.
LP2
ANALIZA BIOCHIMIC A SALIVEI

Compoziia chimic:
99,5% ap, 0,2% substane anorganice: ioni de Na, potasiu, calciu, magneziu, ioni
carbonat, SCN, 0,3% substane organice. i este format din proteine, amilaza
lizozimul, mucinele, glicoproteinele, substane azotoase neproteice, creatinine,
amoniac, substane neazotate, acidul lactic i acidul citric.

1. Identificarea srurilor minerale din compoziia salivei

Principiul metodei:
Ionii srurilor minerale din saliv formeaz precipitate cu reactivi specifici fiecrui
ion: - ionul de Cl d cu azotatul de argint un precipitat alb clorura de argint
- ionul de fosfat cu molibdatul de amoniu d un precipitat galben
- ionul tiocianat cu clorura feric d tiocianatul feric de culoare roie
Ca reactivi: - soluie de azotat de argint 5%
- acid azotic concentrat
- soluie de molibdat de amoniu 5%
- soluie de clorur feric 3%
Tehnica de lucru:
Se pregtesc trei eprubete n care se pipeteaz cte 1ml saliv.
n prima eprubet se adaug cteva picturi de azotat de argint. Apariia unui
precipitat alb indic prezena clorului n saliv.
n a doua eprubet se adaug 1ml de acid azotic concentrat i 2ml soluie molibdat
de amoniu. Se agit uor eprubeta. Apariia unui precipitat galben indic prezena
ionului fosfat n saliv.
n a treia eprubet se adaug 1, 2 picturi de soluie de clorur feric. Apariia unei
coloraii roie indic prezena ionului tiocionat n saliva analizat.

2. Identificarea mucinelor din saliv (glicoproteine)

Mucinele sunt glicoproteine care au ca grupare prostetic compui din clasa glucidelor ce
deriv de la aminozaharuri.
Principiul metodei:
Mucinele dau reacia biuretului pozitiv, reacie caracteristic legturilor peptidice.
Reacia biuretului se bazeaz pe formarea unor compui de tip chelaric ntre
legtura peptidic i ionul de Cu+, n mediu alcalin, cu formarea unui
complex colorat violet sau albastru.
Reactivi
Reactiv biuret
Tehnica de lucru
ntr-o eprubet se pipeteaz 1 ml de saliv la care se adaug 1 ml de ap distilat.
Se omogenizeaz coninutul eprubetei i se adaug 2 ml de reactiv biuret. La limita
de separare dintre cele dou lichide apare un inel colorat n violet ce indic
prezena mucinelor n saliva analizat.
3. Identificarea amilazei din compoziia salivei.
Amilaza salivar este o enzim care face parte din clasa hidrolazelor i hidrolizeaz amidonul
degradndu-l pn la stadiul de dextrine.
Principiul metodei:
Hidroliza amidonului de ctre amilaza salivar conduce la formarea maltozei care va reduce
hidroxidul de cupru la suboxid de cupru de culoare rou crmiziu.
Reactivi:
- soluie de amidon 1%
- reactiv fehling 1 i 2
Tehnica de lucru:
ntr-o eprubet se pipeteaz 0,5ml saliv i 1ml soluie de amidon. Se omogenizeaz amestecul
i se incubeaz 30 de minute la 37C, timp n care amilaza hidrolizeaz amidonul pn la
maltoz. Se adaug 3, 4 picturi de reactiv fehling i se fierbe eprubeta. Datorit proprietilor
reductoare ale maltozei, aceasta va transforma reactivul fehling ntr-un precipitat rou
crmiziu de suboxid de cupru.
LP3. DETERMINAREA ACTIVITI I AMILAZEI SERICE

