GENETICA FIM

CURS 13 – 16 aprilie 2013

AUTOR:
PROF.DR. EMILIA SEVERIN
UMF “Carol Davila”
Bucuresti
 TERAPIA GENICA

Terapia genică defineşte

tratamentul unei boli prin
fabricarea şi introducerea
unei “gene bune” în genomul
unei anumite celule a
organismului.

Noua gena o va inlocui pe Este o strategie alternativă

cea mutanta functionand la terapia clasică aflată in
normal sau va sintetiza o imposibilitatea de a oferi
proteină terapeutică menită tratamente convenţionale
să blocheze producerea sau pentru vindecarea bolilor
dezvoltarea bolii. genetice.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 2

 TERAPIA GENICA (TG)

Scopul terapiei genice

TG urmareste îmbunătăţirea stării de sănătate

a individului prin corectarea la nivel molecular a
unui defect genic din genom.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 3

 TERAPIA GENICA

Astfel, o gena normala, izolata

Descoperirea: de la un individ sănătos, era
inserată in genomul unui virus;

enzimelor de restrictie; acest virus modificat era folosit

a tehnologiei ADN pentru transferul genei normale
in celulele bolnavului, iar boala
recombinant in anii ’70; era tratată direct, prin transfer

si a faptului ca, multe boli genic.
ereditare au drept cauza
mutatia unei singure gene,
a permis oamenilor de Noua strategie de terapie
devenea o promisiune prin
stiinta sa-si imagineze potenţialele aplicaţii in clinica
principii revolutionare de (in cazul bolilor genetice, al
vindecare a bolilor unor forme de cancer si al unor
genetice. infectii virale).

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 4

 TERAPIA GENICA

Rezultatele cercetărilor Eforturile aplicării terapiei genice

fundamentale şi experimentale au în patologia genetică umană nu au
fost transferate din laborator in avut însă efectele terapeutice
practica medicală. sperate.

Pentru moment, identificarea unor

vectori specifici unui anumit tip de
Limitele actuale ale terapiei genice
celulă, funcţionarea pe termen lung a
au in vedere probleme de ordin
genei transferate şi la un nivel de
tehnic care trebuie rezolvate prin
expresie stabil sau răspunsul imun
strategii ingenioase, apte să asigure
al organismului par a fi impedimente
o manipulare genică sigură, eficientă
sau provocări ştiinţifice, după
şi predictibilă.
părerea unor cercetători, în obţinerea
unor rezultate terapeutice pozitive.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 5

 TERAPIA GENICA

• În acest sens, transferul “genei terapeutice” poate fi

directionat spre o celulă somatică – terapie genică
somatica, sau spre o celulă a liniei germinale – terapia
genică germinală sau terapie genică ereditară.

• Terapia genica somatica are efecte doar asupra

pacientului si un are impact asupra generatiilor viitoare.
• Efectele terapiei genice germinale se transmit în
generaţiile succesive. Terapia genica germinala este
folosită pentru crearea organismelor transgenice dar
neacceptată si neutilizată la specia umana din motive etice.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 6

 TERAPIA GENICA

• Căile prin care “gena terapeutică” este introdusă în celula

sunt diferite. Frecvent sunt folosite două metode:
terapie ex vivo si terapie in vivo.
Aplicarea lor se face în funcţie de tipul de celulă.
Terapia ex vivo presupune prelevarea de celule bolnave de la
pacient, introducerea genei normale in genomul celular şi
creşterea celulelor în cultură după care, celulele tratate sunt
reintroduse pacientului. Se folosesşte în cazul celulelor
măduvei osoase, în leucemii.
Terapia in vivo presupune injectarea genei normale, inserată
într-un vector viral non-virulent, pacientului. Se foloseşte în
cazul celulelor maligne, în neoplazii.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 7

TERAPIE GENICA EX VIVO

Prelevarea de
celule de la In laborator se
pacient modifica un virus
pentru a fi folosit
ca vector .

