Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
permanent
Preparatele permanente sau durabile permint un studiu amnunit al celulelor
pe seciuni fixate i colorate; ele rezist n timp i se pot realiza prin: metoda
efecturii seciunilor fine i prin metoda etalarii materialului biologic n
monostrat.
Preparatul microscopic permanent reprezint modalitatea de examinare a
unor celule, fragmente de esut sau organ, crora li s-au suprimat procesele
vitale prin fixare. Permite examinarea la microscopul optic a principalelor
caracteristici ale celulelor i a modului lor de organizare.
Un preparat microscopic este alctuit din:
*Obiect de examinat subire i transparent;
* Mediu de fixare transparent;
*Lam si lamel.
Scopul realizrii unui preparat microscopic permanent este de a conserva
structurile celulare si raporturile dintre ele pe un timp nelimitat. Este folosit n
clinic, laborator de anatomie patologic, medicin legal, cercetare, n scop
didactic.
Obtinerea unor preparate microscopice permanente necesita efectuarea unor
timpi operatori succesivi, fiecare din ei avnd o influen hotrtoare asupra
reusitei finale. n ordinea executrii lor acetia sunt: recoltarea, fixarea,
splarea(decalcifierea in cazul esuturilor dure), includerea, secionarea,
aplicarea seciunilor pe portobiect, culoarea, montarea i etichetarea. n funcie
de tehnica aleas, succesiunea acestor timpi poate fi modificat, unii dintre ei
putand fi omisi.
Dac unele greeli in efectuarea secionrii, colorrii sau montrii mai pot fi
ulterior corectate partial, recoltarea, fixarea si includerea incorect fcute,
compromit definitiv calitatea preparatelor microscopice.
Recoltarea reprezint unul din timpii cei mai dificili din tehnica de biopsie
celular, deoarece dup sacrificarea animalului de experien sau obinerea unui
fragment de esut sau organ prin biopsie sau alt act operator cu maximum de
Secionarea -piesa inclus sau ngheat se taie n felii sub iri de ordinul
micronilor cu ajutorul unui aparat numit microtom. Secionarea la microtomul
pentru parafin presupune urmtorii timpi pregtitori: modelarea blocului pentru
secionare; lipirea blocului pe portobiect; secionarea propriu-zis; etalarea i
lipirea seciunilor.
Colorarea: se urmrete creterea contrastului ntre elementele tisulare sau
celulare prin modificarea indicilor de refracie ai substratului morfologic cu
ajutorul colorantilor. Tehnica de colorare depinde de natura fixatorului si de
esutul pe care se aplic.
Montarea reprezint protejarea seciunilor fragile de eventuale
deteriorri,conservarea coloraiei i asigurarea unui mediu optic omogen si
transparent necesar examinrii microscopice. Se face ntre lam i lamel n
diferite medii de montare iniial fluide. Mediile de montare pot fi: apoase
(glicerina,sirop Apathy) si anhidre (balsam de Canada,colofoniu).
Etichetarea se face astfel: pe fiecare lam se noteaz: tipul celular, sursa de
recoltare, fixatorul, metoda de colorare i data efecturii.