UNIVERSITATEA ACADEMIEI DE TIINE A MOLDOVEI

FACULTATEA TIINE ALE NATURII

CATEDRA BIOLOGIE









Daniela ELENCIUC



IMUNOLOGIA
ndrumar metodic














CHIINU
2014
3

CUPRINS
I. PRELIMINARII. ...................................................................... 4
II. OBIECTIVELE GENERALE ALE DISCIPLINEI. ........... 5
III. ADMINISTRAREA DISCIPLINEI. ................................... 6
IV. TEMATICA I REPARTIZAREA ORIENTATIV A
ORELOR. ..................................................................................... 7
V. OBIECTIVE DE REFERIN I CONINUTURI. ......... 9
VI. CONINUTUL TEMATIC ................................................ 12
Tema 1. Introducere. Istoricul dezvoltrii imunologiei ca
tiin. Marile descoperiri n domeniul imunologiei. ............... 12
Tema 2. Caracterizarea general a antigenelor. Clasificarea i
imunogenitatea antigenelor. Factorii ce condiioneaz
heterogenitatea.......................................................................... 17
Tema 3. Anticorpi. Structur. Funcie. .................................... 22
Tema 4. Sistemul imunocitar (limfoid). Mecanisme de aprare
la nevertebrate. Organizarea sistemului imunitar la vertebrate.
Limfocitele B i T..................................................................... 27
Tema 5. Bazele genetice ale diversitii receptorilor de antigen.
.................................................................................................. 36
Tema 6. Antigenele complexului major de histocomparibilitate.
.................................................................................................. 42
Tema 7. Imunitatea n transplantul de esuturi i organe ......... 48
Tema 8. Rspunsul imun. ........................................................ 58
Tema 9. Activarea limfocitelor B i T. .................................... 74
Tema 10. Dinamica rspunsului imun mediat humoral.
Imunitatea mediat celular. ...................................................... 82
Tema 11. Reaciile de hipersensibilitate. ................................. 88
Tema 12. Conflictul imunitar. Maladiile autoimune.
Mecanisme celulare i moleculare ale progresiei maladiilor
autoimune. .............................................................................. 105
Tema 13. Imunodeficiena. .................................................... 112
Tema 14. Antigenele tumorale. Rspunsul imun antitumoral.
................................................................................................ 121
BIBLIOGRAFIE ...................................................................... 145
4

I. PRELIMINARII.
Imunologia, unul dintre cele mai dinamice domenii al
biologiei, care se gsete ntr-un proces continuu de dezvoltare.
Rezultatele obinute de imunologia modern modific i
complecteaz informaiile abordrile despre patogenez
diagnostic, tratament i prevenirea diferitelor boli. Funcia
imunitar este esenial pentru organismul uman i animal i de
aceea, disfunciile imunitare severe sunt incompatibile cu
supravieuirea. Pe de alt parte, activarea neadecvat a funciei
imunitare are drept consecin iniierea sau progresia strilor
patologice de hipersensibilitate i a maladiilor autoimune, ceea ce
a amplificat interesul pentru studiul Imunologiei.
Cursul de lecii de IMUNOLOGIE include: o expunere
sistematic a fundamentelor teoretice ale imunologie moderne,
date actuale privind antigenele i anticorpii, rolul limfocitelor T i
B, toleran imunologic, reacii alergice, imunizarea .a. Este
redat organizarea structural a sistemului imun, rolul imunitii
celulare i humorale i interaciunea lor cu factorii de protecie a
imunitii nespecifice. Sunt bordate problemele ca: maladiile
autoimune, imunodificiena, rolul sistemului de
histocompatibilitate n transplantologie, imunologia tumorilor etc.
Direciile majore de cercetare n imunologie ar fi:
organizarea sistemului imunitar ;
stabilirea legitilor i mecanismelor de manifestare a
imunitii;
condiiile i legitile dezvoltrii reaciilor
imunopatologice i modalitile de corecie a acestora;
posibilitatea utilizrii mecansimelor sistemului imun n
lupta cu maladiile infecioase i neinfecioase;
probleme imunologice n transplantologie.

5

II. OBIECTIVELE GENERALE ALE DISCIPLINEI

La nivel de cunoatere:

- s cunoasc istoria dezvoltrii imunologiei, tipurile
imunitii;
- s posede noiuni despre structura i mecanismul de
funcionare a sistemului imunitar la diferite nivele de
organizare a viului;
- s difineasc conceptul de rspun imun, cooperarea
celulelor imunocompetente;
- s determine diferenele dintre rspunsuriler imune
humorale i celulare,
- s cunoasc tipurile i funciile antigenelor,
- s identifice structura i funciile sistemului humoral i a
imunoglobulinelor;
- s posede noiuni de structur i funciile sistemului
complementului i mecanismele lui de activare;
- s deosebeasc tipurile celulelor prezentatoare de
antigen i rolul lor n rspunsul imun specific;
- s diferenieze structura i funcia sistemului celular n
rspunsul imun, limfocitele T, imunotolerana;
- s clasifice strile de imunodificien;
- s descrie reaciile de hipersensibilitate;
- s cunoasc structura complexului de
histocompatibilitate i problemele de transplatologie;
- s posede noiuni despre reaciile de hipersensibilitate i
maladii autoimune;
- s priceap rolul imunizrii, tipurile de vaccinuri i
mecanismul de aciune;
- s cunoasc elementele de baz ale imunitii anti-
tumorale, metodele moderne de immunodiagnostic i
imunoterapia cancerului.
6

La nivel de aplicare:

- s posede metodele contemporane de laborator de
stabilire a statutului imunitar al organsimului uman
- s neleag principiile tehnicilor imunologice i
aplicarea lor n contextul diverselor afeciuni, identificarea
grupelor sanguine;
- s efectuieze analiza morfologic a frotiului de snge
periferic.

La nivel de integrare:

- s aprecieze rolul integrator al imunologiei n tiina
contemporan;
- s analizeze datele n contextul realizrilor din domeniu;
- s elaboreze proiecte de cercetare n domeniu.


III. ADMINISTRAREA DISCIPLINEI


* C - curs
S seminar

Codul
disciplinei
n planul
de nv-
mnt
Anul
de
studii
Sem.
Numrul de ore Total
ore
Evaluarea Responsabil
de
disciplin C* S Indivi-
duale
Nr. de
cre-
dite
Forma de
evaluare
F.06.O.041 3 2 28 14 78 120 4
Exa-
men
dr. n
biologie,
D.
Elenciuc
7

IV. TEMATICA
I REPARTIZAREA ORIENTATIV A ORELOR

a) Tematica i repartizarea orientativ a orelor la curs

Tema
Nr.
ore
Introducere. Istoricul dezvoltrii imunologiei ca tiin.
Marile descoperiri n domeniul imunologiei.
2
Caracterizarea general a antigenelor. Clasificarea i
imunogenitatea antigenelor. Factorii ce condiioneaz
heterogenitatea
2
Amticorpii. Structur. Funcie, 2
Sistemul imunocitar (limfoid). Mecanisme de aprare la
nevertebrate. Organizarea sistemului imunitar la
vertebrate. Limfocitele B i T.
2
Bazele genetice ale diversitii receptorilor de antigen. 2
Antigenele complexului major de histocomparibilitate 2
Imunitatea n transplantul de esuturi i organe. 2
Rspunsul imun. 2
Activarea limfocitelor B i T. 2
Dinamica rspunsului imun mediat humoral. Imunitatea
mediat celular.
2
Reaciile de hipersensibilitate. 2
Conflictul imunitar. Maladiile autoimune. Mecanisme
celulare i moleculare ale progresiei maladiilor autoimune
2
Imunodeficiena. 2
Antigenele tumorale. Rspunsul imun antitumoral. 2
TOTAL 28



8

b) Tematica i repartizarea orientativ a orelor de
seminar

Tema
Nr.
ore
Obiectul de studiu al imunologiei. Marile descoperiri n
domeniul imunologiei. Tipurile de imunitate.
2
Fagocitoza etapele i rolul n procesul de asigurare a
homeostaziei organismelor
2
Sistemul complementului. 2
Interaciuni antigen-anticorp. Imunodiagnosticarea. 2
Diversitatea celulelor imunocompetente. 2
Imunizarea. Tipurile de vaccinuri. Argumente pro i
contra vaccinrii.
2
Interaciunea sistemului imunitar cu cel neuroindocrin. 2
Total 14


9

V. OBIECTIVE DE REFERIN I CONINUTURI.

Obiectivele de referin Coninuturi
s determine obiectul de
studiu al disciplinei;
s cunoasc etapele
dezvoltrii imunologiei;
s identifice problemele
principale ale imunologiei;
s stabileasc corelaia dintre
imunologie i disciplinele biologiei
contemporane.
Introducere. Istoricul
dezvoltrii imunologiei
ca tiin. Marile
descoperiri n domeniul
imunologiei.
s defineasc noiunea de
antigen;
s cunoasc structura
antigenului;
s identifce factorii care
cauzeaz antigenicitatea i
imunogenitate a antigenelor;
s deosebeasc antigenele
dup provinien;
s cunoasc importana
haptenelor.
Caracterizarea general
a antigenelor.
Clasificarea i
imunogenitatea
antigenelor. Factorii ce
condiioneaz
heterogenitatea
sa cunosc structura tipic a
anticorpilor,
sa deosebeasc tipurile de
anticorpi ;
sa identifice funciile
anticoprilor.
Amticorpii. Structur.
Funcie,
10

s cunoasc organle
limfoidale primare i secundare,
srtuctura i rolul lor n formarea
limfocitelor;
s diferenieze limfocitele B i
T dup structur i funcie;
s cunoasc tipurile de
limfocite B i T;
s identifice diferenele dintre
receptorii memebranari a
limfocitelor.
Sistemul imunocitar
(limfoid). Mecanisme de
aprare la nevertebrate.
Organizarea sistemului
imunitar la vertebrate.
Limfocitele B i T.
Bazele genetice ale
diversitii receptorilor
de antigen.
s cunoasc antigenele CMH
s cunoasc importana CMH;
s deosebeasc dup structur
CMH I i CMH II;
s identifice rolul distribuiei
tisulare a CMH i semnificaia
evolutiv
Antigenele complexului
major de
histocomparibilitate
(CMH)
s cunoasc tipurile de grefe;
s identifice cauzele
reactivitii imune a respingerii
grefelor;
s cunoasc necesitatea
aplicrii imunosupresiei n
transplantologie.
Imunitatea n
transplantul de esuturi
i organe.
11

s cunoasc principalele etape
ale rspunsului imun;
s deosebeasc cile de
rspuns mediat celular i humoral;
s indentifice geneza i
mecanismul interaciunii limfocitelor
B i T;
s posede noiunea de
memorie imunologiec.
Rspunsul imun.
Activarea limfocitelor B
i T. Dinamica
rspunsului imun mediat
humoral. Imunitatea
mediat celular.
s cunoasc tipurile de reacii
de hipersensibilitate;
s identifice factorii care
condiioneaz reaaciile de
hipersensibilitate;
s cunoasc tipurile de alergii
cele mai frecvent ntlnite i
mecanismul declanrii acestora.
Reaciile de
hipersensibilitate.
s posede noiunea de
toleren;
s cunoasc mecanismul
instalrii toleranei;
s identifice maladiile
autoimune i mecanismul dezvoltrii.
Conflictul imunitar.
Maladiile autoimune.
Mecanisme celulare i
moleculare ale
progresiei maladiilor
autoimune
s posede noiuni de antigene
tumorale;
s cunosc mecanismele de
veghe ale imunitii n vederea
neutralizrii celulelor humorale;
s cunoasc tipurile de
imunodificiene;
s stabileasc mecanismele
dezvoltrii sindromului
imododificienei.
Imunodeficiena.
Antigenele tumorale.
Rspunsul imun
antitumoral.
12

VI. CONINUTUL TEMATIC

Tema 1.
Introducere. Istoricul dezvoltrii imunologiei ca tiin.
Marile descoperiri n domeniul imunologiei.

Imunologia studiaz funcia de aprare a organismului uman
i animal, care face este esenial pentru supravieuire. Sistemul
imunitar este esenial pentru supravieuirea organismelor
multicelulare, datorit agresiunii permanente a agenilor infecioi
(microorganisme i virusuri). Disfuncia sever congenital sau
dobndit a funciei imunitare este incompatibil cu viaa.
Termenul de imunitate are o provenien social: n Roma
antic, persoanele scutite de impozite ctre stat, erau considerate
imune. Sensul termenului s-a extins, ulterior desemnnd
persoanele scutite de a suferi efectele infeciei cu ageni patogeni.
Imunologia s-a nscut i s-a dezvoltat ca un domeniu al
Microbiologiei, bazndu-se pe cunotiinele i conceptele
Patologiei i Biochimiei.
n concepia modern, funcia imunitar se definete ca o
proprietate biologic esenial a organismului uman i animal,
care const n capacitatea de a diferenia rapid i specific,
substanele proprii de cele strine.
Componentele chimice proprii organismului, pe care
sistemul imunitar le tolereaz, sunt incluse n noiunea de self
(self, englez = propriu), iar cele strine, care se abat de la structura
chimic programat genetic a organismului, poart denumirea de
substane nonself sau antigene. Astfel, funcia imunitar este o
funcie biologic esenial, prin intermediul creia organismele
difereniaz prompt i cu mare sensibilitate, componentele self de
substanele nonself.
Funcia imunitar are un rol determinant pentru pstrarea
homeostaziei mediului intern i a individualitii chimice a
fiecrui organism, prin faptul c sistemul imunitar recunoate i
13

tolereaz moleculele proprii, dar se activeaz la contactul cu
substanele strine care se abat de la programul biochimic tolerat.
Dup ce nva s tolereze self-ul, chiar din perioada
dezvoltrii embrionare, funcia imunitar realizeaz un permanent
control de calitate a moleculelor self.
Aa cum aparatul genetic asigur stabilitatea i integritatea
unei specii ca sistem biologic, sistemul imunitar asigur pstrarea
homeostaziei biochimice a organismului.

Etapele dezvoltrii I munologiei ca tiin
Imunologia este o tiin relativ tnr, care a aprut iniial
ca un domeniu a Microbiologiei, care la nceputurile sale a studiat
mecanismele reaciilor de aprare a organismului uman i animal
fa de agresiunea infecioas. Imunologia a fost fundamentat de
descoperirile lui Pasteur i Metchnikoff i pstreaz nc legturi
de esen cu disciplina mam - Microbiologia, dei astzi ea este
una dintre ramurile cele mai importante i mai dinamice ale
tiinelor biologice.
Apariia Imunologiei ca tiin a fost precedat cu milenii,
de observaii empirice referitoare la faptul c vindecarea unor
maladii infecioase era urmat de o stare de rezisten permanent
la reinfecie sau cel mult de forme uoare de mbolnvire. Cu 2-3
secole .C., n China i India s-a observat c unele maladii foarte
grave (variola, pesta, ciuma), las n urm o stare de rezisten
permanent la reinfecie sau cel mult, persoanele fceau forme
foarte uoare de mbolnvire.
Perioada tiinific a Imunologiei a fost inaugurat de L.
Pasteur, prin descoperirea unor vaccinuri cu o larg aplicaie
practic. Denumirea de vaccin a fost dat de Pasteur, n
amintirea produsului recoltat de Jenner din leziunile de pe ugerul
vacii. Denumirea s-a pstrat pentru toate produsele folosite n
practic, pentru a crea o stare de rezisten preventiv fa de
eventualul contact cu agentul patogen.
14

Cercetrile lui Pasteur au pus bazele Imunologiei medicale
i ale obinerii i utilizrii pe baze tiinifice a vaccinurilor. A
urmat o perioad n cursul creia s-au nregistrat progrese
importante n obinerea i administrarea vaccinurilor.
Bazele conceptului imunitii humorale au fost puse de
Behring i Kitasato (1890), care au evideniat anticorpii serici,
dup imunizarea animalelor de laborator. Serurile imune pot fi
folosite n scop terapeutic pentru a stopa sau a atenua evoluia
unei boli infecioase, cu condiia ca administrarea acestor seruri s
fie foarte precoce. In 1923, Behring a organizat producia de
seruri imune, preluat de Institutul Pasteur din Paris (nfiinat n
1894) i apoi de Institutul Babe i de Institutul Cantacuzino.
n 1894, Pfeiffer a descris fenomenul de bacterioliz,
demonstrnd c serul sanguin al animalelor imunizate are
proprietatea de a provoca liza celulelor bacteriene. El a
demonstrat c bacterioliza necesit dou componente: serul
sanguin al animalului imunizat i o pictur de ser proaspt de
cobai. Procesul este foarte specific: serul produce numai liza
celulelor bacteriene care au specificitate fa de anticorpii serici.
J. Bordet a evideniat c fenomenul lizei se produce i n
cazul hematiilor, dac sunt puse n contact cu serul sanguin de la
iepurele imunizat cu hematii, la care se adaug ser proaspt de
cobai, n care se gsete complementul (alexina).
Conceptul imunitii mediate celular a fost formulat de
Metchnikoff (1891). El a evidniat c n organism exist o serie de
celule specializate, cu capacitatea de a recunoate celulele strine
i de a le ngloba prin procesul de fagocitoz, care sunt digerate i
eliminate din celula fagocitar. Metchnikoff a fcut observaii pe
crustaceul Daphnia magna, ale crui celule fagocitare nglobeaz
i diger sporii fungici (Monospora bicuspidata). Cnd infecia cu
spori este masiv, capacitatea de aprare a organismului este
depit i gazda moare.
Cele dou doctrine ale fenomenului imunitar, care s-au
confruntat prin reprezentanii lor, au fost unificate de Wright
15

(1903). El a demonstrat existena n ser a unor anticorpi naturali
denumii opsonine, care acioneaz n cooperare cu fagocitele.
n 1930, K. Landsteiner a evideniat o structur antigenic
pe suprafaa hematiilor umane i a stabilit existena sistemului
antigenic ABO, precum i a normelor ce trebuie respectate n
practica transfuziei de snge.
Cercetrile de biochimie(1930-1950) au permis elucidarea
structurii moleculare a antigenelor, a imunoglobulinelor i a
haptenelor.
Studiul mecanismelor celulare ale proceselor imunitare
(1950-1980) este marcat de progresele biologiei moleculare i de
interferena cu Virologia, Microbiologia, Biologia celular,
Biofizica, Biochimia, Genetica. S-a evideniat rolul esenial al
limfocitului n fenomenele imunitare, precum i rolul
plasmocitelor n sinteza i secreia anticorpilor.
Mc Farlane Burnet (1959) a elaborat teoria seleciei clonale
a rspunsului imun, iar J.F.A.P.Miller (1960) a stabilit rolul
esenial al timusului n dobndirea competenei funcionale a
limfocitelor T.
R. Good (1960) a evideniat rolul bursei lui Fabricius n
geneza sistemului imunitar la psri.
J. Dausset (1954) a demonstrat c pe suprafaa celulelor
oricrui organism se gsete o serie de molecule (antigene), care
confer fiecrui organism o individualitate antigenic unic.
Datorit acestor antigene, reaciile care sunt determinate de o
gref de esut sau de organ, pot evolua n mod diferit: ntre
organismele foarte nrudite, grefa prinde foarte bine, iar o gref
ntre organisme cu diferene majore de ordin genetic, produce o
reacie de respingere, care este cu att mai rapid cu ct diferenele
antigenice sunt mai mari. Antigenele suprafeei celulare care
confer individualitate biochimic unic fiecrui organism, se
numesc antigene de histocompatibilitate. Evaluarea diferenelor
celor doi parteneri (donor i receptor) n ceea ce privete
16

moleculele de histocompatibilitate, este esenial nainte de
grefarea organului.
Dup 1970, studiul sistemului imunitar corespunde unei
abordri integratoare. Dup opinia lui N. K. Jerne (1985),
imunologia i-a pierdut statutul de disciplin izolat, fiind pe cale
de a fi absorbit de biologia clasic.
Dup 1980, Imunologia s-a diversificat i s-a aprofundat,
dar n acelai timp este mai unificat ca oricnd, sub imperativul
numitorului comun al nelegerii funciei imunitare la nivel
molecular. Abordrile moleculare vor sta la baza tuturor
cercetrilor viitoare, legate de funcia imunitar.
n perspectiv, orizontul de evoluie a Imunologiei se
extinde asupra nelegerii genelor codificatoare ale moleculelor
efectoare i reglatoare ale rspunsului imun i ale mecanismelor
aciunii lor. Astfel vom nelege diferenierea limfocitelor,
activarea lor, mecanismele sintezei, secreiei, recirculrii
limfocitelor i mecanismele aciunii moleculelor efectoare. Ar
urma utilizarea cunotiinelor imunologice pentru prevenirea
maladiilor cu substrat imunitar (alergii, maladii autoimune),
pentru prevenirea respingerii grefelor de esuturi i organe i
pentru imunoterapia neoplaziilor. Va fi o perioad a rentoarcerii
aplicrii Imunologiei moleculare, la nivelul ntregului organism.

17

Tema 2.
Caracterizarea general a antigenelor.
Clasificarea i imunogenitatea antigenelor.
Factorii ce condiioneaz heterogenitatea.

Convenional, antigenele se definesc ca substane strine,
care, consecutiv introducerii n organismul uman sau animal pe o
cale parenteral (alta dect cea digestiv), declaneaz sinteza
anticorpilor cu care se combin specific.

Modelul general de structur a unui antigen:
- componenta purttor (carrier), care corespunde celei mai mari
pri a moleculei;
- gruprile determinante de specificitate sau epitopi, localizate pe
suprafaa componentei purttor i formate din secvene specifice
de monomeri. Epitopii, prin secvena proprie a monomerilor i
prin configuraia spaial specific, confer individualitate
chimic i specificitate antigenic moleculei nonself. Gruprile
determinante de specificitate sunt echivalenii moleculari i
funcionali ai haptenei.
Gruprile determinante de specificitate se gsesc n numr
variabil pe suprafaa purttorului i pot fi identice att n ceea ce
privete compoziia chimic, ct i configuraia spaial sau sunt
diferite, att ca secven a monomerilor ct i n privina
configuraiei spaiale.
Proprietile definitorii ale antigenelor
n studiile experimentale asupra imunogenitii unor
molecule sintetice, M. Sela (1969) a descris dou proprieti
eseniale ale antigenelor:
1. Imunogenitatea sau antigenitatea este proprietatea unui
antigen complet, format din gruparea carrier i epitopi, de a
declana un rspuns imun, humoral sau celular, ori de cte ori
ptrunde n organism pe o cale adecvat.
18

2. Specificitatea definete capacitatea antigenului ntreg sau
numai a epitopilor si de a se combina specific cu anticorpii sau
cu receptorii celulari a cror sintez a fost indus.

Clasificarea i imunogenitatea antigenelor
Dup originea lor, antigenele sunt exogene i endogene.
Antigenele exogene sunt cele mai numeroase i pot fi
mprite n trei categorii: 1) naturale; 2) artificiale; 3) sintetice.
1) Antigene naturale
Antigenele naturale formeaz categoria cea mai
cuprinztoare. Aici sunt incluse toate macromoleculele naturale
din virusuri, microorganisme, fungi, plante i animale.
Dup dimensiuni se disting antigene moleculare (solubile)
i antigene corpusculare.
Antigenele moleculare (solubile) constituie gruparea cea mai
numeroas, care include toate tipurile de macromolecule: proteine,
polizaharide, lipide, acizi nucleici.
Antigenele corpusculare (insolubile) sunt reprezentate de
virusuri i de celule (procariote i eucariote).
Haptene (haptein, grec = a apuca) sunt substane chimice
naturale sau de sintez, cu molecul mic, a cror imunogenitate
este condiionat de cuplarea cu o molecul purttor, dar i
pstreaz proprietatea de specificitate, adic reacioneaz cu
anticorpii specifici a cror sintez a fost indus de haptena
conjugat cu o molecul cu rol de purttor
Utiliznd haptenele simple, prin reacii de cuplare cu o
molecul purttor s-au obinut antigene artificiale. Haptena din
complexul molecular are rolul gruprii determinante de
specificitate.
2. Antigene artificiale
La origine, antigenele artificiale sunt antigene naturale,
modificate chimic prin cuplarea, cel mai adesea covalent, cu una
sau mai multe molecule mici, care le confer o nou
19

individualitate antigenic i o nou specificitate de combinare cu
anticorpii, n raport cu molecula de origine.
3. Antigene sintetice
Antigenele sintetice sunt polimeri de aminoacizi, cu
secven cunoscut, obinui in vitro.
Determinanii antigenici
De cele mai multe ori, antigenele sunt macromolecule
complexe sau chiar celule ntregi, dar rspunsul imun, dup
injectarea lor n organism, este orientat predominant fa de
situsuri discrete, strict limitate ale antigenului, denumite grupri
determinante de specificitate, situsuri antigenice, determinani
antigenici sau epitopi.
Epitopul este regiunea limitat a antigenului care induce un
rspuns imun specific, se combin cu situsul activ al moleculei de
anticorp i determin specificitatea reaciei antigen-anticorp.
Capacitatea unei regiuni a moleculei de antigen de a
funciona ca epitop (adic de a stimula rspunsul imun) se
numete imunopoten.

Factorii care condioneaz imunogenitatea
Condiiile imunogenitii au fost deduse prin studii
experimentale, utiliznd antigene artificiale i sintetice.
1. Caracterul strin al moleculei este condiia major a
imunogenitii. O molecul nonself este cu att mai imunogen, cu
ct este mai diferit de moleculele organismului receptor. n
esen, caracterul nonself al unei molecule nu este strict dependent
de raporturile taxonomice ale organismului donor cu cel receptor
de antigen, ci este consecina deosebirilor de structur molecular.
2. Mrimea moleculei influeneaz imunogenitatea
moleculelor nonself. Pentru a fi imunogen, o molecul trebuie s
aib dimensiuni care s depeasc un prag limit. Moleculele cu
o bun imunogenitate sunt mai mari de 10 kD. Cu ct o molecul
este mai mare, cu att numrul epitopilor si este mai mare. Pentru
polizaharide, limitele minime pentru imunogenitate sunt mai mari.
20

Dextranii sunt antigenici dac au peste 50 kD, cu variaii mari de
rspuns imun de la o specie la alta.
3. Complexitatea molecular. Dimensiunile mari ale unei
molecule nonself nu sunt totdeauna suficiente pentru a-i conferi
imunogenitate. De exemplu, moleculele de polimeri sintetici sunt
foarte mari, fiind formate dintr-un numr mare de monomeri
repetitivi, dar nu sunt imunogene pentru c nu au complexitatea
molecular minim necesar.
4. Starea fizic a antigenului. Imunogenitatea unei molecule
este condiionat de o anumit rigiditate a epitopilor si.
5. Accesibilitatea determinanilor antigenici. Pentru ca un
epitop s fie imunogen, trebuie s fie expus la suprafaa moleculei,
pentru a fi accesibil mecanismelor de recunoatere imunitar.
6. Configuraia spaial a moleculei este un factor decisiv
pentru imunogenez. Studiile privind imunogenitatea antigenelor
sintetice, au evideniat c cel mai adesea, anticorpii se formeaz
fa de o anumit secven de aminoacizi, care are rol de epitop.

Antigenele endogene sunt componente celulare i tisulare
proprii (self), fa de care, n condiii normale, sistemul imunitar
nu manifest reactivitate. Totui, unele componente tisulare, n
anumite condiii, pot s stimuleze reactivitatea imunitar. Se
disting dou categorii de antigene endogene: 1) antigene
sechestrate (mascate) i 2) antigene alterate.
Antigenele sechestrate sunt substane cu localizare
intracelular i de aceea nu sunt accesibile sistemului imunitar
pentru a fi recunoscute n cursul dezvoltrii ontogenetice. Sub
aciunea unor factori (fizici, chimici, biologici), inductori ai unor
procese de liz celular, moleculele cu localizare intracelular se
pot elibera i sunt recunoscute ca nonself de sistemul imunitar. De
exemplu, anticorpii antimitocondriali care caracterizeaz ciroza
biliar primitiv, se sintetizeaz dup liza unor celule i eliberarea
acestor organite.
21

Alteori, unele componente tisulare sunt separate de sistemul
imunitar, prin bariere anatomice:
- proteinele cristalinului, delimitate de cristaloid, se
elibereaz n cursul interveniilor chirurgicale, dup traumatisme
care sparg capsula sau dup afeciuni care permeabilizeaz
cristaloida. Ele sunt recunoscute ca molecule nonself i stimuleaz
rspunsul imun anti-cristalin, ce poate afecta irisul, procesele
ciliare i coroida;
- proteinele spermatice, n strile de spermostaz, induc
sinteza local a autoanticorpilor n structurile epididimului.
Anticorpii recunosc specific un antigen al spermatozoizilor i
rezultatul este imobilizarea sau chiar aglutinarea, cu consecina sa,
sterilitatea imunitar;
- caseina din lapte poate stimula reactivitatea autoimunitar.
Antigenele alterate sunt molecule normale ale suprafeei
celulare, legate de membran, care, din diferite cauze (uzur
fiziologic sau sub aciunea diferiilor factori fizici, chimici,
biologici) i modific structura chimic i sunt recunoscute ca
molecule nonself. De exemplu, unele medicamente, dup legarea
cu diferite molecule din plasm sau de pe suprafaa eritrocitelor, le
modific conformaia nativ i acestea sunt recunoscute ca
nonself. Virusurile induc sinteza n celula infectat, a antigenelor
proprii, dar adeseori moleculele specific virale determin
modificarea unor molecule self, care sunt recunoscute ca molecule
strine i iniiaz conflictul autoimun.
n condiii normale, antigenele sechestrate i alterate sunt
neutralizate i eliminate, fr consecine patologice.


22

Tema 3.
Anticorpi. Structur. Funcie.

Anticorpii sunt imunoglobuline care se sintetizeaz n
organism dup ptrunderea unui antigen i au proprietatea de a se
cupla specific cu antigenul inductor i de a-i anihila aciunea
nociv.

Structura moleculei de imunoglobulin
Unitatea structural de baz a moleculei de Ig este
monomerul. Acesta este o unitate tetrapeptidic, format prin
asocierea a dou lanuri grele (H, Heavy = greu), fiecare avnd circa
450 de aminoacizi i o greutate molecular cuprins ntre 50-76 kD
i dou lanuri uoare (L, Light = uor), fiecare avnd circa 216
aminoacizi i o greutate molecular de 25 kD. Cele 4 catene
polipeptidice sunt legate ntre ele prin puni S-S i se rsucesc n
spiral - att unul fa de altul, dar i fiecare separat fa de
propria-i ax, rezultnd o configuraie tridimensional, stabilizat
prin 16-24 legturi S-S i prin alte interaciuni necovalente.
Monomerul tetrapeptidic tridimensional are form de T sau de Y.
n funcie de secvena aminoacizilor, fiecare lan polipeptidic
este alctuit din dou regiuni distincte:
a) regiunea constant (C ) corespunde jumtii C-terminale
a celor 4 catene polipeptidice. Are o secven relativ uniform a
aminoacizilor i asigur unitatea structural i funcional a
moleculei de Ig;
b) regiunea variabil (V) cuprinde o secven de circa 110
aminoacizi n jumtatea N-terminal a celor 4 catene polipeptidice.
Regiunile variabile ale fiecrei perechi de catene formeaz situsul
de combinare al moleculei de Ig, care confer specificitate de
legare cu antigenul.
Variabilitatea maxim a secvenei de aminoacizi a catenei L
se concentreaz n poziiile 24-34, 50-55, 89-97, iar a catenei H, la
secvenele 30-36, 50-56, 86-91 i 95-100. Aceste secvene
23

formeaz regiunile hipervariabile sau regiunile determinante de
complementaritate (RDC), fa de configuraia spaial a
epitopului. Aminoacizii acestor secvene intr n alctuirea situsului
de combinare al moleculei de Ig.
Aproape de jumtatea catenelor H se gsete o secven de
circa 15 aminoacizi, n care sunt grupate toate resturile de cistein
ce formeaz puni S-S intercatenare. Aceast secven se numete
regiunea balama. Regiunea balama asigur flexibilitatea moleculei
de Ig, permind mobilitatea fragmentelor Fab, care, teoretic, pot
forma unghiuri variabile, ntre 0-180
o
, conferind moleculei o
geometrie variabil.
Catena L are dou domenii: unul corespunztor regiunii
variabile (VL) i altul corespunztor regiunii constante (CL).
Catena H are 4 domenii: unul corespunztor regiunii variabile
(VH) i trei domenii ale regiunii constante: CH
1
, CH
2
, CH
3
.

