CITOLOGIE

Lucrarea pracuc 2 - reparaLul mlcroscoplc permanenL

!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
Cerln(e necesare penLru o examlnare precls:
- Celulele sl celelalLe elemenLe prezenLe in (esuL
s e psLraLe in condl(ll cL mal aproplaLe de
condl(llle lor naLurale (IIkAkL)
- reparaLul s e LransparenL, sub(lre, plaL
- ulferlLele componenLe s e coloraLe dlferlL
(CCLCkAkL)
regnrea preparatu|u| pentru
m|croscop|e opnc
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Posibilit!"i de preparare
- sec!iuni
- in toto (structuri/organisme mici,
suficient de sub"iri pt. a fi ntinse pe o
lam#)
- zdrobire (pt. studiul con"inutului celulei)
- frotiuri (celule suspendate n fluid)
- culturi celulare
regnrea preparatu|u| pentru
m|croscop|e opnc
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Preparatul microscopic permanent
Modalitatea de examinare a unor celule,
fragmente de "esut sau organ, c#rora li s-au
suprimat procesele vitale prin fixare


Permite examinarea la microscopul optic a
principalelor caracteristici ale celulelor $i a
modului lor de organizare
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Preparatul microscopic permanent
Un preparat microscopic este alc#tuit din:

1. obiect de examinat (sub"ire $i transparent)
2. mediu de montare (transparent)
3. suport de montare (lam# $i lamel#)
hup://www.agLcbloproducLs.com/lmages/sllde.[pg
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Preparatul microscopic permanent
Scopul realizrii de a conserva
- structurile celulare i
- raporturile dintre ele pe un timp nelimitat.
Este folosit n:
-clinic
-laboratorul de anatomie patologic
-medicin legal
-cercetare
-scop didactic
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Etapele obinerii preparatului
microscopic permanent
1. Recoltare
2. Fixare
3. Deshidratare %i clarificare
3. Impregnare %i includere
4. Sec"ionare
5. Colorare
6. Montare (ntre lam# $i lamel#)
7. Etichetare
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
1. RECOLTAREA
= Opera"ia prin care fragmentul de "esut/organ
este prelevat de la om, animal viu sau de la cadavru
RECOLTAREA BIOPSIC#

Se recolteaz# de la om sau animal
viu $i se practic# n scop diagnostic.
Se realizeaz# prin :
1. raclare
2. punc"ie-biopsie
3. aspira"ie cu ac fin
4. interven"ie chirurgical#
1. dimensiunea pieselor s# nu
dep#$easc# 5 mm

2. instrumentele bine ascu"ite
pentru a evita zdren"uirea $i
pierderea paralelismului
dintre planuri

3. adecvat# n func"ie de tipul
organului; se vor evita
modific#rile de volum, form#
$i relief
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
RECOLTAREA NECROPSIC#
recoltarea de la cadavrele umane se practic# n
laboratoarele de anatomie patologic# $i medicin# legal#
cu scopul de a confrunta datele de anatomie clinic# $i
tanatogenetice

dup# sacrificarea animalului, n scop de cercetare sau
didactic
1. RECOLTAREA
(ct mai aproape de momentul decesului)
pentru a evita procesele de autoliz#
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Recoltarea biopsic
A. raclare

B. puncie biopsie

C. aspiraie cu ac fin

D. intervenie
chirurgical
- biopsie incizional
- biopsie excizional
hup://lmg.webmd.com/dLmcms/llve/webmd/consumer_asseLs/slLe_lmages/arucles/healLh_Lools/eczema_overvlew_slldeshow/phoLollbrary_rm_phoLo_of_hand_wlLh_eczema.[pg
hup://www.bellefneL.com/healLhandheallng/lmages/sl33331723.[pg
hup://www.glowm.com/resources/glowm/graphlcs/gures/v1/0270/016f.[pg

A
C
D
8
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
etap# critic# pentru un bun preparat
proces fizic sau chimic prin care:
- sunt oprite rapid procesele vitale (celulare),
- p#strndu-se, cu alter#ri minime:
- volumul,
- forma,
- relieful $i
- raporturile moleculare (n structuri/ultrastructuri) $i spa"iale (ntre structuri/
ultrastructuri)
Prin fixare urm#rim:
1. Conservarea "esuturilor
2. Prevenirea pierderii de constituen"i celulari
3. Cre$terea diferen"ierii optice a structurilor celulare
4. M#rirea consisten"ei "esuturilor n scopul de a facilita
trecerea lor prin celelalte etape $i mai ales pentru
sec"ionare
2. FIXAREA
hup://www.lelcablosysLems.com/Lypo3Lemp/plcs/Scl_Lab_PlsLo_Lead0004_d0f91f3944.[pg
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Serle de solu(ll alcoollce de concenLra(ll crescnde
(pn la 100) penLru indeprLarea apel sl inloculrea
el cu alcool
lndeprLarea alcoolulul cu a[uLorul unor agen(l in care
sl alcoolul sl parana sunL mlsclbll (ex: Loluen)
3. DESHIDRATAREA $i CLARIFICAREA
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
McCraw-Plll Companles / !unquelra PlsLology
- eLapa care aslgur condlll opume penLru
seclonarea pleselor

