GENOMICA

FUNCIONAL
Bazele moleculare ale bolilor monogenice
Boli metabolice congenitale
Boli monogenice dominante i recesive
Conf. dr. Cristina Rusu
1. Bolile monogenice: definiie, frecven, etio-patogenie.

2. Tipuri de boli monogenice n funcie de modul de
transmitere.

3. Tipuri de boli moleculare.

4. Boli genetice produse prin mutaii dinamice.
U.M.F IAI
PROBLEME:
1. BOLILE MONOGENICE (B.MG.) :
DEFINIIE, FRECVEN, ETIO-PATOGENIE
B. MG = afeciuni produse de mutaii ale unei singure
gene (An) sau ale unei singure perechi de gene (aa);

se transmit ereditar conform legilor lui Mendel: AD; AR; LX
boli mendeliene repertoriate n catalogul Mendelian
Inheritance of Man (MIM sau OMIM = versiunea online);

anamneza familial i arborele genealogic = metod
important de diagnostic;
la unele B.MG se cunoate defectul primar i secundar
(mutaiile i proteinele anormale) = boli moleculare; identificarea
proteinelor i genelor mutante = diagnostic molecular
U.M.F IAI
BOLILE MONOGENICE (B.MG.) frecven:
B. MG. sunt
numeroase (peste 10.000);
rare individual, dar frecvena lor global = 2-3%nn;
se manifest la orice vrst
~ 90% la copil,
~ 10% dup pubertate, inclusiv variante monogenice
ale unor boli comune ale adultului;
afecteaz orice organ, structur celular i proces
metabolic;
au deseori consecine importante pentru bolnav i
familia sa.
U.M.F IAI
BOLILE MONOGENICE (B.MG.) etio-patogenie:
B. MG. sunt produse de mutaii diferite n aceeai
gen, care pot avea 4 categorii de efecte asupra
proteinelor codificate:
pierderea funciei,
ctig de funcie,
dobndirea de funcii noi,
expresia anormal temporal sau spaial.
Cunoaterea lor este important pentru
tratamentul B.MG, diferit n funcie de efect.
U.M.F IAI
Bolile monogenice: etio-patogenie
a) Mutaii cu pierderea funciei proteinei:
reducerea / abolirea funciei proteinei heterozigoii (N/A)
vor avea totui 50% protein normal;

frecvent organismul funcioneaz normal i heterozigoii N/a
sunt sntoi:
mutaia (boala) se transmite Autosomal Recesiv (AR);
ex. deficienele enzimatice erori de nscute metabolism.

alteori haploinsuficiena ( 50%) produce boal:
fie proteina codificat este necesar n cantiti mari; ex.
mutaia genei pt elastin ex. stenoza aortic
supravalvular din Sdr. Williams;
fie are un efect dominant negativ: proteina anormal
codificat de gena mutant se fixeaz pe proteina N
codificat de alela normal i complexul dimeric devine
nefuncional (ex. bolile de colagen - osteogenesis
imperfecta);
mutaia (boala) se transmite Autosomal Dominant (AD), deoarece
gena anormal blocheaz funcia genei normale;
U.M.F IAI
Bolile monogenice: etio-patogenie
b) Mutaii cu ctig de funcie a proteinei:
fie crescnd cantitatea de protein sintetizat (ex., mielina n
nervii periferici n boala Charcot Marie -Tooth = neuropatie
motorie i senzorial ereditar);
fie amplificnd funcia normal a proteinei (ex. activarea
permanent a unui receptor n absena ligandului; ex, FGFR3 n
acondroplazie).
Se transmit AD.
c) Mutaii cu dobndirea unei funcii noi
ex. normal alfa-1-antitripsina inhib elastaza (produs de
bacterii la locul infeciei) efect benefic; unele mutaii ale genei
inhib trombina tulburare de coagulare, uneori letal.
d) Mutaii cu expresie anormal temporal sau spaial
a genei
ex., persistena hemoglobinei fetale (22);
mutaiile proto oncogenelor proliferare anormal.
U.M.F IAI
Bolile monogenice: etio-patogenie
Mutaii diferite n aceeai gen:

fenotipuri asemntoare clinic dar diferite prin
intensitatea de manifestare = heterogenitate alelic (ex.
Distrofia muscular Duchenne > DM Becker);

fenotipuri diferite = heterogenitate clinic
ex., mutaii n gena RET :
cu pierdere funcie megacolon congenital
(b. Hirschprung);
cu ctig funcie neoplazii endocrine multiple
(MEN2A).

se pot transmite diferit: AR sau AD.
U.M.F IAI
2. TIPURI DE BOLI MONOGENICE
N FUNCIE DE MODUL DE TRANSMITERE
(a) BOLI CU TRANSMITERE AUTOZOMAL DOMINANT

Peste 50% din OMIM;
Afecteaz (la diverse vrste) circa 2 % nn.

