Genul Borrelia

Caractere generale

spirochete groase (3-20/0,3-0,5 m), cu spire laxe

i neregulate; mobile printr-un aparat flagelar periplasmic; pot fi colorate prin coloraia Giemsa sau Gram; pretenioase nutritiv, pot fi cultivate n condiii de microaerofilie pe medii speciale; pot determina infecii la mamifere i psri, transmise prin artropode hematofage; la om reprezint agenii etiologici ai febrelor recurente i ai bolii Lyme.

Agenii etiologici ai febrelor recurente

determin infecii sistemice caracterizate prin episoade

febrile separate prin perioade de afebrilitate; sunt cunoscute dou forme majore de boal: - febra recurent epidemic care evolueaz numai la om, determinat de B.recurrentis transmis de pduchele de corp; - febre recurente endemice determinate de mai multe specii (B.hispanica, B.persica, B.duttonii, B.hermesii, B.parkeri etc), transmise ocazional la om de la roztoare prin cpue Ornithodoros; caracterul recurenial al acestor infecii este explicat de variaia antigenic sub presiunea de selecie a rspunsului imun; diagnosticul etiologic este bazat pe examenul microscopic al frotiului din snge; tratament etiotrop cu tetracicline sau macrolide; nu dispunem de o profilaxie specific.

Borrelia burgdorferi sensu lato

include 11 genospecii din care 3 sunt ntlnite n Europa: B.burgdorferi sensu stricto (Europa, SUA), B.garinii, B.afzelii (Europa, Japonia); determin boala Lyme, transmis la om de la animale i psri slbatice sau domestice prin cpue Ixodes, care evolueaz n trei stadii, dup o incubaie de 3-30 zile: - primar, localizat: eritem migrator; Manifestri tardive: - secundar , sistemic (dup aprox 2 ani) cu: manifestri neurologice (meningit limfocitar, encefalit, paralizie de nerv facial) i cardiace (tulburri de conducere atrioventricular, miopericardite, insuficien cardiac congestiv) - zile-sptmni; - teriar, cronic: artralgii , artrit, acrodermatita atrofic (dureaz luni-ani); nu prezint variaie antigenic;

microscopia nu este util (numr mic de bacterii in leziuni); cultivare: leziunil einiial esunt patognomonice, iar pentru cele secundare, cultivarea nu est esensibil; diagnosticul este serologic: IgM i IgG n ser i LCR prin IF, ELISA + Western-Blot; IgM apar in 2-4 spt, maxim 6-8 spt, dispar dup 4-6 luni de la apariia eritemului migrator (pot persista in formele persistente) IgG, cresc mai trziu, maxim, 4-6 luni (prezeni in formele tardive) Ac in LCR neuroborelioz tratament etiotrop cu doxiciclin sau amoxicilin, in stadiile precoce; alternativa: cefuroxima adm. parenteral de ceftriaxon, doxiciclin sau amoxicilin, previne complicaiile; n general: peniciline, cefalosporine, macrolide, tetracicline; n studiu un vaccin purificat (OspA - lipoprotein de suprafa).

 Rezervor: oareci, cpue, cprioare Vectori: cpue Ixodes, (larevele se infecteaz n cursul unui prnz) sanguin pe oarece Omul: gazd accidental (nimfa dezvoltat din larv ia un al 2-lea prnz sanguin) Cprioara gazd natural pentru cpue adulte, omul infectat accidental al 3-ea prnz (transformarea nimfei, n cpu adult).

Genul Leptospira

Caractere generale

spirochete fine (5-15/0,l0-015 m) cu spire strnse i regulate, terminate n crlig la unul sau ambele capete; pot fi vizualizate la microscopul cu fond ntunecat, prin IF sau impregnare argentic; mobilitatea asigurat de 2 flageli periplasmici; tulpinile patogene cultiv lent pe medii lichide mbogite cu ser, n aerobioz la temperatura de 28-300C; pe baza caracterelor fenotipice sunt recunoscute dou specii:

- L.interrogans (semn de intrebare), cu numeroase

serovaruri (218), care include tulpini patogene pentru om sau animale; - L.biflexa (ncurbat de dou ori) corespunde tulpinilor saprofite.

