Interactiunea nanoparticulelor cu

tesuturile vii IV FIM

Interactiunea
nanoparticulelor cu
tesuturile vii

Prof. Alina Badanoiu

Terapia cancerului prin hipertermie

realizata cu ajutorul nanoparticulelor

1
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Hipertermia
Reprezinta o crestere a temperaturii tesuturilor
care se poate realiza local sau global;
Hipertermia se utilizeaza in terapia cancerului si
poate consta in:
Hipertermie (40-47oC) – determina o serie de
evenimente la nivel celular care conduc in final la
apoptoza celulelor.
Termoablatie (temperatura mai mare de 50oC) –
moarte celulara determinata de coagularea
proteinelor si bio-macromoleculelor – temperatura
mai mare de 50oC;

2
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Efectele hipertermiei in terapia

cancerului
Zonele tumorale cu o retea de vase sanguine
nou-formate (ineficiente) sunt mai sensibile la
hipertermie comparativ cu zonele sanatoase;
Este recomandata o terapie combinata
(radioterapie-hipertermie) celulele tumorale
aflate in faza S sunt radio-rezistente
Hipertermia (40-42oC) poate determina si o
chemo-sensibilitate a celulelor canceroase
(combinarea terapiei medicamentoase cu
hipertemia - reduce riscul reactiilor adverse);

Tehnici
Hipertermie totala ( intreg organismul) – camere
termale, pături calde etc (reactii adverse)
Hipertermia regionala - perfuzie de lichide calde (solutii
medicamente sau sange incalzit ex-vivo) in regiunea in
care se afla zona afectata
Hipertemia locala zona afectata:
1. Luminal hypertemia - plasare de probe sau retele de
probe speciale cat mai aproape de zona canceroasa
aceste probe sunt incalzite de surse externe
Probleme: incalzire neuniforma a tumorii, metoda invaziva;

3
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

2. Plasare de (nano) particule metalice

(“antenas”/”seeds”) in spatiile interstitiale ale tumorii
(Enhance Permeability and Retention - EPR effect)

Fig. 1. Principiul “autostopului” (hichhiking) celular – celulele (cu afinitate pentru tumora –
“tumor-tropic”) sunt “incarcate” cu nano-medicamente prin diferite procese (internalizare,
adsobtie la suprafata, interactii ligand-receptor etc). Aceste celule pot fi injectate intravenos si
sunt extravazate in spatiile interstitiale ale tumorii)
Current Approaches for Improving Intratumoral Accumulation and Distribution of Nanomedicines.Durymanov MO, Rosenkranz AA, Sobolev AS - Theranostics (2015)

Se aplica apoi surse externe care

determina cresterea temperaturii:
A. Nanoparticule feromagnetice (SPION) – camp
magnetic alternativ;
Particulele SPION nefunctionalizate – sunt eliminate
rapid din organism si se acumuleaza in ficat, splina,
noduli linfocitari
Particulele SPION acoperite cu materiale
biocompatibile (dextran, amidon, etc.) sunt eliminate
mai incet din organism
Particule SPION acoperite/inglobate/functionalizate in
polimeri – se acumuleaza mai usor in tumora

4
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Rezonanta plasmonica de suprafata

(RSP)
Nanoparticulele metalice prezinta “rezonanta
de suprafata a plasmonilor” absorb puternic
o radiatie la o anumita lungime de unda ( VIZ
sau NIR) si o disperseaza sau o transforma
in caldura.

Rezonanta plasmonica
de suprafata – un camp
electric oscilant
deplaseaza electronii
(verde) de conductie in
raport cu nuclele ( gri)

B. Nanoparticule de aur Spectrul electromagnetic

Sursa de incalzire – radiatie UV sau NIR
13 nm
Au

Silica
150nm
(dielectric)

GNP (gold nanoparticles) – dim. 60-400nm efect EPR si activare cu radiatie in domeniul Viz si
NIR (absobtie optica ~ 540-700 nm)
GNS (gold nano-shells) – dim. 50-150 nm activare cu radiatie in domeniul NIR

Fig.2. Spectrele de absorbtie in apa pentru trei tipuri

de nanoparticule:
GNP (AuNP) prezinta rezonanta in regiune vizibila
(400-700 nm)
GNS (AuNS) prezinta rezonanta in NIR (700-
1100nm)
Single Particle and PET-based Platform for Identifying Optimal Plasmonic Nano-Heaters for Photothermal
Cancer Therapy,Jesper Tranekjær Jørgensen, Kamilla Norregaard, Pengfei Tian, Poul Martin
Bendix., Andreas Kjaer & Lene B. Oddershede,Scientific Reports volume 6, Article number: 30076 (2016)