Multe dintre ele sunt frecvente i au consecine serioase:
hipercolesterolemia familial,
boala polichistic renal AD a adultului (ADPKD),
neurofibromatoza 1,
boala Huntington,
polipoza adenomatoas familial,
cancere ereditare de sn sau colon etc.
U.M.F IAI
Tipuri de boli monogenice n funcie de modul de transmitere
CRITERII TRANSMITERE AD:

fiecare bolnav are un printe afectat;
boala este prezent n fiecare
generaie (continuitate; transmitere vertical);
indivizii sntoi nu transmit boala
- excepii: penetran redus, mutaii noi, debut
tardiv, heterogenitate genetic, non-
paternitate (v.LP);
boala se manifest i se transmite egal
de ambele sexe;
transmiterea tat fiu este posibil i
caracteristic;
orice bolnav (An) are un risc de 50% de
a avea descendeni bolnavi;
- riscul este valabil la fiecare sarcin;
U.M.F IAI
Tipuri de boli monogenice n funcie de modul de transmitere
(b). BOLI CU TRANSMITERE AUTOZOMAL
RECESIV

1/3 din B. MG se transmit AR;
Cele mai frecvente boli AR n populaia
european:
hemocromatoza,
fibroza chistic sau mucoviscidoza,
surditatea congenital (unele forme),
fenilcetonuria,
atrofia muscular spinal,
sindromul adrenogenital etc
U.M.F IAI
Tipuri de boli monogenice n funcie de modul de transmitere
CRITERII TRANSMITERE AR:

Bolnavul (aa) primete o gen mutant
de la fiecare din prini (sntoi i
purttori: Na);
- motenirea se face prin ambii prini;

Doi prini sntoi pot avea copii
bolnavi (fete i biei);
discontinuitate n succesiunea
generaiilor (transmitere orizontal);

Boala se manifest i se transmite egal
de ambele sexe;

Riscul unui cuplu de indivizi normali i
heterozigoi de a avea un copil bolnav
este de 25%
- la fiecare sarcin;
- indiferent de sex.
U.M.F IAI
Tipuri de boli monogenice n funcie de modul de transmitere
(c). BOLI CU TRANSMITERE LEGAT DE X

Circa 500 de gene situate pe cromozomul X produc, prin mutaie, fenotipuri
anormale;
boli mai frecvente: hemofilia, distrofia muscular Duchenne, cecitate pt
culori (daltonismul), deficiena n G6PD;
Muli geneticieni nu mai clasific bolile legate de X n recesive legate de X
(RLX) i dominante legate de X (DLX), deoarece:
mutaia genei se exprim la brbat (hemizigot) indiferent dac este
dominant sau recesiv.

la femeile heterozigote X
N
/ X
A
, datorit fenomenului de inactivare
ntmpltoare a cromosomului X, alela mutant dominant sau recesiv -
se exprim n 50% din celule;

mprirea este ns util deoarece fenotipurile dominante se exprim
constant la heterozigote n timp ce fenotipurile recesive nu se manifest
de obicei la heterozigote .
U.M.F IAI
Transmiterea recesiv legat de X
Bolnavi sunt numai brbaii
(X
a
Y) care:
au primit gena mutant de la
mame sntoase dar purttoare
(X
N
X
a
); transmitere oblic;
Brbaii bolnavi NU transmit
niciodat boala, deci nu pot avea
copii bolnavi, dar fetele lor vor fi
purttoare sntoase (Na)

Doi prini sntoi pot avea
copii bolnavi, dar numai biei
U.M.F IAI
3. TIPURI DE BOLI MOLECULARE
Bolile moleculare pot fi clasificate n funcie de activitatea
proteinei normale:
1) boli enzimatice (erori nscute de metabolism),
2) boli prin erori ale proteinelor de transport,

3) boli prin anomalii ale proteinelor structurale,

4) boli prin anomalii ale proteinelor de semnalizare,
5) boli prin anomalii ale proteinelor de control a
homeostaziei extracelulare
U.M.F IAI
(1) BOLI ENZIMATICE
(erori nnscute de metabolism)
Produse (n majoritate) prin mutaii cu pierderea
funciei, care se transmit autozomal recesiv;

deficiena unei enzime produce un bloc metabolic , cu 4
tipuri de consecine:

U.M.F IAI
1
2
3
4
Boli enzimatice
Intereseaz toate metabolismele; multe pot fi diagnosticate prenatal
sau dup screening neonatal.