Leptospira interrogans
prezent n apele de suprafa poluate cu urina gazdelor de

ntreinere (n special roztoare la care infecia este endemic) sau a gazdelor de amplificare (animale domestice); sensibile la desicaie, lumina solar, temperaturi extreme, pH acid sau dezinfectante uzuale; posed Ag cu specificitate de gen, grup sau tip; cele mai frecvente serogrupe: australis, autumnalis, sejroe, canicola, grippotyphosa, icterohaemorrhagiae, pomona; pot determina mbolnviri sistemice la om, frecvent cu caracter profesional, poarta de intrare fiind mucoasele sau tegumentul;

Factori de virulen
Virulena este caracter de tulpin Gradul de ncovoiere la unele tulpini din serogrupurile sejroe i canicola. Factorul de virulen Vi: la suprafaa unor tulpini icterohaemorrhagiae i pomona. Multiplicare rapid, leziuni ale vaselor mici, manifestri grave: meningit, disfuncii hepative i renale, hemoragii.

prezente n snge, LCR i mai tardiv n urin, determin manifestri clinice deosebit de polimorfe, prin afectarea diferitelor organe (SNC, ficat, rinichi, pulmon, tub digestiv); Microscopie pe fond ntunecat: nespecific i puin sensibil. Cultivarea: teoretic se pot izola din snge i urin (practic nu se folosete datorit prezenei inhibitorilor nespecifici din snge i urin); diagnosticul etiologic este n special serologic: reacia de aglutinare microscopic; Serul pacienilor reacioneaz cu leptospire vii (laboratoar de referin!) Titru semnificativ: peste 100 (poate ajunge si la 25.000) Teste de triaj: ELISA, aglutinare pe lam, hemaglutinare indirect (antigene ale tulpinilor saprofite).

tratament etiotrop: peniciline, tetracicline, fluorochinolone; Forme grave: penicilin sau ampicilin i.v. Oral (forme mai puin severe): doxiciclin, ampicilin, amoxicilin. Gazde de ntreinere (obolan, oarece, porc), accidentale (om) i de amplificare (animale domestice vite, porci, cini). PI: piele lezat minim, mucoasa nasal, conjunctiva; digestiv (hipoaciditate, consum de carne insuficient prelucrat sau ap contaminat); profilaxie specific prin vaccinarea animalelor domestice i a celor de companie. Chimioprofilaxie la contaci: doxiciclin.

Familia Mycoplasmataceae

Caractere generale

include dou genuri de interes medical:

Mycoplasma i Ureaplasma; sunt cele mai mici microorganisme cu posibiliti de sintez, capabile s cultive pe medii de cultur cu aport de steroli; sunt lipsite de capacitatea de sintez a peretelui celular, avnd drept consecine:

- mare plasticitate morfologic; - capacitatea de a trece prin membrane filtrante (pori de

450-200 m); - rezisten natural la antibiotice care acioneaz prin inhibarea sintezei peretelui celular; - cultivarea inhibat de prezena Ac specifici.

Mycoplasma pneumoniae

specie cu multiplicare lent pe medii complexe cu steroli i glucoz, n condiii anaerobe; pe medii agarizate formeaz colonii muriforme; identificare pe criterii biochimice i inhibarea creterii prin Ac specifici; patogen primar pentru om, cu tropism pentru tractusul respirator; ader la celule prin proteina P1 i produce un factor
inhibitor al catalazei, ceea ce conduce la ciliostaz i cilionecroz; determin angine, traheobronite i pneumonie atipic primar, uneori asociate cu manifestri clinice prin mecanisme autoimune: anemie hemolitic, meningite, polinevrite, miocardite, artrite etc; diagnosticul este n special serologic: Ac specifici IgM prin ELISA; tratament etiotrop cu: tetracicline, macrolide, fluorochinolone.

