Determinarea glicemiei prin metoda enzimatic Principiul metodei Metoda folosete glucozoxidaz i o reacie de culoare Trinder modificat, catalizat

de peroxidaz. Glucozoxidaza (GOD) catalizeaz oxidarea glucozei la acid gluconic cu formare de peroxid de hidrogen:
GOD

Glucoz + H2O + O2

acid gluconic + H2O2

n prezena peroxidazei (POD), 4aminoantipirina i fenolul sunt cuplate oxidativ cu peroxidul de hidrogen, formnd un compus intens colorat n rou (chinonimin). Intensitatea culorii formate este direct proporional cu concentraia de glucoz din prob.
POD

2H2O2 + fenol + 4aminoantipirin

chinonimin + 4H2O

Tehnica de lucru Se pregtesc trei eprubete: martor, standard, prob. Se pipeteaz n eprubete conform tabelului urmtor:
Tabelul VII

Reactivi Amestec R1 + R2 Ap distilat Standard Prob 25C.

Martor 1 ml 10 l

Standard 1 ml 10 l

Proba 1 ml 10 l

Se agit eprubetele i se incubeaz timp de 10 minute la 37C sau 30 de minute la 20 Se citesc extinciile probei (Ep) i standardului (Es) fa de martor la lungimea de und de 505 nm, n cuve de 1cm. Calcul C p = Ep / Es C s mg glucoz/100 ml snge = Ep / Es Cs unde: Cp = concentraia probei Ep = extincia probei Es = extincia standardului

Cs = concentraia standardului Valori normale: n ser sau plasm: 3,9 5,8 mmol/l (70 105 mg/dl) Variaii fiziologice Valorile glicemiei cresc peste vrsta de 40 50 de ani. Glicemia poate nregistra valori crescute pasagere n: efort fizic intens; emoii; oboseal; expunere la frig; postprandial. Glicemia poate nregistra valori sczute n: sarcin (scderi de 15 20% ca urmare a utilizrii glucozei de ctre ft); malnutriie; post. Variaii patologice Valori crescute (hiperglicemii) diabet zaharat; sindrom Cushing; hipertiroidie; acromegalie; feocromocitom; hiperaldosteronism; tumori pancreatice cu celule A; accidente vasculare la nivelul sistemului nervos central; tumori ale sistemului nervos central; encefalit; infarct miocardic; oc; insuficien renal; hipotermie; intoxicaie cu monoxid de carbon; administrare de: diuretice; glucocorticoizi; acid nicotinic; contraceptive; fenotiazine; fenitoin.

Valori sczute (hipoglicemii) malabsorbie; glicozurie de cauz renal; febr; sindrom postgastrectomie; consum de alcool; insuficien hepatic; glicogenoze; intoleran la fructoz; galactozemie; insuficien hipofizar; insuficien corticosuprarenalian; hipotiroidie; hiperinsulinism; hiperplazia celulelor insulare pancreatice; administrarea de: antidiabetice; beta blocante.