Exemple:
FENILCETONURIA (cod OMIM 261600) mutaii gen PAH
incapacitatea transformrii fenilalaninei n tirozin acumulare metabolii
toxici: tulburri neurologice, retard de cretere i retard mental. Screening
i diagnostic neonatal + terapie dietetic (fr fenilalanin) dezvoltare
NORMAL;
GALACTOZEMIA (cod OMIM 230400) mutaii gen GALT
deficit de galactozo-1-fosfat-uridil transferaz acumularea de
galactoz: hepatomegalie, cataract, tulburri neurologice i retard mintal;
BOLI LIZOZOMALE : deficitul enzimelor lizozomale
acumulare substrat n lizozomi SNC, miocard, ficat:
Sfingolipidoze: b. Gaucher; b. Fabry etc
Mucopolizaharidoze : b. Hurler, b. Morchio etc
Mucolipidoze : ex. sialidoza etc
BOLI PEROXIZOMALE tulburri metabolism lipidic
U.M.F IAI
U.M.F IAI
PREZENTARE CAZ
FENILCETONURIA
(AR)
Fenilcetonuria (AR):
- Gena PAF (12q22);
- Deficien Fenil-alanin-
hidroxilaz acumulare
acid fenilpiruvic toxic
- 1:15.000 nn
- RM + convulsii +
hipopigmentaie
Albinism
Screening neonatal: test Guthrie
Control pozitiv cu
concentraii fen
bolnav
TRATAMENT DIETETIC


PREZENTARE CAZ
U.M.F IAI
GALACTOZEMIA
Galactozemia (AR):
- Gena GALT (9p13)
- deficien G1PUT
acumulare galactoz
- 1:50.000 nn
- hepatomegalie ciroz,
- cataract, retard mental
- Insuficien renal


PREZENTARE CAZ
U.M.F IAI
BOLI LIZOZOMALE:
SFINGOLIPIDOZE B. FABRY
Boala Fabry (RLX):
- Gena GLA (Xq22)
- deficien alfa-galactozidaz A acumulare glicolipide
- 1:100.000 nn
- angiokeratoame difuze (cutanate, viscerale)
- INSUFICIEN RENAL
-Tratament - fabrazime


PREZENTARE CAZ
U.M.F IAI
BOLI LIZOZOMALE:
MUCOPOLIZAHARIDOZE B. HURLER
Boala Hurler (AR):
- Gena IDUA (4p16)
- deficien alfa-1-iduronidaz acumulare MPZ (heparan sulfat)
- 1: 100.000 nn
- hipostatur
- facies grosier (gargoilic),
- macroglosie,
- hepato- spleno megalie
- cataract,
- retard mental
(2) BOLI PRIN ANOMALII ALE
PROTEINELOR DE TRANSPORT
Trei categorii:

Proteine de transport tranmembranar:
Canale: aquaporinele i canalele ionice,
Molecule cru (familia SLC solute carrier);
Pompe ionice;
Transportori ABC (ATP-binding cassette);
Proteine de transport intracitoplasmatic:
Hb; dinein, kinezina etc

Proteine de transport plasmatic:
apolipoproteinele etc.
U.M.F IAI
Fibroza chistic
Boli prin anomalii ale proteinelor de transport
FIBROZA CHISTIC (AR)
(mucoviscidoza)
Prevalen bolnavi 1:2500 iar purttori sntoi (Na) - 1:25 !!!

Afectarea glandelor exocrine:
plmni: gld. mucus (vscos) inf.resp. repetate
broniectazie,
pancreas exocrin malabsorbie,
Intestin ileus meconial
sudoripare ( Na i Cl),

Gena CF (sau ABCC7 pe 7q31) proteina CFTR = canal clor;
Mutaia F508 = 70%

Posibiliti de diagnostic prenatal i screening neonatal
U.M.F IAI
(3) BOLI PRIN ANOMALII ALE
PROTEINELOR STRUCTURALE
Trei categorii:
Citoschelet celular (actin, microtubuli etc)
Sferocitoza ereditar etc
Distrofia muscular Duchenne,

Proteine de structur membranar adeziune celular (CAMs)
i comunicare intercelular;
Epidermoliza buloas etc