Micoplasme genitale

M.genitalium, M.hominis, U.urealyticum colonizeaz mucoasa uro-genital dup pubertate, odat cu

debutul activitii sexuale; sunt implicate n uretrite non-gonococice la brbat, sindrom uretral la femeie, pielonefrite, bacteriemii postpartum sau postabortum, vaginoze, infecii neonatale etc; diagnosticul este bacteriologic: - calitativ n cazul prelevatelor necontaminate; - cantitativ ( 104 UFC) n uretrite sau infecii urinare; tratament etiotrop cu tetracicline, fluorochinolone; fa de U. urealyticum sunt active i macrolidele; msuri de profilaxie nespecific, comune pentru toate infeciile cu transmitere sexual.

Familia Chlamydiaceae

Caractere generale

include dou genuri cu 3 specii de interes medical: genul Chlamydia i genul Chlamydophila; se deosebesc de restul bacteriilor prin:
intracelular);

- lipsa peptidoglicanului din structura peretelui celular de tip gram-negativ; - incapacitatea de sintez a ATP (parazitism energetic strict

prezint un ciclu reproductiv particular n care apar

dou forme diferite morfologic:

- corpi elementari cu aspect cocoid (300 nm ), inactivi metabolic, forma extracelular infecioas; - corpi reticulai (0,8-1,5 m ) metabolic activi, care se

LPS este un Ag comun speciilor iar proteina major

din ME are epitopi cu specificitate de specie.

divid i formeaz o microcolonie (incluzie) n citoplasma celulei parazitate;

Chlamydia trachomatis

specie patogen primar pentru om; cultiv pe culturi de celule i n sacul vitelin al embrionului de gain, incluziile intracitoplasmatice care conin glicogen putnd fi evideniate cu Lugol, coloraia Giemsa sau prin IF; sunt 15 serovaruri care determin difereniat: - trahom (serovarurile A, B, Ba, C); frtratament orbire; - uretrite, endocervicite i complicaii ale acestora, conjunctivite cu incluzii, infecii neo-natale (serovarurile D-K), singurele manifestri ntlnite n zona noastr geografic; - limfogranulomul venerian sau limfogranulomatoza venerian (serovarurile L1-L3); diagnosticul este n special direct: microscopic, izolare pe culturi de celule, metode moleculare; tratament etiotrop: tetracicline, macrolide, fluorochinolone.

Chlamydophila pneumoniae

specie patogen primar pentru om, cu tropism pentru

tractusul respirator; determin faringite, sinuzite, otite medii, traheobronite, pneumonii atipice primare i frecvent infecii subclinice; diagnosticul de laborator este n special serologic: Ac specifici IgM sau IgG n dinamic, prin microimunofluorescen; tratament etiotrop: tetracicline, macrolide, fluorochinolone.

Chlamydophila psittaci

specie cu patogenitate natural pentru psri i animale; tulpinile aviare pot accidental determina infecii pe cale

respiratorie la om ornitoz sau psitacoz; poate cauza pneumonii atipice severe, uneori cu evoluie sistemic; diagnostic i tratament asemntor cu specia precedent.

Rickettsiile
Definiie: Rickettsiile sunt mici microorganisme pleomorfe (coci, scuri bacili - 300/600 m forme filamentaose) gzduite de artropode; patogene pentru om i vertebrate. Compoziia peretelui (peptidoglican cu acid muramic i diaminopimelic) le aseamn cu bacteriile gram-negativ. Se divid ca bacteriile, iar n culturi de celule timpul de generaie este de 8-10 ore, la 34C.

 Sunt microorganisme parazite intracelular ; chiar dac au capacitii de biosintez independete i au metabilism energetic nu pot fosforila glucoza ca substrat energetic, folosind metabolii intermediari ai gazdei. Cultiv n sacul vitelin; multe tulpini cultiv i n culturi de celule.

