PROTIDE

DEFINIIE Protidele sunt substane organice macromoleculare complexe care prin hidroliz total pun n libertate aminoacizi (conin n molecul grupri aminice - NH2 i grupri carboxilice COOH) Protidele complexe conin n afar de aminoacizi i alte componente - denumite grupri prostetice (ex.glucide, lipide, acizi nucleici, acid fosforic, metale,colorani) Ca bioelemente protidele conin C, H, O i N, i n plus S i P, (mai frecvent) uneori Fe, mai rar Cu, Zn, Co, Mg, Cl, I i Br. Azotul este bioelementul caracteristic protidelor i se gsete n proporie medie de 16%. Prin dozarea azotului se poate determina indirect: Proteina brut % = (cantitatea de azot) N x 100/16 = 6,25 x N Proteos greac = cel dinti - sunt cele mai importante componente structurale i funcionale ale materiei vii - constituie substratul material al tuturor proceselor vieii. - alctuiesc din punct de vedere cantitativ partea cea mai nsemnat a combinaiilor organice existente n organismele vii, i cea mai variat clas de compui, numrul reprezentanilor lor posibili poate atinge cifre astronomice ROLUL PROTIDELOR Structural - intr n structura tuturor celulelor i esuturilor organismelor vii - constituienii principali ai nucleului i protoplasmei (proteine structurale) plastic - Raportat la subst. uscat n organismul uman i animal protidele sunt 62-70%, la plante 2-35% , la microorganisme 80-90% 1. particip la absolut toate reaciile chimice eseniale pentru funcionarea normal Funional a celulelor vii - biocatalizatorii (enzime) 2. particip la contracia muscular proteine contractile 3. particip la diviziunea celular - acizii nucleici -multiplicare 4. asigur transportul unor componente vitale n organism (oxigen, fier, acizi grai, medicamente etc.) -proteine de transport 5. reacii de autoaprare fa de agenii patogeni - imunoglobulinele anticorpi
proteine de aprare 6. 7.

reglarea proceselor metabolice hormonii- proteine cu rol de reglare depozitarea anumitor elemente, cum ar fi fierul - proteine de depozitare ex. feritina
i hemosiderinei din ficat i splin

Energetic

8. particip la hrnirea embrionilor proteinele din ou 9. particip la alimentarea puilor mamiferelor proteinele din lapte 10. regleaz presiunea osmotic, permeabilitatea membranelor, echilibrul electrostatic i acido-bazic - proprieti coloidale i caracter amfoter 11. rol esenial n recepionarea, prelucrarea i acumularea informaiilor prin acizii nucleici - ADN; ARN - nu se remarc n mod deosebit la protide coeficientul calorigen este de 4,5 kcal pentru 1 g proteine

CLASIFICARE n clasa protidelor intr toate substanele naturale care prin hidroliza total elibereaz aminoacizi

Amino acizi Peptide proteide inferioare Proteide proteide superioare PRO TIDE

(monoprotide) substane simple monomoleculare care nu hidrolizeaz Oligopeptide conin 210 aminoacizi Polipeptide Holoproteide (proteide simple) (proteine)
(holos=acelai fel)

-Dipeptide; Tripeptide -Tetrapeptide; Decapeptide; Conin un numr mai mare de 10 aminoacizi - Histone Globulare - Protamine; - Prolamine; - Gluteine; - Globuline; -Albumine;
(structur strns n ghem, solubile n ap ; n lichidul celular)

prin hidroliz pun n libertate numai aminoacizi Morfologic - globulare - fibrilare Au aminoacizi n secvena specific Heteroproteide (proteide complexe) neomogene) (heteros = diferit) protein + grupare .prostetic

Fibrilare - Elastine, (scleroproteine) - Keratine - Colagene

(structur liniar, subst.de susinere, de rezisten mecanic, insolubile ; se gsesc n pr, ln, mtase natural)

- Fosfoproteide; (funcie de gr. prostetic) - Glicoproteide; - Metaloproteide - Lipoproteide; - Cromoproteide - Nucleoproteide.