A m i l a z e l e s u n t e n z i m e c a r e c a t a l i z e a z h i dr o l i z a l e g t u r i l or
g l u c o z i d i c e d i n a m i d o n , g l i c o g e n i a l t e g l u c i d e n r u di t e c u
a c e s t e a d u c n d l a f or m a r e a u n o r m o l e c u l e m a i m i c i d e : d e x t r i n e ,
maltodextroze, maltoz, glucoz.
n cavitatea bucal exist o amilaz care poart numele de ptialin ce produce
primul atac hidrolitic asupra glucidelor din cavitatea bucal.
Determinarea amilazei prin metoda Wohlgemuth.
Principiul metodei:
Amilaza hidrolizeaz amidonul n compui mai simpli, cu mas molecular din ce
n ce mai mic care i pierd capacitatea de a se colora cu iodul.
n 10 eprubete se fac diluii succesive ale probei de ser. Apoi n fiecare eprubet se
pune amidon i iod. Se incubeaz i se observ coloraia. Se apreciaz cantitatea
minim de ser necesar hidrolizei amidonului.
Reactivi: NaCl 0,9%, amidon 0,1% i iod 0,2%
Prob: ser
Tehnica de lucru:
Se pregtesc 10 eprubete:
n prima eprubet se pipeteaz 2ml ser, iar n celelalte 9 se pune 1ml NaCl.
Din prima eprubet se ia 1ml i se pune n a doua eprubet. Se agit. Din a doua
eprubet se ia 1ml i se pune n a treia eprubet. ..pn la ultima eprubet din
care se ia 1ml i se arunc. Apoi se adaug n fiecare eprubet 2ml amidon.
Eprubetele se agit i se in 37C timp de 30 minute. Dup incubare se pun 3
picturi de iod i se observ culoarea.
Eprubeta
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
nr.
Diluia 1/1 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512
Activitatea
enzimatic 2 4 8 16 32 64 128 256 512 1024
(UW)

Interpretarea rezultatului
Culoarea eprubetelor reflect gradul de hidroliz a amidonului. Eprubetele colorate
n:
- albastru conin amidon nehidrolizat
- violet amilo dextrine
- brun rocat eritrodextrine
- glbui maltodextrine
- incolor amidon complet hidrolizat
activitatea amilazei se exprim n U.W.
1UW reprezint cantitatea minim de enzim capabil s hidrolizeze 1mg amidon
n 30 minute la 37C.
1UD (diasplazic) reprezint cantitatea de enzime capabil s hidrolizeze 0,2ml
amidon n condiiile descrise.
1UW = 2nUD, unde n este numrul de eprubete n care nu apare culoarea albastr.
Valori normale:
Amilazemie - 16-32 UW
Variaii patologice:
Valori crescute: pancreatite acute i cronice, insuficien renal, carcinom de cap
de pancreas, obstrucii intestinale, ulcer, colici biliare, intoxicaii cu alcool.
Valori sczute: ciroze, carcinom hepatic, hepatite, alcoolism.
Eprubeta 5 32 sntos.
LP4. DETERMINAREA ACTIVITII CATALAZEI