Taxonomie:
In familia Rickettsiaceae, funcie de spectrul de gazde, s-au diferenait trei triburi, 2 dintre ele fiind implicate n patologia vertebratelor:

(a) Tribul I Rickettsiae, cu specii patogene pentru om i specii nrudite cu ele. Cuprinde trei genuri : Rickettsia; Bartonella (denumire anterioar Rochalimaea); Coxiella
Coxiella este singura rickettsie cu transmitere respiratorie

Genul Coxiella

Agentul etiologic al febrei Q sau febra Query a fost identificat prima dat n1935, n Australia. C. burnetii, agentul etiologic al febrei Q a fost iniial clasificat n familia Rickettsiaceae deoarece este un microorganisms obligator intracelular; d.p.d.v. genetic este ns mai asemntor cu speciile de Legionella.

Se deosebete de genul Rickettsia antigenic i prin rezistena deosebit n mediu conferit de endosporii pe care i formeaz cultiv preferenial n vacuole citoplasmatice nu prezint antigen solubil nu prezint efect citotoxic

 Cultivarea prelungit in vitro duce la variaii ale structurii antigenice, cunoscute ca variaia de faz, similar variaiei S-R. Organismele n faz I sunt reprezentate de tulpini izolate din natur, n timp ce tulpinile n faz II sunt obinute prin subcultivri repetate n laborator i sunt avirulente pentru animalele de laborator. Organismele virulente n faz I izolate de la pacieni cu endocardit pot fi diferite genetic i structural de cele izolate de la pacieni cu febr Q.

 Spre deosebire de alte specii de Rickettsia, C. burnetii poate prezenta plasmide : s-au descris pn n prezent 2 plasmide distincte i o secven ADN omolog integrat n ADN-ul cromozomal. Una dintre aceste secvene ADN a fost asociat endocarditelor subacute, iar alta, cu cazuri de endocardite i avort la animale, iar cea de-a treia structur enumerat a fost asociat cazurilor de boal auto-limitat.

Patogenie:
infecia la om se transmite prin inhalarea aerosolilor contaminai coninnd C. burnetii. De la nivel pulmonar, infecteaz macrofagele alveolare determinnd o scurt rickettsemie. Multe infecii sunt asimprtomatice sau subclinice. Perioada de incubaie este de 2 spt. sau mai mult. S-au descris pe lng manifestri febrile nespecifice cu alur gripal i : * pnumonii interstiiale (tifosul pulmonar), * hepatite, * meningo-encefalite i * endocardite.

 Infeciile cronice sunt consecina persitenei bacteriei la nivelul valvelor cardiace sau n alte sedii. Cazurile de endocardit subacut sunt rare, (favorizate de leziuni cardiace pre-existente) dar potenial fatale i se pot nsoi de: glomerulonefrit, osteomielit sau de afectarea SNC. Reactivarea unei infecii latente este urmat, la femeia gravid de eliminarea odat cu placenta sau de avort. Imunitatea post-infecioas pare solid i de durat.

Diagnostic
Direct: dificil i dublat de riscul crescut de infeciozitate ; se prelev probe de snge n perioada febril. Cultitiv pe ou embrionate (sacul vitelin) dup adaptarea pe gazde vii (e.g. cobai sau oareci) . Indirect: evidenierea Ac-lor specifici prin RFC sau IF.

. Ac fixatori de C (cu antigen n faz II) sunt decelai dup 8-10 zile, ating un maxim dup spt. 4 de boal (sau 12 dup unii autori) dup care scad lent, persistnd ani de zile. Titruri joase ( 8- 16) devin semnificative dac se nregistreaz dinamica semnificativ. Atenie la activitatea anticomplementar a serului. In endocardita cu Coxiella, suspectat ori de cte ori hemoculturile pe medii uzuale rmn negative, titrurile n testul de microaglutinare cu antigen n faz I, ating valori de 200. Pentru IF se remarc creterea titrului Ac, anterior celor din RFC (aprox. spt. 4). Variante: IgM semnificativ> 64 IgG > 256

Tratament
Sunt indicate: tetraciclinele n asociere cu rifampicina, in forme grave; Altele: cotrimoxazolul, cloramfenicolul. In endocardit se recomand fie asocierea tetra + cotrimoxazol , lincomicina sau rifampicina.
In infeciile cronice doxiciclina reduce durata febrei.