AMINOACIZII NATURALI - Exist cca. 400 de aminoacizi identificai pn n prezent n natur, dintre care 20 intr n mod frecvent n structura proteidelor naturale vegetale i animale aminoacizi proteinogeni. - n stare liber aminoacizii se gsesc n germenii seminelor de leguminoase, n sucuri de rdcioase i fructe STRUCTUR l NOMENCLATUR Aminoacizii snt compui organici cu funciuni mixte care conin n molecul cel puin o grupare aminic bazic i o grupare carboxilic acid. NH2 COOH - exist -, -, -, - i -aminoacizi.(dup poziia gruprii aminice fa de gruparea carboxilic) - -aminoacizii formeaz componentele structurale de baz ale protidelor. Denumirea: prefixul amino se adaug la denumirea acidului corespunztor cu precizarea poziiei, felului i nr. gruprilor funcionale din molecul Exemplu: acid --aminoacetic (glicocol) acid --aminopropionic (alanina) acid --amino--hidroxipropionic (serina) Exist i denumiri vulgare (comerciale) ale aminoacizilor, legate de proveniena lor din esuturi vegetale sau animale Formula general a -aminoacizilor poate fi reprezentat astfel:
COOH H2N C R H R sau H C NH 2 COOH COOH H C NH 2 R R sau H2N C H COOH

-aminoacid din seria L

-aminoacid din seria D

R poate fi radical alifatic, aromatic sau heterociclic. Izomerie: - de poziie: poziia gruprii NH2 definete (ca i la glucide) seria D (cnd NH2 este n partea dreapt a lanului carbonat al moleculei) i seria L (cnd NH2 este n partea stng a lanului carbonat al moleculei). Izomerii din seia L au importan biologic i pot fi asimilai de organismele superioare. Izomerii seriei D au fost gsii n unele antibiotice i n proteinele unor tumori maligne. - Izomerie optic: exist izomeri levogiri l(-), izomeri dextrogiri d(+), amestec racemic () amestec echimolecular al celor doi antipozi optici. Toi aminoacizii sunt optic activi datorit prezenei atomilor de C asimetrici din molecul (excepie face glicocolul i beta alanina) Rspndire : Aminoacizii se gsesc n toate organismele vii ele fiind crmizile de baz din care se formeaz poliprotidele. n stare liber se gsesc aproape n toate organele plantelor. n cantitate mai mare se gsesc n seminele de leguminoase, n sucurile plantelor rdcinoase i n numeroase fructe. CLASIFICAREA AMINOACIZILOR dup criteruli biologic - sunt sintetizai numai de plante Aminoacizi eseniali - animalele i omul ii procur din alimente - au rol n creterea i dezvoltarea organismului - prin lipsa lor apar boli careniale Principalii aminoacizi eseniali: Aminoacizi leucina, valina, izoleucina, fenilalanina, treonina, metionina, lizina, triptofanul, arginina, histidina - pot fi sintetizai de organismele animale Aminoacizi Exemple: glicina (glicocol), alanina, cisteina, neeseniali tirozina, serina, acidul glutamic, acidul aspartic Tot dup criteriul biologic putem avea: aminoacizi proteici (care intr n structura proteinelor), aminoacizi neproteici (care nu intr n structura proteinelor), aminoacizi cetogenici (care pot fi transformai n cetoacizi cu rol important n metabolismul glucidelor) aminoacizi necetogeni (care nu pot fi transforrnai n cetoacizi Clasificarea dup criteriul chimic : Monoaminomonocarboxilici cei mai rspndii, caracter slab
acid

Aminoacizi alifatic i Amino acizi

Monoaminodicarboxilici caracter acid puternic, stabilesc

legtura metabolic ntre glucide i protide (ac.aspartic i glutamic)

Diaminomonocarboxilici au caracter bazic, se gsesc n

vegetale, precursori ai alcaloizilor (ex. arginina, ornitina)

Hidroxiaminoacizi conin i grupri hidroxilice (ex. serina) Tioaminoacizi conin i grupri sulfhidrice SH (ex. cisteina)

Aminoacizi ciclici

Aminoacizi aromatici conin ciclul aromatic (ex. fenilalanina,

tiozina)