10

5
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

GNR (gold nano-rods) – dim. L=4-5 nm; L/l=3 (L=lungime; l=latime) sanse mai mari de
acumulare prin EPR si activare cu radiatie in domeniul NIR

In functie de orientare poate prezenta

rezonanta in diferite domenii de
lungimi de unda

11

Nicole H. Levi-Polyachenko, and John H. Stewart, Clinical Relevance of

Nanoparticle Induced Hyperthermia for Drug Delivery and Treatment of Abdominal
Cancers, The Open Nanomedicine Journal, 2011, 3, 24-37
Posibilitatea de a modifica
lungima de unda a radiatiei
pentru care are loc absorbtia

12

6
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

PEG-GNR si PEG-GNS

PEG-NR and PEG-NS (7 µg Au/mL, 810nm laser, 2

W/cm2, n = 3 each) after 2 min of IR irradiation.

13

C. Nanotuburi de carbon
SWCNT absorb undele electromagnetice
(VIS NIR microunde) determina
excitarea unor tranzitii electronice urmata de
relaxare care determina aparitia unor vibratii
in retea genereaza caldura.

14

7
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Influenta concetratiei de MWCNT (700nm)

asupra caldurii degajate dupa iradierea IR timp
de 4 minute

Tori et al, International Journal of Nanomedicine 2007, 2(4), 707-714

15

Crestere
mult mai
mica de
temperatura
(6oC)

Tori et al, International Journal of Nanomedicine 2007, 2(4), 707-714

16

8
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

17

18

9
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Factori care influenteaza cresterea de

temperatura
Dimensiunea CNT (ca sa fie eficiente → sa
aiba o dimensiune egala cu jumatate din
lungimea de unda incidenta)
Tipul de CNT (MWST sau SWNT)
Concentratia in solutie
Gradul de dispersare a CNT
Functionalizare/acoperire (sau nu)

19

Nicole H. Levi-Polyachenko, and John H. Stewart, Clinical Relevance of

Nanoparticle Induced Hyperthermia for Drug Delivery and Treatment of Abdominal
Cancers, The Open Nanomedicine Journal, 2011, 3, 24-37

20

10
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Efectul asupra tesuturilor vii

Quantum dots

21

Definire.Utilizari
Quantum dots (QD) sunt nanocristale
(2-100nm) de material semiconductor
QD au o fluorescenta intensa
Aplicatii
Industria electronica
LED (Light Emitting Diodes)
Sisteme pastrare date (ultra-high density)
Imagistica medicala
Eliberare controlata de medicamente (Drug
delivery)

22

11
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Proprietatile QD
Structura Exemple:
CdSe/ZnS
Functionalizarea: CdTe/CdSe
-Interactii CdSe/ZnTe
electrostatice
Alte substante:
- Adsobtie
GaAs, InAs, InP,
-Chelare PbSe, etc.
multivalenta
-Legaturi
covalente
Cresc
biodisponibilitatea
(PEG)
Scop terapeutic

http://nanophotonica.net/technology/ Core shell conjugated – CdSe/ZnS-SAA

23

Toxicitate QD
Distrugerea/indepartarea startului
biocompatibil expune interiorul (core/shell)–
potential toxic (CdTe)
Core/shell se poate dizolva si elibera metale toxice –
ex: Cd
QD se pot degrada in conditii oxidative
Toxicitatea lor depinde de:
Compozitia lor
Dozaj
Durata
Frecventa de expunere

24

12
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Modalitati de expunere
Cine si unde:
- La serviciu ( cercetatori/ingineri ind.
elecotronica/medici)
- Pacienti – cand QD sunt folosite pentru
imagistica / tratamente medicale (in viitor)
Modalitati de internalizare:
Inhalare
Contact dermal
Ingestie

25

Inhalare
QD < 2.5 nm – in plamani ajunge sa
interactioneze cu epiteliul alveolar
QD cu dimensiuni mai mari (pana la
100nm) se depoziteaza in bronhii
QD pot fi inernalizate prin endocitoza de
diferite tipuri de celule
Bioacumulare

26

13
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Citotoxicitate – CdTe/PDADMAC
PDATMAC- clorura de polidialildimetilamonium

Fig. 1. Stabilitatea fenomenului de Fig. 2. Viabilitatea celulara a QD-

fluorescenta pentru QD- PDADMAC– (a) si QD (CsTe) (b) –
PDADMAC (a) si QD (CsTe) – (b) linie celulara A549 (celule
canceroase plamani)

