Metoda spectrofotometric face parte din clasa metodelor fizice de determinare a
concentraiei unei soluii n laborator. Similar celorlalte metode fizice, este simpl, rapid i ieftin. Spectrofotometria reprezint o clas larg de metode de investigare. Ea face parte dintr-o clas i mai mare i anume clasa metodelor spectrometrice. Orice metod spectrometric nregistreaz i msoar spectre electromagnetice. Un spectru reprezint totalitatea valorilor unei mrimi ce caracterizeaz un sistem. n cazul unui spectru electromagnetic acesta reprezint totalitatea lungimilor de und (frecvenelor) pe care un sistem le poate emite sau absorbi. Atunci cnd un sistem absoarbe radiaii electromagnetice el trece pe un nivel energetic superior iar cnd emite pe unul inferior.
Dac lungimile de und emise sau absorbite au valori ntr-un domeniu
cvasicontinu obinem spectre de benzi, iar dac variaz discontinuu sunt spectre de linii. Spectrele de linii sunt n general specifice substanelor n stare atomic n timp ce spectrele de benzi sunt, n general, specifice substanelor n stare molecular.
Fiind vorba de un numr foarte mare de metode se impune clasificarea lor. i n
acest caz se pot face mai multe clasificri avnd n vedere mai multe criterii.
un prim criteriu poate fi al domeniului spectral investigat. n toate domeniile
spectrale electromagnetice exist metode de investigare, multe dintre ele cu aplicaii n clinic. Domeniile spectrale electromagnetice sunt, n ordinea descresctoare a energiei deci
cresctoare a lungimii de und, urmtoarele: gama (), raze X, ultraviolete (UV),vizibil,
infrarou (IR), microunde i radiounde. Ca metode cu implicaii clinice vom meniona: un alt criteriu de clasificare a metodelor spectrometrice poate fi cel al modului de obinere a spectrelor. Sistemele analizate pot fi puse s emit sau s absoarb radiaii electromagnetice. Vorbim astfel de spectrometrie de emisie respectiv absorbie.
se poate face i o clasificare avnd n vedere rezoluia spaial sau temporal
a metodei. Prin rezoluie nelegem valoarea minim a unui parametru pentru care metoda utilizat mai poate furniza date. Astfel exist metode spectrofotometrice care pot nregistra spectre din regiuni cu suprafaa de ordinul micronului ptrat (microspectrofotometrie sau citospectrofotometrie obinut prin cuplarea unui spectrofotometru cu un microscop). n domeniul rezoluiei temporale se pot nregistra spectre n intervale de ordinul fs (f =10-12). Comparnd aceast rezoluie cu timpul de via a unui electron pe o stare excitat (~10 -8s) constatm c astfel de metode ne permit s urmrim chiar i cum se excit sau dezexcit un atom. Acest lucru este posibil atunci cnd i detectorul de radiaii este foarte sensibil. n prezent exist detectoare care pot nregistra chiar i un singur foton.