Genetic A

Conf.univ.dr.
HELLENE CASIAN
GENETICA
2014
1
2
CUPRINS
UNITATEA DE NVARE NR. 1: ............................................................................................. 7
NOIUNI INTRODUCTIVE ......................................................................................................... 7
1.1 Obiectivele Unitii de nvare nr. 1 .................................................................................... 7
1.2 Obiectul, coninutul i importana geneticii; Terminologie. ................................................ 8
1.3. Teorii care stau la baza dezvoltrii geneticii...................................................................... 10
1.4. Metode de studiu n genetic ............................................................................................. 13
1.5 Comentarii i rspunsuri la teste ......................................................................................... 14
1.6.Lucrare de verificare nr. 1 ................................................................................................... 17
1.7.Bibliografie minimal ......................................................................................................... 17
UNITATEA DE NVARE NR. 2: ........................................................................................... 18
EREDITATEA CARACTERELOR CALITATIVE .................................................................... 18
2.1. Obiectivele unitii de nvare nr.2 .................................................................................. 18
2.2.Gregor mendel Monohibridarea i legea segrgrii genelor ............................................ 19
2.3.Polihibridarea i legea segrgrii independente a perechilor de caractere ......................... 35
2.4.Thomas Hunt Morgan i teoria cromozomial a ereditii ................................................. 50
2.5.Comentarii i rspunsuri la teste ......................................................................................... 64
2.6 Lucrare de verificare nr. 2 ................................................................................................... 67
2.7.Bibliografie minimal ......................................................................................................... 67
EREDITATEA CARACTERELOR CANTITATIVE ................................................................. 68
3.1. Obiectivele unitii de nvare nr.3 ................................................................................... 68
3.2. Determinsmul genetic al caracterelor cantitative ............................................................... 69
3.3. Sisteme de gene multiple. Hibridarea transgresiv ........................................................... 74
3.4. Variana genetic. Ereditatea n sens larg; ereditatea n sens restrns ............................... 79
3.5.Comentarii i rspunsuri la teste ......................................................................................... 83
3.6. Lucrare de verificare nr. 3 .................................................................................................. 86
3.7..Bibliografie minimal ........................................................................................................ 86
CONSANGVINIZAREA I HETEROZISUL ............................................................................. 87
4.1. Obiectivele Unitii de nvare nr. 4 ................................................................................. 87
4.2. Consangvinizarea ............................................................................................................... 88
4.3. Heterozisul ......................................................................................................................... 92
4.4. Comentarii i rspunsuri la teste ........................................................................................ 96
3
4.5. Lucrare de verificare nr. 4 .................................................................................................. 98
4.6. Bibliografie minimal ........................................................................................................ 98
DETERMINISMUL GENETIC AL SEXELOR ......................................................................... 99
5.1. Obiectivele Unitii de nvare nr. 5 ................................................................................. 99
5.2. Tipuri de determinism genetic al sexelor ......................................................................... 100
5.3. Reglajul genetic al diferenierii sexului la plante ............................................................ 105
5.4. Ereditatea caracterelor legate de sex (sex-linkage) .......................................................... 115
5.5. Comentarii i rspunsuri la teste ...................................................................................... 120
5.6. Lucrare de verificare nr. 5 ................................................................................................ 124
5.7. Bibliografie minimal ...................................................................................................... 124
UNITATEA DE NVARE NR. 6: ......................................................................................... 125
EREDITATEA CITOPLAMATIC ......................................................................................... 125
6.1. Obiectivele Unitii de nvare nr. 6 ............................................................................... 125
6.2. Genele extranucleare ........................................................................................................ 126
6.3. Androsterilitatea ............................................................................................................... 130
6.5. Lucrare de verificare nr. 6 ................................................................................................ 134
RESTRUCTURRI CROMOZOMIALE .................................................................................. 135
7.1. Obiectivele unitii de nvare nr.7 ................................................................................. 135
7.2. Modificri structurale ce afecteaz numrul de gene pe cromozom ................................ 136
7.3. Modificri structurale ce afecteaz ordinea genelor pe cromozom ................................. 142
7.5. Lucrarea de verificare nr.7 ............................................................................................... 150
7.6. Bibliografie minimal ..................................................................................................... 150
PLOIDIA VARIAII ALE NUMRULUI DE CROMOZOMI ............................................ 151
8.2. Euploidia ......................................................................................................................... 152
8.3. Aneuploidia ...................................................................................................................... 162
4
UNITATEA DE NVARE NR.9 : ......................................................................................... 169
INTRODUCERE N GENETICA MOLECULAR ................................................................. 169
9.2. Acizii nucleici: structur i funcii ................................................................................... 170
9.3. Replicarea ADN (sinteza ADN) ..................................................................................... 178
9.4. Transcripia i translaia (sinteza proteic) ...................................................................... 184
UNITATEA DE NVARE NR.10 : ....................................................................................... 199
GENA I REGLAJUL GENETIC .............................................................................................. 199
10.1. Obiectivele unitii de nvare nr.10 ............................................................................. 199
10.2. Consideraii generale despre gen ................................................................................. 200
10.3. Mutaiile genetice........................................................................................................... 205
10.4. Reglajul genetic la eucariote .......................................................................................... 209
10.5. Comentarii i rspunsuri la teste .................................................................................... 212
10.6. Lucrarea de verificare nr.10 ........................................................................................... 215
10.7 Bibliografie minimal .................................................................................................... 215
UNITATEA DE NVARE NR.11 : ....................................................................................... 216
TEHNICI DE GENETIC MOLECULAR CU APLICAII N AMELIORAREA
PLANTELOR ............................................................................................................................. 216
11.1. Obiectivele unitii de nvare nr.11 ............................................................................. 216
11.2. Tehnica PCR (Polymerase Chain Reaction) ................................................................. 217
11.3. Markeri moleculari: RAPD, AFLP, SSR, RFLP ........................................................... 225
11.4. Comentarii i rspunsuri la teste .................................................................................... 233
11.5. Lucrarea de verificare nr.11 ........................................................................................... 235
11.6. Bibliografie minimal .................................................................................................... 235
BIBLIOGRAFIE ......................................................................................................................... 236
5
6
UNITATEA DE NVARE NR. 1:
NOIUNI INTRODUCTIVE
CUPRINS
1.1 Obiectivele unitii de nvare nr. 1 7
1.2 Obiectul, coninutul i importana geneticii; Terminologie 8
1.3 Teorii care stau la baza dezvoltrii geneticii 10
1.4 Metode de studiu n genetic. 13
1.5 Comentarii i rspunsuri la teste 14
1.6 Lucrare de verificare nr.1 17
1.7 Bibliografie minimal 17
1.1 Obiectivele Unitii de nvare nr. 1
Prin studierea acestei uniti de nvare vei fi n msur s:
Defineti genetica .
Identifici terminologia utilizat n genetic.
Stabileti rolul i importana geneticii n ameliorarea
plantelor.
Cunoti principalele metode de studiu n genetic.
7
1.2 Obiectul, coninutul i importana geneticii; Terminologie.
Genetica este tiina care studiaz ereditatea i variabilitatea organismelor. Genetica

explic mecanismele de nregistrare, de stocare, de modificare i de transmitere a informaiei
ereditare din generaie n generaie, precum i procesul interaciunii genotipului cu mediul.
Denumirea de genetic provine de la cuvntul grecesc gennao care nseamn a da
natere, a genera .
Ereditatea (hereditas a moteni, lat.) este proprietatea organismelor de a da natere
unor descendeni asemntori lor. Mai poate fi definit ca fenomenul transmiterii din generaie n
generaie a caracterelor sau procesul transmiterii informaiei genetice de la prini la urmai.
Unitatea elementar care condiioneaz transmiterea i manifestarea caracterelor a fost numit
gen ( 1906 de geneticianul danez W. Johannsen). Alturi de genele care se afl n cromozomi
i determin ereditatea cromozomal, exist i uniti ereditare situate la nivelul citoplasmei,
denumite plasmagene, care determin ereditatea citoplasmatic.
Totalitatea factorilor ereditari ai unui organism poart numele de genotip.
Genele i plasmagenele au o mare stabilitate i sunt capabile s se autoreproduc fidel
( funcia autocatalitic a genei). n acest sens ereditatea constituie elementul conservativ al lumii
vii.
Dac se compar descendenii din cadrul unei rase, soi etc, se constat unele deosebiri
ntre indivizi, dar i fa de prini. n natur nu exist doi indivizi identici, unicitatea fiind o
caracteristic de baz a lumii vii. Aceasta nseamn c organismele prezint variabilitate.
Variabilitatea reprezint proprietatea organismelor vii, cu diferite grade de nrudire, de a
se deosebi ntre ele n plan morfologic, fiziologic, biochimic etc. Diferenele ntre indivizi pot fi
determinate de mutaii i recombinri ale materialului genetic (variabilitate ereditar) i de
influena condiiilor de mediu (variabilitate neereditar).
Totalitatea nsuirilor morfologice, fiziologice, biochimice i de comportament ale unui
organism poart numele de fenotip.
8
Test de autoevaluare
1. Avnd n vedere cele nvate n acest subcapitol i innd cont de
spaiul avut la dispoziie, v rugm s comentai sau s rspundei la
urmtoarele ntrebri:
a)Definii genetica:
b) Ce tipuri de ereditate se cunosc?
c) Definii genotipul:
Comentarii la aceste ntrebri vei gsi la sfritul unitii de nvare
Dup parcurgerea acestui subcapitol trebuie s reinei:
Definiia geneticii.
Tipurile de ereditate.
Tipurile de variabilitate..
Noiunile de genotip i fenotip.
Noiunile de gene i plasmagene.
9
1.3. Teorii care stau la baza dezvoltrii geneticii
Genetica, este considerat o tiin tnr, dei preocuprile oamenilor privind ereditatea
caracterelor dateaz din antichitate.
n unele scrieri i desene ale popoarelor antice (egipteni, indieni, greci, romani etc) se
gsesc indicaii cu privire la selecia plantelor i animalelor. O dovad a acestor preocupri o
reprezint sculpturile egiptene vechi de 6000 de ani, n care sunt prezentate pedigreele mai
multor generaii de cai, cu indicaii referitoare la modul cum se transmit la urmai forma capului
i a copitei.
n secolul XIX se intensific interesul pentru ereditate i ncepe elaborarea de teorii
corpusculare. Una dintre primele teorii corpusculare a fost elaborat de Ch.Darwin n 1868 sub
denumirea de teoria pangenezei. Conform acesteia, motenirea caracterelor se realizeaz prin
intermediul unor particule denumite gemule, care migreaz din toate prile organismului i pe
care sngele le transport n celulele sexuale, ele transmindu-se n urma fecundrii la urmai.
Aceast concepie este o renoire a teoriei panspermiei enunate de Hippocrates.
Apogeul teoriilor corpusculare l reprezint teoria plasmei germinative, elaborat de
August Weismann n perioada 1875 1876 i definitivat n 1902. Aceast teorie susine c
organismul este format din dou pri deosebite calitativ : soma sau corpul i substana ereditar
denumit germoplasm sau plasma germinativ. Ea reprezint substratul care prin intermediul
celulelor sexuale asigur transmiterea ereditar a caracterelor.
Biologul i matematicianul Gregor Mendel este considerat fondatorul i printele
geneticii. El a efectuat cercetri bazate pe hibridari experimentale la mai multe specii : mazre,
porumb, fasole etc. Ca urmare a elaborat teoria factorilor ereditari conform creia fiecare
caracter al organismului este determinat de o anumit particul material denumit factor ereditar
( gen ), localizat n nucleu i care se transmite la urmai prin intermediul gameilor (celulelor
sexuale). Modul de manifestare al caracterelor n generaiile F1, F2 i n generaiile urmtoare, l-
au determinat pe Mendel s emit concluzii universal valabile, ulterior au fost ridicate la rangul
de legi ale ereditii.
10
Consacrarea geneticii ca tiin este determinat de trei biologi i anume Hugo de Vries (
1848 1935 ), Carl Correns ( 1864 1933 ) i Erich Tschermac ( 1871 1962 ), care n anul
1900, au redescoperit independent concluziile lui Gregor Mendel.
Contribuii semnificative la dezvoltarea geneticii au avut experienele lui Thomas Hunt
Morgan i colaboratorilor lui, care au efectuat cercetri la Drosophila melanogaster i au emis
trei teze : plasarea liniar a genelor pe cromozomi; fenomenul de linkage complet i fenomenul
de linkage incomplet, acestea alcatuind teoria cromozomial.
n dezvoltarea geneticii moderne, rolul hotrtor l-au avut cercettorii americani
O.T.Avery, C.M.MacLeod i M.McCarty care descoper rolul genetic al acidului
dezoxiribonucleic ( ADN ) din cromozomi, explicnd astfel fenomenul de transformare genetic
la bacterii sesizat de F.Grifftch .
n 1953, J.D.Watson, F.H.C.Crick i M.H.F.Wilkins stabilesc modelul de alctuire al
ADN-ului, ceea ce a dus la impulsionarea cercetrilor privind acizii nucleici.
Mai trziu rezultatele se succed rapid, astfel s-a descoperit rolul i structura ARN-ului,
existena unui limbaj genetic codul genetic, structura genelor, sinteza proteinelor i reglajul
genetic al sintezei proteice etc.
Dup anul 1970 s-au dezvoltat considerabil cercetrile de inginerie genetic. Acest nou
domeniu a dus la : izolarea i sinteza artificial a genelor, transferul intra- i interspecific al
genelor, uneori chiar de la organisme procariote la cele eucariote i viceversa, manipularea
materialului genetic la nivel celular prin realizarea de haploizi prin androgenez i ginogenez
experimental la plante, hibridarea ntre celule vegetale i animale, alctuirea hrilor genetice la
mai multe specii inclusiv pentru om (2005), etc.
Ingineria genetic are implicaii profunde de ordin fundamental i aplicativ, mai ales n
crearea de noi forme vegetale i animale de importan economic, n realizarea de
microorganisme capabile s sintetizeze aminoacizi, proteine, hormoni,vitamine, antibiotice etc,
n realizarea terapiei genice cu importan n medicina uman i veterinar.
Putem concluziona pe baza celor prezentate, marea importan a geneticii i faptul c
genetica este o necesitate pentru specilitii din domeniul biologiei, agriculturii, medicinei.
11
2. Avnd n vedere cele nvate n acest subcapitol i innd cont de spaiul
avut la dispoziie, v rugm s comentai sau s rspundei la urmtoarele
ntrebri:
a) Ce teorie a emis Gregor Mendel?
b) Enumerai tezele elaborate de ctre Thomas Hunt Morgan:
Teoria mendelian..
Tezele lui Thomas Hunt Morgan.
.Descoperirile ce au pus bazele geneticii moderne.
Realizrile ingineriei genetice..
12
1.4. Metode de studiu n genetic
Pentru studiul ereditii i variabilitii organismelor n genetic sunt utilizate n mod

separat sau asociat mai multe metode de studiu.
Vom enuna cteva dintre acestea:
Metoda hibridologic: se realizeaz hibridarea ntre organisme diferite genetic i
se analizeaz descendena obinut privind motenirea diferitelor caracteristici pe baza analizei
matematice. Metoda a fost introdus de ctre G.Mendel i este folosit i astzi.
Metoda genealogic: este cea mai veche metod ( folosit i n antichitate),
presupune nregistrarea i analiza datelor referitoare la indivizi ntr-o succesiune de generaii. Se
poate stabili astfel modul de transmitere i manifestare a unor caracteristici.
Metoda citologic: se bazeaz pe studiul constituenilor celulari cu rol genetic i
interferena modificrile ce apar la nivelul acestora cu manifestarea diferitelor caracteristici.
Metoda biochimic: aplicat n genetica molecular, se bazeaz pe cunoaterea
i manipularea materialului genetic la nivel molecular. Este o metod ce a permis dezvoltarea n
ritm exponenial a geneticii.
Metoda biometric: presupune nregistrarea datelor privind caracteristicile i
prelucrarea statistic a acestor date. Prin prelucrarea datelor se obin informaii privind ereditatea
i mai ales variabilitatea caracteristicilor. Metoda este folosit cu precdere n analiza
caracteristicilor cantitative ( greutatea boabelor/spic , rezistena la ger, coninutul n zahar, etc).
Metoda radiaiilor: utilizarea diferitelor tipuri de radiaii i efectele mutagene
pe care le au asupra materialului genetic, au dezvoltat aceast metod de studiu n genetic.
ntrebri:
a) Enumerai metodele de studiu utilizate n genetic:
b) Definii metoda biometric:

13
Metodele de studiu utilizate frecvent in genetic.

Definirea metodei hibridologice.
.Definirea metodei genealogice.
Definirea metodei citologice..
Definirea metodei biometrice.
Definirea metodei radiaiilor.
1.5 Comentarii i rspunsuri la teste
ntrebarea 1
a) Genetica este tiina care studiaz ereditatea i variabilitatea
organismelor. Genetica explic mecanismele de nregistrare, de
stocare, de modificare i de transmitere a informaiei ereditare din
generaie n generaie, precum i procesul interaciunii genotipului cu
mediul. Denumirea de genetic provine de la cuvntul grecesc
gennao care nseamn a da natere, a genera .
b) Se poate vorbi despre ereditate cromozomal (nuclear) asigurat de
gene i ereditate extracromozomal (citoplasmatic) asigurat de
plasmagene. Cele dou erediti se deosebesc prin faptul c
ereditatea nuclear se realizeaz biparental, iar cea citoplasmatic
uniparental.
c) Totalitatea factorilor ereditari ai unui organism poart numele de

genotip.
14
ntrebarea 2
a) Biologul i matematicianul Gregor Mendel este considerat fondatorul i
printele geneticii. El a efectuat cercetri bazate pe hibridari experimentale la mai
multe specii : mazre, porumb, fasole etc. Ca urmare a elaborat teoria factorilor
ereditari conform creia fiecare caracter al organismului este determinat de o
anumit particul material denumit factor ereditar ( gen ), localizat n nucleu i
care se transmite la urmai prin intermediul gameilor (celulelor sexuale). Modul
de manifestare al caracterelor n generaiile F1, F2 i n generaiile urmtoare, l-au
determinat pe Mendel s emit concluzii universal valabile, ulterior au fost ridicate
la rangul de legi ale ereditii.
b) Thomas Hunt Morgan i colaboratorilor lui, care au efectuat cercetri la
Drosophila melanogaster i au emis trei teze : plasarea liniar a genelor pe
cromozomi; fenomenul de linkage complet i fenomenul de linkage incomplet,
acestea alcatuind teoria cromozomial.
c) n dezvoltarea geneticii moderne, rolul hotrtor l-au avut cercettorii americani
O.T.Avery, C.M.MacLeod i M.McCarty care descoper rolul genetic al acidului
dezoxiribonucleic ( ADN ) din cromozomi, explicnd astfel fenomenul de
transformare genetic la bacterii sesizat de F.Grifftch .
n 1953, J.D.Watson, F.H.C.Crick i M.H.F.Wilkins stabilesc modelul de alctuire
al ADN-ului, ceea ce a dus la impulsionarea cercetrilor privind acizii nucleici.Mai
trziu rezultatele se succed rapid, astfel s-a descoperit rolul i structura ARN-ului,
existena unui limbaj genetic codul genetic, structura genelor, sinteza proteinelor
i reglajul genetic al sintezei proteice etc.
d) Acest nou domeniu a dus la : izolarea i sinteza artificial a genelor, transferul
intra- i interspecific al genelor, uneori chiar de la organisme procariote la cele
eucariote i viceversa, manipularea materialului genetic la nivel celular prin
realizarea de haploizi prin androgenez i ginogenez experimental la plante,
hibridarea ntre celule vegetale i animale, alctuirea hrilor genetice la mai multe
specii inclusiv pentru om (2005) etc.
15
ntrebarea 3
a) Pentru studiul ereditii i variabilitii organismelor n genetic sunt utilizate
n mod separat sau asociat mai multe metode de studiu: metoda hibridologic,
metoda genealogic., metoda citologic, metoda biochimic, metoda
biometric, metoda radiaiilor sunt cteva dintre metode. Cea mai veche
metod este cea genealogic. n lucrrile clasice de genetic i ameliorare este
folosit cu precdere metoda hibridologic.
b) Metoda biometric: presupune nregistrarea datelor privind caracteristicile i

prelucrarea statistic a acestor date. Prin prelucrarea datelor se obin informaii
privind ereditatea i mai ales variabilitatea caracteristicilor. Metoda este
folosit cu precdere n analiza caracteristicilor cantitative ( greutatea
boabelor/spic , rezistena la ger, coninutul n zahar, etc).
16
1.6 Lucrare de verificare nr. 1
INSTRUCIUNI
Lucrarea de verificare solicitat, implic activiti care necesit
cunoaterea Unitii de nvare nr. 1.
Rspunsurile la ntrebri vor fi transmise tutorelui pentru comentarii,
corectare i evaluare.
Pe prima pagin a lucrrii se vor scrie urmtoarele:
Titulatura acestui curs (GENETICA), numrul lucrrii de verificare,
numele i prenumele studentei (studentului).
Fiecare rspuns va trebui s fie clar exprimat i s nu depeasc o
jumtate de pagin. Punctajul aferent este menionat pentru fiecare
ntrebare.
ntrebrile la care trebuie s rspundei sunt urmtoarele:
1) Explicai teoria factorilor ereditari 2p
2) Definii variabilitatea organismelor. Clasificare 2p
3) Definii noiunile de genotip i fenotip 1p
4) Precizai descoperirile i implicaiile ingineriei genetice 2p
5) Enumerai i definii principalele metode de studiu utilizate n genetic
2p
6) n ultima parte a lucrrii, v rog s comentai coninutul testelor de
autoevaluare i s subliniai ce credei c ar trebui s
cuprind acestea pentru a fi mai eficiente.
* Un punct se acord din oficiu.
1.7 Bibliografie minimal
1. Casian H., 2006. Genetic- support pentru curs.Ed. Printech;

2. Crciun T., i colab., 1995. Genetica vegetal - Ed. Didactic i Pedagogic, Bucureti;
3. Cornea Clina Petrua, 2005. Genetic Ed. Ceres, Bucureti
17
EREDITATEA CARACTERELOR CALITATIVE

CUPRINS
2.1 Obiectivele unitii de nvare nr.2. 18

2.2 . Gregor mendel- Monohibridarea i legea segrgrii genelor. 19
2.3. Polihibridarea i legea segrgrii independente a perechilor de caractere. 35
2.4. Thomas Hunt Morgan i teoria cromozomial a ereditii. 50
2.5. Comentarii i rspunsuri la teste 64
2.6. Lucrare de verificare nr.2 67
2.7. Bibliografie minimal. 67
2.1. Obiectivele unitii de nvare nr.2

identificai caracterele calitative i s dobndii cunotiinele
privind controlul genetic al acestora.
explicai metoda de studiu privind ereditatea caracterelor
calitative hibridarea.
cunoatei legile ereditii caracterelor calitative n cazul
monohibridrii, polihibridrii.
explicai test-cross-ul i back-cross-ul.
evideniai alte interaciuni ale genelor alele.
prezentani sistemul de alele multiple i interactiunile dintre
acestea, precum i comportarea genelor n anumite condiii de
mediu.
cunoatei tezele lui T.H.Morgan i comportarea genelor linkage..
18
2.2. Gregor mendel Monohibridarea i legea segrgrii genelor
2.2.1 Gregor Mendel unul dintre fondatorii geneticii i caracterele calitative
Primele experinee de hibridare la diferite specii de plante au fost ncepute de Mendel n

anul 1857, n grdina mnstirii din Brunn (astzi Brno din Slovacia).
Astfel, el a efectuat ncrucuri la numeroase specii de plante ca:
Pisum, Phaseolus, Zea, Anthirhinum, Melandrium, Ipomoea,
Verbascum, Hieracium, etc., prefernd n mod deosebit mazrea care
ofer o serie de avantaje.n 1865 prezint rezultatele experimentale i
concluziile la care a ajuns, la dou conferine ale Societii de Istorie
Natural din Brunn. Comunicrile au fost publicate ntr-o lucrare de
48 pagini n anul 1866 n analele societii, sub titlul: Versuche uber
Pflanzenhybriden (Cercetrile privind hibridarea plantelor).
Gregor Mendel 1822-1886
Rezultatele cercetrilor lui G. Mendel publicate, nu au produs senzaie n lumea biologilor de

atunci, care pe de o parte nu au putut sesiza esena i importana descoperirilor, iar pe de alt
parte Mendel era considerat un cercettor amator. Astfel, concluziile lui Mendel au rmas
nerecunoscute pana n anul 1900, cnd au fost redescoperite i ridicate la rangul de legi ale
ereditii, moment care marcheaz apariia geneticii ca tiin.
n concepia geneticii clasice caracterele mendeliene (calitative) sunt acelea care prezint
fenotipuri distincte (contrastante) i sunt controlate de gene majore (mendeliene) dup regula
o gen un caracter (condiionare monogenic). Unele gene majore au efecte pleiotropice,
adic o gen controleaz simultan mai multe caractere calitative, ceea ce reprezint, evident, o
abatere de la regula general amintit mai sus.
n F1 toate plantele hibride sunt uniforme, avnd acelai fenotip. n F2, caracterele
calitative segreg n clase discontinue, cu fenotipuri distincte i usor detectabile, datorate
ambelor alele. Marea majoritate a caracterelor calitative au heritabilitatea mare, fiind puin
19
influenate de mediu. Aceasta confer seleciei posibiliti mari n detectarea indivizilor cu
caractere dorite.
Pentru studiul ereditii i variabilitii se folosete pe scar larg metoda hibridologic.
Aceast metod a permis lui Gregor Mendel s formuleze principalele legi ale ereditii i s
pun bazele geneticii, ca tiin biologic.
n cercetrile sale, Mendel a folosit cu precdere mazrea, plant anual care ofer
numeroase avantaje pentru studiul ereditii si variabilitii caracterelor calitative:
are flori hermafrodite cu polenizare strict autogam (cleistogam), mazrea s-a dovedit un
obiect potrivit pentru analizele genetice, folosind la ncruciare forme pure din punct de vedere
genetic;
este o plant anual i se pot urmri relativ repede descendenele n generaii succesive;
structura morfo anatomic a florii permite realizarea cu destul uurin a hibridrii
sexuate;
mazrea are numeroase soiuri (varieti care se deosebesc prin unul sau mai multe
caractere contrastante).
Mendel a folosit pentru ncruciare 22 de soiuri pure, la care a luat n considerare 7
caractere alelomorfe (forma bobului, culoarea bobului, forma pstii uscate, culoarea pstii
necoapte, culoarea cotiledoanelor, poziia florilor pe plant i lungimea tulpinii).
Considerm c este util s definim, civa termeni de baz, folosii frecvent n explorarea
acestor fenomene.
Hibridarea reprezint metoda care permite obinerea de plante hibride (hibrizi).
Ea const n principal, n dou operaii: castrarea formei mam i polenizarea cu polen de la
forma tat.
Hibridul reperezint un organism rezultat prin hibridarea (ncruciarea) a doi sau
mai muli genitori (prini) diferii prin unul sau mai multe caractere. Hibridul ntrunete
caractere de la prinii folosii la ncruciare. Printele mam se noteaz cu , iar printele tat
cu . Prinii se noteaz cu P1 i, respectiv P2, iar generaiile hibride (filiaiile) cu F0, F1,
F2,......, Fn.
ncruciarea unor forme parentale care se deosebesc printr-o singur pereche de caractere
se numete monohibridare, iar ncruciarea unor indivizi care se deosebesc prin dou sau mai
multe perechi de caractere se numete dihibridare i, respectiv, polihibridare
20
Schematic, realizarea unei hibridri sexuale se prezint astfel:
Anul I (F0) P1 x P2
n care
P1 i P2 = prinii (genitorii)
F0 = generaia n care se face
Anul II F1 hibridarea
F1 x F1
F1 = prima generaie hibrid
F2 = a doua generaie hibrid
Anul III F2
Caracterelor studiate la soiurile de mazre, de ctre G.Mendel, au dou forme distincte

de manifestare, opuse sau contrastante. Aceste forme de manifestare alternativ ale aceluiai
caracter au fost denumite ulterior alele. Unele caractere prezint mai mult de dou forme
alternative de manifestare, reprezentnd fenomenul de alelism multiplu. La organismele
diploide exist pentru fiecare caracter (factor ereditar) dou alele, care pot fi de acelai fel i
indivizii sunt puri (homozigoi) sau pot fi diferite i indivizii sunt impuri (heterozigoi). n
acest caz, la indivizii impuri (heterozigoi) ntre cele dou alele pot apare diferite relaii.
2.2.2. Monohibridarea i legea segregrii genelor
Monohibridarea este definit ca fiind ncruciarea ntre genitori ce se deosebesc printr-

un singur caracter. n experienele efectuate la mazre, G. Mendel a observat c pentru
structurile genetice heterozigote, fenotipul este rezultatul interaciunii dintre cele dou alele
diferite, i a enunat relaia de tip Pisum sau relaia de dominan i recesivitate.
2.2.3. . Relaia de dominan i recesivitate (dominana total)
21
Cnd fenotipul unui heterozigot se datoreaz numai uneia dintre alele nseamn c ntre
cele dou alele exist o relaie de dominan recesivitate (dominan total sau complet). n
acest caz hibridul F1 (Aa) are acelai fenotip cu printele homozigot dominant (AA) sau altfel
spus, Aa = AA (din punct de vedere fenotipic).
Exemplu: ncrund dou soiuri pure de mazre, unul cu boabe galbene i
cellalt cu boabe verzi, Mendel a obinut n F1 numai plante cu boabe galbene. Acest caracter l-a
denumit dominant, n timp ce caracterul pereche care nu s-a manifestat l-a denumit recesiv.
Mendel a constat uniformitatea plantelor hibride n F1.
Prin autofecundarea plantelor din F1 a obinut n generaia a doua ( F2), att plante cu
boabe galbene, ct i plante cu boabe verzi, n proporie de 3:1. Acest fenomen constatat n F2 a
fost denumit de Mendel segregare sau disjuncia caracterelor (genelor).
Mendel a explicat segregarea prin prezena sub forma de pereche a fiecrui factor ereditar
(gen) n celulele parentale i separarea acestora n timpul meiozei, cnd fiecare gamet primete
numai un singur factor ereditar (alel) din perechea respectiv, ntrucat prinii sunt puri, fiecare
printe va produce un singur tip de gamei. Gameii se unesc n timpul fecundrii i rezult
plante hibride (F1) n care factorii ereditari (alelele) se alatur din nou n perechi. Cnd plantele
hibride din F1 formeaz la randul lor gamei, factorii ereditari se separ din nou, rezultnd de
data aceasta dou tipuri de gamei. Prin unirea la ntamplare a gameilor rezultai, se obine
generaia a doua de indivizi (F2) cu patru combinaii de factori, la care se constat segregarea
factorilor ereditari n dou grupe fenotipice (3:1) i trei grupe genotipice (1:2:1).
Indivizii care posed un singur tip de factori ereditari (alele) sunt puri din punct de vedere
genetic i se numesc homozigoi (AA = homozigote dominante i aa = homozigote recesive).
Plantele hibride din F1 posed ambii factori ereditari (alele) i se numesc impure sau
heterozigote (Aa). La plantele heterozigote se manifest numai caracterul dominant (A), n timp
ce caracterul pereche recesiv (a) rmane n stare ascuns.
Notarea alelelor dominanate se poate face cu majuscul (A) sau cu liter mic i indice + (a+).
Alelele recesive se noteaz de regul cu liter mic (a).
Prezentm schema monohibridrii din exemplul anterior privind ncruciarea dintre
mazrea cu boabe galbene i cea cu boabe verzi, ntre care exist relaie de dominan i
recesivitate, cunoscut sub denumirea de monohibridarea de tip Pisum sau cu dominan
22
total. La toate monohibridrile efectuate la mazre indiferent de caracterele luate n considerare,
G Mendel a constatat raporturi de segregare fenotipic foarte apropiate de 3:1.
Fig.2.1.. Schema unei monohibridri cu dominan total

Boabe galbene Boabe verzi
P AA aa
G A x a
F1 Aa boabe galbene
F2 P Aa Aa
G A a x A a
F2 AA Aa Aa aa
25% 50% 25%
75% plante cu boabe galbene 25% plante cu boabe verzi

n cazul unor experiene similare la animale, psri, etc., n F1 au aprut indivizi
uniformi, iar n F2 o segregare fenotipic n raportul de 3:1. Astfel, L. Cuenot a ncruciat oareci
cenuii cu oareci albi, rezultnd n F1 numai oareci cenuii. Prin ncruciarea oarecilor cenuii
din F1, au rezultat n F2 75% oareci cenuii i 25% oareci albi.
Pe baza analizei generaiei F1 i, respectiv F2, n cazul monohibridarii, Mendel a emis
1.Legea segregrii sau disjunciei genelor n generaia a doua (F2)
23
Prin analiza generaiei F2 la dihibridare i polihibridare, Mendel a emis a doua concluzie,
care ulterior a devenit a doua lege a ereditaii, pe care o enunm anticipat pentru a sesiza
esena mendelismului:
2. Legea combinrii libere a genelor sau a segregrii independente a
caracterelor (apariie la di- i polihibridare a unor combinaii noi de gene la descendenii din
F2).
Din schema prezentat rezult n F2 dou raporturi de segregare, i anume:
raportul fenotipic de 3:1:
raportul genotipic de 1 AA : 2 Aa : 1 aa.
Prin autofecundarea generaiei a doua (F2) se obine generaia F3, la care se observ c
din plantele pure cu boabe galbene (AA) rezult numai plante cu boabe galbene, din cele pure cu
boabe verzi se obin numai plante cu boabe verzi i din plante impure cu boabe galbene (Aa) se
obin atat plante cu boabe galbene ct i plante cu boabe verzi n proporie de 3:1.
2.2.4. . Testcross-ul
Raportul de segregare fenotipic de 3:1, difer de raportul de segregare genotipic de 1:2:1,

rezult c cele dou genotipuri diferite (AA, Aa) determin acelai fenotip, respectiv culoarea
galben a boabelor. Pentru a putea preciza genotipul unor monohibrizi ce prezint acelai fenotip
se folosete testcross-ul, o ncruciare analizatoare cu un tester.
Printele folosit ca tester este ntotdeauna homozigot recesiv pentru toate genele studiate.
Homozigotul produce ntotdeauna un singur tip de gamei, iar un heterozigot monohibrid
produce dou tipuri de gamei cu aceeai frecven. Determinarea structurii genetice a unui
monohibrid se face prin analiza descendenei din F1 (raportul de segregare), care permite s se
determine indirect numrul de gamei al individului testat i respectiv, genotipul acestuia.
Exemplu:
a) O plant de mazre cu boabe galbene se ncrucieaz cu o plant cu boabe verzi
(caracter recesiv) i d natere n F1 la plante cu boabe galbene:
24
n F1 apare numai un singur fenotip- nseamn c individul testat produce numai un fel
de gamei (A) i este obligatoriu homozigot dominant pentru caracterul analizat (AA).
b) Considerm cazul cand o plant cu boabe galbene se testeaz cu o plant cu
boabe verzi i rezult plante cu boabe galbene i plante cu boabe verzi n proporie de 1:1 sau
50%:50%.
Individul (planta) testat este heterozigot (Aa) - n F1 au rezultat dou fenotipuri, indicnd
faptul c el a produs dou tipuri de gamei, respectiv A i a.
2.2.5. Backross
ncruciarea unui individ F1 cu unul din prini se numete backross. Uneori n literatura
de genetic, backrossul este utilizat n acelai sens ca testcross- ul. Referindu-ne la exemplul de
mai sus (folosit la testcross), prezentm ncruciarea backross n felul urmtor:
25
Backross-ul spre deosebire de testcross, nu oblig la folosirea printelui recesiv ca
tester. Aa cum se vede n exemplul folosit mai sus, testerul este printele homozigot dominant.
2.2.6. Mecanismul citologic al segregrii genelor
Gregor Mendel a precizat c factorii ereditari sunt particule materiale independente

care n celulele mam (parentale) se gsesc sub form de pereche, iar n gamei cte un singur
factor ereditar din perechea iniial, dup repartizarea acestora la cei doi poli n timpul meiozei.
Segregarea factorilor se realizeaz odata cu formarea gameilor, iar combinarea lor n timpul
fecundrii prin ntalnirea la ntamplare a acestora.
Deoarece factorii ereditari (genele) sunt dispui n cromozomi, cauzele segregrii au fost
asociate cu separarea i repartizarea cromozomilor n diferite combinaii, din celulele mam
26
(2n) n gamei (n) n timpul diviziunii meiotice. Prin fecundarea gameilor (n) se reface
numrul diploid de cromozomi (2n) i respectiv, perechile de cromozomi, dar n combinaii
diferite datorit asocierii ntampltoare a cromozomilor cu ocazia migrrii lor n gameti .
n 1902, W. Sutton a afirmat c n fiecare cromozom este localizat un anumit numr de
factori ereditari (gene) i c fiecare factor (gena) dintr-un cromozom este independent fa de
factorii ereditari localizai n ceilali cromozomi.
Fig 2.2
n cazul n care cei doi prini prezint aceeai alel pe cromozom, n perechea de
cromozomi rezultat dup fecundare, alelele identice vor fi n doza dubla, iar organismul
respectiv este homozigot (dominant AA sau recesiv aa), iar cnd prinii au alele diferite la
acelai cromozom, organismul este heterozigot (Aa). n timpul meiozei (n procesul de formare
27
al gameilor) organismul heterozigot va produce gamei diferii ntre ei, deoarece ntr-un gamet
(la unul din polii celulei) va trece un cromozom cu alela dominant, iar n cellalt gamet (la
cellalt pol al celulei) va trece cellalt cromozom din pereche cu alela recesiv, devenind astfel
independeni att cromozomii ct i genele localizate pe ei. La o nou fecundare fiecare
cromozom (respectiv alel) din gametul femel se va ntlni fie cu un cromozom cu alel de
acelai fel, fie cu un cromozom cu alt alel din gametul mascul. n felul acesta vor apare
indivizi diferii genetic n combinaii noi de gene, care indic efectul segregrii n procesul de
formare al gameilor urmat de fecundare. Modul cum se realizeaz segregarea cromozomilor i
respectiv a genelor (factorilor) este prezentat n figura 2.2.
2.2.7. Interaciuni ale genelor alele
Vom prezenta i alte interaciuni ntre genele alele dect dominana total cea pe care am
prezentat-o anterior. Aceste relaii au fost puse n eviden la diferite specii i duc la
modificarea raportului fenotip din F2 fa de cel cunoscut la dominan total. Pentru
exemplificare vom utiliza monohibridarea.
Semidominana (dominana incomplet)
Este o relaie alelic interalelic n care heterozigotul din F1 (Aa) are un fenotip
intermediar ntre cei doi prini heterozigoi. Fiecare alel este responsabil de un anumit grad de
expresie fenotipic fa de cealalt alel. Este important de reinut faptul c dei formele
heterozigote par s fie un amestec de fenotipuri ale prinilor homozigoi, fiecare alel pstreaz
identitatea sa i segreg normal n meioz.
Simbolizarea n cazul semidominanei se face printr-o liter care ndic gena considerat
i cu cte un indice pentru fiecare alel, pentru a arta c niciuna dintre alele nu este dominant.
Acest tip de monohibridare este cunoscut i sub denumirea de Zea, dat fiind
descoperirea sa pentru prima dat la porumb.
Exemplu: la ncruciarea unei varieti de porumb cu boabe albastre (CA CA) cu
o varietate cu boabe galbene (CG CG) au rezultat n F1 plante hibride cu boabe violet (CA CG). n
F2, s-a produs segregarea n proporie de 1/4 albastru (CA CA) : 2/4 violet (CACG) : 1/4 galben
(CG CG).
28
Cu alte cuvinte dintre indivizi prezint fenotipul genitorului P1; 2/4 dintre indivizi
prezint fenotipul intermediar; indivizi prezint fenotipul genitorului P2. Relaia a fost
identificat i la alte specii (Mirabilis jalapa).
Supradominana
Este relaia interalelic, n care un individ n stare heterozigot (Aa) determin o sporire
sau o intensificare a fenotipului fa de indivizii homozigoi de tip parental (Aa > AA > aa).
Acest fenomen este mai pregnant n cazul unor caractere cantitative ca: talia, fertilitatea,
vigoarea, etc, avnd importan n apariia heterozisului.
n acest caz, n F2, raportul fenotip va fi: fenotipul P1: 2/4 fenotipul supradominant:
fenotipul P2.
Codominana
Sistemului sangvin la om prezint patru grupe de snge notate cu A, B, AB i 0,

controlate genetic de locului I cu trei alele multiple, i anume: IA (alela pentru producerea
aglutinogenului A), IB (alela pentru aglutinogenul B) i I0 (alela pentru lipsa aglutinogenilor).
Alelele IA i IB sunt dominante asupra alelei I0, iar cnd se gsesc mpreun la acelai
individ sunt codominante, determinnd un fenotip nou i, respectiv grupa sangvina AB.
Prezentm n continuare fenotipurile i genotipurile posibile innd cont de relaiile existente.
Grupa sangvina (fenotipul) Genotipul

A IA IA sau IA I0
B IB IB sau IB I0
AB (codominanta) IA IB
0 I0 I0
Cunoaterea acestor relaii alelice este necesar pentru realizarea transfuziilor de snge
(persoanele cu grupa 0 sunt donatori universali, iar persoanele cu grupa AB sunt primitori
universali; persoanele cu grupa sangvin A primesc sange de la A i 0, persoanele cu grupa
sangvin B de la B i 0, iar 0 numai de la 0) i n stabilirea paternitii. Cunoscnd grupa
sangvin a copilului i a mamei se pot cunoate grupele sangvine ale tatlui prezumtiv.
Exemplu: Cnd copilul are grupa B i mama 0, tatl nu poate avea dect grupa B
(homozigot sau heterozigot) sau grupa AB.
29
Letalitatea
Unele alele pot provoca moartea individului n perioada prenatal sau postnatal n stadii
diferite de dezvoltare. Asemenea alele au fost denumite letale. O alel letal dominant poate
determina moartea individului n stare homozigot (LL) i, uneori chiar n stare heterozigot
(Ll); ea se elimin din populaie n momentul cand apare n constituia unui individ. O alel
letal recesiv determin moartea individului numai n stare homozigota (ll). Dup caz, indivizii
heterozigoi sunt n aparen normali sau pot manifesta unele deficiene, care ns nu le afecteaz
viabilitatea.
Putem preciza dou tipuri de letalitate:
a) Letalitatea de dominan cnd o alel dominant n stare homozigot (uneori chiar
heterozigot) provoac moartea indivizilor;
b) Letalitatea de recesivitate cnd o alel recesiv n stare homozigot provoac moartea

indivizilor.
Exemple: a) Studiul unor oareci galbeni a artat c ei sunt ntotdeauna heterozigoi,

deoarece la ncruciarea lor rezult o descenden n proporie de 2 oareci galbeni : 1 oarece de
alt culoare. Din raportul de segregare, oarecii galbeni homozigoi lipsesc, deoarece ei mor nc
din stadiul embrionar.
Rezult urmatoarele genotipuri i fenotipuri:
Genotipul Fenotipul Raportul de segregare
LL galbeni (letali)
2Ll galbeni(viabili) 2:1
ll alt culoare (viabili)
b) Cantitatea de clorofil la Anthirrhinum este controlat de o gen la care alela

recesiv este letal n stare homozigot. n descenden pot apare urmatoarele genotipuri i
fenotipuri:
Genotipul Fenotipul Raportul de segregare
CC verde (normale)
2Cc verde deschis (normale) 3 :0
cc albe (letale)
30
n acest caz, rezult practic un raport de segregare de 3:0, n loc de 3:1.
Genele letale pot fi clasificate dup diferite criterii, i anume:

a. Dup celulele n care apar:
- gametice, cnd gameii cu gene letale sunt neviabili;
- zigotice, cnd zigotul cu gene letale este neviabil.
b. Dup cromozomii n care apar:
- autozomale, cnd se afl pe autozomi;
- heterozomale, cnd se afl pe cromozomii sexului.
c. Dup gradul de letalitate (penetran) al indivizilor:
- letale propriu-zise, cnd se produce moartea tuturor indivizilor:
- semiletale, cnd circa 50% din indivizi mor;
- subletale, cnd pier circa 30% din indivizi.
2.2.8. Sisteme plurialele
Exist n natur gene ce prezint mai mult de dou alele, este vorba de o serie de alele
multiple sau de o serie plurialelic. Un individ normal diploid nu poate avea mai mult de dou
alele diferite sau de acelai fel pentru o anumit gen sau locus (cte una pe fiecare cromozom
homolog).
n cadrul unei serii de alele multiple pot exista relaii de dominan complet,
semidominan sau codominan. Cele mai frecvente sunt relaiile alelice de dominan i
recesivitate.
Pentru simbolizarea alelelor multiple trebuie mai nti cunoscut ierarhia de dominan.
Exemple:
a) culoarea ochilor la Drosophila este guvernat de o serie de alele multiple ( 12 alele),
variind de la rou(tipul slbatic, notat cu w+ ) pana la alb (tipul mutant far pigment, notat cu w).
n cadrul seriei plurialelice, fiecare alel (cu excepia lui w) produce pigment, ns din ce n ce
mai puin pe masur ce se avanseaz ctre alela complet recesiv (w) fa de toate celelalte.
Ierarhia de dominan este urmatoarea: w+ > w co >w bl >w e >w ch >w a >w h >w bh > w t >wp >wi
>w. Alela de tip slbatic w+ este dominant fa de toate celelalte alele ale seriei, iar alela w este
31
recesiv fa de toate celelalte alele din serie. Genotipurile heterozigote ntre diferitele alele
recesive prezint fenotipuri intermediare.
b) Tipurile de grupe sangvine la om este un alt exemplu de alelism multiplu. Alela IA
este codominat cu alela IB, iar alela I0 este recesiv fa de acestea. Relaiile ntre aceste alele se
noteaza astfel: (IA = IB) > I0.
c) Seria de alele multiple albino la iepuri, la care blana prezint urmatoarele culori:
c+c+ = agouti tipul slbatic ,
cchcch = gri tipul Chinchilla ,
chch = alb cu extremitile de culoare neagr tipul Himalaia
cc = alb tipul albino.
La ncruciarea tipului slbatic c+c+ cu toate celelalte tipuri (cchcch, chch, cc) n F1 s-a
manifestat culoarea agouti a tipului slbatic, iar n F2 s-a obinut un raport de segregare de 3:1 n
toate cazurile. Aceasta demonstreaz c este vorba de alele ale aceluiai locus i c ntre ele
exist relaia de dominan recesivitate. Pe baza ncrucirilor ntre diferitele tipuri de alele s-a
stabilit urmatoarea ierarhie de dominan: c+c+ > cchcch >chch> cc.
d) Serii de alele multiple la plante. La numeroase specii de plante, anumite caractere
sunt controlate de serii de alele multiple. Astfel, la trifoiul alb la locusul v exist 8 alele
dominante care produc pete albe pe frunze de diferite forme i mrimi. La porumb, s-a identificat
la locusul R o serie de peste 12 alele, atat dominante, ct i recesive, care controleaz
pigmentaia pericarpului i aleuronei.
Penetran i expresivitate
n condiii diferite de mediu, indivizi cu alele identice pentru acelai locus ( aceeai structur
genetic) pot prezenta fenotipuri diferite. Capacitatea unei gene sau a unui grup de gene de a se
exprima fenotipic n condiii determinate de mediu se numete penetran, iar gradul de
exprimare al fenotipului se numete expresivitate.
32
Exemple: a) Polidactilia (apariia de degete suplimentare) manifestat la om, este
determinat de prezena genei dominante P. Pentru fenotipul normal corespunde genotipul pp.
Cu toate acestea, indivizi cu genotipul Pp nu prezint polidactilie. Pentru acest caz, spunem c
penetrana genei P este mai mic de 100%.
b) Polidactilia se poate exprima numai la mini i
nu la picioare. Este vorba de o expresivitate
diferit.
Relaiile dintre gene i mediu
Diversitatea factorilor de mediu i

mai ales intensitatea cu care acioneaz asupra
organismelor n anumite etape ale dezvoltrii acestora, pot influena n mod foarte diferit
manifestarea unor gene.
Exemple:
a) plantele de Primula crescute la temperaturi de 30-37 o C i umiditate mare, produc flori
albe, iar la temperaturi sub 30 oC produc flori roii;
b) plantele mutante de porumb cu port pitic tratate cu hormoni (gibereline) se dezvolt
normal i au talie nalt;
c) iepurele de Himalaia crescut la temperaturi de peste 30 oC devine complet alb, iar la
temperaturi de 24-26 oc capat culoarea neagr la extremitatea cozii, picioarelor,
urechilor i botului.
Anumite gene au o manifestare diferit la factorii de mediu, fiind afectai numai o parte
din indivizi, dei au acelai genotip.
Alte gene sub influena unor factori de mediu manifest fenotipuri similare altor gene
(fenocopii).
33
urmtoarele ntrebri:
a) Definii caracterele mendeliene:
b) Care este raportul de segregare fenotip i genotipic in generaia F2,

n cazul relaiei de tip Pisum ?
c) Enumerai alte relaii ntre genele alele:
d) Cum se clasific genele letale?
Comentarii la aceste ntrebri vei gsi la sfritul unitii de nvare.