27

Fig. 3. QD sintetizate in mediu apos (a) si in mediu organic (b)

Avantajele QD sintetizate in mediu apos - ruta mai rapida de sinteza, dimensiune

mai mica

28

14
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Pentru a
verifica
efectul
ionilor de
Cd2+

Fig. 4. Viabilitatea celulara/ activitate metabolica a liniei celulare HEK293 in contact cu QD

(aqua) (CdTe) – (A;C) si CdCl2 (B;D)

29

Concluzii studiu
Citotoxicitatea QD este asociata in principal
inhibitiei activitatii metabolice a celulelor si nu
induce direct moartea celulelor
ROS joaca un rol important in citotoxicitatea
QD

30

15
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Fig. 5. Shema citotoxicitaii determinate de QD (CdTe)

QD penetreaza membrana celulara si in interiourul citoplasmei elibereaza ioni de Cd2+.
Ionii de Cd si QD se concentreaza localizat in jurul nucleului /organite celulare
determina reducerea/pierderiea activitatii

31

Studii in vitro/in vivo

32

16
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Citotoxicitatea depinde de tip QD (inclusiv

tipul de acoperire - coating) concentratie, timp
expunere, linie celulara
Pentru concentratii reduse si timp mic de
expunere (pana la 2 ore) nu s-a pus in
evidenta efect citotoxic
Bioacumulare in diferite organe (fig. 6)

33

QD
preferential in

Fig. 6. Organele in care s-a constat acumularea de nanomateriale

34

17
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Fig. 7. QD compus din CdSeS/

SiO2 – strat cu grupari OH D mediu = 21.3+2nm

35

Soareci –injectati in vena (coada) cu

solutie cu QD- 5nmol/sorece.

Fig. 8. Eliminarea QD in functie de timp

36

18
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Fig. 9. Acumulare QD in diferite organe in functie de timp

37

Concluzie studiu
Mecanismul in vivo prin care se elimina QD este
complex el depinzand de dimensiunea acestora si de
interactiile QD cu proteinele din plasma:
QD nano - se pot elimina in cateva zile
QD + proteinele din plasma
pot forma agregate de dimensiuni mari (micro)
Eliminarea acestora se face prin in principal prin
sistemul excretor dar aprox. 10% raman in tesutul
hepatic.

38

19
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

S. R. Stürzenbaum, et. al, Biosynthesis of luminescent quantum dots in an earthworm,

Nature Nanotechnology, 8,57–60(2013),doi:10.1038/nnano.2012.232

Ramele (Lumbricus rubellus) pot sintetiza QD de CdTe daca sunt “hranite” cu pamant
(sol) impurificat cu CdCl2 si NaTeO3. Avantajele acestui mod de biosinteza ar putea fi o
toxicitate mai mica a QD.

39

Bibliografie
Rodica Rogojan, Nanomateriale bioceramice destinate implanturilor osoase, UPB, 2013
Otilia Radacina, Sinteza, caracterizarea si citotoxicitatea nanoparticulelor, Teza de doctorat,
UPB, 2013
J.R.Brucher, Predicting human health risks from nanomaterials, 2006
Karin Aschberger, Christian Micheletti, Birgit Sokull-Klüttgen, Frans M. Christensen,Analysis
of currently available data for characterising the risk of engineered nanomaterials to the
environment and human health — Lessons learned from four case studies, Environment
International 37 (2011) 1143–1156
Proiect european – Engineered nanoparticles: review on health and environmental security
(ENHES)
Scientific Committee on Consumer Safety, Opinion on Zinc oxide (nano form), 18 september
2012
Makoto Ema, Norihiro Kobayashi, Masato Naya, Sosuke Hanai, Junko Nakanishi,
Reproductive and developmental toxicity studies of manufactured nanomaterials,
Reproductive Toxicology 30 (2010) 343–352
Mahsa Hamzeh, Geoffrey I. Sunahara,In vitro cytotoxicity and genotoxicity studies of
titanium dioxide (TiO2) nanoparticles in Chinese hamster lung fibroblast cells, Toxicology in
Vitro 27 (2013) 864–873
Xuhong Chang, Yu Zhang, Meng Tang, Bei Wang, Health effects of exposure to nano-
TiO2:a meta-analysis of experimental studies, Nanoscale Research Letters 2013, 8:51
Soo Jin Parka, Young Chan Parkb, Sang Won Leea, Min Sook Jeonga, Kyeong-Nam Yub,
Haksung Jungc,Jin-Kyu Leec, Jun Sung Kima, Myung-Haing Chob,Comparing the toxic
mechanism of synthesized zinc oxide nanomaterials byphysicochemical characterization
and reactive oxygen species properties,Toxicology Letters 207 (2011) 197– 203
Shawna Nations, Mike Wages, Jaclyn E. Cańas, Jonathan Maul, Chris Theodorakis, George
P. Cobb Acute effects of Fe2O3, TiO2, ZnO and CuO nanomaterials on Xenopus
laevisChemosphere 83 (2011) 1053–1061

