Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Definitie
Boala canceroasa este caracterizata prin prezenta in organism a unei populatii celulare cu origine
monoclonala care este in expansiune continua prin crestere autointretinuta.Celulele maligne nu se mai
supun controlului mecanismelor fiziologice de reglare a proliferarii celulare. Apare o subpopulatie
capabila de a migra si de a se adapta la alte micromedii straine generand tumori secundare (metastaze).
cresterea necontrolata;
cresterea in gramezi dezordonate (in mod normal celulele ce se divid cresc in strat monocelular);
respiratia anaeroba
Imortalizarea celulelor tumorale. Fiecare celula din organism are un numar limitat de
replicari(limita Hayflick) datorita scurtarii capetelor cromozomiale(telomere) la fiecare replicare.
In 90% din cancere telomeraza este activata si ea reface telomerele;
Modificari epigenetice;
Angiogeneza tumorala;
Rezistenta la mecanismele de moarte celulara programata, de obicei prin mutatii ale genei p53.
La om, telomerele poseda motivul repetitiv TTAGGG/AATCCC care se repeta de o mie de ori si permite
replicarea normala a capetelor cromozomilor. Catena bogata in G este orientata in sensul 5-3 catre
extremitatea cromozomului si depaseste cu 12 la 15 nucleotide extremitatea catenei bogata in C.
Datorita existentei acestui dezechilibru catena bogata in G formeaza o coada scurta, monocatenara, la
cele doua extremitati ale cromozomului. Aceasta dispozitie persista de la o generatie celulara la alta
datorita unei enzime speciale, telomeraza, care poate adauga noi unitati repetitive .
Telomeraza(Elisabeth Blackburn) este o transcriptaza inversa care asambleaza fragmente de ADN
folosind o catena ARN matrita. Este o enzima foarte neobisnuita deoarece fragmentul de ARN care
serveste drept model (matrita) face parte din structura.
Modificari epigenetice
Transmiterea de oncogene care pot determina apariia unor stri clinice i biologice precursoare
sau a unor cancere: transmiterea direct a genei BRCA 2 la brbai produce ginecomastie
unilateral cu ectazie canalicular urmat de malignizare.
Anomalii cromozomiale: trisomia 21, sindromul Klinefelter( sindrom XXY), sindromul de deleie
al cromozomului 13. Trisomia 21 se asociaz cu un risc mai mare de apariie a leucemiei acute i
a tumorilor solide( 10-20 x) . Sindromul de deleie a cromozomului 13 se asociaz cu risc mare
de retinoblastom bilateral.
Sdr. Peutz-Jeghers( predispune la cancer de colon, mamar avnd ca markeri fenotipici: pete
hiperpigmenate punctiforme n regiunea perioral, mucoasa bucal, extremiti)
Sunt de numarul sutelor. Primul indiciu ca celulele eucariotelor superioare pot contine gene specifice
care produc cancer au rezultat din studiile mecanismelor moleculare virale care produc tumori la
animale. La sfarsitul anilor 70 studiul capacitatii transformante a virusului care produce sarcomul aviar
(VSR) de catre Peyton Rous a dus la edificarea conceptului de oncogena si intelegerea mecanismului
procesului malign. Astfel unele retrovirusuri (si virusuri acut transformante) poarta in genomul lor
impreuna cu genele proprii si o gena care poate transforma celulele normale ale gazdei in celule
canceroase. Ea a fost numita oncogena virala (v-onc).
Principalele tipuri de gene implicate in carcinogeneza sunt: oncogenele, genele supresoare ale cresterii
A.Oncogenele
Sunt variante mutante ale unor gene normale implicate in crestere si diferentiere-protooncogenele.