Funciile moleculei de imunoglobulin
n ansamblul efectorilor sistemului imunitar, moleculele de
imunoglobulin ndeplinesc dou categorii de funcii:
- funcii de specificitate ;
- funcii grupate sub denumirea de activiti biologice
efectoare.
Specificitatea imunoglobulinei fa de un antigen este
exprimat prin capacitatea de recunoatere fin a epitopului
complementar al antigenului i de combinare cu acesta.
Specificitatea moleculei de imunogobulin este conferit de situsul
su de combinare. Marea diversitate a moleculelor de anticorpi,
asigur o diversitate uria a situsurilor de combinare, de ordinul a
10
8
10
9
specificiti de legare.
Specificitatea de legare este dat de structura spaial a
situsului de combinare cu antigenul, conferit de resturile de
aminoacizi ale regiunilor hipervariabile ale catenelor H i L.
24

Aminoacizii care formeaz situsul de combinare al moleculei
de imunoglobulin, prin plierea regiunilor hipervariabile,
delimiteaz o cavitate molecular ce difer ca form i mrime.
Cavitatea prezint substructuri (proeminene i depresiuni),
pe care le formeaz secvenele hipervariabile, n timp ce restul
regiunilor variabile ale celor dou catene confer structura
tridimensional a cavitii moleculare.
Potrivirea spaial dintre situsul de combinare al moleculei de
anticorp i epitopul specific, din punctul de vedere al configuraiei
spaiale, este perfect. Eventualele imperfeciuni geometrice pot fi
ocupate de moleculele de ap. Potrivirea perfect a celor dou
uniti combinante este sugerat de metafora cheie-broasc.
Numrul funciilor biologice efectoare este mai mic i sunt
dependente de regiunile constante ale moleculei de imunoglobulin.
Fiecare domeniu al regiunii constante a moleculei de
imunoglobulin ndeplinete anumite funcii:
- legarea antigenului pe imunoglobulinele de suprafa care
funcioneaz ca receptori pe limfocitele B, declaneaz proliferarea
i diferenierea lor, iar legarea antigenului cu imunoglobulinele
citotrope pentru mastocite, declaneaz degranularea acestor
celule;
- dup cuplarea cu antigenul, moleculele de imunoglobulin
expun fragmentul Fc, recunoscut ulterior de receptorii specifici
pentru Fc de pe suprafaa monocitelor, macrofagelor, PMNN.
Astfel se stimuleaz procesul de fagocitoz a celulelor nonself
tapetate cu imunoglobuline, denumit imunofagocitoz;
- celulele K, prin intermediul receptorilor pentru Fc,
interacioneaz cu celulele nonself tapetate cu IgG i realizeaz liza
de contact prin fenomenul de citotoxicitate;
- interaciunea antigen-anticorp genereaz un semnal care se
transmite regiunii Fc. Aceasta i modific configuraia spaial i
expune un situs de recunoatere de care se leag C1q;
- regiunea balama este transductoare de semnale i are un rol
important n flexibilitatea moleculei de imunoglobulin, permind
25

variaia unghiului dintre fragmentele Fab: ele trec reversibil de la
forma T la Y. Geometria variabil a moleculei de imunoglobulin
mrete eficiena de legare a antigenului, deoarece ajusteaz poziia
celor dou situsuri de combinare ale anticorpului, n funcie de
distana la care se gsesc determinanii antigenici pe suprafaa unui
antigen particulat (virus sau celul).

Componenta glucidic a imunoglobulinei ndeplinete
urmtoarele funcii:
- realizeaz i menine o conformaie a moleculei de
imunoglobulin, esenial pentru secreie;
- mrete solubilitatea moleculelor de imunoglobulin;
- are rol de spaiator ntre domeniile unui lan i ntre catenele
moleculei;
- particip la funciile citotrope ale moleculei de
imunoglobulin;
- are rol n legarea C1q, component a sistemului
complement.
Heterogenitatea anticorpilor
Moleculele de imunoglobuline din plasma oricrui organism
sunt foarte heterogene, att datorit diversitii epitopilor fa de
care s-au sintetizat ceea ce induce variaii ale secvenelor
hipervariabile ale moleculei, ct i datorit variaiilor secvenei de
aminoacizi n regiunile constante ale moleculei.
Heterogenitatea anticorpilor este ordonat n clase, subclase,
tipuri, alotipuri i idiotipuri, pe baza variaiei secvenei de
aminoacizi. Din punctul de vedere al manifestrii imunopotenei
determinanilor antigenici ai imunoglobulinelor, s-au definit trei
nivele de heterogenitate: izotipic, alotipic i idiotipic.
Heterogenitatea izotipic
Heterogenitatea izotipic (izos = acelai) definete variantele
biochimice ale imunoglobulinelor, comune pentru toi indivizii unei
specii. Variantele biochimice se datoreaz variaiilor secvenei de
aminoacizi n regiunea constant a catenei H. Fiecare individ al
26

unei specii exprim toate variantele antigenice izotipice
caracteristice speciei.
Variantele antigenice izotipice ale imunoglobulinelor umane
s-au identificat iniial, n regiunea constant a catenei H.
Exist 5 variante antigenice distincte ale catenelor H n
regiunea constant, notate cu g, m, a, d, e, corespunztoare celor 5
clase de imunoglobuline: IgG, IgM, IgA, IgD, IgE.
Ulterior, determinanii antigenici s-au identificat i n
regiunile constante ale catenelor L. Determinanii antigenici ai
catenelor L determin tipurile de imunoglobuline.
Catena L are dou variante antigenice, notate cu k i l, care se
gsesc la toate cele 5 clase de imunoglobuline. Cele dou tipuri
structurale de lanuri L (k i l) prezint deosebiri de secven a
aminoacizilor n regiunea constant i nu au determinani antigenici
comuni.

Structura i funciile biologice dominante ale claselor de I g:
1. IgG monomer, prezint cele mai multe particulariti
funcionale caracteristice anticorpilor i determin
imunitatea pasiv la ft, fixeaz complement ( cu excepia
IgG4), manifest activitate opsonizant, antibacterian,
antitoxic, antiviral;
2. IgA n plasm monomer, n secreii dimer, asigura
rezistena imunitar n secreii, la nivelul mucoaselor i
manifest o asctivitate antiviral net;
3. IgM pentamer, conine extradomeniul CH4 i lanul J,
anticorpul caracteristic primei faze a rezistenei imunitare
(rspunsul primar) particip n liza bacteriilor;
4. IgD monomer, conine o pies coad, receptor pe
limfocitele B, posbil particip la eliminarea limfocitelor B
care produc autoAc;
5. IgE monomer, conine extradomeniul CH4, rol de
reagin, mediator principal n reaciile alergice.

27

Tema 4.
Sistemul imunocitar (limfoid). Mecanisme de aprare la
nevertebrate. Organizarea sistemului imunitar la vertebrate.
Limfocitele B i T.

Existena tuturor organismelor vii este condiionat de
activitatea unor mecanisme de rezisten i de imunitate, capabile
s protejeze individualitatea lor chimic, prin mecanisme de
recunoatere i difereniere a substanelor proprii (self) de cele
strine (nonself). Mecanismele de rezisten i imunitate sunt
prezente pe toat scara evolutiv a organismelor.
Celulele bacteriene posed mecanisme de protecie a
individualitii genetice, reprezentate de:
- fenomenele de restricie mediate de prezena unor sisteme
enzimatice specifice (enzime de restricie), care recunosc
moleculele strine de ADN, le cliveaz la nivelul unor situsuri
specifice, rezultnd fragmente mai mici, sensibile la aciunea exo-
i endonucleazelor;
- fenomenele de reparaie genetic dependente de
activitatea unor sisteme enzimatice care recunosc modificrile
ADN induse de mutaii sau de lipsa de fidelitate a mecanismelor
de replicare, transcriere i traducere genetic, corectndu-le fie
complet sau minimaliznd erorile n cazul sistemelor reparatorii
predispuse la erori.
La plantele superioare, mijloacele de aprare specific,
aparent sunt absente, dar exist o gam larg de modaliti de
aprare nespecific:
- continuitatea i integritatea esuturilor epidermice,
acoperite sau impregnate cu substane impermeabile pentru
virusuri i microorganisme;
- rezistena fiziologic conferit de coninutul nalt de
zaharuri reductoare, prezena taninurilor, a diferiilor acizi
organici, a pseudoanticorpilor cu activitate hemaglutinant n
sucurile vegetale.
28

Mecanisme de aprare la nevertebrate
Dei nu au sistem limfoid, nevertebratele recunosc i
rspund la substanele nonself, la fel de eficient ca i vertebratele.
La ele funcioneaz o diversitate de mecanisme, unele fiind
inductibile. Rspunsul este de scurt durat i nu are specificitate
fa de agentul infecios patogen. Rspunsul imun al
nevertebratelor se aseamn calitativ cu cel nscut al
vertebratelor mediat de celulele fagocitare i de moleculele
neimunoglobulinice.
La nevertebrate, aprarea organismului este asigurat de
bariere fizico-chimice complexe: secreia mucoas care acoper
corpul celenteratelor, anelidelor, molutelor i protocordatelor,
omoar potenialii patogeni. Exoscheletul dur al celenteratelor,
molutelor, artropodelor, echinodermelor i protocordatelor,
formeaz o barier protectoare eficace fa de agenii infecioi.
Majoritatea nevertebratelor superioare au sistem circulator cu
celule albe, denumite hemocite sau celomocite, n funcie de
natura cavitii corpului. Lipsesc hematiile.
n mediul intern al nevertebratelor se gsesc fagocite, factori
antimicrobieni constitutivi i inductibili cu efect neutralizant i
litic, factori de coagulare a macromoleculelor strine. Toate
nevertebratele, chiar cele care nu au caviti ale corpului
(spongieri, anemone, viermi lai), au fagocite, uneori de mai multe
tipuri. Ca i la vertebrate, fagocitele sunt efectorii rspunsului
inflamator, sintetizeaz enzime lizosomale i posed mecanisme
citocide dependente de superoxid.
Reaciile de aprare (repararea tisular, fagocitoza, reacia
de ncapsulare) sunt mediate de fagocite i de celulele
hemostatice.
La nevertebrate lipsesc limfocitele i moleculele de
imunoglobuline, dar acestea sunt compensate de o varietate de
factori humorali de aprare: aglutinine, lizozim, bactericidine,
enzime lizosomale, factori de imobilizare. La insecte s-au detectat
29

peste 15 tipuri de proteine antibacteriene inductibile n cteva ore
dup injectarea unui antigen.
Nevertebratele nu au proteinele cascadei complementare,
dar viermii, insectele, crustaceii conin sistemul profenoloxidazei.
Componentele acestui sistem sunt activate de o serie de enzime.
La captul cascadei de activare se formeaz enzima activ
fenoloxidaza, cu rol esenial n ndeprtarea substanelor nonself.
Fagocitoza este foarte activ i este stimulat de aglutininele
i bactericidinele cu rol de opsonine. Din punct de vedere
funcional, aglutininele i bactericidinele sunt similare
anticorpilor. Acestea sunt lectine, cu rolul de a lega componenta
glucidic a glicoproteinelor de pe suprafaa celulelor nonself,
rezultatul fiind aglutinarea.
Lectinele sunt molecule care au aprut timpuriu n evoluie
i sunt ubicvitare: se gsesc la bacterii, plante, nevertebrate i
vertebrate. Ele tapeteaz microorganismele invadatoare i au rolul
de a le imobiliza, dar au i rol opsonizant, uurnd fagocitoza. n
funcie de specificitatea lor de legare cu glucidele, lectinele sunt
foarte diferite.
n corpul gras al insectelor superioare s-au caracterizat circa
100 de peptide antimicrobiene, a cror sintez rapid este indus
de infecie. Din punct de vedere structural sunt de dou tipuri:
- peptide ciclice, care conin puni S-S (de exemplu,
drosmycina), active fa de bacteriile Gram pozitive i fa de
fungi;
- peptide lineare (cecropine bogate n Gly i Pro), active fa
de bacteriile Gram negative.
Componentele celulare i humorale cu funcii protectoare
mediaz reacii de aprare nespecifice (nscute), fr rspuns
accelerat la stimularea antigenic secundar.

Organizarea sistemului imunitar la vertebrate
La vertebrate, aprarea este asigurat de mecanisme
complicate celulare i humorale, de rezisten i imunitate.
30

Funcia esenial a sistemelor de aprare este protecia fa de
agenii patogeni invadatori. Interaciunea permanent cu
microorganismele are un rol hotrtor n dobndirea complexitii
structurale i funcionale a sistemului imunitar. Dovada o
constituie faptul c la animalele germ-free (axenice), numrul
limfocitelor B i titrul anticorpilor serici naturali sunt de 5-10 ori
mai mici dect la organismele convenionale. Evoluia a generat
tipuri celulare specializate, tot mai eficiente funcional, care
neutralizeaz, sechestreaz, omoar sau ndeprteaz agenii
infecioi.
La vertebrate, reaciile de aprare sunt rezultatul aciunii
unor factori humorali nespecifici (complement, substane
bactericide) i specifici (anticorpi) i a unor populaii de celule
specializate, cu aciune nespecific (fagocite) sau specific
(limfocite).
Din punct de vedere structural i funcional, sistemul de
aprare al organismelor superioare prezint numeroase dualiti:
- existena unui compartiment al rezistenei nespecifice i
neadaptative (nscut) i a unui compartiment cu aciune
specific i adaptativ (sistemul imunitar);
- prezena a dou populaii nclinate de limfocite (T i B),
care mediaz imunitatea celular i respectiv humoral;
- activitatea limfocitelor este modulat fie stimulator, fie
inhibitor, sub aciunea unor celule i a unor factori humorali;
- existena organelor limfoide centrale (primare) i
periferice (secundare);
- existena unui rspuns imun primar i a unui rspuns imun
secundar;
- dualitatea structural (dou perechi de catene
polipeptidice) i funcional (bivalena) a moleculei de anticorp;
- comportamentul dublu al moleculei de anticorp: molecula
de anticorp recunoate epitopul specific i la rndul ei este
recunoscut de molecule cu rol receptor.
31

Numrul celulelor sistemului imunitar (cu un ordin de
mrime superior neuronilor) i al moleculelor sale nu reflect fidel
potenialul de aprare a organismului, deoarece n cursul
rspunsului imun are loc proliferarea i amplificarea numeric a
limfocitelor, precum i a potenialului de biosintez

Limfocitele
Limfocitele sunt celule care n cursul elaborrii rspunsului
imun, recunosc specific antigenul i de aceea se mai numesc
imunocite. De aici deriv denumirea de sistem imunocitar,
echivalent celei de sistem limfoid. Toate celulele acestui sistem
poart pe suprafaa lor, molecule cu rol receptor, capabile s
recunoasc specific determinanii antigenici strini.
Sistemul imunitar funcioneaz pe baza interaciunii dintre
semnal (antigen) i receptorul specific limfocitar preformat.
n concepia modern, limfocitul este celula central a
sistemului imunitar. Ea nu este celula cap de serie aa cum o
considerau vechii histologi, ci prezint o extraordinar capacitate
de reactivitate i difereniere.
Populaia de limfocite care are receptori identici de antigen
i recunoate un singur epitop (sau civa nrudii) formeaz o
clon. Toate celulele unei clone sunt descendente ale unei singure
celule-mam. In consecin, n organism sunt tot attea clone de
limfocite, cte tipuri de determinani antigenici exist (teoretic) n
natur. Corespondena complementaritii spaiale dintre
receptorii limfocitari de antigene i epitopii antigenici asigur
posibilitatea elaborrii unui rspuns imun specific, dup contactul
limfocitelor cu oricare dintre epitopi.
n raport cu organul limfoid primar n care se produce
diferenierea i maturarea, Roitt i col. (1966) au mprit
limfocitele n dou categorii distincte;
- limfocite T, care se difereniaz i se matureaz n timus;
- limfocite B, care se difereniaz i se matureaz n bursa
lui Fabricius la psri i n echivalenii ei funcionali, la mamifere.
32

n funcie de capacitatea lor de a interaciona cu antigenul
specific, limfocitele sunt:
- incompetente (imature), cele care nu recunosc antigenul;
- competente (mature), cele care recunosc antigenul specific.
Dup ce limfocitul i-a dobndit competena n unul din
organele limfoide primare, poate s rmn n repaus, dac
organismul nu a recepionat mesajul antigenic corespunztor.
Aceste limfocite sunt neangajate (neinformate sau naive). Cele
care au venit n contact cu antigenul specific sunt limfocite
angajate (informate). Ele constituie substratul material al
memoriei imunologice i ori de cte ori se vor rentlni cu
antigenul, vor produce un rspuns imun rapid i amplu.
Dup durata vieii, limfocitele sunt:
- cu via scurt (efectoare ale rspunsului imun);
- cu via lung (de memorie). Ele recircul n organism
perioade ndelungate (de ordinul anilor). La om, limfocitele de
memorie ar supravieui circa 10 ani, fr s se divid.
n raport cu funcia pe care o ndeplinesc, se disting
urmtoarele categorii de limfocite:
- efectoare, cele care direct sau indirect, prin molecule
efectoare, neutralizeaz antigenul;
- reglatoare, cele care ralizeaz echilibrul optim al
rspunsului imun.
Limfocitele B
Limfocitele B reprezint 5-15% din totalul limfocitelor
circulante i constituie o diviziune funcional major a populaiei
limfocitare. mpreun cu descendenii lor difereniai
(limfoblastul, plasmocitul), limfocitele B sintetizeaz anticorpi,
efectorii rspunsului imun mediat humoral (RIMH).
Limfocitul B imunocompetent (matur, neangajat)
sintetizeaz cantiti mici de molecule ale unui izotip de
imunoglobuline, care rmn legate de membrana limfocitului,
avnd rol de receptori de antigen.
33

Sub aspectul specificitii de legare a antigenului, fiecare
organism posed milioane de clone de limfocite B, adic mici
populaii celulare identice, descendente din aceiai celul mam,
care recunosc i leag acelai antigen i produc anticorpi cu
aceiai configuraie spaial a situsului de combinare.
Dup activare, toi descendenii limfocitului B sintetizeaz
imunoglobuline i le secret ca anticorpi, cu aceiai specificitate
de legare pe care a avut-o receptorul.
Majoritatea limfocitelor B umane din sngele periferic
exprim dou izotipuri de imunoglobuline pe suprafaa lor: IgM i
IgD sau numai IgD. Situsurile de legare ale celor dou izotipuri
sunt identice. Numai 10% dintre limfocitele B au pe suprafaa lor,
ca receptor de antigen, molecule de IgG, IgA sau IgE. Cele care
au ca receptor molecule de IgA, sunt localizate n esutul limfoid
asociat mucoaselor.
Limfocitele T
Limfocitele T reprezint pn la 80% din totalul limfocitelor
circulante. Limfocitele T mature exprim markerul

CD
4
sau CD
8
.
Aceste molecule aparin suprafamiliei imunoglobulinelor.
Celulele CD
4
au de obicei funcie helper, iar cele ce exprim
markerul CD
8
sunt citotoxice.
Limfocitele T ndeplinesc funcii complexe, att efectoare
ale rspunsului imun mediat celular ct i reglatoare, prin
intermediul unor factori humorali pe care-i secret, denumii
limfochine. Limfocitele T realizeaz urmtoarele funcii:
lizeaz celulele care exprim molecule nonself pe
suprafaa lor;
regleaz rspunsul imun;
mediaz reaciile de hipersensibilitate ntrziat.
Aceste funcii sunt rezultatul heterogenitii funcionale i se
datoreaz activrii unor subpopulaii distincte de limfocite T:
- limfocite Tc (Tcl, citotoxice sau citolitice) exprim pe
suprafaa lor markerul T
8
(CD
8
);
34

- limfocite Th (helper) au pe suprafa markerul CD
4
.
Acestea sunt cele mai numeroase, reprezentnd 60-65% din
numrul total de limfocite T ale organismului uman;
- limfocite Ts (supresoare), purttoare ale markerului CD
4
;
- limfocite T
D
sau T
DH
(delayed hypersensitivity) exprim
markerul CD
8
.
Funciile limfocitelor Th se realizeaz prin intermediul
limfochinelor secretate. n funcie de limfochinele pe care le
sintetizeaz, limfocitele Th se clasific n dou subseturi:Th-1 i
Th-2.
Celulele Th-1 (Th-c) secret IFN gama, IL-2 i TNF beta
(citochine de tip 1, stimulatoare ale imunitii mediate celular).
Citochinele de tip 1 produc urmtoarele efecte: stimuleaz reacia
de citotoxicitate i inflamatorie asociat cu reaciile de
hipersensibilitate ntrziat. n esen, limfocitele Th-1 au rol n
edificarea unui rspuns imun mediar celular (RIMC).
Celulele Th-2 (Th-b) secret citochine de tip 2: IL-4, IL-5,
IL-6 i IL-10 (dar nu secret Il-2) i stimuleaz activitatea
limfocitelor B de memorie. Citochinele tip 2 (IL-4, IL-5)
stimuleaz rspunsul imun humoral (RIMH) fa de paraziii
extracelulari i instalarea strilor alergice prin capacitatea lor de a
induce sinteza IgE i de a stimula mastocitele. Prin toate aceste
efecte, limfocitele Th sunt amplificatoare ale rspunsului imun
Limfocitele CD
8
(T citototoxice) reprezint 25-35% dintre
limfocitele T circulante. Funcia lor const n efectul litic prin
contact celular direct asupra celulelor infectate cu virusuri,
malignizate sau alogenice.
Limfocitele T
D
sunt mediatoare ale reaciilor de
hipersensibilitate ntrziat (delayed) de tip tuberculinic. Ele
secret limfochine cu efecte locale asupra macrofagelor i
limfocitelor din focarul inflamator.
Limfocitele Ts sunt inhibitoare ale amplitudinii rspunsului
imun, dup epuizarea antigenului. Ele au rolul de a diminua
intensitatea RIMC i RIMH, meninnd n limite fiziologice
35

intensitatea reaciilor imunitare. Au efect supresor direct asupra
limfocitelor T i B efectoare. Limfocitele Ts au rol important n
inducerea strii de toleran fa de antigenele exogene, ca i fa
de moleculele self. Deficienele funcionale ale limfocitelor Ts
creeaz predispoziii pentru maladiile autoimune.

Celulele NK
Celulele NK (natural killer) reprezint circa 15% din totalul
limfocitelor sanguine. Ele deriv din mduva osoas i au origine
comun (acelai progenitor), ca i celulele T. In vitro, sunt
neaderente i nefagocitare, ceea ce le aseamn cu limfocitele.
Din punct de vedere morfologic, celulele NK sunt mari, granulare,
avnd citoplasm mai bogat dect celelalte limfocite, cu granulaii
azurofile.
Celulele NK nu au nici unul din receptorii de antigen
caracteristici limfocitelor T sau B i de aceea au fost denumite
celule nule.
n dezvoltarea lor, celulele NK nu sunt dependente de timus.
Celulele NK au via scurt i reprezint o linie important,
primordial n evoluie, cu rol esenial n mecanismele de aprare
nscut a organismului: sunt active n respingerea grefelor i a
celulelor modificate sub raport antigenic. Funcia celulelor NK
este de a recunoate i de a liza anumite celule tumorale i celule
infectate cu virusuri. Mecanismul recunoaterii celulelor
purttoare de molecule nonself nu este cunoscut. Se admite c
celulele NK recunosc moleculele CMH i se activeaz cnd
receptorii lor nu ntlnesc moleculele CMH pe suprafaa celulelor
int sau cnd moleculele CMH au o densitate mai mic dect cea
normal. Efectul interaciunii este liza celulei int.
Aciunea definitorie a celulelor NK este citotoxicitatea. Ele
lizeaz fr restricie CMH, celulele tumorale sau pe cele infectate
cu virusuri.

36

Tema 5.
Bazele genetice ale diversitii receptorilor de antigen.

Funcia imunitar se bazeaz pe interaciunea specific
dintre receptorii limfocitari i epitopii nonself. Diversitatea
specificitii de legare a receptorilor limfocitari este paradigma pe
care se cldete ntregul edificiu al tiinei imunologice.
Diversitatea receptorilor caracterizeaz ambele populaii de
limfocite.
Limfocitele B ale vertebratelor sintetizeaz anticorpi cu o
mare diversitate a specificitii situsului de combinare (10
8
- 10
9

tipuri diferite, care leag un numr echivalent de epitopi antigenici
diferii). Inelegerea determinismului genetic al acestei uriae
diversiti a ntrziat mult fa de alte aspecte ale funcionalitii
sistemului imunitar.
Sistemul imunitar funcioneaz pe principiul gata fcut,
adic receptorul de antigen preexist pe suprafaa limfocitelor,
astfel nct problema diversitii anticorpilor trebuie explicat pe
baze genetice.

Mecanismele genetice ale diversitii imunoglobulinelor
Susinut de dovezi experimentale, teoria seleciei clonale
este acceptat. Se pune problema modalitii de codificare
genetic a sintezei unei mari diversiti moleculare de anticorpi.
Potenialului imens al unui organism de a sintetiza milioane de
tipuri de molecule diferite de anticorpi, ar trebui s-i corespund
un numr egal de gene codificatoare. Generarea potenialului uria
de diversitate genetic s-a explicat n diferite moduri:
- teoria liniei germinale consider c genele care codific
sinteza domeniilor VL i VH se gsesc n celula germinal. n
genomul fiecrui individ s-ar gsi un numr imens de cistroni care
s-ar transmite ereditar. Pentru cele 10
8
10
9
specificiti de legare
ale moleculelor de anticorpi, ar exista tot attea gene codificatoare.
Teoria nu explic modalitile de pstrare n cursul evoluiei, a
37

acestui numr uria de gene i nici posibilitatea sintezei
anticorpilor specifici fa de antigenele sintetice;
- teoria recombinrilor somatice presupune existena unui
numr limitat de cistroni codificatori ai domeniilor variabile ale
moleculei de anticorp, n linia germinal. Diversificarea
specificitii de combinare a anticorpilor s-ar realiza prin
recombinri somatice ntre un numr limitat de cistroni, asociate
cu diviziunile celulare n cursul diferenierii limfocitelor;
- teoria mutaiilor somatice consider c repertoriul genelor
pentru sinteza imunoglobulinelor este construit de novo n cursul
dezvoltrii sistemului imunitar, pornind de la un numr mic de
gene ale liniei germinale, prin mutaii la nivelul celulelor
somatice. Selecia pozitiv (pstrarea viabilitii clonelor limfoide
cu receptori pentru antigenele exogene) s-ar face sub influena
antigenelor care selecioneaz i stimuleaz proliferarea celulelor
mutante, care sintetizeaz anticorpi cu situs de combinare
complementar. Teoria presupune persistena n organism, pentru
perioade lungi de timp, a unui numr mare de antigene, ceea ce
este improbabil;
- teoriile mixte presupun existena unui numr limitat de
cistroni codificatori ai domeniului variabil (V), n celulele liniei
germinale. Diversificarea imens a potenialului de codificare i
sintez s-ar face prin recombinri somatice ntre aceti cistroni, n
timpul diviziunilor celulare, declanate de recunoaterea i
stimularea antigenic.
Teoria genelor multiple codificatoare ale unei molecule de
imunoglobulin a fost confirmat ulterior prin tehnica cineticii de
hibridare. Autorii au artat c att n celulele limfoide embrionare
ct i n celulele tumorii de mielom, regiunea constant a
catenelor H i L ale moleculei de imunoglobulin este codificat
de o singur gen,iar regiunea variabil este codificat de mai
multe gene.
n esen, genele funcionale pentru sinteza
imunoglobulinelor n celulele mature sunt rezultatul rearanjrii
38

prin procese de transpoziie, a unor segmente genice mici,
motenite n ADN al liniei germinale. Rearanjrile au loc n
limfocite, pe msur ce ele se difereniaz din celule imature
precursoare, n limfocite B productoare de anticorpi.
Singurul mecanism care aduce cele dou gene ntr-un
ansamblu funcional este reunirea prin transpoziie i
recombinarea genetic a celor dou secvene de ADN pentru a
forma o gen activ L i o gen activ H.
Polipeptidele L i H sunt codificate de trei grupuri de gene
nelincate:
- grupul genelor H, pentru sinteza catenelor , , , ,
(situate pe cromosomul 14 la om i 12 la oarece);
- grupul genelor k, codificatoare ale lanului Lk (situate pe
cromosomul 2 i respectiv 6);
- grupul genelor pentru sinteza catenei L (situate pe
cromosomul 22 i respectiv 6).
Fiecare din aceste familii cuprinde un numr controversat de
gene codificatoare ale regiunii variabile, situate separat, la
distan, de gena codificatoare a regiunii constante a moleculei de
imunoglobulin.
Genele pentru catena H a imunoglobulinelor au o organizare
asemntoare celei a genelor catenei L. Segmentele genice
codificatoare ale catenei H sunt mai numeroase i au o organizare
mai complex, deoarece conin n plus secvene codificatoare D
(diversity), intercalate ntre secvenele VH i JH. Cele circa 12
secvene genice D codific fiecare 5-15 aminoacizi i amplific
diversitatea biochimic a anticorpilor. Ele confer cea mai mare
variaie biochimic a catenei H.
Secvenele genice VH par a fi n numr de cteva sute.
Fiecare segment VH este asociat cu segmentul LH, codificator al
secvenei leader. La oarece sunt 200-300 de segmente genice
VH, 10-20 segmente D, 4 gene JH i 10 gene CH, iar la om sunt
circa 100 segmente genice VH(din care circa jumtate sunt
39

funcionale), circa 30 de gene D i 9 gene J, din care 6 sunt
funcionale. Genele VH sunt diseminate n 4 aglomerri.
Genele CH, codificatoare ale regiunii constante ale claselor
i subclaselor de catene H, se gsesc n ordinea: , , 3, 1, ,
(nefuncional), 1, 2, 4, , 4
Fiecare segment genic CH conine mai muli exoni. Fiecare
exon codific un domeniu structural al moleculei de
imunoglobulin.
Asamblarea genei active pentru catena H este similar
asamblrii genei active pentru catena L, dar mai complex,
deoarece implic recombinarea a trei regiuni genice distincte ale
domeniului variabil: VH, D i JH. Iniial s-ar realiza legarea
segmentelor genice D i JH, urmat de transpoziia uneia din
genele VH n vecintatea complexului D-JH, pe unul din
cromosomii celulei pre-B. Rearanjrile sunt posibile datorit
secvenelor de recunoatere ale genelor V, D, J.
De cele mai multe ori, rearanjrile genice au loc
intracromosomal i foarte rar intercromosomal. Dac rearanjarea
este nefuncional, are loc rearanjarea genelor n cellalt
cromosom pereche. n general, rearanjarea are loc la situsul k, iar
dac rearanjarea n cei doi cromosomi este neproductiv, este
iniiat rearanjarea la situsul .
Imensa diversitate a specificitii de legare a anticorpilor
este generat prin cteva mecanisme:
1) Diversitatea combinaiilor posibile prin asamblarea
ntmpltoare a segmentelor genice. De exemplu, cele circa 250
segmente genice Vk i cele 4 segmente funcionale Jk produc
circa 1000 (250 x 4) combinaii Vk-Jk. Pentru gena H exist
posibilitatea unui numr superior de combinaii VH D JH:
circa 250 segmente VH, 12 segmente D i 4 segmente JH (250 x
12 x 4 = 12000).
2) Flexibilitatea joncional a segmentelor genice. n
momentul asamblrii complexelor VH D JH sau VL JL se
produc deleii, adiii, substituii de baze, care modific circa 3
40

aminoacizi la fiecare jonciune. Numrul variantelor biochimice
ale moleculelor de imunoglobulin crete de 3 ori pentru lanul L
(1000 x 3) i de 9 ori pentru catena H (12 000 x 9 = 100000).
Adiiile i deleiile care nsoesc legarea segmentelor genice
VL-JL trebuie s se fac astfel nct s se pstreze unicul cadru de
citire al tripletelor pentru fiecare segment genic V i J. Dac
legarea segmentelor genice introduce sau pierde 1 sau 2
nucleotide (sau alt numr nedivizibil cu 3), secvena n aval nu va
fi citit. Aceasta este o rearanjare genic neproductiv.
Segmentele genice D pot fi citite n toate cele 3 cadre de
citire, n diferite recombinri V-D-J, ceea ce contribuie
semnificativ la diversitatea anticorpilor.
3) Diversitatea combinatorial prin mperecherea
ntmpltoare a catenelor H i L. Dac oricare lan L poate fi
mperecheat cu oricare lan H, vor rezulta peste 10
8
variante de
imunoglobuline (100000 H x 3000 L).
4) Adiii de nucleotide n regiunea N. Cea mai variabil
regiune a moleculei de anticorp este cea de a III-a secven
determinant de complementaritate a catenei H (aminoacizii 86-
91), locul de unire a segmentelor genice VH-D i D-JH. Aici se
gsesc scurte secvene de aminoacizi, foarte variabile, denumite
regiuni N. Ele sunt codificate de secvene de nucleotide adugate
de enzima terminal-deoxinucleotidil-transferaz (TdT), activ n
celulele limfoide imature, capabil s adauge nucleotide la captul
3 al catenei de ADN n curs de sintez, fr s necesite matri.
Activitatea TdT este minim la ft i la noul-nscut, dar este
stimulat postnatal. Enzima acioneaz preponderent pe genele
catenei H, dar regiunile N s-au identificat i la jonciunile V-J ale
catenei L.
5) Mutaiile somatice. Un numr de ordinul milioanelor de
variante ale regiunii V pot s apar prin substituii unice de
nucleotide n segmentul genic V. Acesta este
fenomenulhipermutaiei somatice a domeniilor variabile, care este
41

activat mai ales n condiiile imunizrii intense, ceea ce explic
creterea afinitii anticorpilor pentru epitopul stimulator.
Hipermutaia somatic este mecanismul esenial pentru
generarea diversitii anticorpilor. La om, hipermutaia somatic
se produce n prezena antigenului i are loc n centrii germinativi
din esutul limfoid periferic.
Rearanjrile genice se produc, iniial, la nivelul genei pentru
sinteza catenei H. Catena H apare prima n citoplasma
limfocitelor. Ulterior are loc rearanjarea genelor ce codific
sinteza catenei L.
Rearanjarea genelor se desfoar continuu n limfocitele B
din mduva osoas hematogen. Limfocitele care nu genereaz o
rearanjare genic productiv sunt eliminate, nefiind utile
sistemului imunitar. Probabil c pentru o rearanjare productiv
sunt necesare, statistic, multe altele neproductive, ceea ce
presupune c pentru fiecare limfocit funcional se pierde un numr
mare de celule. Teleonomic ns, risipa este justificat de
importana esenial a funciei imunitare pentru organism.
Mecanismele de recombinare genic permit ca n contextul
existenei a mai puin de 1000 de gene n linia germinal,
organismul s produc o mare diversitate de anticorpi (cteva
miliarde), ceea ce constituie repertoriul imunoglobulinelor.
Descoperirea mecanismelor genetice de transpoziie,
generatoare a uriaei diversiti a specificitii de combinare a
anticorpilor, a deschis o nou cale a nelegerii asupra modului n
care informaia genetic poate s fie diversificat.
Mecanismele de transpoziie sunt active n limfocitele B, dar
i n celulele liniei T, n care codific o diversitate asemntoare a
receptorului de antigen al acestor celule, dar nu au fost identificate
pentru alte gene.