Toate antibioticele testate au doar efect "static" i, de aceea, C. burnetii a mai fost detectat dup luni-ani de zile de tratament continuu. Pe lng tratamentul cu antibiotice unii autori recomand i monitorizarea status-ului hemodinamic sau/i nlocuirea valvelor afectate.

C. burnetii infecteaz macrofagele, supravieuiete in fagolizozom, unde se multiplic. Bacteria este eliberat prin liza celulei si fagolizozomului.

Epidemiologie
Este o infecie prezent pe toate continentele (cu excepia Antarcticii). Sursa de infecie o reprezint animalele infectate (ungulatele domestic : bovine, ovine, carpine sau roztoare). Infecia se trasmite trans-ovarian la cpue. Fecalele lor infectate pot conine un numr mare de microorganisme, dei prezena lor nu este indispensabil persistenei infeciei n natur. Transmiterea infeciei este asigurat i de forma lor de rezisten, endosporii, care poate contamina pulberile, aerosolii sau latele. Pasteurizarea laptelui poate fi ineficient.

 Boala apare sporadic sau epidemic, afectnd mai ales ngrijitorii de animale. Personalul expus acestei infecii trebuie vaccinat. Vaccinuri: corpusculare, inactivate sau care conin componente antigenice purificate. Vaccinuri obinute din antigene n faz I pot genera un rspuns superior celor n faz II. Infecia este dificil de controlat datorit persistenei ca infecie cronic n rndul animalelor i datorit abilitii de a supravieui pentru mult timp n mediul nconjurtor.

Coxiella burnetii (rezumat)

singura specie a genului, clasificat iniial printre rickettsii; bacterie cu parazitism obligatoriu intracelular, se deosebete

de rickettsii prin rezistena particular n mediul extern; se coloreaz prin metoda Gimenez, Giemsa, Macchiavello; prin subculturi n sacul vitelin al embrionului de gin, sufer o trecere de la faza I virulent la faza II lipsit de patogenitate, asemntor cu variaia S-R a bacililor gramnegativi din familia Enterobacteriaceae; transmis de la vite sau oi la om pe cale respiratorie sau digestiv; poate determina infecii acute (pneumonii interstiiale) sau infecii cronice (endocardite) febra Q; diagnosticul etiologic este serologic: Ac specifici fa de Ag n faz II n infecii acute i fa de Ag n faz I n infecii cronice; tratament etiotrop cu tetracicline, fluorochinolone.

 (a) Tribul I Rickettsiae, cu specii patogene pentru om i specii nrudite cu ele. Cuprinde trei genuri : Rickettsia; Bartonella (denumire anterioar Rochalimaea); B. quintana, B. henselae (boala zgrieturii de pisic) Coxiella (b) Tribul Ehrlichieae cu specii patogene pentru vertebrate (mai ales animale domestice). Patogene pentru om: Erlichia sennetsu i E. cannis. (c) Tribul Wolbachiae

 Genul Rickettsia cuprinde trei grupe de specii; diferenierea s-a realizat pe baza caracterelor biologice (localizare n celula gazd, structur antigenic) i clinicoepidemiologice: Grupul tifos cu R. prowazekii i R. typhi (sinonim R. mooseri). Grupul febrelor ptate cu R. rickettsii, R. conorii, R. australis, R. siberica i R. akari. Grupul tifosului de lstri cu R. tsutsugamushi (Orentia).

