Familia

Enterobacteriaceae
LP 1
 Familia Enterobacteriaceae

 Manualul de Bacteriologie
sistematica Bergey (editia III /
2004)
 Reuneste in prezent 44 genuri,
dintre care 25 au fost implicate
semnificativ in patologia umana
 Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu
importanta
medicala
I. 7 E. coli, E.
ESCHERICHIA fergusonii, E.
hermanii, E.
vulneris
X. 12 C. freundii, C.
CITROBACTER amalonaticus,
C. diversus
XII. 16 E. cloacae, E.
ENTEROBACTE aerogenes, E.
R agglomerans, E.
sakazakii
 Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu
importanta
medicala
XXI. 1 M. morganii
MORGANELLA
XXIX. PROTEUS 8 P. vulgaris, P.
mirabilis, P.
penneri
XXX. 6 P. alcalifaciens,
PROVIDENCIA P. rettgeri,
P.stuartii
 Familia Enterobacteriaceae
Genul Numar de specii Specii cu
importanta
medicala
XXXIV. 8 S. enterica, S.
SALMONELLA choleraesuis, S.
arizonae, S.
enteritidis, S.
paratyphi, S.
typhi, S.
typhimurium
XXXVI. 12 S. marcescens,
SERRATIA S. liquefaciens
XXXVII. 4 S. dysenteriae,
SHIGELLA S. boydii, S.
 Caractere morfo-
tinctoriale:

• Bacili Gram-negativ
• Mobili prin flageli peritrichi / imobili
• Unii au capsulă: genul Klebsiella (K.
pneumoniae)
• Nu formează endospori (nesporulati)
 Caractere de cultură:

• Aerob - facultativ anaerobe

• Nepretentiosi nutritiv – cresc pe
medii cu peptona in prezenta bilei
• Fermenteaza glucoza
• Oxidazo – (-)
• Produc catalaza
• Reduc nitratii la nitriti
 Caractere de cultură:
• Tulbură uniform mediul de cultură lichid
• Colonii tip S, dar si R
• Uneori, colonii mucoase (tip M):
Klebsiella pneumoniae
• Medii selective, majoritatea au lactoză:
• Drigalski, Levin, MacConkey,
• Leifson (ADCL), Istrate-Meitert, Hektoen,
SS,
• Wilson - Blair
 Mediul Levin (EMB)
 Categoria: Mediu
slab selectiv si
diferenţial
 Contine: Eozina Y si
albastru de metilen,
care inhiba bacteriile
Gram (+)
 Utilizare: cultivarea
enterobacteriilor (E.
coli)
 Mediul ADCL (Leifson)
 Categoria: Mediu
moderat - selectiv si
diferenţial
 Contine: agar –
dezoxicholat – citrat –
lactoza
 Inhiba bacteriile Gram
(+) si o parte din
bacteriile Gram (-)
 Utilizare: cultivarea
shigellelor si
salmonellelor, Yersiniei
 Familia Enterobacteriaceae
Categoria Gruparea Semnificatia
taxonomica etiologica
I. Patogene Salmonella, certa
Shigella –
Escherichia
(fenotipuri
diareigene si
uropatogene de E.
coli), Yersinia
II. Conditionat - Citrobacter, Izolate semnificativ
patogene Enterobacter, in prelevate
Escherichia, necontaminate
Klebsiella, (LCR, prelevate din
Morganella, cavitati inchise,
Proteus, hemoculturi,
Providencia, colectii neabcedate
Serratia
 Genul Shigella
 patogen intestinal
Caracteristicile speciilor de Shigella:
 imobile

 nu fermentează lactoza pe mediile cu

lactoza – lactozo (-)
 determină dizenterie bacilară – boala
specific umana:
• febră,
• colici abdominale,
• scaune diareice muco - sangvinolente
 Clasificarea Shigella

In functie de antigenul somatic O:

• Shigella dysenteriae: 13 tipuri: 1 – S. shigae, 2 – S.
schmitzii, 3 – 7 S. Large Sachs, 8 – 13
• Shigella flexneri: 6 tipuri (1 – 6), 10 subtipuri (1a,
1b, 2a, 2b, …, 5a, 5b), 2 variante (x, y)
• Shigella boydii: 18 tipuri (1 – 18)
• Shigella sonnei (2 tipuri: S, R)
 Recoltarea produselor patologice