Caracterizarea caracterelor mendeliene;
Definirea monohibridrii i a relaiilor alelice, raporturi fenotipice i
genotipice din generaia F2;
Mecanismul segregrii citologice a genelor;
Legile mendeliene ale ereditii;
Sistemul de alele multiple i interaciunile dintre acestea;
Penetrana i expresivitatea genelor;
Relaiile dintre gene i mediu.
34
2.3.Polihibridarea i legea segrgrii independente a perechilor de caractere
2.3.1. Dihibridarea de tip Pisum
Prin polihibridare se nelege ncruciarea ntre genitori ce se deosebesc prin dou sau
mai multe perechi de caractere. Pentru a nelege modul de transmitere a caracterelor n diferite
generaii, vom exemplifica dihibridarea de tip Pisum i trihibridarea de tip Pisum, putnd
astfel extrapola apoi acest mod de transmitere la nivelul altor tipuri de hibridare (
tetrahibridare,etc) i cu alte relaii ntre alele.
Aa cum am precizat mai sus, genitorii se deosebesc prin dou perechi de caractere, iar n
cadrul fiecrui caracter avem o relaie de dominan total ( de tip Pisum).
Facem precizarea c este vorba de gene independente, situate pe autozomi diferii (n nici
un caz dou gene situate pe acelai cromozom).
Exemplu: ntru-una din experienele sale la mazre, Mendel a ncruciat dou soiuri pure
care se deosebesc prin 2 perechi de caractere, i anume:
1. Culoarea bobului: AA - bob galben
aa - bob verde
2. Forma bobului: BB - bob rotund
bb - bob zbrcit
Unul din soiuri avea boabe galbene i rotunde- pur din punct de vedere genetic (AABB) i
cellalt avea boabe verzi i zbrcite- pur din punct de vedere genetic (aabb). n F1 au rezultat
plante dihibride cu boabe galbene i rotunde dublu heterozigote (AaBb).
Prin autofecundarea plantelor din F1 a rezultat n generaia a doua (F2) patru grupe
(clase) fenotipice n proporie de 9:3:3:1, adic:
9/16 A . B . galbene rotunde (P1 primul printe)
3/16 A . bb galbene zbrcite Combinii noi de
3/16 aa B . verzi rotunde (recombinari intercromozomiale) gene

1/16 aa bb verzi zbrcite (P2 al doilea printe)
Raportul genotipic a fost n proporie de 4 AaBb : 2 AABb : 2 AaBB : 2 aaBb :2 Aabb :

1 AABB : 1 aaBB : 1Aabb: 1 aabb (4:2:2:2:2:1:1:1:1).
35
Se explic aceast segregare prin faptul ca plantele dihibride din F1 formeaz 4 tipuri de
gamei, n care se afl cte un singur factor ereditar (respectiv cromozom) din fiecare pereche. n
urma fecundarii celor 4 tipuri de gamei rezult 16 combinaii posibile de gene (genotipuri), care
au fost grupate in 4 clase fenotipice n proporia amintit de 9:3:3:1 si 9 genotipuri n proporie
de 4:2:2:2:2:1:1:1:1. Dintre toate fenotipurile identificate in F2, Mendel a constatat c n afar de
cele dou fenotipuri parentale cu boabe galbene si netede (A . B . ce reprezint P 1) i boabe
verzi i zbrcite (aabb, ce reprezint P2) au mai aprut n urma combinrii libere i ntmpltoare
a gameilor, respectiv a factorilor ereditari (genelor) dou fenotipuri noi, care prezint un
caracter de la un printe si altul de la cellalt printe, respectiv plante cu boabe galbene i
zbrcite (A . bb) i cu boabe verzi i netede (aa B .).
Din cauza apariiei la dihibridare, vom vedea i la polihibridare, a unor combinaii noi
de caractere (gene) datorit independenei i puritaii gameilor, respectiv a genelor situate pe
cromozomi separai, Gregor Mendel a formulat a doua lege: Legea combinrii libere a genelor
(caracterelor) sau segregarea independent a genelor, lege pe care am enunat-o i la
monohibridare pentru a fi grupate la un loc toate concluziile i, respectiv legile mendeliene.
Experienele de dihibridare la mazre presupun relaia de dominan-recesivitate la ambii

loci. Ulterior, ntr-o serie de experimente la plante i animale au fost evideniate i celelalte
relaii alelice (semidominana, codominana, letalitatea, etc.) care au afectat fie un locus, fie
ambii loci, determinnd modificri profunde ale raportului fenotipic de segregare. Astfel,
raportul fenotipic de segregare tipic dihibridrii de tip Pisum cu dominana complet la ambii
loci, se poate modifica n cazul unor relaii alelice de semidominan, letalitate etc., la unul sau
ambii loci:
36
Relaii interalelice Raport fenotipic de segregare
Locus 1 Locus 2
dominant-recesiv semidominant 3:6:3:1:2:1
semidominant semidominant 4:2:2:2:2:1:1:1:1
dominant-recesiv recesiv letal 3:1:6:2
semidominant recesiv letal 1:2:1:2:4:2
recesiv letal recesiv letal 4:2:2:1
Metode pentru analiza dihibrizilor

Pentru analiza ncrucirilor difactoriale se folosesc, in general, urmtoarele metode:
A) Metoda tabelei de combinaii (ahul de combinaii, dup R.C. Punnett)

Gameii maculi
Gameii femeli AB Ab aB ab
AB AABB AABb AaBB AaBb
galben-rotund galben-rotund galben-rotund galben-rotund
Ab AABb Aabb AaBb Aabb
galben-rotund galben-zbrcit galben-rotund galben-zbrcit
Gamei aB AaBB AaBb aaBB aaBb
i galben-rotund galben-rotund verde-rotund verde-rotund
fem ab AaBb Aabb aaBb aabb
eli galben-rotund galben-zbrcit verde-rotund verde-zbrcit
Raport fenotipic de segregare:

9/16 galben i rotund
3/16 galben i zbrcit
3/16 verde i rotund
1/16 verde i zbrcit
37
Raport genotipic de segregare:
4/16 AaBb
2/16 AABb
2/16 AaBB
2/16 aaBb
2/16 Aabb
1/16 AABB
1/16 AAbb
1/16 aaBB
1/16 aabb
Deoarece n metafaza I a meiozei fiecare pereche de cromozomi se separ independent i

apoi, migreaz la poli (respectiv n gamei) n toate combinaiile posibile, la ntmplare i cu
aceeai probabilitate , rezult 4 tipuri de gamei femeli i masculi, care n procesul de
fecundare vor forma 16 combinaii genotipice.
B) Metoda ramificaiilor
Aceast metod este utilizat pentru determinarea tuturor combinaiilor genotipice i
fenotipice posibile, fiind o metod rapid i simplificat.
a) proporia genotipurilor
38
b) proporia fenotipurilor
39
2.3.2. Testcross-ul la dihibridare
Testarea dihibrizilor cu dominan complet (toatal). Pentru determinarea genotipurilor

dihibrizilor cu acelai fenotip, dar genotipuri diferite, se procedeaz la ncruciarea fiecrui
dihibrid cu printele dublu recesiv folosit ca tester.
a) Dac n F1 rezult un raport fenotipic de 1:1:1:1 :dihibridul testat este heterozigot pentru
ambele perechi de carctere, producnd 4 tipuri de gameti:
galben rotund verde zrcit (printele recesiv folosit ca tester)
b) Dac n F1 rezult un raport de segregare fenotipic de 1:1: dihibridul este heterozigot

pentru o singur pereche de caractere, producnd 2 tipuri de gamei:
galben rotund verde zbrcit

P AaBB aabb
G AB AaBb - 1/2
aB x ab aaBb 1/2
40
Raportul fenotipic de segregare indic faptul c a segregat culoarea bobului i deci, acest caracter
este heterozigot (Aa), n timp ce caracterul forma bobului este homozigot (BB).
galben rotund verde zbrcit (tester)
P AABb aabb
G AB AaBb 1/2
Ab x ab Aabb 1/2
Cel de al doilea caracter, forma bobului, este heterozigot(Bb), iar primul este homozigot (AA).
2.3.3.Trihibridarea de tip Pisum
Trihibridarea reprezint ncruciarea ntre doi genitori care se deosebesc prin trei perechi de
caractere.
Metodele prezentate la dihibridare se pot generaliza i n cazul ncrucirilor cu trei sau mai
multe perechi de alele localizate pe autozomi diferii.
Dac n reprezint numrul perechilor de alele heterozigote se pot determina proporiile
fenotipice n funcie de principalele relaii alelice (vom vedea n tema urmtoare i alte tipuri de
relaii).
La o trihibridare de tipul AABBCC x aabbcc, se pot folosi aceleai metode de analiz a
descendenilor, metoda ahului de combinaii devine ns complicat i greoaie, fapt pentru care
recomandm metoda ramificaiilor. Adugm al treilea caracter: talia plantelor.
A) metoda ahului de combinaii :schema unei trihibridri se prezint astfel:
P AABBCC x aabbcc
F1 AaBbCc
41
F2 P AaBbCc AaBbCc
Dup proportiile indicate n tabelul de mai sus, rezult c:

Nr. gamei = 2n =23 =8
n 3
Nr. fenotipuri =2 =2 =8
Nr. genotipuri = 3n =33 = 27
Nr.combinaii = 4n =43 = 64
Dac se completeaz ahul de combinaii i se face gruparea combinaiilor pe clase
fenotipice, rezult urmtorul raport de segregare fenotipic:
27/64 cu trei carctere dominante (ABC) printele 1
9/64 cu dou caractere dominante i unul recesiv (Abc)
9/64 cu dou caractere dominante i unul recesiv (AbC) combinaii noi de gene
9/64 cu dou caractere dominante i unul recesiv (aBC)
3/64 cu un caracter dominant i dou recesive (Abc)
3/64 cu un caracter dominant i dou recesive (abC)
3/64 cu un caracter dominant i dou recesive (aBc)
1/64 cu trei caractere recesive (abc) printele 2
Raportul genotipic de segregare este i mai greu de realizat dup acast metod.
42
A) metoda ramificaiilor: proporia fenotipurilor i genotipurilor este mult mai uor de
realizat:
boabe galbene, netede, talie nalt boabe verzi, zbrcite, talie mic
43
Combinaiifenotipice:
Combinaii genotipice:
44
Raportul genotipic este urmtorul: 8:4:4:4:4:4:4:2:2:2:2:2:2:2:2:2:2:2:2:1:1:1:1:1:1:1:1 =
64
45
La trihibridare, combinaiile noi de gene care rezult sunt n proporie mult mai ridicat
fa de dihibridare. Posibilitile de combinare sunt mai mari, datorit numrului de gene
independente implicate. Astfel, dac la dihibridare proporia combinaiilor noi este de 6/16 (30,7
%), la trihibridare este de 36/64 (56,8 %). Cu ct doi genitori se deosebesc prin mai multe
perechi de caractere, cu att combinaiile noi sunt mai numeroase n defavoarea formelor
parentale si variabilitatea organismelor crete.
2.3.4. Verificarea raporturilor de segregare (Testul 2)
Pentru verificarea unei ipoteze de segregare, trebuie gsit o metod de calcul care permite
estimarea probabilitii (P), a estimrii abaterilor (diferenelor) ntre valorile observate i cele
ateptate.
Aceast metoda trebuie s in cont de numrul de indivizi (descendeni) analizai i de
gradul de libertate (GL).
GL = n-1 n care n= numrul de clase fenotipice
2
Testul este metoda de calcul care permite evaluarea unei asemenea probabiliti.
La compararea rezultatelor obinute cu cele ateptate (teoretice) n cadrul unei anumite
ipoteze de segregare, se admite n primul rnd c ipoteza considerat este just i c diferena
ntre rezultatele obinute i cele ateptate se datoreaz numai faptului c numrul de descendeni
(indivizi) analizai este limitat.
Testul 2 se calculeaz dup formula urmtoare:
2 = (d2/t) n care: d = diferena dintre valorile experimentale
i cele teoretice; t = valorile teoretice
n funcie de valoarea lui 2 calculat i gradele de libertate se determin probabilitatea P,
folosind datele din tabelul de date (dup R. A. Fisher i F. Yates)
46
Tabelul 1
Distribuia 2 (dup Fisher i Yates)
GL Probabilitatea
0,95 0,90 0,80 0,70 0,50 0,30 0,20 0,10 0,05 0,01 0,001
1 0,004 0,02 0,06 0,15 0,46 1,07 1,64 2,71 3,84 6,64 10,83
2 0,10 0,21 0,45 0,71 1,39 2,41 3,22 4,60 5,99 9,21 13,82
3 0,35 0,58 1,01 1,42 2,37 3,66 4,64 6,25 7,82 11,34 16,27
4 0,71 1,06 1,65 2,20 3,36 4,88 5,99 7,78 9,49 13,28 18,47
5 1,14 1,61 2,34 3,00 4,35 6,06 7,29 9,24 11,07 15,09 20,52
6 1,63 2,20 3,07 3,83 5,35 7,23 8,56 10,64 12,59 16,81 22,46
7 2,17 2,83 3,82 4,67 6,35 8,38 9,80 12,02 14,07 18,48 24,32
8 2,73 3,49 4,59 5,53 7,34 9,52 11,03 13,36 15,51 20,09 26,12
9 3,32 4,17 5,38 6,39 8,34 10,66 12,24 14,68 16,92 21,67 27,88
10 3,94 4,86 6,18 7,27 9,34 11,78 13,44 15,99 18,31 23,21 29,59
Nesemnificativ Semnificativ
Probabilitatea poate fi experimentat n procente sau n fraciuni de unitate. Dac aceast

probabilitate este prea mic inseamn c raporturile de segregare experimentale nu pot fi luate in
considerare pentru demonstarea unei anumite ipoteze. Se elimin o ipotez cnd P< 5% . n
acest caz, se consider c valorile experimentale se abat semnificativ fa de valorile ateptate
(teoretice) n cadrul ipotezei stabilite.
Abaterile mari dintre valorile experimentale i cele teoretice, n cadrul unei anumite
ipoteze, se pot datora urmtoarelor cauze:
- ipoteza privind raportul de segregare nu este just, caz n care se lanseaz o alt ipotez
care s poat fi luat in considerare;
- valorile experimentale au fost afectate de o serie de erori (determinri greite, impurificri
mecanice sau biologice a descendenei analizate, etc.);
- numrul de indivizi cercetai a fost prea mic.
Testul 2 se folosete n cazul variabilelor continui (caracterelor cantitative) cu o
distribuie normal, iar pentru caracterele calitative unde numrul claselor fenotipice este de
obicei restrns, n unele cazuri trebuie s se introduc o corecie pentru a ine cont de absena
continuitii. Aceast corecie implic o uoar diminuare a valorii lui 2 , care poate avea
importan mare n vecintatea valorii critice corespunztoare lui P5%. Aceast corecie este
47
obligatorie cnd anumite clase fenotipice cuprind ntre 5 10 indivizi. Testul 2 corectat se
calculeaz dup formula:
2corectat = [(d 0,5)2 /t]
Exemplu:
La ncruciarea unui soi de mazre cu boabe galbene cu un soi cu boabe verzi rezult n F1
numai plante cu boabe galbene. n F2 din cele 400 plante s-au gsit 90 plante ale cror boabe sunt
verzi. Presupunem c acest caracter este guvernat de o singur gen i boabe galbene (Y. ) este
dominant fa de boabe verzi (yy).
Rezolvare:
P: YY(galbene) x yy(verzi)
F1: Yy(galbene)
F2: Raport teoretic: 3/4Y. (galbene)

1/4 yy (verzi)
Fiind vorba de numai dou clase fenotipice se calculeaz obligatoriu 2 corectat:

Clase Valori Valori (e t) 0,5 [(e t) 0,5]2/ t
fenotipice exper. (e) teoretice (t)
Boabe galbene 310 3/4 x 400 = 300 9,5 0,300
Boabe verzi 90 1/4 x 400 = 100 9,5 0,902
Total 400 400 2 = 1,102
GL = 2 1 = 1
Testul 2 nu are valoare semnificativ, ntruct P > 20% i deci, ipoteza privind raportul de
segregare este just.
48
urmtoarele ntrebri:
a) Definii polihibridarea:
b) Care este raportul de segregare fenotip i genotipic in generaia F2,

n cazul relaiei de tip Pisum la o dihibridare, respectiv trihibridare?
c) Enumerai metodele de analiz a unei polihibridri:
d) Care este utilizarea testului 2 ?

Definirea polihibridrii;
Metodele de analiz n cazul unei polihibridri;
Cum se poate modifica raportul fenotipic de segregare n cazul unei
polihibrdri cu relaii alelice diferite;
Aplicarea testului 2.
49
2.4.Thomas Hunt Morgan i teoria cromozomial a ereditii
2.4.1. Drosophila melanogaster obiect de studiu.
Aezarea liniar a genelor pe cromozomi
Thomas Hunt Morgan, profesor la Universitatea Columbia

din New York, mpreun cu colaboratorii si C.B. Bridges, A.H.
Sturtevant, H.J. Muller, au elaborat teoria cromozomial a
ereditii, care asociaz genele cu cromozomii.
Cercetrile efectuate n anii 1910 1915 asupra musculiei
de oet Drosophila melanogaster, au permis concluzii ce sunt
cunoscute astzi ca teze i completeaz tabloul privind ereditatea caracterelor.
Drosophila melanogaster se nmulete foarte repede, la temperatura de 20C se obine o
generaie n 12 zile. Astfel, se puteau studia mai multe generaii pe an comparativ cu mazrea
obiect de studiu la G.Mendel. Fiecare femel produce cteva sute de descendeni ce cresc pe un
mediu minimal, astfel c numrul indivizilor cercetai ntr-un interval scurt este foarte mare.
Numrul de cromozomi n celula somatic este mic la Drosophila melanogaster (2n=8) i pot fi
uor identificai.
T.H.Morgan i colaboratorii au identificat peste 500 de mutaii care afecteaz organele
insectei (vezi fig.2.3 ) :
culoarea ochilor w = alb forma aripilor vg+= normale

pr= purpurie vg= vestigiale
se= sepia
culoarea corpului y+ = cenuiu

y = galben
yb = negru
50
Fig.nr. 2.3 Diferite mutante la
Drosophila melanogaster (culoarea
ochilor, forma aripilor, culoarea corpului)
Prin ncruciarea mutantelor ntre

ele sau cu tipul slbatic s-a studiat modul
de transmitere ereditar a diferitelor gene.
Aceste
rezultate corelate cu cercetri citologice au
dus la elaborarea celor mai importante
teze privind mecanismul cromozomial al
ereditii.Teoria cromozomial a reditii cuprinde trei teze:
plasarea liniar a genelor pe cromozomi (care a fost asemuit cu aranjarea mrgelelor
ntr-un irag);
tendina genelor de pe acelai cromozom de a se transmite n bloc sau nlnuite
(linkage), adic de a intra n gamei n combinaii parentale, comportndu-se ca o unitate
n ereditate. Cnd dou sau mai multe gene sunt localizate n acelai cromozom, spunem
c sunt nlnuite.
Ele pot fi nlnuite fie pe un autozom (gene linkage), fie pe un cromozom al sexului (gene
sexlikage);
tendina genelor nlnuite de a intra n gamei n alte combinaii dect cele parentale,
acest fenomen fiind denumit crossing-over. n esen, crossing-over-ul reprezint un
schimb reciproc de segmente cromatidice nesurori ntre doi cromozomi omologi. n urma
acestui schimb de material genetic (gene) apar cromatide recombinate cu combinaii noi
de gene, denumite crossovere sau recombinri, fiind deosebite de combinaiile parentale.
51
Prima tez a teoriei cromozomiale a ereditii consider c genele sunt plasate pe
cromozomi n anumite poziii denumite loci ( locus singular). Pe ambii cromozomi este
prezent cte o alel pentru fiecare gen, astfel putem avea starea homozigot ( AA sau aa) sau
heterozigot (Aa).
T.H. Morgan i colaboratorii au ajuns la aceast concluzie n urma analizrii unor
musculie ce aveau 2n=7 cromozomi fa de 2n=8. Au sesizat corelaia dintre lipsa unui
cromozom i absena anumitor caracteristici, cum ar fi prezena ochilor. De asemenea ei au
identificat la musculia de oet peste 500 de mutante, iar numrul total de cromozomi este 8, ca
urmare pe fiecare cromozom trebuie s se fie mai multe gene.
2.4.2.. Transmiterea nlnuit a genelor plasate pe acelai cromozom linkage
Studiul fenomenului de linkage a permis evidenierea mai multor situaii. Astfel, s-a
stabilit c el poate fi complet (absolut sau total), atunci cnd genele de pe acelai cromozom au
tendina permanent de a rmne nlnuite i incomplet (relativ sau parial), cnd ntre
cromozomii omologi au loc schimburi reciproce de gene.
Vom analiza n continuare linkage-ul complet ( cea de a doua tez).
Detectarea linkage-ului se poate face n dou moduri:
a) prin testcross-ul heterozigotului F1 (mai ales la organismele dioice unde
ncruciarea se face uor).
Metoda const n apariia n descendena testcross a unui raport de segregare 1:1,
indiferent de numrul de gene nlnuite.
La testcross-ul unui dihibrid heterozigot (F1), n cazul genelor independente (gene
localizate pe cromozomi diferii), rezult un raport de segregare de 1:1:1:1.
52
n cazul testcross-ului unui dihibrid heterozigot cu gene nlnuite (situate pe acelai
cromozom) rezult raportul de segregare de 1:1. reprezentnd formele parentale:
Orice deviere de la raportul testcross de 1:1:1:1 indic o abatere de la combinarea

independent, cel mai adesea datorat fenomenului de linkage.
53
Exemplu:
La ncruciarea unor masculi heterozigoi de Drosophila cu corp cenuiu i aripi
normale (BVg/bvg) cu femele dublu recesive cu corp negru i aripi vestigiale (bvg // bvg)
folosite ca tester, rezult n loc de 1 BbVgvg : 1 Bbvgvg : bbVbvb : 1 bbvgvg, ct ar fi rezultat la
combinarea indepentent a genelor, un raport simplu de 1 BVg // bvg : 1bvg // bvg, care indic
nlnuirea celor dou gene. Acest testcross se prezint schematic astfel:
b) prin studiul generaiei F2 (preferabil la organismele hermafrodite i monoice la care

testcross-ul se execut mai dificil). n cazul unei dihibridri cu gene independente raportul
fenotipic n F2 este de 9:3:3:1, iar la o dihibridare cu gene linkage, precum i la orice
polihibridare linkage raportul n F2 este de 3:1. O dihibridare cu gene linkage se desfaoar dup
schema de mai jos. Linkage-ul complet se manifest rar. El poate fi prezent numai ntr-o pereche
sau ntr-o regiune oarecare a unei perechi de cromozomi, care nu poate s conjuge. Raport
fenotipic 3 : 1.
54
2.4.3. Schimbul reciproc de gene (Crossing-over-ul)
Crossing over-ul apare n meioz, dar poate s apar i n mitoz, n diferite esuturi i
organe.
n cursul meiozei, fiecare cromozom se duplic n dou cromatide surori, identice.
Cromozomii omologi se mperecheaz (conjug) i formeaz tetrade cromatidice; ntre
cromatidele nesurori pot avea loc schimburi reciproce de segmente (gene). n schema de mai jos
prezentm situaia cnd are loc un singur crossing over ntre dou gene, A i B.
Rezult c dou dintre cele patru cromatide nu au suferit crossing over i au genele
asociate ca n cromozomii parentali (cromatide parentale), iar celelalte dou cromatide au suferit
crossing over-ul (schimb reciproc de gene) i prezint asociaii noi de gene (cromatide
recombinate sau remaniate).
55
Un crossing over n afara intervalului A-B nu produce schimbri ntre cei doi markeri (A i
B). Dac ntre doi loci (A-B) apar dou crossing overe ntre aceleai cromatide surori,
cromatidele rezultate la sfritul meiozei vor fi toate de tip parental. Orice dublu crossing over
ntre doi markeri A i B, nu poate fi decelat dect n prezena unui al treilea marker C situat ntre
A i B. Dac ntre A i C, pe de o parte i ntre C i B, pe de alt parte, probabilitile de apariie
a unui crossing over sunt x i, respectiv y, probabilitatea crossing overe-lor duble (unul ntre A i
C i altul ntre C i B) este egal cu produsul xy.
Crossing over-ul se detecteaz ca i linkage-ul prin testcross-ul heterozigotului F1 i
analiza ralortului de segregare n F2.
a) detectarea crossing over-ului prin testcross (la crossing over-ul ntre doi loci).
Un dublu heterozigot care se testeaz cu printele dublu recesiv poate avea dou poziii ale
alelelor: a) poziia cis, cnd ambele alele dominante se gsesc pe un cromozom, iar alelele
recesive pe cromozomul omolog (AB // ab) si b) poziia trans, cnd fiecare cromozom are o
alel dominant
56
i alt alel recesiv (Ab // aB). Analizele hibridologice efectuate la Drosophila de ctre Morgan
i colaboratorii au relevat faptul c heterozigotul F1 folosit ca femel formeaz patru tipuri de
gamei n proporii diferite: gameii de tip parental apar cu o frecven mare, iar gameii
recombinai cu o frecven sczut. Testerul mascul este homozigot i recesiv, formnd un singur
tip de gamei. n descendena testcross apar patru fenotipuri n proporii determinate de cele patru
tipuri de gamei. Combinaiile parentale (non cross overe), care apar n proporia cea mai mare,
indic intensitatea linkage-ului ntre cei doi loci considerai, iar tipurile noi de indivizi reprezint
recombinrile genelor (crossovere). Analiza acestor rezultate i-au permis lui Morgan s constate
c frecvena crossing over-ului ntre cele dou gene (B i Vg) reprezint distana dintre aceste
gene localizate n acelai cromozom. Cnd s-au folosit n analize hibridologice ali loci (gene),
frecvena recombinrilor a fost alta, demonstrnd astfel, corelaia dintre frecvena crossing
overe-lor nregistrate i distana ntre genele implicate.
Exemplu:
La ncruciarea unei femele heterozigote de Drosophila cu corp cenuiu i aripi normale (BVg //
bvg) cu un mascul dublu recesiv (bvg // bvg) au rezultat n descendena acestui testcross 41,5%
indivizi cu corp cenuiu i aripi normale,
57
41,5% cu corp negru i aripi vestigiale, 8,5% cu corp cenuiu i aripi vestigiale i 8,5% cu corp
negru i aripi normale. Primele dou fenotipuri reprezint combinaiile parentale (non
crossovere) care nsumeaz 83%, iar ultimele dou fenotipuri reprezint recombinri ale celor
dou gene (crossovere), datorate schimbului reciproc de gene ntre cei doi cromozomi omologi,
nsumnd 17%.
b) detectarea crossing over-ului prin analiza descendenei F2 (la crossing over-ul ntre
cei doi loci).
n cazul a doi loci independeni (nu manifest linkage), segregarea fenotipic n F2 este
tipic mendelian, adic de 9:3:3:1. Dac cei doi loci manifest linkage incomplet, atunci n F2 se
vor manifesta fenotipic n exces combinaiile parentale (non crossoverele), n timp ce
recombinrile (crossoverele) vor apare cu o frecven sczut, dependent de distana dintre
genele considerate.
2.4.4. Factorii care influeneaz crossing-over-ul
Dintre factorii care influeneaz direct sau indirect fenomenul de crossing over
menionm pe cei mai semnificativi, i anume (T. Crciun i colab., 1978):
Sexul. La origanismele cu lips de omologie ntre cromozomii sexului X i Y, nsoit
adesea de absena chiasmelor ntre autozomii omologi (n profaza I a meiozei), nu apare
sau este foarte redus fenomenul de crossing over. La organismele cu crossing over la
ambele sexe, exist adesea diferene de la un sex la altul. De regul, o frecven mai
sczut a crossoverelor se observ la sexul heterogametic.
Vrsta. La Drosophila melanogaster, Bridges (1927) a constatat c femele de vrst
diferite produc crossovere n proporii variabile. Astfel, la nceputul maturitii sexuale se
nregistreaz o frecven maxim de crossovere, iar dup aceea la intervale diferite de
timp, s-au observat mai multe minime. La porumb, s-au observat, de asemenea, fluctuaii
ale frecvenei de crossovere n raport cu vrsta plantelor.
Zona heterocromatinei. n zona heterocromatinei a cromozomului, situat de o parte i de
alta a centromerului, precum i n satelii, chiasmele lipsesc sau se gasesc cu o frecven
redus. Genele din aceast parte a cromozomului sunt foarte dense, puternic spiralizate, cu
posibiliti mici de transcripie i deci, de funcionare, fiind considerate inactive. Putem
spune c heterocromatina inhib manifestarea crossing-overului.
58
Modificrile n structura cromozomului. n funcie de natura lor, pot reduce sau
suprima prezena chiasmelor ntre cromozomii omologi. Aceste modificri apar cu
frecven mare n urma tratamentelor cu ageni mutageni n doze mari, care induc
numeroase i diferite dislocaii cu efecte negative asupra organismelor. Practic, toate
tipurile de modificri n structura cromozomilor (deficienele, duplicaiile, inversiile,
translocaiile) n stare heterozigot suprim sau reduc apariia chiasmelor prin lipsa
omologiei induse artificial ntre cromozomii pereche.
Modificrile numrului de genomuri sau de cromozomi (autopoliploidia,
alopoliploidia, monosomia) reduc sau suprim total apariia chiasmelor i respectiv, a
crossing over-ului.
Factorii de mediu (temperatura, lumina, umididatea, nutriia, etc.) pot afecta n mod
diferit, n anumite etape ale dezvoltrii oraganismelor, apariia chiasmelor i respectiv, a
crossing overe-lor, mai ales n regiunile heterocromatice ale cromozomilor.
2.4.5. Tipuri de crossing-over
Crossing over-ul se poate clasifica dup mai multe criterii, dintre care menionm:
a) dup tipul de diviziune celular n care apare se cunosc dou tipuri de crossing over, i
anume:
1) crossing over meiotic:

are loc n profaza I a meiozei i se identific n diplonem, prin apariia chiasmelor ntre
cromatidele nesurori ale cromozomilor omologi. Este tipul cel mai frecvent de crossing over,
care prin recombinrile intracromozomiale, reprezint o surs foarte important a variabilitii
organismelor. Condiiile majore pentru manifestarea fenotipic a acestui tip de crossing over
sunt: prezena obligatorie a cromozomilor omologi n stare heterozigot i realizarea
formaiunilor citologice de tetrad cromatidic.
2) crossing over mitotic sau somatic:
59
Crossing- overul este asociat n mod normal, cu diviziunea meiotic. n anumite condiii i cu
o frecven foarte redus, un fenomen asemntor poate avea loc i in diviziunea mitotic (n
celulele somatice de la plante i animale, la sfritul interfazei sau n profaza mitotic, cnd
cromozomii pereche au formate cele 4 fire cromatidice i sunt n stare heterozigot. Acest tip de
crossing over a fost denumit crossing over mitotic sau somatic i se detecteaz fenotipic prin
segregarea mitotic a genelor marker pe acelai individ, determinnd apariia de esuturi
mozaicate (esuturi normale alturi de esuturi recombinate). Crossing over-ul mitotic a fost pus
n eviden la Drosophila melanogaster (C. Stern, 1936); la plante (J.H. Taylor, 1958), precum i
la numeroase microorganisme (bacterii, ciuperci).
b) dup nivelul la care are loc ruperea i schimbul de segmente cromozomiale, crossing
over-ul poate fi:
1) crossing over egal, atunci cnd chiasmele apar ntre loci omologi (la acelai nivel sau punct)
i segmentele cromatidice care se schimb sunt egale (identice); acesta este tipul normal de
crossing over, cu ruperi i schimburi simetrice (egale) de segmente cromatidice:
2) crossing over inegal, atunci cnd chiasma i, respectiv, schimbul segmentelor cromatidice
care se schimb sunt inegale. n cazul crossing over-ului inegal dispare condiia de heterozigoie
a cromozomilor omologi. Datorit acestui tip aparte de crossing over, ntr-o cromatid remaniat
vor apare una sau mai multe gene n dublu exemplar, iar fenomenul se numete duplicie, iar n
cealalt cromatid vor lipsi genele respective, de unde i denumirea de deficien (vezi figura de
mai jos).
Crossig over-ul inegal i consecinele sale asupra cromatidelor implicate
60
3) crossing over-ul nelegitim, atunci cnd chiasma apare ntre cromozomi heteromorfici
care au poriuni (zone) homoloage sau parial homoloage (la indivizi haploizi sau poliploizi)
c) dup complexitatea materialului genetic implicat n crossing over distingem dou tipuri:
1) crossing over intergenic (ntre gene) n care schimbul reciproc ntre cromozomii
omologi cuprinde segmente de cromatide cu una sau mai multe gene. Este tipul obinuit de
crossing over a crui valoare de schimb depinde de distana dintre gene.
2) crossing over intragenic (n cadrul aceleiai gene), reprezint schimburi reciproce ntre
subunitile unor gene complexe (loci compleci), denumite subgene sau pseudoalele.
2.4.6. Alctuirea hrilor cromozomale
Harta cromozomal constituie reprezentarea grafic a cromozomilor cu indicarea ordinei

i distanei relative a genelor linkage (pe fiecare cromozom). Dac distana dintre gene este
estimat prin frecvena crossoverelor (n uniti Morgan), reprezint o hart genetic. Dac
pentru localizarea genelor pe cromozomi se folosesc observaii citologice ale crossoverelor
asociate cu mutaii, dislocaii cromozomale etc., se obine harta citologic. Cele mai complete,
sunt hrile citogenetice,care se alctuiesc pe baza studiilor citologice ale crossoverelor, asociate
61
cu stabilirea genelor de pe fiecare cromozom i a distanelor dintre ele (proporionale cu
frecvena crossoverelor).
Alctuirea hrilor genetice presupune o serie de etape, i anume:

delimitarea grupelor linkage prin identificarea unor gene marker n fiecare cromozom
(gene care se transmit n bloc), folosind fenomenul de aneuploidie;
stabilirea distanei dintre genele din acelai cromozom prin determinarea frecvenei
crossoverelor;
determinarea ordinei (poziiei) genelor n cromozomi.
Harta cromozomial a porumbului Zea mays
62
urmtoarele ntrebri:
a) Enumerai tezele elaborate de ctre T.H. Morgan i colaboratorii:
b) Explicai linkage-ul complet:
c) Precizai metodele de evideniere ale linkage-ului i crossing-over-ului:
d) Indicai factorii ce pot influena manifestarea crossing-over-ului:

tezele emise de ctre Thomas Hunt Morgan i colaboratorii lui n
urma studiilor efectuate la Drosophila melanogaster.
Mecanismele privind transmiterea genelor linkage i recombinarea
genetic ce poate apare n cazul acestor gene ( completeaz
cunotiinele privind ereditatea caracterelor).
factorii ce pot influena manifestarea crossing-over-ului.
Etapele alctuirii hrilor cromozomiale.
63
2.3. Comentarii i rspunsuri la teste
ntrebarea 1
a) n concepia geneticii clasice caracterele mendeliene (calitative) sunt acelea
care prezint fenotipuri distincte (contrastante) i sunt controlate de gene majore
(mendeliene) dup regula o gen un caracter (condiionare monogenic).
Unele gene majore au efecte pleiotropice, adic o gen controleaz simultan mai
multe caractere calitative, ceea ce reprezint, evident, o abatere de la regula
general amintit mai sus.
n F1 toate plantele hibride sunt uniforme, avnd acelai fenotip. n F2,
caracterele calitative segreg n clase discontinue, cu fenotipuri distincte i usor
detectabile, datorate ambelor alele. Marea majoritate a caracterelor calitative au
heritabilitatea mare, fiind puin influenate de mediu. Aceasta confer seleciei
posibiliti mari n detectarea indivizilor cu caractere dorite.
b) n cazul relaiei Pisum, raportul fenotipic este D : R; raportul genotipic
este AA: 2/4 Aa :1/4 aa
c) Se pot manifesta relaii de semidominan, codominan, supradominan
,letalitate.
d) Clasificare gene letale
a. Dup celulele n care apar:
- gametice, cnd gameii cu gene letale sunt neviabili;
- zigotice, cnd zigotul cu gene letale este neviabil.
b. Dup cromozomii n care apar:
- autozomale, cnd se afl pe autozomi;
- heterozomale, cnd se afl pe cromozomii sexului.
c. Dup gradul de letalitate (penetran) al indivizilor:
- letale propriu-zise, cnd se produce moartea tuturor indivizilor:
- semiletale, cnd circa 50% din indivizi mor;
- subletale, cnd pier circa 30% din indivizi
64
ntrebarea 2
a) Reprezint ncruciarea unor forme ce se deosebesc prin dou sau mai multe
caractere.
b) . La dihibridarea de tip Pisum n F2 apare un raport fenotipic de 9:3:3:1. n

cazul unei trihibridri raportul devine 27:9:9:9:3:3:3:1. Numrul de clase
fenotipice crete cu numrul de caractere luat n considerare, asigurnd
variabilitatea organismelor.
c) Sunt prezentate pentru dihibridare i trihibridare metoda tabelei de combinaii

i metoda ramificaiilor pentru determinarea raporturilor fenotipice i
genotipice n generaia F2.. Metoda ramificaiilor fiind mai simplu de utilizat
prin comparaie cu metoda tabelei de combinaii.
d) n cazul analizei unei populaii se emite o ipotez de segregare privind

ereditate caracterelor.Aceasta se verific cu ajutorul testului 2. . El permite
estimarea diferenelor dintre valorile experimentale i cele teoretice.
Confirmarea ipotezei se face n funcie de valoarea probabilitii P extrase din
tabelul de date al lui Fisher i Yates, n funcie de valoarea lui 2 i GL.
La o valoare mai mare de 5% a probabilitii, ipoteza se confirm. O
probabilitate mai mic de 5% poate apare dac ipoteza nu este corect; valorile
experimentale au fost afectate de erori; numrul de indivizi din populaie este
prea mic.
65
ntrebarea 3
a) 1.plasarea liniar a genelor pe cromozomi (care a fost asemuit cu aranjarea
mrgelelor ntr-un irag);
2.tendina genelor de pe acelai cromozom de a se transmite n bloc sau
nlnuite (linkage), adic de a intra n gamei n combinaii parentale,
comportndu-se ca o unitate n ereditate.
3.tendina genelor nlnuite de a intra n gamei n alte combinaii dect cele
parentale, acest fenomen fiind denumit crossing-over.
b) Cnd dou sau mai multe gene sunt localizate n acelai cromozom, spunem c
sunt nlnuite.
Ele pot fi nlnuite fie pe un autozom (gene linkage), fie pe un cromozom al
sexului (gene sexlikage);
c) Pentru punerea n eviden a tezelor sunt utilizate metoda studiului generaiei

F2 i testcross-ul heterozigotului F1.
n cazul manifestrii linkage-ului complet, raportul de segregare n generaia
F2 este de 3:1, ceea ce demonstreaz c genele plasate pe acelai cromozom se
comport ca o singur unitate ereditar. n cazul crossing-overului,
fenotipurile parentale reapar n proporii egale i mari, iar recombinrile apar
n proporii mai mici n funcie de distana dintre gene.
.d) Crossing-overul este influenat de o serie de factori ce pot favoriza sau

defavoriza manifestarea acestuia: sexul, vrsta, zona heterecromatic, modificrile
structurale i numerice ale cromozomilor, factorii de mediu.
66
INSTRUCIUNI
Lucrarea de verificare solicitat, implic activiti care necesit cunoaterea
Unitii de nvare nr. 2.
Rspunsurile la ntrebri vor fi transmise tutorelui pentru comentarii, corectare
i evaluare.
Titulatura acestui curs (GENETICA), numrul lucrrii de verificare, numele i
prenumele studentei (studentului).
Fiecare rspuns va trebui s fie clar exprimat i s nu depeasc o jumtate de
pagin. Punctajul aferent este menionat pentru fiecare ntrebare.
1) Definii noiunile: hibridare, alele, homozigot, heterozigot 2p
2) Se ncrucieaza o linie de Mirabilis jalapa cu flori roii cu alt linie ce
prezint flori albe. n generaia F1, toi indivizii prezint flori roz. Explicai
acest rezultat i prezizai raportul fenotic ateptat in F2 2p
3) Se ncrucieaz o linie de tomate cu cretere nedeterminat i pulp roie cu
o alt linie ce prezint cretere determinat i pulp de culoare galben. n
generaia F1, toi indivizii prezint cretere determinat i pulp roie. Care va
fi raportul fenotipic ateptat n F2. 2p
4) Care a fost materialul de studiu folosit de ctre T.Morgan? 1p
5) Enumerai tipurile de crossing-over 2p
autoevaluare i s subliniai ce credei c ar trebui s cuprind acestea pentru a
fi mai eficiente.
2.7 Bibliografie minimal