Catalaza este o enzim care face parte din clasa oxidoreductazelor rspndit n
celulele animale i vegetale i care ndeplinete o funcie important n fenomenele
de oxidoreducere celular i anume descompunerea apei oxigenate la O2:
2 H2O2= 2 H2O + O2
Catalaza se afl n eritrocite, iar activitatea ei depinde de numrul eritrocitelor de
aceea este foarte important ca odat cu activitatea ei s se calculeze i nr. de
eritrocite.
Principiul metodei:
Catalaza acioneaz asupra unei cantiti n exces de ap oxigenat la temperatura
camerei un timp determinat. Excesul de ap oxigenat rmas nedescompus, dup
ntreruperea aciunii catalazei, prin titrare cu o soluie de permanganat de
potasiu n mediu acid:
Determinarea activitii catalazice se face prin cantitatea de ap oxigenat
descompus de catalaz n 30 de minute la 37C.
Pentru determinarea activitii catalazice se folosete snge diluat 1/1000.
Tehnica de lucru:
Se recolteaz 0,1ml snge din pulpa degetului cu ajutorul unei micropipete.
Se introduce ntr-un balon Erlenmeyer de 100ml n care afl
10ml ap distilat. Se agit bine s se produc hemoliza i
s e c o m p l e t e a z p n l a s e m n c u a p s e r. n d o u f l a c o a n e
martor i prob se pipeteaz cte 10ml ap distilat i 1ml
s n g e d i l u a t . Unul din baloane, care constituie proba martor se
f i e r b e 3 - 5 m i n u t e pentru a distruge enzima, apoi se rcete. n ambele
eprubete se adaug 2 ml H2O2 (ap oxigenat) soluie 1% agitndu-se bine.
Ambele probe se incubeaz pentru 30 minute la 170C, (timp n care se
observ degajarea bulelor de oxigen n pr o b a c u e n z i m d a t o r i t
descompunerii apei oxigenate de ctre catalaz, pe cnd n proba
m a r t o r, n c a r e c a t a l a z a a f o s t i n a c t i v a t pr i n f i e r b e r e , a c e a s t
degajare nu se observ). Se adaug n fiecare prob 5 ml soluie
H 2SO4 (acid sulfuric) 10% i cte 2,3 picturi de alcool amilic . Pr o b e l e s e
titreaz apoi cu o soluie de permanganat de potasiu 0,1 N pn la
apariia culorii roz pal persistent 30 secunde.
Calcul
Activitatea catalazic este dat de indicele catalazic, care reprezint
numrul de miligrame H2O2 descompus de 0,1 ml snge n decurs de 30 minute.
Pentru calcul se utilizeaz urmtoarele notaii:
mg ap oxigenat = Vm Vp titru s o l u i e d e p e r m a n g a n a t d e p o t a s i u
1,7mg/ml
V m v o l u m u l d e p e r m a n g a n a t d e p o t a s i u f ol o s i t l a t i t r a r e m a r t or
V p v o l u m u l d e p e r m a n g a n a t d e p ot a s i u f o l o s i t l a t i t r a r e p r o b .
A c t i v i t a t e a e n z i m e i s e e x pr i m p r i n n r. c a t a l o z i c c a r e r e p r e z i n t
c a n t i t a t e a n m g d e a p o x i g e n a t d e s c o m p u s d e c a t a l a z d i n t r-
un ml de snge.
Va l o a r e a d e d i a g n o s t i c a r e i n di c e l e c a t a l o z i c c a r e r e pr e z i n t
r a p o r t ul d i n t r e n r. c a t a l o z i c / n r. d e e r i t r o c i t e .
Va l o r i n o r m a l e 1 2 - 1 4
Va l o r i p a t o l o g i c e :
Va l o r i s c z u t e : a m e n i e , af e c i u n i h e p a t i c e , c a n c e r.
LP5. DETERMINAREA VITAMINEI C
DOZAREA VITAMINEI C
Vitamina C este o vitamin antiscorbutic care previne apariia ascorbutului.
Acidul ascorbic se gsete sub dou forme: acid ascorbic form redus i acidul
dehidroascorbic form oxidat.
Rol fiziologic:
- este un puternic agent reductor care neutralizeaz radicalii liberi
- asigur structura i funciile celulei care sintetizeaz colagenul: fibroblati,
osteoblati i odontoblati
- este coenzim pentru oxidoreductoze
- crete imunitatea organismului fa de infeciile virale.
Necesar zilnic: 60-80mg.
Dozarea vitaminei C prin metoda iodometric
Principiul metodei:
Vitamina C se transform n mediul acid prin oxidare cu iod n acid
dehidroascorbic. Iodul este obinut prin reacia dintre iodatul de potasiu i iodura
de potasiu.
Metoda utilizat este de titrare, iar indicatorul folosit este amidonul.
Reactivi:
- acid clorhidric soluie apoas 2%
- soluie apoas KIO3 de concentraie 0,004 M (iodat de potasiu)
- soluie apoas de amidon 0,2 % ca indicator
- soluie apoas 1 % KI (iodur de potasiu)
Tehnica de lucru:
Proba martor: ntr-un flacon se pipeteaz 2ml soluia de acid clorhidric, 3ml ap
distilat, 0,5ml potasiu iod, 3ml amidon
Coninutul flaconului se titreaz rapid ntr-o soluie de iodat de potasiu pn la
apariia unei coloraii albastre.
Se noteaz cu Vm volumul iodatului de potasiu utilizat la titrare probei martor.
Proba de analizat:
ntr-un balon se pipeteaz 1ml prob, 1ml HCl, 3ml ap distilat, 0,5ml potasiu
iod, 2ml soluie amidon. Coninutul se titreaz cu o soluie de iodat de potasiu pn
la apariia unei coloraii albastre.
Vp volumul de iodat de potasiu la titrarea probei
Calcul:
mg vitamina C%= (Vp-Vm)T
T= titrul probei de iodat de potasiu = 0,352
mg vit. C %= (0,2 - 0,1) 0,362= 0,0352
LP6. DOZAREA LACTAT DEHIDROGENAZ LDH