40

20
Interactiunea nanoparticulelor cu
tesuturile vii IV FIM

Bibliografie (selectiva)
Rongfa Guan, Tianshu Kang, Fei Lu, Zhiguo Zhang, Haitao Shen,Mingqi Liu, Cytotoxicity, oxidative
stress, and genotoxicity in human hepatocyte and embryonic kidney cells exposed to ZnO
nanoparticles, Nanoscale Research Letters 2012, 7:602
S. Nations et al. / Chemosphere 83 (2011) 1053–1061
A.Semisch et all,Particle and Fibre Toxicology 2014, 11:10
Akhil Wadhera MD and Max Fung MD Systemic argyria associated with ingestion of colloidal silver,
Dermatology Online Journal 11 (1): 12
Braydich-Stolle, Saber Hussain, John J. Schlager, Marie-Claude Hofmann In Vitro Cytotoxicity of
Nanoparticles in Mammalian Germline Stem Cells.Laura, Toxicol Sci. Dec 2005; 88(2): 412–419.
Cytotoxicity and Genotoxicity of Silver Nanoparticles in Human Cells,P. V. AshaRani, Grace Low Kah
Mun, Manoor Prakash Hande, Suresh Valiyaveettil , ACS Nano, 2009, 3 (2), 279–290
F.K. Alanazi et al., Biopharmaceutical applications of nanogold, Saudi Pharmaceutical Journal (2010)
18, 179
Shang et al. Journal of Nanobiotechnology 2014, 12:5
Yu Pan et al., Size-Dependent Cytotoxicity of Gold Nanoparticles, DOI: 10.1002/smll.200700378
Yu-Shiun Chen et al, Nanoscale Res Lett (2009) 4:858–864
Jelena Kolosnjaj-Tabi, Henri Szwarc and Fathi Moussa, In vivo Toxicity Studies of Pristine Carbon
Nanotubes: A Review, www.intechopen.com
Wong, Pumera, Phys. Chem. Chem. Phys., 2013,15, 7755-7759
J. Boczkowski, S. Lanone / Advanced Drug Delivery Reviews 64 (2012) 1694
S. Lanone et al. / Advanced Drug Delivery Reviews 65 (2013) 2063–2069
http://www.rsc.org/chemistryworld/news/2009/october/25100901.asp

41

Bibliografie
Ron Hardman, Environ Health Perspect. 2006 Feb; 114(2): 165–172
Chen Z et. al, Toxicol Appl Pharmacol. 2008 Aug 1;230(3):364-71.
Carbon nanotubes in macrophages: imaging and chemical analysis by synchrotron X-ray fluorescence
microscopy, http://www.esrf.eu/UsersAndScience/Publications/Highlights/2008/imaging/imaging12
Hansang Kwon et al 2012 Nanotechnology 23 225704
J.Du et all., E n v i r o n m e n t a l t o x i c o l o g y a n d p h a r m a c o l o g y 3 6 ( 2 0 1 3 ) 451–462)
A.M. Jastrzebska et all, J Nanopart Res (2012) 14:1320
Y. Chang et al. / Toxicology Letters 200 (2011) 201–210
C.M.Sayes et all, Nano Lett., Vol. 4, No. 10, 2004
Magnetic properties, http://phys.thu.edu.tw/~hlhsiao/mse-web_ch20.pdf
D.H.Kim et. All, J.Currebt Applied Phisics 6SI (2006) 242-246
M.F. Calmon et al. / Colloids and Surfaces B: Biointerfaces 100 (2012) 177– 184
Z.Chen, J.J. Yin, Y.T. Zhou, et al, 2012, ACS Nano, 6, p.4001-12.
R.Mejias et al., Journal of Controlled Release 171 (2013) 225-233
S. R. Stürzenbaum, et. al, Biosynthesis of luminescent quantum dots in an earthworm, Nature
Nanotechnology, 8,57–60(2013),doi:10.1038/nnano.2012.232

42

21