42

Tema 6.
Antigenele complexului major de histocomparibilitate.

Existena antigenelor de histocompatibilitate a fost dedus
din faptul c alogrefele tegumentare sau de organe, nu sunt viabile
n organismul receptor. Dup 7-10 zile, esutul transplantat se
inflameaz i curnd dup aceea, grefa este respins.
Respingerea grefei este de natur imunitar: sistemul
imunitar al receptorului de gref recunoate ca nonself, anumite
molecule ale celulelor grefei i se activeaz. Moleculele de
suprafa ale celulelor grefate, recunoscute ca nonself, sunt
denumite antigene de histocompatibilitate. Ele confer
individualitate biochimic fiecrui individ.
Antigenele de histocompatibilitate se definesc ca molecule
ale suprafeei celulare i care, datorit diferenelor biochimice
individuale sunt recunoscute de sistemul imunitar al unui
organism cu un alotip diferit (cu o alt combinaie de gene alele
la situsul codificator).
Diversitatea biochimic la nivel individual a acestor
molecule, st la baza unicitii biochimice a fiecrui individ uman
i este determinat de o diversitate genetic corespunztoare.
Deoarece se comport ca antigene majore n organismul
receptor de gref, antigenele CMH se numesc i antigene de
transplantare.
n funcie de capacitatea lor de a stimula rspunsul imun de
respingere a grefei, antigenele CMH sunt tari i slabe.
Antigenele CMH tari reprezint principala barier n calea
transplantului de esuturi i organe. La oarece, moleculele CMH
tari aparin sistemului H-2. Grefele de esuturi i organe ntre
organisme care difer prin antigenele complexului H-2 ale
suprafeei celulare sunt invariabil respinse n 10-14 zile.
Antigenele tari aparin claselor I i II.
43

Antigenele slabe (uoare) sunt codificate de sistemul minor
de histocompatibilitate i determin respingerea lent a grefei de
piele, n circa 200 de zile.
La om, corespondentul sistemului molecular antigenic H-2
de la oarece este complexul antigenic al sistemului HLA (Human
Leucocyte Antigen). Denumirea semnific faptul c moleculele
sistemului au fost detectate iniial
(J. Dausset, 1958), pe suprafaa leucocitelor.
Antigenele complexelor H-2 i HLA au o varietate
antigenic individual i de aceea natura lor chimic se poate
studia numai n populaii genetic pure (inbred) de oarece,
obinute prin mperecheri multiple ntre indivizii aceleiai
descendene.
Structura molecular a antigenelor CMH clasa I
Antigenele codificate de genele CMH clasa I sunt
glicoproteine de membran, a cror regiune C-terminal se gsete
n citoplasm, iar cea N-terminal este expus extracelular.
O molecul CMH clasa I este alctuit dintr-un lan H
(Heavy) polipeptidic glicozilat (45 kD), n asociaie strns,
necovalent, cu -2 microglobulina (12 kD), un polipeptid care se
gsete i n ser.
Catena H este alctuit din 339 aminoacizi, distribuii n
urmtoarele 5 domenii:
- trei domenii extracelulare, n regiunea N-terminal, notate
cu -l, -2, -3, fiecare cu cte 90 de aminoacizi. Sub aciunea
papainei, pot fi clivate de restul moleculei. Domeniile -2 i -3
prezint legturi S-S intracatenare i formeaz bucle de 63 i
respectiv 86 aminoacizi;
- domeniul transmembranar conine 25 resturi de
aminoacizi hidrofobi, care traverseaz membrana. Imediat
deasupra acestui domeniu se gsesc 5 aminoacizi bazici (Arg,
Leu), tipici pentru proteinele legate de membran, cu rolul de a
ancora lanul polipeptidic n membran;
44

- domeniul hidrofil cito-plasmatic (30 de aminoacizi la om,
40 la oarece), conine n special serin, unele resturi
fiind fosforilate, este implicat n transmiterea semnalului de la
domeniile extracelulare, la mediatorii citoplasmatici. Acest
domeniu conine resturi de cistein cu rol n legarea prin
intermediul punilor S-S, de alte catene H sau de proteine
citoplasmatice.
Componenta glucidic este alctuit din dou grupri,
fiecare fiind format din 12-15 resturi de zaharuri, ataate de
domeniile -1 i -2. Sunt oligozaharide care conin manoz, de
care se leag catene laterale de glucozamin i acid sialic.
Catena H are o regiune variabil n jumtatea N-terminal,
cu dou subzone hipervariabile, care difer prin mai mult de 60%
din aminoacizi, de la un organism la altul, localizate n domeniile
-1 i -2. Studiile prin difracie cu raze X ale domeniilor
extracelulare, cristalizate dup clivarea cu papain arat c
domeniile -1 i -2 sunt foarte asemntoare ca secven de
amino-acizi i prin pliere formeaz mpreun o cavitate
molecular, presupus a fi situsul de legare stabil a epitopului
antigenic. Cavitatea, susinut de secvene -pliate ale acelorai
domenii -1 i -2, este ocupat de o molecul linear, care este
un peptid ce cristalizeaz concomitent cu catena H. Situsul
cavitar, dup ce leag antigenul, formeaz un complex recunoscut
de limfocitele TCD
8
. Restul catenei H corespunde regiunii
constante.
Moleculele CMH clasa I sunt adevrate certificate de
identitate biochimic i genetic, pentru fiecare organism,
datorit polimorfismului lor biochimic foarte accentuat. Ele
vegheaz la pstrarea homeostaziei biochimice a organismului i
devin inta sistemului imunitar n urmtoarele situaii:
a) dup grefarea esuturilor i organelor care poart molecule
incompatibile;
b) dup ce se asociaz cu antigenele virale, tumorale sau cu
cele induse de agenii chimici;
45

c) dup modificarea biochimic printr-un proces mutaional.
Antigenele CMH clasa II-a sunt glicoproteine heterodimere
de membran, formate din dou catene diferite, notate cu i .
Prin solubilizare cu detergent, aceste molecule se elibereaz
ntregi. Lanul are 30-34 kD, iar lanul are 26-29 kD.
Fiecare caten este format din 4 domenii:
- dou extracelulare, alctuite din circa 90 de aminoacizi
fiecare, notate cu -1, -2, respectiv -1, -2;
un domeniu transmembranar (circa 30 de aminoacizi);
un domeniu citoplasmatic (10-15 aminoacizi).
Domeniile -1 i -1 au o variabilitate accentuat a secvenei de
aminoacizi. Ele se asociaz pentru a forma o structur ce
delimiteaz o cavitate n care este legat peptidul antigenic.
Determinismul genetic al moleculelor CMH
Moleculele CMH sunt codificate de genele complexului
major de histocompatibilitate. Calificativul complex este
justificat de numrul mare de gene componente, iar cel de major
semnific importana deosebit a moleculelor codificate de aceste
gene, n realizarea unor funcii imunitare importante:
-elaborarea rspunsului imun
-respingerea grefelor de esuturi i organe.
n raport cu tipul de proteine pe care le codific, genele
CMH aparin clasei I i clasei a II-a.
La oarece, genele CMH codificatoare ale moleculelor
complexului antigenic H-2 sunt localizate pe cromosomul 17, ntr-
un fragment de 2000-4000 kb perechi, suficient de mare pentru a
codifica circa 200 de proteine de dimensiuni medii. In acest
complex se gsesc 3 tipuri de gene descoperite independent:
- primul grup de gene (descoperit n anii 40) codific
antigenele tari de transplantare, care induc respingerea rapid a
grefelor de tegument i de organe, ntre indivizi neidentici genetic
(aparin unor alotipuri diferite). Acestea sunt genele CMH clasa I,
care codific moleculele CMH clasa I;
46

- al II-lea grup, denumite genele rspunsului imun (IR)
codific sinteza unor molecule care condiioneaz intensitatea
rspunsului imun al organismului, slab sau puternic, fa de un
antigen. Genele IR codific proteinele clasei a II-a de molecule
CMH, denumite i molecule Ia (I associated);
- al III-lea set de gene ale complexului CMH codific
sinteza unor componente ale complementului.
La om, moleculele CMH clasa I sunt codificate de genele HLA, iar
moleculele CMH II, de regiunea cromosomal D, localizate pe
cromosomul 6.

Distribuia tisular a moleculelor CMH I i I I i
semnificaia lor evolutiv
Moleculele CMH I se gsesc pe suprafaa majoritii
esuturilor, pe celulele endoteliale ale capilarelor, iar leucocitele
exprim cea mai nalt densitate a moleculelor CMH I: 1% din
moleculele de suprafa ale membranei leucocitare sunt molecule
HLA.
Moleculele CMH I au o densitate mai mic pe suprafaa
celulelor hepatice, din plmn, rinichi i sunt foarte diluate pe
suprafaa celulelor musculare i a celor mai multe glande
endocrine (cu excepia suprarenalelor).
Moleculele CMH II sunt exprimate predominant, pe
suprafaa limfocitelor B i pe celulele specializate pentru
prelucrarea i prezentarea antigenelor: celulele seriei monocit-
macrofag, celulele endoteliale ale capilarelor sanguine i
limfatice, celulele Kupffer, celulele dendritice, eozinofile,
microglia SNC.
Moleculele CMH lipsesc pe eritrocite, pe celulele
endoteliului corneean, pe componenta exocrin a pancreasului,
pe celulele acinare ale glandelor parotide, pe neuronii SNC, pe
celulele endoteliale ale capilarelor SNC, pe esutul placentar.
n condiii normale, o form solubil de molecule HLA
se gsete n plasm. Nivelul ei crete marcat n timpul
47

infeciei virale, probabil datorit creterii ratei sintezei
moleculelor HLA, stimulat de interferon i de alte citochine.
Limfocitele B i celulele tumorale secret molecule CMH
II.
Privit n perspectiva evoluiei, existena moleculelor CMH
nu semnific respingerea grefelor de esuturi i organe, deoarece
acestea nu se realizeaz n mod natural, ci au fost introduse n
practica medical a ultimelor decenii. In sens evolutiv, existena
moleculelor CMH ar putea fi atribuit necesitii organismelor de
a semnaliza rapid, celulele care prezint molecule antigenice pe
suprafaa lor: celulele infectate cu virusuri sau cele transformate
malign. In acest context, moleculele CMH au o semnificaie
deosebit: pentru supravieuirea organismului, liza celulelor
purttoare de molecule nonself trebuie s fie rapid, nainte ca
virusul s se multiplice i respectiv, nainte ca celula malign s se
divid i s formeze o microtumor.
Pentru ca intervenia limfocitelor Tc s fie eficient, este
necesar ca moleculele CMH s fie prezente pe oricare celul ce
poate fi infectat de un virus sau poate s fie transformat malign.
Pe de alt parte, moleculele CMH, al cror rol esenial este acela
de a prezenta epitopii nonself, trebuie s permit aciunea
eficient i rapid a limfocitelor Tc.
Moleculele CMH ndeplinesc i funcii neimune. Moleculele
CMH I sunt componente ale receptorilor de hormoni. De exemplu,
linia celular stabilizat Daudi nu exprim moleculele CMH I i
nu are nici receptor pentru insulin, deoarece nu sintetizeaz 2-
microglobulina.


48

Tema 7.
Imunitatea n transplantul de esuturi i organe

Chirurgia transplantului a depit dificultile de ordin
tehnic. Reuita transplantului depinde exclusiv de reactivitatea
imunitar, care declaneaz un rspuns de respingere.
Ideia nlocuirii unui organ lezat, cu unul sntos, a
preocupat medicina din timpuri foarte ndeprtate. n mitologia
greac se vorbea de organisme himere.
Perioada tiinific a transplantului ncepe cu Alexis Carrel
(medic american, care a lucrat n Frana), cel care a pus bazele
cultivrii celulelor i esuturilor. n 1902, Carrel a fcut grefe de
rinichi la animale. n 1906, a grefat plmni la pisic i a fcut
primul transplant de inim la cine, legnd inima de vasele regiunii
cervicale. Animalul a trit 21 de ore.
K. Landsteiner, unul din promotorii perioadei tiinifice, a
descris grupele sanguine i condiiile de compatibilitate major
ntre donor i receptor. n 1944, Medawar a conchis c
respingerea grefelor de esuturi i organe are cauze imunitare, iar
curnd dup aceea, Billingham, Brent i Medawar au descris
fenomenul de toleran imunitar.
G. Math (hematolog francez) a creat himerele biologice. El
a pornit de la ideia c fenomenele de respingere a grefelor de
esuturi i organe sunt datorate stimulrii activitii sistemului
imunitar. n lucrrile sale experimentale, a recurs la metoda
paralizrii reactivitii imunitare. In acest scop, puii nou-nscui
de obolan au fost supui iradierii totale, cu doza de 800 de razi.
Rezultatul iradierii este desfiinarea barierelor imunitare, adic
anihilarea reactivitii imunitare fa de gref. La animalele
iradiate a inoculat cteva milioane de celule din mduva osoas de
oarece. Autorul a creat astfel, himera biologic oarece-obolan
(obolan cu elemente figurate sanguine de oarece). Himera este
sensibil la infecia cu virusul leucemiei oarecelui i face
49

leucemia, n timp ce obolanii convenionali sunt rezisteni la
infecia cu acest virus.
Himera biologic este orice organism dotat n mod artificial
cu componente celulare, cu esuturi sau organe, care provin de la
alte organisme. Ulterior, tehnicile de inginerie genetic au creat
molecule de ADN himere i chiar microorganisme himere, ce
poart informaie genetic provenit de la dou specii diferite.
n 1967, Christian Barnard a realizat primul transplant de
cord la om.
Denumirea de gref, folosit curent pentru esutul implantat
n organismul strin, vine de cuvntul grecesc grafion, care
desemneaz un instrument de scriere prin gravur. Denumirea a
fost ulterior folosit cu nelesul de altoi la plante. Denumirea de
transplant a fost folosit de Paracelsus i nseamn a transfera, a
muta.
Noiunea de transplant are un sens mai larg. Ea include
fecundarea ovulului de ctre spermatozoid, ca transplant natural.
Ftul este o alogref natural, ce poart informaia genetic de
origine patern, dar este protejat prin mecanisme cu aciune
placentar, de fenomenele de respingere.
Autogrefele se practic cu o frecven mare: n cazuri de
arsuri, intervenii chirurgicale estetice. Pielea dintr-o regiune a
corpului este implantat ntr-o zon compromis.
Alte denumiri se refer la particularitile esutului
transplantat:
-> grefele homovitale se fac pentru asigurarea viabilitii
esutului transplantat
-> grefele homostatice sunt acelea n care esutul grefat are
rolul numai de suport structural, pe care se poate dezvolta esutul
gazdei, pentru restabilirea arhitecturii iniiale. Astfel de grefe sunt
lipsite de orice urm de esut antigenic, se practic pentru a
nlocui un fragment de vas sau de os.
n raport cu locul de unde esutul a fost luat i locul unde se
reimplanteaz, se disting grefe ortotopice (esutul grefat este
50

aezat la receptor n aceiai poziie) i grefeheterotopice (esutul
grefat este implantat n alt situs anatomic al organismului
receptor).
Dup 1956, primul succes al grefei de rinichi ntre gemeni
univitelini, transplantul de organe a devenit o practic curent.
Interesul pentru transplant s-a deplasat de la actul chirurgical, la
aspectele imunologice.
Argumente ale rolului reactivitii imunitare n
respingerea grefei
Respingerea grefei este rezultatul activrii mecanismelor
imunitare, datorit diferenelor antigenice ntre moleculele CMH I
i II ale donorului i receptorului. n favoarea acestei afirmaii
argumenteaz mai multe fapte de observaie:
-> autogrefele i singrefele sunt acceptate totdeauna, dac
sunt respectate condiiile de asepsie;
-> grefa ntre indivizi diferii este respins cu att mai brutal,
cu ct diferenele antigenice(biochimice) dintre moleculele CMH
ale donorului i receptorului sunt mai mari;
-> din punct de vedere histologic, esutul grefat respins este
infiltrat cu celule efectoare ale rspunsului imun: limfocite,
macrofage, plasmocite;
-> animalele timetomizate au o capacitate sczut de
respingere a grefelor de esuturi i organe, care se restabilete
dup grefarea timusului;
-> debutul fenomenelor de respingere este foarte mult
ntrziat, dac organismului receptor de gref i se administreaz
ser antilimfocitar (SAL);
-> fenomenele de respingere sunt mai intense la copii,
datorit abundenei esutului limfoid, dar sunt mult atenuate la
btrni.
Argumente indirecte n favoarea respingerii imunitare:
-> organele grefate rapid dup recoltare sunt suportate mult
mai bine dect cele care au fost pstrate o perioad mai lung de
timp n afara organismului. esutul transplantat dup o perioad
51

de pstrare, conine mai multe celule lezate i lizate, din care se
elibereaz molecule nonself, care amplific rspunsul imun;
-> conservarea n condiii optime mrete gradul de
toleran fa de esutul grefat, iar pstrarea neadecvat are efecte
defavorabile;
-> organele i esuturile sntoase sunt tolerate mai bine
dect cele care prezint o stare de uzur biologic.

Antigenele declanatoare ale respingerii grefei
Moleculele CMH ale esutului grefat stimuleaz un rspuns
imun intens al organismului receptor, a crui finalitate este
respingerea grefei. Moleculele CMH I se gsesc pe toate celulele
nucleate, dar au un nivel variabil de exprimare. Moleculele CMH
II au o distribuie limitat: pe macrofage, pe limfocitele B, pe
unele celule epiteliale i endoteliale, pe celulele dendritice.
Polimorfismul extensiv al moleculelor CMH limiteaz
posibilitatea transplantului numai ntre parteneri compatibili
CMH. Chiar n aceste condiii, grefa poate fi respins, datorit
diferenelor ntre antigenele minore ale donorului i receptorului.
Antigenele din gref au urmtoarele origini:
-> antigenele libere (antigene solubile) provin din liza
eritrocitelor i din membrana bazal;
-> antigenele CMH exprimate pe celulele dendritice
existente n esutul grefat;
-> antigene CMH asociate membranelor rezultate din liza
celulelor organului, n perioada de conservare.
Antigenele CMH ale donorului pot fi recunoscute pe
suprafaa celulelor prezentatoare (prezentare direct) sau ca
fragmente prelucrate i asociate cu moleculele CMH ale
receptorului (prezentare indirect).
Antigenele eliberate din gref, ajung n ganglionii regionali
ai gazdei i activeaz limfocitele T i B. Cele mai importante
antigene aduse de organul grefat, cu rol esenial n declanarea
conflictului imun, sunt moleculele CMH I i II. Un rol deosebit se
52

atribuie celulelor dendritice din esutul grefat. Ele exprim
molecule CMH II la densitate foarte nalt, care determin
stimularea iniial a limfocitelor gazdei.
Moleculele CMH I i II libere se comport ca antigene tari,
intens imunogene i nu necesit prezentarea n asociaie cu
moleculele CMH proprii organismului, pentru a stimula
limfocitele T, dar sunt mult mai imunogene dac sunt prezentate
de alte celule, n special de celulele dendritice i de celulele
endoteliale.
Rspunsul imun fa de esutul grefat este mediat n primul
rnd de limfocitele T. n organul grefat, raportul dintre limfocitele
TCD
4
i TCD
8
este 1/3, adic predomin net limfocitele Tc, iar n
mod normal, acest raport este 2/1. Limfocitele T stimulate de
antigenele CMH sintetizeaz interferon , activator al macofagelor
din focarul conflictului. Macrofagele devin citotoxice fa de
esutul grefat, ca i limfocitele Tc.
Macrofagele secret IL-1, care produce febra ce nsoete
reacia de respingere a grefei. Limfocitele ptrunse n esutul
grefat sunt pasagere. Ele prsesc grefa, trec n limf i ajung n
ganglioni, unde ncepe proliferarea, elibereaz citochine, care
activeaz limfocitele ganglionare. Acestea devin limfocite
efectoare.
Celulele NK nu necesit activarea prealabil pentru a liza
diferite celule tumorale. Ele sunt implicate n respingerea
alogrefelor de organe.
Rolul anticorpilor. Ca rspuns fa de antigenele esutului
grefat, se sintetizeaz anticorpi specifici fa de antigenele de
transplantare. Anticorpii au rol secundar n reacia de respingere a
grefelor de esuturi i organe. Anticorpii au rol foarte important n
respingerea grefei, n situaiile n care, anticorpii anti-CMH
preexist la un titru crescut n momentul transplantrii. Sinteza lor
este indus de sarcinile multiple, de transfuzii repetate sau de o
gref anterioar. Grefa este respins imediat.
53

Anticorpii au rol important n respingerea grefelor cu
incompatibilitate grav ntre donor i receptor, deoarece fixeaz
complementul i produc fenomenul de citoliz. Dac nu fixeaz
complementul, anticorpii au rol de opsonine, adic sensibilizeaz
celulele grefate fa de aciunea macrofagelor i neutrofilelor.
Anticorpii sintetizai n esutul grefat, determin eliberarea
mediatorilor reaciei de hipersensibilitate imediat (de exemplu,
histamina), care produc modificri circulatorii n vasele grefei.
Anticorpii fa de antigenele eritrocitare sunt singurii
efectori imunitari eficieni n transfuzia incompatibil. Efectul lor
const n aglutinarea i liza eritrocitelor.
Prevenirea respingerii grefelor de organe este posibil
printr-o mperechere ct mai adecvat a donorului i receptorului
din punctul de vedere al asemnrii moleculelor CMH i, ulterior,
prin instituirea tratamentului imunosupresor.

Xenotransplantarea
Termenul semnific transplantul de esuturi i organe ntre
organismele unor specii diferite. Interesul clinic pentru
xenotransplantare a fost determinat de lipsa organelor umane.
Succesul alotransplantului a creat un necesar care depete
disponibilul. n 1963, transplantul de rinichi de cimpanzeu la om,
a prelungit supravieuirea cu 9 luni i moartea a survenit dup
complicaiile provocate de imunosupresie. n 1984, inima de
babuin a fost transplantat la om. A urmat transplantul de ficat de
maimu, transplantul de celule neurale de embrion de porc, la un
pacient cu boal Parkinson, transplantul de mduv osoas de la
babuin, la un pacient cu SIDA.
Barierele xenotransplantrii sunt multiple: unele organe de
la alte specii nu funcioneaz adecvat n noul mediu. Rinichiul de
cimpanzeu este funcional n organismul uman. Persoanele
transplantate cu rinichi de porc devin anemice, probabil pentru c
eritropoetina nu este activ, iar cele cu ficat de babuin au nivele
mai mici de colesterol (echivalente cu cele de babuin) i nivele
54

foarte sczute de acid uric (pentru c ficatul de babuin nu produce
acid uric). Grefarea celulelor sanguine stem xenogenice este
limitat de absena factorului de cretere specific celulelor stem
transplantate.
Xenogrefele pot fi neconcordante (de la porc) sau
concordante (de la cimpanzeu, babuin). La perechile
neconcordante, titrul anticorpilor preformai este detectabil i
xenogrefele sunt respinse hiperacut (n cteva minute), prin
reacia de activare a endoteliului. Pentru respingerea hiperacut a
grefelor neconcordante, un alt factor critic (alturi de anticorpii
preformai) al producerii leziunilor endoteliale este complementul
i proteinele sale reglatoare. n combinaia porc-om, anticorpii
preformai se leag la nivelul determinanilor antigenici de
galactoz (1,3)-galactoz ai endoteliului grefei, deoarece omul a
pierdut gena pentru enzima alfa-galactozil-transferaz i nu
posed acest epitop. Activarea complementului se face pe calea
clasic, iar n absena anticorpilor preformai, pe calea altern. In
esen, respingerea hiperacut se datoreaz reaciei endoteliale la
activarea complementului, mediat de anticorpii preformai (IgG
anti--gal).
inta respingerii hiperacute este endoteliul vascular.
Activarea endoteliului produce cele mai evidente manifestri ale
respingerii hiperacute: tromboza intravascular, hemoragia
extravascular i edemul.
n asocierile concordante, titrul anticorpilor preformai nu
este detectabil i respinerea este acut, datorit aceluiai fenomen
de activare a endoteliului vascular.
Respingerea ntrziat (acut) a xenogrefelor concordante se
face n 2-3 zile (mult mai repede dect a alogrefelor). Din punct de
vedere histologic, respingerea acut relev mai puin hemoragie,
dar cu tromboz intravascular semnificativ, ca i n reacia
hiperacut, deoarece inta este endoteliul vascular. Respingerea
acut a xenogrefei se datoreaz anticorpilor a cror sintez este
55

indus de antigenele xenogrefei. Se sintetizeaz preponderent IgG
anti--gal, al cror titru crete rapid.
Progresul n xenotransplantare s-a fcut n sensul prevenirii
respingerii hiperacute: imunosupresia receptorului de gref i
ingineria genic a donorului pentru a elimina marile diferene
antigenice dintre xenogrefe i alogrefe.

I munosupresia
Variantele alelice multiple codificatoare ale moleculelor
CMH fac cu totul improbabil posibilitatea ca dou organisme s
fie identice pentru moleculele CMH, cu excepia gemenilor
monozigoi. Natura determinismului genetic al moleculelor CMH
nu este favorabil transplantului de esuturi i organe.
Amplitudinea procesului de respingere a grefei este parial
dependent de gradul de incompatibilitate al antigenelor CMH,
dintre donor i receptor.
Scopul imunosupresiei selective este de a menine
funcionalitatea mecanismelor de aprare a organismului, fa de
infeciile virale, bacteriene, fungice i fa de parazii, de a pstra
capacitatea SFM de a fagocita celulele mbtrnite i de a proteja
mecanismele de imunosupraveghere care elimin celulele
maligne. Pe de alt parte, se urmrete inducerea strii de
toleran fa de antigenele organului grefat (rinichi, ficat, inim).
n cazul maladiilor autoimune, dezideratul imunosupesiei este
inhibiia selectiv a reactivitii imunitare autoagresive fa de
antigenele retinei (n uveit)sau fa de antigenele colonului (n
boala Crohn).
Un medicament imunosupresor trebuie s ntruneasc
urmtoarele criterii:
-> s inhibe activarea rspunsului imun i s fie eficient fa
de procesele imunitare n curs de desfurare;
-> s aib aciune selectiv, adic s produc deleia clonal
sau s inactiveze numai anumite subpopulaii de celule
imunocompetente;
56

-> s aib un index terapeutic bun, adic un raport favorabil
ntre doza terapeutic i cea toxic.
Pentru supravieuirea grefei, transfuziile de snge cu
specificitatea antigenic a donorului sau transfuziile nespecifice,
ca i testele de histocompatibilitate sunt importante numai dac se
asociaz cu imunosupresia, cu scopul diminurii reactivitii
imunitare. Terapia imunosupresoare este foarte complex, pentru
c nici un agent chimic nu are aciune strict selectiv asupra
esutului limfoid. Imunosupresia se realizeaz prin:
-> iradierea x ;
-> terapia imunosupresoare ;
-> metode imunologice.
Terapia imunosupresoare. Medicamentele imunosupresoare
inhib nespecific reactivitatea imunitar i se administreaz att
dup grefa tisular, ct i pacienilor cu maladii reumatice,
caracterizate prin reactivitate imunitar excesiv.
Imunosupresia s-a realizat cu o varietate de ageni
terapeutici: hormoni corticosteroizi, medicamente citotoxice. Cele
mai multe metode convenionale de imunosupresie i realizeaz
efectul n mod neselectiv.
Medicamentele citotoxice au fost iniial folosite n
tratamentul neoplaziilor, dar reprezint o modalitate important de
imunosupresie pentru tratamentul maladiilor autoimune.
Chimioterapia administrat pacienilor neoplazici produce,
uneori, o imunosupresie profund. Medicamentele citotoxice sunt
imunosupresoare deoarece distrug celulele imunocompetente sau
blocheaz proliferarea lor.
Imunosupresorul ideal va media inducerea toleranei, n
special n transplant, adic va permite sistemului imunitar s
adopte ca self, moleculele CMH specifice esutului grefat.
Radiaia ionizant x i gama produce ionizarea atomilor i
genereaz radicali liberi, n special radicalul OH
.
, foarte reactiv,
principalul agent ce mediaz moartea celulelor iradiate. Efectele
radiaiilor ionizante sunt dependente de doz. Celulele stem i
57

celulele imature sunt foarte sensibile. Limfocitele T sunt mai
rezistente dect limfocitele B, iar monocitele i macrofagele sunt
relativ rezistente.
Corticosteroizii sunt cele mai folosite medicamente, cu efect
inhibitor asupra rspunsului imun, dar i al proceselor
inflamatorii. S-a propus mecanismul limfolizei, dar la om acest
efect nu se produce. Timp de 4-6 ore dup administrare,
corticosteroizii reduc numrul de leucocite circulante (limfocite,
monocite, eozinofile), dar crete semnificativ numrul
neutrofilelor. Valorile leucocitelor revin la normal n 24 de ore.
Limfocitele T, precum i monocitele prsesc circulaia i
migreaz n mduva osoas, iar limfocitele B sunt relativ
rezistente la corticosteroizi. Eozinopenia, dup injectarea
corticosteroizilor, explic efectele benefice ale acestor hormoni la
persoanele alergice.
Serul antilimfocitar (SAL) i globulina antitimocitar se
obin prin injectarea limfocitelor, respectiv a timocitelor, la o
specie xenogen. Se folosesc celulele ductului toracic sau
timocitele pentru imunizarea iepurelui sau calului. Din serul
heterolog se separ fracia imunoglobulinic, ce se administreaz
intravenos pentru depirea unei stri critice dup grefare.
Deoarece citochinele sunt molecule foarte importante n
reacia imunitar, s-a ncercat neutralizarea lor cu receptori
solubili.
Deleia specific a populaiilor de limfocite este posibil cu
preparatele denumite imunotoxine. Acestea sunt complexe ce
constau din dou componente: un anticorp monoclonal care
asigur recunoaterea specific a intei celulare i o component
toxic (ricina, toxina difteric).

58

Tema 8.
Rspunsul imun.

Organismul, ca sistem funcional este echilibrat atta timp
ct informaia antigenic pe care o primete, este identic cu cea
proprie. Fa de moleculele strine, care se abat de la modelul
informaional propriu, sistemul imunitar rspunde prin activarea
mecanismelor de recunoatere pentru a ndeprta moleculele
nonself.
Ansamblul fenomenelor complexe n cascad, declanate de
interaciunea specific a sistemului imunitar cu antigenul, n
cursul crora celulele imunocompetente se activeaz, prolifereaz
i se difereniaz n celule efectoare i celule de memorie,
constituie rspunsul imun.