LDH este o enzim cu o rspndire mare n organism. O ntlnim n rinichi,

miocard, muchi, ficat, creier, plmni.
Datorit acestei rspndiri valorile crescute sunt nespecifice.
n infarctul miocardic persistena nivelului crescut de LDH este mai ndelungat
dect a activitatea altor enzime cu valori de diagnoz
LDH este o oxidoreductaz care particip la glicoliza anaerob i catalizeaz
transformarea reversibil a piruvatului n lactat
LDH enzim tetrameric. Aceste lanuri pot fi: de tip H (miocard) i lanuri de tip
M care sunt distribuite n muchii scheletici i n ficat.
Exist 5 izoenzime cu localizare specific ntr-un anume organ:
LDH1 4 lanuri H H4
LDH2 3 lanuri H 1M
LDH3 2 lanuri H 2M
LDH4 1 lan H 3M
LDH5 M4
Dozarea LDH-ului prin metoda spectrofotometric (cinetic)
Principiul metodei:
LDH-ul catalizeaz conversia piruvatului la L lactat i n prezena NADH care esre
transformat n NAD+.
Viteza de conversie a NADH n NAD + este msurat la 340nm este proporional
cu activitatea LDH.
Reactivi:
R1 tampon fosfat pH 7,5
R2 piruvat de sodiu
NADH
Se amestec R1 i R2 n proporie 1/1
Proba este ser nedehidrolizat
Metoda de lucru:
ntr-o eprubet se pipeteaz 1ml amestec R1+R2 i 10l ser.
Eprubeta se agit i se incubeaz un minut la 37C. se msoar variaiile extinciei
la a= 340nm fa de apa distilat timp de 3 minute cu notarea absorbiei la fiecare
minut.
Calcul:
Cp = A/min K= 16030
Unitatea de msur a LDH este U/l
Valori normale la adult: 135-225 U/l, copii sugari: 225-600 U/l, copii 2-14ani: 120-
300 U/l.
Variaiile fiziologice: valori crescute la efort.
Valori patologice: valori crescute n infarctul miocardic LDH (valori crescute la
35-36ore de la producerea infarctului persist ntre 3 i 10 zile.
n infarctul pulmonar: creterea LDH se nregistreaz n decurs de 24 ore de la
producere.
valori crescute n insuficien cardiac, afeciuni hepatice,
leucemie, afeciuni musculare, anemii, infarct renal, pancreatit acut, obstrucii
intestinale, hipertermie.
Valori sczute LDH asociate cu terapii citostatice
V0 1,026
R1 1,019
R2 1,025
R3 1,030

1,030-1,019 = 0,011 = 0.0036

3 3
Cp= 0,0036 16030 = 58,77U/l

LP7 DETERMINAREA LACTATULUI (SAREA)

(ACIDULUI LACTIC)