 Produs patologic: Materii fecale (emisie

spontana, sondaj recto – sigmoidian cu
sonda Nélaton
 cât mai aproape de debutul bolii
 inaintea instituirii tratamentului
antimicrobian
 Coprorecoltor steril cu mediu de transport:
- Cary - Blair
 Examenul microscopic din produs
patologic

- oferă informatii importante pentru

diagnosticul diferential al
enterocolitei
- preparatul nativ între lamă si lamelă
→ polimorfonucleare, eritrocite
- poate evidentia chiste sau trofozoiti
de Entamoeba histolytica (exclude
dizenteria bacilara)
 Coprocultura
Izolarea:
- Medii de cultură selective si
diferentiale pentru enterobacterii:
* Drigalski
* Levin
* MacConkey
* Leifson (ADCL)
* Istrate-Meitert
* Hektoen
 Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram-negativ
 Proprietăţi de cultură

 Colonii S sau R
 Lactozo - negative
 Identificarea preliminara
 caracteristicile biochimice: TSI, MIU,
MILF, Citrat: lactozo (-), nu produce gaz
din fermentarea glucozei, nu produce H2S,
imobil, ureaza (-), indol (+/-),
lizindecarboxilaza (-),
fenilalanindezaminaza (-), citrat (-).
 caracteristicile antigenice (tiparea
serologica):
permit clasificarea de grup, de tip (ex.: S.
disenteriae, S.flexneri etc.).
 Patogenie
 Shigella este agentul dizenteriei bacilare
(shigelloză)
 Ag. de suprafata permit atasarea non –
receptor specifica, modificarea citoscheletului,
endocitarea bacteriei, apoi diseminarea in
submucoasa unde produc necroze –
patogenitate de tip invaziv.
 Exotoxinele – sunt, de asemenea implicate
(ex.: toxina Shiga, produsa de S. dysenteriae
blocheaza sinteza proteica, prin efect citotoxic
asupra endoteliului capilar determina
complicatiile vasculare si producerea Sdr.
hemolitic – uremic din shigeloze).
 Manifestări clinice
 se manifestă prin: colici abdominale
severe, varsături, tenesme si scaune
caracteristice muco - sanguinolente.
 rareori, caracter invaziv
 complicatii extraintestinale:
tulburari neurologice, sdr. hemolitic
– uremic, artrita reactiva. Aparitia
lor depinde de virulenta tulpinilor.
 Epidemiologie:
 Shigella este un patogen specific uman
 se transmite pe cale fecal - orală, asociata
intotdeauna cu un nivel igienico – sanitar
scazut
 insectele (mustele) sporesc potentialul
epidemigen estival
 transmisia hidrica este importanta
 dezastrele naturale si razboaiele au fost
frecvent asociate cu izbucniri epidemice de
dizenterie.
 Teste de patogenitate

Testul Sérèny (testul

keratoconjunctivitei):
- poate confirma caracterul de

invazivitate al Shigellelor izolate;

- acest test nu se foloseste în mod
uzual.
- o picătură cu Shigelle invazive
izolate
depusă în corneea unui cobai (porc
de Guineea), va produce kerato-
conjunctivite severe în câteva zile,
prin invazie la cornee, care se
vindecă complet în 2 - 3 săptămâni.
 Tratament

 se face în functie de sensibilitatea la

antibiotice, conform antibiogramei
difuzimetrice Kirby – Bauer, efectuata dupa
standardul CLSI.
 Genul Salmonella
peste 2200 serotipuri

