Determinarea acidului citric din vin-metoda spectrofotometric cu anhidrid acetic 1.

Scopul lucrrii Scopul lucrrii este determinarea coninutului de acid citric din vin. Printre modificrile nedorite ce apar n vinuri se numara si cele de natur fizicochimic,provocate de excesul de fier.Fierul este prezent n toate vinurile n cantiti ce variaz de la 2-6 mg/l pn la cateva zeci de miligrame.Cel ce provine din struguri,numit si fier fiyiologic,reprezint circa 2-3mg/l din cantitate totala existent.Restul ii are originea n praful depus pe struguri, n contactul strugurilor, a mustului sau a vinului cu uneltele i recipienii metalici neprotejai corespunztor, ori datorit unor tratamente aplicate pe parcursul prelucrrii sau condiionrii.Pn la 5-6mg/l fierul ndeplinete un rol pozitiv,participnd la o serie de reacii care stau la baza unei bune maturari i invechiri naturale.Peste aceste limite el provoaca procese de instabilitate i tulburri cunoscute sub numele de casare feric. Pentru blocarea fierului trivalent n combinaii solubile cel mai utilizat este acidul citric(sarea de lmie), mai ales n cazul vinurilor albe.Doza este de 0,5-0,6 g/l. 2.Principiul metodei Metoda de determinare a acidului citric din proba de vin se bazeaz pe reacia cu anhidrida acetic n mediu bazic care formeaz un produs a crei absorban maxim se citete la spectrofotometru cu lungimea de und de 363nm. Sensibilitatea metodei este de 5mg/l. 3.Aparatur Spectrofotometru cu domeniul de msurare n ultraviolet. 4.Reactivi i materiale -Anhidrid acetic cu concentraia minim de 97% -Piridin,cu concentraia minim de 99% -Soluie etalon de acid citric cu coninutul de 1 g/l, preparat astfel: ntr-un balon cotat de 1000cm se introduc 1,0938 g acid citric monohidratat ,se adaug 500-600 cm ap, se agit pentru dizolvare i se aduce coninutul balonului la semn,cu ap. -Crbune active 5.Prepararea reactivilor 1.Anhidrid acetic 97%

Se iau 97 g anhidrid acetic , se introduc intr-un balon cotat de 100cm i se aduce la semn cu ap. 2.Piridina 99% Se iau 99 g piridin,se introduc intr-un balon cotat de 100cmi se aduce la semn cu ap. 6.Mod de lucru Determinarea se efectueaz sub ni, la temperatura de 20C. -ntr-un pahar de laborator se introduc 25 cm prob de analizat i se adaug 0,1 g crbune activ. -Se las n repaus 5 minute,dup care se filtreaz prin hrtie cu porozitate mic,cutat Se obine un filtrat limpede incolor.Dac filtratul nu este incolor (cazul vinurilor i musturilor roii) se retrateaz filtratul cu aceeai cantitate de crbune activ i se refiltreaz.Tratarea filtratului cu crbune activ se repet pn la obinerea unui filtrat limpede i incolor. -n paralel se efectueaz o prob martor din 35 cm ap, 2 cm piridin, 1 cm anhidrid acetic.Proba martor este stabil o zi. -n dou vase conice de laborator de 50cm , notate cu literele a, b i se introduc urmtoarele: n vasul conic a se introduc 25 cm ap, msurai cu pipeta n vasul conic b se introduc 10 cm prob filtrat, obinut aa cum a fost prezentat mai sus, 2 cm piridin 1 cm anhidrid acetic, sub agitare continu.Dup ultima pictur de anhidrid acetic adugat se mai agit vasul conic, prin rotire, de trei ori i cu o micare rapid, se transvazeaz cei 25 cm ap din vasul a, n vasul b, de 2 sau 3 ori pentru preluarea cantitativ a apei i pentru omogenizare. -Din proba obinut ca mai sus se introduce n cuva spectrofotometrului, cu grosimea stratului de 10 mm, apoi cuva se introduce n aparat i dupa un repaus de 5 minute se citete absorbana, n comparaie cu proba martor, la lungimea de und de 363 nm. -Se citete pe curba de etalonare coninutul de acid citric corespunztor absorbanei, n grame la litru. -n cazul n care coninutul de acid citric din prob este mai mare de 0,5 g/l se procedeaz la o diluare cu ap a filtratului decolorat cu crbune activ. 7.Trasarea curbei de etalonare n 5 baloane cotate de 100 cm se introduc soluiile indicate n tabel: Numrul de ordine i soluiilor

etalon(baloanelor cotate) Soluie etalon cu coninut de acid citric de 1 g/l, cm Ap, cm Coninutul de acid citric al etaloanelor, g/l 99 95 90 75 50 1 5 10 25 50

0,010 0,050 0,100 0,250 0,500

-Din fiecare soluie etalon obinut aa cum a fost prezentat mai sus i din reactivi se introduc n cte un pahar conic de laborator de 50 cm cantitile indicate n tabel Soluie etalon obinut conform punctului de mai sus Anhidrid acetic, cm Piridin, cm Ap, cm 1 2 25 1 2 25 1 2 25 1 2 25 1 2 25

10

10

10

10

10

-n continuare se procedeaz aa cum este prezentat mai sus , de la introducerea n cuva spectrofotometrului. -Pentru fiecare soluie etalon se fac dou citiri la spectrofotometru i se face media aritmetic a celor dou valori citite. -Cu valorile obinute se traseaz curba etalon, care este o dreapt care trece prin origine

Absorbana

Conc.acid citric g/l

8.Calculul i exprimarea rezultatelor Coninutul de acid citric, n grame la litru, se citete pe curba de etalonare, n funcie de absorbana determinat. n cazul n care a fost necesar ca proba s fie diluat, diluia respectiv se introduce n calcul.