Curs 8: Magia prelucrarii i prezentarii

antigenului

Prelucrarea antigenului
Legarea si asimilarea antigenului
Nivelurile sczute de particule sau antigene solubile
Nivelurile ridicate de particule sau antigene solubile
Proteine virale sau proteine tumorale produse intracelular
Prelucrarea antigenului
Prelucrarea de catre MHC clasa I
TAP (transportor cu prelucrare de antigen)
Prelucrarea de catre MHC clasa II
Lanul invariabil
Interaciunea peptid antigenic-MHC
Prezentarea antigenului
Prezentarea antigenului ctre celulele T
Recunoaterea asociata de peptide antigenice i MHC
Superantigene
Celulele prezentatoare de antigen
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

 Pentru a menine supravieuirea organismului, celulele sistemului

imunitar trebuie s fie capabile s recunoasc i s elimine antigenele
care intr n organism. Antigenele care nu intr uor in celula, cum ar fi
bacteriile sau proteine mari, sunt recunoscute de celule numite celule
prezentatoare de antigen (APC), cum ar fi macrofage sau limfocite B.
Aceste celule sunt numite celule prezentatoare de antigen (APC),
deoarece acestea internalizeaza antigenul i il prelucreaz pentru
prezentare la receptorii specifici asociati cu limfocite T CD4+.
n contrast, antigenele care intra n celul si locuiesc in interiorul
celulei, cum ar fi virusurile, sunt prelucrate de ctre celula gazd pentru
prezentare la receptori specifici asociati cu limfocitele T CD8 +.
Antigenul este prezentat ca o secven peptidic scurt n asociere cu
o protein de suprafa celular codificata n interiorul complexului
major de histocompatibilitate (MHC) de catre celulele prezentatoare
de antigen. Astfel, moleculele MHC prevd prezentarea extracelulara
de peptide antigenice care au fost internalizate i prelucrate n mediul
intracelular.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

LEGAREA SI ASIMILAREA ANTIGENULUI

Legarea i asimilarea antigenului n celul depinde de
starea fizic a antigenului i de tipul de celule implicate.
NIVELURI SCAZUTE DE PARTICULE SAU ANTIGENE SOLUBILE
Nivelurile scazute de antigen se leag la un receptor specific de
imunoglobulin exprimat pe celulele B i sunt internalizate printr-un
proces cunoscut sub numele de endocitoz.
De asemenea, antigenele se pot lega de receptorul lor specific cu
ajutorul unei imunoglobuline ataata la un macrofag prin receptorii
pentru poriunea Fc ai imunoglobulinei. In acest mod, imunoglobulina
legata de receptorul Fc capteaz antigenul, iar complexul receptor de
antigen-imunoglobulin-Fc sufera procesul de endocitoza. Aceste
antigene se vor asocia cu moleculele MHC clasa II dup prelucrare.
NIVELURI RIDICATE DE PARTICULE SAU ANTIGENE SOLUBILE
Nivelurile ridicate de antigen sunt nghiite nespecific de catre
macrofage prin fagocitoza. Aceste antigene se vor asocia cu
moleculele MHC clasa II dup prelucrare.
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

PROTEINE VIRALE SAU PROTEINE TUMORALE PRODUSE INTRACELULAR

Aceste antigene scapa de legarea i de preluarea de ctre celulele B i
macrofage. Proteinele mari produse de virusuri sau tumori vor fi
degradate de celulele somatice intracitoplasmatic n peptide mai mici i
se vor asocia cu molecule MHC clasa I. Antigene extracelulare preluate
prin fagocitoza sau endocitoz merg direct la endozomi i/sau la lizozomii
pentru degradarea antigenului i legarea pe moleculele MHC clasa II.
Enzimele endozomale i/sau lizozomale descompun proteinele n
fragmente peptidice coninnd o secven scurta de aminoacizi.
Moleculele MHC clasa II nou sintetizate vor fi transportate de la nivelul
reticulului endoplasmatic (RE) la endozomi si/sau lizozomi, unde se vor
asocia cu fragmente de peptide derivate din antigene extracelulare. Pe de
alt parte, proteinele antigenice intracelulare sunt transformate n peptide
mici n proteozomi, care conin proteaze.
Aceste peptide se vor atasa la proteine transportatoare care le vor muta la
RE pentru a interaciona cu moleculele nou sintetizate MHC clasa I.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

Calea de procesare a HLA Clasa I

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

PROCESAREA ANTIGENULUI

Prelucrarea antigenului implic degradarea antigenului intern sau extern n

secvene peptidice scurte i asocierea peptidelor cu molecule MHC. Dou clase
distincte de molecule MHC, MHC clasa I i MHC clasa II, regleaza prezentarea
antigenelor la celulele CD8 + sau CD4 + .
Localizarea antigenului, extracelular sau intracelular, determin care dintre
moleculele MHC vor lega peptida. Peptidele derivate din proteine antigenice care
sunt stocate n interiorul celulei, cum ar fi proteine virale, se leag de molecule
MHC clasa I, n timp ce peptidele derivate din proteine antigenice care se afl
iniial n afara celulei, cum ar fi fie proteine bacteriene sau proteine mari ataate
de haptene mici, se leaga de moleculele MHC clasa II.

CALEA DE PRELUCRARE MHC clasa I

Protein antigenica -> proteozom -> fragment de peptid eliberat in citosol ->
legare de proteine TAP -> transport la RE
Lan clasa I nou sintentizat i microglobulina 2 -> trasnport la ER -> calnexina se
leag la lanul -> fragmentul de peptid i microglobulina 2 se leag la lanul > eliberarea unui lan de calnexina -> complexul este transportat la aparatul Golgi
-> glicozilare n aparatul Golgi -> formarea veziculelor de secreie -> eliberare la
nivelul membranei plasmatice.
Lanul alfa nou sintetizat i beta-2-microglobulina a moleculei MHC clasa I sunt
sintetizate i translocate prin ribozomii la reticulului endoplasmatic (RE) si nu
interacioneaz numai ntre ele, ci i cu fragmente de peptide antigenice procesate
de proteozomi.
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

TAP - TRANSPORTOR ASOCIAT CU PRELUCRARE DE ANTIGEN

TAP este o protein care transport peptide mici n citosol la

RE, astfel nct acestea s poat fi legate de molecule MHC
clasa I.
Pentru ca peptidele antigenice mici situate n citosol sa se
ataeaze la molecule de clasa I, acestea trebuie transportate
din citosol la RE de o proteina transportor, TAP, care este
specifica pentru dimensiunile peptidului i secvena de
aminoacizi.
Prin acest mod, de legare a peptidelor mici antigenice, TAP
exclude posibilitatea ca moleculele de clasa I sa lege proteine
mari neprelucrate. Din RE, complexul peptid antigenic
molecula clasa I trece in aparatul Golgi, unde are loc
glicozilarea nainte de exportul complexului la suprafaa
celulei.
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

CALNEXINA

Calnexina este o protein membranara integrala de transport de 88-kd a RE care

se leag la lanul al MHC clasa I dup eliberarea din ribozom n lumenul RE astfel
nct lanul nu va prsi RE pn cnd nu leag att o secven peptidica scurta
i o 2 microglobulin.

Moleculele de clasa I din RE care sunt n ateptare pentru a lega peptidele sunt
pstrate n RE prin legarea calnexinei de lanului .