Aceste prototoncogene se activeaza prin mutatii dominante cu castig de functie care modifica
comportamentul de multiplicare al celulei. Oncogenele pot fi oncogene virale(v-onc) si oncogene
celulare(c-onc).
a. Oncogenele virale
Oncogenele virale sunt fragmente de ADN viral capabile in anumite conditii sa induca transformarea
tumorala. Celulele canceroase pot sa apara in urma actiunii virusurilor tumorale specific. Virusurile
tumorale sunt de doua tipuri:
HBV este vs. ADN dar are comportament asemanator cu vs. ARN in ceea ce priveste modul de
replicare. ADN este transcris in ARN atat pentru fabricarea proteinelor virale cat si pentru
replicare genomica. ARN-ul genomic este transcris apoi in ADN genomic: reverstranscriptie.
Hepatita VHB este o problema de sanatate majora datorita corelatiei stranse intre prezenta de
HBsAg la purtatorii cronici si a HCC. In Taiwan studii au aratat ca purtatorii de AgHBs au un risc
de a dezvolta HCC de 217 ori mai mare decat nepurtatorii.51% din decesele la puratorii de
antigen sunt produse de ciroza hepatica si HCC comparativ cu decesul prin aceeasi cauza la
populatia generala care este de 2%.
Retrovirusuri
RSV-tumori aviare
3. Catena sens de ARN este copiata de catre revers transcriptaza in catena antisens de ADN. Aici
polimeraza actioneaza ca o ADN polimeraza ARN-dependenta.
Acesta este un ARNt care este incorporat in particula virala de la celula gazda anterioara;
5. ADN dublu catenar este circularizat si integrat in ADN-ul celulei gazda, folosind o integraza.
Acest ADN va fi copiat de fiecare data cand ADN-ul celular este copiat, iar provirusul se
comporta ca o gena celulara normala;
6. ARN genomic din catena sens este copiat din ADN integrat de catre ARN polimeraza II a celulei
gazda, care copiaza in mod obisnuit o gena in ARNm. ARN genomic este apoi prelucrat la
extremitati.
Genomul unui retrovirus contine 3 gene : -gag (codifica miezul viral ;-pol (codifica revers
transcriptaza virala);-env (codifica proteinele capsulei virale si oncogena virala: v-onc).
TR nu codifica proteine;
tRNA se ataseaza in acest punct atunci cand revers transcriptaza initiaza copierea ARN.
v-src, codifica o tirozinkinaza, o enzima ce ataseaza grupari fosfat la reziduurile Tir ale
diferitelor proteine din celulele gazda si pot deveni oncogenice.
b. Protooncogenele
Sunt gene din celulele normale implicate in controlul cresterii, proliferarii si diferentierii
celulare normale prin produsii pe care ii codifica;
Ele sunt secvente de ADN ce codifica proteine localizate in diferite compartimente celulare si
care se exprima in diferite stadii ale ciclului celular;
Au inalt grad de conservare structurala, fapt ce evidentiaza rolul lor important in viata celulei;
Au ereditate mendeliana;
Nu au secvente LTR, fata de v-onc, care sunt intotdeauna inconjurate de secvente LTR;
c. Oncogenele celulare
Oncogenele celulare-clasificare
Dupa functia indeplinita si localizarea celulara oncogenele celulare se clasifica in 5 clase:
1. Factori de crestere: sis(v-sis este o oncogena a virusului sarcomului simian), care are o structura
asemanatoare cu factorul de crestere trombocitara tip (PDGFB);
2.Receptori ai factorilor de crestere tirozinkinazici- proteinkinaze cu sau fara functie de receptor: erb
B1, Kit;
Clase de oncoproteine
1. Factori de crestere: sis, hst, int 1, int 2
Codifica proteine ce sunt descarcate in spatiul extracelular. Oncogenele contribuie la malignizare prin
activarea permanenta si exagerata a receptorilor membranari care amorseaza proliferarea sau
diferetierea;
30% din oncogenele descrise pina in prezent codifica proteine cu activitate kinazica, in marea lor
majoritate receptori ai factorilor de crestere. Moleculele acestor oncoproteine sunt capabile sa
declanseze, in absenta ligazilor specifici, fosforilarea reziduurilor tirozinice care furnizeaza permanent si
necontrolat semnale intracelulare care promoveaza proliferarea nelimitata.