Proteine matrice extracelular: colagen, elastine, fibriline etc
Osteogenesis imperfecta, sdr. Alport etc ( colagen),
sdr Ehlers-Danlos; Stenoza aortic supravalvular ( elastin ),
Sdr. Marfan ( fibrilin ), etc
U.M.F IAI
Boli prin anomalii ale proteinelor structurale
MICROSFEROCITOZA EREDITAR
(AD)

Prevalen bolnavi 1:5000

Gena SPTA (1q21) spectrina (structura citoschelet membranar)

Globule roii ~ microsferocite anemie hemolitic
splenomegalie
U.M.F IAI
U.M.F IAI
PREZENTARE CAZ
DISTROFIA MUSCULAR DUCHENNE
DM DUCHENNE (RLX):
- Gena DMD (Xp21) distrofin
- 1: 3.500 nn biei
- degenerare rapid muchi dificulti, apoi imposibilitate mers
paralizii deces
N DMD
Boli prin anomalii ale proteinelor structurale
U.M.F IAI
OSTEOGENESIS
IMPERFECTA
OSTEOGENESIS IMPERFECTA (AD):
- Gena COL1A1 (7q22) - colagen
- fracturi multiple la traumatisme minime, sclere albastre, surditate
PREZENTARE CAZ
Boli prin anomalii ale proteinelor structurale
U.M.F IAI
EHLERS - DANLOS
EHLERS - DANLOS (AR sau AD):
- Gena COL5A1 (9q34) colagen
- 1: 20.000 nn
- hiperelasticitate cutanat
- hiperlaxitate / mobilitate arrticular
PREZENTARE CAZ
(4) BOLI PRIN ANOMALII ALE PROTEINELOR
CE CONTROLEAZ COMUNICAREA
INTERCELULAR I CONTROLUL DEZVOLTRII
Patru categorii:
Proteine de semnalizare intercelular (conexine, integrine, etc)
Surditate neurosenzorial, displazii ectodermale etc

Hormoni peptidici (hipofizari, insulina, endorfine etc) i
factori de cretere (EGF, PDGF, citokine etc)
Deficit hormon cretere; diabet insipid etc

Receptori membranari sau intracelulari (R hormoni)
Hipercolesterolemia familial,
Acondroplazia etc
Sdr. Morris

Proteine implicate n transducia semnalului
Neurofibromatoza 1 etc
Boala polichistic renal a adultului (ADPKD)

Factori de transcripie ex. sdr Rubinstein-Taybi etc
U.M.F IAI
U.M.F IAI
HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAL (AD):
- Gena FH (19q13) - receptor LDL
-1: 500 nn
- hipercolesterolemie
- ateroscleroz coronarian
Boli prin anomalii ale receptorilor
U.M.F IAI
ACONDROPLAZIA (AD):
- Gena FGFR3 receptor FGF
-1:10.000 NN
- talie f. mic, disproporionat, pe seama membrelor (rizomelic)
- craniu mare
PREZENTARE CAZ
Boli prin anomalii ale receptorilor
U.M.F IAI
Boli prin anomalii ale proteinelor
implicate n transducia semnalelor
NEUROFIBROMATOZA 1 (AD):
- Gena NF1 neurofibrina (protein supresoare a creterii tumorale)
-1:3.000 NN
- afectarea celulelor derivate din creasta neural:
- melanocite pete cafe au lait; pistrui axilari
- schwann neurofibroame
- noduli irieni (Lish)
PREZENTARE CAZ
NEUROFIBROMATOZAA
(5) BOLI PRIN ANOMALII ALE PROTEINELOR
IMPLICATE N CONTROLUL HOMEOSTAZIEI
Trei categorii:
Proteine responsabile de aprarea autoimun
Agamaglobulinemii etc

Proteine implicate n hemostaz
Hemofilia A i B,
Deficit factor V etc

Proteine implicate n inhibiia proteazelor
Deficitul de alfa-1-antitripsin,
Angioedemul ereditar (deficit C1) etc
U.M.F IAI
4. BOLI GENETICE
PRODUSE PRIN MUTAII DINAMICE (INSTABILE)
(EXPANSIUNEA REPETIIILOR
TRINUCLEOTIDICE)
Mutaiile dinamice prin glisarea / deraparea
replicativ a repetiiilor trinucleotidice mperecheate
incorect.
Se produce o cretere moderat a nr repetiiilor
instabilitate dar fr manifestri clinice = premutaii.
n meioz unuia dintre prini (efect parental) cretere
peste un anumit prag mutaie complet boal.
n succesiunea generaiilor nr de repetiii crete
progresiv boala apare la vrste mai mici i este mai
sever (anticipaie)
U.M.F IAI
BOLILE MAI FRECVENTE PRODUSE PRIN MUTAII
DINAMICE
U.M.F IAI
Boal Transm.
ered
Gen Localizare Repetiia Nr. repet.
stabile
Nr. repet.
instabile
Sdr. X
fragil
LX FMR1 Xq27 (CGG)n 6-54 >200
Distrofia
miotonic
AD DMPJ 19q13 (CTG)n