1. Nicolae, I., Rduoiu, S., Butnaru, G.,Nicolae, F., 2000, Genetica- principii de baz ale
ereditii, Vol. I, Ed. Bioterra, Bucureti.
2. Hartl ,D. L., Jones, E., 2000, Genetica. Principi e applicazioni, Editoriale Grasso.
67
EREDITATEA CARACTERELOR CANTITATIVE
CUPRINS:
3.1. Obiectivele unitii de nvare nr.3 68

3.2. Determinsmul genetic al caracterelor cantitative 69
3.3. Sisteme de gene multiple. Hibridarea transgresiv 74
3.4. Variana genetic. Ereditatea n sens larg; ereditatea n sens restrns 79
3.7. Bibliografie minimal 86

Definineti noiunile folosite n biometrie;
Precizezi controlului genetic al caracterelor cantitative i
regulile privind ereditatea acestora;
Cunoti diferitele sisteme de alele multiple i raportul
fenotipic n cazul fiecrui sistem;
Definineti variana genotipic i categoriile de variane
aferente;
Dobndeti cunotinele privind eritabilitatea caracterelor
cantitative sau coeficientul de ereditate;
Explici hibridarea transgresiv.
68
3.2. Determinsmul genetic al caracterelor cantitative
Caracterele mendeliene sunt denumite caractere calitative, controlate de gene majore

(mendeliene), cu efecte marcante asupra fenotipului i care practic, nu sunt influenate de condiiile
de mediu. Cel mai adesea, un caracter calitativ este controlat de o singur gen major
(mendelian).
Majoritatea caracterelor i nsuirilor organismelor nu se manifest ns, prin diferene
pregnante, fiind uneori imposibil de a separa fenotipurile cu variaii mici i greu de sesizat.
Numeroase caractere cu importan economic precum elementele de productivitate (numrul de
frai, numrul de inflorescene, numrul de boabe, greutatea fructelor sau seminelor pe plant, etc),
capacitatea de producie (producia de semine, fructe, de mas vegetativ sau producia de ln, lapte,
ou etc), nsuirile fiziologice (rezisten la ger, la secet, la cdere etc), nsuirile biochimice
(coninutul n proteine, n ulei, n aminoacizi etc) prezint o gam continu de fenotipuri ntre minus
i plus varianta (variaie continu). Aceste caractere sau nsuiri ale organismelor se pot numra,
cntri sau msura, exprimndu-se numeric prin diferite valori care indic expresia lor fenotipic.
Asemenea caractere au fost denumite caractere metrice sau cantitative, iar ramura geneticii care se
ocup cu studiul lor a cptat denumirea de genetic cantitativ. n controlul expresiei fenotipice a
caracterelor cantitative sunt implicate dou sau mai multe perechi de gene denumite gene multiple,
poligene sau gene minore; fiecare gen contribuie la realizarea fenotipului ntr-o anumit
proporie i foarte discret, nct sunt necesare metode destul de complicate pentru determinarea
efectului lor. De asemenea, caracterele cantitative sunt influenate putemic de factorii de mediu, care
pot determina deviaii ale fenotipului ntr-un sens sau altul.
Genele care intervin n controlul caracterelor cantitative pot avea efecte aditive i egale,
efecte aditive i inegale i efecte opoziionale. Pe lnga genele multiple cu efecte aditive care au
ponderea cea mai mare n cadrul varianei genetice, pot interveni i unele gene nealele cu moduri de
aciune diferite.
n general, genele multiple implicate n manifestarea unui caracter cantitativ sunt situate n
cromozomi neomologi (gene independente). Prezena n acelai cromozom a mai multor loci din
acelai sistem de gene multiple (aprui prin duplicaie) constituie o piedic puternic n
obinerea unor genotipuri care s posede fie numai alele pozitive (active sau contribuitoare) fie
numai alele negative (inerte sau neutrale).
69
La nceputul geneticii mendeliene se considera c exist o diferen fundamental
ntre caracterele calitative i cele cantitative. Revine meritul lui Nilsson-Ehle (1909), de a
elucida legtura ntre aceste dou tipuri de caractere. Una dintre experienele clasice care i-a
permis s explice mecanismul ereditii cantitative a constat n ncruciarea unui soi de gru
cu boabe de culoare roie foarte intens cu un soi cu boabe albe.
n F1 toi indivizii erau omogeni, avnd boabe de culoare roie intermediar, iar n F2 a
rezultat un raport global de segregare de 15 roii : 1 alb. Dup gruparea atent a indivizilor
dup intensitatea culorii bobului au rezultat 5 clase fenotipice, cu variaie continu, ntr-un
raport de 1:4:6:4:1. El a interpretat aceste rapoarte fenotipice de segregare ca reprezentnd
segregarea a dou perechi de alele cu efecte individuale cumulative care determin acelai
caracter (vezi figura 3. 1.).
Fig. 3. 1. Ereditatea culorii bobului
Rou intens Alb
P R1R1R2 R2 r 1r 1r2r2
G R1R2 x r 1r2
F1 R1r 1R2r2 - rou intermediar
Autofecundare
F2
G R1R2 R1r2 r1R2 r1r2

R1R2 R1R1R2R2 R1R1R2r2 R1r1R2R2 R1r1R2r2
R1r2 R1R1R2r2 R1R1r2r2 R1r1R2r2 R1r1r2r2
r1R2 R1r1R2R2 R1r1R2r2 r1r1R2R2 r1r1R2r2
r1r2 R1r1R2r2 R1r1r2r2 r1r1R2r2 r1r1r2r2
Din analiza generaiei F2 rezult c:
1/16 4/16 6/16 R1R1r2r2 4/16 R1r1r2r2 1/16 r1r1r2r2

R1R1R2R2 R1R1R2r2 R1r1R2r2 r1R1R2r2
R1r1R2r2 r1r1R2r2
R1R1r2R2 R1r1R2r2 r1r1r2R2
R1r1R2r2
R1r1R2R2 r1r1R2R2
R1r1R2r2
rou rou intens rou interm. rou deschis alb
foarte
intens
4 alele 3 alele 2 alele 1 alel 0 alele
active active active activ active
70
Fiecare alel activ R1 i R2 contribuie cu o anumit parte la determinarea culorii roii,
fiind denumite gene active (contribuitoare sau favorabile), n timp ce alelele r1 i r2 determin
numai culoarea alb (fenotipul rezidual), fiind denumite gene inerte (neutrale). Deci, distribuia
genotipurilor i fenotipurilor calculate pe baza alelelor active i a celor neutrale este de 1:4:6.4.1,
adic 1/16 posed 4 alele active, 4/16 posed 3 alele active, 6/16 posed 2 alele active, 4/16
prezint o singur alel activ i 1/16 nu au nici o alel activ.
n alte experiene similare s-a gsit c la gru, culoarea boabelor este controlat de trei perechi
de gene. n acest caz, raportul general de segregare a fost de 63 boabe roii de diferite nuane: 1
bob alb, rezultnd 47 clase fenotipice de la rou la alb n proporie de 1:6:15:20:15:6:1. Din cele
prezentate mai sus, rezult c pe masur ce numrul de gene implicate n determinismul unui
caracter cantitativ crete, numrul claselor fenotipice crete progresiv dup o distribuie binomial,
n timp ce frecvena claselor extreme descrete.
n genetica cantitativ, ca de altfel i n genetica calitativ, se folosesc frecvent noiunile de
"caracter" i "nsuire". Considerm necesar s precizm c prin caracter se nelege o
particularitate morfologic sau anatomic, iar prin nuire se nelege o particularitate fiziologic,
biochimic, tehnologic sau adaptativ.
Pentru studiul ereditaii i variabilitaii caracterelor cantitative se fac n mod obligatoriu
msurtori, numrtori sau cntriri asupra unor populaii de indivizi, urmate de gruparea,
prelucrarea i interpretarea datelor. tiina care indic metodele de calcul, de sintez i de
interpretare a rezultatelor experimentale privind modul de transmitere al caracterelor cantitative de la
prini la urmai, poart denumirea de biometrie, genetic cantitativ, biostatistic sau genetic
statistic. Karl Pearson a definit biometria ca fiind "tiina ce utilizeaz metodele matematice n
studiul ereditii i variabilitii vieuitoarelor". Biometria deriv de la cuvintele greceti "bios" -
via i "metros"- a msura.
Obiectul biometriei l constituie variaiiie care se prezint sub form de valori numerice
rezultate din msurtori, numrtori, cntriri, analize etc, efectuate asupra organismelor ntregi sau a
unor pri ale acestora (spice, boabe, inflorescene, frunze, ramuri etc). Biometria opereaz cu date
biologice i permite compararea populaiilor experimentale (soiuri, linii, hibrizi, sue, cloni etc) cu
populaiile ideale, formulnd concluzii teoretice i practice pe baza datelor experimentale.
71
Analiza genetic a caracterelor cantitative trebuie s raspund unor exigene care s
sporeasc eficacitatea seleciei n procesele de ameliorare. Astfel, orice analiz genetic trebuie s
rezolve n principal, urmatoarele probleme:
-s precizeze contribuia genotipului (G) i a mediului (E) n exprimarea fenotipic a
diferitelor caractere n cadrul unui eantion de indivizi;
-s calculeze diferenele dintre diferite populaii i s stabileasc semnificaia (veridicitatea)
acestor diferene;
- s calculeze principalele valori (indici statistici) care furnizeaz informaii ct mai precise asupra
gradului de variabilitate al caracterelor analizate;
- s permit compararea valorilor empirice calculate pe probe medii cu valorile teoretice ale
populaiilor statistice, care s indice corespondena ntre, datele experimentale i cele
teoretice;
- s stabileasc tipul i gradul de corelaie dintre caracterele analizate;
-s calculeze diferenele de selecie, progresul genetic i indexul de selecie pentru caracterele cu
importan economic.
n perioada 1910-1913 EM. East i colaboratorii (citai de T.Crciun i colab., 1978) au
studiat ereditatea dimensiunilor tiuletelui la porumb, ajungnd la concluzii similare cu cele ale
lui Nilsson-Ehle. Pentru relevarea ereditii lungimii tiuletelui de porumb, E.M. East a ncruciat
un soi de porumb zaharat cu tiulete lung cu un alt soi de porumb de floricele cu tiulete mic,
obinnd n F1 tiulei de lungime intermediar ntre cei doi prini. Studiul generaiei F2 a
evideniat o mare variabilitate a lungimii tiuletelui ntre limite foarte largi, avnd o frecven
maxim indivizii din clasele de lungime mijlocie, in timp ce variabilele extreme au avut o
frecven foarte mic. Gruparea indivizilor din F2 n clase fenotipice (dup lungimea tiuleilor) a
dus la obinerea a 5 clase ntr-un raport de 1:4:6.4:1, sugernd faptul c acest caracter este controlat
de dou perechi de gene multiple.
Tot E.M. East (1916) a pus n eviden ereditatea cantitativ a lungimii corolei la florile
de tutun. Pentru aceasta el a ncruciat dou soiuri pure de N. longiflora cu un soi cu tubul corolei
lung i cellalt cu tubul corolei scurt. n F1 plantele aveau flori cu lungime mijiocie a corolei, iar n
F2 s-a observat o mare variabilitate a acestui caracter, fr a se gsi indivizi cu valorile extreme ale
prinilor. Autorul a explicat acest fenomen prin implicarea unui numar relativ mare de gene
72
multiple, ceea ce a determinat apariia cu frecvent redus a formelor extreme. Reapariia formelor
parentale ar fi posibil n contextul unei populaii hibride F2 mult mai numeroase.
Ulterior, au fost studiate numeroase caractere cantitative determinate de sisteme de gene
multiple cu efecte aditive la mazre, soia, gru, gura leului, tomate, etc.
1.. Avnd n vedere cele nvate n acest subcapitol i innd cont de spaiul avut la
dispoziie, v rugm s comentai sau s rspundei la urmtoarele ntrebri:
a) Prin ce se caracterizeaz caracterele cantitative:
b Care este obiectul biometriei:
c) Unde sunt plasate genele multiple:

Noiunile de caracter i nsuire.
Caracteristicile caracterelor cantitative.
Exemple de caractere cantitative i raporturile de segregare.
Obiectul biometriei..
Rspunsurile pe care trebuie s le dea genetica cantitativ n analiza unei
populaii..
73
3.3. . Sisteme de gene multiple. Hibridarea transgresiv
De la nceput geneticienii s-au preocupat de stabilirea relaiilor alelice i intergenice

din cadrul sistemelor poligenice.
n experientele de pionierat ale lui Nillson-Ehle efectuate la gru s-a descoperit
faptul c genele multiple implicate n culoarea bobului au efecte egale i aditive. Ulterior,
odat cu diversificarea i dezvoltarea cercetrilor de genetic cantitativ s-au descoperit i
alte sisteme de gene multiple: cele cu efecte inegale i aditive i cele cu efecte opoziionale,
precum i relaia genelor multiple cu gene din afara sistemului poligenic (gene cu
dominan total, gene epistatice, gene modificatoare etc).
Pentru relevarea relaiilor posibile dintre genele multiple s presupunem c avem un
sistem poligenic cu 4 perechi de gene care controleaz un anumit caracter cantitativ. Unul
dintre prini are genele active (contribuitoare), respectiv A1 A1 A2 A 2A3 A3 (P1 ), iar cellalt
printe are numai genele neutrale, respectiv a1a1a2a2a3a3a4a4 (P2). Dac se consider c
fiecare alel activ contribuie la realizarea caracterului cu trei uniti, iar o alel neutral
contribuie cu o singur unitate, atunci putem s exemplificm principalele modele de
sisteme poligenice (T.Crciun i colab., dup V. Granth, 1964; 1975).
3.3.1. Sisteme de gene multiple cu efecte egale i aditive (modele polimerice).
n acest sistem, genele implicate au efecte egale i aditive, iar modul lor de comportare n
F1 i F2 se prezint astfel:
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 6 + 6 + 6 + 6 = 24
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 =2+2+2+2= 8
F1: A1a1A2a2A3a3A4a4 = 4 + 4 + 4 + 4 = 16 (intermediar)
n F2, vor rezulta 9 clase fenotipice cu variaie continu, n raportul de

1:8:28:56:70:56:28:8:1, cu valorile extreme de 1/256 A1A1A2A2A3A3A4A4 - 1/256
a1a1a2a2a3a3a4a4. Reprezentarea grafic a distribuiilor din F2 determin o curb normal i simetric
cu extremele 8 i 24, iar media de 16 (la mijlocul curbei).
Dac la unul dintre loci, ntre cele dou alele apare relaia de dominan i recesivitate, de
exemplu ntre A1 i a1, atunci valoarea i distribuia fenotipurilor va fi urmtoarea:
74
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 6 + 6 + 6 + 6 = 24
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 =2+2+2+2= 8
F1: A1 a1A2a2A3a3A4a4 = 6 + 4 + 4 + 4 = 18
n scest caz, valoarea hibridului F1 nu mai este intermediar (este mai mare), iar n F2 rezult
tot 9 clase, ns curba de variaie va fi asimetric, deviat spre printele P1.
3.3.2. Sisteme de gene multiple cu efecte inegale i aditive (modele

anisomerice).
n acest caz, alelele din sistem au contribuii diferite (inegale) la realizarea fenotipului.
Dac n exemplul folosit locusul A1 are efecte triple fa de locii A2, A3 i A4 (n lipsa dominanei
totale), modelul anisomeric se prezint astfel:
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 18 + 6 + 6 + 6 = 36
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 = 6 + 2 + 2 + 2 = 12
F1: A1a1A2a2A3a3A4a4 = 12 + 4 + 4 + 4 = 24
F1:A1A1A2A2A3A3A4A4 a1a1a2a2a3a3a4a4
1/256 1/256
i n scest caz, n F1 hibrizii prezint valori intermediare, iar n F2 ei se distribuie tot dup
o curb simetric, cu un numr mai mare de clase fenotipice i cu o frecven mai redus a indivizilor
cu valori mijlocii. Dac una dintre perechile de gene manifest dominan total (de exemplu, A1 >
a1), atunci n F1 i n F2 curba de variaie sufer o deviaie spre printele P1 cu alela dominant:
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 18 + 6 + 6 + 6 = 36
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 = 6 + 2 + 2 + 2 = 12
F1: A1 a1A2a2A3a3A4a4 = 12 + 4 + 4 + 4 = 24
Deci hibridul F1 = (P1 + P2) / 2
75
3.3. 3. Sisteme de gene multiple cu efecte opozitionale
n acest caz, unele gene din sistem acioneaz n sens pozitiv, iar altele n sens negativ.
Expresia fenotipic rezult din suma algebrica a genelor multiple implicate. Folosind tot
exemplul anterior cu 4 loci, n care gena A1 are efect pozitiv, iar genele A2 , A3 i A4 au efecte
negative, rezult urmatoarele fenotipuri:
P1: A1A1A2A2A3A3A4A4 = 54 - 6 - 6 - 6 = 36
P2: a1a1a2a2a3a3a4a4 = 18 - 2 - 2 - 2 = 12
F1: A1a1A2a2A3a3A4a4 = 36 - 4 - 4 - 4 = 24
Se observ c i n aceast situaie, fenotipul este intermediar n F1, iar n F2, anumite
genotipuri (combinaii de gene) depsesc valorile extreme, datorit segregrii transgresive.
Astfel, genotipul A1A1a2a2a3a3a4a4 cu fenotipul 54 -2-2-2-2 = 48, care depaete cu mult
printele cu fenotipul maximal (P1 = 36) i este dublu comparativ cu F1 = 24, n timp ce genotipul
a1a1A2A2A3A3A4A4 cu fenotipul 18 - 2 6 - 6 = 4 este cu mult inferior printelui minimal (P2 =
12).
O situaie similar apare i n F1, n situaia n care la unii loci din sistemele
opoziionale sunt implicate gene majore cu dominan complet. Astfel, dac perechea de
alele multiple cu efecte pozitive A1a1 manifest dominan total n F1, atunci genotipul din F1
(A1a1A2a2A3a3A4a4 a4) cu fenotipul 54 4 4 4 = 42 depete printele maximal, P1 cu
fenotipul 54 6 6 6 = 32.
3.3.4. . Hibridarea transgresiv (segregarea sau variaia transgresiv)
Variaia transgresiv, ca rezultat al hibridrii ntre forme deosebite genetic are unele
efecte asemntoare cu heterozisul, n sensul c n urma ncrucirii apar indivizi cu fenotipuri
superioare prinilor.
Deosebirile ntre cele dou fenomene, ambele proprii caracterelor cantitative sunt ns
mult mai numeroase. Astfel, heterozisul se manifest n F1, n stare heterozigot i afecteaz toi
indivizii acestei generaii, n timp ce variaia transgresiv apare ncepnd cu generaia F2, n stare
76
homozigot (stabil) i afecteaz un numr foarte redus de indivizi; heterozisul este rezultatul
combinrii genelor multiple iar variaia transgresiv este rezultatul recombinrii genelor multiple
n urma segregri acestora.
Condiia esenial pentru apariia variaiilor transgresive (pozitive sau negative) este ca
formele parentale s nu reprezinte extreme ale unui caracter poligenic, adic prinii s nu fie
saturai n gene active (AABBCCDD) i, respectiv gene inactive (aabbccdd). Astfel, la o
hibridare cu alele active, i respectiv inactive la doi loci, apariia variaiilor transgresive are loc
dup schema:
P: AAbb x aaBB
F1: AaBb
F2: 1/16 AABB - este variaia transgresiva pozitiv ( cu toate alele pozitive), cu un fenotip
superior ambilor parini.
1/16 aabb - este variaia transgresiv negativ (cu toate alele negative), cu un fenotip
inferior ambilor prini.
ntre aceste fenotipuri extreme sunt cuprini indivizi cu 3 alele pozitive (4/16), cu dou
alele pozitive (6/16) i cu o alel pozitiv (4/16). Deci, raportul fenotipic de segregare este de
1:4:6:4.
La o hibridare transgresiv de tipul AABBCCdd x aabbccDD n F1 rezult heterozigotul
AaBbCcDd cu un fenotip intermediar, iar n F2 pot aprea variaii transgresive pozitive cu o
frecven de 1/256 AABBCCDD care depete printele maximal i variaii transgresive
negative cu o frecvent de 1/256 aabbccdd, care au fenotipuri inferioare printelui minimal.
Frecvena variaiilor transgresive este cu att mai mare cu ct numrul genelor multiple
ce determin caracterul luat n considerare este mai mic i invers. Aceasta nseamn c la
caracterele determinate de un numr relativ mare de gene trebuie s avem o descenden foarte
numeroas n generaiile de segregare.
Probabilitatea de a se ncrucia indivizi cu alele opuse, care s dea forme transgresive n
generaiile segregante (F2, backcross, etc.) depinde de numrul combinaiilor hibride. Cu ct
numrul i diversitatea partenerilor de ncruciare este mai mare, cu att ansa de a se ntlni
77
"parteneri ideali" este mai mare. n acest scop, hibridrile dialele cu parteneri foarte diferii
genetic i numeroi sunt cele mai recomandate i folosite n acest scop.
2.. Avnd n vedere cele nvate n acest subcapitol i innd cont de spaiul
ntrebri:
a) Prin ce se caracterizeaz sistemul de gene multiple cu efecte aditive i
inegale:
b Prin ce se caracterizeaz sistemul de gene multiple cu efecte opoziionale:
c) Prin ce se caracterizeaz sistemul de gene multiple cu efecte aditive i egale :

Cele mai cunoscute sisteme de gene multiple implicate n controlul
genetic al caracterelor cantitative.
Fenotipul generaiei F1 i segregarea din F2, caracteristic fiecrui
sistem de gene multiple.
Efectele hibridrii transgresive.
78
3.4. Variana genetic. Ereditatea n sens larg; ereditatea n sens restrns
Variabiliatatea unei populaii se apreciaz prin msurarea varianei. n acest scop se alege
o prob medie de indivizi dintr-o populaie, se msoar caracterul cantitativ ce se studiaz.
Datele primare ale analizei se prezint n iruri de variaie, specificndu-se frecvena cazurilor
cuprinse ntre limitele fiecrei clase.
Valoarea varianei unei populaii de plante sau animale, reprezint variana totala sau
fenotipic a unui caracter oarecare, indiferent dac aceast variabilitate este determinat genetic
sau este cauzat de condiiile de mediu.
mprirea varianei fenotipice numai n varian genotipic i varian datorit mediului
nu este suficient pentru a nelege proprietile genetice ale unei populaii i n special nu se
dezvluie cauza asemanri dintre rude. De aceea variana genotipic, n funcie de modul de
aciune a genelor, a fost mprit n: varian aditiv(VA), varian de dominan(VD) i
variana interaciunii(VI).
Variana genetic aditiv sau variana valorii de ameliorare reprezint componentul cel
mai important al variaiei totale ce se transmite ereditar i este determinat de aciunea genelor
polimere cu efect aditiv. Vriana genetic aditiv este cauza principal a asemnrii ntre rude i
determinana principal a proprietailor genetice ale unei populaii, precum i a rspunsului
populaiei la selecie. Este singurul component care poate fi uor estimat pe baza observaiilor
fcute asupra unei populaii. inndu-se seama de importana varianei aditive, n mod practic,
variana fenotipic se subdivide n varian genetic aditiv i restul, alctuit din variana
genetic neaditiv i variana mediului.
Variana genetic a dominanei face parte din variana genetic total
determinat de manifestarea dominanei intre alelele unui locus n cazul unei forme heterozigote.
Ea reprezint devaia unui hibrid de la valoarea medie a caracterului prinilor si heterozigoi.
n figura 1.1. se perzint cazul cnd n urma ncruciri ntre parinii homozigoi A1 A1 i A2 A2
, heterozigotul A1 A2 dup fenotip este mai aproape de genotipul A2 A2 dect de genitorul A1 A1.
Abaterea heterozigotului de la punctul mediu datorit dominanei este notat prin distana d.
Diferena dintre genitorii homozigoi este egal cu a+a sau 2a.
n dependen de gradul de dominan ntre valorile a i d pot aprea diferite situaii:
d = 0 lipsa total a dominanei;
79
d = a dominan complet;
d < a dominan incomplet;

d>a supradominan.
Variana genetic a interaciunii se datoreaz interaciunii unor gene nealele. Variana
interaciunii(VI) include interaciunile ntre valorile aditive ale diferiilor loci(aditiv x aditiv,
VAA), include interaciunile ntre contribuia aditivitii i dominanei (aditiv x dominant, VAD),
interaciunile ntre genele dominante(dominant x dominant, VDD). Deci, variana genetic
datorit interaciunii poate fi descompus astfel:VI=VAA+VAD+VDD.
Tabelul 3..2. Descompunerea varianei pentru unele caractere la Drosophila melanogaster.
Varina Simbolul Caracterul
Peri Torace Ovar Ovule
Fenotipic Vp 100 100 100 100
Genetic aditiv VA 52 43 30 18
Genetic neaditiv VP + VI 9 6 40 44
Mediului VE 39 51 30 38
Variana genetic a interaciunii genelor complic foarte mult analiza statistic a

ereditii cantitative. Evidenierea interaciunii genelor nealele sau a rolului lor n modificarea
manifestrii genelor prezente n ali loci este dificil. Din aceast cauz calculul statistic al
valorii varianei interaciunii adesea nu se efectueaz.
mprirea varanei genetice n categoriile menionate are mai mult un caracter teoretic.
Separarea componenilor de dominan i interaciune se efectueaz printr-o tehnic destu de
complicat care necesit un mare numr de observaii
80
3.4.1. . Eritabilitatea n sens larg; eritabilitatea n sens restrains
Eritabilitatea, denumit uneori i coeficientul de ereditate, reprezint un parametru

genetic care determin gradul de asemnare dintre rude. Altfel spus, eritabilitatea exprim
proporia varianei totale atribuit efectului mediu al genelor, respectiv gradul n care o anumit
caracteristic este transmis descendenilor, deci msura n care aceasta este reproductibil.
Se noteaz cu h2 i se exprim matematic prin raportul dintre variana de natur genetic
existent pentru un caracter i variana total, fenotipic:
h2 = 2G / 2F
Cunoaterea mrimii coeficientului de eritabilitate este foarte important, deoarece
selecia n vederea ameliorrii caracterelor d rezultate cu att mai bune cu ct eritabilitatea este
mai mare. De aceea, acest parametru a mai fost denumit coeficient de determinare genetic sau
coeficient de predicie genetic.
Exist dou tipuri de eritabilitate: n sens larg(genotipic), notat cu h2G i n sens
restrns(n sens strict), notat cu h2A(genetic).
Eritabilitatea n sens larg (genotipic) red regresia valorii genotipice asupra valorii
fenotipice i ia n calcul att componenta genetic determinat de aditivitate, ct i pe cea
neaditiv:
h2G= 2G / 2F= (2A + 2D + 2I) / 2F
Acest tip de eritabilitate este reproductibil n ntregime prin nmulirea vegetativ.
Eritabilitatea n sens restrns (genetic) se determin ca regresia valorii aditive a genelor
asupra valorii fenotipice:
h 2 A = 2 A / 2 F
Variana aditiv definete, aa cum s-a mai precizat, valoarea de ameliorare, deoarece
cuantific ndeosebi caractere cantitative de interes n programe de ameliorare a diverselor
specii.
Dac eritabilitatea este privit ca regresia valorii de ameliorare(VA) ctre valoarea
fenotipic(VF), se poate deduce c cea mai bun apreciere a valorii de ameliorare a unui individ
rezult din produsul dintre valoarea lui fenotipic(F) i coeficientul de eritabilitate(h2):
2A = h2 2F sau VA = h2 VE
81
Coeficientul de eritabilitate poate avea valori ntre 0 1. Dac h2 = 0, nu exist nicio
legtur ntre genotip i fenotip, caracterul respectiv fiind indus exclusiv de factorii de mediu,
nefiind astfel reproductibil la descendeni. Pe msur ce valorile coeficientului de eritabilitate
cresc, determinismul genetic al caracterelor este din ce n ce mai mare. Astfel, eritabilitatea este
maxim(100%) cnd h2 = 1, ceea ce nseamn c n realizarea caracterului respectiv intervin
numai cauze genetice, fr a fi implicai factorii de mediu. Aa sunt, de exemplu, caracterele
definitorii ale speciilor, cum sunt tipul normal de sexualizare prin determinism cromozomal sau
structura normal a florilor, forma de ansamblu a frunzelor .a.
ntrebri:
a)Definii variana genetic aditiv:
b Definii variana de interaciune:
c) Ce valori poate avea coeficientul de eritabilitate :

Componentele varianei fenotipice.
Componentele varianei genetice.
Definiia i clasificarea eritabilitii..
82
ntrebarea 1
a) Aceste caractere sau nsuiri ale organismelor se pot numra, cntri sau msura,
exprimndu-se numeric prin diferite valori care indic expresia lor fenotipic.
Asemenea caractere au fost denumite caractere metrice sau cantitative, iar ramura
geneticii care se ocup cu studiul lor a cptat denumirea de genetic cantitativ. n
controlul expresiei fenotipice a caracterelor cantitative sunt implicate dou sau mai
multe perechi de gene denumite gene multiple, poligene sau gene minore; fiecare
gen contribuie la realizarea fenotipului ntr-o anumit proporie i foarte discret,
nct sunt necesare metode destul de complicate pentru determinarea efectului lor. De
asemenea, caracterele cantitative sunt influenate putemic de factorii de mediu, care pot
determina deviaii ale fenotipului ntr-un sens sau altul.
b) Obiectul biometriei l constituie variaiiie care se prezint sub form de valori

numerice rezultate din msurtori, numrtori, cntriri, analize etc, efectuate asupra
organismelor ntregi sau a unor pri ale acestora (spice, boabe, inflorescene, frunze,
ramuri etc). Biometria opereaz cu date biologice i permite compararea populaiilor
experimentale (soiuri, linii, hibrizi, sue, cloni etc) cu populaiile ideale, formulnd
concluzii teoretice i practice pe baza datelor experimentale.
c) n general, genele multiple implicate n manifestarea unui caracter cantitativ sunt

situate n cromozomi neomologi (gene independente). Prezena n acelai
cromozom a mai multor loci din acelai sistem de gene multiple (aprui prin
duplicaie) constituie o piedic puternic n obinerea unor genotipuri care s
posede fie numai alele pozitive (active sau contribuitoare) fie numai alele negative
(inerte sau neutrale).
83
ntrebarea 2
a) n acest caz, alelele din sistem au contribuii diferite (inegale) la realizarea

fenotipului. n scest caz, n F1 hibrizii prezint valori intermediare, iar n F2 ei se
distribuie tot dup o curb simetric, cu un numr mai mare de clase fenotipice i cu o
frecven mai redus a indivizilor cu valori mijlocii. Dac una dintre perechile de gene
manifest dominan total (de exemplu, A1 > a1), atunci n F1 i n F2 curba de variaie
sufer o deviaie spre printele P1 cu alela dominant:
b) n acest caz, unele gene din sistem acioneaz n sens pozitiv, iar altele n sens
negativ. Expresia fenotipic rezult din suma algebrica a genelor multiple
implicate. Se observ c i n aceast situaie, fenotipul este intermediar n F1, iar
n F2, anumite genotipuri (combinaii de gene) depsesc valorile extreme, datorit
segregrii transgresive.
c) n acest sistem, genele implicate au efecte egale i aditive. n F2, vor rezulta
clase fenotipice cu variaie continu, n raportul de 1:8:28:56:70:56:28:8:1, cu
valorile extreme de 1/256 A1A1A2A2A3A3A4A4 - 1/256 a1a1a2a2a3a3a4a4., dac se
ia n calcul un sistem de 4 gene multiple. Reprezentarea grafic a distribuiilor din F2
determin o curb normal i simetric.
84
ntrebarea 3
a) Variana genetic aditiv sau variana valorii de ameliorare reprezint
componentul cel mai important al variaiei totale ce se transmite ereditar i este
determinat de aciunea genelor polimere cu efect aditiv. Vriana genetic aditiv
este cauza principal a asemnrii ntre rude i determinana principal a
proprietailor genetice ale unei populaii, precum i a rspunsului populaiei la
selecie. Este singurul component care poate fi uor estimat pe baza observaiilor
fcute asupra unei populaii. inndu-se seama de importana varianei aditive, n
mod practic, variana fenotipic se subdivide n varian genetic aditiv i restul,
alctuit din variana genetic neaditiv i variana mediului.
b) Variana genetic a interaciunii se datoreaz interaciunii unor gene nealele.

Variana interaciunii(VI) include interaciunile ntre valorile aditive ale diferiilor
loci(aditiv x aditiv, VAA), include interaciunile ntre contribuia aditivitii i
dominanei (aditiv x dominant, VAD), interaciunile ntre genele
dominante(dominant x dominant, VDD). Deci, variana genetic datorit
interaciunii poate fi descompus astfel:VI=VAA+VAD+VDD.
c) Coeficientul de eritabilitate poate avea valori ntre 0 1. Dac h2 = 0, nu exist

nicio legtur ntre genotip i fenotip, caracterul respectiv fiind indus exclusiv de
factorii de mediu, nefiind astfel reproductibil la descendeni. Pe msur ce valorile
coeficientului de eritabilitate cresc, determinismul genetic al caracterelor este din
ce n ce mai mare. Astfel, eritabilitatea este maxim(100%) cnd h2 = 1, ceea ce
nseamn c n realizarea caracterului respectiv intervin numai cauze genetice, fr
a fi implicai factorii de mediu. Aa sunt, de exemplu, caracterele definitorii ale
speciilor, cum sunt tipul normal de sexualizare prin determinism cromozomal sau
structura normal a florilor, forma de ansamblu a frunzelor .a.
85
INSTRUCIUNI
Lucrarea de verificare solicitat, implic activiti care necesit cunoaterea
Unitii de nvare nr. 3.
Rspunsurile la ntrebri vor fi transmise tutorelui pentru comentarii, corectare
i evaluare.
Titulatura acestui curs (GENETICA), numrul lucrrii de verificare, numele i
prenumele studentei (studentului).
Fiecare rspuns va trebui s fie clar exprimat i s nu depeasc o jumtate de
pagin. Punctajul aferent este menionat pentru fiecare ntrebare.
1) Care sunt problemele la care trebuie s rspund genetica cantitativ 2p
2) Enumerai i caracterizai sistemele de gene multiple 2p
3) Explicai controlul genetic al culorii bobului de gru. 2p
4) Descriei componentele varianei fenotipice totale 2p
5) Definii i clasificai eritabilitatea1p
autoevaluare i s subliniai ce credei c ar trebui s cuprind acestea pentru a
fi mai eficiente.
3.7.Bibliografie minimal
1. Andrei P.,1998, Genetic Ed. Museum, Chiinu

2. Prnu Ghe.,2010, Genetica i ameliorarea arborilor- Ed. Silcic, Bucureti.
.
86
CONSANGVINIZAREA I HETEROZISUL
CUPRINS
4.2. Consangvinizarea 88
4.3. Heterozisul 92
4.1. Obiectivele Unitii de nvare nr. 4

Defineti consangvinizarea i heterozisul.
Cunoti efectele fenotipice i genotipice ale
consangvinizrii.
Identifici importana consangvinizrii i a
heterozisului n procesul de producere de smn.
Precizezi tipurile de hibrizi comerciali F1 dup
modul de formare.
87
4.2. Consangvinizarea
Consangvinizarea reprezint autofecundarea forat a plantelor alogame sau ncrucisarea

ntre indivizi nrudii, la animale i om, ( frate x sor, tat x fiic, mam x fiu).
Descendena consangvin timp de mai multe generaii succesive a unei plante alogame
sau a unei perechi de indivizi ( la animale ) este cunoascut sub denumirea de linie
consangvinizat. Efectul major al consangvinizrii este obinerea de genotipuri noi, homozigote,
ca urmare a desfacerii populaiei autofecundate n genotipurile componente. Astfel,
consangvinizarea reprezint o alt surs important de variabilitate genetic.
Consangvinizarea constituie o metod utilizat in ameliorarea numeroaselor specii de
plante alogame (porumb, floarea soarelui, sfecl, ceap, varz, morcov, castravei etc.), precum
si la unele specii de animale (psri, porci etc.).
EFECTELE FENOTIPICE ALE CONSANGVINIZRII
Datorit consangvinizrii, are loc o reducere puternic a vitalitii, care afecteaz

capacitatea de cretere, de reproducere i de adaptare, mai ales dup prima autofecundare forat
( C1). Acest fenomen cunoscut i sub denumirea de de depresiune de consangvinizare, variaz
foarte mult cu specia de plante. Astfel, este nul la dovleac, foarte mic la sfecl i foarte
puternic la porumb, floarea soarelui, varz, salat, ceap, morcov, etc. Reducerea vitalitii are
loc pan la C7 C8 , cnd se ajunge la un minim de consangvinizare.
Scderea vitalitii este marcat de reducerea taliei, a suprafeei foliare, diminuarea
elementelor de productivitate i, respectiv, scderea evident a produciei, apariia unor
deficiene clorofiliene etc.
Un efect fenotipic important l reprezint scderea rezistenei liniilor de consangvinizare
la anumii factori de mediu datorit gustrii bazei genetice. Odat cu creterea numrului de
generaii consangvine se realizeaz uniformitatea fenotipic a liniilor consangvinizate, care
practic dup 7-10 generaii sunt homozigote la majoritatea locilor.
88
EFECTELE GENOTIPICE ALE CONSANVINIZRII
Cele mai importante efecte genotipice sunt urmtoarele:

1) segregarea puternic in primele generaii de autofecundare si desfacerea
populaiei n biotipurile componente care pot fi : homozigot-recesive,
homozigot-dominante, homozigot-recesive pentru anumii loci i homozigot-
dominante pentru ali loci. Genotipurile homozigot-recesive se identific relativ
uor i prezint n unele cazuri caracteristici duntoare, cum ar fi: plante
pitice, debile, sterile, cu deficiene clorofiliene etc. Ele pot fi identificate n C1
sau C2 i pot fi eliminate uor.
2) creterea homozigoiei odat cu numrul de generaii consangvine. Indicele
folosit frecvent pentru aprecierea gradului de homozigoie ntr-o populaie
autopolenizat n funcie de numrul locilor luai n considerare, generaia de
consangvinizare i numrul indivizilor dintr-o generaie de consangvinizare,
este coeficientul de consangvinizare (F). Acesta poate avea valori cuprinse ntre
0 i 1.
Valoarea 0, nseamna c nici un locus nu este homozigot,
valoarea 1 toi locii sunt homozigoi ( valoare ideal).
n
Fnt = 1(1 i / 2 N ) t In care:
F= coeficientul de consangvinizare, care nu se confund
cu simbolul pentru generaiile hibride;
t = numrul generaiei de consangvinizare (se numeroteaz cu cifre romane: I, II, III,....);
N= numrul total de indivizi dintr-o generaie consangvin.
n= numrul de loci luat n considerare.
3) Eliminarea din populaie a genelor letale ( n stare homozigot se manifest).
IMPORTANA LINIILOR CONSANGVINIZATE

Aa cum s-a artat, liniile consangvinizate au n general, vitalitate redus, motiv pentru
care nu pot fi folosite direct n producie. Cu toate acestea, la majoritatea speciilor alogame
89
anuale, obinerea i folosirea liniilor consangvinizate n ameliorarea acestor specii, este o metod
eficace din urmtoarele considerente majore:
1. unele linii consangvinizate sunt valoroase datorit manifestrii unor gene recesive n
stare homozigot, care controleaz caractere i nsuiri dorite de om, cum ar fi: port erect, tuf
compact, frunze sesile, coninut redus in alcaloizi, rezisten mare la anumii factori de
mediu, etc.;
2. obinerea efectului heterozis prin ncrucusarea liniilor consangvinizate i obinerea
hibrizilor comerciali F1, care treptat tind s nlocuiasc soiurile la numeroase specii de
plante..
Din acest punct de vedere , putem spune c avem hibrizi simpli ce conin dou linii
consangvinizate (HS = AxB); hibrizi triliniari ce conin trei linii consangvinizate ( HT = HS x
C) i hibrizi dubli ce conin patru linii consangvinizate ( HD = HS x HS). n cazul hibrizilor
triliniari i dubli nu trebuie s existe linie comun ( HT = HS(AxB) x B).
90
ntrebri:
a)Definii consangvinizarea:
b Cum se apreciaz gradul de homozigotare n lucrrile de consangvinizare?
c) Cum se numete descendena obinut dup consangvinizare?:

Definiia consangvinizrii.
Efectele fenotipice ale consangvinizrii.
Efectele genotipice ale consangvinizrii.
Importana liniilor consangvine.Componentele varianei genetice.
91
4.3. Heterozisul
Heterozisul este fenomenul opus consagvinizrii, care reprezint expresia genetic

favorabil a hibridrii. Cu alte cuvinte, heterozisul reprezint creterea vigorii hibride n F1 n
urma ncrucirii ntre forme (linii consagvinizate, soiuri, etc.) diferite genetic. ncepnd cu
generaia F2, efectul heterozis scade datorit segregrii.
Fenomenul de heterozis are un rol deosebit n ameliorarea plantelor alogame, el
putndu-se fixa la plante cu nmulire vegetativ. De asemenea, heterozisul se manifest i la
plantele autogame (tomate, ardei, etc.).
Intensitatea heterozisului este foarte mare la ncruciarea ntre linii consangvinizate sau
ntre soiuri (linii pure) i scade la ncruciarea ntre forme cu grad ridicat de heterozigoie.
Fenomenul heterozis afecteaz att caracterele cantitative (elemente de productivitate,
nsuiri biochimice, nsuiri fiziologice etc), ct i o serie de carctere calitative (culoarea i forma
unor gene, etc.).
Dup natura caracterelor i nsuirilor afectate se disting urmtoarele tipuri de heterozis
(Gustafsson, 1951):
- heterozis reproductiv cnd n F1 sporete productiviteatea de semine i respectiv,

producia de fructe;
- heterozis somatic cnd n F1 crete considerabil masa vegetativ;
- heterozis adaptiv cnd n F1 se nregistreaz o cretere a rezistenei plantelor la anumii
factori de mediu; acest tip de heterozis apare mai ales la ncrucirile ndeprtate.
-
Efectul heterozis ( HF1) se calculeaz frecvent n dou moduri, i anume:
HF1 = XF1- (XP1 + XP2 )/2 sau:
HF1 = XF1 XPmax
n care: XF1 = media aritmetic a populaiei F1 pentru caracterul analizat;

XP1 = media aritmetic a populaiei printelui cu valoarea fenotipic maxim,
notat cu P1.
XP2 = media aritmetic a populaiei printelui cu valoarea minim, notat cu P2.
92
n generaiile urmtoare, efectul heterozis scade cu 50% de la o generaie la alta datorit
reducerii heterozigoilor cu cte 50%.
Astfel, HF2 =1/2 HF1 HF3 = 1/2 HF2 etc.
Teorii care explic fenomenul heterozis. Dintre teoriile care ncearc s explice
fenomenul heterozis, cele mai acceptate sunt urmtoarele:
a) teoria dominanei ( A.B. Bruce i B.C. Davenport, 1910 ) care presupune c

vigoarea hibrid este atribuit aciunii factorilor dominani asupra creterii i vigorii plantelor,
fiecare cuplu de alele heterozigote avnd o valoare fenotipic egal cu perechea homozigot
parental dominant, adic Aa = AA.
Exemplu: s acceptm c un anumit caracter cantitativ este controlat de 4 perechi de
grupe multiple i c fiecare gen activ contribuie la realizarea fenotipului cu 2 uniti, iar fiecare
gen neutral cu o unitate. Rezult c:
P AAbbCCdd x aaBBcccDD
2+1+2+1 = 6 1+2+1+2 = 6
F1 AaBbCcDd
2+2+2+2 = 8
Se observ c hibridul F1 are o valoare fenotipic superioar prinilor.
b) teoria supradominanei ( G.H. Schull,1945) presupune c vigoarea hibrid n F1 se

datoreaz faptului c heterozigotul F1 depete printele homozigot dominant. Adic, Aa >AA.
Fa de exemplul precedent, genotipul Aa = 2.5 uniti, fa de Aa = 2 uniti i aa = 1 unitate.
93
P AABBCCDD X aabbccdd
2+2+2+2 = 8 1+1+1+1 = 4
F1 AaBbCcDd
2.5+2.5+2.5+2.5 = 10
Rezult c, hibridul F1 are o valoare fenotipic mai mare dect printele homozigot
dominant.
c) teoria heterozigoiei ( G.H. Schull, E.M. East i H.K. Hayes, 1912) se bazeaz pe
faptul c, cu ct n F1 se acumuleaz mai multe gene opuse (heterozigote), cu att efectul
heterozis este mai puternic, atingnd valoarea maxim la hibrizii F1 cu heterozigoie la toi locii.
Deci, efectul heterozis este direct proporional cu numrul de gene n stare heterozigot.
Alte teorii explic insuficient fenomenul heterozis sau se refer la cazuri limitate.
Variabilitate fenotipic nregistrat n F1 este mai mic dect cea a liniilor consangvinizate
parentale, demonstrnd c acestea sunt mai sensibile la condiiile de mediu dect hibrizii F1.
Geneticienii utilizeaz termenul de homeostazie care face aluzie la meninerea unei stri de
echilibru pe plan ontogenetic i filogenetic, n limitele uzuale ale fluctuaiilor de mediu.
IMPORTANA PRACTIC A HETEROZISULUI
Pe lng rolul heterozisului n evoluia plantelor, el este considerat ca o metod de

ameliorare extrem de preioas i benefic pentru sporirea produciei agricole. Aa se explic
faptul c la numeroase specii agricole hibrizii F1 se afirm foarte rapid i cu siguran ei vor
nlocui soiurile existente n cultur.
Cercetrile efectuate la plantele autogame ( Lerber, 1954 ) au dus la concluzia c efectul
heterozis poate fi mare i foarte important n direcia heterozisului reproductiv ( creterea
94
produciei de fructe, de semine etc ) i adaptiv, i mai puin semnificativ n direcia creterii
masei vegetative. Odat cu descoperirea sterilitii mascule i a genelor restauratoare de
fertilitate, precum i a posibilitilor de polenizare se asigur premize rapide de ameliorare a unor
specii autogame foarte importante cum sunt : grul, orzul, mazrea, fasolea, soia etc.
Dintre plantele legumicole, tomatele, ardeii, vinetele, castraveii, pepenii etc., manifest un
pronunat efect heterozis. La plantele pomicole a fost semnalat o cretere a vigorii hribride la
prun i piersic.
La unele specii de plante heterozisul din F1 poate fi fixat n descenden prin nmulirea
vegetativ a hibrizilor din prima generaie. Micropropagarea prin culturi de celule i meristeme
apare ca o alternativ rapid de fixare a heterozisului.
Fixarea heterozisului se poate realiza i pe diferite ci genetice, precum: inducerea
popliploidiei, inducerea unor translocaii multiple, a unor deficiene i inversii cromozomale, etc.
ntrebri:
a)Definii heterozisul:
b Precizai teoria heterozigoiei:
c) Ct se menine efectul heterozis?