Pentru ca moleculele de clasa I sa treaca de la RE la aparatul Golgi, calnexina

trebuie s se decupleze de lanul . Aceast decuplare a calnexinei de lanul
necesit ca att secvena peptidic scurta i 2 microglobulina sa se lege de lanul
. Dupa decuplarea de calnexina, complexul microglobulina-peptid cu caten 2
este transportat ctre i prin aparatul Golgi pentru glicozilare i apoi ntr-o
vezicul secretoare care se mic la exteriorul membranei plasmatice. Rezultatul
acestui proces de control i echilibru este faptul c nici o molecula MHC clasa I
libera nu este prezenta pe suprafaa celulei pentru a lega antigene exogene.

In acest mod, receptorul celulei T CD8 + se concentreaz asupra celulelor care

sunt infectate n mod activ i, astfel, exprima o peptid antigenic a agentului
infecios intracelular n locusul de legare a MHC clasa I.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

BREFELDIN

Brefeldin A este un medicament care blocheaz specific

trecerea complexelor peptide antigenice - MHC clasa I prin
aparatul Golgi, si nici un complex peptid antigenica-MHC
clasa I nu este exprimat pe suprafaa celulei.
Daca acest medicament este prezent, complexul MHC de
clasa I-peptid antigenic se va acumula intracelular i nu
vor fi detectate pe suprafaa celulei.
Acest lucru va arta c micarea complexelor prin aparatul
Golgi , i glicozilarea lor, sunt eseniale pentru ambalarea
complexelor n vezicule secretorii pentru exprimare la
suprafaa celulei.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

10

CALEA DE PRELUCRARE MHC clasa II

Protein antigenic -> endozom/lizozom -> fragment de peptid
nou sintetizata de molecule clasa II -> transport la RE i se leaga cu
proteine lan -> transport la aparatul Golgi -> transport la
endozomi/lizozomi -> eliberare de molecule clasa II -> moleculele
clasa II se leag de fragmentele de peptide antigenice -> transport
la suprafaa celulei.
Spre deosebire de moleculele de clasa I, moleculele MHC de clasa II
se asociaza cu fragmente de peptide antigenice care sunt derivate
de la antigene exogene care au fost endocitate n endozomi/
lizozomi la nivelul citosolului. Moleculele nou sintetizate de clasa II
sunt transportate la RE i apoi direct la aparatul Golgi. Din Golgi,
moleculele de clasa II se misca fie in endozomi sau lizozomi, unde se
leag de fragmente de peptide, spre deosebire de fragmentele de
peptide de legare in RE aa cum se ntmpl pentru molecule de
clasa I.
O molecul care ajut la reglarea transportului specific pentru
moleculele de clasa II la endozomi/lizozomi si pentru legarea
fragmentului de peptid se numete lan invariant.
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

11

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

12

Calea de procesare a HLA Clasa II

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

13

LANTUL INVARIANT
Lanul invariant direcioneaz micarea moleculelor de clasa II nou
sintetizate n aparatul Golgi i apoi in compartimentul endolitic.

Lanul invariant de asemenea, previne legarea peptidelor antigenice

la molecule de clasa II, cel puin pn cnd molecula de clasa II
ajunge in compartimentul endolitic, unde peptidele antigenice i
moleculele de clasa II se leag mpreun pentru prima dat.
Este nc un punct de dezbatere cu privire la locatia exacta a
locusul de legare a peptidelor pe moleculele de clasa II, dar cele
mai multe date arat c legarea are loc n cadrul endozomilor sau
lizozomilor unde mediul devine din ce in ce mai acid.
Astfel, o combinaie de pH i proteaze acide n cadrul endozomilor/
lizozomilor scindeaz lanul invariant din molecula de clasa II i
expune situsul de legare la peptide.
Complexul peptid antigenic-molecul clasa II MHC, se mut la
suprafaa celulei.
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

14

Clorochina

Clorochina este un medicament care ridic efectiv pH-ul endozomilor i

lizozomilor, fcnd astfel mediul mult mai bazic.
Un mediu bazic n aceste compartimente previne degradarea proteinelor n peptide
mici antigenice. Utilizarea acestui medicament mpiedic procesarea antigenului i, n
consecin, previne producerea de peptide antigenice care se leaga de moleculele
MHC clasa II n endozomi. Acesta este un instrument experimental care este folosit
pentru a arta c procesarea antigenului este necesar pentru a obine un rspuns
imun conditionat de MHC clasa II.
Analiza acestor molecule prin cristalografie cu raze X arat c fiecare gen HLA
codific regiuni ale moleculei intacte care furnizeaz un locus de legare pentru
secvene peptidice scurte de antigen. Natura variabil a moleculei MHC este
localizata n primul rnd la aceste locusuri de legare de peptide, care permit
gazdei s prezinte o multitudine de antigene invadatoare. Toate moleculele MHC
de pe suprafaa unei celule particulare prezentatoare de antigen leag aceeai
secven linear de aminoacizi din antigenul prelucrat. In acest mod, toate
complexele MHC-peptid de pe suprafaa unei APC sunt capabile de a se asocia cu
un singur receptor specific al celulelor T.
Lungimea secvenei peptidei n asociere cu molecule MHC este importanta, deoarece
cu cat mai scurt este lungimea peptidului antigenic, cu att mai probabil este ca
proteinele prezente n mod normal n celula vor conine, de asemenea, aceeai
secven de aminoacizi. Aceast posibilitate nseamn c celulele imune ar putea
recunoate proteinele proprii i sa reacioneze mpotriva lor. Prin urmare, peptidele
antigenice trebuie s aib o lungime care s asigure recunoaterea acestora de ctre
15
receptorul celulei T ca antigen.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

INTERACTIUNEA PEPTID ANTIGENIC-MHC

Peptidele care se leag la locusurile MHC clasa I sunt, de
obicei, ntre 8 i 10 aminoacizi lungime, n timp ce peptidele
care se leag la MHC clasa II sunt, de obicei, ntre 12 i 24
aminoacizi.
Secvena peptidic se leag strns la molecula MHC n mai multe
puncte, astfel c recunoaterea de ctre receptorul celulei T poate
avea loc nainte ca peptida sa se decupleze de molecula MHC.
Cerina pentru ca o secven de peptid scurta sa se lege la
molecula MHC nseamn c cele mai multe antigene proteice
trebuie s fie dezmembreze n peptide mai mici pentru a distruge
structura secundar i teriar a antigenelor mari proteice. Unele
proteine antigenice, cum ar fi insulina externa, necesit dezintegrare
limitat pentru a expune epitopul antigenic necesar legarii la
molecula MHC, n timp ce altele, cum ar fi fibrinogenul extern, nu
necesita dezmembrare.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