5-35 >50
Boala
Huntington
AD HD 4p16 (CAG)n

10-26 >36
Ataxia
Friederich
AR FRDA 9p13 (GAA)n

5-35 >50
U.M.F IAI
PREZENTARE CAZ
SINDROMUL X FRAGIL (RLX):
- Gena FMR1 (Xq27) proteina FMR
-1:2.000 NN biei i 1;4000 nn fete
- 1:2.600 femei purttoare ale
premutaiei (60-200 CGG)
- mutaie >200 CGG
- RM +facies particular +macro-orhidism
U.M.F IAI
PREZENTARE CAZ
SINDROMUL X FRAGIL (RLX):
RLX: brbai
bolnavi din mame
purttoare
Particulariti:
brbai purttori; femei bolnave
Amplificarea premutaiei prin meioza matern
65 = numrul de copii CGG
MEDICINA MOLECULAR
Elucidarea
mecanismelor
moleculare ale
bolilor
O nou TAXONOMIE
Subtipuri genotipice
DIAGNOSTIC MOLECULAR
(presimptomatic; predispoziie genetic)
NOI INTE I METODE TERAPEUTICE
PREDICIE I PROFILAXIE PERSONALIZAT
(riscul individual)
TERAPIE INDIVIDUALIZAT
(farmacogenomic)
n loc de . CONCLUZII
BOLILE POLICHISTICE RENALE (PKD)
Boli genetice, sistemice (cu manifestri renale i extra-renale).

Tipuri diferite ca manifestare, vrst de debut i transmitere
ereditar

Importante n practica medical:
frecvena global de ~ 1: 800 nn vii;
a treia cauz major de IRCT
(7 10% din bolnavii dializai);
risc mare de recuren n familie.
BOLILE POLICHISTICE RENALE:
pe baza patogeniei moleculare au fost
regrupate ntr-o singur categorie
ADPKD,

ARPKD,

NEFRONOFTIZIILE (6),

sindroamele sau bolile sistemice
cu chiti renali (BBS, MGS, OFD-1;
TS i VHLS)

generate prin defecte diferite
produse ns n acelai releu
funcional (ce produce n final chiti)
(P. Wilson, 2004)
BOLILE POLICHISTICE RENALE
Identificarea genelor precum i a mutaiilor
permite un diagnostic exact i precoce:
presimptomatic i prenatal
BOLILE POLICHISTICE RENALE
Descifrarea mecanismelor moleculare:
n formarea chitilor dou etape
Prima etap: iniierea formrii chitilor
ncepe n perioada fetal i continu lent dar progresiv toat
viaa
Mutaiile genelor PKD produc creterea excesiv a
proliferrii celulare;

A doua etap: expansiunea chitilor
tardiv i progresiv;
produs de creterea secreiei intrachistice de fluide.
BOLILE POLICHISTICE RENALE
Descifrarea mecanismelor moleculare:
Ambele etape se produc prin anomalii ale
proteinelor ce controleaz comunicarea
intercelular i dezvoltarea celular :
proteine implicate n transducia semnalului;
Progresele recente n descifrarea
mecanismelor moleculare ale cistogenzei
au dus la identificarea unor noi inte
terapeutice n PKD
INHIBAREA PROLIFERRII
CELULELOR TUBULARE
INHIBAREA SECREIEI
CONCLUZII
...publicarea schiei GU nu nseamn c practica
medical va fi brusc i radical schimbat dar, cu
siguran, n urmtoarele 2 decenii medicina
genomic va transforma profund medicina clinic
(Getting Ready for Gene-based Medecine
H. Varmus, N.Engl.J .Med, 2002)

Trebuie s fim pregtii s nelegem i aplicm
medicina genomic (molecular).

... n stadiul actual avem nevoie de cunotine, vocabular i, mai
ales, de un concept larg despre rolul genomicii pentru a evita
RISCUL DE A NU NELEGE MEDICINA VIITOARE
(Dumont-Driscoll - 2002)