Definiia heterozisului.
Clasificarea heterozisului.
Teoriile ce explic heterozisul.
Importana heterozisului.
95
ntrebarea 1
a) Consangvinizarea reprezint autofecundarea forat a plantelor alogame sau
ncrucisarea ntre indivizi nrudii, la animale i om, ( frate x sor, tat x fiic,
mam x fiu).Efectul major al consangvinizrii este obinerea de genotipuri noi,
homozigote, ca urmare a desfacerii populaiei autofecundate n genotipurile
componente. Astfel, consangvinizarea reprezint o alt surs important de
variabilitate genetic.Consangvinizarea constituie o metod utilizat in ameliorarea
numeroaselor specii de plante alogame (porumb, floarea soarelui, sfecl, ceap,
varz, morcov, castravei etc.), precum si la unele specii de animale (psri, porci
etc.).
b) Indicele folosit frecvent pentru aprecierea gradului de homozigoie ntr-o
populaie autopolenizat n funcie de numrul locilor luai n considerare,
generaia de consangvinizare i numrul indivizilor dintr-o generaie de
consangvinizare, este coeficientul de consangvinizare (F). Acesta poate avea valori
cuprinse ntre 0 i 1.
Valoarea 0, nseamna c nici un locus nu este homozigot,
valoarea 1 toi locii sunt homozigoi ( valoare ideal).
Fnt = In care:
F= coeficientul de consangvinizare, care nu se confund
cu simbolul pentru generaiile hibride;
t = numrul generaiei de consangvinizare (se numeroteaz cu cifre
romane: I, II, III,....);
N= numrul total de indivizi dintr-o generaie consangvin.
n= numrul de loci luat n considerare.
c) Descendena consangvin timp de mai multe generaii succesive a unei plante
alogame sau a unei perechi de indivizi ( la animale ) este cunoascut sub
denumirea de linie consangvinizat.
96
ntrebarea 2
a) Heterozisul este fenomenul opus consagvinizrii, care reprezint
expresia genetic favorabil a hibridrii. Cu alte cuvinte, heterozisul
reprezint creterea vigorii hibride n F1 n urma ncrucirii ntre forme
(linii consagvinizate, soiuri, etc.) diferite genetic. ncepnd cu generaia
F2, efectul heterozis scade datorit segregrii. Dup natura caracterelor
i nsuirilor afectate se disting :
- heterozis reproductiv cnd n F1 sporete productiviteatea de
semine i respectiv, producia de fructe;
- heterozis somatic cnd n F1 crete considerabil masa vegetativ;
- heterozis adaptiv cnd n F1 se nregistreaz o cretere a rezistenei
plantelor la anumii factori de mediu; acest tip de heterozis apare mai
ales la ncrucirile ndeprtate.
b) Teoria heterozigoiei ( G.H. Schull, E.M. East i H.K. Hayes, 1912)

se bazeaz pe faptul c, cu ct n F1 se acumuleaz mai multe gene
opuse (heterozigote), cu att efectul heterozis este mai puternic,
atingnd valoarea maxim la hibrizii F1 cu heterozigoie la toi locii.
Deci, efectul heterozis este direct proporional cu numrul de gene n
stare heterozigot.
c) Efectul heterozis se menine o singur generaie, apoi scade cu 50%

datorit segregrii. Exist preocupri n sensul fixrii fenomenului de
heterozis. Heterozisul poate fi meninut la speciile cu nmulire
vegetativ.
97
4.5. Lucrare de verificare nr. 4
INSTRUCIUNI
ntrebare.
1) Definii consangvinizarea i heterozisul 1p
2) Care sunt tipurile de heterozis. Exemplificai 2p
3) Trecei n revist efectele fenotipice i genotipice ale consangvinizrii
2p
4) Care este importana liniilor consangvinizate ? - 2p
5) . S se calculeze coeficientul de consangvinizare pentru patru loci n
generaia IV, la o pupulaie de 50 indivizi. 2p
4.6. Bibliografie minimal

1. Casian H., 2006. Genetic- support pentru curs.Ed. Printech;
2. Crciun T., i colab., 1995. Genetica vegetal - Ed. Didactic i Pedagogic, Bucureti;
3. Cornea Clina Petrua, 2005. Genetic Ed. Ceres, Bucureti
98
DETERMINISMUL GENETIC AL SEXELOR
CUPRINS:
5.2. Tipuri de determinism genetic al sexelor 100
5.3. Reglajul genetic al diferenierii sexului la plante 105
5.4. Factorii care influeneaz sexul 109
5.5. Ereditatea caracterelor sex-linkage 115

Enumeri i s descrii principalele mecanisme genetice care
controleaz sexul .
Cunoti reglajul genetic ce difereniaz sexele la plante.
Indici factorii care pot influena sexul.
Sesizezi diferena dintre ereditatea caracterelor determinate de
gene autozomale i gene sex-linkage.
99
5.2. Tipuri de determinism genetic al sexelor
Sexualitatea prezint importan prin faptul c asigur variabilitatea genetic a

populaiilor. Selecia natural acineaz pe fondul acestei varaiabiliti imense, care permite
supravieuirea i reproducerea indivizilor celor mai bine adaptai la condiiile noi de mediu.
Reproducerea sexuat reprezint tipul de nmulire cel mai rspndit n lumea plantelor i
animalelor, ea realizndu-se foarte diferit pe scara evoluiei organismelor.
Prin reproducerea sexuat alogam se asigur ncruciarea ntre indivizi diferii genotipic,
care determin creterea vigorii i a capacitii de adaptare a organismelor, fenomen cunoscut
sub denumirea de heterozis. n acest sens, plantele alogame s-au adaptat pe diferite ci la
prevenirea autofecundrii (prin decalarea maturitii gameilor, protandrie i protoginie;
heterostilie; monoicitatea i dioicitatea,; autoincompatibilitatea sau autosterilitatea etc.).
5.2.1.Determinismul cromozomial al sexelor
La un numr nsemnat de specii de animale i plante, sexul este determinat de o pereche

de cromozomi denumii cromozomii sexului sau heterozomi. Unul din sexe este homogametic
(produce un singur tip de gamei) i se noteaz, de regul cu XX, iar cellalt sex este
heterogametic (produce dou tipuri de gamei) i se noteaz cu XY sau XO. La unele specii de
plante i animale n determinismul sexului sunt implicai mai mui heterozomi.
A) Sexul mascul heterogametic. La mamifere (inclusiv om) i la unele insecte (Diptere)
masculii normali au constituia genetic XY i produc dou tipuri de gamei: X i Y, iar femelele
au constituia genetic XX i produc un singur tip de gamei: X. Acest tip de determinism etse
cunoscut sub denumirea de tipul XY (tipul Drosophila) i se prezint astfel:
100
n fiecare generaie se asigur astfel, un raport de 1:1 ntre masculi i femele.
La anumite insecte din ordinul Hemiptera i Orthoptera, masculii sunt de asemenea
heterogametici, ns ei conin un singur cromozom X care nu are un omolog Y (au un cromozom
mai puin). Acest determinism este denumit curent tipul XO (tipul Protenor) i se prezint
astfel:
B) Sexul femel heterogametic. Se ntlnete la insectele din ordinul Lepidoptera,

Trichoptera, la amfibieni, peti, psri etc.
Sexul femel heterogametic poate prezenta dou tipuri, i anume: XY(tipul Abraxas) i XO
(tipul fluture).
Masculii sunt homogametici XX. Uneori, se noteaz femelele cu ZW sau ZO, iar masculii
cu ZZ, n scopul de a atrage atenia c femela este heterozigot.
Determinismul de tipul XY (ZW) se prezint n felul urmtor:
101
1 : 1
Determinismul de tipul XO sau ZO se prezint astfel:
5.2.2. Determinismul genomial al sexelor
Este cunoscut faptul c albinele mascule (trntorii) se dezvolt prin partenogenez din ou
nefecundate i sunt, deci, haploizi (n). femelele (att lucrtoarele, ct i reginele) se dezvolt din
ou fecundate i sunt diploide (2n). Nici un cromozom sexual nu este implicat n acest mecanism
de deteminare a sexului (caracteristic ordinului Hymenoptera, din care fac parte furnicile,
albinele, viespile etc.). Cantitatea i calitatea hranei de care dispun larvele diploide detremin
apariia unor lucratoare sterile sau a unei regine fertile. Deci, mediul influeneaz numai
102
sterilitatea sau fertilitatea, fr s intervin n determinismul sexului care este controlat genetic.
Proporia ntre femele i masculi n descenden este sub controlul reginei. Majoritatea oulor
depuse de regin (matc) vor fi fecundate i vor rezulta femele diploide (lucrtoare) sterile.
Oule pe care regina le alege nu vor fi fecundate i vor da natere la masculi haploizi fertili. Fa
de regina diploid (2n), la care meioza este normal, la masculii haploizi (n) meioza este
anormal, fr reducerea cromatic. Astfel, n prima diviziune a meiozei (diviziunea
heterotipic) toi cromozomii, n numr haploid, migreaz spre un singur pol, rezultnd o singur
celul haploid (de restituie), iar n diviziunea urmtoare (diviziunea homeotipic) rezult doar
o diad spermatidic i, ulterior gamei funcionali (fertili).
5.2.3. Determinismul genic al sexelor
a) factori sexuali complementari. La insectele din ordinul Hymenoptera se cunosc cel

puin dou specii la care determinarea sexului mascul este sub controlul unui singur locus (o
alel haploid sau n stare diploid homozigot). La viespea parazit Bracon hebetor, denumit
frecvent Habrobracon juglandis, se cunosc cel puin 9 alele la locusul sexului, care se noteaz
cu s a, s b, s c,, s i). Toi masculii sunt fie diploizi homozigoi, indiferent pentru care dintre
alele (s as a, s bs b, s is i ), fie haploizi pentru una din alelele acestui locus (s a, s b, sc,.., s i).
Femelele sunt obligatoriu heterozigote (s as b, s bs c, s bs I etc.). Acest tip de determinism genic se
prezint astfel:
P: s as b sa
Femel diploid mascul haploid
G: sa sb x sa
F1: sa s as a s as b sb
mascul mascul femel mascul
haploid diploid diploid haploid
Printre descendenii diploizi exist un mascul la o femel (s as a, s as b); printre
descendenii haploizi exist doi masculi (s a, s b ).
b) gene transformatoare de sex. La Drosophila o gen recesiv (tra) de pe cromozomul
3, n stare homozigot transform o femel diploid ntr-un mascul steril.
103
Femelele XtraXtra seamn morfologic cu masculii normali, cu excepia faptului c au
testicule reduse. Aceast gen este fr efect la masculii normali, adic XtraY.
c) determinismul monogenic la microorganisme. La unele microorganisme
(Chlamidomonas, Neurospora, etc) tipul sexual este sub controlul unui cuplu de alele. Indivizii
haploizi care posed aceeai alel nu fuzioneaz pentru a forma un zigot; indivizii cu alele
diferite ale aceluiai locus sexual fuzioneaz i produc zigoi.
ntrebri:
a)Enumerai principalele tipuri de determinism genetic al sexelor:
b Descriei determinismul cromozomial de tip Drosophila:
c) Ce sunt genele transformatoare de sex?

Determinismul cromozomial al sexelor.
Determinismul genomial (haplodiploidie).
Determinismul genic al sexelor.
104
5.3. Reglajul genetic al diferenierii sexului la plante
Studiul sexualitii la plante are importan pentru cunoaterea mecanismelor diferenierii

organelor de reproducere al florilor, a raportului dintre sexe i a determinismului genetic al
componentelor de producie (numr de flori pe plant, numr de fructe pe plant, greutatea medie
a fructelor etc.). De asemenea, cunoaterea determinismului genetic al sexelor permite
modificarea raportului ntre sexe n favoarea unor obiective economice, inhibarea funcinrii
unuia dintre sexe (de exemplu, androsterilitatea) cu impotan n producerea de semine hibride,
transformarea genetic a plantelor monoice n dioice, etc.
La gimnosperme, majoritatea speciilor sunt dioice, n timp ce la angiosperme dimorfismul
sexual (dioicitatea) este un fenomen rar (circa 0,5-0,7 %), cuprinznd un numr relativ mic de
specii, dintre care menionm: Cannabis sativa, Humulus lupulus, Bryonia dioica, Melandrium
album, Urtica dioica, Fragaria elatior, etc., precum i speciile de Populus, Salix, Rumex, .a.
Marea majoritate a angiospermelor sunt ns hermafrodite (90-93 %) i unisexuat monoice (5-7
%).
Dup modul de fecundare, cele mai multe specii de plante sunt alogame i previn
autopolenizarea prin diferite mecanisme morfo-fiziologice i genetice. Numrul speciilor
autogame sau preponderent autogame este mic.
Fa de cele menionate mai sus, se poate conchide c n determinismul sexului la plante
sunt implicate mai multe mecanisme genetice.
5.3.1. Determinismul genetic al sexelor la plantele dioice
Pe baza cercetrilor la unele specii de plante dioice s-a constatat c sexele au un

determinism genetic cromozomial, asemntor cu tipul Drosophila sau tipul Abraxas, uneori
fiind implicai heterocromozomi multipli. Principalele tipuri de determinism cromozomial al
sexelor sunt (dup T. Crciun i colab., 1978):
- sexul femel XX i sexul mascul XY.
Acest mecanism se ntlnete la Canabis sativa, Melandrium album, Brionia dioica, Urtica
dioica, ca i celelalte specii sau varieti de Humulus, Populus, Salix, Vitis, Rumex etc. Acest
mecanism este prezent la speciile poliploide. Astefel, la specia tetraploid de Rumex tenuifolius
(2n = 4x = 28) sexul femel are structura (XX) XX, iar cel mascul (XX) XY. La specia
105
hexaploid de R. acetosella (2n = 6x = 42) sexul femel are structura (XXXX) XX i sexul
mascul (XXXX) XY. La speciile subdioice, la care sexul mascul heterogametic produce i flori
subandroice (Vitis vinifera, asparagus officinalis) pot aprea plante mascule cu structura YY
viabile. Asemenea indivizi masculi apar prin autopolenizarea plantelor subandroice (XY) care
segreg n raportul 1XX : 2XY : 1XY. La alte specii dioice subandroice nu apar prin
autopolenizare masculi YY, fie datorit unei mutaii letale recesive, fie a deleiei locusului
viabilitii din cromozomul Y;
- sexul femel XX i sexul mascul XO.
Acest tip de determinism se ntlnete la genul Dioscorea.
- sexul femel XX i sexul mascul XY1Y2.
n acest caz, sexul mascul are 2n + 1 cromozomi i este prezent la Rumex acetosa, R. hastatulus
i Humulus japonicus. Planta mascul produce n meioz tot dou tipuri de gamei, i anume: X
i Y1Y2 (acetia rmn legai).
- sexul femel X1X1X2X2 i sexul mascul X1Y1 X2 X2Y2.
Se ntlnete la Humulus lupulus var. cordifolius (2n = 16 A + 4 X femela i 2n = 16 A +
2X + 2Y masculul).
- sexul mascul XX i sexul femel XY.
Este similar cu tipul Abraxas i se gsete la unele forme din genul Fragaria.
5.3.2. Determinismul sexelor la plantele hermafrodite i monoice
La aceste tipuri de plante, sexul este determinat de gene majore (determinism genic).
Ambele sexe sunt homogametice, iar n gameii lor se gsesc gene care favorizeaz feminitatea
(F) i masculinitatea (M sau m). Pe lng genele sexului, pot exista i alte gene care pot suprima
(inhiba) apariia unui sex sau altul. Astfel, prin recombinarea genelor normale cu cele mutante
(supresoare) implicate n fromarea organelor florale la porumb (plant monioc) C.A. Emerson
(1932) i D.F. Jones (1944) citai de T. Crciun i colab., 1978, au obinut plante dioice de
porumb. Ei au descoperit c n controlul genetic al sexelor la porumb sunt implicai trei loci, i
anume:
- locusul I: TS - determin panicul normal, cu flori mascule.
tsts - inhib formarea florilor mascule i determin apariia
106
florilor female n panicule.
- locusul II: SK - dezvoltarea normal a pistilului (carpelei).
sksk - inihib formarea pistilului.
-locusul III: Ba - dezvoltarea normal a tiuletelui (inflorescenei
femele).
baba - inhib formarea tiuletelui.
Prin combinarea n diferite moduri a genelor sexului, la porumb se pot obine urmtoarele
genotipuri i fenotipuri, care pot transforma porumbul n plant dioic:
TS ts sksk - mascul TS ts baba - mascul
tsts sksk - femel tsts baba - femel
La castravei, sexul este controlat, n general, de doi loci: St-st i M-m, ale cror
combinare n diferite moduri dau natere la urmtoarele genotipuri i fenotipuri ale sexului:
StStMM - plant monoic (masculi + femele);
ststMM - plant femel;
StStmm - plant andromonoic (masculi + femele);
Ststmm - plant cu flori hermafrodite.
Obinerea de linii consangvinizate ginoice cu capacitate de combinare ridicat (reacie
puternic n F1 o vigoare hibrid puternic i producii mari de castravei pe plantele ginoice
(mam), care evident au numai flori femele, productoare de fructe.
5.3.3. Hormoni vegetali si expresia sexului
Expresia sexului este afectat de ctre hormonii vegetali la multe specii monoice i dioice.
n plus, factorii de mediu, precum temperatura, fotoperioada pot induce reversia sexului, posibil
datorit schimburilor la nivelul hormonal. De asemenea, au fost observate diferene privind
nivelul hormonilor endogeni ntre cele dou sexe.
Efectul specific al hormonilor asupra sexului variaz n funcie de specie. De exemplu,
aplicarea giberelinei la florile femele de castravete conduce la masculinizarea acestora, iar
aplicarea sa pe florile mascule coduce la feminizarea lor. Exemplele de reversie sexual induse
de aplicarea hormonilor vegetali sugereaz c la multe specii cu flori unisexuate, meristemele
107
acestora sunt sexual bipotente, iar genele implicate n determinarea sexului pot determina
reversia sexual ca urmare a schimbrii nivelurilor sau raporturilor hormonilor endogeni.
Porumbul reprezint prima plant la care au fost izolate gene ce determin sexul. Aceste
gene au fost analizate din punct de vedere genetic, biochimic i molecular, iar rezultatele acestor
analize au condus la concluzia c hormonii vegetali joac un rol foarte important n procesul
determinrii sexuale. De exemplu, mutaiile genelor D (dwarf = piticire) i An1 (Anther ear 1 =
tiulete masculinizat 1) afecteaz dezvoltarea sexual a florilor din tiulete. Dezvoltarea pistilului
este normal, dar cea a staminelor este derepresat, fapt ce conduce la obinerea unei plante cu
paniculul hermafrodit, iar tiuletele masculinizat. Mutaiile acestor gene produc i o ntrziere a
nfloririi, o modificare a staturii plantelor, cauznd fenotipul de piticire. Studiile biochimice i
genetice au evideniat faptul c plantele mutante pentru gena D sunt deficiente n giberelin, iar
aplicarea exogen a acestui hormon conduce la revenirea plantelor la fenotipul normal.
ntrebri:
a) Precizai mecanismul genetic al sexului la castravei:
b) Efectele hormonilor la specii cu flori unisexuate:
c) Ce determinism genetic al sexelor prezint speciile dioice?

Determinismul sexelor la speciile dioice.
Determinismul sexelor la speciile monoice i hermafrodite.
Rolul hormonilor vegetali n expresia sexului.
108
5.4. Factorii care influeneaz sexul
La numeroase specii de plante i animale, inclusiv la om, o serie de factori de mediu,

administrarea de hormoni, anomalii n structura i numrul cromozomilor sexuali afecteaz
determinismul genetic al sexelor, n special n ceea ce privete raportul ntre sexe i modul de
reproducere.
Factorii de mediu. Dintre factorii de mediu, un rol important n determinismul sexelor l
au condiiile de nutriie, lumina, temperatura, umiditatea etc. (P. Raicu, 1991).
n ceea ce privete condiiile de nutriie s-a constatat c dac larvele de Bonellia virilis
(virme) sunt crescute separat devin femele, iar dac sunt crescute mpreun ntr-un vas cu femele
adulte, ele ptrund n trompa acestora unde triesc parazit i devin masculi de dimensiuni foarte
mici, comparaticv cu femelele. Dac dup un timp se scot din trompa femelei i sunt crescui
izolat, devin indivizi hermafrodii.
La unele specii de animale, variaia temperaturii poate modifica determinismul genetic
al sexelor. Astfel, c i stolonii i hidranii, care repezint tipul vegetativ de nmulire, meduzele
tipul sexual de nmulire, sunt influenate puternic de temperatura mediului. La temperaturi
ceva mai ridicate ele produc numai ovule i sunt de sex femel, la temperaturi ceva mai sczute
(mijlocii) devin hermafrodite (produc att ovule ct i spermatozoizi), iar la temperaturi relativ
sczute devin mascule (produc numai spermatozoizi).
Un exemplu de influen a luminii asupra schimbrii sexului, chiar de mai multe ori pe
an, l reprezint palmierul brazilian Attalea humifera. n anumite condiii, de densitate mare cu
arbori mai nali care umbresc, plantele devin de sex masculin, iar n cazul cnd plantele sunt
izolate sau au aceeai nlime cu arborii din jur, capt sexul femel. La umbrire, plantele redevin
mascule.
n condiii modificate de mediu, n care sunt implicai mai muli factori (temperatura,
lumina, umiditatea etc.) la unele specii de plante apar modificri nsemnate privind diferenierea
inflorescenelor i raportul dintre sexe. De exemplu, la porumb, n condiii de temperaturi mai
reduse, umiditate mare i luminozitate sczut se constat apariia de flori femele n inflorescena
mascul, formarea de flori mascule n inflorescena femel, tendina de ramificare a tiuletelui,
sterilitatea florilor mascule etc., crescnd considerabil proporia florilor femele. Aceste
modificri sunt mult mai profunde la formele de porumb originar din zonele subtropicale, care
sunt bine adaptate la zile scurte i temperaturi ridicate. La castravei, n condiii de zi scurt i
109
temperaturi mai reduse (primvara) apare tendina plantelor de feminizare i invers, n condiii de
zi lung i temperaturi ridicate (vara) se manifest tendina de masculinizare. De asemenea, la
cnep, n condiii de zi scurt crete proporia de plante femele pn la 80-90% fa de 50% n
condiii normale.
Hormonii sexului. La vertebrate, inclusiv om, detreminismul sexelor are dou etape
distincte: i) etapa genetic, care la om ncepe cu zigotul pn la formarea gonadelor (ovare i
testicule) i dureaz pn la a 60-a zi de la fecundare. n aceast etap sexul este determinat n
exclusivitate de cromozomii sexului: ii) etapa hormonal, n care procesul de sexualizare
masculin continu sub influena hormonilor androgeni (testosteronul), iar sexualizarea feminin
evolueaz pasiv sub determinism genetic, pn la formarea ovarelor (gonadelor femele).
Diferenierea definitiv a sexelor se realizeaz n preajma pubertii, cnd producerea de hormoni
femeli (foliculina i progesteronul) i masculi (testosteronul), capt importan deosebit n
procesul de sexualizare.
Importana hormonilor sexuali a fost relevat la animale vertebrate prin administrarea de
hormoni de la un sex la altul, n diferite stadii ale vieii, care au produs modificri n expresia
fenotipic a sexului (T. Crciun i colab., 1978).
Anomalii n structura i numrul cromozomilor sexuali. O serie de modificri n
structura i numrul cromozomilor sexuali, cum ar fi deleiile, duplicaiile, inversiile i
translocaiile, care apar la sexul homogametic (XX), non-disjuncia cromozomilor sexului n
meioz etc., pot determina apariia unor genotipuri anormale ce altereaz expresia fenotipic a
sexului. Dintre anomaliile mai frecvente n ereditatea sexului menionm:
- ginandromorfismul. La unele specii dioice (insecte, animale, om etc.) s-a observat
apariia unor organisme la care unele pri ale corpului sunt de tip femel, iar altele de tip mascul.
Dup extinderea esuturilor femele i, respectiv mascule, pe acelai individ, ginandromorfismul
poate fi bilateral, cnd anomaliile au aprut n diviziunile ulterioare (T. Crciun i colab., 1978).
Cercetrile ntreprinse la Drosophila, ncepnd cu anul 1919 de ctre A. sturtevant, T.
Morgan i C. Bridges au dus la concluzia c acest fenomen apare cu o frecven de 1 : 2000 sau
1 : 3000 musculie normale, preciznd i principalele cauze care guverneaz aceast anomalie.
O prim cauz a ginandromorfismului bilateral (transversal sau longitudinal), la care
jumtate din organism este tipic femel i cealalt jumtate este tipic mascul, o reprezint
pierdera unuia dintre cromozomii X la sexul femel (XX) n una din celulele fiice ale zigotului la
110
prima sa diviziune mitotic. n felul acesta, o celul fiic va avea structura normal XX i prin
diviziuni mitotice repetate va da netere la celule i esuturi de tip femel, iar cealalt celul fiic
(care a pierdut un cromozom X sau a migrat la timp din placa ecutorial ctre polul celulei fiice)
va avea structura XO i, prin diciziuni succesive, va da natere la esuturi de tip mascul (vezi
figura 5.1.).
Fig. 5. 1.
Apariia ginandromorfismului bilateral la Drosophila datorit pierderii unui cromozom X
la prima diviziune a zigotului:
n cazul situaiei cnd pierdera cromozomului X are loc mai trziu (la o diviziune
ulterioar), esutul sau poriunea cu structura XO (mascul) va fi mai mic i va fi integrat n
corpul femelei adulte, fiind observat sub forma de mozaicuri cu caractere sexuale diferite
genetic. La alte mamifere i la om, ginandromorfismul bilateral apare tot la prima diviziune a
zigotului la un individ mascul (XY) prin pierderea cromozomului Y cu rol masculinizant (vezi
figura 5. 2.).
Fig. 5.2.
Ginandromorfismul bilateral la om i alte mamifere
111
O a doua cauz care genereaz ginandromorfismul bilateral const n apariia de ovule
binucleate datorit inhibrii formrii corpuscului polar n meioz. Astfel, la femelele de
Drosophila s-au descoperit ovule cu cte doi nuceli, fiecare avnd un cromozom X. Prin
fecundarea acestor ovule cu spermatozoizi diferii, unul X i cellalt Y, va rezulta un oragnism
cu o parte a sa cu structura XX (femel) i cealalt cu structutra XY (mascul), determinnd
apariia unui ginandromorfism bilateral (vezi figura 5..3.).
Fig.5.3.
Apariia ginandromorfismului bilateral prin fecundarea unei ovule binucleate
A treia cauz care determin apariia de organisme ginandromorfe, caracteristic

insectelor din Hymenoptere, cu determinism sexual haplo-diploid, const tot n apariia de ovule
binucleate, fiecare nucleu avnd n cromozomi. Prin fecundarea numai a unuia dintre nucleii
acestor ovule cu n cromozomi, cu un spermatozoid haploid (n) va rezulta jumtate din corp
diploid (2n) de tip femel i cealalt jumtate din corp (rezultat din nucelul nefecundat) haploid
(n), de tip mascul (vezi figura 5. 4.).
112
Fig. 5. 4
Apariia ginandromorfismul bilateral la Hymenoptera
Non-disjuncia heterocromozomilor. Cercetrile efectuate la om cu diferite afeciuni de

comportament, deficien mintal, tulburri endocrine, steriliate, nanism, surzenie, etc., au
evideniat faptul c In majoritatea cazurilor, acestea sunt asociate cu anomalii n numrul
cromozomilor. Sunt cunoscute o serie de maladii grave cu denumiri diferite, dintre care le
prezentm pe cele mai frecvente (P. Raicu, 1990, 1997):
- sindromul Klinefelter ntlnit la brbaii cu structurile cromozomiale XXY, XXXY,
XXYY sau XXXYY, care const n deficien mintal, tulburri endocrine, sterilitate, surzenie,
etc.);
- sindromul de agresivitate descoperit recent i, care dup unele constatri apare cu o
frecven de circa 1% n anumite populaii. Se ntlnete la brbaii cu formula cromozomial
XYY. n aparen, aceti brbai sunt normali, dar n anumite circumstane de stres devin
agresivi i constituie adesea, un pericol social;
-sindromul Turner se ntlnete la femeile cu cariotip heterozomal XO (se apreciaz c
deficiena n cromozomul X apare n ovul). Aceste femei se caracterizeaz prin nanism,
sterilitate, surzenie, demen etc.
Fenotipuri femele anormale apar i la structurile cromozomiale de tipul XXX sau
XXXX.
Non-disjuncia cromozomilor sexului la nceputul embriogenezei poate determina, aa cum
s-a precizat mai nainte, mozaicuri genetice de esuturi cu diverse caractere sexuale primare i
secumdare.
113
ntrebri:
a) Precizai influena factorilor de mediu asupra raportului ntre sexe la plante:
b) Definii ginandromorfismul:
c) Ce sindroamuri heterozomale la om cunoatei ?

Aciunea factorili de mediu n determinismul sexelor.
Aciunea hormonilor n determinismul sexului..
Anomaliile structurale i numerice ce pot afecta heterozomii.
114
5.5. Ereditatea caracterelor legate de sex (sex-linkage)
5.5.1. Ereditatea caracterelor legate de sex la tipul Drosophila
O gen localizat pe cromozomul X i foarte rar pe Y se numete legat de sex. Prima

gen legat de sex a fost observat la Drosophila; este vorba de gena recesiv (w) care determin
culoarea alb a ochilor, n timp ce gena dominant (W) determin culoarea roie (tipul slbatic).
Masculii nu posed dect o singur alel legat de sex, iar aceast stare se numete hemizigoie.
Diferite ncruciri ntre masculi i femele cu alele pentru culoarea ochilor se prezint
astfel:
n F2 toate femelele au ochii roii, iar jumtate din masculi au ochii roii i jumtate au
ochii albi. Raportul fenotipic global ntre indivizii F2 (indiferent de sex) este de 3 roii : 1 alb.
La ncruciarea invers (femele cu ochi albi x masculi cu ochi roii), rezult:
115
n acest caz asistm n F1 la o transmitere n cruce (cris cros) a culorii ochilor;
masculii motenesc culoarea alb de la mam, iar femelele motenesc culoarea roie de la tat.
Cris-cross-ul se manifest dac sexul homogametic prezint alela recesiv n stare homozigot.
n F2 rezult:
n F2 jumtate din femele i masculi au ochii roii i jumtate au ochii albi. Raportul
global de segregare este de 1 rou : 1 alb.
Analizele hibridologice la Drosophila melanogaster au artat c numeroase alte carctere
sunt determinate de gene X sex linkage i se transmit similar la descendeni ca i culoarea
ochilor (ex. Mutantele: aripi tiate, ochi lozenge, corp galben i multe altele).
Pe lng acest tip general de ereditate a caracterelor legate de sex, exist i unele tipuri
particulare, determinate de existena unor gene pe cromozomul Y care nu au gene (alele)
homoloage pe cromozomul X. Astfel, la om se cunosc cteva gene situate pe poriunea
neomoloag a cromozomului Y denumite gene holandrice. Dintre genele holandrice studiate
pn n prezent menionm gena care produce brbai cu prul aspru i epos, gena pentru
116
urechi proase, gena pentru degete de la picior sudate prin membran i alte gene mai puin
studiate. n acest caz carcterele respective se exprim numai la masculi i se transmit din tat n
fiu. Aceste gene care sunt total nlnuite pe cromozomul Y sunt denumite gene Y-complet sex-
likage (T. Crciun i colab., 1978).
5.5.2. Ereditatea caracterelor legate de sex la tipul Abraxas
Ereditatea sexului de tip Abraxas a fost observat i valorificat naintea ereditii de tip
Drosophila, caracterizat printr-un mecanism total opus determinrii genetice a sexelor la
Drosophila i anume: femelele sunt heterogametice (XY sau ZW) i masculii homogametici (XX
sau ZZ).
Acest tip de ereditate (prezent la psri, fluturi, peti), la care transmiterea caracterelor
n cruce (cris-cros) este similar cu ereditatea sexului la tipul Drosophila pentru sexul
homogametic (XX) cu gene recesive homozigote, poate fi utilizat n practic cel puin la psri
i viermii de mtase, pentru detectarea i izolarea timpurie a sexelor, folosind unele gene marker
translocate pe cromozomii sexului. Ca gene marker translocate de pe autozomi pe cromozomii
sexului i care se folosesc n procesul de autosexare se utilizeaz gena pentru culoarea pufului
(alela B produce puf galben, iar alela recesiv b determin puf negru), gena care determin
culoarea penelor (alela S produce penaj auriu i alela s produce penaj argintiu) i gene care
controleaz viteza de cretere a penajului (K determin creterea rapid, normal i k cretere
lent).
De exemplu, la ncruciarea unui coco din rasa Langshan cu penaj negru (XbXb) cu o
gin din rasa Plymouth Rock cu penaj vrgat (XBY), n F1 se manifest ereditatea cris-cros,
femelele avnd penaj negru, iar masculii penaj vrgat, ceea ce permite izolarea cu uurin a
sexelor imediat dup ecloziune (autosexare). Schematic aceast hibridare de autosexare se
prezint astfel:
117
Separarea timpurie a sexelor la gini, permite aplicarea unui regim de alimentaie
difereniat n funcie de destinaia de consum. Astfel, masculii sunt recombinai pentru broiler
(cretere intensiv), iar femelele pentru producia de ou.
La ncruciarea reciproc (invers) cu cocoi vrgai (XBXB) i femele negre (XbY), n
F1 toi indivizii sunt vrgai, iar n F2 segreg n raportul global de 3 vrgai : 1 negru (50% din
femele sunt negre i 50% vrgate, iar masculii sunt toi vrgai).
118
ntrebri:
a) Definii genele sex-linkage :
b) Definii genele holandrice i explicai ereditatea acestora:
c) Ce este ereditatea de tip cris-cross ?

Ereditatea caracterelor sex-linkage la tipul Drosophila.
Ereditatea caracterelor sex-linkage la tipul Abraxas..
Diferenele ntre ereditatea mendelian i ereditatea sex-linkage.
119
ntrebarea 1
a) La un numr nsemnat de specii de animale i plante, sexul este determinat de o
pereche de cromozomi denumii cromozomii sexului sau heterozomi, acesta este
un prim determinism, respectiv determinismul cromozomial. Un al doilea
mecanism este cel genomial (haplodiploidie), n care nu este implicat niciun
cromozom, ci genomul determin sexul (exemplu la albine: sexul femel este
diploid 2n, iar sexul mascul este haploid n- se dezvolt prin partenogenez)
Al treilea determinism este cel genic, n cadrul cruia sexul este controlat de gene
ale sexului ( gene transformatoare de sex. factorii complementari sexuali, gena
sexual la microorganism).
b) La mamifere (inclusiv om) i la unele insecte (Diptere) masculii normali au

constituia genetic XY i produc dou tipuri de gamei: X i Y, iar femelele au
constituia genetic XX i produc un singur tip de gamei: X. Acest tip de
determinism etse cunoscut sub denumirea de tipul XY (tipul Drosophila). La
anumite insecte din ordinul Hemiptera i Orthoptera, masculii sunt de asemenea
heterogametici, ns ei conin un singur cromozom X care nu are un omolog Y (au
un cromozom mai puin). Acest determinism este denumit curent tipul XO (tipul
Protenor).
c) La Drosophila o gen recesiv (tra) de pe cromozomul 3, n stare homozigot

transform o femel diploid ntr-un mascul steril. Femelele XtraXtra seamn
morfologic cu masculii normali, cu excepia faptului c au testicule reduse.
Aceast gen este fr efect la masculii normali, adic XtraY.
120
ntrebarea 2
a) La castravei, sexul este controlat, n general, de doi loci: St-st i M-m, ale
cror combinare n diferite moduri dau natere la urmtoarele genotipuri i
fenotipuri ale sexului:
StStMM - plant monoic (masculi + femele);
ststMM - plant femel;
StStmm - plant andromonoic (masculi + femele);
Ststmm - plant cu flori hermafrodite.
Obinerea de linii consangvinizate ginoice cu capacitate de combinare ridicat
(reacie puternic n F1 o vigoare hibrid puternic i producii mari de castravei
pe plantele ginoice (mam), care evident au numai flori femele, productoare de
fructe.
b) Efectul specific al hormonilor asupra sexului variaz n funcie de specie. De

exemplu, aplicarea giberelinei la florile femele de castravete conduce la
masculinizarea acestora, iar aplicarea sa pe florile mascule coduce la feminizarea
lor. Exemplele de reversie sexual induse de aplicarea hormonilor vegetali
sugereaz c la multe specii cu flori unisexuate, meristemele acestora sunt sexual
bipotente, iar genele implicate n determinarea sexului pot determina reversia
sexual ca urmare a schimbrii nivelurilor sau raporturilor hormonilor endogeni.
c) Pe baza cercetrilor la unele specii de plante dioice s-a constatat c sexele au un

determinism genetic cromozomial, asemntor cu tipul Drosophila sau tipul
Abraxas, uneori fiind implicai heterocromozomi multipli.
121
ntrebarea 3
a) n condiii modificate de mediu, n care sunt implicai mai muli factori
(temperatura, lumina, umiditatea etc.) la unele specii de plante apar modificri
nsemnate privind diferenierea inflorescenelor i raportul dintre sexe. La
castravei, n condiii de zi scurt i temperaturi mai reduse (primvara) apare
tendina plantelor de feminizare i invers, n condiii de zi lung i temperaturi
ridicate (vara) se manifest tendina de masculinizare. De asemenea, la cnep, n
condiii de zi scurt crete proporia de plante femele pn la 80-90% fa de 50%
n condiii normale.
b) La unele specii dioice (insecte, animale, om etc.) s-a observat apariia unor
organisme la care unele pri ale corpului sunt de tip femel, iar altele de tip mascul.
Dup extinderea esuturilor femele i, respectiv mascule, pe acelai individ,
ginandromorfismul poate fi bilatera transversal sau longitudinal. Cercetrile
ntreprinse la Drosophila, ncepnd cu anul 1919 de ctre A. Sturtevant, T. Morgan
i C. Bridges au dus la concluzia c acest fenomen apare cu o frecven de 1 : 2000
sau 1 : 3000 musculie normale,
c) - sindromul Klinefelter ntlnit la brbaii cu structurile cromozomiale XXY,
XXXY, XXYY sau XXXYY, care const n deficien mintal, tulburri
endocrine, sterilitate, surzenie, etc.);
- sindromul de agresivitate descoperit recent i, care dup unele constatri
apare cu o frecven de circa 1% n anumite populaii. Se ntlnete la brbaii cu
formula cromozomial XYY. n aparen, aceti brbai sunt normali, dar n
anumite circumstane de stres devin agresivi i constituie adesea, un pericol social;
-sindromul Turner se ntlnete la femeile cu cariotip heterozomal XO (se
apreciaz c deficiena n cromozomul X apare n ovul). Aceste femei se
caracterizeaz prin nanism, sterilitate, surzenie, demen etc. Fenotipuri femele
anormale apar i la structurile cromozomiale de tipul XXX sau XXXX.
122
ntrebarea 4
a) O gen localizat pe cromozomul X i foarte rar pe Y se numete legat de sex.
Prima gen legat de sex a fost observat la Drosophila; este vorba de gena
recesiv (w) care determin culoarea alb a ochilor, n timp ce gena dominant (W)
determin culoarea roie (tipul slbatic). Masculii nu posed dect o singur alel
legat de sex, iar aceast stare se numete hemizigoie.
b) Sunt gene plasate pe cromozomul Y care nu au gene (alele) homoloage pe

cromozomul X. Astfel, la om se cunosc cteva gene situate pe poriunea
neomoloag a cromozomului Y denumite gene holandrice. Dintre genele
holandrice studiate pn n prezent menionm gena care produce brbai cu prul
aspru i epos, gena pentru urechi proase, gena pentru degete de la picior
sudate prin membran i alte gene mai puin studiate. n acest caz caracterele
respective se exprim numai la masculi i se transmit din tat n fiu. Aceste gene
care sunt total nlnuite pe cromozomul Y sunt denumite gene Y-complet sex-
linkage (gene holandrice).
c) Cris-cross-ul se manifest dac sexul homogametic prezint alela recesiv n

stare homozigot. Acest tip de ereditate presupune transmiterea n cruce a
caracterelor. Astfel, indivizii din F1 de sex femel motenesc caracterele genitorului
patern, iar indivizii din F1 de sex mascul motenesc caracterele genitorului matern.
123
INSTRUCIUNI
ntrebare.
1) Definii i prezentai schemele de ncruciare pentru determinismul
cromozomial de tip Abraxas 2p
2) Ce este determinismul genic al sexelor. Exemplificai 2p
3) Trecei n revist principalii factori care pot influena sexul 2p
4) Determinismul genetic al sexelor la speciile hermafrodite i monoice .
Exemplificai- 2p
5) .Ce este autosexarea i importana ei la psri. 1p
1. Badea, E., Rduoiu, S., Nicolae, I., Raicu, P., 2000, Genetica-genetic molecular i
inginerie genetic, Ed. Bioterra, Bucureti.
2. Brooker, R. J., 2000, Genetica. Analisi e principi, Zanichelli.
3. Brackdorff, N., 1984, Linactivation du chromosome X, La Recherche, Vol. 25, 136-141.
4. Casian, H., 2006, Genetica suport pentru curs, Ed. Printech.
124
EREDITATEA CITOPLAMATIC
CUPRINS:

6.2. Genele extranucleare 126
6.3. Androsterilitatea 130

Identifici diferenele ntre ereditatea nuclear i cea
citoplasmatic .
Cunoti localizarea genelor citoplasmatice .
Defineti androsterilitatea i tipurile de androsteriitate.
Precizezi rolul androsterilitii n procesul producerii de
smn.
125
6.2. Genele extranucleare
Dat fiind interdependena dintre nucleu i citoplasma unei celule, care numai mpreun
asigur existena i funciile celulei ca unitate funcional a organismului, s-a constatat c
anumite caractere i nsuiri se transmit datorit unor determinani genetici din citoplasm.
Astfel, s-a ajuns la concluzia c exist o ereditate nuclear (cromozomial) de tip mendelian,
care a explicat relaiile din F1 n urma hibridrii, raporturile de segregare, transmiterea
independent i cea nlnuit a genelor, etc. i o ereditate citoplasmatic (extracromozomial)
de tip mendelian cu transmitere uniparental a caracterelor i care a explicat fenomene eseniale
ale practicii cum ar fi : unele tipuri de androsterilitate la plante, ereditatea plastidic, ereditatea la
hibrizii reciproci, predeterminarea, etc..
La folosirea termenilor n cazul ereditii nucleare se include noiune de genotip
(totalitatea genelor din cromozomi), iar la ereditatea citoplsmatic se utilizeaz noiunea de
plasmotip (totalitatea plasmagenelor din citoplasm, plasmagena fiind unitatea ereditatea din
citoplasm prin analogie cu gena din nucleu). Dup localizarea plasmagenelor n diferite organite
citoplasmatice, acestea au diferite denumiri precum : plastogene (pentru genele din plastide),
mitogene sau condriogene (pentru genele din mitocondrii), kinetogene etc.
Descoperirile genetice fundamentale, fcute n numai cteva decenii ale acestui secol,
preau s confirme ipotezele multor geneticieni c substratul material al ereditii ar fi localizat
exclusiv n nucleu, care ar deine astfel un rol singular n ereditate.
Ideea c citoplasma ndeplinete totui un anumit rol n ereditate nu a fost ns
abandonat, mai ales c o serie de date faptice dovedeau acest lucru. Astfel, n anul 1902,
botanistul C. Correns remarcase la planta Mirabilis jalapa apariia unor ramuri anormale, cu
frunze albicioase sau avnd poriuni verzi, ce alterau cu poriuni albe, lipsite de cloroplaste aa
numita forma albomaculata. Efectund polenizri ntre florile de pe ramurile normale (cu frunze
verzi) i florile de pe ramurile cu frunze anormale, Correns ajunge la o serie de date interesante
(Tab.6.1. ).
126
Descendena n cazul polenizrii florilor de pe ramuri cu frunze
normale i anormale la Mirabilis jalapa
Ramuri cu flori mascule Ramuri cu flori femele Descendeni F1
Verzi Verzi
Verzi Albe Albe
Ptate Verzi, albe, ptate
Verzi Verzi
Albe Albe Albe
Verzi Verzi
Ptate Albe Albe
Frunze
Rezult din Tab. 6.1. c segregarea descendenilor nu se face conform proporiilor

mendeliene, acetia semnnd cu forma materna, cu excepia florilor de pe ramuri cu frunze
ptate, care, independent de forma mascul, determin apariia unor descendeni cu frunze
normale, albe i ptate.
Un alt caz a fost descries de ctre Gregory (1915) la Primula sinensis, la care florile de
pe ramuri cu frunze verzi produc numai descendeni verzi, cele de pe ramuri cu frunze albe
numai descendeni albi, iar cele pe ramuri cu frunze variegale - descendeni verzi, albi sau ptai.
Explicaia fenomenului, care ulterior a mai fost confirmat i la numeroase alte plante
(peste 20 de genuri), const n aceea c sacul embriomar matern conine primordiile
cloroplastelor, n timp ce grunciorii de polen, fiind mult mai mici, sunt lipsii aproape total de
citoplasm i de primordii ale cloroplastelor, aa nct zigotul motenete tipul de cloroplaste al
florilor female. Cloroplastele i deci coloraia frunzelor sunt transmise pe cale extranucleara,
numai pe baz posibilitilor ereditare de care dispune citoplasma.
n sfera aceluiai fenomen de ereditate citoplasmatic pe linie matern se ncadreaz i
diferenele care apar la ncruciri ntre anumite animale sau plante, n funcie de form matern.
127
La plante, din ncruciarea reciproc dintre dou specii de muchi, Funaria
higrometrica i F. mediterranea, deosebite destul de mult prin forma i mrimea frunzelor, prin
tipul organelor de reproducere .a. au rezultat hibrizi asemntori mult mai mult cu genitorul
matern dect cu cel patern.
Fenomenul de transmitere a unor caractere prin intermediul citoplasmei materne se
numete matroclinie.
Faptul este explicabil avnd n vedere c celulele sexual femele conin o cantitate mult
sporit de citoplasm, n comparaie cu cele mascule, ceea ce asigur transmiterea ereditar a
unor anumite nsuiri. n afar de aceasta, la mamifere, organismul matern poate influena
dezvoltarea hibridului n cursul vieii intrauterine. De asemenea, la plantele superioare, zigotul
ncepe s se divid imediat dup fecundare, formnd embrionul nc din perioada cnd acesta se
afl n organismul matern. Pe de alt parte, la Angiospermae endospermul, depozitarul
substanelor nutritive de rezerv ale embrionului, este format din celule triploide (3n), cu dou
garnituri de cromozomi (2n) de origine matern i numai o garnitur (n) de origine patern, ceea
ce face ca influenarea endospermului s fie mai pronunat pe linie matern. Esenial ns n
ereditatea extranucleara este faptul c n citoplasm se localizeaz genomuri specifice
(cloroplastic, mitocondrial) sau factori genetici necromozomiali, cu aparat genetic propriu, care
au rol direct n ereditate.
Influena genelor citomplasmei la animale, crora le lipsesc plastidele, s-a pus n
eviden la Lymantria dispar, la care plasma spermei i ovulei se deosebete la diferite rase. n
cazul cnd diferenele sunt mici sau lipsesc are loc o segregare obinuit, mendelian, a genelor;
dac ns deosebirile sunt mari, atunci citoplasma ovulei fecundat determin apariia n
proporii excedentare a unor fenotipuri i, deci, modificarea raporturilor normale de segregare
(Goldschmidt i col., 1924).
O serie de fenomene de ereditate extranuclear se datoresc prezenei n citoplasma
celulelor a particulelor simbiotice de tip infecios (Kappa, Lambda, Miu etc.).
128
ntrebri:
a) Definii plasmotipul :
b) De ce tipul de frunze la Mirabilis jalapa se transmite pe linie matern?
c) Ce este matroclinia ?