16

Procesarea si prezentarea antigenului MHC clasa II

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

17

Procesarea si prezentarea antigenului MHC clasa I

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

18

PREZENTAREA ANTIGENULUI
PREZENTAREA ANTIGENULUI LA CELULELE T
Prezentarea antigenului este, strict vorbind, activarea celulelor T, prin
intermediul receptorilor de celule T, care recunosc specific peptide
antigenice n asociere fie cu MHC clasa I sau molecule MHC clasa II pe
suprafaa celulelor prezentatoare de antigen (APC).
Este demn de remarcat faptul c celulele B sunt capabile sa recunoasca i
sa lege anumite antigene fr restricii din partea MHC din cauza
receptorilor lor antigenici de suprafa celular, de imunoglobulin sau
anticorp.
Celula T este celula primar care rspunde la prezentarea antigenului.
Celulele T recunosc antigenul doar n contextul moleculelor MHC
adecvate. Prin urmare self MHC este necesar pentru prezentarea
antigenic efectiv a celulelor T, care sunt activate pentru a oferi ajutor
celulelor T sau pentru a deveni citotoxice.
Celulele T CD8+, de obicei, citotoxice, recunosc antigenul numai n
asociere cu moleculele de clasa I MHC. Celule T CD4+, de obicei celulele
T-helper, sunt limitate la recunoaterea antigenului numai n asociere cu
molecule MHC clasa II.
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

19

RECUNOASTEREA ASOCIATA A PEPTIDULUI

ANTIGENIC SI MHC

Dou teorii pot explica cerina ca un antigen dependent de celule T trebuie prezentat
mpreun cu antigene MHC pentru a genera un rspuns imun eficient.
Conform teoriei dublei recunoateri, o celula T poate purta dou tipuri distincte de
receptori, un receptor de legare la peptide antigenice i cellalt pentru legarea de molecule
MHC.
Cealalt teorie, cea a recunoaterii asociate, impune ca celula T sa prezinte un receptor
capabil sa recunoasca att peptide antigenice cat i molecule MHC.
Cele dou teorii de recunoatere, au fost testate. Celule T rezult din fuziunea unei celule T
parental cu un antigen definit (A) i specificiti MHC (k) cu o celul T care poart antigen
diferit (B) i specificiti MHC (1). Teoria recunoaterii asociate susine c un astfel de hibrid
de celule T va rspunde si va prolifera ca rspuns la specificitile antigen-MHC a celulei
originale parentale (Ak sau B1), dar nu A1 sau Bk.
Dac, pe de alt parte, dubla recunoatere a moleculei de antigen i MHC de dou tipuri
distincte de receptori de pe celulele T este eficace, o astfel de celul hibrid T ar trebui s
rspund la toate cele patru specificiti antigen-MHC: Ak, B1, A1, i Bk, datorit asociaie
independente de antigen de celule T i receptori MHC. Astfel de rspunsuri nu au fost gasite
cnd au fost testate hibrizi de celule T. Toate dovezile experimentale au sprijinit pn acum
teoria recunoatere asociate de antigen i MHC de catre celulele T. Acum stim ca un receptor
al celulelor T singur recunoate att MHC i cat specificiti antigenice. Mai recent, cunotine
detaliate despre structura moleculei MHC i propria sa capacitate de a lega antigenul
peptidic, a rafinat nelegerea noastr despre recunoaterea antigenului celular de catre
celula T. Interpretarea mai exact a modului de legare a receptorul celulei T (TCR) la
antigen i la moleculele MHC clasa I n cazul celulelor T CD8+ i clasa II, n cazul celulelor T
CD4+, este descrisa in continuare. TCR se cupleaz cu complexul peptida antigenic-MHC,
celule T CD4+ se leaga de o regiune conservat a moleculei MHC clasa II, i moleculele CD8+
se lega la o regiune conservat a MHC clasa I.
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

20

Recunoastere
asociata

Recunoastere
dubla
D
A

NU

A.B=Specificitate antigen receptor

K.I=Specificitate MHC receptor

Recunoasterea asociata versus recunoasterea antigenica duala de catre celulele T

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

21

Recunosterea antigenului de catre celulele T

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

22

SUPERANTIGENE

Superantigenele sunt anumite glicoproteine virale i bacteriene care se leaga

la TCR i antigene MHC clasa II n afara locusului convenional de legare pentru
peptide antigenice, ceea ce duce la activarea nespecific a mai multor clone
de celule T.

n timp ce un singur antigen sau peptid poate fi recunoscut de ctre sau este
imunogen pentru un numr mic de clone de celule T, o categorie aparte de
antigene, cunoscut sub numele de superantigene, au capacitatea de a stimula
mai multe clone de celule T.

Superantigenele, care au fost identificate pn n prezent ca glicoproteine

virale i bacteriene, sunt super-stimulatori de celule T, deoarece acestea sunt
capabile s se lege la un numr mare de receptori de celule T prin secvenele
V, precum i la moleculele MHC clasa II intr-un alt locus de legare.

Legarea superantigenelor la regiuni relativ nonpolimofice ale molecule MHC i

TCR promoveaz adeziunea celulelor T la celule prezentatoare de antigen,
indiferent de specificitate TCR. Astfel de interactiune a TCR cu moleculele MHC
conduce la activarea multor clone de celule T, n special celule CD4+.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

23

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

24

CELULELE PREZENTATOARE DE ANTIGEN

Macrofage, celule dendritice, celule B, i practic orice alt tip
de celule capabile s exprime moleculele MHC clasa II poate
funciona ca celulele prezentatoare de antigen (APC).
Amintiti-va ca celulele T helper CD4+ pot recunoasc i s
rspund la antigen n contextul MHC clasa II.
Macrofagele sunt celule fagocitare ale liniei monocitare
prezente n esuturi i sunt deosebit de bine echipate pentru
prezentarea eficace a antigenului. Ele exprim, n general,
moleculele MHC clasa II i, mpreun cu proprietile lor
fagocitare sunt extrem de eficiente n acapararea materialelor
macromoleculare sau a particulelor, le digera, si sunt
prelucrate cu ajutorul unui sistem lizozomal la peptide
antigenice, i le exprim pe suprafata celulelor pentru
recunoaterea de ctre limfocitele T .

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

25

CELULE PREZENTATOARE DE ANTIGEN

APC

PREZENTE IN

Macrofage

Celule T via antigene MHC

Celule dendritice

Celule T via entigene MHC

Celule B

Celule T via captarea antigenului de catre

anticorpii de suprafata si antigenele MHC

Celule T helper activate

Celule T via entigene MHC

Celulele dendritice, denumite astfel pentru morfologia lor extrem de ramificata,

se gasesc in multe organe prin tot corpul, sunt derivate din maduva osoasa i,
de obicei, exprima un nivel ridicat de antigen MHC clasa II. Celulele dendritice
sunt activ motile si pot recircula ntre fluxul sanguin i esuturi. Spre deosebire
de macrofage, celule dendritice au o capacitate limitat pentru procesarea
antigenului i pot prezenta antigene prelucrate i eliberat de la alte celule
anterior. n acest fel, ele sunt considerate APC-uri importante. Celulele
Langerhans sunt un exemplu de celule dendritice care sunt localizate la nivelul
pielii.
Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

26

 Datorit potenialului mare de legare a antigenului, celulele B

sunt unic nzestrate cu capacitatea de a concentra cantitati
sczute de antigen pe suprafaa lor, sa realizeze endocitoz,
sa
prelucreaze, i sa prezinte peptidele antigenice n
asociere cu antigene MHC pe suprafaa lor. In acest mod,
celulele B devin celule prezentatoare de antigen eficiente.
Dei nu sunt considerate APC clasice, celulele T helper merit
menionate pentru capacitatea lor de a aciona ca atare n
anumite condiii de activare a lor. La om si alte specii de
mamifere, cu excepia soarecilor, celulele T activate exprima
moleculele MHC clasa II i, de asemenea, regleaza MHC
clasa I.
Astfel de evenimente de activare pot servi pentru a recruta
ajutor suplimentar de celule T CD4+, de celule B, precum i
de a oferi ajutor eficient celulei citotoxice T CD8+.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