Celulele O gena
pacientului normala este
modificate vor inserata in
sintetiza proteina genomul
normala viral

Celulele pacientului
modificate genetic sunt
injectate acestuia

Virusul cu gena
inserata este
introdus in celulele
prelevate de la
Celulele pacientului sunt pacient
modificate genetic

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 8

 TERAPIA GENICA IN VIVO

Copii ale genei

terapeutice sunt
inserate intr-un vector
viral sau non-viral
(lipozom, plasmid,
HAC)

Terapia in vivo
ADN –ul
presupune injectarea genei genei

normale, inserată într-un vector inserat intr-

un vector
viral non-virulent, pacientului. Se este injectat
direct
foloseşte în cazul celulelor pacientului
intr-un tesut
maligne, în neoplazii. specific.
In organism, ADN
inserat in vector
este incorporat de
celulele tesutului in
care s fost injectat.
Celulele vor
produce proteina
codificata de noua
gena inserata.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 9

 AMPRENTAREA ADN

AMPRENTA ADN (DNA fingerprinting) – model

specific de dispunere a unor repetitii de secvente
scurte de ADN, dispuse in tandem si hipervariabile;
acest model este caracteristic fiecarui individ.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 10

TIPAREA ADN – METODA FOLOSITA IN JUSTITIE SI MEDICINA LEGALA

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 11

 SUSPECT

Analize
serologice

Amprenta
dentara

Amprenta
digitala

Amprenta ADN

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 12

 TERATOLOGIE UMANA
(dismorfologie
dismorfologie)

GENETICA FIM 13
 TERATOLOGIE UMANA
(dismorfologie
dismorfologie))

TERATOLOGIA studiaza dezvoltarea

embriofetala anormala
(erori de morfogeneza).

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 14

 TERATOLOGIE UMANA
(dismorfologie
dismorfologie))

O anumita
anomalie
congenitala poate
avea cauze diferite.

Anomaliile de dezvoltare pot fi

atribuite unor CAUZE cunoscute,
genetice (~45%) si negenetice
(~5%), restul de 50% fiind
necunoscute ca determinism
cauzal.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 15

 TERATOLOGIE UMANA
(dismorfologie
dismorfologie))

Anomaliile de dezvoltare
definesc defectele
morfologice, functionale sau
biochimice care apar ca
rezultat al erorilor
embriogenezei sau tulburarilor
dezvoltarii fetale.

In practica, se foloseste mai

frecvent termenul de anomalie
congenitala dar
« CONGENITAL » se traduce
prin « prezent la nastere »
fara sa implice si cauza care a
produs anomalia.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 16

 TERATOLOGIE UMANA
(dismorfologie
dismorfologie))

De la conceptie si
pana la nastere se
pot produce la 2. biochimice
embrion si fat
diferite defecte:

1. morfologice 3. functionale

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 17

 ANOMALIILE CONGENITALE
CLASIFICARE:

Natura erorii de
morfogeneza Manifestarea Severitatea
(clasificare clinica: fenotipului:
patogenica):

letale,
majore,
medii,
minore.
izolate sau
malformatii, asociate.
disruptii,
deformatii,
displazii.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 18

 CAUZELE ANOMALIILOR
CONGENITALE

Identificarea cauzelor care au produs anomalia

este importanta pentru
profilaxie si sfat genetic.

Cauze genetice: Cauze negenetice:

agentii teratogeni
~ 45%. ~ 5%.

CAUZE CUNOSCUTE

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 19

 TERATOLOGIE UMANA
(dismorfologie
dismorfologie))
Producerea si dezvoltarea anomaliilor
de dezvoltare induse de agentii
teratogeni fac obiectul de studiu al
teratogenezei
( teras, -astos = monstru si
genesis=aparitie).

Un agent extern care produce o

anomalie congenitala prin interferarea
dezvoltarii embriofetale este numit
TERATOGEN.

Agenti externi cu risc mare de

teratogeneza:
agenti biologici, agenti chimici, agenti
fizici, starea fiziologica sau patologica
a mamei.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 20

 TERATOLOGIE UMANA
(dismorfologie
dismorfologie))

- TIMPUL EXPUNERII
Efectele unui
teratogen ( momentul in care a
depind de : fost administrat femeii
insarcinate )

- SUSCEPTIBILITATEA GENETICA
a mamei / fatului la actiunea unui
teratogen care explica de ce nu se
produc intotdeauna anomalii
congenitale dupa expunerea la
- DOZA PRIMITA
teratogeni a femeii insarcinate

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 21

 TERATOLOGIE UMANA
(dismorfologie
dismorfologie))

TIMPUL EXPUNERII
( momentul in care a fost administrat
femeii insarcinate )
– expunerea in perioada
organogenezei are consecinte grave,
fiecare organ avand o perioada critica,
de maxima vulnerabilitate.