Aminoacizi heterociclici conin n molecul un heterociclu

(ex.prolina, triptofanul, histidina)

AMINOACIZI ALIFATICI - structuri chimice Aminoacizii naturali se gsesc sub forma izomerilor seriei L Aminoacizi monoamino monocarboxilici (valina, leucina, izoleucina eseniali)
COOH COOH COOH COOH H2N CH2 H2N CH CH3 Alanin Acid - amino propionic H3C H2N CH CH CH3 H3C H2N CH CH2 CH CH3 Leucin Acid - amino izocapronic

Glicocol (glicin) Acid - amino acetic

Valin Acid - amino izovalerianic

Aminoacizi diamino monocarboxilici ( lizina, arginina - eseniali)

COOH COOH H2N H3C CH CH CH2 CH3 Izoleucin Acid -amino- -metil-valerianic Lizin Acid ,-diaminocapronic H2N COOH CH (CH2)4 NH 2 H2N CH (CH2)3 NH C NH Arginin Acid -amino- -guanidinvalerianic NH 2

Aminoacizi monoamino dicarboxilixi au caracter puternic acid

COOH H2N CH CH2 COOH Acid aspartic Acid -aminosuccinic H2N CONH 2 CH CH2 COOH Aspargin -amida acidului -aminosuccinic H2N COOH CH (CH2)2 COOH Acid glutamic Acid -aminoglutaric H2N CONH 2 CH (CH2)2 COOH Glutamin -amida acidului -aminoglutamic

Hidroxiaminoacizi (treonina esenial)

COOH H2N CH CH2 OH H2N

COOH CH HC OH Treonin Acid -amino- -hidroxi butiric

Serin Acid -amino- -hidroxi propionic

CH3

Tioaminoacizi (metionina esenial)

COOH Cistein Acid -amino- H2N -tiopropionic COOH CH CH2 SH H2N CH CH2 CH2 S CH3 Metionin Acid -amino-metiltiobutiric

AMINOACIZI AROMATICI (fenilalanina - esenial)

Fenilalanin Acid -amino-fenilpropionic COOH H2N CH CH2 H2N COOH CH CH2 Tirozin Acid -amino-hidroxifenilpropionic

OH

AMINOACIZI HETEROCICLICI (histidina, triptofanul eseniali)

H2C H2C

CH2 CH COOH

N H2C N H

C CH

CH2

CH NH 2

COOH

N H Prolin Acid pirolidin- -carboxilic N H

Histidin Acid -amino- -imidazol-propionic CH2 CH COOH NH 2 triptofan

Acid amino indolil propionic (indolil alanina) PROPRIETI FIZICE ALE AMINOACIZILOR sunt substane cristaline, incolore, cu gust dulceag amrui solubile n ap cu excepia cisteinei, cistinei, treoninei au proprieti optic active cu excepia glicocolului i -alaninei au temperaturi de topire i de fierbere ridicate (peste 2000C) n soluii apoase aminoacizii disociaz i prezint un caracter amfoter, adic se comport n funcie de pH, fie ca baze (n mediu acid), fie ca acizi (n mediu bazic). Gradul de ionizare a gruprilor carboxilice este mai mare dect al gruprilor aminice (ac. monoamino monocarboxilici au caracter slab acid) fie ca amfiioni - ioni dipolari (la pH-ul izoelectric)
+ CH NH 3 COOH mediu acid R R CH NH 2 COO mediu bazic R CH + NH 3

anion amfion la pH izoelectric aminoacizii se prezint ca amfioni ioni dipolari. pH-ul izoelectric sau punctul izoelectric este valoarea pH-ului la care cele dou funciuni din molecula aminoacidului (bazic NH2 i acid - COOH) sunt integral disociate deci soluia