Exemple : erb B1 specifica domeniul kinazic al receptorului pentru factorul de crestere epidermal (E
GFR);Kit receptorul factorului de crestere al macrofagelor (MGFR)
3. Proteine G membranare
Familia protooncogenelor ras (H-ras, K-ras, N-ras) codifica proteine mici cu greutate moleculara de 21
K-daltoni cu proprietatea de a lega si hidroliza GTP.
Genele c-mos au rol in reglarea meiozei iar genele c-raf stimuleaza mitoza.
5. Factori de transcriere
Sunt cunoscuti peste 20 de factori de transcriere care sunt alcatuiti din 2 domenii funtionale ce produc
legarea la ADN si activarea trascriptiei. Exemplu : c-erb A codifica proteina Erb A care este receptor al
hormonilor tiroidieni. Familia de gene MYC(C-MYC, N-MYC si L-MYC) implicate in controlul factorilor de
transcriptie sufera mutatii in neoplaziile hematologice.
Sunt gene care prin produsii lor inhiba proliferarea celulara. Mutatiile cu pierderea functiei duc la
cresterea si proliferarea celulara necontrolata si apoptoza ineficienta. Genele au un caracter recesiv.
Inactivarea ambelor alele ale unei GST schimba comportamentul celulei devenind mutant(LOH-loss of
heterozigosity).
Au fost investigate diferite femei care au dezvoltat diferite tumori si care erau heterozigote pentru
polimorfismul G6PDH. Aproape invariabil s-a gasit ca tesutul tumoral exprima doar una dintre cele doua
alele G6PDH. Acesta este un indiciu ca tumora a luat nastere dintr-o singura celula si nu din doua.
Cromozomul Philadelphia apare in celulele maligne ale majoritatii pacientilor cu leucemie mieloida
cronica (LMC). Faptul ca aceasta translocatie apare in toate celulele maligne ale unui individ cu LMC
sustine notiunea de clonalitate a tumorii.
In familiie mici, ca urmare a penetrantei, cel mai adesea incompleta a genei patologice, aceasta
trasatura poate trece neobservata;
De aceea afirmarea determinismului monogenic este posibila numai in urma investigarii unor familii
numeroase sau prin cumularea datelor obtinute prin investigarea mai multor familii;
Varsta la care debuteaza boala este redusa (cancere pediatrice), comparativ cu cele comune;
Tumorile primare sunt multiple si multifocale, in timp ce neoplasmele comune sunt frecvent
monocentrice.
Furnizeaza informatii necesare producerii unei proteine care este localizata in nucleu si care
controleaza ritmul cresterii si diviziunii celulare
Recunoaste lanturile de ADN rupte sau avariate si le repara prin activarea unor enzime
Sindromul Bloom
Este caracterizat de statura redusa, anomalii cutanate produse prin actiunea radiatiilor si cancere
cutanate. Boala apare cu frecventa de 1/50.000 la evreii Ashkenazi. Este produsa prin deficienta genei
BLM de a sintetiza proteine din familia RecQ helicazelor, care au rolul de a despiraliza structura de dublu
helix a ADN-ului in vederea replicarii si repararii structurii ADN.
Inactivarea GST;
I.Activarea unei protooncogene se realizeaza prin urmatoarele mecanisme : insertia virala; amplificarea
genica; mutatia punctiforma; translocatia cromozomiala; si transpozitia intr-o regiune cromozomiala
activa.
1. Insertia virala
Reprezinta procesul de intergrare a genomului viral sub forma de provirus in genomul celulei gazda.In
functie de tipul de virus inserat avem 3 cazuri :
a. Retrovirusuri sunt ribovirusuri(ARN) ce contin in genomul lor oncogene pe care le-au achizitionat
din genomul celulelor parazitate. Dupa insertia lor in genomul celulei gazda (ca provirusuri), genomul
retroviral este copiat cu ajutorul reverstranscriptazei virale si sunt copiate si oncogenele virale care sunt
apoi traduse in oncoproteine ce vor interfera programele vitale ale celulei gazda.