Particularitile generale ale rspunsului imun
Elaborarea rspunsului imun fa de o substan nonself este
un proces fiziologic care se caracterizeaz printr-o mare eficien
i suplee i are urmtoarele particulariti generale:
- funcia imun are caracter adaptativ, care decurge din
orientarea specific a reaciilor sale fa de o substan nonself.
Caracterul adaptativ al rspunsului imun implic mobilizarea unor
celule preprogramate care ateapt s fie activate de un anumit
antigen, corespunztor specificitii lor;
- caracterul foarte economic al funciei imunitare deriv din
specificitatea aciunii sale. n timpul rspunsului imun se
selecioneaz i se activeaz numai clonele de limfocite care au
recunoscut specific epitopii antigenului, toate celelalte clone
rmnnd disponibile pentru alte interaciuni;
- eficiena funciei imune deriv din caracterul foarte
economic al mijloacelor celulare i moleculare pe care le
mobilizeaz i din capacitatea de a amplifica efectorii si, pe dou
ci :
59

a) proliferarea masiv (circa 8 generaii celulare) a
celulelor selecionate sub aciunea stimulatoare a
substanei nonself. Dup activare se produc modificri
funcionale calitative ale acestor celule, de difereniere
proliferativ i maturare, rezultatul fiind generarea
celulelor efectoare cu mare capacitate de aciune i a
celulelor de memorie;
b) celulele efectoare produc cantiti mari de
molecule de recunoatere, sub forma receptorilor
specifici fa de substana nonself;
- caracterul de reea a celulelor activate n rspunsul imun,
conectate prin mediatori moleculari (interleuchine) i care
condiioneaz eficiena rspunsului imun;
- celulele sistemului imunitar coopereaz stimulator cu
numeroase alte categorii de celule, capabile la rndul lor s
confere rezisten organismului. Cooperarea are loc, inclusiv cu
factorii nespecifici (nscui) ai rezistenei (fagocitele, proteinele
sistemului complement, molecule bactericide sau bacteriolitice din
plasm);
- rspunsul imun adaptativ necesit o perioad de timp
pentru activarea i proliferarea limfocitelor care au recunoscut
antigenul, n timp ce reaciile neadaptative sunt prompte;
- rspunsul imun adaptativ asigur protecia organismului i
a descendenilor si, prin transferul placentar al anticorpilor i prin
secreia lactat;
- rspunsul imun adaptativ are o proprietate fundamental
unic - memoria imun - consecin a experienei antigenice
individuale, netransmisibil la descendeni.
Rspunsul imun este rezultatul cooperrii unui numr
restrns de tipuri celulare i moleculare. n funcie de
predominana componentei celulare sau moleculare n
compartimentul efector al rspunsului imun, se disting dou tipuri
de reactivitate imunitar.
60

1. Rspunsul imun mediat humoral (RIMH), care se
caracterizeaz n esen, prin sinteza anticorpilor ca molecule
efectoare. Efectele RIMH sunt urmtoarele:
- neutralizarea toxinelor i a infeciozitii particulelor virale
- opsonizarea antigenelor celulare(bacterii, celule eucariote)
- legarea antigenelor moleculare n complexe Ag-Ac i
eliminarea lor.
Imunitatea mediat humoral este transferabil de la un
organism la altul prin intermediul serului. RIMH este protector
fa de infeciile bacteriene (n special piogene), fa de
reinfeciile virale i fa de antigenele moleculare pe care le
neutralizeaz.
2. Rspunsul imun mediat celular (RIMC) se caracterizeaz
prin aceea c, dup ptrunderea antigenului, de regul celular,
sistemul imunitar mobilizeaz celule specializate, care atac
antigenul int. Atacul se realizeaz fie prin contact celular direct
ntre limfocitele T efectoare i celula int, fie prin mediatori
moleculari.
Rspunsul imun mediat celular este declanat de antigene
care se exprim pe suprafaa celulelor:
- antigene virale exprimate pe suprafaa celulelor infectate,
n special dup infecia viral primar;
- antigene fungice;
- antigene exprimate pe suprafaa celulelor infectate de
bacteriile cu localizare intracelular obligat (Rickettsia,
Coxiella, Chlamydia) sau facultativ intracelular (M.
tuberculosis, M. bovis, M. leprae, Brucella sp., Listeria
monocytogenes, Francisella tularensis), n special n macrofage;
- antigenele tumorale;
- antigenele celulare din grefele de esuturi i organe
alogenice.
Nici un antigen nu induce un rspuns imun pur, humoral sau
celular. Totdeauna rspunsul imun este mixt, cu predominana
unuia sau a celuilalt dintre compartimente.
61

Etapele rspunsului imun
Rspunsul imun este rezultatul succesiunii urmtoarelor
etape:
- ptrunderea antigenului n organism i nglobarea lui de
ctre celulele accesorii;
- prelucrarea antigenului i prezentarea epitopilor pe
suprafaa celulelor accesorii;
- recunoaterea specific a componentelor nonself i
activarea celulelor efectoare;
- producerea efectorilor rspunsului imun.
Ptrunderea antigenului n organism se realizeaz pe
diferite ci:
- pe cale cutanat
- pe calea circulaiei sanguine
- pe calea mucoaselor (respiratorie, gastro-intestinal i
urogenital).
Elaborarea rspunsului imun este, n esen, rezultatul
cooperrii a dou categorii de celule: celulele accesorii ale
rspunsului imun i celulele limfoide.
Antigenul este recunoscut de celule specializate funcional
i nglobat, cel mai adesea prin aciunea unor mecanisme
nespecifice, de celulele accesorii, cu rolul de a prelucra i de a
prezenta antigenul.

Celulele prezentatoare de antigen (CPA)
Celulele accesorii au rol esenial n elaborarea rspunsului
imun, datorit capacitii lor de a ngloba substanele strine, de a
le prelucra i de a le prezenta limfocitelor, de a fagocita celulele
opsonizate i de a sintetiza substane imunomodulatoare.
Prezentarea antigenului este treapta obligatorie care precede
recunoaterea antigenelor proteice de ctre celulele T.
Orice celul care poart pe suprafaa ei molecule CMH
poate s participe la elaborarea rspunsului imun. Celulele
prezentatoare de antigen au urmtoarele proprieti: preiau
62

antigenele, le internalizeaz i le prelucreaz; exprim moleculele
CMH I i II; exprim moleculele de aderen care favorizeaz
interaciunea cu limfocitele; produc molecule stimulatoare ale
creterii i diferenierii limfocitelor T; elibereaz citochine.
Cele mai importante celule accesorii pentru elaborarea
rspunsului imun sunt macrofagele. In vivo, macrofagul particip
decisiv la procesul de imunogenez. Indiferent de calea de
ptrundere n organism, antigenele sunt captate de celule
accesorii, cel mai adesea, de macrofag.
Cea mai mare parte a antigenelor circulante sunt eliminate
nainte de a declana rspunsul imun, n primul rnd de celulele
Kupffer, localizate pe faa luminal a capilarelor sinusoide din
ficat. La nivelul ficatului se elimin circa 90% din totalul
antigenelor circulante (bacteriile care strbat bariera mucoasei
digestive, endotoxinele absorbite la nivelul colonului, antigenele
de origine alimentar).
Alte celule specializate, cu rol major n prezentarea
antigenului sunt celulele dendritice i limfocitele B.
Celulele dendritice fac parte dintr-o familie care cuprinde
urmtoarele tipuri de celule:
- celulele Langerhans, localizate n epiderm, dar i n
mucoase(oral, nazal, esofagian, bronic, n mucoasa traheii)
- celulele cu voal, din limfa aferent
- celulele dendritice, din epiderm, din epiteliile mucoaselor,
din organele limfoide i din snge
- celulele interdigitate, din aria paracortical a ganglionilor
limfatici.
Celulele dendritice au rol important pentru iniierea
rspunsului imun. Sunt larg distribuite n esuturile limfoide i
nelimfoide la toate speciile de mamifere studiate. Precursorii
celulelor dendritice i ai macrofagelor sunt localizai n mduva
osoas, iar monocitul este un stadiu comun, nainte de
diferenierea pe cele dou linii. n tegument, celulele dendritice i
celulele Langerhans formeaz o reea ramificat n tot epidermul.
63

Ele au capaciti optime de captare i prelucrare a antigenelor,
care ptrund pe cale tegumentar. Dup maturare, favorizat de
citochinele produse local, migreaz din esuturile nelimfoide, n
esuturile limfoide secundare. Migrarea din epitelii are loc pe cale
limfatic, pn n ganglionii limfatici regionali, iar cele din spaiile
interstiiale migreaz pe cale sanguin n splin. n timus, celulele
dendritice prezint complexele CMH-peptide, timocitelor care i
dobndesc competena imunitar, pentru inducerea toleranei
imune.
Celulele acestei familii nu au receptori pentru Fc i nici
pentru C3, dar exprim la un nivel ridicat, moleculele CMH I i II.
Celulele Langerhans reprezint 2-8% din totalul celulelor
epidermice i formeaz o reea printre cheratinocitele straturilor
profunde. Ele reprezint celulele dendritice imature i exprim
nivele mai mari de molecule CMH II. Sunt capabile s preia
antigenul exogen prin intermediul moleculelor de suprafa, fiind
celule prezentatoare de antigen foarte eficiente. Celulele
Langerhans pot s prezinte antigenul local, n epiderm, sau pot s
se mobilizeze, s prseasc stratul bazal i s migreze pe cale
limfatic, pn n ganglionii regionali. n timpul migrrii, celulele
au prelungiri membranare i se numesc celule cu voal. n
ganglionul limfatic, ele se distribuie n aria paracortical (cortexul
profund) i devincelule dendritice i celule interdigitate (o
variant morfologic cu prelungiri mai scurte), avnd rol esenial
n prezentarea antigenelor i activarea limfocitelor T. Celulele
Langerhans, celulele cu voal i celulele interdigitate sunt stadii
diferite ale liniei celulelor dendritice.
Limfocitul B este celula efectoare a RIMH, dar are i rolul
de captare i prezentare a antigenului specific. Eficiena sa n
captarea antigenului este maxim, deoarece receptorul
imunoglobulinic leag specific epitopii corespunztori chiar la
concentraii foarte mici, de 1000 de ori mai mici dect cele
necesare prezentrii sale de ctre macrofag sau de ctre celula
dendritic.
64

Limfocitul B recunoate i prezint numai antigenele
moleculare mici (peptide). Probabil c proteinele mari nu le sunt
accesibile. Exist dovezi c antigenul peptidic legat la suprafaa
limfocitului B, prin intermediul receptorului imunoglobulinic
specific, este endocitat, prelucrat n compartimentul acid i
prezentat n asociaie cu moleculele CMH II, pentru a fi
recunoscut de limfocitele T. Limfocitele B exprim nivele relativ
nalte ale moleculelor CMH II. Rolul lor de captare i eventual,
prelucrare a antigenului este semnificativ la contactul secundar cu
antigenul.
Cele mai importante celule, cu funcia de captare i
prelucrare a antigenului sunt macrofagele i celulele dendritice.
Prima treapt a interaciunii antigenului exogen cu CPA
(macrofag, celula dendritic) este legarea nespecific,
necovalent, cu structuri nedeterminate ale suprafeei celulare.
Antigenele din complexele imune sunt recunoscute de CPA prin
intermediul receptorilor pentru Fc i C3.
Dup ce a ptruns n organism, antigenul este repede
nglobat i depozitat n interiorul macrofagului. Scoaterea
antigenului din circulaie are o semnificaie funcional deosebit,
deoarece constituie un depozit din care este eliberat treptat i
stimuleaz imunogeneza. Antigenul liber n organism poate s
induc una din cele dou stri defavorabile pentru reactivitatea
imunitar:
- poate fi eliminat prea rapid din organism, nainte de
stimularea rspunsului imun;
- dozele prea mari de antigen liber sunt defavorabile
reactivitii imunitare, prin blocarea rspunsului limfocitelor.
Starea caracterizat prin incapacitatea de rspuns imun a
organismului se numete paralizie imunologic.
Antigenele moleculare sau particulate cu o bun
imunogenitate sunt reinute parial n macrofag sub o form
rezistent la degradare, pentru perioade mai lungi de timp.
65

Macrofagele modific imunogenitatea antigenelor: dup
legarea de macrofag, cele slab imunogene devin mai imunogene,
iar cele cu imunogenitate ridicat, dup legarea de macrofag i
pierd parial aceast calitate.

Prelucrarea antigenelor
Prelucrarea antigenelor exogene este o etap obligatorie
deoarece limfocitele T (Th i Tc) nu recunosc i nu preiau direct
informaia antigenic nativ. Limfocitele T recunosc numai
informaia antigenic prezentat pe suprafaa CPA. Din punct de
vedere biochimic, prelucrarea semnific deplierea, clivarea
proteinelor i generarea peptidelor, ca rezultat al unei proteolize
pariale. Prelucrarea antigenului exogen de ctre celulele
prezentatoare, parcurge urmtoarele etape: internalizarea
antigenului n veziculele membranare acide; proteoliza parial;
cuplarea cu moleculele CMH; transportul la nivelul membranei
plasmatice.
Gradul prelucrrii antigenului este dependent de natura sa.
Intervalul de prelucrare este de 45-60 minute.
Experienele cu antigen marcat au evideniat c n CPA,
materialul imunogen are dou destinaii: o parte este expus pe
suprafaa celulei i este recunoscut de celulele T, iar o alt parte
este sechestrat n celul, de unde este eliminat activ n mediul
extracelular i este preluat de alte CPA.
Principalul mecanism degradativ care are loc n CPA este
proteoliza lizosomal. Prezentarea antigenelor i asocierea cu
moleculele CMH I nu este sensibil la aciunea substanelor
lizosomotrope alcalinizante.
Proteoliza rapid i extensiv este cauza slabei
imunogeniti a unor antigene (sau chiar a absenei
imunogenitii).
Mecanismele moleculare ale prelucrrii antigenelor sunt
puin cunoscute. n macrofage se produce o digestie selectiv a
66

antigenului, n urma creia o parte din epitopi se pstreaz, dar
cea mai mare parte a antigenului este complet degradat.
Complexitatea antigenului condiioneaz numrul de
peptide cu rol de epitopi, care deriv prin procesul de prelucrare i
care pot fi legate de moleculele CMH. Dac antigenul este o
bacterie, numrul de epitopi este nedeterminat i specificitatea lor
antigenic este variabil, n funcie de complexitatea aparatului
enzimatic hidrolitic al celulei care prelucreaz antigenul.
Nu toate antigenele necesit proteoliza (fragmentarea)
prealabil recunoaterii de ctre celulele T. Uneori este suficient
numai denaturarea (deplierea) proteinelor pentru ca antigenul s
fie prezentat de CPA, chiar tratate cu cloroquin.
Forma sub care limfocitele T recunosc antigenele, depinde
att de natura CPA, dar n special de natura antigenului.
Majoritatea proteinelor sunt rapid endocitate i prelucrate,
dar unele sunt legate de membrana celulei i prezentate n stare
nativ, fr o prelucrare prealabil. Antigenele peptidice mici
(insulina, angiotensina) pot fi recunoscute n form nativ, de
unele subpopulaii de limfocite T, n timp ce altele recunosc
formele prelucrate ale acelorai antigene.
Dimensiunea i configuraia spaial a moleculei de antigen
sunt hotrtoare n ceea ce privete gradul prelucrrii sale, nainte
de a fi prezentat. De regul, moleculele mari necesit prelucrarea
prealabil, iar cele mici sunt prezentate n form nativ.
Forma chimic a antigenului, dup prelucrare, nu este
cunoscut cu certitudine. Foarte probabil, este un polipeptid de
dimensiuni mici (9-20 aminoacizi).
Epitopii antigenelor peptidice exogene sunt expui la
suprafaa CPA, n asociaie cu moleculele CMH clasa II, iar
epitopii antigenelor de origine endogen sunt prezentai n
asociaie cu moleculele CMH clasa I.



67

Rolul moleculelor CMH n prezentarea antigenelor
Moleculele CMH I i II au capacitatea funcional de a lega
i de a expune pe suprafaa celulei, un numr neli-mitat de peptide
diferite. Complexul format de moleculele CMH I sau II i epitopul
peptidic este recunoscut de limfocitele T.
Nu se cunoate modalitatea interaciunii dintre moleculele
CMH i epitopii antigenici. Ar putea fi o interaciune ferm sau
moleculele CMH au numai rolul de suport pentru epitopii
antigenici.
Se accept ideia unei ierarhii a epitopilor cu privire la
ordinea legrii competitive de moleculele CMH, datorit
sensibilitii difereniate la proteaze. Rezult peptide cu afinitate
diferit fa de situsul de legare a moleculelor CMH. Astfel, exist
epitopi dominani, care se asociaz cu mare probabilitate de
moleculele CMH, epitopi subdominani, cu mai puine anse de
asociere cu moleculele CMH i epitopi criptici, care se asociaz
rareori n complexe cu moleculele CMH i care nu devin
accesibili limfocitelor T potenial reactive.

Antigenele exogene sunt prezentate n asociaie cu
moleculele CMH I I
Moleculele CMH II leag peptide derivate din proteinele
exogene endocitate de celule: proteine solubile, proteine ale
capsidei virale, proteine bacteriene sau proteine ale protozoarelor
endocitate de celul.
Antigenele exogene sunt nglobate i prelucrate n
fagolizosomii celulelor prezentatoare de antigen (CPA).
Moleculele CMH II se sintetizeaz n reticulul endoplasmic
granular i sunt modificate post-traducere, n cisternele Golgi.
Cele dou catene ale moleculei sunt reunite prin catena
invariant. Asocierea este meninut pn cnd moleculele CMH
II ajung n sistemul endocitar al celulei. n drumul lor spre
suprafaa celulei, moleculele CMH II ajung prin fuziunea
veziculei transportoare, n compartimentul fagolizosomului ce
68

conine antigenul parial degradat. La acest nivel este eliminat
catena invariant ce reunete catenele i i care ocup situsul
de legare a antigenului. Moleculele CMH II se asociaz cu
peptidul antigenic de 13-25 aminoacizi. Complexul format este
expus la nivelul membranei, unde este recunoscut de limfocitele
TCD
4
. Complexul format este recunoscut de limfocitele TCD
4
.
Moleculele CMH II au funcia fundamental de a stimula
elaborarea rspunsului imun specific fa de antigenele exogene,
prin intermediul limfocitelor TCD
4
. Limfocitele TCD
4
secret IL-
2, IL-4, IL-5, IFN , cu efect stimulator fa de limfocitele Tc i
B.
Asocierea unui peptid nonself cu moleculele CMH II
semnific cererea de ajutor pentru eliminarea antigenului,
materializat n activarea limfocitelor TCD
4
i secreia de
limfochine stimulatoare ale rspunsului imun.
Moleculele CMH II au rol esenial pentru stimularea
rspunsului imun, dar i pentru reglarea intensitii sale.
Interaciunea moleculelor CMH II cu epitopii antigenici nu este
specific.
Deoarece moleculele CMH sunt polimorfe, exist diferene,
uneori importante, ntre organismele outbred ale unei specii de a
rspunde la un antigen. Astfel se explic diferenele individuale de
sensibilitate fa de un agent infecios. Un rspuns imun mai
amplu, este generat de un organism care expune mai muli epitopi
antigenici diferii, asociai cu diferitele variante de molecule CMH
II, comparativ cu un organism care expune mai puine fragmente
antigenice asociate cu 1 sau 2 tipuri de molecule CMH II.

Antigenele endogene sunt prezentate n asociaie cu
moleculele CMH I
Recunoaterea asociat a antigenelor cu moleculele CMH I
sau II are dou semnificaii majore:
- celulele sistemului imunitar interacioneaz cu proteinele
proprii, numai dac acestea sunt asociate cu un determinant
69

antigenic nonself, de origine viral, tumoral sau indus de ageni
chimici;
- recunoaterea antigenului este condiionat de existena
fenomenului de histocompatibilitate, adic celulele care prezint
antigenul i cele care l recunosc (limfocitele Tc i Th) trebuie s
poarte molecule CMH identice, adic celulele care interacioneaz
trebuie s aparin aceluiai organism sau unor organisme genetic
identice(ale aceleiai linii inbred). Acesta este fenomenul de
restricie (limitare) a interaciunilor celulare prin moleculele
CMH.
Moleculele CMH I au rolul de a lega i de a prezenta
proteine self, peptide derivate din catabolismul proteinelor
citosolice, antigene bacteriene sau ale paraziilor intracelulari,
antigene virale sintetizate n celul prin traducerea unui ARNm
viral, antigene tumorale sau antigene a cror sintez a fost indus
de ageni chimici. Dup asocierea cu epitopi antigenici,
moleculele CMH I devin inta atacului limfocitelor TCD
8
.
Limfocitele Tc sunt implicate, n primul rnd, n
recunoaterea i eliminarea celulelor infectate cu virusuri sau a
celor transformate malign. Ambele tipuri de antigene sunt
sintetizate n celul i sunt considerate ca avnd origine endogen.
Evenimentele celulare al cror rezultat este prezentarea
peptidelor, se succed n urmtoarele trepte:
- catabolismul antigenului proteic (n citoplasm)
- transportul peptidului din citosol, n cisternele reticulului
endoplasmic
- asamblarea complexului format din peptid i molecule
CMH I
- transportul complexului la suprafaa celulei.
Antigenele endogene se asociaz cu moleculele CMH I,
chiar n cisternele reticulului endoplasmic granular. La acest nivel,
moleculele CMH II sunt inaccesibile asocierii cu epitopii
antigenici, deoarece catenele i sunt reunite prin catena
invariant.
70

Prezentarea antigenelor endogene, asociate cu moleculele
CMH I nu este sensibil la aciunea agenilor lizosomotropi
alcalinizani (amoniac, cloroquin), dar este sensibil la derivaii
peptidici(di- sau tripeptide aldehidice) care inhib proteasomul.
Proteasomul este un complex proteic multicatalitic, compus din
mai multe subuniti inelare suprapuse, asamblate ntr-o structur
cilindric, n care se produce proteoliza moleculelor proteice
citosolice conjugate cu ubicvitina. Proteasomul este o structur
care controleaz turn-overul proteinelor citosolice, inclusiv al
factorilor de transcriere i al ciclinelor. Ubicvitina este un
polipeptid mic, care este asociat pe cale enzimatic dependent de
ATP, de lizina proteinelor citosolice. Legarea ubicvitinei produce
deplierea proteinei int i asigur recunoaterea de ctre
elementele complexului proteasomic citosolic. Proteinele celulare
modificate dup cuplarea cu ubiquitina, devin sensibile la
proteoliz. Proteoliza are loc n mediul apos al structurii cilindrice
i este independent de ATP. Astfel sunt protejai constituienii
celulari de degradarea necontrolat. Peptidele rezultate n
proteasom sunt foarte rapid degradate n citoplasm. De aceea s-a
presupus c ele se asociaz cu proteinele chaperone, cu rol
protector i de orientare a peptidelor n lumenul reticulului
endoplasmic.
Peptidele rezultate din prelucrarea antigenelor endogene
sunt transportate n reticulul endoplasmic, de o categorie de
proteine transportoare, denumite TAP (proteine transportoare
asociate cu prezentarea antigenului) care folo-sesc energia
rezultat din hidroliza ATP, pentru a transporta prin membrane
diferite proteine, ioni, antibiotice. Molecula TAP este un
heterodimer, format din dou subuniti (TAP
1
i TAP
2
). Fiecare
subunitate are o regiune hidrofob N-terminal transmembranar
i un domeniu C-terminal ce leag ATP. Moleculele TAP au
capacitatea de a transloca peptidele prin membrana RE.
Catenele moleculei CMH I se sintetizeaz separat pe
cisternele RE i odat cu traducerea sunt transportate n RE.
71

Catena H, -2 m i peptidul se asambleaz ntr-un complex, chiar
n cisternele RE sau n compartimentul pregolgian. n cisternele
Golgi, catena H este glicozilat, iar complexul CMH I-peptid este
ancorat n membran i expus la suprafaa celulei. Moleculele
CMH I leag peptide mici, de 8-10 aminoacizi. Specificitatea de
legare este larg. Molecule CMH I identice leag peptide diferite.
Liniile celulare care nu sintetizeaz -2 m, nu exprim
molecule CMH I pe suprafaa lor. Acesta este un exemplu al
funciei de control de calitate pe care l are RE. Moleculele
CMH pliate incorect nu sunt transportate la nivelul membranei, ci
rmn n cisternele RE i sunt degradate. Absena -2 m determin
plierea greit i degradarea catenei mari. Controlul de calitate
este mediat de un set de proteine chaperone, care se asociaz
reversibil cu proteinele pliate incorect i astfel permit corectarea
greelii de pliere.
La nivel membranar, complexul molecular este recunoscut
de limfocitele Tc i rezultatul interaciunii este liza celulei int.
Moleculele CMH I nu disting ntre peptidele self i nonself.
Peptidele asociate cu moleculele CMH I au fost izolate,
fracionate prin HPLC (high-performance liquid chromatography)
i secveniate. Fiecare celul expune pe suprafa , sute de
peptide, cele mai multe fiind proteine citosolice autologe.
Asocierea moleculei CMH I cu un peptid nonself pe
suprafaa celulei, semnific necesitatea distrugerii celulei int.
Dovada n favoarea acestei ipoteze este adus de faptul c, in vivo,
situsul de legare al moleculelor CMH I este ocupat de peptide self,
adic fragmente ale proteinelor proprii, pe care celulele le
capteaz din spaiul interstiial sau le produc n proteasom i le
prezint ca i pe cele nonself.
Dup disocierea peptidului, molecula CMH I goal
expus la suprafaa celulei, este instabil.
Faptul c situsul de legare al moleculelor CMH I este ocupat
de peptide self, este n acord cu teoria supravegherii imune,
conform creia, celulele killer i limfocitele Tc controleaz
72

permanent suprafaa celulelor organismului, pentru a detecta
eventuala apariie a antigenelor tumorale sau virale. Celulele care
exprim pe suprafaa lor molecule nonself, sunt eliminate prompt.
Deoarece celulele prelucreaz i prezint continuu molecule
proprii, celulele sistemului imunitar sunt stimulate permanent.
Limfocitele controleaz calitatea moleculelor CMH I i detecteaz
celulele ce prezint molecule alterate sau molecule nonself.
Indivizii umani deficieni ai moleculelor CMH I, nu par a
avea o inciden crescut a infeciilor virale severe, ceea ce
sugereaz existena i a altor mecanisme de recunoatere a
moleculelor nonself, neasociate cu moleculele CMH I.

Modelul recunoaterii antigenuluide ctre limfocitele T
Recunoaterea antigenului de ctre limfocitele T este
mediat n primul rnd, de receptorul de antigen (RCT).
Secvenele hipervariabile ale lanurilor i formeaz regiunile
determinante de complementaritate (RDC 1 i RDC 2). Buclele
RDC 1 i RDC 2 ale regiunilor variabile (V) i ale RCT,
interacioneaz cu regiunea helical a moleculei CMH, iar cele
dou secvene RDC 3, interacioneaz cu peptidul antigenic.
Interaciunea limfocitului cu celula prezentatoare de antigen
este mediat i de alte molecule.
Limfocitele Tc prezint pe suprafaa lor, markerul CD
8
i
recunosc antigenele asociate cu moleculele CMH I, iar limfocitele
Th prezint markerul CD
4
i recunosc antigenele asociate cu
moleculele CMH II. Moleculele CD
4
i CD
8
sunt proteine
membranare, monomorfe, participante la recunoaterea
complexelor CMH-peptide, de pe suprafaa celulelor int.
Domeniile lor extracelulare, prin secvena aminoacizilor, se
aseamn cu domeniile imunoglobulinelor.
Molecula CD
4
este monomeric i este pliat n 4 domenii
extracelulare, omologe cu ale moleculei de Ig, stabilizate prin
puni S-S.
73

CD
8
este o protein dimeric, iar conformaia sa spaial
prezint un domeniu asemntor domeniului variabil al moleculei
de imunoglobulin.
n procesul recunoaterii antigenului, molecula CD
8
se
asociaz cu domeniul constant -3, al moleculei CMH clasa I, iar
molecula CD
4
se asociaz cu domeniile constante -2 sau -2 ale
moleculei CMH clasa II-a.
Moleculele CD
8
i CD
4
sunt importante nu numai pentru
orientarea limfocitelor spre intele adecvate, dar au i rol n
transducerea semnalului, deoarece cozile lor citosolice leag o
tirozin-kinaz, cu rol esenial n transmiterea semnalului activator
al limfocitului T.
Receptorul de antigen al limfocitelor T recunoate
fragmentele peptidice complexate cu moleculele CMH I sau II.
Pentru fiecare organism, diversitatea moleculelor CMH este
limitat, dar ele leag o larg varietate de peptide scurte (8-9
aminoacizi, pentru moleculele CMH I i circa 14 aminoacizi,
pentru moleculele CMH II). Dei nu este o legare pe baza
specificitii, interaciunea peptidului antigenic cu moleculele
CMH este caracterizat de o afinitate nalt, deoarece se stabilete
cu gruprile NH
2
i COOH de la extremitatea peptidului, restul
secvenei de aminoacizi rmnnd disponibili pentru interaciunea
cu RCT.
Deoarece moleculele CMH I i II leag peptide scurte, epitopii
celulelor T sunt alctuii din secvene peptidice lineare, adic
configuraia epitopilor nu este dependent de conformaia
proteinei native. Deoarece epitopii recunoscui de limfocitele T
sunt peptide scurte, rezult c prelucrarea proteolitic a
antigenelor este o etap obligatorie, care precede interaciunea lor
cu limfocitele T.

74

Tema 9.
Activarea limfocitelor B i T.

Activarea limfocitelor T
Cel puin trei molecule distincte sau complexe moleculare,
fizic independente, ale membranei au rol n transducerea eficient
a semnalului activator al celulei T, fiecare fiind asociat cu o
activitate enzimatic relevant:
- RCT - i complexul CD
3
(--). Partea invariant a
RCT este asociat cu tirozin-chinaza p59
fyn
;
- coreceptorii CD
4
sau CD
8
, asociai cu tirozin-chinaza
p56
lck
;
- CD
45
, cu activitate fosfatazic tirozin-specific.
Limfocitele T mature cu RCT - sunt CD
4
sau CD
8
.
Celulele TCD
4
recunosc fragmentele peptidice legate de
moleculele CMH II, iar celulele TCD
8
recunosc fragmentele
peptidice legate de moleculele CMH I. Aceast specificitate a
condus la sugestia c molecula CD
4
poate s lege molecula CMH
II, iar molecula CD
8
leag molecula CMH I, ambele avnd rol de
coreceptori de antigen.
Coreceptorii CD
4
i CD
8
sunt glicoproteine
transmembranare. Fiecare este asociat cu o molecul de tirozin-
kinaz specific celulei T. n procesul activrii celulei T de ctre
antigen, coreceptorul trebuie s se lege de aceiai molecul CMH
ca i RCT, pentru transducerea optim a semnalului.
CD
4
i CD
8
sunt membre ale suprafamiliei
imunoglobulinelor. Dei ambele au rol de coreceptori i se
asociaz cu aceiai tirozin-kinaz (p56
lck
), nu au omologie
structural.
Studiile de cristalografie cu raze X au artat c domeniul
extern al moleculei CD
4
formeaz o protruzie pe faa lateral a
moleculei, implicat n legarea moleculei CMH II.
Molecula CD
8
este format din dou catene diferite ( i )
i are un singur domeniu de omologie cu molecula de Ig, la
75

captul amino. Acesta este urmat de o secven cu configuraie
nedefinit i cuprinde resturile de cistein care permit legarea
moleculelor n dimeri funcionali. Molecula CD
8
are rol de
coreceptor, participnd la recunoaterea antigenului, prin
asocierea cu domeniul -3 al moleculei CMH I.
Coreceptorii se asociaz fizic cu RCT n timpul activrii
celulei T.
Limfocitele TCD
4
recunosc complexul molecular CMH II-
epitop, expus la suprafaa celulei prezentatoare de antigen (CPA)
i se activeaz. Limfocitul activat secret IL-2, o interleuchin
esenial pentru expansiunea clonal a limfocitelor TCD
4
i
amplificarea rspunsului imun. Amplificarea rspunsului imun
parcurge mai multe etape:
- dup legarea limfocitului TCD
4
de CPA, ultima produce
IL-1;
- stimuleaz limfocitul TCD
4
s produc IL-2. IL-2
acioneaz stimulator asupra celulelor care o produc (bucl
autocrin) i asupra limfocitelor nvecinate, care au aceiai
specificitate a receptorului de antigen (aciune paracrin), efectul
fiind exprimarea intens a receptorilor pentru IL-2 pe suprafaa
limfocitelor stimulate;
- limfocitele TCD
4
activate de IL-2 prolifereaz i genereaz
o populaie de celule imunoreactive, Th1 i Th2, care la rndul lor,
prin intermediul interleuchinelor pe care le secret, au efecte
activatoare asupra compartimentului imunitii celulare sau
stimuleaz activarea i proliferarea limfocitelor B specifice, n
funcie de natura antigenului.
Pentru ca epitopii s fie recunoscui, moleculele CMH
trebuie s expun simultan pe suprafaa celulei, un numr mare de
peptide nonself, pentru un interval suficient, astfel nct s permit
limfocitelor T s controleze calitatea moleculelor CMH ale
fiecrei celule. Faza de activare const n inducerea genelor pentru
sinteza IL-2 i a receptorului de mare afinitate pentru IL-2. n
aceast faz, apoptoza este practic absent. Faza de proliferare a
76

limfocitelor T este iniiat de fixarea IL-2 pe receptorul su. Dup
ce celulele T au parcurs unul sau cteva cicluri celulare i intr n
faza G
1
sau S, devin foarte sensibile la apoptoz. Factorul esenial
al apoptozei este IL-2.
Conceptul controlului feed-back al intensitii rspunsului
imun prin fenomenul apoptozei (reglarea propriocid) s-a nscut
din nevoia de a explica acest nou rol al IL-2, care contrasteaz cu
proprietile sale proliferative. Teoria afirm c IL-2 confer
celulelor T, sensibilitate la apoptoz. Gradul stimulrii antigenice
determin inducerea apoptozei. Dup ncetarea stimulrii
antigenice, sinteza IL-2 i a receptorului su scade. In absena IL-
2, cu rol trofic pentru limfocitele T, se iniiaz apoptoza pasiv.
Invers, dac celulele T intrate n ciclul diviziunii sunt intens
stimulate de antigen, se produce apoptoza activ (indus de
antigen).
Apoptoza pasiv diminu expansiunea populaiei celulelor
T, i o adapteaz la intensitatea unui rspuns fiziologic. Apoptoza
activ este indus numai de activarea RCT. Ca rezultat al acestor
dou forme de apoptoz, rspunsul feed-back elimin celulele T
dac antigenul i IL-2 sunt n exces sau n deficit.
O parte a celulelor T poate s scape morii apoptotice pasive
sau active i s devin limfocite T de memorie, cu via lung.