COO pH izoelectric cation

aminoacidului conine n proporii egale anioni i cationi deci toate moleculele se prezint sub form de amfiioni . La pH izoelectric molecula este neutr i nu migreaz n cmpul electric. Punctul izoelectric are o valoare caracteristic pentru fiecare aminoacid. Exemplu: Acidul aspartic pH 3 Acidul glutamic pH 3,2 Serina - pH 5,08 Leucina - pH 6 Glicocol - pH 6,1 Lizina - pH 9,7 Arginina - pH 10,8 Se constat ca aminoacizii dicarboxilici au pH izoelectric acid (ac. aspartic, glutamic) n timp ce aminoacizii cu dou grupri aminice (lizina, arginina) au pH izoelectric bazic. prezint fenomenul de migrare n cmpul electric, numit electroforez (datorit caracterului amfoter) In mediu acid, aminoacizii se comport ca baze (cationi) i migreaz spre catod (-) (polul negativ), iar n mediul alcalin, se comport ca acizi (anioni) i migreaz spre anod (+) (polul pozitiv). Electroforeza este o metod de separare i analiza proteinelor i se bazeaz pe proprietatea lor de a migra n cmpul electric aminoacizii regleaza pH-ul celular rol de sistem tampon datorit caracterului amfoter

PROPRIETI CHIMICE ALE AMINOACIZILOR Sunt consecina prezenei celor dou grupri funcionale carboxilic COOH i gruparea aminic NH2) n molecula lor (gruparea

A. Proprieti determinate de gruparea carboxilic 1. Reacia cu alcooli Aminoacizii reacioneaz cu alcoolii n mediu de acid clorhidric i se formeaz mai nti un produs intermediar cristalizat - clorhidrat de ester. Esterul se separ sub form de ester liber prin tratarea clorhidratului cu o baz (KOH)
COOH H2N CH R H2O R'OH HCl COOR' + H3N CH R clorhidrat de ester Cl KOH KCl HOH H2N COOR' CH

R ,L-aminoacid

esterul liber al aminoacidului 2. Reacia cu baze aminoacizii reacioneaz cu bazele la nivelul gruprii carboxilice i formeaz sruri.
COOH H2N CH R + NaOH H2N COONa CH + H2O R Sarea de sodiu a aminoacidului

3. Reacia de decarboxilare Sub influena unor enzime specifice ( decarboxilaza), aminoacizii din organism se decarboxileaz pierd CO2 i se transform n amine, numite i amine biogene, care au n general funcii biologice importante (ex. histamina - rezultat prin decarboxilarea histidinei este responsabil de fenomenele alergice, stimuleaz muchii netezi).

COOH H2N CH R Aminoacid

CO 2

H2N

CH2 R

Amin

De la glicocol se obine metil amina n prezena bacteriilor de putrefacie n mediu slab acid aminoacizii se decarboxileaz trecnd n amine toxice (ornitina trece n putrescein iar lizina n cadaverin)
COOH H2N CH (CH2)3 NH 2 Ornitin decarboxilaz CO 2 H2N CH2 (CH2)3 NH 2 putrescein H2N COOH CH (CH2)4 NH 2 Lizin decarboxilaz CO 2 H2N CH2 (CH2)4 NH 2 cadaverin

B. Proprieti determinate de gruparea aminic 1. Reacia cu acizii - Aminoacizii reacioneaz cu acizii datorit caracterului bazic al gruprii aminice i formeaz sruri (clorhidrai, sulfai, azotai, etc.)
COOH H2N CH R + HCl + H3N COOH CH Cl

R Sarea de amoniu

(ex.clorhidrat de glicocol) 2. Reacia cu agenii de metilare, ca iodura de metil (CH3I) sau sulfatul de metil [(CH3)2SO4], gruparea aminic se metileaz obinndu-se tot sruri cuaternare de amoniu, numite betaine donori de grupri metilice in procesele metabolice din organism.
COOH H2N CH R + 3 CH3I 2 HI H3C H3C H3C + N COOH CH I

R Betain

3. Reacia cu aldehidele - aminoacizii dau reacii de condensare cu aldehidele, formnd baze Schiff.
COOH H2N CH R + O CH2 H2O H2C N COOH CH R Baz Schiff