Habitat
Gazda natural: verterbratele, inclusiv omul; transmitere prin ectoparaziii hematofagi. Unele specii se transmit n organismul artropodului vector transovarian, ntre generaii. Dintre ele, doar R. prowazekii i mbolnvete gazda nevertebrat (pduchele de corp Pediculus humanus varianta corporis) care moare dup 1-3 sptmni, fr a transmite infecia la descendeni. Excepii mai sunt: Bartonella quintana, omul este singura gazd; Coxiella burnetii : datorit endosporului rezistent, poate fi transmis nu numai prin intermediul cpuelor ci i prin elemente contaminate ale mediului sau prin lapte.

Patogenitate
Sunt microorganisme invazive iar suspensiile vii de Rickettsia au i efect toxic. Efectul toxic lipsete la Coxiella i Bartonella. Se multiplic n endoteliul celulelor de la nivelul vaselor mici deteminnd lezini de vasculit. Leziunea caracteristic, rspndit difuz, este cea de endotelit trombozant cu inflamaie periadventiial a vaselor mici (nodulul Popov-Frankel). Leziunile vasculare apar evidente la nivelul tegumentului; sunt afectate ins i organele interne. La nivel cerebral apar agregate de limfocite, PMN i macrofage, n asociere cu leziunile vaselor de la nivelul substanei cenuii.

Rickettsia dispoziie intracitoplasmatic

Imunitate
Infecia, la om, este urmat de instalarea imunitii pariale la reinfecia din surse externe, cu posibiliti de reactivare (e.g. boala Brill - Zinsser).

 Rickettsiozele omului evolueaz ciclic cu febr, stare tific i exantem variabil ca aspect, funcie de specia infectant. Grupul tifos Tifosul exantematic epidemic, determinat de R. prowazekii este o infecie sistemic cu stare de prostraie i febr ce dureaz aprox. 2 sptmni.
Boala este mai sever la pacieni peste 40 de ani iar reactivarea infeciei latente este cunoscut ca boala Brill -Zinsser.

Rickettsiile pot persista pentru muli ani la nivelul nodulilor limfatici fr siptomatologie clinic manifest. Rickettsiile izolate de la aceti pacieni seamn cu formele clasic cunoscute, deci i omul este rezervorul agentului etiologic. In timpul epidemiilor rata mortalitii tifosului exantematic variaz ntre 6-30%. Tifosul endemic, determinat de R. typhi, seamn d.p.d.v. clinic ce cel epidemic, dar este de severitate medie, i rar fatal, la btrni.

Grupul febrelelor ptate

R. rickettsii este agentul etiologic al febrei ptate a Munilor Stncoi - cea mai grav form; R. conorii este agentul etiologic al febrei butunoase; R. australis - tifosul de cpu de Queensland; R. sibirica - tifosul de cpu Nord-Asiatic; R. akari - determin rickettsioza variceliform (seamn cu varicela).

 Grupul tifosului de lstri R. tsutsugamushi (Orentia tsutsugamushi ) este agentul etiologic; seamn cu tifosul exantematic.

 Febra de tranee, determinat de Bartonella quintana (Rochalimea quintana) se caracterizeaz prin: cefalee, febr, dureri, transpiraii, rcirea extremitilor i rash. Singura cultivabil. Recderile sunt posibile. B henselae - boala zgrieturii de pisic: limfadenopatie cronic rgional (n vecintate zgrietur, muctur....); poate fi transmis i de purice. Exist diagnostic serologic (IF indirect, ELISA). Nu pare s rspund la antibiotice; se vindec de la sine.

Inflamaia nodulilor limfatici

Bartonella henselae colonii pep geloz snge

Bartonella henselae gazda natural

 Bartonella bacilliformis (determin boala Carrion), cu o faz bacteriemic, (sau febra Oroya) i o faz eruptiv (veruca peruan) [verruga peruana sau Peruvian wart]) sau anginomatoza bacila.