27

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

28

REZUMATUL 1

Rspunsuri imune adaptive cer ca celule specifice T, iniial prezente n frecven

joas, s identifice i sa se lege la un numr relativ mic de peptide specifice legate de
complexul MHC (pMHC) gasit pe celulele prezentatoare de antigen (APC).
Prezentarea antigenului este procesul n care fragmente proteolitice de antigene sunt
ncrcate n molecule MHC (pMHC) i prezentate pe suprafaa celulei. APC prezinta
pMHC ducnd la activarea i reactivarea celulelor T. In general, celulele care prezint
molecule pMHC clasa II sunt cunoscute ca celule APC profesionale, iar acestea sunt
celule dendritice, macrofage n primul rnd, i celulele B.
Fragmente proteolitice ale proteinelor exogene, cele care au originea n afara celulei,
cum ar fi bacteriile i proteinele gsite n esuturile i fluidele extracelulare, sunt
ncrcate n molecule MHC clasa II. Fragmente proteolitice ale proteinelor provenite
din interiorul citoplasmei celulei, cum ar fi proteine virale, sunt ncrcate n molecule
MHC clasa I.
Celule dendritice imature capteaza microbi, celulele infectate, celule moarte, sau
molecule acestora, fie prin fagocitoza mediat de receptor sau prin macropinocitoza.
Prin aplicarea de selecie pozitive i negative ale timocitelor, sistemul imunitar adaptiv
este asigurat de o populaie de celule T naive care au TCR-uri care pot rspunde la
peptide nonself prezentate de molecule MHC self. Celulele-T autoreactive sunt
eliminate.
Celulele naive T CD4 activate prin sinapsa imunologica ncep s-i exprime o
varietate de citokine i receptori pentru citokine la suprafa celular.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

29

REZUMATUL 2

Rspunsurile imune umorale sunt cele care implic aciunile imunoglobulinelor,

anticorpilor, sau complementului. Numai celulele B i forma lor complet difereniat,
celulele plasmatice, sintetizeaza imunoglobuline. Celulele mature B, care coexprima
IgD i IgM, sunt gata activate.
Celulele T i B cresc n numr ca rspuns la stimuli antigenici pentru a produce celule
T i B mature, activate.
Reaciile de hipersensibilitate de tip intrziat (DTH) sunt localizate n zona imediat
nconjurtoare locului injeciei antigenului.
Reacia se caracterizeaz prin induraie localizat (umflare), poate duce la necroz
localizata i ulceraie, i este urmat de o scdere a induratiei i/sau vindecarea
leziunii.
Eozinofilele i celulelor NK recunosc alterarea n poriunea Fc a anticorpului legat.
Aceste celule ucid celulele marcate de anticorpi printr-un proces cunoscut sub numele
de citotoxicitate mediat celular dependent de anticorpi (ADCC).
Mastocitele i bazofilele conine granule citoplasmatice compuse dintr-o varietate de
mediatori chimici (histamina, serotonina, factorului plachetar activator) implicate n
generarea de inflamaie.
Sistemul imunitar adaptiv al mamei ofer protecie pasiv la ft. Aceasta se
realizeaz prin transferul pasiv al IgG prin placent.
Celule epiteliale specializate din glandele salivare i lacrimale, ale tractului respirator,
intestinului subire, i din tesutului de transport mamar pentru IgA (IgA fie, sau lgA2)
folosesc un receptor specializat care este proteolizat si scurtat transformndu-se in
component secretorie.

Curs 8 - Imunologie - Prof. Ileana Constantinescu

30

Curs 9: Receptori de celule T: structura

i funcii n activarea celulelor T
Structura anatomic a receptorilor celulelor T
(TCR)
Superantigene
Molecule CD3 ca componente a complexului
TCR
Semnal + componentele de transductie ale
complexului CD3-TCR
CD4 i CD8 co-receptori
Activarea celulelor T
Celulele T i citokine
Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

31

 Ca i celulele B care sintetizeaz imunoglobuline (Ig) cu specificitate

pentru antigene, celulele T exprima receptori (receptorii celulelor T,
TCR-uri) care se leag specific la peptide antigenice. Fiecare celula
matura T exprim aproximativ 30.000 de TCR-uri. Dei ambele
celulele B care sintetizeaza Ig i TCR-uri poate recunoate i se
leag la antigene, exist mai multe caracteristici importante care
disting TCR de imunoglobulinele Ig.
n primul rnd, TCR este o molecula integral membranara celular
i nu este un produs de secreie ca anumite Ig-uri. n al doilea rnd,
IgG este bivalent si se leaga de antigene solubile; TCR este
monovalent i poate recunoate i lega peptide antigenice cnd
aceste peptide sunt ncorporate n canelura MHC clasa I sau clasa II
i complexele antigen-MHC prezentate de ctre o celul
prezentatoare de antigen (APC).
Complexul TCR are dou molecule distincte: TCR care leag
antigenul-MHC, i moleculele CD3, care funcioneaz ca si
componente pentru transducia de semnal. Este nevoie de
exprimarea att a CD3 i cat si a TCR pentru activarea celulelor
T i generarea de celule T efectoare.

Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

32

STRUCTURA ANATOMICA A RECEPTORILOR CELULELOR T (TCR)

TCR este un heterodimer coninnd lanuri sau lanuri .
Cele mai multe celule T periferice ale organelor limfoide
secundare, cum ar fi ganglionilor limfatici i splin, exprima
lanuri TCR . Situsul de legare a antigenului la TCR este codificat
de segmentele genetice VDJ recombinate ale , i VJ ale , .
Regiunile moleculei TCR care formeaz suprafaa complementar
cu antigenul sunt denumite regiuni de determinare complementare,
sau CDR.
Astfel, cele trei CDR-uri ale TCR, CDR1, CDR2 i CDR3, formeaz
situsul de legare cu antigenului.
CDR3 este n centru, afieaz cel mai mare diversitate, i
interacioneaz direct cu antigenele, n timp ce CDR1 i CDR2 sunt
la periferie i interacioneaza cu spirala a moleculelei MHC.

Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

33

Structuri ale receptorului celulei T - CD3 (TCR-CD3) exprimat pe suprafaa celular a celulelor T ,. Lanurile ,
ale TCR formeaz situsul de legare peptide antigenice, n timp ce complexul CD3 functioneaza drept componenta
a semnalului de transductie. Legturile disulfurice sunt prezente ntre lanuri si ale TCR i ntre dou lanuri
CD3.

Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

34

Diversitatea TCR ca i imunoglobuline este generata de rearanjare a genelor. Pentru lanurile TCR
i , CDR-urile sunt produsele finale ale rearanjarii VJ, iar pentru i , CDR-urile sunt generate
prin recombinarea segmentelor VDJ.

n procesul de rearanjare a genelor, completarile de nucleotide la fiecare jonciune a fiecrui

segment cresc diversitatea TCR i extinde repertoriul TCR. Adaosul de nucleotide este catalizat de
enzima deoxinucleotidiltransferaza terminal (TdT) i nu necesit matri de ADN.