Aldehid formic

Aceast reacie st la baza metodei de dozare volumetric a aminoacizilor (metoda Srensen) prin titrarea Bazelor Schiff (care conin gruparea carboxilic) cu soluie de hidroxid de sodiu. Dac aldehida este o glucid reacia este specific reaciei Maillard cu formare de melanoide (glucoprotide). 4. Reacia de dezaminare - aminoacizii se dezamineaz - n prezena acidului azotos - prin eliminarea azotului aminic sub form de azot molecular, trecnd n -hidroxi-acizii corespunztori.
COOH H2N CH R Aminoacid + HO Acid azotos O N HO COOH CH R -Hidroxiacid + N2 + H2O

Din glicocol rezult acidul glicolic (hidroxiacetic) Prin dozarea volumului de azot care se degaj din aceast reacie se poate stabili numrul gruprilor amininice din molecula aminoacidului. Reaciile de dezaminare au loc in vivo sub aciunea unor enzime specifice ( dezaminaze) care sunt prezente n esuturi n condiii diferite: a) n dezaminarea oxidativ aminoacidul conduce la un cetoacid R CH COOH ------ R CO - COOH - NH3 NH2 aminoacid cetoacid b) n dezaminarea reductiv se formeaz acizi grai saturai (n prezena enzimelor specifice) R CH COOH ------ R CH2 - COOH - NH3 NH2 aminoacid acid organic c) n dezaminarea hidrolitic se formeaz hidroxiacizi R CH COOH ------ R CH - COOH - NH3 NH2 OH hidroxiacid 5. Reacia de transaminare a aminoacizilor Este o reacie care se desfoar n organismele vii i are loc prin transferul gruprii amino de la un aminoacid la un cetoacid. n urma acestor reacii rezult tot un aminoacid dar diferit de cel precursor COOH COOH COOH COOH | | | | NH2 CH + C O ------ C = O + H2N CH | | | | R1 R2 R1 R2 aminoacid1 cetoacid2 cetoacid! aminoacid2 Reacia prezint un interes deosebit n metabolismul intermediar, n sinteza aminoacizilor 5. Reacia cu dinitrofluorbenzenul (DNFB) - aminoacizii formeaz compui colorai n galben, utilizai la identificarea aminoacizilor terminali din molecula peptidelor i proteinelor.
COOH H2N CH + F R Aminoacid NO 2 NO 2 2,4-dinitro-1fluorbenzen - HF O2N NO 2 HN COOH CH R 2,4-dinitro-fenil aminoacid

C. Proprieti determinate de prezena concomitent a gruprii aminice i carboxilice 1. Reacia de dezaminare i decarboxilare enzimatic simultan Este o reacie care se produce in vivo sub aciunea drojdiilor bogate n enzime de tipul dezaminaze i decarboxilaze. Aceast reacie explic formarea alcoolilor superiori n fermentaia alcoolic sub influena drojdiilor specifice H2O R CH COOH ---------- R CH2 -OH - NH3, - CO2 NH2 aminoacid alcool superior 2. Formarea peptidelor - este cea mai important proprietate a aminoacizilor . Prin eliminarea unei molecule de ap, ntre gruparea aminic a unui aminoacid i gruparea carboxilic a altui aminoacid, se realizeaz o legtur chimic de tip special.

Acest tip de legtur st la baza formrii tuturor proteinelor (polipeptidelor n general) din organismele vii numit legtur amidic sau legtur peptidic (-CO-NH-)
H2N CH R H COOH + H N CH R'
H 2O

COOH

H2O

H2N

CH R

CO

NH

CH R'

COOH

Dipeptid
CO HN

Legtura peptidic
H2N CH H glicin COOH + HHN CH CH3 alanin CH2 CO NH CH2 CH NH 2 COOH acid glutamic CH CO NH CH2 SH cistein glicin CH2 COOH H2N CH H CH COOH CH3 glicil-alanin

Dipeptid
COOH

glutation ( glutamilcisteinilglicin)

Tripeptid

2. Reacia cu metalele (Cu, Ni, Cd, Pb, Fe) - aminoacizii pot forma sruri complexe colorate, numite chelai, greu solubile i stabile. Sunt reacii folosite la dozarea aminoacizilor pe cale cromatografic.
H2C O C NH 2 H2N Cu O O C O CH2 Sarea complex de cupru a glicocolului

