Universitatea "Dunărea de Jos" Galați

Facultatea de Științe și Industrie

Alimentară
CLONAREA
Disciplina: Principii de Genetică
 ҉ Este posibil ca oaia Dolly să fi fost cea mai faimoasă clonă din lume dar se pare că nu a fost prima. Mai multe animale, inclusiv broaște, șoareci, oi, vaci fuseseră clonate înaintea lui Dolly.

҉ Așadar, Dolly nu a fost prima clonă și arăta ca oricare altă oaie, dar de ce a provocat atât entuziasm și atâta îngrijorare? Pentru că a fost primul mamifer clonat dintr-o celulă adultă, mai degrabă decât dintr-un embrion. Aceasta a fost o realizare științifică majoră dar a ridicat și preocupări etice.

҉ În 2004, un șoarece a fost clonat folosind un nucleu dintr-un neuron olfactiv, arătând că nucleul donator poate provenii dintr-un țesut al corpului care nu se divine în mod normal.

Deci, cum a Dolly?

Cum a fost produsă Dolly?
҉ Pentru a o produce pe Dolly, oamenii de știință au
folosit nucleul unei celule din uger de la o oaie albă
finlandeză Dorset de șase ani. Nucleul conține aproape
toate genele celulei. Ei au trebuit să găsească o modalitate
de a "reprograma" celulele ugerului - pentru a le stopa
creșterea dar menținându-le în viață – pe care le-au obținut
prin modificarea mediului de creștere (acel „fluid" în care
celulele au fost menținute în viață). Apoi au injectat celula
într-un ovocit nefertilizat căruia i-a fost înlăturat nucleul și
au făcut ca celulele să fuzioneze folosind impulsuri
electrice. Ovocitul nefertilizat a provenit de la o oaie
scoțiană cu fața neagră (Scottish Blackface).
Când oamenii de știință au reușit să fuzioneze nucleul din celula provenită de la oaia
adultă donatoare cu celula nefertilizată de la cealaltă oaie, trebuiau să se asigure că
celula rezultată se dezvoltă într-un embrion. Au cultivat-o timp de șase - șapte zile
pentru a vedea dacă aceasta s-a divizat și se dezvoltă normal (stadiul de balstocist),
înainte de a o implanta pe o oaie surogat, o alta oaie din rasa Scottish Blackface. Din
277 de fuzionări s-au dezvoltat 29 de embrioni timpurii, care au fost implantați la 13
oi surogat, iar după 148 de zile doar o singură sarcină a ajuns la termen, născându-se
un miel de 6,6 kg pe nume Dolly.

Producția lui Dolly a arătat că genele din nucleul unei celule somatice diferențiate
atât de mature sunt încă capabile să revină la o stare de totipotență embrionară,
creând o celulă care poate continua să se dezvolte în orice altă parte a unui animal.