Astfel, aceste nucleotide sunt denumite nucleotide N-regiune (nucleotide non-ablon). Odat
rearanjata, secvena de codificare a fiecrei TCR rmne neschimbata i nu afieaz hipermutatii
somatice ca la imunoglobulinele derivate din celulele B.

La nivelul suprafeei celulare a celulei T, TCR-uri sunt exprimate ca heterodimeri fie de sau .
Nu au fost descoperite alte combinaii sau un singur lan TCR. Toate cele patru lanuri TCR sunt
molecule ale membranei celulare integrale care afieaz un domeniu extracelular, un domeniu
transmembranar, i o coad citoplasmatic scurt. Domeniile extracelulare constau in regiuni
variabile, regiuni constante, i balamale.

Cele trei CDR-uri se gasesc pe regiunea variabil. CDR3 afieaz cea mai mare diversitate generat
de mbinarea segmentelor D i J i nucleotide N-regiune la fiecare intersecie. n contrast, CDR1 i
CDR2 sunt codificate de genele V i V.
CDR3 formeaz centrul situsului de legare a antigenului, n timp ce CDR1 i CDR2 formeaz periferia
situsului de legare a antigenului i prezinta mai puina diversitate. Cnd un TCR se leaga de
complexele antigen-MHC de pe o APC, CDR3 se leaga direct de peptida antigenic, i CDR1 i CDR2
iau contact ce spiralele ale celor dou domenii MHC exterioare. S-a sugerat c numerele limitate
ale segmentelor genice V genereaza diversitatea necesara pentru recunoaterea moleculelor MHC
i marea diversitate intalnita la regiunile joncionale, si asigurara recunoaterea majoritatii
peptidelor antigenice.

Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

35

Structura exterioara care arat seciunea transversal orizontal a TCR CDR1,

CDR2 i CDR3 cnd TCR se leag la o peptid antigenic n canelura MHC I sau
MHC II. CDR3 care are o diversitate mai mare se leag la peptida antigenic, n
timp ce CDR1 i CDR2 leag la spiralele ale celor dou domenii MHC
exterioare.
Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

36

SUPERANTIGENE
Superantigenele sunt o clas unic de antigene bacteriene i
virusuri, care au capacitatea de a se lega la complexul TCRMHC ntr-o manier mai puin stricta i activeaza un mare
numr de celule T, care conduce la diferite boli severe cum
sunt toxiinfecia alimentar i sindrom de oc toxic.
Dei cele mai multe peptide antigenice sunt prezentate TCR
prin inserarea ntre dou spirale ale moleculelor MHC,
superantigenele se leaga de suprafeele laterale ale MHC I
sau MHC II.
Mai mult, acestea se leag direct la poriunea TCR codificata
de genele V care nu fac parte din locusurile de legare a
antigenului (CDR3). Este important de remarcat faptul c
legarea superantigenelor la TCR este independent de
lanul i de segmentele DJ ale lanurilor V, segmentul care
codific CDR3.
Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

37

Activarea celulelor T helper de superantigen.

Sus: Celula T helper este activata prin prezentarea antigenului procesat n asociere cu proteine MHC clasa II la poriunea specifica antigenului de pe
receptori celulelor T. Reinei c superantigen nu este implicat i c doar unul sau un numr mic de celule helper T specifice pentru antigenul sunt
activate.
Jos: Celula T helper este activata prin legarea superantigenului la poriunea V a receptorului celulelor T n afara locului su specific de antigen fr
a fi prelucrate de ctre celula prezentatoare de antigen. Pentru c ocolete locusul de antigen specific, superantigenele pot activa mai multe celule
38
T helper.

Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

 Toate cele cinci lanuri ale moleculelor CD3 conin

o regiune conservat n coada citoplasmatica care
are rol n transducia semnalului.
Domeniul conservat este denumit receptor imun pe
baz de tirozin sablon de activare (ITAM) i
conine o pereche de reziduuri de tirozin i leucina.
Reziduurile de tirozina sunt substraturi pentru
proteinele tirozin-kinazelor n timpul activrii celulelor
T. Lanuri CD3 , , au doar un ITAM n coada lor
citoplasmatica, n timp ce i au trei copii ale ITAM.
Fosforilarea, acestor regiuni duce la recrutarea de mai
multe ZAP-70 la complexele TCR-CD3 si la activarea
ZAP-70.

Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

39

CORECEPTORI CD4 SI CD8

Dei TCR-CD3 este direct responsabil de legarea la complexul antigen-MHC si livrarea de semnale n
celule, legarea optim i activarea celulelor T necesit co-receptori i molecule de suprafa celular.
CD4 i CD8 sunt co-receptori importani pentru legarea TCR la MHC I i MHC II, precum i pentru
activarea celulelor T. Att CD4 i CD8 sunt asociate cu proteina tirozin-kinaz.
Prin procesul de selecie pozitiv, celulele T maturate n timus sunt selectate n funcie de capacitatea
TCR de a se lega la moleculele MHC I i II.Capacitatea de a lega MHC I sau II este dictat de CD8 i CD4.
Astfel, CD4 se leag la domeniul invariabil a MHC II, n timp ce CD8 se leag la domeniul invariabil a
MHC I. Din acest motiv, moleculele CD4 i CD8 sunt numite co-receptorii TCR.
CD4 i CD8 sunt membri ai superfamiliei de imunoglobuline. Molecula de CD4 conine patru domenii
de tip imunoglobulin (D1-D4); primele dou domenii sunt separate de D3 i de D4 de o regiune
balama. CD4 este exprimat ca o singur lan proteic de membran. n contrast, CD8 este exprimat ca
heterodimeri sau ca homodimeri. Mai mult dect att, poriunea extracelular a moleculelor
CD8 are un singur domeniu de tip imunoglobulin. Cozile citoplasmatice ale ambelor CD4 i CD8 sunt
asociate cu lck.
Cnd TCR-CD3 a unei celule T CD4+ leaga molecule MHC II pe APC, domeniul D1 a moleculelor CD4 se
leaga simultan la domeniul 2 al MHC II. n mod similar, poriunea a moleculelor CD8 se leag la
domeniul 3 MHC I, atunci cnd celulele T CD8+ recunosc antigenul prezentat de APC. Legarea CD4 la
MHC II i CD8 la MHC I stabilizeaz interaciunea celula T-APC i faciliteaz activarea celulelor T.
Activarea celulelor T este mediat de o protein asociat receptorului tirozin-kinaza, Ick, care este
asociat cu cozile citoplasmatice ale moleculelor CD4 i CD8.
n plus fa de co-receptorii CD4 i CD8, exist i alte molecule accesorii exprimate pe celulele T i APC
care particip la activarea celulelor T. Moleculele accesorii actioneaza ca perechi ligand-receptor care
participa adeziunea celul-celul i transducia semnalului.

Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

40

ACTIVAREA CELULELOR T

Pentru a realiza funcii efectoare, cum ar fi activitatea celulelor T helper CD4 sau
CD8 citotoxice, celulele T trebuie s fie activate. Activarea celulelor T este iniiat
prin agregarea complexelor TCR-CD3 cauzata de legarea antigenului.
Aceasta agregare activeaza o fosfataza proteica de pe suprafaa celular (CD45), o
serie de proteine tirozin-kinaze asociate receptorului, i protein-kinaza C (PKC).
Aceste evenimente intracelulare activeaza ulterior o serie de factori de transcriere
care se transloca la nivelul nucleului i iniiaz transcripia citokinelor i
receptorilor pentru citokine.
Celulele mature T, atunci cnd prsesc timusul, rmn inactive n faza G0 a ciclului
celular. Aceste celule T, care nu au confruntat nc niciun antigen strin sunt celule
T naive. Celulele T naive, atunci cnd recunosc un complex antigen-MHC pe o APC,
se va fi activa, si va iniia un rspuns primar.
Ca o consecin a rspunsului primar, celule T efectoare sau celule T activate i cu
memorie sunt generate. Celulele T activate au o via scurt i vor muri prin
apoptoza la 2-3 zile dup rspunsul primar. Dimpotriv, celulele cu memorie au o
durat de via mai lung (luni sau ani) i rspund viguros la contactul cu acelai
antigen intr-o infectie ulterioara, raspuns secundar. Cnd un numr suficient de
molecule TCR-CD3 se angajeaza cu complexe antigenice MHC, are loc agregarea
complexelor TCR-CD3 la nivelul suprafeei celular i rezulta in recrutarea de coreceptorilor suplimentari, cum ar fi CD4 sau CD8, i de molecule accesorii CD45 la
receptori. Se estimeaz c agregarea a aproximativ 100 molecule TCR-CD3 este
suficient pentru a activarea iniiala a celulelor.
Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

41

Activarea celulelor T.
Stnga: O celul prezentatoare de antigen (APC) prezint antigen prelucrat n asociere cu o protein MHC clasa II. Antigenul
este recunoscut de receptorul celulelor T (TCR) specific pentru acel antigen, iar celula T helper este activate pentru a
produce interleukina-2 (IL-2). IL-2 se leag de receptorul de pe celula T helper i o activeaz n continuare. Reinei c
proteina CD4 pe celula T helper se leag de proteina MHC clasa II de pe APC, care stabilizeaz interaciunea dintre cele dou
celule, i c B7 de pe APC trebuie sa interactioneze cu CD28 de pe celulei T helper pentru activarea complet a celulelor T
helper.
Dreapta: O celul infectat cu un virusul prezint un antigen viral n asociere cu clasa I de proteine MHC. Antigenul viral este
recunoscut de TCR specific pentru acest antigen i, n combinaie cu IL-2 produs de celula T helper, este activate celula T
citotoxica pentru a ucide celula infectat cu virusul. Proteina CD8 de pe celula T citotoxica se leag de proteina MHC clasa I
de pe celula infectat viral, si stabilizeaz interaciunea dintre cele dou celule. Reinei c proteina MHC clasa II este
formata din dou polipeptide, ambele fiind codificate de gene din locusul HLA. Proteina clasa I, n contrast, este format
dintr-o polipeptid codificat de locusul HLA i 2-microglobulina (2 MG), care este codificat n alt parte.
Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

42

Citokine produse de celulele T activate

Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

43

Celulele T cu memorie
Celulele T cu memorie (i B), cum sugereaz i numele, confera
sistemului imun capacitatea de a rspunde rapid i viguros timp de
muli ani dup expunerea iniial la un microb sau alte materiale
strine.
Acest tip de rspuns la un antigen specific se datoreaz mai multor
caracteristici:
(1)mai multe celule de memorie sunt produse, astfel nct
rspunsul secundar este mai mare dect rspunsul primar, n care
foarte puine celule rspund;
(2) celule de memorie triesc de mai muli ani sau au capacitatea
de a se reproduce;
(3) celule de memorie sunt activate de cantiti mai mici de
antigen i necesit mai puina co-stimulare decat celulele naive,
celule T neactivate;
(4)celule de memorie activate produc cantitati mai mari de
interleukine decat celulele T naive atunci cand acestea sunt
activate primele.
Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

44

Caracteristicile celulelor T
Celulele T reprezint 65-80% din fondul de recirculare de limfocite
mici. n cadrul ganglionilor limfatici, acestea sunt situate n regiunea
interioar, subcorticala, nu n centrele germinale. Celule B
alctuiesc cea mai mare parte din restul de limfocite mici i se
gsesc n principal n centrele germinale ale ganglionilor limfatici.
Durata de via a celulelor T este lunga: de luni sau ani. Ele pot fi
stimulate s se divida cnd sunt expuse la anumiti mitogeni, de
exemplu, fitohemaglutinina sau concanavalina A (endotoxin, o
lipopolizaharid de pe suprafata bacteriilor gram negative, este un
mitogen pentru celulele B, nu si pentru celulelor T). Cele mai multe
celule T umane au receptori pentru eritrocitele de oaie pe suprafaa
lor i pot forma "rozete" cu ele; aceasta constatare servete ca un
mijloc de identificare a celulelor T ntr-o populaie mixt de celule.
Funciile efectorii ale celulelor T
Exist dou componente importante ale aprare ale gazdei mediate
de celulele T: hipersensibilitate ntrziata i citotoxicitatea.
Curs 9 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

45

Curs 10: Imunitatea umoral

Mecanismele prin care anticorpii asigura imunitatea

Opsonizarea
Rspunsurile primare i secundare mediate de anticorpi
Antigene independente i dependente de celula T
Teorii despre formarea anticorpilor antigen-specific
Formarea anticorpilor antigen-specifici T-dependenti
Molecule de interaciune celule T-celule B importante
pentru producerea de anticorpi dependenti de celulele T
Tipuri de citokine i producia de anticorpi izotip

Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

46

MECANISME PRIN CARE ANTICORPII ASIGURA

IMUNITATEA
Neutralizarea antigenului
Fagocitoza mediat de receptorul Fc
Liza mediat de complement
Exista trei mecanisme principale prin care anticorpii confer
imunitate. n primul rnd, anticorpii se pot lega la antigene
solubile sau asociate celulei si previn inducerea de efecte
duntoare.
De exemplu, HIV exprim un numr de antigene care stimuleaz
producerea de anticorpi specifici. Anticorpii produi sunt apoi
capabili s se lege la antigenele de suprafa celular, prezente pe
un virus intact, care a stimulat iniial producerea lor. Unele dintre
aceste antigene asociate HIV sunt importante pentru ca virusul sa
intre ntr-o celul gazd T CD4+. Legarea unui anticorp specific de
aceste antigene va neutraliza capacitatea virusului de a intra in
celula T.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

47

OPSONIZAREA
Opsonizarea este procesul de acoperire a antigenului cu
un anticorp specific pentru favorizarea fagocitozei
antigenului.
n al doilea rnd, anticorpii se pot lega la antigene
solubile i asociate celulei i, ulterior, se leaga de
celulele fagocitare prin poriunea Fc a anticorpului la
receptorul Fc exprimat pe celulele fagocitare.
In acest mod, anticorpul acopera antigenul si livreaz
antigenului la celulele fagocitare, favorizand fagocitoza i
distrugerea definitiv a antigenului de ctre aceste celule.
n al treilea rnd, anticorpii se pot lega la antigene
asociate celulei i activeaza proteine ale complementului
care formeaza pori in celula si distrug celula prin liz.

Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

48

Rspunsurile primare i secundare mediate de

anticorpi
RASPUNS PRIMAR

Rspunsul la prima
expunere la antigen
Decalajul n rspunsul IgM
Anticorpi cu afinitate
sczuta

RASPUNS SECUNDAR
Rspunsul la a doua
expunere la antigen
Rspuns imediat IgM
Anticorpi cu afinitate ridicata

Expunerea la antigen pentru prima dat induce un rspuns imun care poate fi msurat n
ser dup o perioad de laten de aproximativ 6 - 12 de zile. Anticorpii izotip produsi, n
timpul rspunsului primar, sunt n mare parte IgM. Nivelul de anticorpi produsi scade la
scurt timp dup ce au fost obinute nivelurile de vrf, i incepe generarea de celule B cu
memorie.
n contrast, expunerea la acelai antigen a doua oar induce un rspuns imun care poate fi
msurat n ser n cteva zile de expunere la antigen. Anticorpii izotip produsi sunt n
primul rnd IgG, nivelul de anticorpi n serul persist sptmni sau luni de la expunerea la
antigen, i afinitatea anticorpului pentru antigenul este mult crescuta.

Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

49

 Procesul de formare a anticorpilor este un fenomen

complex i complicat. Celula B este celula responsabila
pentru producerea de anticorpi. Cu toate acestea,
producerea de anticorpi de ctre celulele B poate avea loc
fie ntr-o celul T-independenta sau ntr-o celul Tdependenta, n funcie de natura antigenului care provoca
rspunsul. Clasificarea acestor antigene depinde de
capacitatea dac rspuns bazat pe anticorpi poate sau nu
poate fi generat ntr-o gazd cu deficit de timus.

Deoarece timusul este responsabil pentru generarea

tuturor celulelor T mature, care genereaza rspunsuri
imune n organism, un antigen care genereaz un rspuns
imun la o gazd la care lipsete timusul este clasificat ca un
antigen de celul T independent, spre deosebire de un
antigen care este celul T-dependent i necesit prezena
unui timusului pentru a genera un rspuns cu anticorpi.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

50

ANTIGENE INDEPENDENTE SI DEPENDENTE DE

CELULELE T

Antigenele independente de celulele T sunt

antigenele care activeaz celulele B ntr-un
mod policlonal n absena celulelor T-helper
CD4 +.
Antigene dependente de celulele T sunt
antigene care activeaz celulele B numai n
prezena limfocitelor T-helper CD4 +.

Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

51

Raspunsul primar si secundar mediat de anticorpi

Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

52

Antigenele independente de celulele T activeaz celulele B ntr-un mod policlonal. Activeaz

multe celule B diferite, indiferent de specificitatea epitopilor i nu activeaz neaprat celulele
B prin interaciunea cu receptorul de imunoglobulin. In acest mod, antigenele independente
de celulele T induc productia de anticorpi de catre celulele B. Anticorpii se vor lega la multi
determinani antigenici diferii, chiar i la cei care celula B nu a fost expusa.
Antigenele independente de celulele T include lipopolizaharide ale bacteriilor Gram-negative
i alte antigene, n care un epitop imunodominant este repetat de multe ori, cum ar fi
proteinele polimerice. Antigenele independente de celulele T induc n principal producerea
IgM i nu stimuleaza producerea de celule B cu memorie.
Un rspuns al celulelor B la concentraii sczute de antigene dependente de celulele T
necesit prezena limfocitelor T-helper CD4 +. In acest mod, fie o hapten sau un anumit
epitop al unei proteine antigen solubile este recunoscut de situsul de legare a antigenului al
moleculei de imunoglobulin de pe suprafaa celular a unei celule B. Celulele B sunt
selectate n mod specific de antigen. Pentru ca celula B selectat sa produca anticorpi, o
celul T trebuie sa recunoasca un epitop unic, fie proteina antigen solubil sau proteina de
transport ataat la haptena, ambele trebuind supuse mai nti unei degradari excesive.
Acest proces de degradare are loc numai dup ce antigenele intra n celula B prin endocitoza
mediat celular. Odat intrat interiorul celulei B, antigenul este procesat i reexprimat pe
suprafaa celulei B n asociere cu produsele genelor MHC clasa II. Recunoaterea selectiv a
diferii epitopi de pe acelai imunogen de catre limfocitele T i B foreaz aceste dou
limfocite diferite sa interacioneze fizic una cu cealalta pentru a se activa reciproc si pentru a
induce expansiunea clonal: celule unice T i B, antigen specifice vor prolifera pentru a
produce clone proprii, si vor produce acelai tip de citokine i anticorpi.
Antigenele dependente de celulele T induc rspunsuri primare i stimuleaza proliferarea de
celule B cu memorie care conduc la producerea de anticorpi IgM, IgG, IgA, i IgE. Mai
important, aceste clase diferite de anticorpi se leag numai la antigenul specific initial, legat
la molecula de imunoglobulin exprimate pe suprafaa celular a celulelor B productoare de
anticorpi.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

53

TEORII DESPRE FORMAREA ANTICORPILOR

ANTIGEN-SPECIFICI
Teorii anterioare infirmate.
Teoria selectiv: o celul B exprim mai multe
imunoglobuline specifice.
Teoria instructiv: antigenul modeleaza molecule
de imunoglobuline specifice.
Teorii actuale acceptate.
Teoria seleciei clonale: diversitatea
imunoglobulinic este generat nainte ca
antigenul s intre n sistem.
Teoria reelei: implic interaciuni intre anticorpii
idiotip-anti-idiotip.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

54

nainte de a discuta in detaliu mecanismul prin care celulele B devin activate si

produc anticorpi antigen specifici mpotriva unui antigen dependent de celulele T,
trebuie sa nelegem diferitele teorii care au fost propuse pentru explicarea
modului de formarea a anticorpilor.
Teoria selectiv a propus ca un antigen, combinat cu una din moleculele de pe
suprafaa celulelor imune, stimuleaz generarea i eliberarea unei molecule
specifice, mai mult dect altele. Aceast teorie a devenit invalida, atunci cnd s-a
demonstrat c fiecare celul ar fi trebui sa exprime un numr mare de molecule
diferite pentru a recunoate un numr mare de diferite structuri antigenice
naturale i sintetice.
n contrast, teoria instructiva propus ca un antigen acioneaza ca un ablon pentru
crearea unui anticorp nespecific pe suprafaa celulei, pentru a se plia n jurul
antigenul si pentru a produce un anticorp specific mpotriva acelui antigen.
Aceast teorie a fost contestat atunci cnd a fost stabilit ca specificitate
anticorpilor const n secvena primar de aminoacizi a moleculei proteice de
anticorp.
Teoria cea mai acceptat pn n prezent este cunoscuta sub numele de teoria
seleciei clonale.
Aceast teorie propune ca diversitatea receptorilor de antigen este generata
nainte ca antigenul sa intre n organism i c rolul antigenului este de a stimula
selectiv receptorii specifici de pe o clona specifica de celule pentru a stimula
aceste celule s prolifereze i s produc anticorpi specifici mpotriva antigenului.
Aceast teorie presupune c ansamblul anticorpilor secretati de celulele clonale
vor avea situsuri de legare ale antigenului identice cu receptorii de anticorpi pe
suprafaa clonei originale. Astfel, anticorpii produsi impotriva unui singur antigen
sunt rezultatul seleciei, activarii i expansiunii celulelor care exprim o
specificitate restricionata de receptori pentru antigen.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