Noiunile : plasmotip, plastogene, mitogene, matroclinie.
Caracteristicile ereditii citoplasmatice.
Explicaia ereditii uniparentale n cazul caracterelor citoplasmatice.
129
6.3. Androsterilitatea
Prin citoplasm, la unele plante se transmite nsuirea de a fi lipsite de polen sau de a

produce polen neviabil, steril, fenomenul fiind cunoscut sub numele de androsterilitate.
Fenomenul androsterilitii a fost pus n eviden la Satureja hortensis de ctre C.
Correns, n anul 1904, iar ulterior a fost relevat i la porumb, iarb de Sudan, sfecl pentru zahr
.a.. Caracterul respectiv se folosete pe scar larg n lucrrile de hibridare, de exemplu la
porumb, fcnd inutil operaia costisitoare i pretenioas de castrare a florilor, n vederea
obinerii de hibrizi simpli sau dubli de porumb.
De fapt, androsterilitatea este o nsuire ereditar care se poate transmite prin factori
ereditari recesivi localizai n citoplasm, ca i prin factori din nucleu i din citoplasm.
Androsterilitatea nuclear, observat la plante autogame, nu prezint importan
practic din cauza apariiei descendenilor sterili n proporii mari i, ca urmare, nu este folosit
n procesul de producere a seminelor hibride.
Androsterilitatea citoplasmatic este determinat de factori citoplasmatici S, care se
comport ca factori dominani fa de factorul citoplasmatic de fertilitate F al plantelor cu
aceeai formul genotipic. Prin polenizarea plantelor androsterile (S) cu polen de la plante
androfertile apar n F1 numai plante androsterile, deoarece citoplasma provine n ntregime de la
gametul femel. Din aceste motive, androsterilitatea citoplasmatic are importan paractic
deosebit, folosindu-se cu mult success n producerea seminei hibride la porumb, sorg, sfecl
pentru zahr, gru, cartof .a. Recent s-a dovedit c genele pentru androsterilitate citoplasmatic
nu sunt cloroplastice, cum s-a crezut un timp, ci gene mitocondriale al cror AND a suferit
alterri de structur i funcie.
La porumb fenomenul androsterilitii a fost descoperit de M. M. Rhoades (1933). Pentru
stabilirea naturii factorilor citoplasmatici materni care provoac androsterilitatea i a factorilor
nucleari paterni, Rhoades a efectuat polenizarea repetat a plantelor androsterile cu polen de la o
linie normal cu genom bine cunoscut. Dup mai multe generaii de retroncruciare s-a realizat
transferul genomului celulei sexuale paterne n citoplasma celulei sexuale materne. nlocuirea
genomului propriu cu genomul unei forme fertile nu a restabilit androsterilitatea, fapt care a
confirmat c androsterilitatea este o nsuire cauzat de factori localizai n citoplasm, care
acioneaz independent de factorii nucleari.
130
Androsterilitatea nuclear - citoplasmatic este determinat de factorul citoplasmatic
S care se manifest n prezena factorilor nucleari n stare recesiv rr. Plantele care conin aceti
factori au posibilitatea de a releva att fenomenul de androsterilitate, ct i pe cel de restaurare a
fertilitii, ca urmare a faptului c n citoplasm, pe lng factorul de sterilitate S, dein i
factorul de fertilitate F, iar n nucleu intervin factorii dominani ai restaurrii fertilitii RR.
ntrebri:
a) Definii androsterilitatea :
b) Caracterizai androsterilitatea citoplasmatic:
c) Clasificai androsterilitatea dup genele ce controleaz acest caracter:

Noiunile : plasmotip, plastogene, mitogene, matroclinie.
Caracteristicile ereditii citoplasmatice.
Explicaia ereditii uniparentale n cazul caracterelor citoplasmatice.
131
ntrebarea 1
a) n ereditatea citoplsmatic se utilizeaz noiunea de plasmotip (totalitatea

plasmagenelor din citoplasm, plasmagena fiind unitatea ereditatea din citoplasm
prin analogie cu gena din nucleu). Dup localizarea plasmagenelor n diferite
organite citoplasmatice, acestea au diferite denumiri precum : plastogene (pentru
genele din plastide), mitogene sau condriogene (pentru genele din mitocondrii),
kinetogene etc.
b) Explicaia fenomenului, care ulterior a mai fost confirmat i la numeroase alte

plante (peste 20 de genuri), const n aceea c sacul embriomar matern conine
primordiile cloroplastelor, n timp ce grunciorii de polen, fiind mult mai mici,
sunt lipsii aproape total de citoplasm i de primordii ale cloroplastelor, aa nct
zigotul motenete tipul de cloroplaste al florilor female. Cloroplastele i deci
coloraia frunzelor sunt transmise pe cale extranucleara, numai pe baz
posibilitilor ereditare de care dispune citoplasma.
.
c) Fenomenul de transmitere a unor caractere prin intermediul citoplasmei materne

se numete matroclinie. Vorbim n acest caz despre o ereditate uniparental.
132
ntrebarea 2
a) Androsterilitatea reprezint nsuirea unor plante de a nu produce polen sau de a

produce polen neviabil, steril. Fenomenul androsterilitii a fost pus n eviden la
Satureja hortensis de ctre C. Correns, n anul 1904, iar ulterior a fost relevat i la
porumb, iarb de Sudan, sfecl pentru zahr .a.. Caracterul respectiv se folosete
pe scar larg n lucrrile de hibridare, de exemplu la porumb, fcnd inutil
operaia costisitoare i pretenioas de castrare a florilor, n vederea obinerii de
hibrizi simpli sau dubli de porumb.
b) Androsterilitatea citoplasmatic este determinat de factori citoplasmatici S,

care se comport ca factori dominani fa de factorul citoplasmatic de fertilitate F
al plantelor cu aceeai formul genotipic. Prin polenizarea plantelor androsterile
(S) cu polen de la plante androfertile apar n F1 numai plante androsterile,
deoarece citoplasma provine n ntregime de la gametul femel. Din aceste motive,
androsterilitatea citoplasmatic are importan paractic deosebit, folosindu-se cu
mult success n producerea seminei hibride la porumb, sorg, sfecl pentru zahr,
gru, cartof .a. Recent s-a dovedit c genele pentru androsterilitate citoplasmatic
nu sunt cloroplastice, cum s-a crezut un timp, ci gene mitocondriale al cror AND
a suferit alterri de structur i funcie.
c) Dup localizarea genelor ce controleaz androsterilitatea, avem: androsterilitate

nuclear, citoplasmatic i nuclear- citoplasmatic.
133
INSTRUCIUNI
ntrebare.
1) Definii ereditatea citoplasmatic. Exemplificai 2p
2) Explicai transmiterea uniparental a caracterelor citoplasmatice 2p
3) Enumerai tipurile de androsterilitate 1p
4) Caracterizai androsterilitatea nuclear-citoplasmatic - 2p
5) .precizai rolul androsterilitii n procesul producerii de smn . 1p

2. Nicolae I. i colab., 2000. Genetica, Principii de baz ale ereditii - Ed. Bioterra,
Bucuresti
3. Stnescu V., 1983. Genetica si ameliorarea speciilor forestiere Ed. Didactica si
Pedagogica, Bucuresti
134
RESTRUCTURRI CROMOZOMIALE
CUPRINS
7.2. Modificri structurale ce afecteaz numrul de gene pe cromozom 136
7.3. Modificri structurale ce afecteaz ordinea genelor pe cromozom 142

Identifici categoriile de modificri structurale ale
cromozomilor. .
Cunoti cauzele i efectele restructurrilor cromozomiale. .
nelegi rolul restructurrilor cromozomiale n precesele de
ameliorare.
135
7.2. Modificri structurale ce afecteaz numrul de gene pe cromozom
7.2.1. Caracterizare i clasificare
Speciile de plante i animale au cromozomi cu o organizare, volum, lungime i form

bine definite. Aceste caracteristici sunt n general constante i se pastreaz de la o generaie la
alta, datorit capacitaii cromozomilor de a se duplica identic la fiecare diviziune celular. Pe
fiecare cromozom exist, n mod normal, cte un centromer, care ocup o poziie fix. De-a
lungul cromozomilor se gsesc, n ordine liniar, genele, al cror numr este caracteristic pentru
fiecare cromozom i sunt aranjate ntr-o ordine serial precis.
Ocazional, sub influena unor factori naturali sau artificiali (fizici sau chimici), structura
cromozomilor poate s se schimbe. Tipurile de modificri care afecteaz structura cromozomilor
au fost denumite dislocaii (aberaii cromozomiale sau anomalii cromozomiale). La baza acestor
schimbri structurale st nsuirea cromozomilor de a se fragmenta (rupe) transversal sub
aciunea anumitor ageni fizici sau chimici i capacitatea fragmentelor cromozomale de a se
reuni prin capetele lor (n punctele de ruptur) sau de a se alipi la ali cromozomi care au suferit
fragmentri n lungimea lor. n felul acesta, pot avea loc rearanjri ale materialului cromozomal
care, in esen determin modificri structurale n numr limitat. Fiecare cromozom poate fi
afectat de una sau mai multe rupturi, iar fragmentele rezultate se pot reuni dnd aranjamente noi,
care genereaz formarea de cromozomi noi sau grupe linkage diferite i, n consecin,
cariotipuri modificate.
n cadrul unui anumit cromozom, schimbrile pot avea loc n acelai bra sau ntre cele
dou brae. Segmentele rezultate din fragmentarea cromozomului pot fi mici, afectnd numai
extremitile cromozomului sau pot fi mari, includ i centromerul. La unirea segmentelor se
poate pstra succesiunea liniar a genelor sau pot apare succesiuni noi care, adesea, sunt nsoite
de "efecte de poziie".
La nivelul cromozomilor omologi sau al cromatidelor acestora pot apare, de asemenea,
schimbri structurale rezultate din unirea fragmentelor aprute sub influena diferiilor factori
dislocani (mutageni).
La nivelul cromozomilor neomologi, schimburile de material genetic, ca urmare a unirii
segmentelor dislocate din doi sau mai muli cromozomi neomologi, pot determina modificri n
structura i numrul genelor sau n succesiunea lor.
136
Inducerea modificrilor structurale ale cromozomilor se realizeaz spontan, cu o
frecven relativ mic, diferit de la o specie la alta, determinate de cauze nc puin cunoscute i
artificial, cu o frecven mult mai mare, prin folosirea unor ageni fizici sau chimici cu rol
dislocant.
Cercetarea modificrilor structurale i morfologice la cromozomi a relevat faptul c
acestea se pot grupa n principal, n dou categorii distincte, i anume:
I. Schimbri n numrul de gene (deleii i duplicaii);
II.- Schimbri n succesiunea (aranjarea) genelor (inversii i translocaii).
7.2.2. Deleii
Deleia sau deficiena, care const n pierderea unui fragment de cromozom (cu una sau
mai multe gene). Asemenea nuclei, celule sau indivizi sunt deficieni pentru gena sau genele
respective.
Deficiena poate afecta unul sau mai muli cromozomi i poate avea loc n orice poriune
a cromozomului. Cnd se pierde un segment terminal, deleia se numete terminal, iar cnd se
pierde un segment central, deleia se numete intercalar sau interstiial. Fragmentele pierdute
care sunt lipsite de centromer (acentrice) i nu se ataeaz la ali cromozomi, care au suferit i ei
rupturi, nu sunt viabile. Ele se resorb n masa citoplasmei.
Efectul deleiilor asupra vigorii i feritilitii organismului este diferit, n funcie de
natura organismului i de mrimea fragmentului pierdut. Pierderea unor fragmente mari este, de
cele mai multe ori, letal pentru organism sau pentru gameii n care se produc.
Deleiile sau deficienele pot fi homozigote (cnd ambii gamei prezint aceeai
deficien) sau heterozigote (cnd numai un gamet prezint deficien).
Identificarea deficienelor se poate face prin metode citologice i genetice. Din
punct de vedere citologic, nu se pot detecta deleiile n stare homozigote, ci numai n stare
heterozigot.
Deleiile terminale se pot observa la microscop prin faptul c datorit deficienei
cromozomul este mai scurt (vezi fig. 7.1.). n cazul deficienelor intercalare, la mperecherea
cromozomului deficient cu omologul su normal, acesta din urm formeaza o bucl n poriunea
segmentului n plus, care permite detectarea deficienei . Cu ct deficienele sunt mai mari, cu
137
att ele pot fi mai uor evideniate citologic. Cromozomii deficieni la ambele capete formeaz
cel mai adesea cromozomi inelari i fragmente acentrice. La organismele heterozigote, cu
deficien n cromzomul ce posed alelele dominante se vor manifesta alelele recesive din
cromzomul pereche, alele corespunzatoare celor din fragmentul pierdut. Aceasta d natere la
fenomenul de pseudodominan. De asemenea, unele deleii pot fi identificate i prin modificarea
raportului de segregare.
Fig. 7.1. Deleie terminal
Fig.7..2. Deleie intercalar i conjugarea cromozomilor
138
7.2.3. Duplicaii
Duplicaia const n catigarea unui fragment de la un cromzom omolog. n urma

duplicaiei organismul respectiv posed una sau mai multe alele n duplicat, n acelai
cromozom. ntr-o celul diploid o anumit gen sau mai multe gene sunt reprezentate de dou
ori.
Apariia duplicaiei presupune ruperea simultan a doi cromozomi, deoarece segmentele
cromozomale se pot uni numai cu alte segmente care prezint cel puin un punct de ruptur.
Segmentele cromozomale nu se pot uni cu cromozomi ntregi. Dup un anumit timp, fragmentele
de cromozomi i pierd capacitatea de reunire. Segmentele de cromozomi pot fi inserate la un
cromozom omolog, parial omolog sau chiar la unui neomolog, n diferite poziii. Cnd
segmentul de cromozom transpus ocup poziia dup segmentul identic (de exemplu GHGH),
duplicaia se numete n tandem. n alte cazuri, duplicaia este dispus n tandem invers
(GHHG), nu este inserat dup segmentul identic (GHIJGH) sau este dispus n cromozomi
neomologi (ABCDEFGHI - MNOPQRGHST).
Fig. 7.3. Conjugarea n meioz ntre un cromozom normal i omologul su duplicat
139
Cel mai adesea, duplicaia rezult n urma fenomenului de crossing over inegal. Din acest
caz, duplicaia apare ntr-unul din cromozomii omologi, pe cnd n cellalt cromozom omolog va
rezulta o deficien . Un exemplu foarte cunoscut de duplicaie este la Drosophila melanogaster,
la locusul Bar din cromozomul X (vezi fig. 7.4.). La plante (porumb, orz, maare, etc) se
cunosc, de asemenea, mai muli loci duplicai, n diveri cromozomi.
Fig. 7.4. Duplicaia segmentului cromozomal cu locusul Bar la Drosophila
Detectarea duplicaiilor se face att prin studii citologice, ct i prin observaii asupra
efectelor fenotipice la indivizii afectai. Studiile citologice pentru evidenierea unei duplicaii se
realizeaz mult mai uor comparativ cu deficiena terminal. Duplicaiile heterozigote mai lungi
formeaz bucle n profaza I a meiozei (stadiul de pachinem). Trebuie stabilit dac aceste bucle
sunt determinate de o deleie (unde face bucla cromozomul normal) sau de inversiune (unde
particip ambii cromozomi la formarea buclei). Organismele care posed duplicaii pot determina un
fenotip nou ce poate afecta uneori, un complex de caracteristici care se transmit la urmai.
Adesea, la realizarea fenotipului nou se adaug influena genelor adiacente (efectului de
poziie), ct i schimbarea balanei genelor.
140
ntrebri:
a) Definii i clasificai deleiile :
b) Cum se face identificarea citologic a deleiilor?
c) Care este nsuirea cromozomilor ce faciliteaz restructurrile

cromozomiale?

Tipurile de restructurri cromozomiale ce afecteaz numrul de gene pe
cromozom.
Identificarea citologic i fenotipic a restructurrilor..
141
7.3. Modificri structurale ce afecteaz ordinea genelor pe cromozom
7.3.1. Inversiunea
Inversiunea const n rotirea unui fragment distinct cu 180 n cadrul aceluiai

cromozom. n acest caz, un segment de cromozom se detaseaz i, apoi, se reaeaz cu genele n
ordinea inversat. Aceasta mpiedic apariia crossing over-ului ntruct regiunile inversate i cele
neinversate din cromozomii omologi nu au loc sinapse. Acest supresor al crossing over-ului este
simbolizat cu litera C.
Cnd inversiunea are loc n acelai bra al cromozomului, fr s includ centromerul,
se numeste inversiune paracentric (ABCDE.HGFI). Dac inversiunea afecteaz segmente
cromozomale n care este cuprins i centromerul se numete inversiune pericentric
(ABGFE.DCHI). n acest caz, ruperile pot fi apropiate de centromer la distane simetrice sau
asimetrice. Mecanismul apariiei unei inversii este prezentat n figura de mai jos (fig. 7.5.).
Inversiunea poate fi heterozigot cnd afecteaz numai unul dintre cromozomii omologi, sau
homozigot cnd afecteaz ambii cromozomi omologi.
Cromozomii afectai de inversiunea homozigot au o comportare citologic normal.
Fig. 7. 5. Mecanismul apariiei unei inversiuni
142
Fig.7. 6. Conjugarea cromozomilor n cazul inversiei
n cazul inversiunii heterozigote paracentrice cromozomul afectat de inversiune face o

bucl prin rsucire, n timp ce crozomul omolog normal, formeaz o "bucl" corespunztoare
cromozomului inversat, n aa fel nct, alelele homoloage s ajung n aceeai poziie (fig. 7.6.).
Dac inversiunea afecteaz un segment destul de mare, este posibil s apar fenomenul de
crossing over n bucla ce se formeaz. Ca urmare, poate rezulta n urma crossing over-ului un
cromozom dicentric i unul acentric
n cursul anafazei I a diviziunii meiotice, cromozomul dicentric va forma o punte
datorit tendinei de migrare a celor doi centromeri ctre polii opui. Asemenea puni de inversie
au fost observate la numeroase plante i animale.
Inversiunile au importan n formarea unor cariotipuri noi i, deci, a unor forme noi, n
localizarea unor gene, n meninerea unor stocuri genetice (prin inhibarea crossing over-ului), n
fixarea genetic a heterozisului, etc.
143
7.3.2. Transpoziia i traslocaia
Transpoziiile i translocaiile sunt schimbri intra i, respectiv, inter cromozomale.

Transpoziia reprezint transferul unui segment de cromozom dislocat, ntr-o alt poziie,
n acelai cromozom. Efectul fenotipic major este marcat de efectul de poziie.
Translocaia reprezint schimbul de segmente cromozomale ntre cromozomii neomologi.
Segmentele de cromozomi translocate pot cuprinde o poriune de cromozom sau chiar un bra
ntreg. Schimbul de segmente cromozomale se realizeaz n urma ruperii cromozomilor. Alipirea
segmentelor de cromozomi se face numai n punctele unde au avut loc ruperi.
Studiile citologice au scos n eviden mai multe tipuri de translocaii. Tipul cel mai
frecvent l reprezint translocaia reciproc, care const n schimbul de fragmente cromozomale
ntre doi sau mai muli cromozomi neomologi. Cnd schimbul de fragmente se realizeaz ntre doi
cromozomi neomologi se numete translocaie simpl, iar ntre toi cromozomii din nucleu, se
numete translocaie complex sau multipl. Uneori, pot fi afectai succesiv, reciproc, trei sau
mai muli cromozomi - n acest caz, translocaia se numete succesiv.
Translocaia poate fi heterozigot sau homozigot, dup cum sunt afectai unul sau
ambii cromozomi dintr-o pereche homoloag, prezentnd aceleai translocri de segmente
cromozomale.
Prin ncruciarea unor indivizi normali cu indivizi afectai de translocaie reciproc se
obin hibrizi de translocaie, care n pachinem formeaz diferite configuraii specifice
cromozomilor translocai. La imperecherea, de exemplu a doi cromozomi translocai cu
cromozomii omologi normali, cei patru cromozomi vor forma o figur n form de cruce, care
permite asocierea poriunilor homoloage pe ntreaga lungime a cromozomilor. n diachinez
translocaiile heterozigote formeaz o configuraie n form de "8". Forma de inel apare n lipsa
chiasmei dintre centromer i punctul de translocaie (regiunea interstiial), iar forma de "8", dup
apariia chiasmei n regiunea interstiial .
144
Fig.7. 7. Translocaia heterozigot i conjugarea meiotic
n urma meiozei, heterozigoii pentru translocaie produc 50% gamei fertili (cei care
conin toate genele) i 50% gamei sterili (cei n care lipsesc gene). Prin fecunadrea liber a
gameilor fertili se obin 25% indivizi homozigoi normali, 50 heterozigoi de traslocaie i 25%
homozigoi de trasnlocaie. n descendena, indivizii homozigoi (att cei normaii, cat i cei de
translocaie) vor fi stabili, iar indivizii heterozigoi de translocaie vor segrega n acelai raport de
1:2:1. Hibrizii de translocaie se identific relativ uor citologic, prin configuraiile specifice de
cercuri sau de inele i prin procentul de circa 50% polen steril.
145
Apariia translocaiei a fost studiat la microorganisme (Escherichia, Aspergillus,
Neurospora), la Drosophila, la plantele superioare (orz, porumb, mazre, tomate, gru, tutun etc),
la animale i la om (relevata prin numeroase anomalii ereditare).
Prin translocaie se pot transfera gene de rezisten la factorii de stress sau alte gene
dorite de om. n acest scop, se aplic hibridarea cu specii slbatice sau specii rustice, urmat de
inducerea la hibrizi a unor dislocaii cu ajutorul unor ageni fizici sau chimici i selecia
descendenilor valoroi care posed genele transferate. Metoda a dat rezultate bune la gru, unde
E.R.Sears (1956) a reuit s transfere gene de rezisten la rugina brun de la Aegilops umbellulata
la grul hexaploid. De asemenea, translocaiile au fost utilizate la provocarea sterilitii unor
specii de plante agricole i pomi fructiferi.
n cercetrile de genetic teoretic unele translocaii se folosesc drept markeri genetici
n analizele citologice i hibridologice, la fixarea heterozisului i localizarea pe cromozom a
unor gene.
La unele specii un numr mare de cromozomi au suferit translocaii reciproce, formnd aa-
numitele sisteme de translocaie. Aa este cazul celor mai multor specii de Oenothera. n timp ce O.
hookerii formeaz n mod regulat 7 bivaleni, la 0. biennis cei 14 cromozomi se dispun n dou
inele (unul din 6 i altul din 8 cromozomi) datorit unor translocaii multiple, iar la O. muhcata
toi cei 14 cromozomi formeaz un singur inel .
O importan deosebit n ameliorarea plantelor o are inducerea translocaiilor multiple,
n care sunt implicai toi cromozomii din cariotip ntr-un singur inel de translocaie. Acest
fenomen, observat la Oenothera lamarkiana a servit ca model pentru crearea unor genotipuri
homozigote la porumb. Astfel, C.R. Bumham (1946) a sugerat faptul c i la porumb se poate
obine o linie de translocaie multipl care s includ ntr-un singur inel toi cei 10 cromozomi
din setul haploid. Prin ncruciarea acesteia cu o form normal se obine n F1 un hibrid care
conine inelul haploid de translocaie i un set haploid de cromozomi (n = 10 cromozomi normali).
Prin autopolenizarea hibrizilor F1 de translocaie vor rezulta n F2 25 % genotipuri de translocaie,
50 % heterozigoi de translocaie i 25% homozigoi normali, care reprezint o linie pur genetic
(homozigot) obinut numai n dou generaii.
Prin schimbul de segmente cromozomale cu ajutorul agenilor dislocani se pot obine noi
grupe linkage cu gene favorabile, ducnd astfel, la obinerea de soiuri noi.
146
Principala metod de detectare a translocaiilor este cercetarea citologic n timpul
meiozei sau mitozei, care pe baza configuraiilor specifice n diferite faze ale diviziunii celulare,
permit s se precizeze localizarea, tipul i frecvena translocaiilor la diferite organisme analizate.
ntrebri:
a) Definii i clasificai transpoziiile :
b) Comportarea citologic a cromozomilor afectai de inversiune:

Tipurile de restructurri cromozomiale ce afecteaz ordinea genelor pe
cromozom.
Identificarea citologic i fenotipic a inversiilor, transpoziiilor i
translocaiilor..
Utilizarea acesstor restructurri n procesul de ameliorare a plantelor.
147
ntrebarea 1
a) Deleia sau deficiena, care const n pierderea unui fragment de cromozom (cu
una sau mai multe gene). Asemenea nuclei, celule sau indivizi sunt deficieni
pentru gena sau genele respective. Deficiena poate afecta unul sau mai muli
cromozomi i poate avea loc n orice poriune a cromozomului. Cnd se pierde un
segment terminal, deleia se numete terminal, iar cnd se pierde un segment
central, deleia se numete intercalar sau interstiial. Fragmentele pierdute care
sunt lipsite de centromer (acentrice) i nu se ataeaz la ali cromozomi, care au
suferit i ei rupturi, nu sunt viabile. Ele se resorb n masa citoplasmei. Deleiile
sau deficienele pot fi homozigote (cnd ambii gamei prezint aceeai deficien)
sau heterozigote (cnd numai un gamet prezint deficien).
b) Deleiile terminale se pot observa la microscop prin faptul c datorit deficienei
cromozomul este mai scurt. n cazul deficienelor intercalare, la mperecherea
cromozomului deficient cu omologul su normal, acesta din urm formeaza o
bucl n poriunea segmentului n plus, care permite detectarea deficienei . Cu ct
deficienele sunt mai mari, cu att ele pot fi mai uor evideniate citologic.
Cromozomii deficieni la ambele capete formeaz cel mai adesea cromozomi
inelari i fragmente acentrice.
c) La baza acestor schimbri structurale st nsuirea cromozomilor de a se
fragmenta (rupe) transversal sub aciunea anumitor ageni fizici sau chimici i
capacitatea fragmentelor cromozomale de a se reuni prin capetele lor (n punctele
de ruptur) sau de a se alipi la ali cromozomi care au suferit fragmentri n
lungimea lor. n felul acesta, pot avea loc rearanjri ale materialului cromozomal
care, in esen determin modificri structurale n numr limitat.
148
ntrebarea 2
a) Translocaia reprezint schimbul de segmente cromozomale ntre cromozomii
neomologi. Segmentele de cromozomi translocate pot cuprinde o poriune de
cromozom sau chiar un bra ntreg. Schimbul de segmente cromozomale se
realizeaz n urma ruperii cromozomilor. Alipirea segmentelor de cromozomi se face
numai n punctele unde au avut loc ruperi. Studiile citologice au scos n eviden
mai multe tipuri de translocaii. Tipul cel mai frecvent l reprezint translocaia
reciproc, care const n schimbul de fragmente cromozomale ntre doi sau mai
muli cromozomi neomologi. Cnd schimbul de fragmente se realizeaz ntre doi
cromozomi neomologi se numete translocaie simpl, iar ntre toi cromozomii din
nucleu, se numete translocaie complex sau multipl. Uneori, pot fi afectai
succesiv, reciproc, trei sau mai muli cromozomi - n acest caz, translocaia se
numete succesiv. Translocaia poate fi heterozigot sau homozigot, dup cum
sunt afectai unul sau ambii cromozomi dintr-o pereche homoloag, prezentnd
aceleai translocri de segmente cromozomale.
b) Cromozomii afectai de inversiunea homozigot au o comportare citologic
normal. n cazul inversiunii heterozigote paracentrice cromozomul afectat de
inversiune face o bucl prin rsucire, n timp ce crozomul omolog normal, formeaz
o "bucl" corespunztoare cromozomului inversat, n aa fel nct, alelele homoloage s
ajung n aceeai poziie. Dac inversiunea afecteaz un segment destul de mare,
este posibil s apar fenomenul de crossing over n bucla ce se formeaz. Ca
urmare, poate rezulta n urma crossing over-ului un cromozom dicentric i unul
acentric . n cursul anafazei I a diviziunii meiotice, cromozomul dicentric va forma
o punte datorit tendinei de migrare a celor doi centromeri ctre polii opui.
Asemenea puni de inversie au fost observate la numeroase plante i animale.
149
7.5. Lucrarea de verificare nr.7
INSTRUCIUNI
ntrebare.
1) Definii i clasificai duplicaiile 2p
2) Tipuri de inversiune i mecanismul de apariie a acestora 2p
3) Identificarea citologic i fenotipic a duplicaiilor 2p
4) Utilizarea translocaiilor n ameliorarea plantelor- 2p
5) Avem 2 cromozomi omologi cu 8 gene .Unul dintre cromozomi sufer
o deleie terminal ( trei gene). Desenai configuraia acestora n meioz
1p

150
PLOIDIA VARIAII ALE NUMRULUI DE CROMOZOMI
CUPRINS
8.2. Euploidia 152
8.3. Aneuploidia 162

Stpneti noiunile referitoare la ploidie : numrul de baz X , starea
diploid, euploidie , aneuploidie, etc.
Cunoti caracteristicile monoploizilor, haploizilor , poliploizilor,
aneuploizilor .
Cunoti utilizarea n producie, ameliorare i metodele de inducere a
diverselor variaii numerice.
151
8.2. Euploidia
8.2.1. Ploidia
Cel mai adesea , numrul de cromozomi din celule este constant ( diploid n celulele
somatice i haploid n celulele sexuale). Uneori, acest numr sufer modificri (creterea sau
reducerea), ceea ce duce la o variaie a numrului de cromozomi cu implicaii i asupra
fenotipului indivizilor afectai. Aceast modificare a numrului de cromozomi este cunoscut
sub denumirea de ploidie.
Variaiile numerice pot apare spontan n natur sau sunt induse de ctre om, unele dintre
ele prezentnd interes pentru producie sau n lucrrile de ameliorare ale speciilor.
Pentru aprecierea gradului de ploidie, este necesar s se cunoasc numrul de baz sau X
caracteristic fiecrei specii. Numrul de baz (X) reprezint numrul haploid de cromozomi al
speciei ancestrale.
Exemplu:
Pisum sativum are x=7 ; 2n=2x=14 este un diploid.
Triticum aestivum are x=7 ; 2n=6x=42 este un hexaploid.
Mutaiile numeric cromozomale pot fi clasificate n dou mari categorii :
1) Euploidia variaie ce implic ntreg genomul, putem discuta despre o reducere sau o
multiplicare a acestuia ;
2) Aneuploidia variaie ce afecteaz doar unul, doi cromozomi din genom.
n continuare vom face referire la euploidie, variaie a numrului de cromozomi ce
afecteaz ntreg genomul i se poate referi la o reducere sau o multiplicare a numrului de
cromozomi. Aceasta presupune c euploidia la rndul ei se mparte n dou categorii :
monoploidia respectiv poliploidia.
8.2.2. Monoploidia i haploidia
Monoploidia, este fenomenul prin care numrul de cromozomi din celulele somatice se
reduce la jumtate. n celulele somatice, plantele monoploide au numrul de cromozomi egal cu
cel din celulele gametice. Dup modul n care se formeaz, formele monoploide se grupeaz n
dou categorii: monoploide i haploide.
152
Monoploidia reprezint starea celulelor somatice, sau a organismelor, la care numrul
de cromozomi corespunde cu numrul de baz, posed un singur set cromozomal (x).
Monoploizii se formeaz prin reducerea la jumtate a numrului de cromozomi la speciile
diploide, posednd numrul gametic de cromozomi. Exemplu: 2n=2x prin reducerea la jumtate
rezult n=x. Monoploizii prezint fiecare cromozom (respective gen) ntrun singur exemplar,
starea de hemizigoie. Ca urmare indivizii prezint vigoare redus, rezisten mic la factorii de
mediu i sunt sterili datorit lipsei sinapselor n timpul meiozei. Apariia monoploizilor poate fi
spontan sau indus artificial de ctre om.
Haploidia reperezint reducerea la jumtate a numrului de cromozomi din celulele
somatice la plantele poliploide. Exemplu 2n=4x prin reducere apare n=x+x.
8.2.2.1. Importana monoploizilor i inducerea experimental
Datorit vigorii reduse i sensibilitii mari fa de factoriii de mediu, monoploizii nu

sunt folosii n producie, interesul lor este n procesul de ameliorare. Astfel, prin dublarea
numrului de cromozomi se obin rapid forme homozigote numite linii izogene.
n cazul speciilor autogame , liniile izogene sunt folosite n procesul de selecie (metod
de ameliorare). Caracteristicile prezentate de aceste linii (manifestarea genelor recesive este
posibil datorit homozigoiei) pot corespunde obiectivelor de ameliorare urmrite de specialiti.
n cazul speciilor alogame, liniile izogene sunt folosite pentru obinerea hibrizilor
comerciali F1, ce manifest efectul heterozis, , aceste linii fiind superioare celor consangvine.
Importana monoploizilor:
Datorit vigorii reduse i sensibilitii mari fa de factorii de mediu, monoploizii nu sunt
folosii n producie, interesul lor este pentru procesul de ameliorare. Astfel, prin dublarea
numrului de cromozomi se obin rapid forme homozigote numite linii izogene.
n cazul speciilor autogame , liniile izogene sunt folosite n procesul de selecie (metod
de ameliorare). Caracteristicile prezentate de aceste linii pot corespunde obiectivelor de
ameliorare urmrite de specialiti. Importana genetic a monoploizilor const n manifestarea
integral a tuturor genelor, inclusiv a celor recesive. Din acest punct de vedere, monoploizii
constituie un material ideal pentru studiile de mutagenez. La monoploizi, mutaiile aprute pot
153
fi decelate chiar n anul producerii lor, deoarece se manifest n fenotip toate genele, inclusiv
cele recesive, contrar celor de la poliploizi, care trebuie cutate n generaiile segregante.
n cazul speciilor alogame, liniile izogene sunt folosite pentru obinerea hibrizilor
comerciali F1, ce manifest efectul heterozis, aceste linii fiind superioare celor consangvine.
Inducerea monoploidiei :
Formele monoploide pot fi obinute in vivo ct i in vitro.
1. Metodele utilizate pentru inducerea in vivo a haploidiei sunt:

- iradierea polenului cu radiaii ionizante sau ultraviolete n vederea distrugerii unei
spermatii, ce duce la formarea de haploizi dintr-o oosfer nefecundat;
- polenizarea ntrziat i tratamentele cu ocuri de temperatur imediat dup
polenizare;
- ndeprtarea staminelor florale, fapt ce mpiedic polenizarea normal;
- inactivarea nucleilor spermatici prin tratamente cu diferite substane chimice, care
favorizez o dezvoltare partenogenetic;
- inhibarea creterii tubului polinic prin tratament cu hidrazida maleic.
2. Metodele de inducere in vitro a haploidiei sunt:

- culturi de antere, din grunciori de polen imaturi sau n culturi de ovule nefecundate,
pe medii artificiale.
Tehnica de obinere n culturi de antere sau ovule nu este aplicabil la toate
organismele, deoarece exist unele specii refractare la aceste procedee.
O tehnic deosebit de avantajoas este metoda bulbosum, n care forma diploid de orz
(Hordeum sativum) a fost polenizat cu polen de la forma slbatic Hordeum bulbosum. n
succesiunea diviziunilor mitotice cromozomii speciei Hordeum bulbosum au fost eliminai, dnd
natere unui embrion haploid. Procesul de haploidizare este aproape similar cu fenomenul de
incompatibilitate genetic ntre seturile cromozomale ale celor dou specii, chiar dac fecundarea
are loc. Prin utilizarea metodei bulbosum s-au obinut rapid forme homozigote, fiind posibil
introducerea n cultur a numeroase varieti noi de orz. Metoda se preteaz i la alte specii.
154
8.2.3. Poliploidia
Poliploidia: este definit ca variaia numrului de cromozomi ce presupune multiplicarea

numrului de baz X, superioar lui 2. n cadrul poliploidiei categoriile sunt clasificate dup
dou criterii:
1. Dup numrul de multiplicare:
Artioploizi numrul de multiplicare este par (4x, 6x, 8x,etc). Aceti indivizi au meioz
normal datorit homologiei cromozomilor i sunt fertili.
Perisoploizi numrul de multiplicare este impar (3x, 5x, etc) sunt deobicei sterili i se
recomand la speciile cu nmulire vegetativ.
2. Dup modul de obinere:
Autopoliploizi
Alopoliploizi
o Autopoliploizii: rezult n urma multiplicrii propiului numr de cromozomi, cel
mai adesea sunt forme fertile i se recomand utilizarea lor n producie.
2n=2x AA
Dublare nr. cromozomi
2n=4x AAAA
n celulele poliploide apar o serie de modificri care sunt identificate prin investigare
microscopic. Datorit numrului sporit de cromozomi, celulele sunt mai mari, diametrul
celulelor somatice este mai mare i conin un numr sporit de cloroplaste. n celula poliploid
numrul cromocentrilor nucleolari este de asemenea mai mare. Diametrul grunciorilor de polen
de la organismele poliploide, ca i numrul porilor germinativi a polenului este mai mare.
Macroscopic se disting mai multe particulariti, habitusul plantelor este mai mare i mai
viguros, cu numr mic de tulpini, lstari sau ramificaii, dar de dimensiuni mult mai mari.
Plantele au flori mai puine dar mari i intens colorate. Aparatul foliar este alctuit dintr-un
numr mai mic de frunze, de dimensiuni mai mari i de un verde intens.
La plante, poliploidia este corelat i cu importante modificri fiziologice i biochimice.
Astfel, plantele prezint o cantitate de clorofil i o capacitate sporit de fotosintez, rezisten
155
crescut la stresul climatic i ageni patogeni, manifestnd, n general, o bun homeostazie
(adaptabilitate) la condiii de mediu nefavorabile, asociate ns cu tardivitate.
Ca urmare a efectului de dozaj, plantele poliploide au o capacitate crescut de sintez a
substanelor proteice, a glucidelor, a vitaminelor, pigmenilor etc.
Fertilitatea autoploizilor, n general, este mai sczut, mai ales la perisoploizi, deoarece
apar diferite anomalii n desfurarea meiozei. Anomaliile sunt frecvente n profaza I, deoarece
alturi de bivaleni, se formeaz i uni-, tri- i tetra- valeni. Multivalenii segreg dezordonat
(nebalansat) n anafaza I ceea ce duce la formarea de gamei neechilibrai, pe acest considerent
se recomand utilizarea plantelor poliploide numai atunci cnd din punct de vedere economic,
intereseaz masa vegetativ i nu producia de semine (plante furajere, plante ornamentale,
sfecl de zahr etc.).
Alopoliploizii: are loc multiplicarea seturilor de cromozomi provenite prin hibridare
interspecific sau intergeneric. Formele aloploide se pot realiza prin ncruciarea ntre specii
ndeprtate genetic, urmat de dublarea numrului de cromozomi la hibrizii F1, rezult
amfidiploizi sau amfiploizi.
Pentru natur, aloploidia, n special cea genomal, este deosebit de important,
asigurnd evoluia speciilor.
Un poliploid natural, este grul comun (Triticum aestivum 2n = 6x = 42). Prin studiul
speciilor slbatice diploide sau tetraploide, cu numrul de baz, x = 7, s-a reconstituit evoluia
grului. n meioz, n celulele mam se formeaz 21 de bivaleni, fiecare cromozom fiind
reprezentat de un singur omolog. Formarea bivalenilor este controlat de gena Ph, situat pe
braul lung al cromozomului 5B. Cu toate c specia este hexaploid, comportamentul diploid,
simulat de formarea bivalenilor, este asigurat de gena Ph.
Grul comun ii are originea n trei specii diploide diferite i cu genomuri diferite, AA,
BB i DD (vezi figura 8.1).
Originea aloploid a fost stabilit pentru multe alte specii. Prunus domestica este un
aloploid ntre Prunus spinosa (2n=4x=32) i Prunus cerosifera (2n=2x=16). Alte exemple de
specii aloploide: Nicotiana tabacum, 2n = 48 (n. silvestrys, 2n = 24 x N. tomentosiformis,
2n=24), Brassica napus, 2n = 38 (B. oleracea, 2n = 18 x B.capestris, 2n = 20) etc.
Amfiploizii manifest att caracteristicile celor dou forme parentale, ct i a
poliploizilor, manifestnd homeostazie ridicat. Amfiploidia este o cale deosebit de facil pentru
156
obinerea de specii noi, artificiale. O prim ncercare n acest sens este a lui G.D. Karpecenko
(1928), care a obinut un hibrid fertil ntre varz (Brassica oleracea, 2n = 18) i ridiche
(Raphanus sativus, 2n = 18). Hibridul obinut a fost ns steril.
Fig.8.1. Diagrama evoluiei posibile a grului hexaploid (Triticum aestivum)
157
8.2.3.1. Inducerea artificial a poliploidiei
Pentru crearea de poliploizi artificiali s-au pus la punct numeroase metode de modificare
a diviziunii celulare.
Se preteaz la poliploidizare acele specii care prezint un numr mic de cromozomi, la
care n primul rnd se utilizeaz masa vegetativ i mai puin seminele, precum i speciile care
prezint un grad ridicat de sterilitate, crendu-se posibilitatea de a se multiplica vegetativ.
Cele mai utilizate metode de inducere a poliploidiei sunt:
- tratamente cu ocuri de temperatur, ridicate sau sczute, aplicate la diferite organe,
esuturi sau celule aflate n diviziune. ocurile de temperatur deregleaz aparatul mitotic (fusul
nuclear) genernd artioploidie;
- metoda centrifugrii i a iradierii, conduc la inhibarea fusului de diviziune, microtubulii
nu se asambleaz ca s formeze firele acromatice sau sunt distrui, fiind posibil apariia unor
nuclei de restituie;
- metoda regenerrii se bazeaz pe dublarea numrului de cromozomi prin endomitoz,
frecvent ntlnit n culturile de celule i calusurile de cicatrizare (punctul de altoire), celule care
se multiplic n prezena heteroauxinei;
- metoda poliembrioniei se bazeaz pe predispoziia unor specii (Zea mays, Secale cereale
etc.), de a forma semine cu doi sau mai muli embrioni, dintre care unii pot fi poliploizi;
- metoda tratamentului chimic, cu colchicin sau cu proto-oxid de azot, este cea mai
eficient i mai frecvent utilizat.
Metoda a fost elaborat de A.F. Blakeslee i O.T. Avery (1937) i se bazeaz pe
aciunea colchicinei asupra fusului din celulele n diviziune. Colchicina este un alcaloid extras
din bulbi de brndu de toamn (Colchicum autumnale) care datorit aciunii ei citostatice, are
capacitatea de a bloca formarea fusului , dar nu mpiedic clivajul longitudinal al cromozomilor.
Astfel, se va forma o singur celul cu numr dublu de cromozomi.
Soluia apoas de colchicin n concentraie de 0,1 1,0% poate fi utilizat pentru
tratamentul seminelor, a vrfurilor vegetative i rdcinilor plantelor, a mugurilor, a florilor sau
inflorescenelor.
Sub influena colchicinei, diviziunea sufer unele modificri, fiind denumit C-mitoz i
C-meioz. Colchicina, nu are aciune semnificativ asupra cromozomilor, clivarea centromerului
158
i separarea cromatidelor este normal, n interfaza dintre diviziuni formndu-se cromozomi cu
morfologie specific. Colchicina blocheaz polimerizarea tubulinei i n acest fel, formarea
fusului de diviziune este anihilat.
n urma colchicinizrii, n mitoz apar schimbri specifice i anume: profaza decurge
normal. n metafaz, n absena fusului de diviziune, cromozomii nu se dispun la centrul celulei,
pentru a forma placa metafazic, rmnnd dispersai n citoplasm (pseudometafaz sau C-
metafaz). La cromozomii puternic condensai, cromatidele apar desfcute, fiind unite numai la
centromer (configuraia literei X, cromozomi-X sau cromozomi-C). Cele patru cromatide ale
unei perechi de cromozomi rmn n aceeai celul, formnd nucelul de restituie cu un numr
dublu de cromozomi.
Meioza celulelor colchicinizate se caracterizeaz prin absena fenomenelor sinaptice.
Astfel c n C-metafaz, cromozomii nu formeaz bivaleni, ei rmn ca univaleni. n C-anafaza
I, cromozomii omologi nu se separ, toi cromozomii fiind inclui ntr-un singur nucleu,
denumit nucleu de restituie, care va avea un numr dublu de cromozomi. Meioza de acest tip,
genereaz formarea gameilor diploizi, care n urma fecundrii, vor da natere zigoilor
tetraploizi.
Din seminele tratate cu colchicin, pot aprea plante noi, n totalitate poliploide.
Aplicarea tratamentului la pri vegetative ale plantei, determin formarea de himere, esuturi
mixoploide, n care alterneaz celule diploide i poliploide.
8.2.3.2. Importana poliploidiei
Poliploidia, este un proces cu importan deosebit, att pentru evoluie ct i pentru

ameliorarea plantelor.
n evoluie, autoploidia reprezint o important surs de variabilitate, numeroase specii
avnd o origine poliploid (cartoful 2n = 48; alunele de pmnt 2n = 40; etc.)
A. Mntzing (1967), consider c exist o corelaie pozitiv ntre numrul de cromozomi
i durata vieii unei plante. Numeroase specii perene au provenit din plante anuale cu un numr
mic de cromozomi. Astfel, Sorghum sudanensis, form anual, are n = 10 cromozomi n timp ce
forma peren, Sorghum helepense are n = 20 cromozomi; Helianthus annus, cu n = 17, este o
specie anual, pe cnd Helianthus tuberosus, specie peren are n = 51 cromozomi.
159
Pentru ameliorarea plantelor, autoploizii constituie un material biologic de o importan
deosebit.
Poliploidia determin sporirea cantitii de ADN, implicit a numrului de gene i
respectiv a variabilitii genetice generale ( efectul de doz).
La plante, poliploidia este corelat cu importante modificri morfologice, fiziologice i
biochimice. n consecin, n programele de ameliorare a plantelor sunt utilizate formele
autoploide, valorificndu-se anumite particulariti, cum ar fi, vigoarea vegetativ, coninut
ridicat n proteine sau n vitamine, pigmenii, precum i rezintena sporit la temperaturi
excesive, secet, boli i duntori.
Din punct de vedere practic , poliploidia are o importan economic deosebit. Astfel,
la triploizi, la care sterilitatea mpiedic reproducerea sexuat, nu se formeaz semine, ceea ce
este deosebit de util n cazul strugurilor pentru stafide (3n = 57), pepenelui verde (3n = 33),
bananierului (3n = 33) sau ananasului (3n = 75), forme preferate de consumatori.
La sfecla de zahr, triploizii au cel mai ridicat coninut de zahr i cea mai mare
producie de rdcini.
Formele autoploide sunt importante pentru sectorul plantelor ornamentale, deoarece
dimensiunile florilor sunt mai mari, pigmentaia este mult mai intens i florile se pstreaz mai
mult (lalele, crizanteme, garoafe, narcise).
Producerea de semine este un alt domeniu n care autoploidia are o mare aplicabilitate.
Datorit segregrii deficitare i ncetinit, prin autoploidie se pot obine combinaii hibride, cu
heterozis mai stabil n succesiunea generaiilor.
160
ntrebri:
a) Definii numrul de baz X. Exemplificai:
b) Particulariti macroscopice ale poliploizilor:
c) Liniile izogene i importana lor:

Terminologia specific ploidiei.
Definiia i clasificarea euploidiei.
Caracteristicile monoploizilor i poliploizilor.
Importana monoploizilor, poliploizilor i metodele de inducere.
161
8.3. Aneuploidia
Aneuploidia, este fenomenul prin care modificarea numeric afecteaz numai anumite
perechi omoloage de cromozomi, adic n nucleul celulelor exist n plus sau n minus, unul sau
mai muli cromozomi.
Dac ntr-un cariotip alturi de numrul diploid de cromozomi (2n), se afl unu sau mai
muli cromozomi, aneuploidia este de tip hiperploid (polisomie). Dac din garnitura diploid se
pierde unul sau mai muli cromozomi, aneuploidia este de tip hipoploid (oligosomie).
Cu toate c aspectele genetice i citogenetice ale fenomenului de aneuploidie sunt diferite,
n esen toate au cauze comune i anume:
- non-disjuncia cromozomilor n mitoz sau meioz i, n consecin, repartizarea
inegal a materialului genetic la celulele fiice;
- formarea trivalenilor i univalenilor n loc de bivaleni normali;
- apariia aberaiilor n structura unor cromozomi;
- absena sinapsei sau sinapsis parial ntre unii cromozomi, fenomen mai frecvent
observat la cromozomii lungi. n general, vitalitatea i fertilitatea aneuploizilor, este mai redus.
Gametul femel tolereaz mai bine aneuploidia, gameii masculi aneuploizi nu sunt viabili,
aneuploidia transmindu-se pe linie matern.
Ca urmare a efectului de doz, polisomii prezint unele particulariti, specifice
cromozomilor suplimentari. La oligosomi, ca urmare a reducerii dozei de material genetic, apar
caracteristici noi fa de formele iniiale 2n, fapt care permite stabilirea importanei fiecrui
cromozom.
8.3.1. Tipuri de aneuploidie
Hiperploidia sau polisomia, se ntlnete n situaia cnd, pe lng perechea de cromozomi

omologi se gsete un cromozom n plus, adic 2n + 1, fenomen numit trisomie sau, cnd unei
perechi de cromozomi i se altur doi cromozomi, 2n + 2, fenomen denumit tetrasomie.
Trisomia a fost evideniat, pentru prima dat, de A.F. Blakeslee (1921) ntr-o cultur
de Datura stramonium, 2n = 24, a cror plante posedau habitus modificat, viguroase i cu frunze
deosebite de celelalte. J. Belling (1924), analizndu-le citologic constat existena unui
cromozom n plus, adic 2n=24+1, fa de forma euploid normal.
162
Dup tipul extracromozomului i a configuraiilor din profaza I, exist mai multe clase de
trisomie:
- trisomia primar, atunci cnd n meioz extracromozomul se comport asemntor cu
cei doi omologi la care se ataeaz, formnd o configuraie n lan, un trivalent. Dac se
formeaz un extravalent, la dou perechi de cromozomi, fenomenul se numete trisomie primar
dubl (2n+1+1);
- trisomia secundar, extracromozomul este un izocromozom (izocromozomul se
formeaz ca urmare a diviziunii transversale i nu longitudinale a centromerului),care n meioz,
n zigonem, formeaz configuraii de inel;
- trisomia teriar, extracromozomul este un cromozom translocat, care n meioz
mpreun cu celelalte dou perechi, formeaz un lan.
Tetrasomia a fost observat pentru prima oar tot la Datura stramonium. n urma
fecundrii unui ovul n+1 cu polen n+1, rezult un tetrasom. Polisomia poate afecta oricare
pereche de cromozomi, att la organismele diploide ct i la cele poliploide. n general,
tetrasomia nu are afecte negative asupra organismului vegetal.
i la om sunt cunoscute cteva maladii genetice determinate de fenomenul de trisomie
autozomal sau heterozomal.
Sindromul Down sau trisomia 21, a fost primul exemplu de trisomie la om, descris n
1866 de ctre Down. Persoanele afectate au expresia feei de tip mongoloid, nsoit de anomalii
cardiace, ntrziere minatal, talie redus, greutate corporal mic.
Sindromul Klinefelter (XXY) sau trisomia pentru cromozomii sexului, determin la
persoanele afectate o slab dezvoltare sexual, atrofie testicular, ginecomastie, retardare mintal
i sterilitate.
Hipoploidia sau oligosomia reprezint starea unor celule sau a unor organisme care au
pierdut un cromozom din garnitura normal, fenomen denumit monosomie (2n-1) sau o pereche
de cromozomi, fenomen denumit nulisomie (2n-2).
Hipoploidia se ntlnete foarte rar la speciile diploide. Organismele monosomice sau
nulosomice nu sunt viabile dac cromozomul care lipsete este de importan vital. ansa de
supravieuire o au numai speciile poliploide, ca urmare a fenomenului de compensare, determinat
de efectul de doz. Monosomia pentru cromozomul X, sau sindromul Turner, se ntlnete la
specia uman. Femeile cu un singur cromozom X nu posed cromatin sexual, au statur mic,
163
gt plat, dezvoltare sexual rudimentar, ntrziere mintal. La mamifere, formele trisomice sau
monosomice pentru heterozomii X, pot fi depistate citologic prin intermediul cromatinei sexuale
Barr.
8.3.2. Importana aneuploizilor
Din punct de vedere teoretic, aneuploizii asigur identificarea rolului genetic al unor
cromozomi, legturile dintre cromozomi, precum i rolul diferitelor gene n expresia fenotipic a
unor caracteristici. Stabilirea rolului pe care l au cromozomii, prin absena lor din garnitura
cromozomal, este dificil de realizat, deoarece fiecare cromozom are o semnificaie bine
conturat n supravieuirea gametului sau a individului.
Dei organismele aneuploide nu au importan economic direct, cercetrile n acest
domeniu au luat amploare, datorit rolului lor n procesul de ameliorare a plantelor.
O realizare deosebit n acest domeniu a avut-o E.R. Sears (1953), care a reuit s creeze
21 de linii nulisomice la soiul de gru Chinese Spring, stabilind astfel rolul genetic al fiecrui
cromozom. Un caracter, dac este controlat de o gen plasat pe un anumit cromozom, efectele
acestei gene pot lipsi la plantele nulisomice pentru perechea respectiv de cromozomi.
Dup obinerea tuturor liniilor nulisomice i precizarea rolului genetic al cromozomilor
s-a putut trece la substituirea acestora dintr-un genom, cu cromozomi aparinnd altui genom, de
la alt specie. Metoda permite nlocuirea unuia sau mai multor cromozomi din genomul diploid a
unei specii, cu un numr egal de cromozomi omologi, provenii de la o alt specie, realizndu-se
astfel genotipuri cu o valoare de recombinare mbuntit.
n liniile de substiutuie intraspecific, pot fi fixate anumite caracteristici valoroase de la
donori cu gene particulare valoroase n receptori cu structur genetic deficitar pentru o gen
(rezistena la boli i la condiii nefavorabile de mediu).
Lucrrile lui B.C. Jenkins (1956), privind adiia i substituia de cromozomi de la secar
(specie donor), purttoarea unor caractere valoroase (rezistena la ger, la soluri acide i
duntori) la gru (specie receptor), a dus la obinerea de linii de substituie cu 2n=42
cromozomi, dintre care 40 de cromozomi ai grului i doi cromozomi de la secar, purttori de
gene valoroase.
164
Utilizarea aneuploidiei n ameliorarea plantelor are i unele dezavantaje, deoarece,
uneori specia receptoare pierde gene valoroase, situate pe cromozomul substituit, iar o dat cu
ncorporarea cromozomului strin, pe lng gene valoroase, pot fi incluse i unele gene nedorite.
Numrul de cromozomi, este o caracteristic de baz a tututror organismelor.
Aneuploizii au avut de asemenea un rol important n evoluia speciilor. Monosomii (2n-
1) i trisomii (2n+1) permit precizarea rolului unor cromozomi i ntocmirea hrilor
cromozomale.
ntrebri:
a) Cauze ale apariiei aneuploizilor :
b) Tipuri de trisomie:
c) Importana teoretic a aneuploizilor:

Terminologia specific aneuploidiei
Definiia i clasificarea aneuploidiei.
Caracteristicile aneuploizilor.
Importana aneuploizilor n ameliorarea plantelor..
165
ntrebarea 1
a) Numrul de baz (X) reprezint numrul haploid de cromozomi al speciei

ancestrale.
Exemplu:
Pisum sativum are x=7 ; 2n=2x=14 este un diploid.
Triticum aestivum are x=7 ; 2n=6x=42 este un hexaploid.
b) Macroscopic se disting mai multe particulariti, habitusul plantelor este mai

mare i mai viguros, cu numr mic de tulpini, lstari sau ramificaii, dar de
dimensiuni mult mai mari. Plantele au flori mai puine dar mari i intens colorate.
Aparatul foliar este alctuit dintr-un numr mai mic de frunze, de dimensiuni mai
mari i de un verde intens. La plante, poliploidia este corelat i cu importante
modificri fiziologice i biochimice. Astfel, plantele prezint o cantitate de
clorofil i o capacitate sporit de fotosintez, rezisten crescut la stresul climatic
i ageni patogeni, manifestnd, n general, o bun homeostazie (adaptabilitate) la
condiii de mediu nefavorabile, asociate ns cu tardivitate.
c) n cazul speciilor autogame , liniile izogene sunt folosite n procesul de selecie

(metod de ameliorare). Caracteristicile prezentate de aceste linii (manifestarea
genelor recesive este posibil datorit homozigoiei) pot corespunde obiectivelor
de ameliorare urmrite de specialiti. n cazul speciilor alogame, liniile izogene
sunt folosite pentru obinerea hibrizilor comerciali F1, ce manifest efectul
heterozis, , aceste linii fiind superioare celor consangvine
166
ntrebarea 2
a) Cu toate c aspectele genetice i citogenetice ale fenomenului de aneuploidie
sunt diferite, n esen toate au cauze comune i anume:
- non-disjuncia cromozomilor n mitoz sau meioz i, n consecin,
repartizarea inegal a materialului genetic la celulele fiice;
- formarea trivalenilor i univalenilor n loc de bivaleni normali;
- apariia aberaiilor n structura unor cromozomi;
- absena sinapsei sau sinapsis parial ntre unii cromozomi, fenomen mai
frecvent observat la cromozomii lungi. n general, vitalitatea i fertilitatea
aneuploizilor, este mai redus.
b) Dup tipul extracromozomului i a configuraiilor din profaza I, exist mai

multe clase de trisomie:
- trisomia primar, atunci cnd n meioz extracromozomul se comport
asemntor cu cei doi omologi la care se ataeaz, formnd o configuraie n
lan, un trivalent. Dac se formeaz un extravalent, la dou perechi de
cromozomi, fenomenul se numete trisomie primar dubl (2n+1+1);
- trisomia secundar, extracromozomul este un izocromozom
(izocromozomul se formeaz ca urmare a diviziunii transversale i nu
longitudinale a centromerului),care n meioz, n zigonem, formeaz configuraii
de inel;
- trisomia teriar, extracromozomul este un cromozom translocat, care
n meioz mpreun cu celelalte dou perechi, formeaz un lan.
.
c) Aneuploizii asigur identificarea rolului genetic al unor cromozomi, legturile
dintre cromozomi, precum i rolul diferitelor gene n expresia fenotipic a unor
caracteristici.
167
INSTRUCIUNI
ntrebare.
1) Definii i clasificai euploidia 1p
2) Aloploidia : definiie, caracteristici, exemplificri 2p
3) Importana practic a poliploidiei 2p
4) Metode de inducere a poliploidiei - 2p
5) Hiperploidia : definiie, clasificare, exemplificri 2p

2. Nicolae, I., Rduoiu, S., Butnaru, G.,Nicolae, F., 2000, Genetica- principii de baz
ale ereditii, Vol. I, Ed. Bioterra, Bucureti.
3. Russel, P. J., 1998, Genetica, EDISES.
168
UNITATEA DE NVARE NR.9 :
INTRODUCERE N GENETICA MOLECULAR
CUPRINS
9.2. Acizii nucleici: structur i funcii 170
9.3. Replicarea ADN 178
9.4. Transcripia i translaia 184
Identifici natura chimic a materialului genetic.

Cunoti rolul genetic i structura acizilor nucleici.
Cunoti mecanismele privind stocarea, transferul i utilizarea informaiei
genetice la nivel molecular.
169
9.2. Acizii nucleici: structur i funcii
9.2.1. Acizii nucleici: structur i funcii
Cu ajutorul determinrilor chimice si citologice, s-a descoperit c acizii nucleici

ndeplinesc funcia genetic de a nregistra, conseva i transmite informaia ereditar de la o
celul la alta, de la un individ a altul i de la o generaie la alta. Astfel, este unanim acceptat
afirmaia, conform careia, baza material a ereditaii este reprezenta de acidul dezoxiribonucleic
(ADN-ul) i acidul ribonucleic (ARN-ul), ambii fiind prezeni n celulele organismelor
eucariote, sau solitari n cazul organismelor procariote: ADN-ul reprezint suportul material al
informaiei genetice la bacterii si adenovisui, respectiv ARN-ul la ribovirui.
a) Structura chimic i molecular a acizilor nucleici
Acizii nucleici reprezentai de acidul dezoxiribonucleic (ADN) si cel ribonucleic

(ARN) sunt substante chimice cu o structur macromolecular, alcatuite din unuiti mai simple,
numite nucleotide. Un nucleotid este alctuit dintr-un nucleozid i un radical fosforic. Un
nucleozid este alctuit dintr-o baza azotat i o pentoz: riboza i dezoxiriboza.
Bazele azotate din macromolecula acizilor nucleici de la toate vieuitoarele sunt
de dou tipuri:
- baze purinice: adenina (A) i guanina (G);
- baze pirimidinice: citozina (C), timina (T), uracil (U).
Pentozele care intr n alctuirea acizilor nucleici sunt dezoxiriboza, la ADN i riboza, la
ARN.
170
Fig. 9.1. Bazele purinice i pirimidinice. Structura chimic a principalelor baze azotate
care intr n componena moleculei acizilor nucleici (ADN i ARN)
Se constat c bazele purinice sunt aceleai n ambii acizi nucleici , ns dintre bazele
pirimidinice, numai citozina este comun, timina gasindu-se numai n ADN, iar uracilul numai n
ARN.
b) Funciile acizilor nucleici

Acizii nucleici reprezint substratul ereditii. Ei au inscris, sub form de codificare
biochimic informaia ereditar n catena polinucleatidic. Acetia au rol i n pstrarea
informaiei genetice (atat ADN-ul, ct i ARN-ul), dar i n sinteza proteinelor (numai ARN-ul).
Acizii nucleici ndeplinesc dou funcii: funcia autocatalitic i heterocatalitic.
1. Funcia autocatalitic (replicaie, sintez sau copiere). Se realizeaza n nuclei n
interfaza ciclului celular i are 3 faze:
1) Faza G1: cromozomii sunt monocromatidici, au 2 cromoneme, are loc sinteza
enzimelor necesare replicaiei.
171
2) Faza S: cromozomii devin bicromatidici, au 4 cromoneme n prezenta enzimei
ADN polimeraza, se dubleaz cantitatea de ADN.
3) Faza G2 : are loc sinteza proteinelor necesare organizrii fusului de diviziune.
2. Functia heterocatalitic implica TRANSCRIPIA informaiei dintr-o catena de

ADN5-3 n molecula de ARN mesager i TRANSLAIA care reprezint decodificarea
informaiei din molecula de ARN mesager n lanul protidic.
TRANSCRIPIA
La procariote n procesul de transcripie este copiat informaia genetic din mai multe gene.
Gena procariotelor are numai ADN informaional. ARN polimeraza recunoate un segment de
ADN numit promotor, se uneste cu acesta permind desfurarea transcripiei. La eucariote
transcripia se realizeaz dintr-o singur gen care are segmente informaionale (EXONI) i
segmente noninformaionale (INTRONI). n prima faz este copiat gena n ntregime n ARN
premesager apoi intronii sunt eliminai i se sintetizeaz ARN mesager neutru.
ETAPELE TRANSCRIPIEI:
1. Iniierea - ncepe cu codonul AUG sau CUG
2. Alungirea - implic aezarea pe baz de complementaritate a nucleotidelor n
ARN mesager.
3. nlocuirea nseamn sfaritul informaiei marcat prin prezena unui CODON STOP.
TRANSLAIA
Are loc n citoplasm la nivelul ribozomilor, const n transferul informaiei din molecula de
ARN mesager n lanul protidic.
ETAPELE TRANSLATIEI:
1. Recunoaterea locului de unde ncepe translaia;
2. Pregatirea aminoacizilor pentru sinteza proteinelor.
9.2.2. Forme structurale de ADN
Structura primar a ADN-ului

Structura monocatenar reprezint structura primar a ADN-ului. Secvena bazelor
azotate n cadrul structurii primare a ADN-ului este specific pentru fiecare specie i reprezint
modalitatea de nscriere a informaiei ereditare n molecula de ADN sub form de codificare
172
biochimic. Prin polimerizarea (sau nlnuirea) nucleotidelor, se formeaz lanuri
polinucleotidice, adic acizii nucleici. Legturile dintre nucleotide sunt fosfo-diesterice. Aceste
legturi esterice se formeaz ntre grupul fosfat al unei nucleotide (ribonucleotida sau
dezoxiribonucleotida) i atomul de carbon din poziia 3 al pentozei (riboza sau dezoxiriboza)
nucleotidului vecin.
Un lan polinucleotidic are o polaritate: o extrem 3', cu un grup hidroxil i o alta 5' , cu
un grup fosfat. O singur caten (lan) de acid nucleic este un polimer fosfat-pentoz cu bazele
purinice i pirimidinice ataate sub forma de grupri laterale.
Informaia genetic este nregistrat n succesiunea bazelor.
Structura secundar a ADN-ului
Structura secundar a AND a fost stabilit n anul 1953 de ctre J.D.Watson i F.H.C.
Crick i corespunde tipului B de ADN, prezent n regiunile de eucromatin, cu gene active
metabolic. Conform acestui model, molecula de ADN este alcatuit din dou catene
macromoleculare, antiparalele, cu direcie diferit de naintare, rsucite n jurul unui ax comun,
avnd forma unei scari n spiral. Dublul helix prezint rsucirea spre dreapta, fiind uor
asimetric i prezint dou scobituri (una mare, una mic) .
Fig. 9.2. Structura primar a ADN-ului
173
Molecula de ADN este format din doua catene polinucleotidice nfaurate una n jurul
celeilalte, ntr-un dublu helix de dreapta. Bazele azotate i implicit cele dou catene ale
moleculei de ADN se leaga ntre ele prin puni de hidrogen. Punile de H dintre A-T sunt duble,
iar cele dintre C-G sunt triple. Coloana zahar-fosfat se afl la exteriorul helixului, iar bazele
azotate sunt orientate spre interior (centru) n planuri aproximativ perpendiculare pe axa
(lungimea) moleculei.
Molecula de ADN are forma unei scari n spiral: balustradele sunt constituite din
coloanele zahar-fosfat, iar treptele fiind reprezentate din bazele azotate.
Cele doua catene polinucleotidice sunt: antiparalele, un lan fiind orientat n directia 3' -
5' ,iar celalalt n directia 5' -3 ' i complementare, secvena nucleotidelor dintr-o caten "dictnd"
secvena nucleotidelor din cealalta caten.
Adenina se leag ntotdeauna de timin i citozin de guanin (A-T; C-G).
De exemplu dac o caten conine secvena TACGTA, cealalt caten trebuie s conin
secvena ATGCAT, din cauza regulilor de mperechere menionate aici.
Principiul complementaritii, care reglementeaz mperecherea bazelor, asigur att
autoreplicarea, ct i transferul informaiei genetice n succesiune bazelor.
9.2.3. Niveluri de mpachetare a ADN; denaturarea i renaturarea ADN
S-au propus mai multe modele de mpachetare a moleculei de ADN. Cel mai acceptat
este acela propus de Pettijohn i Hecht (l974), n acord cu care, mpachetarea se face printr-un
proces de pliere i supraspiralizare (formare de suprahelice). Se formeaz astfel o structur
condensat, meninut prin aciunea asociat a proteinelor din nucleoid.
Modelul de mpachetare prin pliere i supraspiralizare ncearc s explice
mecanismul molecular al drumului invers, de la structur circular relaxat a macromoleculei de
ADN, la arhitectura corpuscului dens existent n celul.
Pentru mpachetare, se consider c molecul dublu catenar, circular, iniial se
pliaz n 40-60 de domenii egale. Punctele de pliere sunt determinate de molecule de ARN ,
legate cu una dintre extremiti de ARN-polimeraz. Moleculele de ARNr i ARNt, mpreun cu
ARN-polimeraz particip la formarea i meninerea domeniilor de pliere. Prin pliere, diametrul
cromozomului scade la circa 30 Am. n interiorul fiecrui domeniu de pliere are loc un proces
174
de supraspiralizare. Supraspiralizarea este o stare fizic n care molecula de ADN se pliaz prin
rsucire n jurul propriei axe .
Moleculele de ADN dublu catenare pot suferi modificri importante ale proprietilor lor
fizice, ca rezultat al aciunii unor factori fizici (temperatura) sau chimici (modificri de pH,
prezena unor substane de tipul alcoolilor, cetonelor etc) .
Prin nclzire la temperaturi cuprinse ntre 63 i 100 grade C, timp de circa 10
minute,moleculele de ADN dublu catenare avnd diverse proveniene, sufer o rupere a
legturilor de hidrogen dintre catenele complementare, precum i a legturilor van der Waals
dintre bazele azotate stivuite, determinnd trecerea la structura monocatenar a ADN-ului,
proces denumit denaturare.
Denaturarea termic este denumit i topire, deoarece nclzirea ADN-ului,furnizeaz
energia necesar ruperii legturilor de hidrogen.Zonele din ADN bogate n guanin sau citozin
se topesc la temperaturi mai nalte, deoarece ntre G - C exist trei legturi de hidrogen, fiind
astfel mai rezistente la denaturare. ntre adenin i timin exist 2 legturi de hidrogen,
denaturarea zonelor bogate n A - T realizndu-se la temperaturi mai joase. Dovada n acest sens
o constituie faptul c denaturarea ncepe n zone bogate n A - T, iar temperatura de topire poate
oferi indicii asupra compoziiei n baze azotate a ADN-ului.Dac dup denaturarea complet,
catenele separate sunt rcite brusc, legturile de hidrogen nu se mai refac, ADN-ul rmnnd sub
forma monocatenar, fiind aa numitul ADN denaturat.
Cnd rcirea este lent, legturile de hidrogen se refac ntre catenele complementare,
refcndu-se i dublu helix al moleculei de ADN, proces numit renaturarea ADN-ului.
9.2.4. ADN repetitiv caracteristic eucariotelor
ADN-ul repetitive este format din secvene nucleotidice (de tip A - T sauG - C), repetate
de ordinul a zecilor sau sutelor de mii ntr-un lan polinucleotidic. n general aceste secvene sunt
considerate lipsite de informaie genetic.n funcie de numrul repetrilor, ADN repetitiv se
clasific n: ADN nalt repetitiv i ADN moderat repetitiv.
175
ADN nalt repetitiv reprezint 5 - 10% din totalul ADN-ului celular, fiind reprezentat de
secvene nucleotidice n medie de 1.500 pb, care se repet ntre 50.000 i 1 milion de ori.
Aceste secvene nalt repetate sunt localizate mai ales n regiunile telomerice i
centromerice ale cromozomului.
ADN moderat repetitiv reprezint 15 - 40% din totalul ADN-ului celular,cuprinznd

secvene mediu repetate, ntr-un numr de copii de 500 - 5.000 de ori.ADN-ul mediu
repetat are o aranjare caracteristic n genom, fiind reprezentat de secvene mediu
repetate, separate cu secvene de ADN nerepetitiv (secvene informaionale). Aceasta
clas de secvene dezoxiribonucleotidice este destul de heterogen,fcnd parte din
cadrul ei i o serie de gene funcionale reprezentate n copii multiple,cum ar fi genele
pentru sinteza ARN-ribozomal i a histonelor, ale cror numr de copii este cuprins ntre
500 i 2.000 n genom. Din categoria ADN-ului moderat repetitiv, fac parte i elementele
genetice mobile, care se pot deplasa n interiorul genomului, fiind denumite elemente
transpozabile. Secvenele repetitive din molecula de ADN au funcii nc insuficient
cunoscute. Mult timp s-au considerat a fi secvene genetice inactive, dar recent s-a emis
ipoteza c au un rol reglator i intervin n procesul de difereniere celular.
176
ntrebri:
a) Structura chimic a acizilor nucleici :
b) Prezentai pricipiul complementaritii :
c) Ce este denaturarea ADN?:

Structura chimic i molecular a acizilor nucleici.
Procesele de denaturare i renaturare ADN , niveluri de mpachetare
ADN..
Caracterizarea ADN repetitiv- eucariotic.
Funciile acizilor nucleici.
177
9.3. Replicarea ADN (sinteza ADN)
O condiie esenial ce trebuie ndeplinit de ctre o substan pentru a putea fi numit

material genetic este aceea de a se multiplica (replica) cu cea mai mare fidelitate, astfel nct, n
procesul de diviziune celular, celulele fiice s conin aceeai informaie genetic ca i celula
mam din care au provenit.
n momentul n care au propus structura fizic bicatenar a ADN, Watson i Crick au
propus i modelul de replicare a acestuia: cele dou catene ale celulei mam sunt folosite ca
matrie pentru sinteza altor dou catene, fiice. Moleculele de ADN din nou formate vor avea cte
o caten veche provenit de la celula mam (matria) i o caten nou sintetizat. Acest mod de
replicare poart numele de replicare semiconservativ i a fost demonstrat experimental de ctre
cercettorii Mathews Meselson i Franklin Stahl, n 1958, utiliznd izotopul greu al azotului
(N15) i separnd moleculele de ADN cu greuti diferite prin centrifugare n gradient de
densitate.
Replicarea ADN este un proces biochimic complex la care particip un ntreg aparat
enzimatic. Din cadrul acestuia fac parte:
1) ADN helicazele enzime care se leag de ADN-ul bicatenar, determin separarea
celor dou catene complementare i formarea furcii de replicare;
2) SSD (single stranded DNA) proteine care se leag de ADN -ul bicatenar sub
form de tetrameri i mresc viteza de replicare;
3) ADN girazele permit desfacerea celor dou catene la nivelul furcii de
replicare;
4) Primaza (un tip de ARN polimeraza) sintetizeaz o scurt secven de ARN
primer - prin ataarea de nucleotide la catena matri, pe baz de
complementaritate;
5) ADN polimerazele: Pol III funcia de elongare (polimerizare) 5 3 i Pol I
cu funciile: 5 3 elongare; 5 3 exonucleazic; 3 5
exonucleazic (corectare);
6) ADN ligazele formeaz legturi covalente ntre C5 i C3 ale celor dou
nucleotide alturate.
178
Din punct de vedere chimic, sinteza ADN este, de fapt, o reacie de polimerizare. i,
pentru c este o reacie biochimic, trebuie s fie catalizat de ctre o enzim: ADN polimeraza.
ADNpolimeraza
H-P-P-P-Nn OH + H-P-P-P-Nx-OH Nn+1 + H2O + PP
Pentru a realiza sinteza ADN, enzima ADN-polimeraza are nevoie de:
1) prezena nucleotidelor sub form de trifosfai: dATP, dGTP, dCTP, dTTP; absena
uneia dintre acestea sau modificarea radicalilor de la atomii implicai n
polimerizare (C5 i C3) conduce la stoparea procesului;
2) prezena unei catene ce poate fi folosit ca matri; aceasta va determina, de fapt
ordinea bazelor azotate din noua caten;
3) prezena unei scurte secvene de nucleotide (ADN sau ARN), numit primer, care
s poat oferi captul C3-OH necesar formrii legturii covalente; cu alte cuvinte,
ADN polimeraza nu poate iniia sinteza unei catene de ADN de novo.
Deoarece ADN polimeraza poate aduga nucleotide doar la captul 3-OH, rezult c sinteza
noii catene este orientat ntotdeauna n direcia 53 (prima nucleotid are captul 5 liber, iar
ultima are captul 3 liber). n acelai timp, pentru c cele dou catene mam sunt antiparalele,
este necesar ca i catenele fiice s fie antiparalele. Acest fapt complic mecanismul de replicare a
ADN. Mai precis, pentru a se ndeplini toate condiiile, replicarea trebuie s fie
semidiscontinu: o caten fiic este sintetizat continuu, iar cealalt discontinu, sub forma
unor fragmente mici de ADN care, apoi, sunt reunite (vezi figura 9.3).
9.3.1. Etapele procesului de sintez ADN
1) ADN-helicazele se ataaz la molecula de ADN bicatenar, la o anumit secven de baze

azotate numit originea replicrii (ORI) i desfac cele dou catene legate prin legturi de
hidrogen. Se formeaz de-a lungul moleculei o zon monocatenar sub forma unei bucle care, pe
msur ce helicazele nainteaz ntr-o direcie sau alta se lrgete din ce n ce mai mult.
179
2) Pentru a menine starea monocatenar necesar replicrii, proteinele SSD (single stranded-
DNA) se ataeaz la cele dou catene sub form de octameri.
Fig. 9.3 Sinteza ADN
3) Primazele, avnd la dispoziie nucleotidele sub form de trifosfai (dATP, dCTP, dGTP,
dUTP), ncep s le ataeze la catenele matri, pe baz de complementaritate, sintetiznd un
fragment scurt de ARN (50-75 nucleotide), numit primer. Reinem c, datorit orientrii
antiparalele a celor dou catene matri, primerii trebuie s fie i ei antiparaleli.
4) ADN polimeraza III (POL III), avnd la dispoziie captul 3-OH de la fiecare primer
ncepe s adauge la acesta noi nucleotide. Helicazele nainteaz de-a lungul ADN-ului separnd
din ce n ce mai mult cele dou catene iar, n urma lor, vine Pol II care i realizeaz funcia
180
polimerazic: adugarea de nucleotide la captul 3-OH utiliznd ca matri vechea caten de
ADN. Este important de reinut c, datorit orientrii antiparalele a celor dou catene matri i,
datorit faptului c, datorit orientrii antiparalele a celor dou catene matri i, datorit faptului
c sinteza de ADN are loc doar n direcia 5 3,una dintre catenele fiice, i anume cea care
nainteaz n aceeai direcie 5 3, se va sintetiza continuu (catena conductoare
leading), pe cnd cealalt, fiind antiparalel, se va sintetiza discontinuu (catena lagging), sub
form de fragmente scurte, denumite fragmentele Okazaki. Deoarece viteza de replicare este
foarte mare, din cnd n cnd, Pol III integreaz greit nucleotidele n catena fiic (de exemplu A
n loc de C). n acest caz, intervine enzima ADN polimeraza I (Pol I) care, datorit funciei
sale exonucleazice n direcia 3-5, denumit i cea de corectur (proofreading), ndeprteaz
nucleotida greit ncorporat, iar Pol III i reia activarea de la acel punct.
5) Att catena continu, ct i cea discontinu, au la captul 5 primerul ARN sintetizat de
primaze. Acesta trebuie ndeprtat, funcie realizat tot de ctre Pol I prin domeniul su
exonucleazic n direcia 5 3.
6) Pe catena discontinu, prin eliminarea primerilor ARN ramn poriuni din catena matri
nefolosite pentru replicare (goluri). Acestea sunt umplute de ctre Pol I prin funcia sa
polimerazic.
7) Fragmentele Okazaki sunt unite cu ajutorul enzimei ADN-ligaza care formeaz legtura
covalent ntre C5al unui fragment i C3' al urmatorului fragment.
Fig.9.4 Etapele sintezei ADN

181
9.3.2. Replicaia ADN la procariote i eucariote
Majoritarea organismelor procariote posed ADN dispus n form circular, ceea ce

complic oarecum procesul de replicare, innd cont de faptul c ADN este un dublu helix.
Replicarea acestuia ncepe dintr-un singur punct (ORI) i nainteaz n ambele direcii -replicare
bidirecional.
La E.coli a fost demonstrat prin autoradiografiere c replicarea cromozomului su are loc
tot circular, acesta lund forma literei greceti theta () - replicarea tip (vezi figura 9.5). La
ORI, cele dou catene se desfac, furca de replicare nainteaz n ambele direcii i, pentru a evita
suprarsucirea i tensionarea celor dou catene la polul opus lui ORI, enzimele numite
topoizomeraze creaz tieturi n una din cele dou catene, aceasta se rsucete, iar tensiunea este
eliminat.
Anumite virusuri cu ADN-ul circular, datorit faptului c au nevoie de un numr foarte
mare de copii ale acestuia, au adoptat o alt strategie de replicare a cromozomului lor. Modelul
lor de replicare poart numele de cercul rotativ i este prezentat n figur. Una dintre cele dou
catene este tiat la ORI i se creaz cele dou capete: unul 5' cu P i cellalt cu 3'-OH.
Fig.9.5 . Replicare de tip i cercul rotativ

Avnd la dispoziie captul 3'-OH, enzima ADN polimeraza ncepe s adauge noi
nucleotide folosind ca matri catena netiat, circular. Prin adugare de nucleotide la captul 3',
captul 5' este mpins nainte fapt care conduce implicit, la rotirea catenei din interior (cercul
rotativ). De cele mai multe ori, prin rotirea catenei din interior se formeaz lanuri lungi de ADN
bicatenare cuprinznd mai multe copii ale ADN-ului iniial. n final, enzimele vor tia acest lan
182
n fragmentele corespunztoare fiecrui cromozom, acestea se unesc i sunt identice cu ADN-ul
circular pe baza cruia au fost sintetizate.
La eucariote, ADN-ul este liniar, deci replicarea decurge n mod normal. Datorit
lungimii foarte mari a cromozomilor eucariotelor i vitezei mari de replicare a acestora, este
necesar ca procesul s nceap n mai multe puncte, mai multe ORI, de la fiecare dintre acestea,
furca de replicare naintnd n ambele direcii (replicare bidirecional).
ntrebri:
a) Enumerai enzimele implicate n procesul replicrii ADN :
b) Argumentai sinteza semidiscontinu a ADN :
c) Prin ce se caracterizeaz replicarea ADN, n cazul cromozomilor la

eucariote?