POLIPEPTIDE INFERIOARE PEPTIDELE

sunt substane organice formate din doi sau mai muli aminoacizi legai ntre ei prin legturi peptidice (-CO-NH-) Legturile peptidice se realizeaz prin eliminarea unei molecule de ap dintre gruparea aminic a unui aminoacid i gruparea carboxilic a altui aminoacid. oligopeptidele au 210 aminoacizi n molecul polipeptide au ntre 10 i 100 de aminoacizi n molecul i masa molecular pn la 10.000. peptidele se obin prin hidroliza parial a proteinelor au rol structural i funcional formeaz sisteme de oxido-reducere (ex. glutationul); sau ndeplinesc rol de substane antibiotice, toxine, sau anticorpi.

Specificitatea unei polipeptide depinde de: numrul aminoacizilor (dipeptide, tripeptide, tetrapeptide, etc.) felul aminoacizilor succesiunea aminoacizilor din lanul polipeptidic modalitatea de realizare a legturii peptidice n lanul polipeptidic Peptidele pot forma numeroi izomeri n funcie de felul, numrul i succesiunea aminoacizilor din lanul polipeptidic.Astfel din glicocol i alanin se formez dou dipeptide: glicil-alanina i alanil-glicina

Teoretic din 4 aminoacizi diferii se pot forma 24 de peptide izomere, din 6 aminoacizi 720 de peptide iar din 10 aminoacizi diferii 3.600.000 de peptide izomere Peptidele se gsesc n organismele vegetale i animale n stare liber i ca produi intermediari n procesul de hidroliz a protidelor Denumirea peptidelor se face cu numele aminoacizilor n ordinea n care se gsesc n molecul adugnd terminaia il" cu excepia aminoacidului terminal (cel cu gruparea carboxilic liber) care rmne cu denumirea nemodificat ( glutamil-cisteinil-glicin; glicilalanin; etc.) Exist: peptide lineare, formate dintr-un lan de aminoacizi care are la un capt o grupare aminic liber (captul N-terminal), iar la cellalt capt o grupare carboxilic liber (captul Cterminal)
CH2 CH2 CH NH 2 COOH acid glutamic CO NH CH CH2 SH Cistein Glicin CO NH CH2 COOH Glutation (-Glutamil-cisteinil-glicin)

COOH NH 2 CH2 CH2 NH 2 COOH

CO CH2

NH

CH2

NH 2 COOH

dipeptid

glicil-glicin

COOH CH2 NH 2

NH 2 CH2 COOH

COOH CH2 NH 2

NH 2 CH2 COOH

COOH CH2 NH 2 tetrapeptid pentapeptid

peptide ciclice primul i ultimul aminoacid din lanul polipeptidic pot fi i ei legai printr-o legtur peptidic.- (au mase moleculare mai mici dect cele liniare) si se gsesc n otrvuri de ciuperci, venin de arpe, antibiotice (au aciune toxic asupra organismului) sau n hormoni ex. oxitocina, insulina, vasopresina
CO NH CO NH CO NH CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH 2 NH 2 CO NH CO NH COOH

Proprieti fizice i chimice - sunt substane solide, cristaline, solubile n ap i insolubile n solveni organici - oligopeptidele formeaz cu apa soluii moleculare iar polipeptidele soluii coloidale - polipetidele precipit n soluie prin adugare de sruri ale metalelor grele - au caracter amfoter - prezint activitate optic - au proprieti chimice specifice aminoacozilor dnd reacii caracteristice gruprilor carboxilice i aminice - toate peptidele hidrolizeaz n mediu bazic sau acid sau sub influena enzimelor specifice numite peptidaze. Prin hidroliz se reformeaz aminoacizii din constituia molecular a peptidei. Ex. din glicil alanin prin hidroliz se formeaz glicina (glicocolul) i alanina. Peptide naturale