Motivul principal pentru care
cercetătorii de la Institutul Roslin
(Universitatea din Edinburgh)
doreau să poată clona animale a fost
legat de cercetarea lor care viza
producerea de medicamente. Ei au
reușit să transfere gene umane care
produc proteine utile la ovine și
vaci, astfel încât să poată produce,
de exemplu factorul IX de coagulare
a sângelui pentru a trata hemofilia
sau alfa-1-antitripsina pentru a trata
fibroza chistică și alte afecțiuni
pulmonare.
҉ Există și alte motive medicale și științifice ale interesului pentru clonare.
Aceasta este deja utilizată alături de tehnici genetice în dezvoltarea de
organe animale pentru transplant la om (xenotransplant). Combinarea unor
astfel de tehnici genetice cu clonarea porcilor (obținută prima dată în martie
2000) ar duce la o furnizare fiabilă de organe donatoare adecvate. Utilizarea
organelor de porc a fost împiedicată de prezența unui zahăr (alfa gal), în
celulele porcilor, dar în 2002 oamenii de știință au reușit să elimine gena
care produce acest zahăr, iar acești porci "knockout" ar putea fi crescuți în
mod natural.
҉ Studiul clonelor animale și celulelor clonate ar putea duce la o mai bună
înțelegere a dezvoltării embrionului și a bolilor legate de îmbătrânire și
bolile asociate cu vârsta. Șoarecii clonați devin obezi, cu simptome legate de
nivelul crescut de insulină plasmatică și leptină, deși urmașii lor sunt sau nu
normali. Clonarea ar putea fi folosită pentru a crea modele de animale
rezistente la boli, care la rândul lor, ar putea duce la progrese suplimentare în
înțelegerea și tratarea acelor boli. Ar putea chiar îmbunătății biodiversitatea,
asigurând continuitatea raselor rare și a speciilor pe cale de dispariție.
҉ Cromozomii lui Dolly au fost mai scurți decât cei ai altor oi, dar în alte
privințe, ea a fost la fel ca oricare oaie din epoca ei. Cu toate acestea,
îmbătrânirea ei timpurie se reflectă în faptul că a fost creată din nucleul unei
oi de șase ani. Studiul celulelor ei a relevat, de asemenea că avea o cantitate
mică de ADN mitocondrial moștenită de la celula donatoare, și nu de la
nucleul celulei donat ca restul ADN-ului ei. Deci aceasta însemnă că nu a
fost o copie identică. Această constatare ar putea fi importantă pentru bolile
genetice, cum ar fi hemofilia și pentru anumite afecțiuni neuromusculare, ale
creierului și rinichilor, care sunt transmise genetic de la mamă.
 Ce s-a întâmplat cu Dolly?
Dolly a fost răsfățata Institutului Roslin, s-
a împerecheat și a produs descendenți în
mod normal, arătând astfel că animalele
clonate se pot reproduce. Ea a fost
eutanasiată pe 14 februarie 2003, la vârsta
de 6 ani și jumătate. În mod normal oile
pot trăi până la 11-12 ani, dar Dolly
suferea de artrita la nivelul articulațiilor
membrelor posterioare și de adenomatoză
pulmonară (o tumoră specifică oilor indusă
de un virus, la care sunt predispuse oile
crescute în interior).
Pe 2 februarie 2003, prima oaie clonată din
Australia a murit pe neașteptate la vârsta
de 2 ani și 10 luni. Cauza morții nu a fost
cunoscută iar carcasa a fost incinerată
rapid deoarece era in stadiu avansat de
descompunere.
Preocupări etice și reglementări
҉ Majoritatea preocupărilor etice legate de clonare se referă la
posibilitatea ca aceasta să fie folosită pentru a clona omul. Aceasta ar
presupune dificultăți tehnice enorme. Deși tehnologia există în
prezent, ar trebui implicate sute de femei care doresc să doneze
probabil ovule, să dorească să se ofere ca mame surogat iar
posibilitatea ridicată de avort spontan sau mortalitate la naștere,
probabilitatea îmbătrânirii premature și ratelor ridicate de cancer la
copii astfel produși ar fi imposibil de imaginat. Cu toate acestea, în
2004 oamenii de știință din Coreea de Sud au anunțat că au clonat 30
de embrioni umani, pe care i-au crescut în laborator până la un anumit
stadiu, din care au produs o linie de celule stem. O discuție etică
suplimentară a avut loc în 2008, când cercetătorii au reușit să cloneze
șoareci din țesut înghețat de 16 ani.
 ҉ În SUA, președintele Clinton a cerut comisiei Naționale de Bioetică și Congresului
american încă din anii 2000 să examineze această problemă, în Regatul Unit Comitetul
științei și tehnologiei din Camera Comunelor, Autoritatea pentru embriologie și fertilizare
umană și Comisia Consultativă pentru genetică umană au avizat faptul că clonarea ar trebui
interzisă. Consiliul Europei a interzis de asemenea clonarea, de fapt majoritatea țărilor au
interzis utilizarea clonării pentru producerea de bebeluși umani (clonarea reproducerii
umane). Cu toate acestea, există un aspect medical important al tehnologiei de clonare care
ar putea fi aplicat oamenilor. Este vorba de clonarea terapeutică (sau înlocuirea nucleului
celular) prin ingineria țesuturilor.

҉ În clonarea terapeutică, celulele unice ar fi prelevate de la o

persoană și "reprogramate" pentru a crea celule stem, care
au potențialul de a se dezvolta în orice alt tip de celule din
corp. Când este necesar, celulele stem ar putea fi înghețate
sau dezghețate și apoi induse să crească în anumite tipuri de
celule, cum ar fi celulele cardiace, hepatice sau ale
creierului, care ar putea fi utilizate în scop medical.