b.Retrovirusuri acut transformante - pot transforma rapid in cateva zile celulele in cultura si induc
formarea tumorilor la gazde potrivite in aproximativ 2-8 saptamani. Replicarea este defectiva, necesita
un virus helper. Genomul unui retrovirus tipic are trei gene : gag, pol, env care asigura infectivitatea si
capacitatea replicativa. Genomul unui retrovirus acut trasformant are pe langa cele trei gene clasice si o
gena aditionala v-onc.
c. Virusuri ADN sau ARN nepurtatoare de oncogene care intervin in cancerogeneza prin mecanismul de
mutatie prin insertie. Aceste oncogene nu au corespondenti celulari. Provirusul se insera in acest caz in
interiorul unei protooncogene pe care o activeaza , nu produce el insusi oncoproteine
2.Amplificarea genica
Este procesul prin care o protooncogena normala structural este amplificata intr-un numar foarte mare
de copii (zeci-sute) astfel incat se va sintetiza o cantitate mare de oncoproteina.
Exemple de activare prin amplificare genica : trei familii de gene myc, erb B, ras;
In neuroblastom gena c-myc este amplificata in 50% din cazuri iar in cancerul de san sunt amplificate
erb B si c-myc in 20% din cazuri.
3. Mutatia punctiforma este reprezentata de substitutia sau deletia unei singure baze azotate cu o alta
baza azotata. Ea duce la sinteza unor proteine anormale sau trunchiate. Mutatiile punctiforme pot fi
localizate in regiunile structurale si duc la modificari calitative ale produsilor genici sau pot fi localizate in
regiunile reglatoare si duc la modificari cantitative ale proteinelor;
familia ras (H-ras, K-ras, N-ras) si apar frecvent in cancerele de colon, pulmonar si vezica
urinara;
p-53 - rol in control ciclu celular (inhibitie) produce tranzitie perioada GS. Pot apare mutatii
punctiforme in exonii 5 si 10 > 50% din cazurile de cancer de colon, san, vezica urinara si plaman
In cancerul hepatic apare mutatia G-249-T a genei p-53.
5.Transpozitia intr-o regiune cromozomiala activaLimfomul Burkitt este o tumora frecventa in copilarie
si se intalneste relativ frecvent in regiunile cu malarie din Africa Centrala si Noua Guinee. Un rol
important in etiologie il au tintarii si virusul Ebstein Barr dar evenimentul central il constituie activarea
unei protooncogene. S-a descoperit o translocatie caracteristica, reciproca intre cromozomul 8 si
cromozomul 14 (t 8; 14) in 90% din cazuri. In 5% t(2;8) si 5% t(8;22).
GST codifica semnale antiproliferative si proteine care inhiba mitoza si cresterea celulara, avand ca
rezultat apoptoza. GST inhiba formarea tumorilor prin 2 mecanisme: inhibarea mitozei prin
proteinele produse sau prin mentinerea starii de heterozigotie a alelei normale. Alterarea GST
contribuie la malignizare doar atunci cand ambele alele ale sale sunt inactivate secvential sau se
pierd. Prin utilizarea sondelor de ADN s-a demonstrat ca progresia majoritatii tumorilor solide se
coreleaza cu pierderea heterozigotiei. Un exemplu de pierdere a starii de heterozigotie il constituie
retinoblastomul care este o tumora rara (1/20000 de nasteri) a celulelor retiniene, care se manifesta
in primii ani de viata. Exista doua forme maligne: forma ereditara si forma sporadica. Forma
ereditara are transmitere autozomal dominanta. Copiii cu retinoblastom au risc mare sa dezvolte in
adolescenta sau la varsta adulta alte neoplazii. Ei sunt purtatorii unei mutatii in celulele germinale
ale unuia dintre parinti. Gena este localizata pe cromozomul 13q14 si se noteaza cu Rb. Celulele
normale ale copiilor cu Rb ereditar sunt heterozigote pentru markerii ADN (au o alela normala). In
celulele tumorale starea de heterozigotie este pierduta datorita deletiei alelei normale.