ORAR EMBRIONAR
care corespunde perioadei de formare
a organelor.

Genetica FIM Curs 13 - A nu se copia sau distribui fara copyright 22

SUSCEPTIBILITATEA LA TERATOGENI PENTRU DIFERITE
SISTEME DE ORGANE, IN FUNCTIE DE VARSTELE DE
DEZVOLTARE
CONCEPTIE DEZVOLTARE EMBRIONARA (saptamani) PERIOADA FETALA (saptamani)

SISTEM NERVOS CENTRAL

INIMA

MEMBRE SUPERIOARE

MEMBRE INFERIOARE

URECHE
OCHI

PALAT

DINTI
ORGANE
GENITALE
EXTERNE
MALFORMATII MINORE SI ANOMALII
AVORT MALFORMATII MAJORE FUNCTIONALE

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 23

 PERIOADA DE FORMARE A UNOR ORGANE
Sistem NERVOS central
Saptamana a 3-a pana la
termen.
URECHEA
Saptamana a 4-a pana in
saptamana a 20-a.
OCHI
Saptamana a 4-a pana la
termen.
DINTII
Saptamana a 6-a pana la
termen.

INIMA
Saptamana a 3-a pana in
saptamana a 9-a.
PALATUL
Saptamana a 6-a pana in
saptamana a 16-a.

Membre INFERIOARE
Saptamana a 4-a pana in
saptamana a 9-a.

Membre SUPERIOARE
Saptamana a 4-a pana in
Organe GENITALE externe saptamana a 9-a.
Saptamana a 7-a pana la
termen.

Genetica FIM Curs 13 - A nu se copia sau distribui fara copyright 24

EXPUNEREA LA TERATOGENI ASOCIATA UNOR
EFECTE REPRODUCTIVE ADVERSE

EFECTUL

EXPUNERE AVORT MALFORMATII GREUTATE TULBURARI DE

SPONTAN CONGENITALE MICA LA DEZVOLTARE
NASTERE

ALCOOL X X X X

ANESTEZICE X X - -
GAZOASE

PLUMB X - X X

SOLVENTI X X - X
ORGANICI

FUMAT X X X -

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 25

 SCREENING GENETIC

- identificarea intr-o
populatie definita a
unor persoane cu o
anumita boala sau
DEFINITIE: anomalie genetica,
inaintea aparitiei
simptomelor clinice,
in stadiu
presimptomatic.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 26

TIPURI DE SCREENING GENETIC
-Screening prenatal -Varsta materna peste 35 ani
-Alfa fetoproteina anormala in serul
matern
-Quadruplu test anormal
Ecografie fetala
1.
-Screening neonatal -Fenilcetonurie
Screening (sange, urina) -Hipotiroidie congenitala
-Aminoacidopatii
populational -Screening heterozigoti in -Talasemie, sicklemie
anumite grupuri etnice - Fibroza chistica
- Boala Tay-Sachs
-Presimptomatic Boala Huntington, cancer de san, cancer
de colon

2. -La purtatorii sanatosi de Translocatii

anomalii cromozomiale
Screening echilibrate
-La heterozigotii in boli Fibroza chistica, distrofie musculara
familial recesive : autozomale sau Duchenne
legate de X
-Premutatii Sindromul X fragil

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 27

 TESTE GENETICE
Teste medicale care identifica
modificari ale cromozomilor,
genelor sau proteinelor, asociate
cu anumite tulburari genetice.

Confirma sau infirma o anumita

suspiciune legata de o conditie
genetica.

In momentul de fata, sunt disponibile

cateva sute de teste genetice existand
posibilitatea dezvoltarii unor teste noi.