Activarea limfocitelor B
Spre deosebire de limfocitele T care recunosc numai
antigenul modificat, prelucrat i prezentat n asociaie cu
moleculele CMH, limfocitele B recunosc att forma prelucrat ct
i forma nativ, nemodificat a antigenului solubil.
Contactul limfocitelor B cu un antigen timo-dependent,
declaneaz diferenierea limfocitelor B pe dou ci:
- calea extrafolicular, rezultatul fiind sinteza timpurie a
anticorpilor ;
- calea centrilor germinativi, care duce la memorie
imunologic i genereaz plasmocite.
77

n splin, n absena cooperrii cu limfocitele Th, consecina
este lipsa de rspuns imun (anergia). Dac are loc cooperarea T-B,
se formeaz focare proliferative oligoclonale. Din focare, unele
limfocite B migreaz n centrul germinativ i dobndesc memoria
imunitar.
Limfocitele B recunosc direct antigenele timo-independente
i se activeaz fr s necesite cooperarea limfocitelor T.
Dup activare ntr-un centru germinativ, de ctre un antigen
T-independent sau dup interaciuni cu celule Th, celulele B mici
n repaus sunt convertite la limfoblaste mari i ulterior acestea
evolueaz fie spre plasmocite productoare de anticorpi, fie se
difereniaz n celule mici de memorie. Procesul de activare n
centrul germinativ este nsoit de generarea mutaiilor n regiunea
V i comutarea de la IgM, la IgG, IgA sau IgE. Mutaiile mresc
diversitatea situsurilor de legare a antigenului. Dac mutaia
produce un situs nefuncional, celula activeaz programul morii
genetice (apoptoza). Aceste modaliti de difereniere sunt
influenate de semnale co-stimulatoare i de citochine (IL-2, 4, 6,
10, TGFB).
Limfocitul B leag specific antigenul n configuraia nativ,
prin intermediul receptorului imunoglobulinic de membran i
probabil l ncorporeaz sub forma complexului antigen-anticorp.
Importana limfocitelor B ca prezentatoare de antigen este
redus n cursul rspunsului imun primar, dar devin foarte
importante n cursul rspunsului imun secundar, n special n
cazul n care doza stimulant de antigen este foarte mic.
n cursul stimulrii antigenice secundare, limfocitele B de
memorie, a cror populaie este numeroas, nglobeaz specific
antigenul prin intermediul receptorilor imunoglobulinici
(endocitoz mediat de receptori sau prin pinocitoz nespecific).
Soarta antigenului recunoscut specific de limfocitele B nu
este cunoscut. Antigenul ar rmne n compartimentul vezicular
i nu ar fi amestecat cu proteinele citoplasmatice. Proteinele
internalizate, probabil sunt prelucrate de proteazele lizosomale i
78

se elibereaz fragmentele peptidice care se asociaz cu moleculele
CMH II. Complexele peptid-molecule CMH II sunt transportate la
suprafaa celulelor B, unde interacioneaz cu RCT specific al
celulelor Th. Interaciunea peptid-RCT, determin eliberarea
citochinelor din limfocitul Th, la rndul lor, cu rol stimulator
asupra proliferrii i maturrii celulelor B. Pe de alt parte,
antigenul nativ, fr s fie internalizat i prelucrat, ar putea
declana stimularea limfocitelor B de memorie. Din aceast cauz,
rspunsul imun va fi specific fa de epitopii conformaionali ai
moleculei native, n configuraia sa spaial.
Mecanismul molecular al activrii limfocitelor B este greu
de studiat, datorit faptului c proporia limfocitelor stimulate de
antigenul specific este mic, chiar i dup stimularea secundar.
Din acest motiv, activarea limfocitelor s-a explicat prin
extrapolarea rezultatelor obinute dup activarea policlonal
nespecific, in vitro, consecutiv legrii moleculelor de lectine, cu
efect mitogen asupra limfocitelor B. Receptorii de lectine ai
limfocitelor B nu s-au identificat.
Receptorul limfocitelor B este evaluat la 10
8
-10
9

specificiti de legare. Datorit numrului foarte mare de
specificiti de legare antigenic a limfocitelor B, organismul
prezint o mare diversitate de imunoglobuline serice (10000000
tipuri diferite), adic un numr de 1000 de ori mai mare dect
numrul proteinelor structurale, enzimatice i hormonale din
organism.

Stimularea nespecific a limfocitelor B
Proliferarea limfocitelor B este indus nu numai de
antigenul specific i de superantigene, ci de orice ligand care
leag ncruciat receptorii de antigen i formeaz puni
intermoleculare. Legarea ncruciat a imunoglobulinelor de
suprafa (probabil nu numai a lor, ci i a altor molecule
membranare) declaneaz semnalul pentru proliferare, dar nu i
pentru diferenierea lor n plasmocite.
79

Stimularea limfocitului B este, uneori, rezultatul activrii
receptorilor membranari neimunoglobulinici, sub aciunea
diferitelor mitogene. Mitogenele sunt antigene timo-independente.
Cele mai cunoscute mitogene sunt lectineledin seminele
plantelor. Din punct de vedere chimic, mitogenele sunt
glicoproteine cu specificitate de legare pentru glucidele de pe
suprafaa celulelor.
Lectinele sunt produse de toate organismele, dar unele tipuri
de celule produc cantiti mari de lectine.
Avnd o distribuie ubicvitar, lectinele ndeplinesc funcii
biologice importante, fiind molecule de recunoatere n diferite
procese biologice:
- eliminarea glicoproteinelor din circulaie
- aderena agenilor infecioi de celulele gazd sensibile
- recrutarea leucocitelor la situsul inflamator
- medierea interaciunilor celulelor imunitare.

Cooperri celulare n elaborarea rspunsului imun
De cele mai multe ori, sinteza anticorpilor dup stimularea
antigenic, este rezultatul interaciunilor stimulatoare ale
limfocitelor B convenionale (B
2
), cu limfocitele Th. Un antigen
macromolecular poate fi considerat ca un complex format din
carrier i determinani haptenici (epitopi), recunoscui de
limfocitele Th i B.
Antigenele care pentru stimularea rspunsului imun necesit
cooperarea celor dou populaii de limfocite, aparin grupului larg
al antigenelor timo-dependente. Ele sunt reprezentate de
proteinele heterologe, de polipeptidele sintetice, de hematiile
heterologe, de flagelina monomer etc. Cele mai multe antigene
moleculare, n special de natur proteic sunt timo-dependente.
Cooperri celulare T-B-macrofag. Pentru declanarea
rspunsului imun, antigenele timo-dependente necesit cooperarea
limfocitelor Th, cooperare supus restriciei moleculelor CMH.
Aceste antigene se comport ca univalente, n raport cu
80

specificitatea antigenic a fiecrui determinant i de aceea, n
absena cooperrii celulare, ele sunt ineficiente n stimularea
rspunsului imun. Pe de alt parte, antigenele timo-dependente pot
fi prea repede degradate de celulele fagocitare. Nu au activitate
mitogenic, iar dac se leag de receptorii limfocitelor B, aceste
antigene se comport ca haptene i nu declaneaz diferenierea
celulelor B.
De cele mai multe ori, limfocitele cooperante Th i B
recunosc epitopi diferii ai aceleiai molecule de antigen solubil
nativ, neprelucrat, dar expus pe suprafaa limfocitului B.
Limfocitele B recunosc epitopi conformaionali ai antigenelor
proteice mici, iar limfocitele Th recunosc epitopi secveniali, de
10-20 aminoacizi. Cele dou celule cooperante ader una de alta.
Dup ce recunoate antigenul, celula Th activat secret IL-2 n
spaiul intercelular ngust, cu rol declanator al stimulrii
limfocitului B. Clona de limfocite B, cu receptori specifici pentru
epitopul antigenic, prolifereaz. Astfel, se produce fenomenul
expansiunii clonale.
Limfocitele Th i B coopereaz i n cazul n care recunosc
epitopi diferii ai unui antigen, asociai cu moleculele CMH II, pe
suprafaa unei CPA.

Activarea limfocitelor B,
indus de antigenele timo-independente
Antigenele timo-independente se numesc astfel, deoarece
declaneaz rspunsul imun prin activarea direct a limfocitelor B,
fr s necesite cooperarea limfocitelor Th. Antigenele timo-
independente sunt molecule mari, neproteice: polizaharidul
capsular de Streptococcus, ficolul (polimer de sucroz), dextran-
sulfatul, LPS ale bacteriilor Gram negative, levanii (polimeri de
fructoz), polivinil-pirolidona.
Antigenele timo-independente au trei proprieti comune:
- au secvene repetitive n structura lor chimic. Aceast
condiie nu este suficient i nici definitorie pentru calitatea de
81

antigen timo-independednt, deoarece polimerii sintetici ai L-
aminoacizilor, au secvene repetitive, dar sunt antigene timo-
dependente;
- au o structur tridimensional care favorizeaz
interaciunea direct cu receptorii de antigen ai limfocitelor B;
- sunt molecule rezistente la aciunea enzimelor degradative
i persist ndelung n organism.
Limfocitele T nu coopereaz la elaborarea rspunsului imun
indus de antigenele polizaharidice, deoarece acestea sunt
rezistente la procesele degradative i nu furnizeaz oligozaharide
care s se poat asocia cu moleculele CMH II. Fragmentele
moleculare eventual rezultate din procese degradative, se leag cu
afinitate mic de proteine i nu se asociaz cu moleculele CMH II.
Cele dou categorii funcionale de antigene nu sunt strict
delimitate n ceea ce privete mecanismul activrii rspunsului
imun. Dup degradarea structurilor repetitive, antigenele timo-
independente devin timo-dependente. De exemplu,
glucagonul(antigen timo-dependent), dup clivare cu tripsin,
elibereaz doi determinani antigenici: unul corespunztor
captului N-terminal, timo-independent i cel corespunztor
captului C-terminal, timo-dependent(stimulator al limfocitelor
Th).

82

Tema 10.
Dinamica rspunsului imun mediat humoral. Imunitatea
mediat celular.

Dinamica rspunsului imun mediat humoral

n serul normal, cantitatea total de imunoglobuline este de
10 mg/ml (circa 5 x 10
16
molecule).
nainte de imunizare, anticorpii serici specifici fa de un
antigen dat, sunt sub nivelul detectabil prin metodele clasice.
Rspusul imun generat dup contactul primar al
organismului cu antigenul constituie rspunsul imun primar, n a
crui dinamic se disting trei faze:
- faza de laten
- faza de cretere a titrului anticorpilor
- faza de scdere a titrului anticorpilor serici.
Faza de laten este intervalul cuprins ntre momentul
stimulrii antigenice i nceputul creterii titrului anticorpilor
serici. Durata sa este foarte variabil n funcie de natura
antigenului (de exemplu, 2-3 zile pentru hematiile de berbec i 20
de zile pentru toxina difteric), de doza de antigen administrat,
de calea de administrare (subcutan, intramuscular,
intravenoas), de modul de administrare (cu sau fr adjuvant).
Latena este mai scurt pentru antigenele corpusculare.
Perioada de laten este necesar expansiunii clonale. La contactul
primar al sistemului imunitar cu antigenul, n organism se gsete
o populaie numeric restrns de limfocite care recunosc specific
antigenul. In perioada de laten, clona de limfocite activat
specific, prolifereaz intens (cu o succesiune de circa 8 generaii
celulare) i va produce o populaie de celule, corespunztoare
numeric reaciei de aprare a organismului.
Faza de cretere a titrului anticorpilor serici ncepe la
sfritul perioadei de laten. Titrul anticorpilor crete cu o rat
exponenial. Durata sa este foarte variabil: fa de hematiile de
83

berbec, titrul maxim al anticorpilor este atins la 4-5 zile, iar al
anticorpilor anti-toxin difteric, la circa 90 de zile. Titrul rmne
maxim (n platou), cteva zile, dup care ncepe s scad.
Faza de scdere a titrului anticorpilor ncepe curnd dup
atingerea valorii maxime. Rata scderii depinde de rata sintezei,
de rata degradrii anticorpilor, dar i de cantitatea de antigen
disponibil, care leag anticorpii n complexe, determinnd
scderea titrului lor. Titrul IgG scade cu 7%/ zi, IgA cu 25%/ zi,
IgM cu 18%/zi. La 30-40 de zile, titrul anticorpilor poate deveni
nedectabil. n fazele de cretere i de scdere a titrului, anticorpii
sunt detectabili prin reacii secundare in vitro, de aglutinare i de
precipitare.
n perioada de debut a rspunsului imun primar se
sintetizeaz IgM. Dup cteva zile se detecteaz IgG, care atinge
un titru maxim mai nalt dect IgM. Titrul IgM ncepe s scad,
nainte ca titrul IgG s ating valoarea maxim. La nivelul maxim
al titrului anticorpilor, IgG este de circa 10 ori mai concentrat
dect IgM, ceea ce denot c dup activare, dei majoritatea
limfocitelor B (circa 90%) au ca receptor de antigen molecula de
IgM, dup activare comut sinteza de la izotipul IgM la izotipul
IgG.
Unele limfocite ale clonelor n expansiune, nu se
difereniaz n plasmocite, ci sintetizeaz molecule de
imunoglobulin care rmn asociate membranei citoplasmatice. n
tehnica hemolizei localizate n gel, aceste celule nu produc plaje
de liz. Ele constituie substratul celular al memoriei imunitare.
Rspunsul imun are caracter adaptativ i se caracterizeaz
prin trei trsturi eseniale (care lipsesc reaciilor de aprare
nespecifice, nscute):
- specificitatea (anticorpii se combin cu antigenul inductor)
- diversitatea izotipic i a situsului de combinare
- memoria (pstrarea memoriei experienei contactului cu
antigenul).
84

Diversitatea. Moleculele de anticorpi sunt foarte heterogene
n ceea ce privete izotipul (IgG, A, M, E). IgM dispare relativ
repede, dar IgG i IgA persist la titruri sczute, nedectabile prin
metodele obinuite, pentru perioade variabile (sptmni, ani).
Anticorpii sunt heterogeni din punctul de vedere al specificitii
de legare cu diferii epitopi ai antigenului inductor.
Anticorpii rspunsului imun primar (IgM i IgG), n general,
au afinitate sczut, dar aviditatea lor este mare.
Afinitatea anticorpilor msoar fora de legare dintre un
epitop i situsul de combinare al anticorpului specific. Afinitatea
este rezultanta forelor de atracie (legturi de H, fore
electrostatice, fore van der Waals, legturi hidrofobe), dintre cele
dou grupri reactante.
Aviditatea msoar fora rezultant a afinitii dintre epitopii
multipli i paratopii complementari i este consecina faptului c
cele mai multe antigene sunt mozaicuri de epitopi. Complexele
antigen-anticorp cu IgM au aviditate mare, deoarece anticorpul
este decavalent.

Rspunsul imun humoral secundar
Rspunsul imun secundar este expresia memoriei imunitare.
Memoria definete capacitatea unui organism de a elabora un
rspuns imun mai eficient, adic mai rapid, dar n special mai
intens, dup contactul secundar cu antigenul.
Rspunsul imun secundar fa de antigenele timo-
independente este comparabil cu rspunsul imun primar:
- dup stimularea secundar, titrul anticorpilor nu crete
semnificativ
- se sintetizeaz predominant IgM
- nu se produce comutarea sintezei la IgG
- memoria imunitar este slab exprimat.
Rspunsul imun secundar este indus de antigenele timo-
dependente i se caracterizeaz printr-o laten mai scurt,
85

creterea rapid a titrului anticorpilor, cu un maxim mult mai nalt
dect n rspunsul imun primar.
Doza de antigen inductoare a rspunsului imun secundar
este mult mai mic, iar timpul necesar dublrii titrului este de
ordinul orelor. Iniial se sintetizeaz IgM, fr o perioad evident
de laten. Sinteza IgG este de asemenea accelerat. Titrul maxim
al IgG este de cteva ori mai mare dect n rspunsul imun primar
i rmne ridicat o perioad mult mai lung de timp.
Din punctul de vedere al evenimentelor celulare, la cteva
zile dup iniierea rspunsului imun secundar, limfocitele B de
memorie, activate, migreaz n mduva osoas i se matureaz n
plasmocite. Mduva osoas este un sediu major al rspunsului
imun specific i o surs major de imunoglobuline. In rspunsul
imun secundar, cea mai mare parte a imunoglobulinelor se
sintetizeaz n mduva osoas. In timp ce esutul limfoid periferic
rspunde rapid dup stimularea antigenic, dar numai pentru o
perioad scurt, mduva osoas rspunde lent, dar sinteza de
anticorpi este masiv i de lung durat, fa de un antigen care
stimuleaz repetat.
Trsturile distinctive ale rspunsului imun secundar sunt:
a) maturarea afinitii anticorpilor;
b) comutarea izotipului la sinteza IgG.
Maturarea afinitii anticorpilor se explic prin aceea c pe
parcursul diferenierii proliferative a limfocitelor B, se produc
mutaii somatice ale secvenei regiunii V, prin substituii de
nucleotide i prin selecia mediat de antigen, a clonelor de
limfocite cu afinitate mare de legare a epitopilor complementari.
La om, hipermutaia are loc n prezena antigenului, n centrii
germinativi, singurul situs n care antigenul este reinut pentru luni
sau ani, asociat cu celulele. Antigenul este sechestrat pe suprafaa
celulelor dendritice foliculare, care l pstreaz sub forma
complexelor antigen-anticorp, n proximitatea limfocitelor B.
Consecutiv mutaiei somatice, se sintetizeaz anticorpi cu afinitate
mai mare, deoarece, treptat, crete numrul limfocitelor B cu
86

mutaii care confer afinitate mai mare de legare a anticorpilor cu
antigenul. Celulele B care au suferit mutaii nefuncionale, mor
prin apoptoz.
Mutaiile sunt mai ales punctiforme, cu foarte rare deleii
sau inserii a nucleotidelor unice.
Sinteza anticorpilor cu afinitate nalt are dou consecine
practice importante:
- complexele antigen-anticorp sunt greu disociabile i se
elimin mai rapid din mediul intern;
- anticorpii dau reacii ncruciate cu antigenele nrudite.

Imunitatea mediat celular

Rspunsul imun mediat celular s-a evideniat nainte de
descoperirea diferenelor funcionale dintre limfocitele T i B,
odat cu observaia c unele antigene induc reacii inflamatorii a
cror intensitate nu este corelat cu titrul anticorpilor serici. La
indivizii la care anticorpii serici nu sunt detectabili, pot fi produse
reacii de hipersensibilitate ntrziat, ca manifestri directe ale
rspunsului imun mediat celular.
n organism, imunitatea mediat celular ndeplinete
urmtoarele funcii:
- protecia fa de infeciile bacteriene cu localizare
intracelular, fa de infeciile fungice, virale i cele produse de
protozoare;
- rezistena fa de multe tipuri de celule tumorale;
- mediator al proceselor inflamatorii asociate cu diferite
procese infecioase;
- respingerea alogrefelor.
n toate aceste cazuri, reacia imun mediat celular se
declaneaz nainte de sinteza anticorpilor.
Rspunsul imun mediat celular este consecutiv recunoaterii
unei structuri antigenice pe suprafaa unei celule int, de ctre
limfocitul citotoxic TCD
4
sau TCD
8
, ori de ctre celulele NK sau
87

K, cu potenial litic natural. n general, limfocitele TCD
4
recunosc
antigenele prelucrate, sub forma fragmentelor peptidice, pe
suprafaa celulelor specializate (macrofage), n asociaie cu
moleculele CMH II.
Limfocitele TCD
8
recunosc antigenele prezentate pe
suprafaa celulelor int, n asociaie cu moleculele CMH I. Ele au
dimensiuni mici i recunosc celulele proprii infectate cu virusuri
sau malignizate, dar i transplantele alogenice sau xenogenice.
Limfocitele TCD
8
produc efecte citotoxice asupra celulei int, att
in vivo ct

i in vitro.
Procesul morii celulare sub aciunea limfocitelor Tc
specifice, in vitro, se desfoar n trei stadii:
- stadiul de recunoatere
- programarea pentru liz
- dezintegrarea celulei int.
Limfocitul Tc recunoate antigenul de pe suprafaa celulei
int, prin intermediul receptorului de antigen.
Dezintegrarea celulei int se caracterizeaz prin apariia
leziunilor membranare i dureaz circa 100 minute. Este un proces
dependent de temperatur i nu necesit prezena limfocitului Tc,
dei n prezena sa procesul este accelerat.
Dup contactul cu o celul int, limfocitul Tc se deplaseaz
pentru a explora alte celule. Procesul de recunoatere a
antigenului este limitat (restrictiv) de identitatea moleculelor
CMH I.
Limfocitul Tc este rezistent la aciunea litic a proteinelor
proprii, deoarece granzimele sunt sintetizate ca prepropeptide.
Dup clivajul peptidelor leader, moleculele sunt transportate prin
cisternele golgiene pn la granulele omologe lizosomilor. Pentru
liza unei celule int, limfocitul Tc elibereaz 10% din coninutul
su toxic.


88

Tema 11.
Reaciile de hipersensibilitate.

De cele mai multe ori, n special n procesele infecioase,
reaciile imunitare au o finalitate benefic, avnd un rol
determinant n eliminarea agenilor patogeni. Uneori, dup
contactul cu antigenele (n special moleculare), activarea
funciei imunitare are rol prejudiciant, defavorabil asupra
organismului, deoarece rspunsul imun se instituie drept cauz
i mecanism pentru producerea diferitelor maladii (alergii, boli
autoimune).
Reaciile Ag-Ac in vivo, cu consecine defavorabile
pentru organism, fac obiectul de studiu al unui domeniu bine
conturat, denumit Imunopatologie.
Activarea neadecvat a funciei imunitare determin dou
categorii de manifestri clinice:
a) strile de hipersensibilitate
b) maladiile autoimune
Diminuarea activitii sistemului imunitar, genereaz o
categorie special de manifestri clinice, cunoscute sub
denumirea generic de imunodeficiene. Ele pot fi
nscute(primare) sau dobndite (secundare).
Imunopatologia studiaz reactivitatea funciei imunitare
n strile neoplazice, reactivitatea consecutiv transplantului
de esuturi i organe, n maladiile infecioase virale,
bacteriene, fungice i n maladiile parazitare.

Strile (reaciile) de hipersensibilitate
Strile de hipersensibilitate sunt reacii teriare,
consecutive reaciilor Ag-Ac in vivo. Ele sunt o consecin a
faptului c procesul de imunizare dup contactul primar cu
antigenul i generarea efectorilor imunitari (anticorpi i
limfocite efectoare) nu confer totdeauna o stare favorabil, de
rezisten a organismului. Contactul primar cu antigenul
89

creeaz, uneori,o stare de sensibilizare fa de antigenul
respectiv. Sensibilizarea este o stare fiziologic duntoare
organismului i se manifest, n special dup contactul
organismului cu antigene proteice (din ou, din ser), cu
antigenele din polen i mai rar dup contactul cu antigenele
corpusculare (hematii de berbec). La contactul secundar cu
antigenul sensibilizant, organismul rspunde prin strile
patologice de hipersensibilitate.
Strile de hipersensibilitate sunt consecina unui rspuns
de intensitate prea mare sau a unui rspuns imun neadecvat,
care st la originea leziunilor tisulare. Echivalentul termenului
de hipersensibilitate, folosit n mod curent, este cel de alergie
(allos, ergon = alt energie).
Termenul de alergie a fost introdus de von Pirquet (1906)
i semnific o reacie imunitar care se exprim cu energie
diferit de cea normal, dup expunerea secundar la un
antigen. Ambele denumiri se refer la o reactivitate imunitar
de intensitate anormal crescut, fa de un antigen. In sens
tiinific, noiunea de alergie include toate manifestrile care
decurg din reactivitatea imunitar, cu o alt energie dect cea
fiziologic: reaciile hiperergice, hipoergice i anergice.
n mod curent, alergia se definete ca o stare de
hipersensibilitate, ce rezult din expunerea la un alergen i se
distinge prin supraproducia componentelor imunitare.

Clasificarea strilor de hipersensibilitate
Strile de hipersensibilitate au fost clasificate n raport cu
promptitudinea cu care se manifest:
- reaciile de hipersensibilitate imediat au o dinamic
rapid. Se declaneaz n cteva secunde sau minute de la
contactul secundar cu alergenul i diminu rapid, n cteva ore,
fr semne vizibile, cu excepia celor foarte grave. esutul
suport al reaciei este diferit de la o specie la alta. Aproape
totdeauna va rezulta distrugerea celulei int. Reaciile imediate
90

se desfoar n esuturi vascularizate i, de obicei, se
manifest local, dar pot produce i efecte sistemice.
Hipersensibilitatea imediat este cea mai rspndit dezordine
imunitar la om. Este cea mai frecvent maladie cronic, ce
afecteaz circa 25% din populaie n rile dezvoltate, cu
severitate variabil, de la o simpl iritare, pn la periclitarea
vieii;
- reaciile de hipersensibilitate subacut sunt acelea care
ncep s se manifeste dup 1-3 ore de la contactul secundar cu
antigenul i nceteaz dup 10-15 ore. Sunt mediate de IgG sau
IgM;
- reaciile de hipersensibilitate ntrziat se evideniaz la
1-2 zile dup contactul secundar cu alergenul. Persist un
interval de cteva zile, pn la cteva sptmni. Aceste reacii
sunt mediate de limfocitele T i de macrofage. Nu sunt
dependente de factori humorali circulani i de aceea se pot
produce i ntr-un esut nevascularizat. Singura condiie este ca
esutul s fie situat n apropiere de sistemul vascular, pentru ca
limfocitele i macrofagele s poat migra spre locul unde a fost
injectat antigenul.
Reaciile de hipersensibilitate imediat i ntrziat se
deosebesc prin urmtoarele trsturi:
- mecanismul inducerii (humoral sau celular)
- dinamica desfurrii n timp
- particularitile manifestrilor patologice
- posibilitatea combaterii.
Gell i Coombs au definit 4 tipuri de reacii de
hipersensibilitate:
- reacii de tip I: reaciile de anafilaxie (anafilaxia
generalizat, reaciile de anafilaxie local, denumite i stri
atopice: astmul bronic alergic, febra de fn, urticaria, reacia
Arthus, maladia serului).
- reacii de tip II: reacii de citotoxicitate mediate de
anticorpi
91

- reacii de tip III: reaciile de hipersensibilitate induse de
complexele imune
- reacii de tip IV: reaciile de hipersensibilitate
ntrziat, mediate de limfocitele T(reacia la tuberculin,
brucelin, lepromin etc; dermatitele de contact, reacia de
respingere a grefei).
Reaciile de tip I, II i III sunt mediate de anticorpi, iar
cele de tip IV sunt mediate de celule.
Dovezi pentru natura imunitar a reaciilor de
hipersensibiltate:
- reaciile de hipersensibilitate necesit stimularea
prealabil (sensibilizarea) organismului uman sau animal cu
antigenul inductor (alergenul);
- ntre momentul contactului cu doza sensibilizant i
momentul administrrii dozei declanatoare este necesar o
perioad de timp (5-10 zile), pentru sinteza efectorilor reaciei
(anticorpi) sau pentru expansiunea clonelor de limfocite. Dup
acest interval, organismul devine sensibil la declanarea strii
de hipersensibilitate, numai la contactul cu acelai alergen care
a creat starea de sensibilizare sau cu un antigen nrudit, care d
reacie serologic ncruciat cu alergenul inductor. Intre
antigenul sensibilizant, cel declanator i starea de
hipersensibilitate este o relaie specific;
- organismele sensibilizate prezint un rspuns imun de
tip humoral sau celular. Starea de hipersensibilitate este
mediat de efectorii rspunsului imun;
- reaciile de hipersensibilitate imediat se transfer prin
ser de la un organism hipersensibil la unul sntos. Pentru ca
reacia de hipersensibilitate s se manifeste, serul trebuie s se
injecteze ntr-un esut vascularizat. Reaciile de
hipersensibilitate ntrziat se transfer prin intermediul
limfocitelor viabile.


92

Reaciile de hipersensibilitate imediat de tip I

Reaciile de hipersensibilitate de tip I, denumite i reacii
anafilactice au cea mai mare frecven i se manifest foarte
diferit, att n ceea ce privete intensitatea, ct i a organului
int al reactivitii.
Declanatorii
Antigenele care induc manifestrile reaciilor anafilactice
se numesc alergene. Ele se gsesc n polenul unor plante, n
praful de cas, n veninul insectelor sau n produse alimentare.
Alergenele sunt un set de antigene, stimulatoare ale sintezei de
IgE. Natura lor chimic este foarte heterogen. Un studiu
german recent, relev c organismul uman vine n contact cu
circa 14000 de substane chimice: unele sunt substane
alimentare, altele sunt ingerate odat cu alimentele, fiind
adugate n procesul industrial al prelucrrii. O categorie larg
o formeaz substanele poluante. Din punct de vedere chimic,
alergenele sunt glicoproteine i polizaharide de origine
vegetal sau animal sau molecule mici, cu rol de haptene.
Haptenele sunt molecule organice sau anorganice, cu
greutate mic, insuficient pentru a fi antigene, dar devin
alergene dup cuplarea lor cu macromoleculele tisulare. De
cele mai multe ori, haptenele alergice sunt substane de uz
farmaceutic, de 500-1000 D. Dup legarea covalent
ireversibil cu proteinele serice, rezult un conjugat hapten-
protein, cu specificitate antigenic modificat i adeseori
alergic. Toate medicamentele n stare nativ, dar i derivaii lor
de degradare parial pot s se comporte ca haptene i s
devin alergene.
Intensitatea reaciilor de hipersensibilitate este
dependent de calea de ptrundere n organism, de doz, de
frecvena expunerii i de caracteristicile moleculare ale
alergenului. Cel mai adesea, alergenele se clasific n funcie
93

de calea de ptrundere n organism. In raport cu calea de
ptrundere a alergenelor, se disting:
- alergene inhalate
- alergene ingerate
- alergene inoculate
Alergenele inhalate sunt glicoproteine din polen, din
fungi, din praful animalelor de cas. Greutatea molecular nu
depete 50 kD, deoarece moleculele mai mari nu strbat
membranele mucoase ale tractului respirator. Un alergen
inhalat poate determina simptome respiratorii: rinit, astm.
Crizele se produc numai n prezena alergenului. Unele
alergene sunt sezoniere (polen), altele sunt perene (praful de
cas).
Polenul este, din punct de vedere cantitativ, cea mai
important surs de alergene. Plantele din familiile Gramineae,
Compozitae, Betulaceae, Fagaceae produc polen alergic. Toate
polenurile alergice provin de la plante polenizate de vnt
(anemofile). Ele produc cantiti mult mai mari de polen dect
plantele entomofile i n perioada nfloririi l elibereaz n
atmosfer. Alergenele din polen sunt glicoproteine nrudite
chimic i dau reacii ncruciate. Serul imun de iepure, fa de
un alergen din polen precipit o diversitate de alergene
polenice.
Sporii fungilor se gsesc n aer, n cantitate de circa 5 ori
mai mare dect granulele de polen, dar produc mai puine stri
alergice. In regiunile temperate, numrul sporilor fungici este
maxim n timpul verii i scade n sezonul rece. Alergiile sunt
produse de sporii a peste 80 de genuri de fungi: Alternaria,
Penicillium, Aspergillus. Singura substan alergic de origine
fungic, izolat n stare pur, este penicilina.
Cantitile de alergene care ptrund pe cale respiratorie, sunt
foarte mici: sub 1 g/an.
Reaciile alergice la alergenele fungice apar la 30 de
minute de la expunere, iar cele toxice, la 6-8 ore dup ingestie.
94

Reaciile toxice nu au substrat imunologic. Micotoxinele au
greutate molecular mic (sub 1 kD) i pot fi eliminate din
extractele de alergene fungice, prin dializ.
Cele mai multe particule inhalate (mai mari de 10 m), ca
de exemplu, polenul i sporii mari sunt depozitate n nazofaringe
i sunt asociate cu manifestri locale, nazale i/sau oculare,
denumite generic febr de fn. Particulele mai mici de 10 m
(dar n special cele mai mici de 5 m) sunt antrenate cu curentul
de aer inspirat, n cile inferioare, unde reaciile alergice tind s se
manifeste sub form de astm. Sporii fungici difer ca dimensiuni
i determin reacii alergice ale tractului respirator superior i
inferior.
Alergenele ingerate se gsesc n compoziia unor
alimente: n ou, ciocolat, cpuni, ciree, uleiul de ficat de
pete, n seminele de Glycine max (soia), n fina unor cereale
(gru, orz), n seminele de Arachys hypogea (alun de pmnt)
etc. La copii, laptele de vac i soia sunt cauzele majore ale
reaciilor alergice, urmate de cereale, ou i pete. Vrsta
manifestrilor este variabil: dup primele zile de via(fa de
laptele de vac), pn la doi ani. La 90% din cazuri, intolerana
dispare dup trei ani. Cele mai comune manifestri sunt voma,
diareea, colicile abdominale, ce apar ntr-un interval variabil,
de la cteva minute, pn la 1-2 ore dup ingestie. Alergia la
laptele de vac i la pete este mai frecvent la populaiile care
consum cantiti mari ale acestor produse.
Alergenele alimentare traverseaz lumenul intestinal, la
nivelul mucoaselor digestive. Bariera mucoasei
gastrointestinale este expus la un grup heterogen de antigene.
Experienele cu molecule marcate cu peroxidaz de hrean sau
cu feritin, au evideniat c unele antigene intacte i fragmente
de antigene particulate din tubul digestiv, dobndesc accesul la
esuturile limfoide ale gazdei, n special la persoanele cu deficit
al sintezei de IgA. Antigenele ce ajung n contact cu structurile
limfoide ale mucoaselor, stimuleaz rspunsul imun al gazdei.
95