Non-disjunctia cromozomilor care poarta alelele heterozigote ale genei supresor a cresterii
tumorale. O celula fiica mosteneste un singur cromozom normal, iar cealalta 3;
Recombinarea mitotica intre cromatida purtand alela normala si cromatida care poarta alela
mutanta, rezultatul fiind 2 cromatide normale si 2 cromatide cu alela mutanta. Segregarea
ulterioara poate genera 3 tipuri de celule fiice:una homozigota pentru alela mutanta a GST, una
heterozigota cu o alela normala si una mutanta si un tip homozigot pentru alela normala;
Sunt GST care impreuna sunt raspunzatoare de producerea a 2-3% dintre cancerele de san si de ovar.
Sunt gene autozomal dominante reprezentate de mutatii germinale. Riscul aparitiei cancerelor la
femeile purtatoare este de 85-90% pe parcursul intregii vieti si de 50% pana la 50 de ani. Proteinele
BRCA au rol in repararea ADN dar si in reglarea transcriptiei.
BRCA 1 are pozitia 17q21. Mutatiile produc 40% din cancerele mamare ereditare si 80% din cancerele
mamare si ovariene ereditare. Mutatiile sunt produse prin: aparitia prematura a a codonilor STOP la
nivelul cadrului de citire si repetarea secventelor Alu.
BRCA 2 are locus pe cromozomul 13q12-q13. Prin mutatie duce la inhibarea apoptozei celulare.Mutatiile
se asociaza mai frecvent cu aparitia cancerului mamar la barbat.
Exemple de GST
gena APC (Adenomatosus Poliposis Coli) CR5. mutatii ale acestei gene produc polipoza
adenomatoasa familiala cu transmitere autozomal dominanta.
Clinic se manifesta prin aparitia a sute de mici polipi adenomatosi, asimptomatici cu risc de a se
transforma malign.
gena DCC ( Deleted in Colorectal Carcinoma) situata pe cr.18. Pierderea heterozigotiei apare in
70 % din cancerele colorecatale si in 40 % din adenoamele de colon.
mutatii ale MCC apar in 40% din cancerele sporadice colorectale dar si in formele familiale
gena WT1 (Tumora Wilms 1) pe cr. 11 si se exprima in rinichi, aparat genital si splina
gena p53 (Protein 53 kDalton) pe cr.17 este una dintre cele mai importante gene cu rol in
inhibarea cresterii si proliferarii anarhice si impiedicarea aparitiei tumorilor.
Integritatea moleculelor de ADN este mentinuta de sisteme enzimatice multiple care corecteaza
leziunile ADN aparute spontan sau induse de agenti fizici sau chimici. Genele de stabilitate sintetizeaza
proteine implicate in mentinerea integritatii structurale a moleculelor de ADN si conservarea informatiei
genetice. Mutatiile genelor ce codifica acest sistem de corectare a leziunilor ADN duce la instabilitate
genomica. Aceasta se coreleaza cu riscul crescut de dezvoltare a cancerului.
Genele supresoare de tumori si genele de stabilitate au de multe ori actiuni similare. De exemplu, BRCA
1 si BRCA 2 sunt GST prin activitatea de control a transcriptiei si gene de stabilitate prin interventia in
repararea rupturilor bicatenare ale ADN-ului. APC are si activtate de controlul stabilitatii genomice.
Indivizii sunt considerati candidati pentru protocoalele de evaluare a factorilor de risc pentru cancer
daca au un istoric personal si/sau familial(pe linie materna sau paterna) de trasaturi sugestive pentru
cancerele ereditare. Urmatoarele aspecte sunt sugestive pentru cancerele ereditare:
Cancer bilateral in organe pereche, sau cancere multifocale(cancer de san bilateral sau cancer
renal multifocal)
Aparitia aceluiasi tip de cancer la rude apropiate( mama, fiica si surorile cu cancer de san)
Cancere aparute in mai multe generatii ale unei familii( transmitere autozomal dominanta)