Sunt benevole dar decizia trebuie

discutata cu un medic genetician
( beneficii, limite, aspecte sociale,
emotionale).

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 28

 TIPURI DE TESTE GENETICE

Screening neonatal

Teste pentru diagnostic

Testarea heterozigotilor

Teste prenatale

Testare preimplantatorie

Teste presimptomatice (predictive)

Teste utilizate in medicina legala (forensic testing)

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 29

 TESTE GENETICE
TESTE DE PREDICTIE – in
momentul testarii individul nu are
niciun simptom al afectiunii
pentru care se face testarea.
Scopul este de a prezice viitorul
risk de dezvoltare a afectiunii.

TESTAREA PRECOCE – in
momentul testarii individul nu are
niciun simptom asociat afectiunii
pentru care se face testarea, dar
afectiunea exista si progreseaza
fara manifestari. Scopul este
detectarea precoce.

TESTE DE DIAGNOSTIC – in
momentul testarii individul
prezinta semnele si simptomele
care pot fi cauzate de afectiunea
pentru care se face testarea.
Scopul este de a diagnostica.

Genetica FIM Curs 13 - A nu se copia sau distribui fara copyright 30

 Ecogenetica si farmacogenetica
Ecogenetica umana studiaza
Farmacogenetica studiaza
raspunsurile variate ale indivizilor
variatiile raspunsului individual la
(raspunsuri determinate genetic)
administrarea unui medicament,
la actiunea factorilor externi
variatii controlate de structura
(chimici, fizici, infectiosi,etc.).
genetica a individului.
Dintre factorii externi cu care
Medicamentele pot precipita sau
omul vine in contact fac parte si
agrava unele tulburari ereditare.
medicamentele.

Avand in vedere ca
medicamentele reprezinta o mica Studiul variatiilor individuale la
parte dintre agentii de mediu care actiunea unor medicamente este
agreseaza organismul uman, util in practica medicala pentru
conceptul de ecogenetica este profilaxia individualizata,
mai larg si include si personalizata pentru pacient.
farmacogenetica.

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 31

 FARMACOGENETICA
S-a observat ca un acelasi medicament
administrat in aceiasi doza, pe aceiasi
cale, la bolnavi cu aceiasi afectiune,
varsta si sex, produce efecte diferite:

- terapeutice

- toxice

- reactii adverse chiar fatale in unele cazuri

- lipsa oricarui efect.

•Din momentul patrunderii medicamentului in organism si

pana la eliminarea lui, medicamentul este absorbit,
transportat si distribuit la situsurile sale de actiune, unde va
interactiona cu tintele terapeutice. In procesele de
metabolizare, medicamentul sufera o serie de transformari
biochimice in care sunt implicate mai multe proteine
functionale (receptori, enzime) a caror sinteza este
controlata genetic. Orice modificare a cailor de metabolizare
cauzata de defecte ale proteinelor implicate ar putea avea
ca efect un raspuns anormal din partea organismului..

Curs 13 GENETICA FIM - A nu se copia sau distribui fara copyright 32

 Raspunsul organismului la actiunea
medicamentelor reprezinta un tip special de
interactiune ereditate-
ereditate-mediu si difera de la un
individ la altul.

Variabilitatea farmacocinetica – explica diferentele privind

absorbtia, rata de metabolizare si a eliminare a
medicamentului si a catabolitilor sai; un medicament,
administrat in aceiasi doza mai multor pacienti, se va gasi in
concentratii (plasmatica, tisulara) diferite la acestia pentru ca
exista diferente individuale in ceea ce priveste: absorbtia,
distribuirea, metabolizarea si eliminarea medicamentului.

Variabilitatea farmacodinamica - reflecta polimorfismele

proteinelor de transport al medicamentelor in organism si
polimorfismul genetic ce influenteaza tintele medicamentelor

33
 REFERINTE ELECTRONICE

Pentru ilusrarea experimentelor si a mecanismelor

moleculare prezentate s-au preluat imagini de pe site-
ul:
http://images.google.com
www.google.com

Pentru clarificarea unor probleme legate de tematica predata la

curs se pot trimite intrebari la adresa:
geneticaintrebari@gmail.com

4/16/2013 34