Penetrarea antigenelor la nivelul tractului digestiv se face
pe dou ci:
- prin endocitoz de ctre celulele intestinale absorbante,
la polul luminal. Se formeaz fagosomi, n interiorul crora se
produce digestia materialului endocitat, dar cantiti mici rmn
nedigerate i sunt exocitate n spaiul extracelular, la polul
bazal. Strile de hipo- sau aclorhidrie favorizeaz tranzitul
proteinelor prin mucoasa intestinal.
- ptrunderea antigenelor alimentare la nivelul celulelor
epiteliale M, ce acoper plcile Peyer, foarte numeroase n
regiunea distal a intestinului subire. Aceste celule
funcioneaz ca adevrate sonde de antigen, adic au
capacitatea de a ngloba antigenele derivate n special din
microorganisme i ntr-o msur mai mic, antigene de origine
alimentar.
Celulele M reprezint un sistem de avertizare timpurie
pentru sistemul imunitar al organismului. Ele sunt acoperite de un
strat subire de mucus, au microvili scuri, dar au capacitatea de a
endocita antigene luminale, prin mecanismul pinocitozei. Celulele
M sunt difereniate, conin lizosomi i nu degradeaz antigenele
pe care le pinociteaz, dar le transfer macrofagelor din foliculii
subiaceni.
Dei au evoluat ca o modalitate strategic protectoare fa
de antigenele luminale, totui celulele M reprezint poarta de
intrare pentru microorganismele patogene, care la acest nivel i
dobndesc accesul la esuturile subiacente mucoasei.
Studiile electrono-optice cu molecule marcate cu peroxidaz
de hrean, au artat c acestea sunt transportate din lumenul
intestinal i ajung n spaiul subiacent celulelor M, unde se gsesc
limfocite i macrofage. Se stimuleaz astfel rspunsul imun local.
Structurile limfoide asociate mucoaselor constituie prima barier
de protecie fa de antigenele tractului digestiv. Uneori,
cantitile relativ mari de antigene de origine bacterian i
alimentar, nu sunt anihilate local, de structurile limfoide ale
96

mucoaselor i trec n mediul intern, ajungnd la cea de a II-a
barier major de protecie fa de antigene, care este ficatul.
Circa 30% din numrul total de celule ale ficatului au capacitatea
de a fagocita i epureaz sngele adus de vena port din teritoriul
digestiv.
Antigenele inoculate sunt proteine din veninul de insecte, n
special Hymenoptere (albin, viespe), care conine 7-10 antigene.
Alergenele din venin sunt diferite forme ale fosfolipazei A.
Veninul de albin conine fosfataz acid, hialuronidaz,
dopamin i norepinefrin i un peptid care produce degranularea
mastocitelor.
Serurile imune obinute pe diferite specii de animale
(heteroantiseruri), dup injectare la om, adeseori activeaz
rspunsul imun al organismului receptor. Muli diabetici tratai cu
insulin de origine animal sau cu insulin sintetizat n celule
reprogramate prin metodele ingineriei genice, sintetizeaz
anticorpi anti-insulin.
Agenii farmacologici, administrai n scop terapeutic sau
diagnostic, pot cauza o varietate de dezordini imunitare, deoarece
acioneaz ca haptene care se cupleaz cu diferite proteine
tisulare, conferindu-le imunogenitate. Legarea covalent a unui
medicament ori a unui metabolit reactiv derivat prin
metabolizarea lui, de o macromolecul, creeaz unconjugat
hapten-macromolecul, inductoare a rspunsului imun specific.
Legarea covalent a celor dou molecule se numete haptenare.
Unii indivizi sunt predispui la reaciile alergice fa de
diverse medicamente, n special antiinfecioase. Dac un
individ manifest fenomene alergice fa de un compus
antimicrobian, riscul alergiei fa de o alt clas de compui
farmacologici crete de 9 ori. Circa 10% dintre aduli sunt
alergici fa de o clas de compui i intr n categoria celor cu
risc crescut fa de ali compui farmacologici.
97

Reaciile de hipersensibilitate imediat de tip 1, induse de
medicamente, se manifest variat: anafilaxie, urticarie,
angioedem.
Unele substane pot produce mai mult de un tip de
reacie, la un organism sensibil. De exemplu, penicilina poate
cauza o reacie anafilactic de tip I, o anemie hemolitic
datorat reaciei citotoxice de tip II, dezordini funcionale de
tip III cu complexe imune sau o reacie de hipersensibilitate
ntrziat.
Reaciile de hipersensibilitate apar, de cele mai multe ori,
n esuturile bogate n mastocite: tegument, mucoase, mucoasa
lingual, plmn, tractul gastrointestinal.
Dac reacia de hipersensibilitate imediat este localizat
n mucoasa nazal i n conjunctiva ocular, simptomele includ
rinoree, lcrimare, strnut, congestie nazal, creterea
numrului eozinofilelor n snge. Titrul IgE seric poate s
creasc sau s rmn sczut.
Dac reacia de hipersensibilitate imediat este localizat
n bronhii, manifestarea clinic este astmul alergic, caracterizat
prin scurtarea i ngreunarea respiraiei.

Mediatorii reaciei de hipersensibilitate imediat de tip I
Reaciile de hipersensibilitate imediat de tip 1 se datoreaz
sintezei unor izotipuri de anticorpi cu proprieti particulare.
Din punct de vedere funcional, anticorpii sunt convenionali
i citofili.
Anticorpii convenionali (Ig A, IgG, IgM) din ser se
detecteaz in vitro, prin reacia de aglutinare, precipitare sau de
fixare a complementului. In vivo, anticorpii convenionali se
combin cu antigenul i l neutralizeaz. Reaciile de
hipersensibilitate de tip 1 se datoreaz sintezei anticorpilor citofili,
cu proprieti funcionale particulare.
Anticorpii citofili au proprietatea de a se fixa pe suprafaa
unor celule care au receptori pentru regiunea Fc i n primul rnd
98

pe mastocite, dar i pe bazofile, eozinofile, macrofage. Nu produc
reacii secundare de aglutinare, precipitare sau de fixare a
complementului.
Anticorpii citofili declanatori ai reaciilor de
hipersensibilitate imediat se numesc reagine, deoarece produc
modificri ale reactivitii tisulare: mresc permeabilitatea
vascular prin intermediul histaminei, eliberat din mastocite. La
om, reaginele majore sunt IgE i IgG
4
. IgE este termolabil (se
inactiveaz la 56
o
, timp de 30 de minute), iar IgG
4
este
termostabil. Ambele izotipuri se sintetizeaz dup imunizri
naturale. IgE nu traverseaz bariera placentar. Timpul de
njumtire este de dou zile.
Sinteza lor se face dup mecanismul clasic: dup ce
alergenul vine n contact cu mucoasele (respiratorie sau digestiv),
penetreaz pelicula de mucus i celulele epiteliale, este fagocitat
de macrofage, prelucrat i prezentat n asociaie cu moleculele
CMH II, limfocitelor Th. Limfocitele Th sintetizeaz IL-2 care
produce expansiunea clonal a limfocitelor B. Sub aciunea
stimulatoare a IL-2, limfocitele B se transform n plasmocite ce
sintetizeaz IgE.
La persoanele normale, sinteza IgE este supresat de
limfocitele Ts, iar concentraia de IgE seric variaz ntre 17-450
ng/ml, adic 0,002% din totalul cantitii de imunoglobuline
serice. La indivizii atopici (cu predispoziie genetic pentru
manifestarea reaciilor alergice), dup contactul cu o doz mic de
alergen, aproape totdeauna se sintetizeaz IgE, iar titrul seric
crete de 1000 de ori. Nivelul seric crescut al IgE este o
modalitate de diagnostic al strilor alergice, dar nivelul normal al
IgE nu exclude starea alergic.
IgE se sintetizeaz local, n structurile limfoide, la poarta de
intrare a antigenului, n plasmocitele din corionul mucoasei.
Excesul de IgE trece n circulaie i se leag pe receptorii pentru
Fc de mare afinitate ai bazofilelor, neutrofilelor, ai celulelor
endoteliului vascular, ai celulelor epiteliale alveolare pulmonare.
99

Sngele transport IgE la masocitele tisulare din tot organismul.
IgE fixat pe celule reprezint o proporie important din IgE total.
Celulele mediatoare ale reaciilor de hipersensibilitate
imediat sunt n primul rnd mastocitele i bazofilele.
Bazofilele sunt celule circulante, dar pot ptrunde n
focarul inflamator. Mastocitele sunt celule mononucleate i au
dou localizri principale:
- n esutul conjunctiv, n special n jurul vaselor
sanguine din ficat, rinichi, splin;
- n mucoasele digestive i cea respiratorie.
Exemple de reacii de hipersensibilitate de tip I
Reaciile anafilactice (ana = opus; phylaxis = protecie) se
caracterizeaz printr-o dinamic exploziv a manifestrilor, n
decurs de 3-4 minute. Clinic, termenul de anafilaxie semnific
sindromul care rezult din eliberarea unor mediatori preformai i
generai de novo n mastocite, care determin o stare opus celei
de protecie. Manifestrile clinice ale reaciilor de
hipersensibilitate sunt dependente de calea de ptrundere a
alergenului i de cantitatea de histamin eliberat. Reaciile
cutanate medii, cu eritem, urticarie, prurit, dureri de cap, sunt
asociate cu un nivel sczut al histaminei plasmatice
Anafilaxia generalizat (sistemic) este forma cea mai grav a
hipersensibilitii imediate. Mult timp s-a considerat c anafilaxia
generalizat este o manifestare patologic, indus numai n
condiii experimentale la animalele de laborator. In realitate, att la
om ct i la animale se produc ambele tipuri de reacii anafilactice,
att generalizate, ct i locale.
Alergenele inhalate produc manifestri locale, la poarta de
intrare.
Reacii atopice. Termenul de atopie definete strile de
hipersensibilitate imediat cu substrat ereditar, limitate la om.
Strile atopice se manifest la 10-20% din populaie, sub forme
variate.
100

Reaciile atopice au un tablou clinic mai simplu i se produc
atunci cnd reacia alergenului cu anticorpii specifici are loc pe
suprafaa unei mucoase sau n epiteliul tegumentar.
Rinita alergic sau febra de fn este forma cea mai simpl a
atopiei i se manifest prin secreie abundent a glandelor
epiteliului nazal, iar astmul bronic, prin contracia muchilor
cilor respiratorii. Cele dou forme extreme de manifestri
alergice sunt determinate de alergenele inhalate, care se gsesc n
polen, n praful de cas(ce conine alergene de acarieni), n prul
animalelor.
Astmul alergic, o variant complex a reaciilor atopice, este o
maladie cronic inflamatorie a plmnului, cu o prevalen
crescnd a morbiditii i mortalitii n ultimele dou decenii.
Alergiile la alimente formeaz o categorie de stri atopice
foarte comune la copii i se manifest fa de alergene din lapte,
ou, ulei de pete, ciocolat, cpuni, ciree, portocale.
Manifestrile reaciilor alergice la alimente pot fi locale sau
generalizate.
Reaciile alergice locale se caracterizeaz prin erupii
urticariene (pustule eritematoase) la nivelul mucoasei bucale,
nsoite uneori de tulburri digestive (colici abdominale,
diaree). La vrsta adult, subiecii vor manifesta reacii alergice
respiratorii.

Reaciile de hipersensibilitate de tip I I
Reaciile de hipersensibilitate de tip II sunt de tip citotoxic,
dependente de anticorpi i sunt consecina aciunii fagocitelor
asupra celulelor nucleate, dup opsonizarea lor prealabil cu
anticorpi sau cu componente ale complementului.
Diferitele izotipuri de anticorpi variaz n ceea ce privete
posibilitatea lor de a iniia aceste reacii, n funcie de capacitatea
de a lega C1q sau de a interaciona cu receptorii pentru regiunea
Fc, ai celulelor efectoare. Mediatorii reaciilor de
hipersensibilitate de tip II sunt IgG, IgM, i componentele
101

complementului (C3), care se leag specific de antigenele celulare
sau tisulare.
Consecina legrii anticorpilor, este apariia leziunilor,
limitate la celulele sau esuturile care expun antigenele. In
general, anticorpii specifici fa de antigenele suprafeei
celulelor proprii, produc efecte defavorabile iar cei specifici
fa de antigenele intracelulare sunt inofensivi.
n reaciile de hipersensibilitate imediat de tip citotoxic,
anticorpii specifici fa de antigenele suprafeei celulare
coopereaz cu componentele complementului i cu celulele
efectoare.
Celulele efectoare sunt macrofagele, neutrofilele,
eozinofilele, celulele NK. Toate au receptori pentru regiunea
Fc a Ig i receptori pentru C3. Legarea anticorpilor prin
intermediul receptorului pentru Fc, stimuleaz fagocitele s
produc leucotriene i prostaglandine, implicate n rspunsul
inflamator.
Mecanismul prin care celulele efectoare atac celulele
int este acelai prin care ele sunt active fa de agenii
infecioi. Agenii patogeni sunt nglobai n fagolizosom,
unde, de cele mai multe ori, virusurile sunt inactivate iar
celulele sunt omorte sub aciunea intermediarilor reducerii O
2
,
a enzimelor lizosomale, a pH acid.
n reacia de hpersensibilitate imediat de tip citotoxic,
inta celular este prea mare pentru a fi fagocitat i de aceea,
coninutul granulaiilor i al lizosomilor citoplasmatici este
eliberat la contactul cu celula sensibilizat, prin exocitoz.
Exocitoza coninutului enzimatic al fagocitelor are efect
benefic, dac inta este un parazit, dar este defavorabil dac inta
este esutul propriu, care a fost sensibilizat n prealabil de
anticorpi.
Ali efectori ai hipersensibilitii citotoxice mediat de
anticorpi, sunt celulele K. Ele au receptori de mare afinitate pentru
regiunea Fc i produc efecte citotoxice.
102

Declanatorii reaciilor de hipersenbilitate imediat de tip
citotoxic sunt aloantigenele.
Reaciile citotoxice dependente de anticorpi sunt
consecutive aloimunizrii, adic au loc dup contactul cu
antigenele unui organism al aceleiai specii, dar cu o alt variant
alelic a moleculelor CMH.
Aloimunizarea survine n urmtoarele situaii:
- transfuzii de snge izogrup
- aloimunizarea feto-matern n cazurile de
incompatibilitate Rh
- n transplantul de esuturi i organe.

Reaciile de hipersensibilitate imediat de tip I I I
Hipersensibilitatea imediat de tip III este dependent de
complexele imune i este consecina formrii i persistenei
complexelor imune n organism.
Complexele imune in vivo se formeaz n urmtoarele
trei situaii:
- n infeciile cronice cu streptococ -hemolitic, cu
stafilococ, cu Plasmodium, cu virusurile hepatitice B i C, cu
HIV. In toate aceste cazuri, antigenele persist timp ndelungat.
Se sintetizeaz anticorpi specifici i se formeaz complexe
imune, care eventual se depun n esuturi;
- complexele imune pot fi rezultatul proceselor
patologice autoimune. Sinteza continu a anticorpilor fa de
componentele self modificate, determin formarea complexelor
imune, care nu pot fi eliminate n ritmul formrii i se depun;
- complexele imune se pot forma cu antigenele exogene,
care nu se multiplic n organism, dar ptrund n mod repetat,
n cantitate mare. Astfel, antigenele vegetale, bacteriene (din
actinomicete), fungice sau antigene de origine animal, dup
inhalarea repetat n plmn, induc sinteza local a anticorpilor
i formarea complexelor imune.

103

Reaciile de hipersensibilitate de tip I V
(Hipersensibilitatea ntrziat)
Hipersensibilitatea ntrziat cuprinde toate reaciile care,
dup clasificarea lui Coombs i Gell (1963), necesit mai mult de
12 ore pentru a deveni evidente.
Reaciile de hipersensibilitate ntrziat au urmtoarele
particulariti:
- apariia lor este lent i atinge amplitudinea maxim la 24-
72 de ore de la contactul secundar cu antigenul;
- reacia de hipersensibilitate ntrziat nu afecteaz un
anume organ int, ci este o stare cu rsunet sistemic, cu simptome
generalizate, ceea ce o deosebete de reaciile de hipersensibilitate
imediat;
- n reaciile de hipersensibilitate ntrziat nu se produce
liz celular, cu excepia cazurilor grave;
- reaciile de hipersensibilitate ntrziat nu sunt dependente
de factorii humorali (anticorpi) i de aceea nu se transfer prin
intermediul serului. Sunt dependente de limfocitele T sensibilizate
i se transfer prin suspensia celular din exudatul inflamator
(exudat peritoneal), bogat n limfocite i macrofage;
- nefiind dependent de molecule proteice circulante,
reaciile de hiper-sensibilitate ntrziat se manifest n esuturile
vascularizate i nevascularizate.

Declanatorii reaciilor de hipersensibilitate ntrziat
Declanatorii acestor reacii sunt foarte diferii, dar au o
caracteristic funcional comun, ce const n aceea c devin
stimuli cronici:
- substane anorganice: HgCl
2
, sulfat de nichel, compui
ai cromului, coloranii de anilin;
- glucidele, cu rol de haptene, dup ce in vivo se
complexeaz cu o protein purttor;
- substane proteice produse de M. tuberculosis
(tuberculina), de Brucella (brucelina), dar i celulele ntregi, al
104

cror perete este rezistent la aciunea anticorpilor i a
complementului: celule de M. tuberculosis, vaccinul BCG, M.
leprae, Streptococcus, Staphylococcus, Treponema, Bordetella,
Brucella, Listeria, Salmonella.
- fungii Candida, Histoplasma;
- paraziii Schistosoma, Plasmodium, Toxoplasma,
Leishmania;
- virusuri: rujeolic, herpetice, adenovirusuri etc;
- antigenele celulare din grefele de esuturi i organe.
Modul de administrare a antigenului influeneaz
reactivitatea imunitar. Asocierea antigenului cu adjuvantul
Freund complet, favorizeaz reacia de hipersensibilitate
ntrziat, iar injectarea intravenoas este defavorabil
acestui proces.
Reaciile de hipersensibilitate imediat i ntrziat
coexist pentru orice antigen, cu predominana uneia sau alteia,
fr s se exclud complet.
Se cunosc trei tipuri de reacie de hipersensibilitate de tip
ntrziat:
- reacia ntrziat de tip tuberculinic
- hipersensibilitatea ntrziat de contact. Ambele tipuri
de reacie apar la 48-72 de la reexpunerea la antigen;
- hipersensibilitatea ntrziat granulomatoas se
manifest n 21-28 de zile. Granuloamele se formeaz prin
agregarea i proliferarea macrofagelor i pot s persiste un
interval de mai multe sptmni.


105

Tema 12.
Conflictul imunitar. Maladiile autoimune. Mecanisme celulare
i moleculare ale progresiei maladiilor autoimune.

n 1900, Ehrlich i Morgenroth au formulat conceptul
horror autotoxicus, care semnific faptul c, n mod normal,
organismul i tolereaz propriile componente, pe care le
protejeaz fa de autodistrugerea pe calea efectorilor rspunsului
imun. Sistemul imunitar este tolerant fa de componentele
proprii. Starea de toleran fa de self se instaleaz n cursul
dezvoltrii embrionare. Una din axiomele Imunologiei este c, la
organismele cu reactivitate imunitar normal, nu se produc
anticorpi fa de constituienii proprii organismului. Totui,
autoanticorpii apar mai ales la persoanele n vrst: sunt
autoanticorpi anti-hematii sau anti-membran bazal glomerular.
Starea de toleran perfect a sistemului imunitar fa de
componentele self, este perturbat n unele situaii n care se
sintetizeaz autoanticorpi sau se difereniaz limfocite
autoreactive, care nu mai recunosc selful. Prin extinderea efectelor
sale, starea de autoreactivitate imunitar genereaz maladiile
autoimune. Maladiile autoimune, n esen, se caracterizeaz prin
expansiunea proliferativ a limfocitelor reactive fa de
componentele self.
Reactivitatea imunitar fa de self nu s-a evideniat
niciodat ca fiind factorul iniiator primar al maladiilor autoimune,
chiar dac self-reactivitatea a amplificat manifestrile patologice
cu componente autoimune. Exist maladii cu fenomene autoimune
bine exprimate, dar etiologia lor primar nu se cunoate.
Mecanisme ipotetice ale iniierii conflictului autoimun
Mecanismele celulare i moleculare prin care este perturbat
starea de toleran a sistemului imunitar fa de self, nu se cunosc,
dar faptele de observaie au condus la urmtoarele ipoteze:
a) Eliberarea antigenului sechestrat. Starea de toleran fa
de self se induce n timpul dezvoltrii embrionare. Antigenele
106

sechestrate sunt acelea care, prin localizarea sau prin
particularitile de vascularizaie ale unui esut, sunt inaccesibile
recunoaterii de ctre celulele limfoide, n perioada dezvoltrii
embrionare. Ele au localizare intracelular sau sunt delimitate prin
bariere anatomice. In situaii normale, antigenele sechestrate nu
stimuleaz nici starea de toleran i nici nu induc rspunsul imun,
datorit absenei contactului lor cu limfocitele. Din diferite cauze
(traumatisme, intervenii chirurgicale, procese infecioase),
antigenele sechestrate se elibereaz i devin accesibile
limfocitelor, declannd rspunsul imun. Un astfel de mecanism
patogen s-a presupus c este activ n generarea oftalmiei imune i
n aspermia autoimun a tubilor seminiferi. Proteinele
cristalinului, n cursul interveniilor chirurgicale, dup
traumatismele ce sparg capsula sau dup afeciunile care
permeabilizeaz cristaloida, se comport ca antigene care
declaneaz un rspuns imun anti-cristalin. Astfel, pot fi afectate
irisul, procesele ciliare, coroida. Proteinele spermatice, n cazurile
de spermostaz, induc sinteza local a anticorpilor n structurile
epididimului. Anticorpii reacioneaz cu antigene acrosomale sau
flagelare ale spermatozoizilor i produc imobilizarea sau chiar
aglutinarea lor, consecina fiind sterilitatea autoimun. Prin
acelai mecanism, al eliberrii antigenului sechestrat, se pot
declana alte maladii autoimune: afeciuni demielinizante ale
SNC, tiroidita Hashimoto. Sistemul nervos central i tiroida sunt
delimitate de bariere anatomice etane, care nu permit accesul
efectorilor sistemului imunitar. Dup traumatisme, intervenii
chirurgicale sau consecutiv unor infecii distructive, antigenele
specifice acestor esuturi, se pot elibera i ptrund n circulaie.
Fa de ele se poate declana rspunsul imun, generator al
maladiilor demielinizante cu component autoimun i al tiroiditei
autoimune.
b) Pierderea strii de toleran, ca mecanism posibil al
generrii strilor de autoimunitate, este tot mai mult acceptat.
Datorit unor mutaii, ar fi posibil apariia clonelor de celule
107

limfoide imunocompetente, care pierd proprietatea de toleran
fa de self. Limfocitele T i B autoreactive, genereaz efectorii
rspunsului imun care interacioneaz specific cu componentele
self. Apariia clonelor autoreactive ar fi asociat cu un deficit al
celulelor Ts, precum i cu activarea celulelor Th.
c) Modificarea structurii chimice a antigenelor proprii
(teoria selfului alterat). Sub aciunea unor factori fizici (arsuri,
radiaii), biologici de natur infecioas (bacterii, virusuri, fungi)
sau a unor substane chimice (medicamente), proteinele proprii se
modific i expun determinani antigenici interni sau se altereaz
configuraia lor molecular. Moleculele modificate devin
autoantigene.
Virusurile nvelite au un rol important n generarea
autoanticorpilor, deoarece, pe suprafaa celulelor infectate sunt
expuse antigene virale, care pot s modifice specificitatea
antigenic a moleculelor proprii membranei celulare. Virusurile
nvelite nmuguresc prin membranele celulei gazd i pot
ncorpora proteine ale membranei celulare. Virusul este
neutralizat de anticorpi, iar complexul imun este ingerat de
macrofag prin intermediul receptorilor pentru Fc. Odat cu
glicoproteinele virale, pe suprafaa macrofagului vor fi expuse i
glicoproteine originare n celula gazd. Astfel sunt stimulate
limfocitele T fa de proteinele self.
d) Asemnarea antigenic ntre antigenele exogene i
componentele self. Uneori, microorganismele infecioase conin
molecule asemntoare, nrudite antigenic cu componentele self.
Se sintetizeaz anticorpi care recunosc nu numai antigenul
invadant, ci i propriile componente. De exemplu, peretele de Str.
haemolyticus conine proteina M. Anticorpii anti-protein M
reacioneaz ncruciat cu proteine membranare ale celulelor
muchiului cardiac. Unele antigene exogene, de origine
bacterian, stimuleaz sinteza anticorpilor ce dau reacii
ncruciate cu molecule ale suprafeei hematiei. De aceea, infecia
cu Str. haemolyticus produce, uneori, leziuni ale miocardului.
108

Maladiile infecioase (sifilis, lepr) stimuleaz sinteza
autoanticorpilor (factorul reumatoid, anticorpi anti-tiroidieni) i
acetia ar putea fi cauza dezechilibrului mecanismelor
imunologice centrale. Rspunsul autoimun este declanat de novo
sau cel preexistent este amplificat dup infecia cu o larg
varietate de virusuri ADN i ARN,
La animalele de experien, infeciile virale acute i
persistente pot induce sau pot accelera evoluia maladiei
autoimune.
e) Activarea rspunsului imun poate fi rezultatul
ntreruperii strii de echilibru a reelei idiotipice. Limfocitele
sunt legate ntr-o reea funcional complex, prin interaciuni
ce implic regiunile variabile ale receptorilor de antigen.
Limfocitele T au receptor de antigen cu regiuni variabile i
stimuleaz rspunsul anti-idiotipic. In mod normal, n absena
stimulului antigenic, interaciunile celulare menin sistemul
imunitar n echilibru, dar la contactul cu antigenul, reeaua se
orienteaz n sensul elaborrii rspunsului imun specific.
Ulterior, datorit semnalelor supresoare, reeaua se ntoarce la
starea de echilibru. Interaciunile idiotipice pot avea rol
stimulator sau inhibitor al rspunsului imun. Anticorpii anti-
idiotipici, care n mod obinuit au rol reglator, pot fi
autoanticorpi.
f) Supravieuirea limfocitelor autoreactive. In timus,
clonele de limfocite self-reactive sunt eliminate. In organism,
rmn totui clone cu o autoreactivitate medie. Ele nu sunt
agresive fa de propriile antigene, dar pot deveni foarte
reactive, dup ce s-au activat sub aciunea unui antigen exogen.
Dup activare, prolifereaz i atac esutul self. Dac
limfocitele supravieuiesc mai mult dect este necesar, efectul
aciunii lor se extinde. Mecanismul supravieuirii limfocitelor
activate pare a fi implicat n generarea lupusului sistemic
eritematos i a artritei reumatoide. Supravieuirea limfocitelor
se datoreaz producerii unor molecule ce blocheaz ligandul
109

Fas. Astfel, ligandul Fas nu se mai leag specific cu receptorul
Fas i transmiterea mesajului morii n limfocit este blocat.
g) Stimularea policlonal a limfocitelor B. Unii ageni infecioi, ca de
exemplu virusul Epstein-Barr, infecteaz limfocitele B i produc
activarea policlonal. Ele strbat cteva cicluri de diviziune i
sintetizeaz anticorpi cu specificiti multiple de combinare, unii fiind
autoanticorpi. Micoplasmele sunt activatoare policlonale ale
limfocitelor i pot contamina preparatele virale. Frecvent, virusurile
infecteaz limfocitele i macrofagele, stimulnd astfel eliberarea
citochinelor. Aceste molecule influeneaz nivelul de exprimare a
moleculelor CMH I i II, modulnd rspunsul imun.
h) Influenele hormonale. Numeroase observaii clinice
sugereaz o corelare direct ntre dezechilibrele hormonale i
momentul declanrii maladiilor autoimune. Maladiile autoimune
sunt mai frecvente la femei, iar brbaii cu fenomene autoimune
au un nivel mai crescut de hormoni estrogeni. Sarcina se asociaz
cu ameliorarea severitii maladiilor autoimune, n special a
artritei reumatoide.
j) Factorii genetici. Maladiile autoimune tind s aib o
inciden familial, ceea ce sugereaz substratul genetic
predispozant la maladiile autoimune.

Mecanisme celulare i moleculare
ale progresiei maladiilor autoimune

Indiferent de mecanismul declanator, maladiile autoimune
se caracterizeaz prin sinteza autoanticorpilor sau prin generarea
limfocitelor T autoreactive. Leziunile tisulare consecutive aciunii
efectorilor imunitari, se produc pe una din urmtoarele ci:
- autoanticorpii au, uneori, o aciune direct fa de
antigenele tisulare cu care formeaz complexe imune. Se
activeaz complementul i rezultatul este liza celulelor;
110

- alteori, autoanticorpii au aciune indirect. Complexele
imune (Ag - Ac - C) se depun la nivelul vaselor mici (arteriole,
capilare) din diferite organe i produc reacii inflamatorii,
consecina fiind distrugerea esutului;
- n alte cazuri, esutul int este lezat sub aciunea
limfocitelor Tc infiltrate.
La pacienii la care se sintetizeaz autoanticorpi, maladiile
autoimune au o particularitate comun: inflamaia cronic fr o
cauz infecioas cunoscut. Autoanticorpii pot iniia procesul
patologic, pot contribui la patogenez i sunt utili pentru
diagnostic. In evaluarea semnificaiei autoanticorpilor trebuie
avute n vedere urmtoarele situaii: 1) autoanticorpii pot fi agenii
efectori ai maladiei, ca de exemplu, n anemia hemolitic
autoimun; 2) alteori, dup lezarea unor esuturi (nervos, cardiac)
se sintetizeaz autoanticorpi care reacioneaz cu esuturile
respective; 3) autoanticorpii semnific prezena unui agent
etiologic, fr s aib rol n patogenitate i indic originea
infecioas a maladiei; 4) autoanticorpii se gsesc uneori, mai ales
la vrstnici, n absena manifestrilor patologice.
Unele maladii autoimune se caracterizeaz prin procese
patologice strict localizate, adic efectorii (n special anticorpii)
au aciune specific fa de antigenele proprii organului sau
esutului int. Astfel, n maladia autoimun diabetus melitus
insulino-dependent, auto-anticorpii au specificitate numai fa de
celulele B din insulele Langerhans, iar ntiroidita Hashimoto,
autoanticorpii sunt specifici fa de celula epitelial tiroidian.
La centrul spectrului se situeaz leziunile care tind s fie
localizate ntr-un singur organ, dar autoanticorpii nu au
specificitate de organ. Exemplul tipic este ciroza biliar
primar,n care, canaliculele biliare sunt inta infiltrrii cu celule
inflamatorii, dar anticorpii serici, n special anti-mitocondriali nu
au specificitate de organ (nu sunt specifici fa de mitocondriile
hepatice).
111

La cealalt extremitate a spectrului sunt maladiile
autoimune diseminate, caracterizate prin sinteza autoanticorpilor
fa de antigene cu distribuie tisular larg (de exemplu, anticorpi
anti-nucleari n lupusul eritematos diseminat).
Autoanticorpii se sintetizeaz preponderent, fa de
antigenele esuturilor endocrine: tiroid, corticosuprarenale,
celulele insulare pancreatice, paratiroide, hipofiz, ovar. Titrul cel
mai crescut se nregistreaz n cazul maladiei tiroidiene.
Autoanticorpii pot fi specifici fa de diferite componente
antigenice:
- fa de molecule ale suprafeei celulare i au rol
patologic(ca de exemplu, anticorpii anti- receptori de hormoni);
- fa de inte extracelulare (molecule circulante sau ale
matricei extracelulare) i pot fi agravani ai maladiei autoimune;
fa de componente intracelulare.
Autoanticorpii au specificitate fa de molecule self.
Prezena autoanticorpilor este, uneori, un indiciu al riscului
pentru viitoare maladii autoimune, iar alteori, titrul lor seric
este o reflectare direct a amplitudinii dezordinii autoimune.
Evidenierea autoanticorpilor nu este niciodat revelatoare
pentru diagnosticul unei maladii, deoarece se pot gsi i n
serul organismului normal. Prezena lor n serul normal are o
frecven variabil n funcie de vrst i sex: cea mai mic
frecven, autoanticorpii o au n serul brbailor tineri, iar n
serul femeilor vrstnice, frecvena este cea mai mare.


112

Tema 13.
Imunodeficiena.