Acidul lactic metabolitul final al glicolizei:

n efort muscular intens, energia necesar contraciei musculare este furnizat de
glicogenul muscular pe calea glucoz acid lactic.
Acumularea acidului lactic n esutul muscular peste limita maxim provoac febra
muscular.
Timp de 2, 3 zile excesul de acid lactic este eliminat n circulaia sanguin i
vehiculat la inim i ficat unde e reoxidat la acid piruric, iar acesta n alte ci
metabolice.
Dozarea acidului lactic sau a lactatului. Colorimetrie
Principiul metodei:
Prin nclzirea limfei cu acid sulfuric, acidul lactic acetoldeliza care n prezena
ionilor de Cu formeaz cu parahidroxid de fenil un compus colorat rou violet
Mod de lucru:
Dozarea acidului lactic se face dup deproteinizare i dup ndeprtarea glucidelor
reactivi P S M
Proba snge recoltat 0,1 - -
Soluie triplaacetic
0,9 0,9 0,9
TCA
Soluie acid lactic - 0,1 -
Ap - - 0,1
Se centrifugheaz Cele trei eprubete
NaOH 0,5 0,5 0,5
CuSO4 0,5 0,5 0,5
Cu(OH)2 0,5 0,5 0,5

Din fiecare eprubet se extrag cte 0,5ml, apoi se adaug: CuSO 4 0,05ml i acid
sulfuric concentrat cte 6ml. Acidul sulfuric se adaug pictur cu pictur. Se
fierbe 2 30 fiecare eprubet. Apoi eprubetele se rcesc brusc n ghea i n
fiecare se pipeteaz 0,1ml para hidroxi difenil (colorantul). Se agit, se las 30 de
minute n repaus, apoi se fierb 1minut.
Dup rcire se citesc extinciile la 570nm
Calcul: mg acid lactic /100= E prob . C stand, unde Cs = 10mg/100
E stand

Valori normale > 4- 16mg/100 n snge venos la adult

Variaii patologice: C a. lact. din snge e corelat cu C a. piruric
 a.l este un indicator al statusului oxidoreductor al organismului i poate
a.p estima severitatea bolilor circulatorii

LP8. DETERMINAREA IONILOR DE Ca i Mg

 n organismul uman intr numeroase elemente minerale. Unele n proporii mai
mari: macroelementele: O, C, H, Ca, P, N, altele n cantiti extrem de mici:
oligoelemente: Fe, Cu, Zn, Ni.
Calciu
Un organism adult, normal conine 1, 2 kg Ca din care 98% n oase.
Ca plasmatic remarcabil de constant n condiii fiziologice este compus din trei
fracii:
Ca ioni - liber fracia activ biologic
Ca legat de proteine (albumine)
Ca complexat (acizi organici) difuzabil
Calcemia e reglat riguros la nivel hormonal
Determinarea calciului prin metoda calorimetric
n mediu neutru, n prezena arsenazei 3 Ca formeaz un compus colorat.
Intensitatea culorii este dat de concentraia ionilor de calciu
Reactivi:
R1 arsenaza 3
Standard de Ca cca 10mg/dl
Proba: ser, plasm heparimizat sau diluat
Tehnica de lucru:
reactivi P S M
R1 1ml 1 1
ser 10l - -
standard - 10l -
ap - - 10l
Se agit, se incubeaz 1minut la 25C i se msoar extincia P i S fa de martor
la 650nm
Calcul: C prob = E prob . C stand, unde Cs = 10mg/dl
E stand
Valori normale: Ca total 8,8 -10,8 mg/dl
Ca ionic 4,2 - 5,2 mg/dl
Variaii patologice:
Hipocalcemie: hipoparatiroidism, deficit de vitamina D, hipomagnezemia,
malabsorbia de Ca, afeciuni hepatice, , pancreatice, intestinale.
Hipercalcemie: hiperparatiroidism primar, creterea absorbiei intestinale,
dezhidratri.
Hipercalcemie sever > 15mg/dl : urgen medical, produce disfuncii nervoase
Manifestri clinice ale hipocalcemiei:
- rahitism, presupune calcefierea defectuas a oaselor
- osteomalacie decalcifieri osoase a persoanelor adulte
 - osteoporoza presupune reducerea structurii osoase, cu predispoziie la
fracturi la cele mai mici loviri.
MAGNEZIUL
n concentraie 2lrde Mg
2/3 n oase
15 n fluidele extracelulare
30% intracelular
n plasm 60 70% Mg este liber, restul legat pe proteine, n special albumine.
Mg rol n:
- permeabilitatea membranelor
- excitabilitatea neromuscular
Dozarea Mg prin metoda calorimetric Mann Yoe.
Principiul metodei:
Colorantul Mann i Yoe (albastru) + Mg la pH 9-10 n mediu alcoolic complex
Intensitatea culorii C Mg
Reactivi:
Colorantul Mann i Yoe
Soluie tampon de tetraoxid de sodiu
Standard de Mg concentraie 2mg%
Acid percloric
Prob: ser
Tehnica de lucru:
n trei eprubete M, S, P se pipeteaz:
reactivi P S M
Mann i Yoe 1ml 1 1
ser 0,1 - -
standard - 0,1 -
Se agit . dup 15 30 se citesc extinciile P i S fa de martor
Calcul: C prob = E prob . C stand, unde Cs = 2mg/100
E stand