Etapele sintezei ADN.
Enzimele implicate n sinteza ADN.
Particulariti ale replicrii ADN la procariote i eucariote.
183
9.4. Transcripia i translaia (sinteza proteic)
9.4.1. Transcripia (sinteza ARN)
Transcripia este primul pas n procesul de expresie al genelor. Mai precis, este vorba de
sinteza unei molecule de ARN, utiliznd ca informaie ADN.
Aa cum am vzut n capitolul referitor la strucrura chimic a acizilor nucleici, ntre ADN
i ARN exist dou diferene majore: riboza nlocuite dezoxiriboza, iar uracilul nlocuiete
timina.
Sinteza ARN este, din punct de vedere chimic, tot o reacie de polimerizare. O reacie
catalizat, de aceast dat, de ARN polimeraza.
Sinteza ARN prezint numeroase asemnri cu cea a ADN:
a) prezena nucleotidelor sub form de ribonucleleozide 5' fosfat(ATP,CTP,GTP, TTP);
b) prezena unei catene de ADN ce poate fi folosit ca matri. Observai c ARN ul se
sintetizeaz pe baza informaiei genetice din ADN i nu se replic, precum acesta din urm.
Ordinea bazelor azotate din ADN determin ordinea bazelor azotate din ARN.
Spre deosebire de ADN-polimeraza, ARN-polimeraza poate iniia sinteza de novo a unei
catene polinucleotidice. Cu alte cuvinte, ea nu necesit prezena unui primer anterior sintetizat.
La fel ca i ADN-polimeraza, ataeaz la carbonul 3'-OH o nou nucleotid, ceea ce dovedete
c i sinteza ARN este orientat n direcia 5' > 3'. Prin urmare, catena de ADN trebuie s fie
orientat in direcfia 3' -> 5' pentru c sinteza ARN este continu.
Ceea ce este foarte important de reinut este faptul c, pentru sinteza unui anumit ARN, cu
o anumit secven de baze azotate, este folosit, ca matri, o singur catena din molecula de
ADN. Aceasta este denumit catena sens, iar complementara sa - catena antisens. Dar, pentru
sinteza tuturor tipurilor de ARN sunt folosite ambele catene ADN. Cu alte cuvinte, o caten de
ADN poate fi sens pentru un tip de ARN i antisens pentru altul (vezi figura 9.6).
184
Fig. 9.6 Sinteza ARN- ului folosind ca matri ADN-ul
9.4.2. Procesarea ARN-m
Este cel care transcrie informaia genetic din nucleu, de la nivelul ADN-ului i o
transport n citoplasm, pentru a fi tradus (translatat) n proteine la nivelul ribozomilor.
La procariote, ARNm este utilizat direct n translaie, fr nici o alt modificare. Spre
deosebire de acestea, la eucariote, prin transcripie, se sintetizeaz o molecul de ARNm primar
(transcript primar) care sufer o serie de modifcri pentru a deveni ARNm matur. Aceste
modificri poart numele de procesarea transcriptului primar i includ:
1) Adugarea la captul 5a unui grup de nucleotide terminal numit cap ce conine guanozina
modificat sub form de metil. Capul este necesar pentru ataarea ARNm matur la
ribozomi i iniierea translaiei.
2) Adaugarea la captul 3' a unui grup de nucleotide terminal (peste 200 de nucleotide) de
tipul poliadenozina - coada poli A. Aceasta asigur stabilitate moleculei de ARNm la
aciunea ribonucleazelor (enzime ce degradeaz ARN-ul) prezente n citoplasm.
3) Eliminarea secvenelor noninformaionale (intronilor) i reunirea celor
informaionale(exonilor). Este un proces complex cunoscut sub numele de mbinarea ARN-ului
(ARN splicing) ce are loc la nivelul spliceozomilor (particule situate n nucleu formate din
proteine i cteva tipuri de ARN nuclear mic - ARNnm). Moleculele de ARNnm conin secvene
185
complementare cu capetele 5' i 3 ale intronilor i exonilor, capete pe care,le aduc unul n
apropierea celuilalt, determinnd cuplarea lor i, n final, eliminarea intronilor.
Din analiza secvenelor de baze azotate din exoni i din introni s-a constatat c exist
dou secvene consens: una donor (capatul 5') i alta acceptor (capatul 3). n figur este
prezentat schematic mbinarea a doi exoni prin eliminarea intronului. n urma eliminrii,
intronul ia forma unui lasso i, apoi, este fragmentat n secvene foarte mici. Legtura care se
formeaz la nivelul intronului, ntre A i G, este una atipic; C5 de la G se ataseaz la C2' de la
A deoarece C3'este ocupat de restul lanului nucleotidic.
La Tetrahymena eliminarea intronilor dintr-un precursor al ARN ribozomal este cu totul
special. Acesta se mpacheteaz n aa fel nct autoelimin intronii. Este prima dovad c
ARN-ul poate avea i rol enzimatic, cataliznd reacii chimice. Un astfel de ARN cu rol
enzimatic poart numele de ribozime.
Existena intronilor n transcriptul primar a fost demonstrat i pe baza hibridrilor
moleculare de tipul ADN - ARNm pentru aceeai gen. S-a constatat ca ADN formeaz din loc
n loc bucle, care reprezint secvenele noninformaionale eliminate n procesul de formare a
ARNm matur.
Numrul intronilor variaz foarte mult de la o gen la alta, dar, n general, eucariotele
inferioare au mai puini introni comparativ cu cele superioare. Majoritatea intronilor par s nu
aib o anume funcie, aceasta deoarece genele sintetizate artificial fr introni, au aceeai funcie
ca i cele cu introni. Dar, uneori, acetia pot include secvene reglatoare ale genei i, deci,
reglatoare ale transcripiei. n orice caz, ei au un rol esenial n evoluia genelor.
n cadrul unui ARNm matur se disting trei zone distincte:
a) captul 5' sau liderul care nu este folosit n translaie i, n anumite cazuri, determin rata
acesteia;
b) secvena codificatoare avnd ntre 500 i 3000 baze azotate (n funcie de numrul de
aminoacizi din catena polipeptidic);
c) captul 3' sau coada care, de asemenea, nu este translatat. La procariote, majoritatea ARNm
au o via foarte scurt, de cteva minute. La eucariote, n schimb, viaa acestora este de cteva
ore, dei exist variaii mari de la cteva minute la cteva zile. Viaa scurt a ARNm reprezint
un alt mod de a regla activitatea unei gene.
186
Fig. 9.7 Schema eliminrii intronilor
9.4.3. Tipuri de ARN
A fost descris existena mai multor tipuri de ARN, care prezint caracteristici structurale
i funcionale diferite. Acestea sunt substane macromoleculare, alctuite dintr-o singur caten
polinucleotidic, ce n anumite regiuni poate prezenta o structur bicaten, datorit rsucirii
catenei in jurul propriei axe i formrii unor puni de hidrogen de tipul A=U, GC i invers.
ARN viral. ARN viral constituie materialul genetic de la ribovirusuri, ex : virusul
mozaicului tutunului, virusul poliomelitei, virusul gripal i altele. Prezint de obicei o form
liniar, excepie fcnd doar virusul encefalomelitei oarecilor care are structur circular.
Mrimea i greutatea sa molecular sunt dependente de cantitatea de informaie genetic pe care
o posed. Se replic n celula gazd n mod diferit .
ARN nuclear mic (ARN-nm sau ARN-sn). A fost evideniat n nucleii celulei animale.
ARN-nm interacioneaz cu proteine specifice formnd mici particule nucleare
ribonucleoproteice. Sinteza ARN-mn se realizaeaz cu ajutorul enzimei ARN-polimeraza III.
187
ARN mesager (ARNm). Este cel care transcrie informaia genetic din nucleu, de la
nivelul ADN-ului i o transport n citoplasm, pentru a fi tradus (translatat) n proteine la
nivelul ribozomilor.
La procariote, ARNm este utilizat direct n translaie, fr nici o alt modificare. Spre
deosebire de acestea, la eucariote, prin transcripie, se sintetizeaz o molecul de ARNm primar
(transcript primar) care sufer o serie de modifcri pentru a deveni ARNm matur(aa cum s-a
prezentat la procesarea ARNm).
ARN de transport (ARN-t). Este o molecul mic de ARN (70-90 de nucleotide) care
aduce aminoacizii la locul de sintez a proteinelor i, care, particip, prin domeniile sale (buclele
monocatenare i captul 3) la patru procese distincte care, cronologic, se desfoar astfel:
1) ataarea enzimei aminoacil sintetaza specific fiecrui tip de aminoacid;
2) ataarea unui anumit aminoacid la captul 3' ce se termin ntotdeauna cu secvena CCA.
ARNt care prezint ataat aminoacidul corespunztor se numete ARNt ncrcat.
3) ataarea la ARN ribozomal din componena ribozomului.
4) ataarea la codonul din ARNm i formarea legturilor de H dintre codon i anticodon.
n consecin pentru fiecare aminoacid esenial, exist un anumit tip de ARNt care se
leag la o anumit aminoacilsintetaz i recunoate un anumit codon din ARNm. Pentru a putea
rspunde la toate aceste procese fiecare ARNt are o anumit structur tridimensional. n figur
este prezentat configuraia unui ARNt cu domeniile sale i modul n care se leag aminoacidul
la capatul 3'.
Fig.9.8 Structura ARN t
188
ARN ribozomal (ARN-r) reprezint circa 85% din cantitatea total de ARN din celul,
fiind localizat n ribozom unde este asociat cu proteinele. Ribozomii sunt particule
ribonucleoproteice (alctuite din ARN-ribozomal i proteine), de form relativ sferic, prezente
att la procariote, ct i la eucariote. Se afl, deasemenea, n constituia mitocondriilor i a
cloroplastelor, organite celulare de origine endosimbiont.
Ribozomii din mitocondrii i cloroplaste de la eucariote prezint caracteristici similare cu
cele ale ribozomilor de la procariote.
9.4.4. Codul genetic
Doar patru baze azotate sunt necesare pentru a determina ordinea celor douzeci
de aminoacizi dintr-o caten polipeptidic. Acest fapt este posibil deoarece o anumit combinaie
de trei baze azotate adiacente este utilizat pentru introducerea unui anumit aminoacid. Aceast
secven de trei baze azotate poart numele de codon, iar totalitatea codonilor alctuiete codul
genetic .
Ipoteza codului genetic sub form de triplet a fost dovedit matematic. Astfel, dac o
singur baz azotat ar fi codificat un aminoacid, atunci ar exista doar patru aminoacizi, dac
dou baze azotate ar codifica un aminoacid, atunci 42 = 16 aminoacizi posibili, n fine, dac trei
baze azotate codific un aminoacid, atunci 43 = 64.
Dei exist doar 20 de aminoacizi eseniali, 61 de codoni dintre cei 64 codific integrarea
aminoacizilor, ceea ce nseamn c mai muli codoni vor determina includerea aceluiai
aminoacid n catena polipeptidic.
Prima dovad acceptat drept evident a codului genetic sub form de triplei a fost
reprezentat de experimentul de inserare i deleie a anumitor baze azotate dintr-o secven
codificaroare. n procesul de translaie bazele azotate sunt citite secvenial, codon dup codon,
orice baz azotat inserat sau deletat duce la modificarea ntregului cadru de citire i, n
consecin la modificarea catenei polipeptidice inserate.
Vorbim aadar, de aa-numitul cadru de citire. Mutaiile acestuia (deleii, inserii de
baze azotate) din experimentele de translaie efectuate in vitro au dovedit c fiecare aminoacid
din catena polipeptidic este codificat de ctre o triplet de baze azotate - un codon.
189
O alt caracteristic extrem de important a codului genetic o reprezint degenerarea sa.
Se observ n tabel c toi aminoacizii, cu excepia metioninei i triptofanului, sunt codificai de
cel putin doi codoni. Dac analizm structura bazelor azotate ce intr n componena codonilor
care codific acelai aminoacid, observm c prima i cea de a doua sunt aceleai pentru toi
(excepie face leucina la care se poate schimba i cea de a doua baz). Cea care se schimb este
baza azotat numrul 3, care mai poart numele i de poziia labil. Raionamentul existenei
bazei labile este unul de natur energetic: sinteza proteic trebuie s decurg cu vitez foarte
mare, iar formarea celor trei legturi de hidrogen ntre codon i anticodon necesit timp i
energie mai mult, comparativ cu formarea doar a dou legturi.
Cea mai important caracteristic a codului genetic o reprezint universalitatea sa.
Indiferent de natura sau de gradul de evoluie al organismului pe care l analizm, aceeai triplet
de baze azotate codific acelai aminoacid. Prin urmare, codul genetic are o origine foarte veche,
la nceputul existenei primelor organisme.
190
9.4.5. Translaia
Reprezint procesul final de expresie al unei gene, respectiv acela de sintez a unei
catene polipeptidice avnd drept surs de informaie ADN. Translaia se desfaoar n citoplasm
la eucariote sau n citosol la procariote dar, ntotdeauna, la nivelul ribozomilor. Aa cum am
vazut, informaia genetic prezent la nivelul ADN ajunge la ribozomi sub forma codificat
ARNm.
Fig9.9 Schema translaiei

Pentru a se putea iniia procesul de translatie este nevoie ca cei 20 de aminoacizi s fie
gata de a participa la formarea legturilor peptidice. Aceasta nseamn c ei trebuie s fie ataai
fiecare la ARNt -ul corespunztor lui. Reacia de ataare a fiecrui aminoacid la ARNt este
catalizat de enzima aminoacil ARN sintetaza. Enzima trebuie s posede capacitatea de a
recunoate att aminoacidul ct i ARNt-ul corespunztor. Recunoaterea se bazeaz pe
existena, att la enzima, ct i ARNt a unor conformaii tridimesionale ce permit mbinarea
perfect dintre un anumit ARNt i o anumit aminoacil ARNt sintetaz. De exemplu, leucil-
ARNt-sintetaza se va putea cupla doar cu ARNt ce va transporta aminoacidul leucin i care
posed anticodonul pentru leucin.
Ribozomii, la nivelul crora are loc sinteza proteic, sunt alctuii din dou subuniti:
subunitatea mic i subunitatea mare. Denumirea lor este bazat pe constana de sedimentare. De
exemplu, ribozomii 70S de la E.coli au subunitatea mic de 30S, iar cea mare de 50S. n mod
191
normal, atunci cnd ribozomii nu sunt implicai n sinteza proteic, cele dou subuniti sunt
separate, ele unindu-se doar pentru a realiza aceast funcie. Prin unirea lor, n interiorul
subunitii mari se creeaz dou situsuri de reace: situsul peptidil (situs P) i situsul aminoacil
(situs A) la nivelul crora se vor integra ARNt ncrcai cu aminoacizii corespunztori.
9.4.5.1. Etapele sintezei proteice
1) Inierea catenei polipeptidice.

Subunitatea mic a unui ribozom se ataeaz la ARNm (matur la eucariote sau cel direct
sintetizat, la procariote), la secvena lider. Aceast nou structur este recunoscut de ctre
subunitatea mare a ribozomului care se va ataa i ea, rezultnd astfel, un complex format dintr-
un ribozom complet i o caten polinucleotidic de ARNm. Ribozomul are capacitatea de a
nainta pe ARNm pn cnd, la un moment dat, ntlnete codonul de iniiere - AUG. Orice
ARNm, indiferent de tipul catenei polipeptidice pe care o codific, trebuie s prezinte acest
codon de iniiere. ntlnind acest codon, ribozomul se oprete i permite ataarea la situsul A a
ARNt cu anticodonul corespunztor: UAC. Acest ARNt este ncrcat cu aminoacidul
corespunztor: - metionina. ntre bazele azotate ale codonului i cele ale anticodonului se
formeaz legturile de H corespunzatoare datorit complementaritii bazelor azotate.
2) Elongarea catenei polipeptidice.
Dup ataarea ARNt ce transport metionina la situsul A, ribozomul nainteaz din nou pe
ARNm. Astfel, nct ARNt-Metionina se mut n situsul P, situsul A ramnnd liber. Aici se va
integra urmtorul ARNt ce corespunde din punct de vedere al anticodonului (n figur, ARNt ce
transport prolina i are anticodonul GGC). Se constat c, acum, ambele situsuri sunt ocupate
cu cte un ARNt ce transport cte un aminoacid. ntre acetia din urm se formeaz legatura
peptidic (COOH de la metionin i NH2 de la prolin). Formarea acestei legturi nu mai permite
medoninei s rmn ataat i la ARNt-ul care a transportat-o, motiv pentru care acetia se
separ. ARNt pentru metionin, rmnnd fr aminoacid prsete situsul P. La situsul A
rmne ARNt cu prolina dar, de care, acum este legat i metionina prin legatura peptidic.
Ribozomul se deplaseaz pe ARNm cu nc o triplet de nucleotide astfel nct conformaia
iniial prezent n situsul A ajunge n situsul P. Situsul A rmne din nou liber pentru ataarea
urmtorului ARNt i aa mai departe. Elongarea reprezint de fapt, un ciclu de evenimente
192
prezentate mai sus care se repet din nou i din nou, pn cnd se ajunge la codonul de terminare
a sintezei proteice.
3) Terminalizarea catenei polipeptidice.
n ARNm exist trei triplete de baze azotate: UAA, UAG i UGA pentru care nu exist nici un
ARNt cu anticodonul corespunztor. Aceste triplete se numesc codoni stop. n momentul n care
ribozomul ajunge pe ARNm la nivelul lor, nemaiexistnd niciun ARNt care s aduc un alt
aminoacid, nu se mai formeaz o alt legatur peptidic i, n consecin, sinteza proteic
nceteaz. Catena polipeptidic este eliberat, iar cele dou subuniti ribozomale se separ de
ARNm.
Translaia prezint o caracteristic important i anume, aceea c are loc ntr-o anumit
direcie. Primul aminoacid are liber radicalul NH2, iar ultimul are liber radicalul COOH. n
figura de mai jos (fig. 9.10) este ilustrat procesul de expresie al unei gene innd cont de
orientrile transcripiei i translaiei.
Fig. 9.10 Dogma central a geneticii
193
ntrebri:
a) Precizai denumirile de caten sens i caten antisens :
b) Caracteristicile ARN-m la procariote i eucariote :
c) Descriei etapa de terminalizare a catenei polipeptidice:

Transcripia i translaia (sinteza proteic) .
Tipurile ARN..
Codul genetic i importana lui.
194
ntrebarea 1
a) Acizii nucleici reprezentai de acidul dezoxiribonucleic (ADN) si cel ribonucleic

(ARN) sunt substante chimice cu o structur macromolecular, alcatuite din
unuiti mai simple, numite nucleotide. Un nucleotid este alctuit dintr-un
nucleozid i un radical fosforic. Un nucleozid este alctuit dintr-o baza azotat i o
pentoz: riboza i dezoxiriboza.Bazele azotate din macromolecula acizilor nucleici
de la toate vieuitoarele sunt de dou tipuri:
- baze purinice: adenina (A) i guanina (G);
- baze pirimidinice: citozina (C), timina (T), uracil (U).
Pentozele care intr n alctuirea acizilor nucleici sunt dezoxiriboza, la ADN i
riboza, la ARN.
b) Adenina se leag ntotdeauna de timin i citozin de guanin (A-T; C-G).

De exemplu dac o caten conine secvena TACGTA, cealalt caten trebuie s
conin secvena ATGCAT, din cauza regulilor de mperechere menionate aici.
c) Prin nclzire la temperaturi cuprinse ntre 60 i 100 grade C, timp de circa 10

minute, moleculele de ADN dublu catenare avnd diverse proveniene, sufer o
rupere a legturilor de hidrogen dintre catenele complementare, precum i a
legturilor van der Waals dintre bazele azotate stivuite, determinnd trecerea la
structura monocatenar a ADN-ului, proces denumit denaturare.
195
ntrebarea 2
a) ADN helicazele enzime care se leag de ADN-ul bicatenar, determin

separarea celor dou catene complementare i formarea furcii de replicare; SSD
(single stranded DNA) proteine care se leag de ADN -ul bicatenar sub form
de tetrameri i mresc viteza de replicare; ADN girazele permit desfacerea celor
dou catene la nivelul furcii de replicare; Primaza (un tip de ARN polimeraza)
sintetizeaz o scurt secven de ARN primer - prin ataarea de nucleotide la
catena matri, pe baz de complementaritate; ADN ligazele formeaz legturi
covalente ntre C5 i C3 ale celor dou nucleotide alturate; ADN polimeraza.
b) Deoarece ADN polimeraza poate aduga nucleotide doar la captul 3-OH,

rezult c sinteza noii catene este orientat ntotdeauna n direcia 53 (prima
nucleotid are captul 5 liber, iar ultima are captul 3 liber). n acelai timp,
pentru c cele dou catene mam sunt antiparalele, este necesar ca i catenele fiice
s fie antiparalele. Acest fapt complic mecanismul de replicare a ADN. Mai
precis, pentru a se ndeplini toate condiiile, replicarea trebuie s fie
semidiscontinu: o caten fiic este sintetizat continuu, iar cealalt discontinu,
sub forma unor fragmente mici de ADN care, apoi, sunt reunite
c) Datorit lungimii foarte mari a cromozomilor eucariotelor i vitezei mari de

replicare a acestora, este necesar ca procesul s nceap n mai multe puncte, mai
multe ORI, de la fiecare dintre acestea, furca de replicare naintnd n ambele
direcii (replicare bidirecional).
196
ntrebarea 3
a) Pentru sinteza unui anumit ARN, cu o anumit secven de baze azotate, este
folosit, ca matri, o singur catena din molecula de ADN. Aceasta este denumit
catena sens, iar complementara sa - catena antisens. Dar, pentru sinteza tuturor
tipurilor de ARN sunt folosite ambele catene ADN. Cu alte cuvinte, o caten de
ADN poate fi sens pentru un tip de ARN i antisens pentru altul.
b) ARN mesager (ARNm). Este cel care transcrie informaia genetic din nucleu,
de la nivelul ADN-ului i o transport n citoplasm, pentru a fi tradus
(translatat) n proteine la nivelul ribozomilor. La procariote, ARNm este utilizat
direct n translaie, fr nici o alt modificare. Spre deosebire de acestea, la
eucariote, prin transcripie, se sintetizeaz o molecul de ARNm primar
(transcript primar) care sufer o serie de modifcri pentru a deveni ARNm
matur(aa cum s-a prezentat la procesarea ARNm).
c) n ARNm exist trei triplete de baze azotate: UAA, UAG i UGA pentru care
nu exist nici un ARNt cu anticodonul corespunztor. Aceste triplete se numesc
codoni stop. n momentul n care ribozomul ajunge pe ARNm la nivelul lor,
nemaiexistnd niciun ARNt care s aduc un alt aminoacid, nu se mai formeaz o
alt legatur peptidic i, n consecin, sinteza proteic nceteaz. Catena
polipeptidic este eliberat, iar cele dou subuniti ribozomale se separ de
ARNm.
197
INSTRUCIUNI
ntrebare.
1) Precizai funciile materialului genetic 2p
2) Prezentai structura secundar a ADN-ului 2p
3) Enumerai etapele sintezei ADN 2p
4) Enumerai etapele sintezei proteice - 2p
5) Pe catena sens ADN, succesiunea bazelor este ACCTGAAGTT.Care va
fi succesiunea bazelor n catena ARNm sintetizat 1p
autoevaluare i s subliniai ce credei c ar trebui s cuprind acestea
pentru a fi mai eficiente.
1. Casian H., 2006, Genetica suport pentru curs, Ed. Printech

2. Szilagyi L., 2007, Genetic, Ed. Amanda Edit
3. Victor Stnescu, 1983, Genetica i ameliorarea speciilor forestiere, Ed. Didactic i
pedagogic, Bucureti.
198
GENA I REGLAJUL GENETIC
CUPRINS
10.2. Consideraii generale despre gen 200
10.3. Mutaiile genetice 205
10.4. Reglajul genetic la eucariote 209
Defineti i s caracterizezi gena.

Identifici mecanismele prin care se produc mutaii ale materialului
genetic.
Cunoti mecanismele de reglaj genetic la eucariote.
199
10.2. Consideraii generale despre gen
T. H. Morgan si colaboratorii si (1910), n rezultatul investigatiilor efectuate cu

musculiele de oet, au stabilit c genele sunt localizate n cromozomi si sunt particule materiale,
aranjate liniar de-a lungul cromozomului, iar fiecare gen ocup un loc bine definit, care se
numete locus. Pornind de la aceast idee, a fost elaborat concepia clasic, conform creia
gena are trei caracteristici de baz:
Unitate funcional (determin caracteristicile ereditare);
Unitate mutaional (structura chimic a genei se schimb prin mutaie, ceea ce duce la
apariia caracterului nou);
Unitate de recombinare (n cadrul procesului de crossing-over are loc un schimb de
gene corespunztoare ntre cromatidele nesurori ale cromozomilor omologi). n concepia clasic
gena stabilete ordinea aminoacizilor n molecula proteic ce determin caracterul dat. O gen
este alctuit din aproximativ 900-1500 de nucleotizi din lanul de ADN (sau ARN viral). n
anul 1941 concepia clasic despre gen s-a completat cu ipoteza o gen o enzim,formulat
de G. W. Beadle si E. L. Tatum. Iradiind cu raze ultraviolete culturile prototrofe de ciuperci
Neurospora sitophila si Neurospora crassa, ei au obinut o serie de mutaii biochimice
dependente de sinteza anumitor enzime.
Fig. 10.1. Gene
200
Gena (din gr. genos descendent) reprezint unitatea elementar a eredittii. Pentru a
specifica particularittile eredittii G. Mendel (1865) a folosit termenul de factor ereditar.
Noiunea de gen a fost propus de W. I. Johannsen (1909) pentru a desemna unitatea ereditar
de baz, care este localizat n cromozomi si nu prezint subdiviziuni. Genele sunt redate prin
simboluri din 1-5 litere, care desemneaz succint caracterul afectat n limbile latin sau englez.
Tipul normal (slbatic) al caracterului respectiv se noteaz cu semnul +. Genele aprute prin
modificarea genelor normale sunt numite gene mutante.
De regul, genele slbatice sunt dominante (predomin n prima generaie). n rezultatul
procesului de mutaie, una i aceeai gen poate aprea sub mai multe forme discrete, cunoscute
sub denumirea de alele. Alelele sunt expresii difereniate ale unui caracter. n fiecare cromozom
exist doar o singur gen alel. n organismele diploide, fiecare gen se afl n doz dubl n cei
doi cromozomi omologi, ocupnd acelai locus i fiind gene identice (alele).
n cazul n care gena a suferit mai multe procese mutaionale n aceti loci se pot gsi
gene polialele. n funcie de plasarea lor n autozomi sau heterozomi, genele pot fi autozomale
sau heterozomale. n cazul plasrii lor n heterozomi, genele manifest fenomenul de sex-
linkage, transmindu-se cu frecven mai mare la unul dintre sexe. Dup funcia lor, genele
sunt divizate n: gene structurale, gene reglatoare i gene operatoare.
Genele structurale codific diferite proteine cu rol structural sau enzimatic. Cele
operatoare declaneaz sau nu activitatea genelor structurale. Genele reglatoare controleaz i
dirijeaz activitatea genei operatoare i a genei structurale.
Dup apariia geneticii moleculare, n anii 50-60, gena este definit drept un segment de
ADN sau ARN care conine informaia genetic necesar sintezei unei catene polipeptidice.
Gena este alctuit dintr-o secven de codoni care codific succesiunea aminoacizilor ntr-o
caten polipeptidic.
Conform concepiei o gen o caten polipeptidic, unele proteine sunt sintetizate pe
baza informaiei genetice din dou sau mai multe gene. De exemplu; hemoglobina A de la om
este alctuit din dou catene polipeptidice a i b i este determinat de dou gene diferite. V. M.
Ingram (1957) pune n relief particularitile de structur a hemoglobinei (HbS), diferit de cea
normal (HbA), prin substituia glutaminei cu valina n poziia a 6-a a lantului ).
201
S. Benzer (1957), cercetnd mutaiile r ale fagului T4 ce paraziteaz pe E . coli, a
dovedit c mutaiile i recombinrile pot avea loc la nivel intragenic, adic la nivelul codonilor i
a nucleotizilor aparte. El propune o serie de noiuni noi, i anume:
muton cea mai mic subdiviziune a genei, echivalent dup mrime cu un
nucleotid, a crui schimbare se soldeaz cu o mutaie;
recon cea mai mic subdiviziune a genei care poate fi separat i schimbat
prin crossing-over;
cistron cea mai mic parte funcional a materialului genetic reprezentat de
ADN (sau ARN viral).
Structura genei la eucariote: W. Gilbert (1978) a propus termenii de exon (fig.10.2)
pentru denumirea fragmentelor informaionale, numrul acestora variaz de la o gen la alta
(ntre 2 i mai mult de 50) i introni pentru fragmentele noninformaionale.
Figura.10.2 Exoni i introni
202
B. Mc. Clintorck nc n anul 1940 a demonstrat fenomenul de instabilitate somatic la
porumb. Datorit acestui fenomen, pe frunze, pe tulpini, pe inflorescene, pe endospermul
boabelor apar pete de culoare. Pentru a explica fenomenul, B. Mc. Clintorck a presupus c exist
elemente de control, care au capacitatea de a circula dintr-o regiune n alta a genomului si se pot
insera n diverse locuri n genom. Aceste elemente au fost numite elemente genetice
transpozabile transpozoni.Astfel, s-a dovedit c gena este o unitate mult mai complex dect se
credea iniial.
Conform concepiei moderne:

gena constituie unitatea funcional a informaiei ereditare;
gena reprezint segmentul de ADN (sau ARN viral) format n medie din 1000-1500 de
nucleotizi dispui liniar;
n cadrul genei pot avea loc recombinri i mutaii;
exist gene structurale i reglatoare;
genele structurale codific sinteza proteinelor;
genele reglatoare controleaz i dirijeaz aciunea genelor structurale;
exist diferite mecanisme ale reglrii activitii genelor la procariote i eucariote.
Purttorii materiali ai informaiei ereditare sunt considerai cromozomii. Termenul a fost

propus n anul 1888 de ctre W. Waldeyer. Acesta a descoperit nite corpusculi cromatici n
celulele n diviziune. Cromozomii (din gr. chroma culoare, soma corp) reprezint uniti
structurale compacte, constante, alctuite din acizi nucleici i proteine, vizibili n timpul
diviziunii celulare la o tratare cu colorani bazici. Cromozomii au un rol deosebit n viaa celulei
(organismului), deoarece asigur transmiterea caracterelor la descendeni.
203
ntrebri:
a) Caracterizai gena conform concepiei clasice :
b) Cum se simbolizeaz genele?:
c) Definii cromozomul:

Definiia genei, transpozonului, cromozomului.
Concepia clasic i concepia modern a genei
Structura genei la eucariote (introni i exoni).
204
10.3. Mutaiile genetice
Noiunea de mutaie a fost introdus de Hugo de Vries, in anul 1901, pentru a defini
schimbrile ereditare brute i intmpltoare observate timp de 15 ani la lumnaric Oenothera
lamarkiana. n baza studierii variaiilor ereditare la aceast plant, Hugo de Vries a elaborat teoria
mutaionista. Conform acestei teorii mutaiile apar brusc (far fome intermediare), sunt total
ereditare, se produc n diferite direcii (pot fi utile, duntoare sau indiferente organismului). n
consecin, mutaiile pot da natere dintr-o dat la specii noi. Pe msur ce s-au intensificat
crecetrile n acest domeniu, au fost fcute corective la concepia ininiiala. E.Bauer a definit
mutaia ca fiind o varietate ereditar care nu este rezultatul unei ncruciari, iar R.P. Wagner i
H.K.Mitchell(1964) susin c mutaia reprezint orice schimbare ereditar care nu se datorete
segregrii sau unei recombinri normale a materialului genetic neschimbat. Descoperirile
geneticii moleculare au demonstrat c moleculele de AND sau ARN viral sunt constituite din
anumite secvene de nucleotide ce conin un mesaj chimic codificat pentru sinteza unei erori n
succesiunea sau n numrul nucleotidelor dintr-o gen, care se copiaz i se transmite greit. n
felul acesta, rezult alele noi sau gene mutante cu funcii i, repectiv, fenotipuri diferite
transmisibile la urmai (sunt ereditare).
Mutaiile reprezint o surs substanial de variaie, care nu numai c mbogete
populaia cu genotipuri noi, dar, n urma recombinrilor ntre ele, mresc gradul de heterozigoie
al populaiilor i sporesc capacitatea de adaptare a acestora. Procesul de mutagenez, schimbarea
materialului ereditar n urma cruia se produc mutaii, n ansamblu cu recombinarea genetic
constituie un important factor al evoluiei, deoarece reprezint materialul de baz asupra cruia
acioneaz selecia natural n vederea realizrii unor noi populai, specii, genuri etc. Existena
diverselor mutaii la plante i animale a fost observat de mult vreme, mai ales din secolul al-
XIX-lea, n legatur cu dezvoltarea fitotehniei i zootehniei. Individul care a suferit o mutaie se
numete mutant, orice modificare n dicionarul genetic i poate gsi exprimarea fenotipic,
prin apariia de caractere noi. Prin mutaie se nelege orice schimbare brusc ereditar, n
structura i funciile materialului genetic, adic a genelor i cromozomilor, care se transmit de la o
generaie la alta..
Mutaiile genice sunt denumite genomutaii sau punctiforme, cnd sunt determinate de
schimbri structurale la nivelul unei nucleotide sau cel mult a unei perechi de nucleotide din ADN.
205
Cnd schimbrile depesc o pereche de nucleotide, mutaiile sunt mari. Mutaia este un
eveniment rar, pentru c genele sunt relative stabile. nc din anul 1953, J.D.Watson i
F.C.H.Crick, odat cu descrierea structurii macromoleculei de ADN, au emis ipoteza copierii
eronate (miscopying theory) conform creia mutaia este o eroare n sinteza nucleotidelor, ce se
comite n timpul replicrii ADN.
Ipoteza Watson-Crick referitore la mecanismul molecular al mutaiilor genice consider c
printre cauzele ce duc la modificrile structurii ADN-ului pot fi urmtoarele:
Substituia (nlocuirea) unei baze azotate cu alta;
Deleia (pierderea) i adiia (inseria) uneia sau a ctorva perechi de nucleotide;
Inversia unei secvene de nucleotide din macromolecula de ADN;
Duplicaia unei perechi de nucleotide.
Substituia se poate realiza prin dou ci:
a) tranziia, cnd are loc nlocuirea unei baze cu alta din aceiai categorie (o baz purinic
nlocuiete o alt baz purinic, sau una piramidinic nlocuiete alta piramidinic). Schematic
aceste schimbri pot fi reprezentate n felul urmtor:
AG i TC;
b) transversia, cnd o baz purinic nlocuiete o baz pirimidinic sau o baz pirimidinic
nlocuiete una conform schemei urmtoate:
TG i AC
GT i GC
Asemenea modificri n structura ADN-ului au loc n urma aciunii diferenelor ageni
mutageni. Mutaiile genice modific cadrul de citire a mesajului genetic din ADN i, respectic,
modific ordinea nucleotidelor din ADN. Schimbarea cadrului de citire determin modificarea
informaiei genetice nu nsa i a codului genetic ca atare. La nivelul mutantului vor funciona
aceleai principii de codificare ale codului de triplete, numai c prin mutaie se vor schimba
codonii, rezultand codoni de acelaii sens, codoni de sens greit si codoni nonsens. Schimbarea de
baze din ADN este reflectat n schimbarea ordinii nucleotidelor din ARN, care, la randul sau, va
determina o secvena alterat de aminoacizi.
Mutaiile genice duc, fie la pierderea total sau parial a capacitii de sintez a uneia din
proteinele specifice, fie la sinteza unei proteine diferite ca propieti, din cauza nlocuirii uneia sau
206
a mai multor aminoacizi. Prin modificarea proteinelor apar noi caractere metabolice sau chiar
morfologice. Genele mutante se transmit la descendeni conform legilor mendeliene, iar raportul
de segregare este condiionat de caracterul dominant, codominant sau recesiv al genomutaiei. n
unele cazuri, modificarile la nivelul macromoleculelor de ADN nu se reflecta asupra ordinii
aminoacizilor n lanul polipeptidic din cauza codului genetic degenerat.
Principala caracteristic a mutaiilor genetice const n faptul c fenomenul se ntlnete
rar. Faptul acesta este deosebit de avantajos cel puin, din dou puncte de vedere: n primul rnd,
confer constan ereditaii, asigurnd asemnarea descendenilor cu parinii, iar n al doilea rnd,
dac inem cont c majoritatea mutaiilor sunt duntoare, rata mic a mutaiei menine la un nivel
sczut proporia indivizilor letali, prevenind moartea genetic a populaiei sau a speciei.
Specificitatea este o alta trstur, n sensul c ele afecteaz, n principiu,o singur caracteristic
ereditar. Mutaiile genice se produc att in celulele sexuale ct i n cele somatice.
Reparaia genetic
Prin reparaie genetic se nelege refacerea de la nivelul moleculei de ADN. Integritarea
materialului genetic este protejat prin mecanisme de reparare enzimatic, care minimizeaz
sau anuleaz efectele mutagenilor. Toate sistemele de reparare de la nivelul moleculelor de
ADN, se grupeaz n: mecanisme de reparare prereplicative i mecanisme de reparare
postreplicative.
Repararea prereplicativ: fenomenele reparatorii au loc naintea sintezei moleculei de
ADN, acestea fiind relativ specifice diferitelor grupe de organisme.
Repararea postreplicativ: are loc la ntuneric i implic att replicarea ct i
recombinarea catenelor de ADN. Activitatea de reparare postreplicativ, este activ atunci cnd
sunt continue, sau cnd are loc ruperea complet a structurii bicatenare a AND-ului. Prin acest
tip de reparare se refac leziunile provocate de radiaiile X, se elimin efectele secundare ale
dimerizrii, cauzat de radiaia ultraviolet, precum i de unele procese fiziologice. Dimerii apar
ca o consecina a alterri induse de radiaiile UV.
Repararea ADN prin inducerea sistemului SOS: Sistemul SOS intr n aciune atunci
cnd n molecul de ADN s-a format un numr mare de leziuni, pe care mecanismele anterioare
nu au avut capacitatea de a le repara. Reacia SOS provoac sinteza unei ADN-polimeraze
speciale, care tolereaz leziuni i permite replicarea ADN-ului modificat.
207
ntrebri:
a) Precizai caracteristicile mutaiilor :
b) Poate fi considerat mutaia factor de evoluie a speciilor ?
c) Repararea ADN prin inducerea sistemului SOS:

Definiia mutaiei genetice i rolul n evoluia speciilor.
Caracteristicile mutaiei genetice.
Tipuri de mutaii genice.
Sisteme de reparare genetic.
208
10.4. Reglajul genetic la eucariote
n celulele organismelor eucariote se afl o cantitate mare de ADN i de gene. La un

moment dat, funcioneaz numai o mic parte, n funcie de tipul celulei respective i de
condiiile de mediu. Celulele organismelor multicelulare conin acelai material genetic.
Diferenierea celular se realizeaz numai prin schimbri privind secvene de ADN, ce sunt
decodificate n proteine i nu reprezint schimbri ireversibile n macromolecula de ADN. Prin
urmare, celulele specializate din organism sintetizeaz anumite seturi de proteine.
Exist dou tipuri de baz de reglare a activitii genelor la eucariote:

1. reglajul genetic pe termen scurt, care se bazeaz pe mecanisme moleculare reversibile,
reprezentate de modificri n activitatea unor gene ce determin fluctuaii n intensitatea
de ADN, de ARN i de proteine n celule.
2. reglajul genetic pe termen lung, care este ireveribil i implic fenomene de difereniere
celular, ce are loc n cursul dezvoltrii ontogenetice, pornind de la celula ou (zigotul).
Acesta este un reglaj genetic ntiprit n memoria celulei i este ereditar i stabil.
Sinteza proteinelor nseamn exprimarea fenotipica a genelor. La eucariote ARNm este

monocistronic. Reglajul genetic al sintezei proteice n celula eucariot are un caracter
complex i se realizeaz la 5 nivele diferite, de-a lungul ntregii ci de sintez.
1. Reglajul genetic la nivel transcripional, la eucariote, ca i la procariote este nivelul cel

mai important la care se realizeaz controlul activitii genelor. Reglajul genetic
transcripional nseamn determinarea exact a unor gene transcrise din genom
(ADNARN). La eucariote, acest control transcripional este pozitiv, realizndu-se cu
ajutorul unor proteine activatoare, ce indic unde, cnd i pentru ct timp trebuie s
funcioneze gena.
2. Reglajul genetic la nivelul maturrii ARNm - se controleaz eliminarea intronilor i
asamblarea exonilor, avnd loc, un proces de reglaj genetic, rezultnd ARNm matur.
3. Reglajul genetic la nivelul migrrii ARNm n citoplasm este acela care decide ce
secvene de ARNm vor fi degradate n nucleu i care vor fi exportate n citoplasm, unde
209
se realizeaz sinteza proteic. Este vorba de enzime diferite ce opereaz n tipuri diferite
de celule, fapt care determin ce sinteze proteice caracteristice vor realiza celulele
respective.
4. Reglajul genetic la nivelul translaiei const n faptul c nu toate moleculele de ARNm
migrate n citoplasm vor fi utilizate n procesul sintezei proteice, se selecteaz anumite
molecule de ARNm ce vor fi translate.
5. Reglajul genetic la nivelul degradrii ARNm are rolul de a selecta moleculele de
ARNm matur migrate n citoplasm, care vor urma s fie degradate. ARNm-ul din cazul
genelor hemoglobinei are o mare stabilitate n timp, astfel c el servete repetat pentru
sinteza proteic.
La eucariotele superioare s-au identificat dou clase de cromatin: heterocromatina sau

cromatina condensat i eucromatina sau cromatina mai puin condensat.
Heterocromatina este inactiv n transcripia ADN, care este foarte puternic condensat i
se replic foarte trziu n faza S a ciclului celular. Ea conine gene inactive i exist dou
subclase de heterocromatin: constitutiv i facultativ.
Rolul interferenei ARN n reglarea activitii genelor

n anul 1998, cercettorii Andrew Z. Fire i Craig C. Mello au descoperit c poate exista
ARN bicatenar ce este capabil s declaneaz silenierea genelor (ARNi). Ca urmare, putem
spune c ARNi este un mecanism ce intervine n reglajul genetic la eucariote.
210
ARNi este activat cnd moleculele de ARN apar cu dubl caten n celul. Dubla caten
a ARN duce la degradarea acelor molecule de ARN-m ce prezint acelai cod genetic cu cel din
ARN bicatenar. Cnd astfel de molecule de ARN-m dispar, gena corespunztoare este sileniat
i nu poate avea loc sinteza proteic.
ARN-interferent poate fi deci un factor de sileniere a exprimrii genetice. Interferena
ARN reprezint un fenomen prezent la toate organismele superioare (plante, animale, oameni).
n urma studiilor efectuate, deasemenea s-a stabilit rolul ARN-i mpotriva infeciilor cu
virusuri ARN la plante, iar n laboratoarele specializate este utilizat acest ARN dublu catenar
pentru determinarea funciei diferitelor gene n cadrul celulei.
ntrebri:
a) Clasificai cromatina:
b) Prezentai reglajul genetic la nivel transcripional :
c) Precizai tipurile de reglaj genetic la eucariote:

Tipurile i nivelurile reglajului genetic la eucariote.
Rolul ARN i n reglarea activitii genelor.
211
ntrebarea 1
a) n concepia clasic, gena are trei caracteristici de baz:unitate funcional

(determin caracteristicile ereditare);unitate mutaional (structura chimic a genei
se schimb prin mutaie, ceea ce duce la apariia caracterului nou); Unitate de
recombinare (n cadrul procesului de crossing-over are loc un schimb de gene
corespunztoare ntre cromatidele nesurori ale cromozomilor omologi). n
concepia clasic gena stabilete ordinea aminoacizilor n molecula proteic ce
determin caracterul dat. O gen este alctuit din aproximativ 900-1500 de
nucleotizi din lanul de ADN (sau ARN viral). n anul 1941 concepia clasic
despre gen s-a completat cu ipoteza o gen o enzim,formulat de G. W.
Beadle si E. L. Tatum.
b) Genele sunt notate prin simboluri din 1-5 litere, care desemneaz succint
caracterul afectat n limbile latin sau englez. Tipul normal (slbatic) al
caracterului respectiv se noteaz cu semnul +. Genele aprute prin modificarea
genelor normale sunt numite gene mutante.
c) Purttorii materiali ai informaiei ereditare sunt considerai cromozomii.