55

 Selecia clonal poate fi indus printr-un mecanism care nu implic

antigenul extern dar implic un proces de interaciuni anticorpi-idiotip anti-idiotip.
Acest mecanism de producere a anticorpilor este cunoscut sub numele de
teoria reelei. Aceast teorie propune c fiecare molecul de
imunoglobulin exprim propriul set unic de determinani n cadrul
domeniului variabil, fiecare este numit un idiotop. mpreun, toti idiotopi
individuali formeaz idiotipul anticorpului.
Idiotipul este recunoscut ca nonself de ctre moleculele de
imunoglobulin exprimate pe alte celule, iar aceti anticorpi sunt
cunoscute ca molecule de anticorp anti-idiotip.
Idiotopii anticorpilor anti-idiotip sunt, la rndul lor, recunoscuti de alte
molecule de imunoglobulin exprimate pe alte celule: astfel, se formeaza
o reea de celule care interacioneaz. In acest mod, interaciunea idiotipanti-idiotip limiteaz expansiunea clonal a celulelor B i, prin urmare,
pstreaz aceste celule ntr-o stare de echilibru. Deoarece idiotopul imit
imaginea unui antigen strin extern, interaciunea idiotip-anti-idiotip
poate fi intrerupta prin intrarea unui antigen extern n sistem.
Antigenul specific sparge starea de echilibru stabilit prin interaciunile
idiotip-anti-idiotip i induce un set specific de celule B pentru proliferare
clonal.

Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

56

FORMAREA ANTICORPILOR ANTIGEN-SPECIFICI

DEPENDENTI DE CELULELE T
Aceasta este producerea de anticorpi mpotriva unui antigen
specific de o anumit celul B i numai n prezena celulelor T care
recunosc o form prelucrat a antigenului.
Teoria selecie clonale a pus bazele studiilor care au stabilit ca
celulele B exprima molecule de imunoglobulin care leag
antigenele i apoi trec printr-o succesiune de evenimente de
activare, proliferare, difereniere i de producie de anticorpi care
neutralizeaz i/sau elimin antigenele care initial au declanat
activarea lor. Celulele B necesit "ajutor" pentru a trece prin
aceast succesiune de evenimente de activare.
Celulele T CD4+ furnizeaza acest ajutor. Celulele B funcioneaza,
independent de celulele T CD4+ si pot lega, endocita, si procesa
antigenul n fragmente mici. Aceste fragmente mici antigenice sunt
apoi reexprimate pe suprafata celulelor B n asociere cu MHC clasa
II. Dup aceste evenimente, funcia celulelor B este dependent de
prezena celulelor T CD4+. Receptorul de celule T CD4+ recunoate
complexul antigen-MHC prelucrat pe suprafaa celulelor B i
interacioneaz cu celula B.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

57

Interaciunea celul-celul care are loc permite transducia semnalelor prin membrana de
catre celulele T CD4+ i celulele B si induce eliberarea de limfokine de ctre celula T CD4+
i o stare de receptivitate pentru limfokine n celula B. In acest mod, celulele B antigenspecifice devin activate si rspund la citokinele eliberate n mediul lor apropiat. In acest
moment, celulele B rspund la citokinele derivate din celulele T prin proliferare clonala, si
cateva zile mai trziu, incep sa secrete anticorpi antigen-specifici.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

58

Molecule de interaciune celule T-celule B importante

pentru producerea de anticorpi dependenti de
celulele T

CELULA T
Receptor celular T / CD4
CD2
CD54 (ICAM-1)
CD11 / CD18 (LFA-1 / )
CD28
CD40

CELULA B
Antigen/MHC Clasa II
CD58 (LFA-3)
CDII/CD18(LFA-1 /)
CD54(ICAM-1)
CD80(B7.1)/CD86(B7.2)
CD40

Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

59

Mai precis, semnalele mediate prin contact pentru activarea celulelor T i celulelor
B ncep cnd celulele B interacioneaz cu celulele T CD4+, cand acestea prezinta
fragmente antigenice procesate n asociere cu molecule MHC clasa II la nivelul
receptorului celulei T. Legarea CD4 la MHC clasa II i a CD2 la CD58 (denumit
anterior LFA-3) promoveaz iniierea procesului de semnalizare prin complexul
receptor al celulelor T.
Aceast interaciune iniial este ntrit de o serie de alte molecule de adeziune,
cum ar fi CD54 (denumita anterior ICAM-1) i CD11/18 (denumita anterior LFA-1
/) prezente pe suprafaa celular a ambelor celule. Alte molecule, numite
molecule co-stimulatoare, sunt necesare pentru activarea optima a celulelor T i a
celulelor B.
Aceste molecule co-stimulatoare includ celule T-CD28 stimulate de asocierea
celulei B-CD80 (denumita anterior B7.1) sau B-CD86 (denumita anterior B7.2) i de
asocierea moleculei CD40 la celula B care este stimulata de molecula CD40L
asociata celulei T.
Interesant, este semnalul co-stimulator CD28 CD86, care pare a fi responsabil
pentru activarea exprimarii molecule CD40L la nivelul celulei T, critic pentru
activarea limfocitelor B, prin stimularea moleculei CD40.Lipsa de expresie CD40L la
nivelul celulelor imunitare duce la dezvoltarea unei boli cunoscute sub numele de
sindromul hiper-IgM X-linkat. Simptomele clinice asociate cu acest sindrom,
include incapacitatea gazdei de a genera anticorpi IgG pentru combaterea
bacteriilor extracelulare i, prin urmare, gazda este pasibila la infecii bacteriene
severe. Boli, cum ar fi aceasta, ne-au ajutat s nelegem semnificaia fiziologic a
interaciunii CD40L-CD40 ntre o celul T i o celul B.

Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

60

Interactiunea intre APC, celula B, si celula Th pentru generarea unei celule plasmatice
secretoare de anticorpi.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

61

Tipuri de citokine i producia de anticorpi

izotip
Celule Th1 -> IL-2 i IFN- -> IgM i lgG2a
Celule Th2 ->-IL 4, IL-5, IL-6, IL-10 -> IgM i lgG4
Celulele T-helper (Th) CD4+ activeaza celulele B n timpul interaciunii
celul-celul, si ofer citokinele necesare pentru proliferarea celulelor B
i diferenierea n celule-secretoare de anticorpi.
Dou subseturi de celule Th CD4+ au fost identificate i sunt caracterizate
prin secretia de citokine. Celulele Th1 secret interleukina IL-2 i
interferonul IFN-. Celulele Th2 secret IL-4, IL-5, IL-6, i IL-10. Ambele
subseturi de celule T CD4+ ofer ajutor celulelor B pentru producia de
IgM, n timp ce citokinele lor distinctive influeneaz producerea
anumitor izotipuri de anticorpi.
O anumit celul B va fi activata pentru a produce anticorpi numai
mpotriva antigenului legat initial la molecula de imunoglobulin a celulei
B. Este important de remarcat faptul c celula B i celulele T devin activate
ca urmare a recunoaterii aceluiasi antigen, sau ca urmare a recunoaterii
unor epitopi diferii de pe acelai antigen.
Curs 10 - Imunologie - Prof. Dr. Ileana Constantinescu

62