Cea mal foloslL mas de
lncluzlune: parana
4. INCLUDEREA
hup://www.lelcablosysLems.com/Lypo3Lemp/plcs/Lmbeddlng_028_slzed_31fe12192c.[pg
hup://www.lelcablosysLems.com/Lypo3Lemp/plcs/Scl_Lab_PlsLo_Lead0008_03_a9cda89137.[pg
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
cu mlcroLomul ( vor rezulLa sec(lunl cu o groslme de aprox. 3m)
5. SEC%IONAREA
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
McCraw-Plll Companles / !unquelra PlsLology
- eLapa prln care se urmresLe cre;Lerea conLrasLulul dlnLre
elemenLele celulare/usulare, prln capaclLaLea subsLraLurllor
morfologlce (care con(ln proLelne, aclzl nuclelcl sau alLe
macromolecule) de a lega dlferlL co|oran||
rln meLode compaublle cu meLoda de xare
oL meLode unlversale (PL) sau speclce esuLulul sLudlaL
(nlssl)
6. COLORAREA
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
- permlLe conservarea speclmenelor
penLru cL mal mulL ump
ntre lam# $i lamel#, n diferite medii de montare, ini"ial
fluide
Protejarea sec"iunilor fragile de eventualele deterior#ri
Conservarea colora"iei $i asigurarea unui mediu optic
omogen $i transparent necesar examin#rii microscopice
7. MONTAREA
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
8. ETICHETAREA
Pe fiecare lam# se noteaz#:
tipul celular/tisular
sursa de recoltare
fixatorul
metoda de colorare
data realiz#rii preparatului
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
PAUZ&
COLORANTUL HISTOLOGIC
Substan"# colorat#, de obicei de natur# organic#, ce
poate intra n celul# ata$ndu-se la nivelul componentelor
celulare $i permi"nd astfel diferen&ierea lor optic!.
Nu toate substan"ele colorate sunt coloran"i!
Coloran!ii prezint#, d.p.d.v. chimic:
- Grup#ri cromofore (purt#toare de culoare)
- Grup#ri auxocrome (cu capacitatea de a colora)
- Ionizate (principale) formeaz# leg. electrochimice cu substratul
- Neionizate (secundare) formeaz# leg. de hidrogen cu substratul
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Claslcare:
- dup provenlen(: naLurall (vegeLall/anlmall) sau slnLeucl
- dup caracLerul chlmlc: - ac|z|: gr.auxocr. sarcln - . se aLaseaz pe subsLraL (+)
- baz|c|: gr.auxocr. sarcln + . se aLaseaz pe subsLraL (-)
- neutr| (amesLecurl de col. aclzl sl bazlcl)
METODE DE COLORARE
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
Criterii de clasificare:
1. Momentul color#rii
2. Nr. de coloran"i utiliza"i
3. Mecanismul color#rii
4. Metoda de ob"inere a
colora"iei optime
5. Raportul dintre
rezultatul color#rii $i
culoarea colorantului
(vitale / permanente)
(simple / combinate)
(directe / indirecte cu intermediar)
(progresive / regresive cu decolorant)
(ortocromatic# / metacromatic#)
METACROMAZIA
Capacitatea unui substrat de a se colora ntr-o alt culoare dect cea a
colorantului.
PRINCIPIU:
- existena unor grupri funcionale aflate la o distan foarte mic una de
alta.
- colorantul se dispune ordonat i foarte aproape molecul de molecul
permind reaezri ale electronilor la alte nivele energetice i absorbia
de alte lungimi de und din spectrul vizibil
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
31&-4#'-+
56) $##7 .3 -81(2-1
9/0): ;06<2=(3 >1 =/03->-?@

AA B C(<?30<D-- (/E3 A F-/01=
COLORA%II UZUALE
!"#$%&'( *+,-.% %/ 0'01#2#
!"#$% '() *)+) ,-./012.34 Disciplina de citologie !i histologie, UMF Carol Davila Bucure!ti
PemaLoxllln-eozln (PL)
Clemsa
Mallory
Colora(ll Lrlcrome: Masson, Azan, van Cleson
lmpregnarea argenuc
MeLode speclale (Ca[al /ua lano, PemaLoxllln ferlc 8egaud)
Sudan (lll, lv, 8, 88)
1. Compoz||e
2. kezu|tate (text + |mag|n| + surs)
3. arncu|ar|t|