Infecţii (salmoneloze):
• Febra tifoidă – S. typhi
• Febra paratifoidă – S. paratyphi A, B
• Toxiinfecţii alimentare şi enterite (copii)
S. typhymurium
S. enteritidis
S. paratyphi B
S. panama
• Stări septico - piemice
S. paratyphi C
S. choleraesuis
 Caractere generale:
• bacili Gram – negativ
• mobili (flageli peritrichi)
• lactozo – negativi
• identificarea antigenelor O, H, Vi →
reacţii de aglutinare
 Salmoneloze majore
 febra tifoidă si paratifoidă determinate de bacilul tific
si paratific - afectează exclusiv omul,
 omul si animalele sunt responsabile de poluarea
solului, a apelor reziduale, apelor de suprafata, in care
pot supravietui luni si chiar ani (in sol)
 se transmit pe cale fecal - orală, apă contaminată,
 intensificarea comertului si a calatoriilor la mari
distante, migratiile populationale, industrializarea
alimentatiei si a cresterii animalelor de consum (porci,
pasari) in mari colectivitati consumatoare de hrana cu
adaosuri proteice deseori contaminate (fainuri
furajere de carne, oase, sange) au contribuit esential
la raspandirea larga a serovarurilor si totodata la
cresterea morbiditatii prin salmoneloze.
 factori sezonieri si clima calda favorizeza, in conditii
precare de igiena, nivelul morbiditatii
 Manifestari clinice
Febra tifoida

 S1: letargie, febră, dureri, constipatie;

 S2: febră mare, abdomen dureros,
rozeole tifice, diaree,
hepatosplenomegalie.
 Salmoneloze minore

 au o incidentă crescută în ultimul timp,

manifestându-se prin toxiinfectii
alimentare
 I loc in etiologia toxiinfectiilor alimentare
 Cauze: ingerarea de carne, lapte, ouă
infestate cu specii de Salmonelle: S.
typhimurium, S. anatum, S. enteritidis.
 TABLOU CLINIC
Simptomele (Dg. diferential cu infectiile
alimentare stafilococice) sunt:
• incubatie mai lungă de 12 – 48 de ore,

• febră,

• sindrom diareic

• stari septico - piemice

 Recoltarea produselor patologice

Febre tifo – paratifoide:

 S1: hemocultură
 S2: urocultură, coprocultură
Gastroenterite:
 coprocultură
 lichid de vărsătură
 alimente
Examenul microscopic din produs
patologic

Nu oferă informatii
relevante!
 Coprocultura
Izolarea:
- Medii de imbogătire:
- Bulion cu selenit acid de sodiu
- Medii moderat – selective, inalt -
selective si diferentiale:
- Leifson (ADCL)
- Istrate-Meitert
- SS
- Hektoen
- Wilson - Blair
 Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram -
negativ
 Proprietati de cultura

Colonii S
 Proprietati de cultura

Mediul Drigalski
Colonii lactozo -
negative
 Proprietati de cultura

Lactozo -
negativ
Mediul Levin
 Proprietati de cultura

Agar Mac
Conkey
 Identificarea
se bazează pe:
 caracteristicile morfologice: bacili gram - negativi,
mobili
 caracteristicile de cultură: colonii S, lactozo –
negative, transparente sau in culoarea mediului, cu
centrul negru (“ochi de pisica”)
 caracteristicile biochimice: Lactoza (-), H2S (+),
produc gaz in cantitate mica sau deloc din
fermentarea glucozei, mobile, ureaza – (-), Indol (-),
lizindecarboxilaza (+), fenilalanindezaminaza(-),
Citrat (+), rosu-metil (+).
 Diagnostic serologic indirect
reacţia Widal

 Sunt colectate 2 probe de sânge în

prima si a – 3 – a săptămână de boala.
 se identifică anticorpii specifici anti -
S. typhi, S. paratyphi A si B in serul
pacientilor, separat pentru antigenul O
(somatic) si H (flagelar) – prin reactii
de aglutinare directa in tuburi.
 se stabileste dinamica titrului de ac.
anti – O si anti – H.
 Tratament

 în functie de testul de sensibilitate la antibiotice

(antibiograma difuzimetrica Kirby – Bauer,
conform standardelor CLSI).
 este recomandat: Cloramfenicolul.
 Ampicilina si Trimethoprim
-sulfamethoxazolul sunt alternative cu efecte
secundare mai puţin severe.
 in ultima vreme, se descriu tot mai mult tulpini de
Salmonella spp. cu fenotipuri de rezistenta de tip
ESBL!
 Tema pentru studenti
 Cautati pe net imagini cu culturi de
Enterobacterii (Salmonella, Shigella).
 Incercati sa descrieti caracterele de
cultura particulare, metodele de
identificare biochimica si antigenica
pentru fiecare gen descris in aceasta
lucrare.
 Desenati in caietul de lucrari practice
coloniile si algoritmul de identificare!
 Tema va fi evaluata si punctata!