Termenul a fost propus n anul 1888 de ctre W. Waldeyer. Acesta a descoperit
nite corpusculi cromatici n celulele n diviziune. Cromozomii (din gr. chroma
culoare, soma corp) reprezint uniti structurale compacte, constante,
alctuite din acizi nucleici i proteine, vizibili n timpul diviziunii celulare la o
tratare cu colorani bazici. Cromozomii au un rol deosebit n viaa celulei
(organismului), deoarece asigur transmiterea caracterelor la descendeni.
212
ntrebarea 2
a) a) Principala caracteristic a mutaiilor genetice const n faptul c fenomenul se

ntlnete rar. Faptul acesta este deosebit de avantajos cel puin, din dou puncte de
vedere: n primul rnd, confer constan ereditaii, asigurnd asemnarea
descendenilor cu parinii, iar n al doilea rnd, dac inem cont c majoritatea
mutaiilor sunt duntoare, rata mic a mutaiei menine la un nivel sczut
proporia indivizilor letali, prevenind moartea genetic a populaiei sau a speciei.
Specificitatea este o alta trstur, n sensul c ele afecteaz, n principiu,o singur
caracteristic ereditar. Mutaiile genice se produc att in celulele sexuale ct i n
cele somatice.
b) Procesul de mutagenez, schimbarea materialului ereditar n urma cruia se

produc mutaii, n ansamblu cu recombinarea genetic constituie un important
factor al evoluiei, deoarece reprezint materialul de baz asupra cruia acioneaz
selecia natural n vederea realizrii unor noi populai, specii, genuri etc.
Existena diverselor mutaii la plante i animale a fost observat de mult vreme,
mai ales din secolul al-XIX-lea, n legatur cu dezvoltarea fitotehniei i zootehniei.
Individul care a suferit o mutaie se numete mutant, orice modificare n
dicionarul genetic i poate gsi exprimarea fenotipic, prin apariia de caractere
noi.
c) Sistemul SOS intr n aciune atunci cnd n molecul de ADN s-a format un
numr mare de leziuni, pe care mecanismele anterioare nu au avut capacitatea de a
le repara. Reacia SOS provoac sinteza unei ADN-polimeraze speciale, care
tolereaz leziuni i permite replicarea ADN-ului modificat.
213
ntrebarea 3
a) La eucariotele superioare s-au identificat dou clase de cromatin:

heterocromatina sau cromatina condensat i eucromatina sau cromatina mai puin
condensat. Heterocromatina este inactiv n transcripia ADN, care este foarte
puternic condensat i se replic foarte trziu n faza S a ciclului celular. Ea
conine gene inactive i exist dou subclase de heterocromatin: constitutiv i
facultativ.
b) La eucariote, ca i la procariote este nivelul cel mai important la care se

realizeaz controlul activitii genelor. Reglajul genetic transcripional nseamn
determinarea exact a unor gene transcrise din genom (ADNARN). La
eucariote, acest control transcripional este pozitiv, realizndu-se cu ajutorul unor
proteine activatoare, ce indic unde, cnd i pentru ct timp trebuie s funcioneze
gena.
c) Exist dou tipuri de baz de reglare a activitii genelor la eucariote:

- reglajul genetic pe termen scurt, care se bazeaz pe mecanisme moleculare
reversibile, reprezentate de modificri n activitatea unor gene ce determin
fluctuaii n intensitatea de ADN, de ARN i de proteine n celule.
- reglajul genetic pe termen lung, care este ireveribil i implic fenomene de
difereniere celular, ce are loc n cursul dezvoltrii ontogenetice, pornind de la
celula ou (zigotul). Acesta este un reglaj genetic ntiprit n memoria celulei i
este ereditar i stabil.
214
INSTRUCIUNI
ntrebare.
1) Precizai caracteristicile genei conform concepiei moderne 2p
2) Enumerai modificrile la nivelul molecui ADN 2p
3) Rolul interferenei ARN n reglarea activitii genelor 2p
4) Enumerai nivelurile de reglaj genetic de-a lungul cii sintetice- 2p
5) Denumii modificarea prin care adenina este nlocuit de citozin 1p
1. Casian H., 2006, Genetica suport pentru curs, Ed. Printech

2. Szilagyi L., 2007, Genetic, Ed. Amanda Edit
3. Nicolae, I., Rduoiu, S., Butnaru, G.,Nicolae, F., 2000, Genetica- principii de baz
ale ereditii, Vol. II, Ed. Bioterra, Bucureti.
215
TEHNICI DE GENETIC MOLECULAR CU APLICAII N AMELIORAREA

PLANTELOR
CUPRINS
11.2. Tehnica PCR 217
11.3. Markeri moleculari: RAPD, AFLP, SSR, RFLP 225

Defineti metoda Polymerase Chain Reaction is
precizezi etapele metodei de amplificare enzimatic a
unei secvene de ADN.
Identifici diferitele variante tehnice i aplicaii ale
tehnologiei PCR.
Cunoati tipurile de markeri i utilizarea lor n
ameliorarea plantelor.
216
11.2. Tehnica PCR (Polymerase Chain Reaction)
Reacia PCR (Polymerase Chain Reaction = Reacie de Polimerizare n Lan) este o

metod de amplificare enzimatic in vitro a unei anumite secvene de ADN. n prezent a fost
dezvoltat o adevarat tehnologie PCR care este folosit ntr-o varietate foarte mare de domenii:
biologie molecular, tiinele mediului, criminalistic, tiine medicale, biotehnologie,
microbiologie, industria alimentar, epidemiologie etc.
Din punct de vedere chimic, reacia PCR este constituit din cicluri succesive de replicare
ADN in vitro, folosind 2 primeri oligonucleotidici ce hibridizeaz cu cele 2 catene ale secvenei
originale (folosit ca matri n replicare). Diferena esenial ntre o asemenea reacie de
replicare i un proces de replicare ADN in vivo, l reprezint faptul c n reacia PCR etapa de
desfacere a dublului helix matri i, respectiv, cea de ataare a primerilor, nu sunt realizate
enzimatic, ci prin parcurgerea unor trepte de temperatur, iar singura enzim folosit n reacie
este o ADN polimeraz ADN-dependent (cu funcie de replicaz).
O reacie PCR este format din n cicluri (ntre 25 i 40), n fiecare ciclu fiind parcurse 3
etape principale: denaturarea termic a matriei (deci, desfacerea dublului helix ADN), ataarea
primerilor i polimerizarea propriu-zis. La terminarea unui ciclu de replicare in vitro (de
amplificare), cantitatea de ADN rezultat este dubl fa de matri. Mai mult, produsele
rezultate ntr-un ciclu sunt folosite ca matri n ciclul urmator, astfel nct numrul final de copii
ADN este de 2n x y, unde y = numrul iniial de copii, iar n = numrul de cicluri de replicare.
Este de subliniat faptul c moleculele acumulate exponenial reprezint copii ale matriei care la
capete au ncorporai primerii.
n concluzie, reacia PCR este o metod prin care se obin cantiti mari dintr-o anumit
secven ADN. Aceste molecule pot fi ulterior manipulate/analizate fr a fi necesar o
prealabil clonare molecular a acestora.
11.2.1. Componentele reaciei

a) Matria ADN. De cele mai multe ori, ntr-o reacie PCR se introduc molecule de ADN
d.c. linear/circular ce include secvena de amplificat.
Puritatea ADN introdus ca matri reprezint un parametru important pentru succesul
unei reacii PCR. De exemplu, cantiti mari de ARN dintr-un extract ADN pot chelata ionii de
217
Mg++, determinnd astfel o activitate sczut a ADN polimerazei. Pe de alt parte, o serie de
contaminani din extractul ADN pot inhiba aciunea ADN polimerazei.
Cantitatea de matri ADN introdus ntr-o reacie PCR influeneaz puternic
performana reaciei.
b) Primerii oligonucleotidici. n general, dimensiunea primerilor folosii n reaciile PCR
este cuprins ntre 15 i 30 bp i, de obicei, sunt complementari cu capetele 5 i, respectiv, 3 ale
regiunii ce urmeaz a fi amplificat. Se recomand ca primerii s aib un procent molar de
guanin + citozin (% mol GC) cuprins ntre 40 60% i s aib o distribuie echilibrat a
domeniilor bogate n A/T i G/C. Este recomandabil ca cei 2 primeri s aib valori Tm care s
permit temperaturi de ataare ntre 55 i 65oC (pentru specificitate maxim se folosesc
temperaturi de 62-65oC). Pe de alt parte, este ideal ca cei 2 primeri s aib valori Tm identice
sau foarte apropiate i s nu prezinte secvene cu complementaritate intracatenar (i care, deci,
s determine structuri secundare interne). Totodat, pentru a se evita dimerizarea primerilor, este
necesar ca primerii s nu fie complementari unul cu celalalt. n general, concentraiile optime ale
primerilor ntr-o reacie PCR sunt cuprinse ntre 0.1 i 0.6 M. Intr-o reacie PCR, un parametru
important l repezint temperatura de ataare a primerilor la matria ADN (primer annealing
temperature). Astfel, n cazul primerilor cu valori ridicate de Tm poate fi crescut temperatura
de ataare a primerilor. Acest lucru conduce la minimizarea atarilor nespecifice, la reducerea
cantitii de dimeri de primeri, precum i la creterea cantitii de produs PCR corect.
c) ADN polimeraza termostabil. n prezent n toate reaciile de tip PCR se introduc
ADN polimeraze termostabile. Variantele naturale ale unor asemnea enzime au fost izolate din
microorganisme termofile, care posed echipamente enzimatice cu temperaturi optime ridicate
(mai mari de 70oC) i care sunt capabile s desfoare activitile specifice i dup treceri peste
temperaturi extreme (n jur de 100oC). n marea majoritate a cazurilor, pornind de la asemenea
variante naturale, ADN polimeraze termostabile au fost manipulate genetic (cu obinerea unor
variante ameliorate) i clonate n tulpini de E.coli (microorganism ce este mult mai uor de
crescut i manipulat dect bacteriile termofile).
n majoritatea experimentelor, cantitatea optim de ADN polimeraz termostabil (sau de
amestec de ADN polimeraze) este cuprin ntre 0.5 i 0.25 U / 50 l volum de reacie.
218
11.2.2. Treptele de temperatur ale unei racii PCR standard
Denaturarea iniial:
Pentru ca o reacie PCR s se desfoare eficient, este foarte important ca
moleculele ADN matri s fie denaturate iniial complet. Acest lucru poate fi realizat prin
nclzirea iniial amestecului de reacie 2 min la 94-95 grade C.
Treapta de denaturare din cadrul fiecrui ciclu:
De obicei, este suficient o denaturare de 20-30 sec la 94-95 grade C, dar aceasta
trebuie adaptat funcie de termocycler i de tuburile folosite (de ex., dac se lucreaz n tuburi
de 500 l sunt necesari timpi mai lungi dect dac se lucreaz n tuburi de 200 l). Totodat,
pentru matrie bogate n GC se recomand folosirea unor timpi de denaturare mai lungi.
Ataarea primerilor:
n marea majoritate a experimentelor, temperatura de ataare a primerilor trebuie
determinat i optimizat empiric. Alegerea acestei temperaturi reprezint unul din factorii cei
mai critici pentru asigurarea unei nalte specificiti a reaciei PCR. Dac temperatura de ataare
este mult prea nalt, nu are loc ataarea primerilor, iar dac temperatura este prea sczut, atunci
crete probabilitatea atarilor nespecifice.
Polimerizarea propriu-zis:
Taq ADN pol polimerizeaz aproximativ 60 baze per secund la 72 grade C. n
fiecare ciclu, o perioad de polimerizare de 45s este suficient pentru amplificarea unor
fragmente de pn la 1 kbp. Pentru amplificarea unor fragmente mai mari de 1 kbp, timpul se
calculeaz n multiplii de 45s, urmat de ajustri pentru diverse matrie.
Pentru a obine o cantitate ct mai mare de amplicon, se poate varia timpul de
polimerizare, astfel: pentru primele 10 cicluri se folosete un timp constant de polimerizare (de
ex. 45s pentru 1 kbp), iar pentru urmtoarele 20 de cicluri se crete timpul de polimerizare cu 2-
5s per ciclu (de ex. 50s pentru ciclul 11, 55s pentru ciclul 12 etc). O asemenea mrire progresiv
a timpului de polimerizare ofer enzimei mai mult timp pentru polimerizare, pentru c pe msur
ce reacia PCR avanseaz, n amestecul de reacie se gsete din ce n ce mai mult matri i din
ce n ce mai puin enzim activ (randamentul enzimei scade datorit expunerii prelungite la
temperaturi nalte).
219
Numrul de cicluri :
ntr-o reacie PCR obinuit, mai puin de 10 molecule de matri pot fi
amplificate n mai puin de 40 de cicluri, obinndu-se un produs (amplicon) detectabil n
electroforez n gel de agaroz. La o cretere mult prea mare a numrului de cicluri, se pot
acumula produi de reacie nespecifici.
Polimerizarea (extensia) final:
n multe reacii, dup ultimul ciclu de amplificare, tuburile de reacie se in 5-15
min la 72oC pentru a realiza polimerizarea complet a produilor pariali, precum i renaturarea
moleculelor monocatenare.
11.2.3. Variante tehnice i aplicaii ale tehnologiei PCR
Marele avantaj al tehnicilor PCR l reprezint faptul c permite obinerea unei cantiti
mari dintr-o anumit secven ADN, fr a necesita clonarea acesteia n prealabil ntr-o molecul
de tip vector. Pe de alt parte, tehnologia PCR a revoluionat i implicarea geneticii moleculare
n domenii n care se apeleaz la cantiti foarte mici de ADN. Asemenea situaii se ntlnesc n:
diagnosticul unor boli monogenice, precum i detectarea de noi tipuri de mutaii
n gene importante n anumite boli;
diagnosticul unor infecii umane: permite detectarea particulelor infecioase
bacteriene i virale chiar aflate ntr-o proporie mic, chiar pentru specii ce se
cultiv dificil in vitro, chiar pentru patogeni cu variabilitate antigenic mare, i
chiar pentru patogeni ce au perioad mare de laten; astfel, pot fi identificai
indivizii umani pozitivi nainte de seroconversie;
studii privind mecanismele genetice ce acompaniaz procesele maligne
(detectarea secvenei i esutului n care se exprim anumite oncogene n diverse
procese maligne);
studii de taxonomie, sistematic i filogenie molecular: obinerea rapid a unei
cantiti mari din secvene ADN cu valoare taxonomic i/sau filogenetic;
220
biologia populaiilor, inclusiv la organisme mici: tehnologia PCR permite
secvenierea rapid a unor molecule de ADN de la foarte muli indivizi, fr a
necesita n prealabil clonarea acestora;
studii de antropologie: tehnica PCR permite n prezent recuperarea i analiza unor
secvene ADN din fosile;
medicin legal: cu ajutorul reaciilor PCR pot fi n prezent analizate la nivel
molecular o serie ntreag de probe biologice.
nafar de toate aceste aplicaii directe ale tehnologiei PCR, pornind de la reacia iniial
de amplificare, au fost imaginate o serie ntreag de variante tehnice ce permit abordarea unor
manipulri ct mai corecte a moleculelor de acizi nucleici.
1. Obinerea unor cantiti suficiente dintr-o anumit secven
Cu ajutorul tehnologiei PCR se pot obine cantiti suficiente dintr-o anumit secven
ADN, astfel nct s poat fi folosit n diverse manipulri, inclusiv pentru secveniere sau
experimente de clonare.
2. Obinerea de sonde ADN/ARN marcate
Foarte multe tehnici de obinere de sonde ADN/ARN folosesc variante de reacii PCR.
Astfel, ntr-o prim variant, se folosesc primeri marcai (n sistem radioactiv sau neradioactiv de
marcare) i dNTP nemarcate. Ampliconii obinui ntr-o asemenea reacie sunt molecule dublu-
catenare marcate la capete (primerii unei reacii PCR intr n structura produilor de reacie).
ntr-o alt variant tehnic, n reacia PCR se introduc att primeri marcai, ct i dNTP
marcate. Ampliconii obinui vor fi reprezentai de molecule marcate pe toat lungimea.
n ambele cazuri, ampliconii rezultai sunt denaturai termic, obinndu-se n final
sondele monocatenare utilizabile n reaciile de hibridizare molecular.
3. PCR n mutageneza situs-specific
Pornind de la faptul ca primerii folosii ntr-o reacie PCR sunt inclui n produsele PCR
(ampliconi), au fost dezvoltate o serie ntreag de variante tehnice ale acestei reacii. Astfel, n
experimentele de mutagenez situs-specific, modificrile dorite pot fi introduse n ampliconi pe
calea primerilor, fie c este vorba de inserii sau de deleii.
n toate aceste cazuri se utilizeaz o tehnologie PCR n care reacia de amplificare este
mprit n 2 reacii PCR separate n care sunt amplificate cele 2 secvene ADN aflate de o parte
i de alta a situsului de modificat. n aceste 2 etape se folosesc perechi de primeri constituite
221
dintr-un primer extern (pentru captul moleculei ADN iniiale) i un primer intern (primerii
interni sunt complementari situsului de modificat i conin n secven modificarea dorit). Prin
folosirea unor asemenea primeri, ampliconii rezultai conin deja modificarea dorit, precum i o
zon de complementaritate inter-ampliconi.
Dup aceast etap se realizeaz ndepartarea primerilor interni, amestecarea celor 2
produse PCR, denaturarea termic a moleculelor urmat de renaturarea acestora n condiii de
stringen. Se adaug primeri exteriori i se realizeaz o noua reacie PCR, al crei rezultat va fi
reprezentat de molecule ADN identice cu matria initial, coninnd ns i modificarea dorit.
Spre deosebire de tehnicile clasice de mutagenez, i chiar de experimentele de
mutagenez cu ajutorul transposonilor, asemenea variante tehnice de PCR permit o rezoluie i o
acuratee mult mai mare n obinerea de molecule ADN modificate. n mare majoritate,
aplicaiile practice vizeaz analiza corelaiilor dintre secvena de nucleotide a unor molecule
ADN i realizarea anumitor funcii.
4. PCR n obinerea de molecule ADN recombinate
Un alt set de studii i propun analiza funciilor de promotor a unor secvene ADN, sau
chiar obinerea de molecule ADN recombinate cu rat nalt de transcriere. n acest scop, se
folosete o schem de manipulare genetic similar celei de mai sus. Astfel, se realizeaz 2
reacii PCR separate n care sunt amplificate secvena potenial promotor i, respectiv, secvena
codificatoare. n ambele reacii PCR se utilizeaz perechi de primeri constituite dintr-un primer
extern i un primer intern (n acest caz, primerii interni conin i o poriune complementar
celeilalte molecule). Etapele urmtoare sunt similare: ampliconii rezultai n aceste 2 reacii PCR
se amestec, se denatureaz i se renatureaz n condiii de stringen. n aceast a treia reacie
PCR se introduc doar primeri externi i se obin molecule ADN recombinate, formate din
secvena promotor i din secvena codificatoare.
5. ARN PCR
O serie ntreag de experimente vizeaz obinerea de molecule de ADNc (complementar
cu anumite molecule ARN). O variant tehnic utilizeaz reaciile de revers-transcriere, n timp
ce o alt variant se bazeaz pe reacii PCR . Astfel, dupa denaturarea structurilor secundare ale
moleculelor ARN, se ataeaz un primer complementar capului 3 al moleculei ARN i are loc
sinteza primei catene de ADNc. n aceast reacie se folosete o ADN polimeraz ARN-
dependent (revers-transcriptaz), de tipul AMV-RT (Avian Mieloblastosis Virus Revers-
222
Transcriptase), MLV-RT (Murine Leukaemia Virus Revers-Transcriptase), rTth(recombinant
Thermus thermophilus DNA polymerase). Hibridul ARN:ADN obinut n aceast reacie de
revers-transcriere este supus unei reacii de distrugere a catenei ARN cu RNaza H, dup care la
catena ADN rmas este ataat un primer complementar cu capul 3 al acesteia. Dup sinteza
celei de-a doua catene ADN, moleculele sunt introduse ntr-o reacie PCR obinuit la sfritul
creia sunt obinute moleculele de ADNc (complementar cu moleculele ARN de la care s-a
plecat). Avantajul unei asemenea variante tehnice l reprezint faptul c se obine o cantitate
mare a secvenelor ADNc.
PCR invers: n foarte multe experimente este necesar amplificarea unor molecule de ADN cu
secven necunoscut. Un asemenea caz este i cel n care se studiaz situsurile n care se
insereaz o serie de transposoni sau genomul unor virusuri . In aceast situaie se secioneaz cu
endonucleaze de restricie o molecul ADN ce cuprinde secvena cunoscut (transposon, genom
viral) ncadrat de secvene necunoscute (aparinnd genomului gazdei). Aceast molecul este
apoi circularizat i introdus ntr-o reacie PCR n care se folosesc primeri complementari cu
capetele secvenei cunoscute. Ampliconul rezultat este reprezentat de secvena necunoscut.
6. PCR in situ
Una din limitrile tehnicii PCR o reprezint necesitatea de a extrage i purifica matria
(ADN sau ARN) nainte de amplificare. Varianta tehnic PCR in situ combin o reacie PCR cu
o hibridizare molecular in situ. Astfel, reacia PCR se realizeaz n celule intacte i este apoi
detectat prin hibridizare in situ (ntreaga reacie, att PCR, ct i hibridizarea, se realizeaz pe
esut mparafinat i plasat pe lama de microscop). Printr-o asemenea tehnica se poate identifica
foarte exact care celule poseda o anumita secven ADN, sau care exprima o anumita gena. Pe de
alta parte, se reduce foarte mult riscul contaminarii produselor PCR cu alte secvene ADN.
223
ntrebri:
a) Care este numrul de cicluri caracteristic unei reacii PCR?
b) Caracteristicile treptei de denaturare n cadrul unui ciclu:
c) Indicai o aplicaie direct a reaciei PCR:

Componentele reaciei PCR
Treptele de temperatur ale reaciei PCR standard.
Aplicaiile i variantele reaciei PCR
224
11.3. Markeri moleculari: RAPD, AFLP, SSR, RFLP
Pentru conservarea eficient a resurselor genetice vegetale este necesar stabilirea ct mai exact
a variabilitii genetice a acestora, ce poate fi determinat la dou nivele, fenotipic i genotipic.
Variabilitatea fenotipic se bazeaz pe analiza morfologiei plantelor, cea genetic pe markerii
moleculari.
Markerii genetici sunt de trei tipuri: markeri morfologici, markeri proteici i markeri
moleculari. (Vicente i colab, 2004)
Markerii morfologici sunt uor de utilizat, nu necesit echipamente costisitoare,
putndu-se efectua o evaluare rapid a fenotipului cu ajutorul lor. Ca dezavantaje, prezint
urmtoarele: se gsesc n numr limitat, sunt influenai de condiiile de mediu i de stadiul de
dezvoltare al plantei i necesit evaluarea de ctre experi n cunoaterea speciei respective.
Markerii biochimici (proteici) se bazeaz pe proprietatea proteinelor de a fi separate
n urma electroforezei. Tipuri de markeri biochimici sunt proteinele rezultate n urma stocrii
seminelor, izoenzimele.
Markerii ADN (moleculari) evideniaz polimorfismul la nivelul ADN-ului nuclear
i citoplasmatic. Markerii moleculari nu sunt influenai de condiiile de mediu, fiind o msur
obiectiv a variabilitii, exist n numr nelimitat, acoperind ntregul genom, dar necesit
echipamente complexe de analiz. Markerii ideali ar fi caracterizai de urmtoarele proprieti:
polimorfism ridicat, reproductibilitate mare, codominan, distribuie uniform n genom,
distinctivitate (s evidenieze diferenele ntre indivizi nrudii), neinfluenai de condiiile de
mediu, neutri (alela prezent la locusul markerului s fie independent, fr efect asupra
presiunii de selecie aplicat individului), necostisitori, uor de utilizat. (Vicente i colab, 2004).
Markerii RAPD (Random amplified polymorphic DNA - polimorfisme de ADN
amplificate aleator) sunt rezultai prin amplificarea PCR a unor segmente necunoscute de ADN
genomic cu ajutorul unei amorse decamere aleatoare (Williams i colab., 1990). Produii de
amplificare sunt migrai ntr-un gel de agaroz i vizualizai prin colorare cu bromur de etidiu
(fluorescent n lumin ultraviolet) sau azotat de argint. Diversitatea genetic i relaiile de
nrudire dintre indivizi se evalueaz pe baza prezenei sau absenei benzilor, rezultnd o
amprent genetic specific.
225
n urma amplificrii cu amorsa decamer aleatoare rezult un numr mare de fragmente
de dimensiuni variabile (300-2000 pb), ns acestea pot prezenta problema co-migrrii
(fragmentele cu aceeai greutate molecular pot avea structuri diferite, astfel presupunerea lipsei
polimorfismului pentru banda respectiv fiind eronat). Fiind o metod simpl, necostisitoare i
care nu necesit cunoaterea secvenei de ADN int, RAPD se utilizeaz i astzi n analizele
genetice, dei markerii sunt dominani iar reproductibilitatea ntre laboratoare e sczut. (Karp,
A. i colab, 1997).
Avantajele analizei RAPD constau n:
relevarea unui numr relativ mare de polimorfisme;
posibilitatea automatizrii analizei;
costuri sczute;
utilizarea metodelor de vizualizare prin fluorescen n locul celor bazate pe
radioactivitate;
analizarea unui numr mare de probe ntr-o singur zi;
nu implic un grad foarte ridicat de pregtire al personalului din laborator.
Dezavantaje:
Comportamentul dominant al markerilor RAPD. De exemplu, n genetica populaiilor
frecvena alelelor nu poate fi exprimat din moment ce homozigoii (AA) nu pot fi deosebii de
heterozigoi (Aa). Acelai lucru este valabil pentru studiile de cartare genic n care se analizeaz
generaiile de segregare F1 sau F2. Din moment ce indivizii AA nu pot fi deosebii de cei Aa, o
informaia valoroas se pierde.
Sensibilitatea mrit a tehnicii. n general s-a ajuns la un consens n ceea ce privete
reproductibilitatea analizei RAPD, acceptndu-se c aceasta este mare n cadrul aceluiai
laborator. Rezultatele devin neconvingtoare atunci cnd datele trebuie transferate de la un
laborator la altul. Din aceast cauz trebuie acordat o deosebit atenie standardizrii analizei
ntre colaboratori aflai n laboratoare diferite.
Markerii AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism)-Polimorfisme de
lungime ale fragmentelor amplificate
AFLP reprezint o tehnic elaborat de VOS i colab. (1995) i reprezint o combinaie
ntre metoda RFLP i PCR. Tehnica const n digestia ADNului cu enzime de restricie, iar la
capetele fragmentelor rezultate se ataeaz secvene dublu catenare specifice (adapters) cu
226
ajutorul ADN ligazelor. Aceste secvee mpreun cu secvenele alturate, reprezentnd situsul de
restricie al enzime, vor constitui locurile de fixare ale primerilor n vederea amplificrii prin
PCR. La capetele 3 ale primerilor se vor aduga anumite nucleotide care vor permite
amplificarea selectiv unei categorii de secvene din setul de fragmente de restricie. Nu vor fi
amplificate dect acele fragmente de restricie care au nucleotidele ce flancheaz situsul de
restricie complementare cu nucleotidele selective ale primerilor. Separarea produilor de
amplificare se realizeaz prin electroforez n geluri de poliacrilamid i evideniere prin
autoradiografie.
Mai recent se utilizeaz i marcajul cu fluorescen i utilizarea secveniatoarelor
automate. Fragmentele de restricie care urmeaz s fie amplificate se obin cu ajutorul a dou
enzime de restricie, EcoRI i MseI (la una dintre ele situsul de restricie apare cu o frecven
redus n cadrul genomului - rare cutter, la cealalt frecvena este mare frequent cutter).
Prin metoda AFLP are loc amplificarea predominant a acelor fragmente de restricie care au la
unul din capete o secven rezultat ca urmare a fragmentrii cu o enzim frequent cutter i la
cellalt capt cu o enzim rare cutter . Numrul fragmentelor amplificate poate fi controlat
prin alegerea enzimei i prin numrul bazelor care se adaug la captul trei al primerului. Cu o
singur combinaie de enzime (una care taie la ase baze iar cealalt la patru baze) este posibil
amplificarea a 100.000 de fragmente din care se pot selecta pentru fiecare reacie AFLP ntre 50
i 100 de fragmente. Ca i n cazul markerilor RAPD fragmentele de interes pot fi extirpate din
gel, purificate, clonate, secveniate i transformate n markeri SCAR cu ajutorul unor primeri
specifici. Spre deosebire de metoda RAPD metoda AFLP are un grad mai ridicat de
reproductibilitate, iar rezoluia fragmentelor este mult mai bun. Cel mai mare avantaj al metodei
este sensibilitatea cu care poate depista polimorfismele ADN. La via de vie, metoda AFLP au
fost aplicat n special pentru identificarea unor clone i a diferenelor genetice existente la nivel
molecular ntre acestea, avnd n vedere c un aspect important n producia i calitatea vinului l
reprezint caracterizarea clonelor.
Astfel, BELLIN i colab. (2000), au utilizat 50 de perechi de primeri cu scopul de a
compara diferite clone de Pinot. VIGNANI i colab. (1996) i SENSI i colab. (1996) au aplicat
metoda AFLP i SSR pentru stabilirea relaiilor genetice ntre clonele de Sangiovese. Rezultatele
ncurajatoare obinute au dus la concluzia c tehnicile bazate pe aceti markeri moleculari pot fi
utilizate pentru diferenierea i/sau identificarea unor clone. De asemenea, se remarc i studiile
227
intreprinse de IMAZIO i colab. (2002), asupra a 24 de clone de Traminer de provenien
diferit. Ei au analizat comparativ clonele de Traminer utiliznd tehnica SSR (Simple Sequence
Repeats), AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism) i MSAP (Methyl-sensitive
Amplified Length Polymorphsim). Rezultatele obinute arat c cea mai adecvat tehnic pentru
evidenierea polimorfismului ntre clone s-a dovedit a fi tehnica AFLP. Tehnica MSAP a fost
utilizat pentru evaluarea diferenelor calitative privind gradul de metilare a ADN-ului ntre
clonele analizate. Cercetrile lor sugereaz c diferenele morfologice ntre clone sunt probabil,
datorate efectului sinergic al modificrilor genetice i epigenetice. Variabilitatea genetic clonal
la soiul Pinot noir a fost pus n eviden de asemenea, tot prin tehnica AFLP, constatndu-se
faptul c n acest caz exist variabilitate att intra ct i interclonal (BLAICH i colab., 2007).
Tehnica AFLP fiind relativ ieftin, iar rezultatele obinute avnd reproductibilitate ntre diferite
laboratoare de analiz molecular constituie un instrument valoros pentru identificarea i analiza
unor clone, facilitnd eforturile de patentare clonal la via de vie.
Markerii RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)
Primele ncercri de diagnosticare a variabilitii somaclonale pe baza markerilor genetici
au fost fcute prin metodologia RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism), creia
autorul (POTTER, 1991) i-a modificat scopul iniial, de urmrire a distribuiei polimorfice a
alelelor ntr-o populaie segregat, pentru a pune n eviden mutaiile ntr-o populaie clonat.
Ulterior, detectarea variabilitii somaclonale a nceput s fie fcut i pe baza analizelor RAPD.
Aceast metod prezint numeroase avantaje comparativ cu RFLP: tehnica este mai simpl, mult
mai rapid, necesit o cantitate mic de material iniial, esutul poate fi prelevat direct in vitro,
absena radioactivitii i repetabilitatea destul de bun a analizelor RAPD.
Markerii SSR (Simple Sequence Repeats)
Secvenele microsatelit constituie repetiii n tandem ale unor secvene di, tri sau tetra
nucleotidice. Cele mai frecvente repetiii sunt cele dinucleotidice, cum ar fi (CA)n, (CT)n,
(AT)n. La plantele superioare exist o secven microsatelit nucleotidic, care se repet dup 30-
100 kb, cea mai frecvent fiind secvena (AT)n (NYBOM i colab., 1989, 1990; HOEPFNER i
colab., 1993; BOTTA i colab., 1995).
Polimorfismul microsateliilor este dat de numrul de secvene nucleotidice care se
repet. n msura n care se cunoate ordinea nucelotidelor la secvenele nvecinate
microsateliilor, se pot concepe primeri specifici, care vor permite amplificarea fragmentelor de
228
ADN, ce nglobeaz microsateliii. Lungimea acestor fragmente se determin apoi prin migrare
n gel de poliacrilamid. Variabilitatea markerilor microsatelii se datoreaz diferenelor de
lungime a fragmentelor de AND amplificate. n cazul secvenelor automatizate, primerii specifici
fiecrei secvene microsatelit sunt marcai cu o substan fluorescent, profilul benzilor fiind citit
cu ajutorul unui fascicul de laser, care va depista fiecare produs de amplificare n funcie de
substana fluorescent cu care a fost marcat.
Markerii microsatelii au fost introdui mai recent pentru identificarea viei de vie.
THOMAS i SCOTT (1993), citai de ULANOVSKY i colab. (2001) au reuit s caracterizez
20 de varieti de vi de vie utiliznd markeri microsatelii. Ei au propus utilizarea
microsateliilor pentru stabilirea unei baze de date internaionale referitoare la descrierea
varietilor de vi de vie, datorit nivelului mare de polimorfism, a codominanei, simplicitii i
repetabilitii analizelor moleculare SSR. BOTTA i colab. (1995), citai de ULANOVSCY i
colab. (2001), au dovedit c markerii microsatelii posed o buna capacitate pentru identificarea
varietilor, dar nu i a clonelor de vi de vie, concluzie la care au subscris i SILVESTRONI i
colab. (1997) care au analizat la nivel molecular clone din cultivarele Sangiovese i Fortana.
SEFC i colab. (1998) utiliznd 10 loci microsatelitari au obinut diferite benzi paterne pentru
fiecare dintre cele 60 de varieti de vi de vie din colecia de germoplasm analizat.
LOUREIRO i colab. (1998), au utilizat de asemenea, tehnica SSR pentru identificarea
varietii Albario. HERRERA i colab. (2002) au folosit amprentele ADN generate cu ajutorul
tehnicilor RAPD i ISSR-PCR (Inter Simple Sequence Repeat Polymerase Chain Reaction)
pentru a compara patru cultivare de Vitis vinifera folosite pe scar larg n Chile, respectiv
Cabernet Sauvignon, Cabernet Franc, Merlot i Carmenere. Referina extern a fost constituit
din material vegetal provenit din Frana. Cele dou tehnici au evideniat diferene ntre
cultivarele studiate, metoda ISSR avnd o putere de difereniere mai mare dect RAPD, ceea ce
sugereaz utilizarea tehnicii ISSR-PCR atunci cnd se lucreaz cu numr mare de cultivare.
Astfel, a fost observat variabilitate ntre clonele de Merlot, clona original din Chile i
proveniena din Frana, rezultatele sugernd c cele dou clone reprezint genotipuri diferite. n
schimb, pentru celelalte cultivare, cele dou tehnici demonstreaz uniformitatea populaiilor din
Chile.
Tehnica SSR i AFLP a fost utilizat n amprentarea genetic a unor varieti de vi de
vie, pentru rezolvarea cazurilor de omonimie i sinonimie, precum i pentru identificarea
229
genotipurilor parentale la unele varieti remarcabile, cum este de exemplu soiul Cabernet
Sauvignon (BOWERS, MEREDITH, 1997).ntr-un alt studiu AKKAK i colab. (2005), au
analizat diversitatea genetic a unor soiuri i varieti de vi de vie autohtone provenite din
bazinul Mrii Mediterane si Algeria, folosind 12 markeri SSR. Dintre cele 60 de cultivare
analizate au fost identificate 34 de genotipuri diferite, ceea ce arat faptul c tehnica SSR poate fi
utilizat cu succes i n studiul relaiilor intraspecifice la aceast specie.
Tehnicile RAPD, AFLP i SSR au fost utilizate cu succes i n studiile de cartare genetic
la via de vie. Astfel, n anul 2002, THIS i colab. s-au preocupat de ntocmirea unei hri
genetice de referin n cazul descendenilor obinui n cazul ncrucirii dintre soiurile Syrah x
Grenache. ntocmirea hrii genetice s-a bazat pe utilizarea markerilor microsatelii polimorfi
VNI i VMC. Hrile genetice ntocmite pe baza markerilor SSR sunt extrem de interesante,
deoarece permit evidenierea grupelor de linkage la nivelul unor combinaii hibride.
De asemenea, markerii SSR VMC au fost testai att n cazul unor soiuri de Vitis vinifera,
ct i Vitis riparia. Aproximativ 80% dintre locusurile identificate cu ajutorul markerilor SSR la
Vitis vinifera fiind reproductibile i la Vitis riparia. Aceti markeri sunt interesani pentru studiile
filogenetice la unele specii nrudite.
Perfecionarea metodelor de analiz a ADN-ului, cum ar fi RAPD, AFLP i SSR au
deschis noi posibiliti de caracterizare i comparare a genotipurilor, independent de fenotip i,
respectiv, de exprimarea genelor n funcie de condiiile de mediu. Utilizarea tehnicilor de
analiz bazate pe PCR au permis detectarea polimorfismului ADN n loci dispui randomizat
(RAPD, AFLP) sau specific (SSR) n genom. Utilizarea markerilor ADN a crescut enorm
potenialul pentru caracterizarea soiurilor cultivate i a descendenilor acestora.
Selecia asistat de markeri moleculari
Pe lng interesul lor fundamental markerii moleculari prezint importan deosebit n

domeniul seleciei.n ameliorarea convenional, se utilizeaz selecia bazat pe fenotip sau pe
markerii morfologici. O astfel de selecie este de multe ori mai puin eficient datorit numrului
de gene care controleaz un anumit caracter, a gradului n care mediul afecteaz expresia acestor
gene.
230
Selecia asistat de markeri moleculari (MAS) este o metod de selecie indirect care
presupune selecia plantelor purttoare a regiunilor care sunt implicate n expresia caracterelor de
interes (plante rezistente) prin markerii moleculari (Landjeva i colab., 2007). n prezent selecia
asistat de marker moleculari este axat pe:
1. selecia caracterelor cu importan economic, pentru care selecia bazat numai pe fenotip
este dificil sau necesit costuri ridicate
2. selecia caraterelor cantitative, pentru care selecia bazat pe fenotip este dificil
3. piramidarea genelor de rezisten.
Selecia asistat de markeri moleculari este considerat o metod foarte util n
ameliorarea pentru rezistena la boli a speciilor cultivate deoarece:
Identificarea genotipului de rezisten prin testarea n cmp este costisitoare, necesit
timp ndelungat i este foarte mult influenat de condiiile de mediu. Cu ajutorul
markerilor se elimin influena mediului n selecie.
Selecia se poate realiza fr a recurge la teste de inoculare, permind astfel evitarea
erorilor asociate cu utilizarea acestor proceduri, fiind posibil ameliorarea rezistenei n
arealuri unde patogenul nu exist.
Schema de selecie este accelerat ntruct selecionerii pot conchide prezena genei
prin prezena markerului naintea expresiei fenotipice.
Markeri linkai cu diferite gene de rezisten ofer posibilitatea combinrii mai multor
gene (piramida genelor) atunci cnd selecia anumitor gene n prezena altor gene este
dificil.
231
ntrebri:
a) Enumerai markerii genetici:
b) Prezentai un dezavantaj al analizei RAPD:
c) Indicai domeniile n care este utilizat selecia asistat de markeri

moleculari:

Clasificarea markerilor genetici.
Tehnici moleculare i utilizarea acestora.
232
ntrebarea 1
a) O reacie PCR este format din n cicluri (ntre 25 i 40), n fiecare ciclu fiind
parcurse 3 etape principale: denaturarea termic a matriei (deci, desfacerea
dublului helix ADN), ataarea primerilor i polimerizarea propriu-zis. La
terminarea unui ciclu de replicare in vitro (de amplificare), cantitatea de ADN
rezultat este dubl fa de matri. Mai mult, produsele rezultate ntr-un ciclu sunt
folosite ca matri n ciclul urmator, astfel nct numrul final de copii ADN este
de 2n x y, unde y = numrul iniial de copii, iar n = numrul de cicluri de replicare.
Este de subliniat faptul c moleculele acumulate exponenial reprezint copii ale
matriei care la capete au ncorporai primerii.
b) De obicei, este suficient o denaturare de 20-30 sec la 94-95 grade C, dar

aceasta trebuie adaptat funcie de termocycler i de tuburile folosite (de ex., dac
se lucreaz n tuburi de 500 l sunt necesari timpi mai lungi dect dac se lucreaz
n tuburi de 200 l). Totodat, pentru matrie bogate n GC se recomand folosirea
unor timpi de denaturare mai lungi.
c) studii de taxonomie, sistematic i filogenie molecular: obinerea rapid a unei

cantiti mari din secvene ADN cu valoare taxonomic i/sau filogenetic
233
ntrebarea 2
a) Markerii genetici sunt de trei tipuri: markeri morfologici, markeri proteici i

markeri moleculari.
b) Comportamentul dominant al markerilor RAPD. De exemplu, n genetica

populaiilor frecvena alelelor nu poate fi exprimat din moment ce homozigoii
(AA) nu pot fi deosebii de heterozigoi (Aa). Acelai lucru este valabil pentru
studiile de cartare genic n care se analizeaz generaiile de segregare F1 sau F2.
Din moment ce indivizii AA nu pot fi deosebii de cei Aa, o informaia valoroas
se pierde.
c) Selecia asistat de markeri moleculari (MAS) este o metod de selecie

indirect care presupune selecia plantelor purttoare a regiunilor care sunt
implicate n expresia caracterelor de interes (plante rezistente) prin markerii
moleculari . n prezent selecia asistat de marker moleculari este axat pe: selecia
caracterelor cu importan economic, pentru care selecia bazat numai pe fenotip
este dificil sau necesit costuri ridicate; selecia caraterelor cantitative, pentru care
selecia bazat pe fenotip este dificil; piramidarea genelor de rezisten.
234
INSTRUCIUNI
ntrebare.
1) Precizai componentele reaciei PCR 2p
2) Enumerai variantele tehnologiei PCR 2p
3) Descriei tehnica RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)
2p
4) Indicai facilitile seleciei asistate de markeri n ameliorarea
rezistenei plantelor la boli- 2p
5) Ce tehnici au fost folosite pentru amprentarea genetic la sp. Vitis 1p
1. Gheorghe Prnu. Genetica i ameliorarea plantelor. Ed. Silvic, Bucureti, 2010.

2. Rodica Pop, Studiul variabilitii somaclonale la via de vie cu ajutorul markerilor
Moleculari
235
BIBLIOGRAFIE
1. Andrei P.,1998, Genetic Ed. Museum, Chiinu.

2. Badea, E., Rduoiu, S., Nicolae, I., Raicu, P., 2000, Genetica-genetic molecular i
inginerie genetic, Ed. Bioterra, Bucureti.
3. Brackdorff, N., 1984, Linactivation du chromosome X, La Recherche, Vol. 25, 136-141.
4. Brooker, R. J., 2000, Genetica. Analisi e principi, Zanichelli.
5. Casian H., 2006. Genetic- support pentru curs.Ed. Printech.
6. Cornea Clina Petrua, 2005. Genetic Ed. Ceres, Bucureti.
7. Crciun T., i colab., 1995. Genetica vegetal - Ed. Didactic i Pedagogic, Bucureti.
8. Corneanu Mihaela, Corneanu,G., 2005, Genetica general i evoluia genomului,
Ed.Universitaria, Craiova.
9. Gallia Butnaru, Ion Nicolae, Simona Rduoiu, Floarea Nicolae, 2000. Genetica
Principii de baz ale ereditii, Vol I, Ed. Bioterra, Bucureti.
10. Gallia Butnaru, Ion Nicolae, Elena Tma, 1999. Genetic molecular. Ed. Mirton,
Timioara.
11. Hartl ,D. L., Jones, E., 2000, Genetica. Principi e applicazioni, Editoriale Grasso.
12. Lizica Szilagyi , 2007, Genetic, Ed. Amanda Edit.
ereditii, Vol. II, Ed. Bioterra, Bucureti.
15. Paula Iancu, 2008, Genetic,Ed. Sitech, Craiova.
16. Prnu Ghe.,2010, Genetica i ameliorarea arborilor- Ed. Silcic, Bucureti.
17. Rodica Pop, Studiul variabilitii somaclonale la via de vie cu ajutorul markerilor
moleculari.
18. Russel, P. J., 1998, Genetica, EDISES.
19. Victor Stnescu, 1983. Genetica i ameliorarea speciilor forestiere.Ed. Didactic i
pedagogic, Bucureti.
20. http://www.usamvcluj.ro.
21. http://www.bio.unibuc.ro
236
237

Genetic A

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Genetic A

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Conf.univ.dr.

1.1 Obiectivele Unitii de nvare nr. 1

Prin studierea acestei uniti de nvare vei fi n msur s:

Genetica este tiina care studiaz ereditatea i variabilitatea organismelor. Genetica

b) Ce tipuri de ereditate se cunosc?

Comentarii la aceste ntrebri vei gsi la sfritul unitii de nvare

Dup parcurgerea acestui subcapitol trebuie s reinei:

b) Enumerai tezele elaborate de ctre Thomas Hunt Morgan:

Comentarii la aceste ntrebri vei gsi la sfritul unitii de nvare

Dup parcurgerea acestui subcapitol trebuie s reinei:

Pentru studiul ereditii i variabilitii organismelor n genetic sunt utilizate n mod

b) Definii metoda biometric:

Metodele de studiu utilizate frecvent in genetic.

1.5 Comentarii i rspunsuri la teste

c) Totalitatea factorilor ereditari ai unui organism poart numele de

b) Metoda biometric: presupune nregistrarea datelor privind caracteristicile i

1.7 Bibliografie minimal

1. Casian H., 2006. Genetic- support pentru curs.Ed. Printech;

EREDITATEA CARACTERELOR CALITATIVE

2.1 Obiectivele unitii de nvare nr.2. 18

2.1. Obiectivele unitii de nvare nr.2

Prin studierea acestei uniti de nvare vei fi n msur s:

Primele experinee de hibridare la diferite specii de plante au fost ncepute de Mendel n

Rezultatele cercetrilor lui G. Mendel publicate, nu au produs senzaie n lumea biologilor de

Caracterelor studiate la soiurile de mazre, de ctre G.Mendel, au dou forme distincte

2.2.2. Monohibridarea i legea segregrii genelor

Monohibridarea este definit ca fiind ncruciarea ntre genitori ce se deosebesc printr-

2.2.3. . Relaia de dominan i recesivitate (dominana total)

Fig.2.1.. Schema unei monohibridri cu dominan total

25% 50% 25%

75% plante cu boabe galbene 25% plante cu boabe verzi

Raportul de segregare fenotipic de 3:1, difer de raportul de segregare genotipic de 1:2:1,

2.2.6. Mecanismul citologic al segregrii genelor

Gregor Mendel a precizat c factorii ereditari sunt particule materiale independente

2.2.7. Interaciuni ale genelor alele

Semidominana (dominana incomplet)

Sistemului sangvin la om prezint patru grupe de snge notate cu A, B, AB i 0,

Grupa sangvina (fenotipul) Genotipul

b) Letalitatea de recesivitate cnd o alel recesiv n stare homozigot provoac moartea

Exemple: a) Studiul unor oareci galbeni a artat c ei sunt ntotdeauna heterozigoi,

b) Cantitatea de clorofil la Anthirrhinum este controlat de o gen la care alela

Genele letale pot fi clasificate dup diferite criterii, i anume:

2.2.8. Sisteme plurialele

Relaiile dintre gene i mediu

Diversitatea factorilor de mediu i

b) Care este raportul de segregare fenotip i genotipic in generaia F2,

c) Enumerai alte relaii ntre genele alele:

d) Cum se clasific genele letale?

Comentarii la aceste ntrebri vei gsi la sfritul unitii de nvare.

Dup parcurgerea acestui subcapitol trebuie s reinei:

2.3.1. Dihibridarea de tip Pisum

3/16 aa B . verzi rotunde (recombinari intercromozomiale) gene

Raportul genotipic a fost n proporie de 4 AaBb : 2 AABb : 2 AaBB : 2 aaBb :2 Aabb :

Experienele de dihibridare la mazre presupun relaia de dominan-recesivitate la ambii

Metode pentru analiza dihibrizilor

A) Metoda tabelei de combinaii (ahul de combinaii, dup R.C. Punnett)

Raport fenotipic de segregare:

Deoarece n metafaza I a meiozei fiecare pereche de cromozomi se separ independent i

Testarea dihibrizilor cu dominan complet (toatal). Pentru determinarea genotipurilor

galben rotund verde zrcit (printele recesiv folosit ca tester)

b) Dac n F1 rezult un raport de segregare fenotipic de 1:1: dihibridul este heterozigot

galben rotund verde zbrcit

galben rotund verde zbrcit (tester)

2.3.3.Trihibridarea de tip Pisum