Valori normale:
- aduli: 1,6 2,5 mg/dl
- copii: 1,6 2,4 mg/dl
variaii patologice:
- valori crescute: insuficien renal acut i cronic, hipertiroidie, ciroze
grave, acidoze
- valori sczute: rahitism, com diabetic, insuficien hepatic,
malabsorbie, vome, pancreatit acut
LP13. DETERMINAREA FOSFATAZEI ALCALIN - FAL
FAL este o alfaglobulin ce catalizeaz hidroliza esteril fosforice la pH alcalin.
Particip la transportul fosfo . Exist trei izoenzime cu importan clinic:
osoas, hepatic, intestinal.
Tranzitorie: n sarcin
Determinarea activitii FAL prin metoda spectrofotometrie
Principiul metodei:
n mediu alcalin FAL catalizeaz hidroliza monofosfailor. n urma reaciei
paranitrofenol i fosfat anorganic.
Ionii de Mg activeaz enzime.
Activarea enzimelor concentraia de paranitrofenol eliberat respectiv cu
intensitatea colorrii obinute.
Reactiv:
R1: tampon dietilamin pH 9,8, clorur de Mg,
R2: fosfat de paranitrofenol
R1 + R2 n proporii recomandate de productor
Proba: ser nehemolizat
Mod de lucru:
ntr-o eprubet: 1ml amestec R1 + R2
20l de ser
Se agit i se incubeaz 1minut la 37oC.
Se msoar variaia absorbiei la =405nm fa de apa distilat timp de 3minute.
Se determin variaia activitii / minut
Calcul:
Cp = DA/min 3000
Valori normale: femei :55-170U/l
brbai: 70-175 U/l
copiii: <700 U/l
Variaii fiziologice: valori mari ale izometriei osoase, duble sau triple fa de
valoarea la aduli se gsesc la copii n perioada de cretere datorit creterii
oaselor.
Variaii patologice: FAL este singura enzim care se determin prin diagnosticul
afeciunilor osoase.
Valori crescute la:
obstrucia cilor biliare,
cancer de cap de pancreas,
ciroz biliar,
hepatit viral.
hiperparatiroidism
hipertiroidism
tumori osoase
osteomalacie
rahitism
Creterea de natur intestinal: afeciuni ulcerative ale tractului gastrointestinal,
malabsorbia sever
valori sczute n: hipofosfatoza familial
malnutriie
deficit de Zn, Mg
hipotiroidism