Anginomatoza bacilar

 Rickettsioza sennetsu este determinat de Ehrlichia sennetsu i se manifest clinic prin febr i limfadenopatii postauriculare i cervicale, cu limfocitoz. E. chaffeensis: ehrlichioza uman granulocitar (EUG) (mortalitate 7-10%) localizarea bacteriei n PMN.

 Detectarea morulelor in sngele periferic este caracteristic (aglomerarea de bacili gram-negativ in vacuole intracitoplasmatice, in monocite, macrofage, PMN).

Ehrlichia - morula

Diagnostic de laborator Izolarea este dificil iar contagiozitatea i gravitatea rickettsiozelor restrnge acest diagnostic numai n laboratoare de referin. Produse patologice In funcie de forma de boal, complicaii i scop se prelev: snge, n primele zile de boal. Dup ziua a 7-a (pn n ziua 12) se tenteaz izolarea lor din sngele integral sau din cheagul sanguin mojarat care se inoculeaz n sacul vitelin, oarece sau cobai; biopsia tegumentar, prelevat de la pacieni ntre zilele 4 - 8 de boal poate evidenia prin IF rickettsiile in cazul febrei ptate a Munilor Stncoi; artropode capturate dup hrnirea cu snge pe pacieni suspectai de rockettsioz sau de pe animale din focarul de infecie (cpue de pe cini din locuina pacienilor cu febr butunoas, de pe animale n focare de febr Q sau febre ptate). sput, exsudat pleural, LCR, probe necroptice (valvule cardiace, esut hepatic) de la pacieni suspectai de febr Q; de la animale, din focarul de infecie: placent, lapte, urin, cpue de pe animale;

 Microscopie direct: pe amprente sau seciuni histologice din probe bioptice sau necroptice rickettsiile apar ca fini bacili sau cocobacili, intracelulari, albatri purpurii n coloraia Giemsa sau roii (pe fondul albastru al citoplasmei) n coloraia Macchiavello. IF - biopsia tegumentar i * evidenierea C. burnetii pe seciuni ale valvulelor cardiace de la pacieni decedai cu febr Q. * evidenierea lor pe frotiuri din hemolimfa cpuelor infectate.

 Izolarea i identificarea inocularea intraperitoneal, la animalele receptive, a prelevatelor necontaminate; inocularea se face la patul bolnavului; dac intervalul de timp se prelungete peste o or, se congeleaz proba la - 25 C. probele contaminate (sput, urin, lapte, suspensii de placent) se inoculeaz dup tratarea cu penicilin;

 R. quintana: inoculare pe medii acelulare: geloz cu snge de cal. Dup 12-14 zile de incubare, la 37 C, 5% CO2, apar microcolonii n care microorganismul este identificat prin coloraie Gimnez i antigenic, prin RFC.

 Diagnosticul serologic (1) Metode nespecifice: (a) reacia de aglutinare; cu antigen Proteus OX (R. Weil-Felix i R. Kudike-Steuer) (2) Metode specifice: (a) RFC cu antigen rickettsian total (b) R. de microaglutinare - utilizeaz antigene

corpusculare purificate; este mai sensibil dec\t RFC. La pacienii cu endocardit cu C. burnetii (care au hemoculturi negative repetat) titruri de cel puin 200, cu antigen n faz I, sunt semnificative.

(c) IF indirect (d) ELISA

ELISA i IF indirect cu antigen C. burnetii n faz II depisteaz rapid, cu mare sensibilitate, anti IgM pentru diagnositcul febrei Q, pe probe unice de ser.

Tratament
Rickettsioze: doxiciclina (de elecie); cloramfenicol (la gravide si copii sub 8 ani). Bartonella: eritromicina, doxiciclina sau genta-, n forme severe. Ehrlichia: tetracicline.

 Rickettsiile sunt natural rezistente la multe antibiotice (ex. R. rickettsii este rezistent la beta-lactamine, aminoglocozide, eritromicin). Sulfonamidele, n general, agraveaz evoluia rickettsiozelor.