Organismele imunodeficitare reprezint, din punct de
vedere clinic, adevrate experiene ale naturii, care, alturi de
studiile experimentale, au contribuit decisiv la fundamentarea
concepiei actuale cu privire la organizarea i funcionarea
sistemului imunitar. Analiza cazurilor clinice ale indivizilor
imunodeficieni, a evideniat faptul c cele dou compartimente
celulare ale sistemului limfoid sunt semiautonome, deoarece
ntre ele exist multiple interdependene funcionale.
Maladiile cu substrat imunitar (imunodeficienele) sunt
heterogene, att n expresia lor imunologic-clinic, ct i n
privina mecanismelor celulare i moleculare implicate.
Imunodeficienele pot fi nscute (primare) sau dobndite
(secundare) i se datoreaz mai multor cauze:
- pot fi rezultatul unor defecte genetice intrinsece ale
celulelor limfoide, care se manifest prin erori ale diferitelor
trepte de maturare, care se succed de la celula
stempluripotent, pn la celula T matur i respectiv, pn la
plasmocit. Deficiena poate fi datorat lipsei unor enzime
eseniale pentru metabolismul celulei (de exemplu,
metabolismul purinelor). Consecina este absena limfocitelor
din organele limfoide i din circulaie;
- alteori se produc deleii ale genelor care codific unele
izotipuri de lan greu (H). Astfel, apar deficienele selective ale
claselor de imunoglobuline;
- imunodeficienele se pot datora slabei dezvoltrii a
mediului necesar diferenierii i maturrii celulelor limfoide
(timus, GALT);
- imunodeficienele pot fi rezultatul perturbrii
mecanismelor reglatoare ale celulelor Th i Ts, care
controleaz rspunsul imun mediat celular i humoral;
113

- imunodeficienele pot surveni ca rezultat al
catabolizrii imunoglobulinelor cu o rat excesiv, sau chiar
datorit pierderii imunoglobulinelor din snge i din secreii,
dei celulele limfoide i imunoglobulinele sunt normale sub
aspect numeric i respectiv, cantitativ;
Circa 50% din imunodeficiene se datoreaz sintezei
deficitare a anticorpilor, 10% sunt imunodeficiene celulare,
20% sunt imunodeficiene combinate, 18% sunt deficiene ale
fagocitelor i 2% sunt deficiene ale proteinelor
complementului.

Imunodeficienele nnscute
Imunodeficienele nnscute (primare) au fost descoperite
de O. Bruton (1952), odat cu descrierea agamaglobulinemiei
i hipogamaglobulinemiei infantile sex-lincat. Maladia
afecteaz bieii i se transmite prin cromosomul X. Pacienii
rmn asimptomatici n primele luni de via, deoarece n
aceast perioad imunoglobulinele materne asigur protecia
antiinfecioas. Dup vrsta de 5-6 luni, pacienii devin foarte
sensibili la infeciile tegumentare cu bacterii piogene i la
infecii ale tractului respirator cu streptococi, meningococi, H.
influenzae. Pacienii sunt lipsii de reactivitatea imunitar
mediat humoral. In esuturile limfoide lipsesc plasmocitele,
iar foliculii limfoizi nu se formeaz nici dup stimularea
antigenic repetat. La electroforez, serul pacienilor nu relev
fracia gamaglobulinic. IgG are concentraia de 1/10 (1 mg/ml
fa de 10 mg/ml), iar IgM are concentraia de 1/100 din
valorile normale. Lipsete IgA, dar lipsesc i hemaglutininele
i . n mod normal limfocitele B reprezint 5-18% din totalul
limfocitelor circulante, dar la aceti pacieni, proporia lor este
foarte mic (mai puin de 0,1%). Absena limfocitelor B mature
se datoreaz defectelor de maturare, determinate de tirozin-
kinaza nefuncional, codificat de gena mutant.
114

Pacienii au reactivitate normal a imunitii mediate
celular: testul hipersensibilitii ntrziate la tuberculin este
pozitiv, resping alogregele, limiteaz infeciile virale, cu
excepia hepatitei B (care evolueaz rapid spre ciroz) i a
celor cu enterovirusuri. Limfocitele T au valori numerice
normale. Vaccinurile virale atenuate sunt bine suportate i nu
produc infecii clinice.
Disgamaglobulinemiile selective se caracterizeaz prin
incapacitatea sintezei unui anumit izotip imunoglobulinic. Se
cunosc deficiene selective ale IgM, IgA sau ale IgM i IgA,
IgA i IgG, IgM i IgG.
Deficienele IgA se asociaz cu o frecven crescut a
infeciilor tractului digestiv i respirator, iar deficienele
sintezei IgG i IgM se nsoesc cu creterea sensibilitii fa de
infeciile tegumentare cu bacterii piogene: Streptococcus,
Staphylococcus.
Agama-, hipogama- i disgamaglobulinemiile selective
se amelioreaz net, prin administrarea intravenoas a
gamaglobulinelor.
Sindromul Di George este consecina hipoplaziei sau
ageneziei timice. In cursul vieii embrionare se produce o
perturbare a dezvoltrii structurilor derivate din perechile a 3-a
i a 4-a de pungi faringiene. Agenezia timic este nsoit de
absena paratiroidelor i de aceea, pacienii, iniial, prezint alte
simptome: hipocalcemie, malformaii cardiace. Timusul este
foarte redus ca dimensiuni sau chiar lipsete la 1/3 dintre
pacieni. Adeseori, timusul exist sub forma glandelor
ectopice. Imunitatea mediat humoral este normal, reflectat
n valorile normale ale concentaiei imunoglobulinelor.
Dac supravieuiesc, la civa ani, pacienii manifest
sensibilitate nalt fa de infeciile virale, fa de bacteriile
intracelulare sau fa de infecia fungic cu Pneumocystis
carinii.
115

Imunodeficiena sever combinat (SCID) se
caracterizeaz prin deficitul ambelor compartimente ale
imunitii, att celular, ct i cel humoral. Deficiena se
datoreaz absenei celulelor stem de origine a limfocitelor.
Lipsesc limfocitele T, B i granulocitele, datorit hipoplaziei
generalizate a esutului reticular hematopoetic. Organele
limfoide secundare sunt hipoplazice, iar timusul este absent.
Lipsesc imunoglobulinele serice.
Pentru restabilirea funciei imunitare se impune transplantul
mduvei osoase.

Imunodeficienele dobndite
Imunodeficienele dobndite (secundare) cuprind diverse
maladii, datorate unor cauze patologice care interfer direct sau
indirect cu funcia imunitar.
Imunodeficienele dobndite pot fi cauzate de
hipercatabolismul imunoglobulinelor. Concentraiile serice ale
imunoglobulinelor reflect raportul dintre rata sintezei i rata
catabolismului acestor molecule. Creterea ratei catabolismului
poate s conduc la o deficien selectiv a unei clase de
imunoglobuline, ce se manifest prin hipoproteinemie.
Imunodeficienele dobndite se pot datora pierderii
excesive a imunoglobulinelor, la nivelul tractului urinar sau
gastrointestnal. Pierderea urinar este consecina defectelor
renale glomerulare, a unor disfuncii tubulare sau unor defecte
combinate.
Deficienele glomerulare sunt asociate cu pierderea
proprietilor de sit ale endoteliului capilarelor glomerulare.
Moleculele imunoglobulinice mici (IgG) trec n urin cu o rat
superioar fa de moleculele mari (IgM). Totui, IgG
3
i IgG
4

rmn normale, ceea ce sugereaz c, n afara greutii
moleculare, sunt importani i ali factori care condiioneaz
funcia filtrului renal. Nivelul seric al IgG scade, proporional
116

cu gradul perturbrii funciei de sit a endoteliului glomerular,
iar IgM rmne normal.
A II-a cale major a pierderii majore a imunoglobulinelor
este tractul gastrointestinal, la nivelul vaselor limfatice. Cele
mai multe situaii patologice la acest nivel nu induc
hipogamaglobulinemie, cu excepia limfangiectaziei
intestinale. Aceasta se caracterizeaz prin dilatarea excesiv a
canalelor limfatice i este nsoit de pierderea masiv de
proteine i chiar a limfocitelor. Dilatarea vaselor limfatice este
cauzat de obstrucia limfatic, datorit unei infecii (de
exemplu, tuberculoza), unei maligniti (limfom) sau datorit
creterii presiunii hidrostatice n insuficiena cardiac sever
congestiv. Rata sintezei imunoglobulinelor este normal sau
crescut, dar turnover-ul este rapid, datorit pierderii excesive a
proteinelor la nivel intestinal.
Imunodeficiene datorate micronutrienilor. Deficiena
fierului creeaz condiii predispozante pentru candidoza
mucocutanat cronic. Deficiena zincului supreseaz funcia
celulelor T i predispune la infecii oportuniste. Seleniul este
important pentru funcia celulelor T. Deficiena parial la
copii, predispune la infecii.
Imunodeficiene induse de medicamente. Cele mai multe
medicamente citotoxice i imunosupresoare, utilizate n
tratamentul malignitilor, al inflamaiilor i n imunosupresia
pacienilor cu transplant de organe, deprim funcia imunitar
celular i humoral, iar neutropenia predispune la infecii cu
bacterii Gram negative i la infecii fungice.
Compuiisteroidici utilizai n tratamentul maladiei
reumatismale, ciclofosfamida i azatioprina, folosite n
tratamentul neoplaziilor, dup administrare prelungit, deprim
imunitatea mediat celular, dar i nivelul seric al
imunoglobulinelor.
Unele imunodeficiene sunt consecutive altor procese
patologice, care interfer cu efectorii sistemului imunitar:
117

deficiena renal sau hepatic are ca efect acumularea
substanelor toxice n organism, cu efect supresor asupra
reactivitii imunitare.
Dezechilibrul endocrin, cu producerea n exces a
cortizonului suprarenalian (n maladia Cushing) este asociat cu
imunodeficiena. Cortizonul lizeaz limfocitele T i B
circulante i diminu monocitele periferice.
Strile neoplazice, n special cele care afecteaz sistemul
imunocitar, monocitar sau granulocitar induc un deficit al
funciei imunitare. In maladia Hodgkin neoplazia liniei
monocitare a ganglionilor limfatici se instaleaz deficiena
imunitii mediate celular, dar imunitatea humoral este
normal. In alte maligniti, efectele neoplaziei asupra
sistemului imunitar, nu s-au putut disocia de efectele provocate
de caexie.
Mielomul multiplu (tumor plasmocitar localizat n
mduva osoas) este nsoit de scderea cantitativ sever a
tuturor claselor de imunoglobuline normale i de aici,
deficiene ample ale imunitii humorale, dar imunitatea
celular rmne normal.

Imunodeficiena consecutiv infeciei cu HI V
Imunodeficiena consecutiv infeciei cu virusul HIV
este, n esen, expresia incapacitii organismului uman de a
neutraliza virionii, n timpul fazei acute a infeciei. Dup
contactul primar cu antigenele HIV, organismul se apr prin
mecanisme imunitare specifice. Se sintetizeaz anticorpi
specifici, la un titru crescut. Testul ELISA pentru diagnosticul
infeciei cu HIV se bazeaz pe detectarea anticorpilor anti-
HIV. Titrul maxim al anticorpilor se coreleaz n timp, cu
nivelul viremiei.
Imunitatea mediat celular anti-HIV se detecteaz foarte
timpuriu dup infecie i este dominat de numrul mare de
limfocite TCD
8
, al cror numr crete de 10-20 de ori fa de
118

valorile normale (200-600/l). Ele manifest activitate
citotoxic specific anti-HIV i lizeaz limfocitele infectate,
care expun pe suprafaa lor, proteinele env (SU i TM).
Limfocitele TCD
8
diminu viremia primar, att prin
efect citotoxic direct asupra celulelor n care virusul se replic,
ct i prin efect represor asupra replicrii virale, mediat de
citochine. Celulele NK lizeaz celulele infectate prin
mecanismul ADCC.
Rspunsul imun primar, humoral i celular represeaz
replicarea viral dup infecie. Dei foarte energic, rspunsul
imun primar nu elimin complet virusul i nici celulele
infectate. Organismul nu se sterilizeaz deoarece anticorpii
specifici anti-HIV, produi n timpul infeciei primare, nu au
activitate neutralizant optim. Anticorpii rspunsului imun
primar, n esen, nu au efect protector, deoarece rspunsul
imun este neadecvat, fie cantitativ, fie calitativ. O proporie
important a virionilor nu este neutralizat, pstrndu-i
infeciozitatea. Rmn de asemenea, multe celule infectate cu
virus, n special n ganglionii limfatici, att limfocite ct i
celule foliculare dendritice.
Anticorpii neutralizani se detecteaz mai trziu, dup
trecerea de la faza acut a infeciei, la faza cronic. Probabil c
anticorpii neutralizani sunt specifici fa de epitopii care nu
sunt expui pe virionii asamblai n cursul infeciei primare sau
anticorpii rspunsului imun secundar sufer fenomenul
maturrii de afinitate i se leag mai eficient de epitopi.
Pe msur ce infecia progreseaz, anticorpii neutralizani
sunt nlocuii cu anticorpi stimulatori (enhancing) ai infeciei.
Anticorpii stimulatori favorizeaz infecia celulelor, prin
intermediul receptorului pentu C
3
sau pentru Fc. Ineficiena
anticorpilor este explicat prin aceea c una din glicoproteinele
de nveli al virionilor este foarte glicozilat (circa 24 de
situsuri de glicozilare), pe o secven de 481 aminoacizi.
119

Gruprile glucidice mascheaz epitopii antigenici i mpiedic
neutralizarea virusului.
Imunodeficiena grav este consecina direct a scderii
dramatice a numrului de limfocite TCD
4
circulante, de la circa
1000 la 100/l. Dac n stadiul preclinic, proporia limfocitelor
productoare de virus este de 1/40, n stadiile avansate,
proporia este 1/10.
Cauza principal a scderii numrului de limfocite TCD
4

este liza consecutiv infeciei cu HIV. Proteinele virale
sintetizate n celul au efect toxic. Legarea HIV de membran i
penetrarea n celul, este asociat cu creterea volumului celular.
Celula pierde controlul influxului ionilor i al apei. Aceste
modificri s-au reprodus in vitro cu glicoproteina 120 de HIV.
Efectul toxic al glicoproteinelor virale este reversat de
antagonitii canalelor de Ca
2+
, utilizai n clinic pentru a atenua
anomaliile neurologice consecutive infeciei cu HIV.
La pacienii infectai cu HIV, o proporie semnificativ
de limfocite, dup stimularea cu antigenele virale, n loc s se
activeze i s se divid, se sinucid prin apoptoz, adic prin
activarea programului genetic al morii.
O alt cauz a imunodeficienei o constituie anergia
limfocitelor. Cele dou glicoproteine (120 i 41)rezult prin
clivajul enzimatic al proteinei precursoare 160. Clivajul
proteinei 160 este esenial pentru infeciozitatea viral.
Glicoproteina 120 asociat necovalent cu gp 41pe suprafaa
nveliului viral, este uor eliberat de pe suprafaa celulei i a
nveliului. Glicoproteina 120 sintetizat n exces, se gsete
liber(solubil) n snge i se leag de receptorul CD
4
,
producnd perturbri ale reactivitii imunitare, prin blocarea
reactivitii limfocitelor. Afinitatea interaciunii gp 120 cu CD
4

este conferit de resturile sale glucidice. Starea de anergie
poate fi reversat sub aciunea stimulatoare a IL-2. Complexele
imune gp 120-anti gp 120 s-au identificat pe suprafaa
limfocitelor, la pacienii infectai cu HIV.
120

HIV-1 infecteaz limfocitele TCD
4
, dar i monocitele,
macrofagele, celulele dendritice, celulele Langerhans, celulele
trofoblastice placentare, neuronii.
Scderea ampl a numrului de limfocite TCD
4
,
detectabil n testul transformrii blastice cu mitogene,
anuleaz funcia lor reglatoare asupra funciei imunitare.
Limfocitele viabile asigur persistena infeciei. Diminuarea
sintezei IL-2 ncetinete proliferarea i diferenierea
limfocitelor Tc. In absena celulelor Tc activate, multiplicarea
viral este necontrolat. Consecutiv scderii sintezei IL-2,
diminu activitatea macrofagelor i a celulelor NK.
La organismele infectate cu HIV, numrul limfocitelor B
este normal, iar concentraia imunoglobulinelor este de circa 10
ori mai mare dect la persoanele sntoase. Explicaia creterii
titrului anticorpilor este c, n absena limfocitelor TCD
4
,
celulele Ts nu-i ndeplinesc rolul fiziologic de a supresa
activarea limfocitelor B, diferenierea lor i sinteza Ig.
Limfocitele B se activeaz nespecific, policlonal. Se
sintetizeaz anticorpi la un titru crescut, dar nu au specificitate
anti-HIV i nu sunt protectori nici fa de ali ageni patogeni
sau potenial patogeni.
Dat fiind specificitatea interaciunii gp 120 cu receptorul
limfocitar CD
4
, s-a ncercat utilizarea CD
4
solubil ca agent
imunoterapeutic. Tulpinile virale de laborator au fost
neutralizate eficient de preparatele CD
4
, dar izolatele primare
de HIV-1 sunt relativ rezistente. Absena neutralizrii
infeciozitii s-a atribuit mecanismelor complexe de intrare a
virusului n celul. CD
4
solubil stimuleaz eliberarea gp 120
din nveliul viral, ceea ce determin creterea infeciozitii.
Grupurile cu risc major de mbolnvire sunt cele ale
homosexualilor i ale consumatorilor de droguri. Virusul se
transmite i pe cale heterosexual, mai ales la femei, care
transmit infecia ftului.

121

Tema 14.
Antigenele tumorale. Rspunsul imun antitumoral.

Dup malignizare, membrana citoplasmatic este cea mai
modificat structur celular. Semnalele reglatoare de control al
creterii i multiplicrii, care acioneaz n primul rnd prin
intermediul receptorilor membranari, nu-i mai gsesc inta
structural. Incapacitatea celulelor de a recepiona semnalele
reglatoare ale creterii i diviziunii sau de a rspunde adecvat
acestor semnale, este cauza principal a comportamentului invaziv
al celulelor maligne. Pierderea inhibiiei de contact este reflectarea
modificrilor suprafeei celulare.
Adeseori, malignizarea este nsoit de sinteza unor
molecule noi, localizate n oricare din compartimentele celulei i
care se comport ca antigene tumorale.
Orice structur chimic a celulei maligne, absent n sau pe
celulele normale ale esutului de origine a tumorii, susceptibil de
a induce o reacie imunitar la gazda primar sau dup injectare
la o nou gazd, poate fi considerat ca antigen tumoral.

Antigene tumorale
Se disting urmtoarele categorii de antigene tumorale:
1. Antigenele tumorale de difereniere, denumite i antigene
oncofetale, deoarece se gsesc att pe suprafaa celulelor unor
tumori, dar sunt prezente i n timpul unei faze de difereniere
embrionar. Ele lipsesc pe suprafaa celulelor organismului adult
sau se gsesc n cantiti foarte mici, nedectabile.
a) Antigenul carcinoembrionar (CEA) s-a izolat din sngele
unui pacient cu cancer de colon (1965). Este o glicoprotein de
180-200 kD, localizat pe membrana celulelor normale ale
tractului digestiv la ft, dar se gsete n cantiti foarte mici la
subiecii normali aduli.
La ft, CEA este sintetizat n celulele mucoasei gastro-
intestinale i este concentrat n glicocalix, pe suprafaa luminal a
122

acestor celule. In celulele embrionare normale, CEA pare a avea
rol n aderena celular, dar probabil favorizeaz metastazarea
celor maligne.
CEA este un grup foarte heterogen de molecule, cu o
cantitate foarte variabil de glucide. Raportul proteine/glucide
variaz ntre 1/1 i 1/5. Componenta glucidic este reprezentat, n
primul rnd, de acidul sialic. Imunogenitatea moleculei este
conferit de componenta proteic.
La adult, CEA se gsete n cantiti mici pe mucoasa
colonului, n plmn, n esutul mamar, dar reapare n cantiti
mari pe celulele maligne ale tractului digestiv uman (intestin
subire, pancreas, ficat, stomac, colon, rect). CEA se gsete nu
numai asociat suprafeei celulelor maligne, dar trece i n sngele a
60-80% dintre pacienii cu cancer de colon. Nu se cunoate
mecanismul prin care CEA ajunge n snge.
Din sngele pacienilor neoplazici, CEA sintetizat de
celulele maligne, este epurat la nivelul ficatului. De aceea, cele
mai mari concentraii de CEA apar la neoplazicii cu insuficien
hepatic (metastaze hepatice, ciroze).
CEA este un antigen nespecific, deoarece poate s apar, n
concentraii mici (10 ng/ml), n sngele unor pacieni cu maladii
nemaligne: la cei cu ciroz alcoolic a ficatului sau cu insuficien
renal, astfel c sperana detectrii cancerului prin depistarea CEA
n snge, s-a nruit.
Leziunile de orice natur ale mucoasei tractului
gastrointestinal sunt nsoite de creterea sintezei i secreiei CEA,
care trece i n snge: n maladia inflamatorie a intestinului, n
colita ulcerativ, polipi ai tractului digestiv, tumori ale tractului
gastrointestinal.
Unele tumori secret CEA, mai ales dup o metastazare
hepatic (adenocarcinomul colonului, tumorile de pancreas, ficat,
plmn).
Nivelul CEA foarte crescut, reflect o evoluie rapid a
tumorii.
123

b) Alfafetoproteina (AFP) este o glicoprotein major a
ftului timpuriu, o globulin normal (69 kD)a sngelui fetal uman
i a celorlalte mamifere, descoperit n 1956. Coninutul glucidic
este de 3,5%. Din punct de vedere structural, AFP este
asemntoare albuminei. Genele codificatoare ale celor dou
proteine au organizare similar. AFP se detecteaz n plasm la
embrionul de 4 sptmni i crete rapid n primul trimestru de
sarcin. Nivelul maxim (2-3 mg/ml) se gsete la ftul de 14
sptmni i scade la valorile caracteristice adultului, la vrsta de
6-10 luni. AFP se gsete nu numai n plasm, ci i n fluidele
fetale: lichidul amniotic, lichidul cerebrospinal, urin. Cantiti
mici de AFP (500 ng/ml) strbat placenta i se gsesc n serul
femeilor gravide.
n timpul vieii fetale, AFP se sintetizeaz n ficat, n
celulele gastrointestinale. La adultul normal, concentraia sa este
nedetectabil prin metodele imunochimice obinuite, dar crete n
neoplaziile de carcinom hepatic. Circa 70% din cancerele hepatice
primare sunt nsoite de creterea nivelului seric al AFP. AFP
crete i n alte neoplazii: testiculare, ovariene. Nu toate
hepatoamele i tumorile testiculare produc AFP, dar cele care
sintetizeaz aceast glicoprotein, o produc n cantiti foarte
mari.
Creterea concentraiei AFP n snge nu este totdeauna
asociat cu malignitatea: AFP crete n strile patologice de
hepatit viral, hepatit cronic, ciroz, fapt ce reflect
regenerarea celular.
AFP crete n maladiile inflamatorii ale intestinului: boala
Crohn, colita ulcerativ.
AFP este un marker util pentru depistarea cancerului hepatic
la populaiile cu risc nalt (chinezi, japonezi, eschimoi din
Alaska), dar este inutil pentru celelalte populaii, datorit
creterii nivelului su n afeciuni nemaligne.
n lichidul amniotic, nivelul crescut al AFP este asociat cu
defecte ale tubului neural (spina bifida).
124

2. Antigenele de transplantare a tumorilor (TATA = tumor
associated transplantation antigen).
a) Antigenele specifice de organ se exprim la un nivel nalt
pe celulele tumorale, n timp ce exprimarea lor pe celulele
normale este foarte sczut sau este limitat la un anumit stadiu al
dezvoltrii esutului.
Antigenul specific prostatei (PSA) este fosfataza acid
prostatic, o glicoprotein cu activitate proteolitic asupra gelului
seminal, pe care-l hidrolizeaz. PSA se gsete n esutul prostatic
normal, n adenomul benign i n carcinomul malign. Este produs
de celulele acinare ale prostatei. n ser, PSA este legat cu 1-
antichimiotripsina, ceea ce influeneaz valorile furnizate de
determinarea sa cantitativ.
PSA crete mult n cancerul prostatic, cel mai comun cancer
la vrsta de peste 75 se ani, dar crete i n hipertrofia prostatic
benign. Concentraia sa se coreleaz cu volumul prostatei, cu
stadiul cancerului prostatic, cu rspunsul la terapie.
Glicoproteinele mucinoase sunt antigene de suprafa
celular, cu greutate molecular mare.
Sunt formate dintr-o ax polipeptidic, de care se ataeaz
numeroase catene oligozaharidice. Glucidele reprezint 60-80%
din greutatea lor molecular. Sinteza glicoproteinelor mucinoase
este consecina pierderii controlului metabolismului celulei
neoplazice. Uneori, celula malign pierde capacitatea de sintez a
unor glicoproteine de suprafa, ca de exemplu antigenul de grup
sanguin A i sintetizeaz molecule absente n celulele normale.
Glicoproteinele mucinoase se exprim pe suprafaa celulelor
epiteliale i se detecteaz n ser, saliv, ori sunt adsorbite pe
eritrocite. Ele s-au identificat odat cu disponibilitatea anticorpilor
monoclonali: CA 15-3, CA 125, asociate cu cancerele ovariene,
CA 19-9, identificat ntr-o tumor colorectal (CA = cancer
associated). Modificarea cantitativ a glucidelor membranare
poate modifica dramatic malignitatea, influennd potenialul de
metastazare.
125

Markerii tumorali imunoglobulinici se identific prin
electroforeza serului sau a urinii. Aparin izotipurilor IgG, A, M,
E sau sunt catene k sau libere. Aproximativ, 1% din aduli
auproteine serice M (monoclonale), iar din acestea 25% au
semnificaie nedeterminat. 50% din totalul proteinelor serice M
sunt datorate mielomului multiplu. Determinarea proteinelor M n
snge sau urin este util pentru monitorizarea rspunsului la
terapie.
b) Antigenele specifice fiecrei tumori sunt antigene
individuale (TSTA = tumor specific transplantation antigen),
proprii fiecrei tumori. Sunt exprimate numai n celulele tumorale
i nu sunt niciodat detectabile n esuturile normale. Sunt
caracteristice tumorilor induse chimic (L. Gross, 1953). Chiar
tumorile multiple induse de acelai agent chimic (metilcolantren),
n acelai esut (tegument) al unui organism, sunt diferite n ceea
ce privete specificitatea antigenelor de transplantare. Aceasta
semnific faptul c informaia genetic declanatoare a
malignizrii, rezid n gene diferite, care sufer mutaie sub
aciunea agentului chimic.
Toate celulele unei tumori induse de metilcolantren sunt
identice din punct de vedere antigenic, fapt demonstrat
experimental: oarecele imunizat cu mojarat de celule tumorale,
respinge ulterior o gref de celule vii ale aceleiai tumori.
Datorit unicitii lor antigenice, fiecare tumor indus
chimic, stimuleaz imunitatea fa de antigenele proprii, iar
reaciile ncruciate sunt absente totdeauna.
Antigenele tumorale specifice de transplantare sunt
complexe glicoproteice sintetizate n celul i inserate n
membrana citoplasmatic.
Celulele maligne pot s prezinte simultan, att antigene
tumorale comune, ct i antigene specifice.
Tumorile care apar n mod natural sunt slab sau deloc
antigenice.
126

Nu se tie dac antigenele tumorale sunt prezente de la
nceput pe toate celulele tumorale sau dac celula devine malign,
fr s dobndeasc markerii distinctivi de malignitate. Antigenele
tumorilor induse de ageni chimici pot fi stabile i se transmit de
la o generaie celular la alta, dar majoritatea tumorilor induse de
ageni chimici, trebuie considerate heterogene din punct de vedere
antigenic, datorit instabilitii genetice.
Antigenele suprafeei celulelor maligne sunt supuse
modificrilor cantitative i calitative.
La om, 90% din tumori sunt induse de ageni chimici.
3. Antigenele de origine viral sunt comune i se gsesc la
toate tumorile induse de acelai virus, chiar la specii diferite.
Antigenele tumorilor induse de oncodnavirusuri sunt
codificate de programul timpuriu al informaiei genetice virale. De
exemplu, virusurile polioma i SV
40
induc tumori la animalele de
experien, iar virusul papiloma este implicat n geneza tumorilor
de cervix uterin uman.
Virusurile oncogene ADN induc sinteza antigenelor
tumorale cu localizare nuclear i membranar. Sunt proteine
nestructurale, care se disting de antigenele capsidei virale. In
celulele transformate cu oncodnavirusuri, nu se detecteaz
antigene capsidale, deoarece programul tardiv al genomului viral
nu este transcris i virusul progen nu este asamblat.
SV
40
codific sinteza a dou proteine virale (antigene
tumorale), de 94 i respectiv 17 kD, iar virusul polioma codific
sinteza a trei antigene, de 100, 55 i respectiv de 22 kD. Antigenul
T de 100 kD are o localizare aproape exclusiv nuclear i se
sintetizeaz att n celulele infectate productiv, ct i n cele
transformate. Antigenul de 55 kD este o protein fosforilat ce se
asociaz cu oncoproteina Src, o chinaz tirozin-specific,
codificat de protooncogena c-src. Interaciunea cu antigenul viral
produce o stimulare de circa 50 de ori a activitii chinazice a
oncoproteinei celulare Src.
127

Antigenele T sunt comune i pentru alte virusuri ale
grupului. Toate tumorile induse de un virus, au antigene comune,
chiar la specii diferite. Imunizarea organismului receptor de gref
de esut tumoral cu celule tumorale iradiate sau cu mojarat de
celule tumorale de acelai tip este protectoare fa de dezvoltarea
tumorii transplantate.
Antigenele T, codificate de oncodnavirusuri nu se gsesc n
structura virionului (proteine nestructurale). De aceea, virionii
inactivai nu imunizeaz i nu protejeaz organismul fa de
suspensia de celule tumorale omologe (transformate de acelai
virus).
Antigenele tumorale codificate de oncornavirusuri sunt
comune pentru toate tumorile induse de un virus, indiferent de
specificitatea antigenic a celulei. Majoritatea sunt antigene
proteice virale structurale, adic se regsesc n structura
virionului, ceea ce le deosebete net de antigenele codificate de
oncodnavirusuri.
Antigenele tumorilor induse de oncornavirusuri sunt
codificate de gena env i au specificitate de grup. Multiplicarea
oncornavirusurilor nu interfer cu capacitatea celulelor de a crete
i de a se divide. Deoarece antigenele tumorale sunt proteine
structurale ale virionilor, imunizarea organismului cu o suspensie
viral inactivat, confer protecie fa de celulele transformate de
virusul omolog.
Spre deosebire de antigenele induse chimic, care pot fi tari
sau slabe, antigenele codificate de virusurile oncogene sunt foarte
imunogene.
La om, circa 10% din totalul tumorilor sunt cauzate de
virusuri:
- carcinomul hepatocelular (indus de virusul hepatitei B)
- cancerul de col uterin (indus de papilomavirusuri HPV
16
,
HPV
18
)
- limfomul Burkitt i carcinomul nazofaringian (induse de
virusul Epstein-Barr)
128

- leucemia celulelor T mature (indus de HTLV-1).
4. Antigenele tumorale codificate de protooncogene.
Mutaiile punctiforme ale oncogenelor genele ce regleaz
creterea normal i diferenierea - i mutaiile genelor supresoare
ale oncogenelor, ca de exemplu, p53 i Rb, produc substituii ale
unui singur aminoacid n catena polipeptidic codificat, care le
transform n antigene tumorale, codificate de genom. Ele au
localizare nuclear, citoplasmatic sau membranar. S-au descris
peste 10 antioncogene (supresoare ale oncogenelor) i circa 100
de oncogene (de exemplu, genele ras), ale cror mutaii
punctiforme determin sinteza unor molecule cu substituii
punctiforme de aminoacizi, unice sau multiple i care se
deosebesc de moleculele normale. Antioncogena p53 codific o
protein nuclear, reglatoare a diviziunii celulare. In celulele
maligne, p53 se sintetizeaz n exces.
Dup localizare, antigenele tumorale sunt:
- antigene expuse la suprafaa celulei. Sunt cele mai
importante, deoarece sunt accesibile efectorilor rspunsului imun
(TSTA, TATA);
- antigene intracelulare, localizate n nucleu sau n
citoplasm.
Ambele categorii de antigene, se pot elibera fie din celulele
vii, fie dup necroz i se gsesc n circulaie, la distan de
tumor. Eliberarea lor poate stimula rspunsul imun sau are un
efect de blocare a reactivitii imunitare, prin fenomenul de
inundare antigenic.
Anticorpii antitumorali se obin prin injectarea celulelor
tumorale viabile, ori a mojaratului tumoral, la organismele altei
linii genetice sau altei specii, care poart alte molecule CMH.
Celulele vor fi respinse ca o gref alogenic. Antiserul conine
anticorpi anti-antigene tumorale, dar i anticorpi anti-antigene
CMH. De aceea, serul imun trebuie absorbit cu antigene tisulare
normale. Astfel s-a evideniat CEA la pacienii cu tumori de colon
i AFP la cei cu hepatoame. Antigenul evideniat de anticorpi n
129

serul absorbit poate fi un antigen tumoral sau un antigen normal,
exprimat abundent pe celulele tumorale.
Procesul dezvoltrii tumorii are loc n cteva trepte:
- transformarea celulei normale n celul malign
- creterea exponenial a celulei maligne i constituirea
tumorii primare
- angiogeneza
- invazia esutului nconjurtor
- intravazarea i eliberarea celulelor tumorale individuale, n
vasele sanguine i limfatice, unde trebuie s supravieuiasc
- oprirea celulelor tumorale n diferite localizri (ficat,
plmn etc.)
- extravazarea celulelor tumorale i invazia acestor esuturi
- creterea tumorii la noile situsuri de metastazare i
angiogeneza.
Fiecare etap a dezvoltrii tumorii este influenat de factori
imunologici i neimunologici. De exemplu, integrinele
condiioneaz interaciunile dintre celule. Cu ct aderena celulelor
maligne este mai bine exprimat, cu att tendina ei de metastazare
este mai limitat. Celulele maligne elibereaz unele componente
membranare, ca de exemplu, fibronectina. Pierderea fibronectinei
pare s determine scderea aderenei majoritii tipurilor de celule
maligne i precede metastazarea. Componentele glicocalixului
sunt eliberate sub aciunea proteazelor, pe care le secret celulele
tumorale. Proteazele (din categoria metaloproteazelor) modific
consistena substanei fundamentale a esutului conjunctiv,
degradeaz colagenul i proteoglicanii, uurnd metastazarea i
invazia.