LP14. DETERMINAREA Na i K

Na cel mai important cation extracelular

K cel mai important cation intracelular
Na n plasm concentraia 136 - 145mEqg/l
Concentraia este reglat strict de rinichi ce asigur echilibrul ntre Na ingerat i cel
excretat
Na principalul element al echilibrului acidobazic i primul factor de reglare a
presiunii osmatice.
K concentraia n plasm 3,5 5mEqg/l.
Exist un echilibru ntre Na extracelular i K intracelular.
Metodele de determinare a Na i K:
- flamfotometria
- absorbia atomic
- electrozi, ioni selectivi de Na i K
Determinarea flamfotometric a Na i K
Principiul
n flacr atomii sunt excitai.
La revenirea electronilor pe nivelul inferior, energia absorbit e eliberat i emis
sub form de lumin cu o lungime de und caracteristic fiecrui element.
Intensitatea radiaiei emise C atomilor din prob
Mod de lucru:
Se pulverizeaz cu un curent de aer soluia sau plasma de analizat. Aerosolii se
amestec cu un gaz carburant amestec de acetilen i se ard ntr-un bec special.
Atomii de Na sunt excitai i emit spectre caracteristice.
Concentraia fiecrui ion este cu intensitatea fluxului luminos i la rndul su
cu intensitatea fotocurentului care declaneaz msurarea la galvanometru.
Valori normale: Na 136 -145 mEqg/l
K 3,5 5 mEqg/l
Variaii patologice:
Hiponatremii: tulburri digestive, diaree, vom, dereglri hormonale
Hipernatremii: dezhidratri
Hipocalemii: tulburri neuromusculare i cardiace
hiperaldosteronism
Hipercalemia: mai rar, dar mai grav, prin tulburri renale, genetice.

LP9 DETERMINAREA IMUNOGLOBULINEI A SECRETORIE

Imunoglobulinele molecule glicoproteice produse de plasmocite (limfocite B
activate) ca un rspuns la un imunogen (antigen)= ANTICORPI
Funcii generale:
- legare Ag
- funcii efectoare: fixare complement i legare de celule
Structur:
2 lanuri grele Heavy
2 lanuri uoare Light
puni disulfidice care leag cele 4 lanuri
izotipuri imunoglobulin 5 forme
Clasificare:
- dup tipul lanurilor: grele:
Ig G g (1 4 subcase)
Ig M
Ig A a ( a1 a2)
Ig D d
Ig E e
Subclase imunoglobin:
- subclasa Ig G Ig G1 G4
- subclasa Ig A - Ig A1- a1
Ig A2 a2
Ig A
Structur: n plasm monomer
n secreii (sIg A) :- dimer, lan Y, component secretorie
Proprieti:
- concentraie granumetric a 2-a dup IgG
- principala Ig n secreie (imunitatea mucoaselor)
Se ntlnete n lacrimi, saliv, suc gastric, surfactant pulmonar.

LP10. DETERMINAREA GLUCOZEI N SALIV I SNGE

Dozarea glucozei din ser prin metoda enzimatic (metod specific)

Principiul metodei:
n prezena glucoxidazei glucoza este oxidat la acid gluconic. Apa oxigenat
rezultat din reacie reacioneaz cu un donor de O2 n prezena peroxidazei
rezultnd un compus colorat fotocolorimetrabil la 505nm. Cantitatea de glucoz
din prob este direct proporional cu intensitatea culorii.
Glucoza + O2 + H2O glucoxidaza acid gluconic + H2O2
Reactivi:
R1 tampon i fenol
R2 glucoxidaza, peroxidaz i un compus colorat 4 aminoantipirina
Standard de glucoz: 100mg/dl
Mod de lucru:
reactivi P S M
Proba 0,01 - -
Standard - 0,01 -
Ap distilat - - 0,01
R1 + R2 1 1 1
Se agit i se incubeaz eprubetele la 37C apoi se citesc extinciile probei i
standardului la =505nm fa de martor.
Calcul: mg glucoz /100ml snge = E prob . C stand
E stand

Glicemia (valori normale) 70 105mg/100ml snge

Variaii fiziologice:
Valoarea glicemiei crete peste 40 50ani n: efort fizic intens, emoii, oboseal, n
sarcin, la marii fumtori, la persoanele sedentare. n efort fizic intens rezult
scderea glicemiei (se folosete glucoza n cantiti foarte mari) hipoglicemie.
Valori sczute: sarcin, malnutriie i n perioadele de post.
Variaii patologice:
- valori crescute (hiperglicemii): diabet zaharat, hipertiroidie, acromegalie /
gigantism, tumori pancreatice, unele infecii, intoxicaii, accidente vasculare,
stres emoional sau fizic (infarct miocardic), boala Cushing
- valori sczute (hipoglicemii): insuficien corticosuprarenal, insuficien
hepatic, insuficien hipofizar, glicozurie, hiperinsulinism, malabsorbie,
febr, consum de alcool.