Cercetările terapeutice de clonare sunt deja
efectuate la animale, iar celulele stem au fost
crescute prin aceeași metodă și transplantate
înapoi la animalul donator. La om, această
tehnică ar revoluționa transplantul de celule și
țesuturi ca metodă de tratare a numitor boli. Cu
toate acestea, este o știință foarte nouă și a
ridicat deja preocupări etice.
҉ În Marea Britanie, un grup condus de prof. Liam Donaldson a
recomandat ca cercetarea asupra embrionilor umani timpurii să
fie permisă. Legea privind fertilizarea umană și embriologia
fost modificată în 2001 pentru a permite utilizarea embrionilor
în cercetarea cu celule stem, și prin urmare HFEA (Human
Fertilisation and Embryology Authority) are responsabilitatea
de a reglementa toate cercetările cu celule stem embrionare din
Marea Britanie.
҉ În ceea ce privește clonarea animalelor, toate clonările în
scopuri de cercetare sau medicale din Marea Britanie trebuie să
fie aprobate de Home Office (Ministerul de Interne) sub
controlul strict al Legii privind animalele din 1986 (proceduri
științifice). Această lege protejează bunăstarea animalelor,
permițând totodată înaintarea cercetărilor științifice și medicale
importante.

În SUA legea The Pacients First Act 2017 îșî
propune să promoveze cercetarea cu celule stem,
folosind celule „obținute etic„ care ar putea
contribui la o mai bună înțelegere a bolilor și a
terapiilor și să promoveze derivarea liniilor de
celule stem pluripotente fără crearea de embrioni
umani
҉ În funcție de metoda folosită, reprogramarea celulelor adulte în
҉ Crearea de celule stem pluripotente induse este un proces lung și
ineficient. Pluripotența se referă la o celulă stem care are potențialul
de a se diferenția în oricare dintre cele trei straturi germinale:
endoderm (căptușeala stomacului interior, tractul gastrointestinal,
plămânii), mezoderm (mușchi, os, sânge, urogenital) sau ectoderm
(țesuturi epidermice și țesut nervos). Un set specific de gene, adesea
numite „factori de reprogramare”, sunt introduși într-un tip specific
de celule adulte. Acești factori trimit semnale în celula matură care
determină celula să devină o celulă stem pluripotentă. Acest proces
este foarte studiat și noi tehnici sunt descoperite frecvent cu privire
la modul de îmbunătățire a acestui proces de inducție.
celule stem pluripotente pentru implantare ar putea avea limitări
severe la om. Dacă un virus este utilizat ca factor de reprogramare
pentru celulă, pot fi activate gene cauzatoare de cancer numite
oncogene. Aceste celule ar apărea ca celule canceroase care
divizează rapid, care nu răspund la procesul natural de semnalizare
a celulelor organismului. Cu toate acestea, în 2008, oamenii de
știință au descoperit o tehnică care ar putea înlătura prezența acestor
oncogene după inducerea pluripotenței, crescând astfel utilizarea
potențială a celulelor stem pluripotente la om.
 Concluzii:
Atât metoda transferului nuclear al celulelor somatice (metoda prin care a fost obținută oaia Dolly) cât și metoda inducerii celulelor stem pluripotente au beneficii dar și deficiențe.
Avantajul metodelor de transfer nuclear al celulelor somatice ar fi viteza cu care se pot produce aceste celule, pe când reprogramarea celulelor stem durează luni de zile, ceea ce ar putea avea
rol important în aplicațiile medicale.

҉ Celulele produse prin transferul nuclear sau prin reprogramare ar putea fi utilizate în cele din urmă în terapia cu celule stem
sau pentru a crea organe care să fie utilizate în transplant, cunoscut sub numele de medicină regenerativă. Terapia cu celule
stem este utilizarea celulelor stem pentru tratarea sau prevenirea unei boli sau afecțiuni. Transplantul de măduvă este o formă
utilizată pe scară largă de terapie cu celule stem. În prezent, nu există alte forme de terapie cu celule stem. Cercetările sunt în
curs de desfășurare pentru a utiliza terapia cu celule stem pentru tratarea bolilor de inimă, diabetului și leziunilor măduvei
spinării.
VĂ
MULȚUM
ESC
PENTRU
ATENȚIE!