Rspunsul imun antitumoral
Creterea anormal este prevenit prin diferite mecanisme
de control: mecanisme de reparare a ADN, aciunea genelor
supresoare ale oncogenelor (antioncogene) sau prin apoptoza
celulelor care au suferit leziuni ireversibile. Dac aceste
130

mecanisme nu mai sunt operative, celula continu s prolifereze.
Celula malign se afl ntr-o interaciune dinamic cu
micromediul, ce determin supravieuirea sau moartea ei.
Imunogenitatea tumorilor pentru gazd i stimularea
timpurie a rspunsului imun antitumoral a condus la formularea
conceptului imunosupravegherii, n acord cu care, organismele
elimin celulele potenial canceroase care apar n cursul vieii
individuale. Conform acestui concept, cancerul clinic este
consecina scprii celulelor maligne, de aciunea mecanismelor
protectoare. De aceea, factorii care interfer cu reactivitatea
imunitar, predispun la malignitate. In concepia actual,
malignizarea este rezultatul activrii oncogenelor sau pierderii
funciei genelor supresoare ale oncogenelor (antioncogene).
Teoria supravegherii imune afirm c sistemul imunitar,
monitorizeaz constant organismul, pentru apariia celulelor
tumorale i c majoritatea acestor celule aberante suntdetectate i
lizate de sistemul imunitar, nainte de a produce tumori clinice.
Aa se ntmpl cu celulele tumorale intens imunogene.
Majoritatea (sau toate) celulele tumorale care apar spontan, sunt
imunogene i rspunsul imun inhib creterea tumorii.
Argumentele n favoarea sau contra acestei teorii sunt greu
de obinut. Ele sunt extrapolate din observaii asupra tumorilor
clinice.
Dispariia spontan a tumorilor i recuperarea complet a
pacienilor cu cancer diseminat, este rar, dar exist i este
explicat prin insuficiena vascularizaiei, prin procese de
difereniere a celulelor tumorale, prin mecanisme psihosomatice.
O explicaie imunologic, este c raportul dintre creterea tumorii
i rspunsul imun antitumoral este n favoarea rspunsului imun.
Exist dovezi care sugereaz c organismul uman rspunde la
prezena tumorilor, prin mecanisme imunitare:
- regresia spontan, n special a meloanoamelor maligne, a
carcinoamelor renale, a neuroblastomului i retinoblastomului,
semnalat n peste 100 de cazuri publicate;
131

- unele tumori evolueaz latent, o lung perioad, adic
cresc foarte ncet sau sunt complet inactive i apoi brusc
metastazeaz. Latena se poate explica prin echilibrul dintre
tumor i sistemul imunitar;
- frecvent tumorile sunt infiltrate cu celule mononucleare:
limfocite, monocite, puine plasmocite. Celulele T i macrofagele
sunt prezente abundent n tumorile umane, sugernd un rspuns
imun antitumoral. Celulele T activate fa de tumora autolog, s-
au izolat din cteva tipuri de tumori(melanom malign, carcinom
renal, cervical). Ele recunosc peptide asociate cu moleculele CMH
I, care sunt represate n celulele normale sau peptide derivate din
proteinele mutante;
- carcinoamele asociate cu reacie inflamatorie evolueaz
mai lent dect cele care nu manifest un rspuns inflamator;
- tumorile sunt mai frecvente la organismele foarte tinere
(datorit imaturitii sistemului imunitar) i la cele vrstnice
(datorit senescenei sistemului imunitar);
- anumite categorii de tumori (cancerele de piele cu
papiloma virus, limfoamele pozitive pentru antigenele EBV) au o
inciden crescut la pacienii cu transplant, supuiimunosupresiei.
Imunosupresia prelungit (20 de ani), este asociat cu creterea
incidenei tumorilor de origine viral, n timp ce incidena
celorlalte categorii de tumori, crete foarte puin. Dovezile clinice
sugereaz c rspunsul imun este orientat predominant fa de
infecia cu virusuri oncogene i neoncogene, iar rata apariiei altor
tumori este relativ nemodificat. Aceasta arat, indirect, c
supravegherea antitumoral este relativ ineficient. Datele
experimentale sprijin ideia c supravegherea imun este
orientat, n primul rnd, fa de virusuri oncogene ADN i nu fa
de oncorna- sau fa de tumorile induse de agenii chimici
carcinogeni.;
- celulele metastatice sunt comune la pacienii cu cancer, dar
frecvena implantrii lor i creterea tumorilor secundare este
mic.
132

Efectorii rspunsului imun antitumoral
Dac sunt prezente, multe antigene tumorale stimuleaz
rspunsul imun la animalele de experien i pot induce o stare de
rezisten antitumoral fa de celulele transplantate. Rspunsul
imun antitumoral are o eficien foarte variabil, n funcie de
natura antigenelor. Astfel, antigenele induse de virusurile
oncogene sau ale tumorilor induse de radiaiile UV, sunt foarte
imunogene i stimuleaz rspunsul imun protector, iar antigenele
de transplantare ale tumorilor induse chimic sunt slabe. Tumorile
care apar spontan la animale i la om sunt puin antigenice i
induc un rspuns imun de mic intensitate.
Antigenele asociate celulelor tumorale sunt recunoscute ca
nonself, de sistemul imunitar al gazdei, dar tumorile secret
antigene solubile, care tind s produc fenomenul de inundare
antigenic i paralizie imunitar.
Rspunsul imun antitumoral este humoral i celular.
Anticorpii specifici, de cele mai multe ori, nu au eficien
antitumoral. Cel mai adesea, celulele tumorale supravieuiesc
aciunii factorilor humorali i se multiplic. Ineficiena aciunii lor
s-a demonstrat n experiene cu celule maligne nchise n camere
poroase, permeabile numai pentru molecule, amplasate n
cavitatea abdominal a unor organisme imunizate cu mojarat de
esut tumoral. Anticorpii sunt efectori eficieni fa de celulele
maligne de origine limfoid (leucemii, limfoame). Dup activarea
complementului, se produce liza celulei int.
Efectorii imunitii antitumorale sunt celulele. Rolul lor s-a
demonstrat cu acelai gen de experimente, cu celule maligne
plasate n camere poroase, care permit trecerea celulelor efectoare
ale rspunsului imun. Rezultatul aciunii celulelor imunitare este
liza celulei int.
Imunitatea celular antitumoral este mediat de celule
capabile s lizeze celulele int, prin interaciune specific sau de
celule care nu necesit procese de recunoatere specific.

133

Rolul celulelor NK
Celulele NK sunt cei mai importani efectori ai imunitii
antitumorale. Aciunea lor nu este limitat de identitatea
moleculelor CMH i i exercit efectul prin contact direct.
Celulele NK nu necesit prezentarea antigenului de ctre celulele
accesorii. Mecanismul molecular al interaciunii lor cu celula int
nu este cunoscut.
Activitatea celulelor NK se modific cu vrsta: are nivel
sczut la natere, atinge maximum la pubertate i scade gradat cu
vrsta. Activitatea lor fa de celulele maligne, in vitro, este invers
proporional cu nivelul moleculelor CMH I, exprimate pe
suprafaa celulelor maligne. Exprimarea moleculelor CMH I poate
duce chiar la scparea celulelor tumorale de a fi recunoscute de
celulele NK, in vivo. Se presupune c celulele NK controleaz
celulele pentru nivelul expresiei CMH I. Celulele care au pierdut
total sau parial moleculele CMH I, par a fi recunoscute ca inte i
lizate. Deoarece aciunea celulelor NK nu este restrictiv n raport
cu moleculele CMH, ele sunt active fa de celulele tumorale
singenice, alogenice i chiar xenogenice.
Importana funcional a celulelor NK pentru protecia
antitumoral este argumentat de faptul c liniile de oareci
congenital atimici sau cei timectomizai neonatal au un numr
mare de celule NK
Celulele K interacioneaz cu celula int prin intermediul
receptorilor pentru Fc . Celula tumoral tapetat cu IgG este
astfel uor recunoscut de celulele K. Ele se activeaz i lizeaz
celula int prin fenomenul ADCC.
Activitatea celulelor NK i K din snge, testat in vitro,
scade odat cu progresia tumorii. La contactul cu celula malign,
direct sau mediat de anticorpi, celula efectoare elibereaz factori
citotoxici solubili: perforina, proteaze, TNF-, limfotoxina (TNF-
). Mecanismul eliberrii factorilor litici este acelai, descris
pentru limfocitulTc.
134

Celulele NK, activate in vitro de IFN- i de IL-2, se
numesc LAK (celule killer activate de limfochine).
Activarea celulelor NK i K nu produce memorie imun. Nu
exist diferene ntre rspunsul imun primar i secundar.
Citotoxicitatea mediat de macrofage
Macrofagul neactivat (de la indivizi normali) exprim un
nivel minim de citotoxicitate antitumoral.
Macrofagul activat distinge celulele tumorale de celulele
normale i poate s omoare selectiv, celulele tumorale. Activitatea
sa citotoxic este independent de moleculele CMH, dar este
dependent de factori genetici.Macrofagul se activeaz n
urmtoarele situaii:
- dup ce leag prin receptorul pentru Fc, moleculele de
imunoglobulin fixate pe determinanii antigenici ai celulei
maligne sau complexele IgAg tumoral solubil;
- sub aciunea factorilor eliberai de celulele T sensibilizate
(IFN )
- sub aciunea endotoxinelor bacteriene
- sub aciunea antigenelor de Mycobacterium, Listeria,
Toxoplasma sau dup infecia cu aceste microorganisme
intracelulare.
Activarea const n amplificarea ratei metabolice i
macrofagul devine killer potenial al celulelor tumorale.
Macrofagul activat nu interacioneaz cu antigenele tumorale
specifice, dar ca i celulele NK, pare s disting ntre celulele
maligne i cele normale, prin mecanisme moleculare necunoscute.
Macrofagele activate secret diferite molecule antitumorale:
- enzime hidrolitice care degradeaz esutul conjunctiv
- IFN-, activator al celulelor NK
- TNF- (caectina) cu efect stimulator asupra altor celule
care elibereaz IL
- H
2
O
2
i produi de oxidare a glucozei, cu efect toxic direct
asupra celulei int, prin perturbri membranare
135

- oxidul nitric (NO), toxic pentru celulele maligne. NO se
formeaz prin combinarea oxigenului cu azotul derivat din
dezaminarea enzimatic oxidativ a L-argininei. Reacia este
catalizat de nitric-oxid-sintaz. NO mediaz citotoxicitatea
macrofagului, dependent de L-arginin.
Una din cauzele primare ale patologiei maligne este
metastazarea, adic eliberarea celulelor din situsul tumorii
primare, pentru a iniia la distan, creterea unei noi tumori.
Celulele metastazate au aceleai antigene de suprafa, ca i
tumora primar. Principalele situsuri de metastazare sunt
ganglionii limfatici, plmnul, ficatul.
n studiile experimentale, macrofagele activate s-au dovedit
a fi foarte eficiente n reducerea incidenei metastazelor unor
tumori.

I munitatea mediat de celulele T
Imunitatea antitumoral mediat de celulele T, ca
mecanism, este analog rspunsului imun fa de alte antigene T-
dependente (de exemplu, antigenele CMH). Experienele in vitro
au evideniat c antigenele tumorale stimuleaz proliferarea
tuturor subpopulaiilor de limfocite T (Th, Ts, Tc). Funciile
efectoare ale limfocitelor T sunt stimulate de limfochine i
monochine (IL-1 i TNF- ), sintetizate i secretate de
macrofagele care prezint antigenele tumorale solubile.
IL-1 stimuleaz proliferarea celulelor B, T i NK. IL-1
produce i rspunsul febril n reacia inflamatorie, iar TNF-
determin necroza celulelor tumorale.
Limfocitele TCD
4
(i NK) secret IL-2, cu efect stimulator
asupra celulelor care o secret.
IFN este secretat de celulele TCD
4
(i NK) i activeaz
macrofagele i celulele NK. Interferonul are efect antitumoral
direct, dar este i imunomodulator.
Limfocitele Tc au rol important n liza celulelor tumorale,
dac acestea exprim molecule CMH I. Interaciunea limfocitului
136

Tc cu celula malign este specific. Limfotoxina produs de
limfocitul Tc are efect litic direct asupra celulelor tumorale.
Celula tumoral expune pe suprafaa ei, antigene asociate cu
moleculele CMH I, dar elimin i molecule solubile, care sunt
preluate de CPA i prezentate limfocitelor Th. Acestea secret IL-
2, activatoare pentru toate tipurile de celule cu funcie imunitar,
specific sau nespecific.
n concluzie, reacia imun fa de celulele tumorale are
dou trepte. In prima etap sunt activate celulele efectoare
nespecifice (macrofage, eozinofile, neutrofile, celule NK) i se
produce o reacie inflamatorie local. Reacia nespecific uureaz
reacia imun specific, prin diminuarea ratei de cretere a
tumorii i creterea nivelului de prezentare a antigenelor tumorale
de ctre celulele maligne, prin modularea exprimrii moleculelor
CMH. In faza a II-a, celulele Tc asigur protecia imun fa de
creterea tumorii.
Celulele efectoare ale imunitii mediate celular, specific i
nespecific, sunt eficiente n detectarea i liza celulelor tumorale
izolate i transplantate. Deoarece detecteaz celulele tumorale
izolate, ele sunt eficiente n prevenirea metastazelor, dar sunt
ineficiente fa de celulele care constituie o microtumor.

Mecanisme de scpare a celulelor tumorale
Antigenele tumorale se gsesc pe suprafaa celulelor
tumorale. Ele sunt antigene TSTA, mai concentrate sau mai
diluate. Antigenele CMH normale nu dispar, dar diminu
cantitativ.
Creterea tumorilor, n condiiile activrii rspunsului imun,
nu este explicat satisfctor. S-au propus mai multe mecanisme
prin care celulele tumorale evit recunoaterea de ctre efectorii
rspunsului imun. Cnd sistemul imunitar este alertat, esutul
tumoral este prea dezvoltat i nu mai poate fi nlturat.
De cele mai multe ori, tumora nu este imunogen. Lipsa
imunogenitii nu se datoreaz absenei antigenelor tumorale, ci
137

faptului c celulele tumorale nu sunt eficiente n prezentarea
antigenului.
Cel mai surprinztor i cel mai studiat mecanism de evitare
a rspunsului imun este modularea antigenic. Fenomenul
modulrii antigenice definete capacitatea tumorii de a masca sau
de pierde antigenele, n prezena efectorilor imunitari. De
exemplu, celulele leucemice transplantate la oarecele imunizat cu
mojaratul celulelor leucemice care conin antigenul TL, au pierdut
antigenul TL, dar antigenul reapare dup transplantul celulelor
leucemice la oarecii care nu au anticorpi serici anti-TL.
Imunoselecia. Antigenele exprimate pe suprafaa celulelor
tumorale activeaz rspunsul imun mediat celular, iar antigenele
solubile stimuleaz sinteza anticorpilor. Unele celule tumorale, ca
rezultat al instabilitii genetice, pierd antigenele iniiale i astfel
evit efectorii rspunsului imun specific. Ele devin dominante n
masa tumorii. Noile variante antigenice induc rspunsul imun
specific, dar fenomenul schimbrii specificitii antigenice se
repet. Rspunsul imun nu induce schimbarea specificitii
antigenice a suprafeei celulei maligne, ci selecteaz celulele care
au suferit modificarea antigenic i astfel au devenit rezistente la
aciunea efectorilor imunitari.
Diminuarea reactivitii imunitare pe cale natural sau
artificial este nsoit de creterea incidenei neoplaziilor.
Imunosupresia natural este mediat de limfocitele Ts. Antigenele
tumorale par s activeze mai uor celulele Ts dect limfocitele Th.
Limfocitele Ts sunt mai numeroase la pacienii neoplazici i pot
s represeze rspunsul imun pn la ineficien total.
Celulele tumorale secret citochine cu aciune
imunosupresoare, prin efectul lor inhibitor asupra
interleuchinelor. Celulele maligne produc IL-10, detectat n
lichidul peritoneal i n serul pacientelor cu cancer ovarian sau cu
alte neoplasme intraperitoneale. IL-10 inhib exprimarea
moleculelor CMH II pe suprafaa monocitelor i macrofagelor i
138

diminu reactivitatea imunitar prin efectele sale multiple asupra
limfocitelor, monocitelor, celulelor NK i celulelor dendritice.
Reactivitatea imunitar poate s diminue datorit mascrii
antigenelor tumorale. De exemplu, sialomucina, abundent pe
suprafaa celulelor unor tumori, mascheaz antigenele tumorale i
le face inaccesibile recunoaterii imunitare i efectorilor imunitari.
Sialomucina poate fi ndeprtat, in vitro, prin tratamentul
celulelor cu neuraminidaz deVibrio cholerae i celulele i
dobdesc sensibilitatea la aciunea litic a efectorilor imunitari.
Diminuarea reactivitii imunitare se poate datora
inundrii organismului cu antigenele tumorii. Fiind o celul foarte
activ din punct de vedere metabolic, componentele membranei
sale au un turn-over ridicat. Antigenele eliberate se complexeaz
cu anticorpii specifici sau cu receptorii specifici ai limfocitelor,
fcndu-i ineficieni n recunoaterea celulelor maligne. Efectul
imunosupresor al antigenelor tumorale este proporional cu
dimensiunile tumorii i dependent de existena metastazelor.
Efectul de inundare cu antigenele tumorii este argumentat
de experienele de transplant tumoral. Numrul celulelor
transplantate este determinant pentru dezvoltarea tumorii.
Grefarea unui numr mic de celule (prin injectarea suspensiei)
este urmat de respingere, iar grefarea unui numr mare de celule
este urmat totdeauna de creterea tumorii. Dup ce organismul a
respins un numr mic de celule maligne transplantate, se va apra
fa de un numr progresiv crescnd de celule de acelai tip.
Imunitatea de transplantare fa de antigenele tumorale poate fi
depit de un numr de 100-10 000 mai mare de celule tumorale,
dect numrul de celule necesar grefei tumorii la animalele
neimunizate.
Efectul imunosupresor al tumorii. Pacienii purttori de
tumori mari nu rspund la antigenele tumorale, iar limfocitele lor
in vitro, au o slab activitate citotoxic fa de celulele tumorale
autologe.
139

Antigenele tumorale exercit un efect imunosupresor n
gradient. La un situs ndeprtat de tumor, efectul imunosupresor
diminu i inoculul mic de celule tumorale este respins. Dup ce
tumora a dobndit dimensiuni importante, efectul imunosupresor
este sistemic. Antigenele tumorale circulante se asociaz cu
celulele efectoare ale sistemului imunitar, chiar n sngele
circulant, producnd paralizia rspunsului imun.
Creterea tumorii poate fi stimulat prin fenomenul de
enhancement imunitar. Fenomenul de enhancement, descoperit
experimental, se definete ca un proces de intensificare a creterii
tumorii, n prezena anticorpilor specifici. Tumorile au fost
transplantate la organisme imunizate cu mojarat celular al
aceleiai tumori, pentru sinteza anticorpilor specifici. Anticorpii
nu numai c nu resping celulele grefate, ci determin un efect
invers, de stimulare a creterii tumorii, comparativ cu creterea sa
la animalele neimunizate. Anticorpii cu efect de enhancement sunt
IgG, la titru mic.
Fenomenul de enhancement se explic astfel:
- anticorpii ar putea induce un efect imunosupresor,
deoarece prin feed-back inhib sinteza anticorpilor potenial
citolitici;
- anticorpii de enhancement sunt citofili, adic se leag
specific pe suprafaa celulelor tumorale, formndu-se complexe
Ag-Ac, care blocheaz fizic ataarea efectorilor humorali sau
celulari.
Evoluia tumorii este condiionat, ntr-o oarecare msur,
de tipul anticorpilor care se sintetizeaz.
Tolerana imunitar este un mecanism eficient de scpare a
celulelor tumorale de aciunea efectorilor sistemului imunitar.
Tolerana se datoreaz lipsei de reactivitate a limfocitelor Tc i B,
care la contactul cu antigenele tumorale nu se sensibilizeaz i nu
genereaz rspunsul imun, dei fa de alte antigene, reactivitatea
imunitar este normal. Tolerana survine datorit stimulrii
repetate cu cantiti mici de antigene, dar un rol esenial n
140

inducerea toleranei imunitare pare s revin raportului dintre
limfocitele Th i Ts.
Diferite produse tumorale, altele dect antigenele, pot s
interfere cu funcia imunitar i s favorizeze instalarea toleranei
imunitare. De exemplu, prostaglandinele diminu nivelul
exprimrii moleculelor CMH II pe suprafaa celulelor
prezentatoare de antigen i pot de asemenea s suprime activitatea
celulelor NK.
Factorii genetici, neidentificai, influeneaz evoluia
tumorii. Unele neoplazii sunt asociate cu incapacitatea
limfocitelor T de a activa rspunsul imun, probabil datorit
incapacitii lor de a recunoate antigenul.
n concluzie, micile acumulri de celule tumorale,
stimuleaz rspunsul imun. Dar, chiar tumorile imunogene
continu s creasc la gazdele imunocompetente, datorit
eficienei sczute a rspunsului imun antitumoral in vivo.
Tumorile evit aciunea distructiv a efectorilor imunitari sau
blocheaz chiar rspunsul imun.
Abordri terapeutice ale neoplaziilor
Terapia neoplaziilor este abordat pe urmtoarele ci:
chirurgical, radioterapia, chimioterapia i imunoterapia. Oricare
ar fi modalitatea de tratament, este necesar reducerea prealabil a
masei tumorale prin rejecie chirurgical.
Terapia chirurgical are ca scop reducerea dimensiunilor
tumorilor solide, n stadiile timpurii ale neoplasmelor de sn,
colon, plmn, prostat - cele 4 maligniti majore la om, ce
reprezint peste 50% din totalul tumorilor solide.
Radioterapia poate fi primar sau secundar. Cea primar se
practic n cancerele capului, gtului i n maladia Hodgkin
(neoplazie a ganglionilor limfatici, din diferite regiuni ale
corpului). Radioterapia este mai eficient pentru esuturile moi, n
arii adiacente maxilarelor i cilor nazale. Iradierea total se
practic nainte de transplantul mduvei osoase i este foarte
eficient pentru anumite leucemii acute, refractare la
141

chimioterapie i pentru tratamentul unor tumori solide (cancer de
sn), care au revenit dup civa ani de remisiune.
Chimioterapia const n tratamentul cu medicamente
citotoxice, majoritatea fiind produse de sintez chimic. Scopul
chimioterapiei este de a omor selectiv celulele maligne, deoarece
au o rat superioar de cretere i diviziune. Cele mai sensibile la
chimioterapie sunt leucemiile. Efectul medicamentelor citotoxice
este dependent de doz. Dozele prea mici nu produc efect, iar cele
mari au efecte toxice asupra organismului, n special asupra
mduvei osoase i asupra celulelor cu o rat mare de diviziune.
Doza se calculeaz la aria de suprafa corporal, preferabil
raportrii la greutate. Majoritatea agenilor citotoxici se
administreaz intravenos, calea oral fiind adecvat pentru
ciclofosfamid (i pentru tamoxifen).
Agenii chimioterapeutici, n funcie de mecanismul aciunii
lor, aparin mai multor clase.
Agenii alchilani induc formarea legturilor transversale
stabile ntre cele dou catene ale AND (prin legarea de N
7
a
guaninei) i inhib replicarea moleculei de ADN. Interaciunea
poate s se produc cu una sau cu ambele catene ADN. Alchilarea
guaninei induce mperecherea anormal cu timina sau depurinarea
prin excizia resturilor de guanin. Consecina este ruperea catenei
de ADN. Dac legtura transversal se face ntre resturile de
guanin ale celor dou catene, excizia reparatorie poate s rup
molecula de ADN i s rezulte o mutaie letal pentru celul.
Agenii alchilani reacioneaz chimic cu gruprile sulfhidril,
amino, hidroxil i fosfat. Aciunea lor nu are specificitate de faz a
ciclului celular, dar celulele sunt mai sensibile n faza G
1
i S.
Efectul se manifest prin blocarea ciclului celular dup faza G
2
.
Mecanismul rezistenei dobndite la agenii alchilani poate
s conste ntr-o retenie sczut a agentului n celul, n creterea
sintezei compuilor sulfhidril cu greutate mic i n creterea
capacitii de reparare a leziunilor ADN. Dei au mecanisme
asemntoare de aciune, diferenele structurii moleculare reduc
142

gradul rezistenei ncruciate ntre compuii subclaselor majore.
Efectele secundare sunt gastrointestinale (grea, vom) i
hematologice (mielosupresie).
Ciclofosfamida este cel mai folosit agent alchilant, n
tratamentul malignitilor hematologice i a tumorilor solide. Este
convertit la forma activ n ficat
Compuii platinei (cisplatin, carboplatin) nu sunt ageni
alchilani, dar acioneaz printr-un mecanism similar, adic se
leag de N
7
al guaninei i realizeaz legarea ncruciat a
catenelor de ADN. Se leag i cu alte molecule: adenina, citozina,
ARN, proteine.
Antimetaboliii (citarabina, fluorouracil, metotrexat,
mercaptopurina, hidroxiureea) sunt analogi ai bazelor azotate i
inhib sinteza ADN, ARN sau sinteza proteinelor. Sunt ageni cu
specificitate de faz a ciclului celular.
Antagonitii pirimidinelor. Citarabina (Ara-C) este un
compus cu specificitate de faz S. Este metabolizat n celul la
forma activ, ara-CTP, inhibitor al ADN-polimerazei i al sintezei
ADN. Ara-C este ncorporat n ADN i blocheaz alungirea
catenei, ca i legarea fragmentelor n molecula de ADN nou
sintetizat.
Antagonitii purinelor. 6-mercaptopurina i 6-tioguanina
sunt convertite la forma nucleotidic de hipoxantin-guanin
fosforibozil transferaz (HGPRT). Metaboliii lor inhib unele
enzime ale cii purinice. Unii metabolii ai
6-tioguaninei sunt ncorporai n ADN i n ARN.
Fludarabina este analog al adeninei. Derivatul su,
fludarabin-trifosfat, acioneaz prin inhibiia ADN-polimerazei i
ribonucleotid-reductazei i prin ncorporarea n ADN
Antagonitii acidului folic (metotrexat, aminopterina) sunt
analogi structurali ai acidului folic.
Alcaloizii din plante (vincristina i vinblastina, izolai din
Vinca rosea), produc agregarea tubulinei i dezorganizarea
microtubulilor celulari. Vinblastina este toxic pentru mduva
143

hematopoetic, iar vincristina are efecte toxice majore asupra
terminaiilor nervoase periferice, producnd neuropatii senzoriale
(parestezie, adic lipsa senzaiei de durere) i motorii, n degete.
Pentru un numr mare de categorii de tumori, chimioterapia
determin o citoreducere important. Dar, la cteva luni sau la
civa ani, creterea tumoral este reluat i continu chiar n
condiiile reinstituirii tratamentului. Creterea reflect dobndirea
rezistenei specifice la medicamentele administrate.
n general, dezvoltarea rezistenei la un medicament este
considerat ca rezultat al unei rate nalte a mutaiilor celulelor
maligne, consecina fiind apariia unor subpopulaii heterogene,
din care unele sunt rezistente la diferite medicamente. Cea mai
important mutant este cea cu rezisten medicamentoas
multipl, mediat de glicoproteina P, o glicoprotein
membranar, care funcioneaz ca o pomp de eflux, dependent
de energie. Pompa elimin activ din celul, o varietate de ageni
citotoxici: alcaloizii din plante, antibioticele (dactinomicina,
doxorubicina, daunorubicina) i unii ageni sintetici (melphalan).
Celulele maligne mutante, care exprim gena codificatoare a
glicoproteinei P, sunt rezistente la o larg varietate de
medicamente anticanceroase.
Imunoterapia ncearc s distrug celulele maligne, prin
manipulri de stimulare a reactivitii a sistemului imunitar.
Injectarea citochinelor sau stimularea in vitro, cu IL-2, a
limfocitelor autologe, obinute din sngele pacientului, are efecte
stimulatoare asupra rspunsului imun. Rareori s-a produs
remisiunea complet a neuroblastomului, a carcinomului renal sau
a melanomului malign, ceea ce evideniaz c rspunsul imun fa
de aceste neoplazii poate fi stimulat.
Cea mai obinuit form de terapie imun a neoplaziilor este
utilizarea anticorpilor monoclonali (AMC) cu specificitate
tumoral, cuplai cu toxine (toxina difteric, toxina de ricin) sau
cuplai cu ageni chimici (I
131
, medicamente citotoxice), ce
suprim proliferarea celular. In ansamblu, terapia cu AMC nu a
144

reuit. Cele mai frecvente tumori (de colon, de sn, de plmn, de
prostat) poart antigene proteice intracelulare, inaccesibile AMC.
Strategiile chimioterapeutice au progresat mult i ofer mai multe
anse de reuit, la un pre de cost inferior.
n tratamentul limfoamelor celulelor B se folosesc AMC
anti-idiotipici fa de imunoglobulina membranar a limfomului.
Stimularea nespecific a esutului limfoid este o metod
terapeutic introdus de G. Math. El a administrat BCG pentru
terapia leucemiilor limfoblastice la copii. Remisiunile se
prelungesc ca durat. Celulele de Corynebacterium parvum au
efecte antitumorale, n asociere cu chimioterapia, iar celule de C.
parvum i BCG injectate direct n masa tumorii, inhib creterea
tumorii. Antigenele bacteriene stimuleaz imunitatea mediat
celular. Celulele limfoide sunt atrase n numr mare la locul
injectrii i aciunea lor este orientat asupra celulelor tumorale.
Macrofagele se activeaz la contactul cu antigenele bacteriene i
dobndesc proprieti citotoxice fa de celulele tumorale,
evideniate in vitro.
Interferonul (produs de leucocite) se utilizeaz n
tratamentul unor leucemii i n tratamentul limfoamelor, dar este
toxic, ceea ce impune limitarea dozei. Majoritatea pacienilor,
dup administrarea interferonului, fac un sindrom al strii
gripale: febr, senzaie de frig, dureri de cap, dureri musculare.
Aceste simptome diminu pe parcursul terapiei i sunt controlate,
parial, cu diferii ageni farmacologici.
Imunoprofilaxia cu vaccinuri, pentru anumite virusuri, a
avut succes la animale. Boala lui Marek, produs de un
herpesvirus, este o maladie limfoproliferativ la puii de gin.
Incidena leucemiei felinelor a sczut, ca rezultat al unui program
de vaccinare. Nu exist vaccinuri protectoare fa de neoplaziile
umane.

145

BIBLIOGRAFIE
1. Bicu A. Bacteriologie i imunologie. Editura universitar
Carol Davila, Bucureti, 2011.
2. Bona C., Bonilla F. Textbook of Immunology. Harwood
Academic Publishers, Amsterdam, 1996.
3. Carasevici E., Dumitriu I., Cianga C., Cianga P., Zugun-Eloae P.
Curs Imunologie. Bucureti, 1999.
4. Cristea V. Imunologie fundamental. Casa Crii de tiin Cluj-
Nappoca, 1999.
5. Dejica D. Tratat de imunologie clinic. Ed. Dacia, Cluj-
Napoca, 1999.
6. Delves P., Roitt I. Encyclopedia of Immunology. vol. 1-4, sec.
ed., 1998, Acad. Press.
7. Ierima A. Alergologie. Ed. Evrika, Brila, 2002.
8. Ierima A. Imunologie clinic. Ed. Evrika, Brila, 2005.
9. Male D., Champion B., Anne Cook. Advanced Immunology. J.B.
Lippincot Company, 1987.
10. Mihescu G. Imunologie i imunochimie. Bucureti, 2001.
11. Patrick S., Larkin M.J. Immunological and molecular aspects of
bacterial virulence. J. Wiley & Sons, 1995.
12. Roitt I. M. Essential Immunology. ninth edition, 1997,
Blackwell Science.
13. Weir D. M., Stewart J. Immunology. seventh edition, Longman
Group, UK, 1993.
14. Zarnea G. Tratat de Microbiologie, vol. IV Imunobiologie. Ed.
Academiei Romne, 1990.
15. Zarnea G., Mihescu Gr. Imunologie. Ed. Universitii
Bucureti, 1995.
16. . . - , 1998.
17. A. . ., 2007.
18. . . , 2009.
19. ., . . ,
2009
20. A. . .:-. 2010 ., 752 .