carnozina dipeptid format din histidin i alanin . Se gsete n muchiul mamiferelor anzerina - este un derivat metilat al carnozinei format din metil histidin i alanin. Se gsete n muchiul psrilor. glutationul este o tripeptid format din acid glutamic, cistein i glicin (-glutamilcisteinil-glicin). A fost izolat prima dat din drojdia de bere. larg rspndit n produse vegetale dar i n unele organe animale (n ficat, splin, semine n stare de germinaie, etc.) este o substan solid, alb, solubil n ap i alcool are caracter pronunat acid (pH 2,83) datorit celor dou grupri carboxilice din molecul. n celule se gsete sub dou forme : forma redus (Gl-SH) forma oxidat (Gl-S-S-Gl) practic dou molecule de glutation se leag ntre ele prin intermediul gruprilor SH (sulfhidrice) ale cisteinei din structura sa molecular punnd in libertate hidrogen Trecerea glutationului din forma redus n forma oxidat este un proces reversibil i constituie unul din cele mai importante sisteme de oxido-reducere din celulele vii. - 2H+ 2 Gl SH
+

Gl S S- Gl

+ 2H glutation diglutation Exemplu: transform acidul dihidroascorbic n acid ascorbic forma activ a vitaminei C rol de protecie asupra unor substane biologice important (enzime, hemoglobin, adrenalin). Albumozele i peptonele sunt polipeptide care apar ca produi intermediari n procesul de degradare a proteinelor sau n biosinteza lor. Nu exist o delimitarea net ntre polipeptide i proteide. Prin hidroliz din proteine se obin proteine albumoze peptone polipeptide oligopeptide aminoacizi Aceste transformri au loc la digestia proteinelor i n timpul unor procese tehnologice alimentare cum ar fi: maturarea crnii, obinerea hidrolizatelor proteice, maturarea brnzeturilor. Albumozele sunt mai apropiate ca structur i proprieti de proteine n timp ce peptonele sunt mai apropiate ca structur i proprieti de polipeptide i au mas molecular mai mic dect albumozele. Albumozele i peptonele se dizolv n ap i formeaz soluii coloidale. Din soluiile coloidale albumozele precipit prin adugare de sruri n mediu acid. Prin adugare de sulfat de amoniu si sulfat de zinc precipitarea este mai intens. Peptonele care se apropie mai mult de polipeptide nu coaguleaz la cald sau sub aciunea alcoolului sau srurilor.

POLIPEPTIDE SUPERIOARE
Polipeptidele superioare sunt substane macromoleculare cu structur foarte complex i nc insuficient cunoscut. Din aceast categorie fac parte proteinele (holoproteide) substane formate numai din aminoacizi i proteidele (heteroproteide sau proteine conjugate) substane formate dintr-o component proteic i una neproteic numit grupare prostetic.

HOLOPROTEIDE - PROTEINELE
Holoproteidele - proteinele sunt polipeptide superioare formate din lanuri polipeptidice neramificate, in care secvena aminoacizilor legai ntre ei prin legturi peptidice este determinat genetic i difer de la protein la protein.

Proteinele sunt componente fundamentale ale materiei vii La nivelul proteinelor apar fenomene de via caracterizate prin metabolism, capacitate de cretere i reproducere, transmitere a caracterelor nnscute la urmai i de apariie a mutaiilor Masa molecular a proteinelor este foarte mare fiind cuprins ntre 10.000 i 60.000.000. Masa molecular se poate determina prin metoda ultracentrifugrii, metoda difuziunii luminii i prin metode chimice.

ROLUL PROTEINELOR se identific cu cel al peptidelor dat fiind faptul c structurile proteice sunt prin excelen responsabile de acest rol biologic al peptidelor Rol structural intr n structura tuturor celulelor i esuturilor organismelor vii ex. colagenul, elastina, mucoproteine, etc. sunt constituienii principali ai nucleului i protoplasmei (proteine structurale nucleoproteidele)

Rol funcional particip la absolut toate reaciile chimice eseniale pentru funcionarea normal a celulelor vii - biocatalizatorii (enzime care au structur proteic) ex. hexokinaza, lactat dehidrogenaza, ADN polimeraza particip la contracia muscular proteine contractile miozina, actina particip la diviziunea celular - acizii nucleici -multiplicare asigur trnsportul unor componente vitale n organism (oxigen - hemoglobina, fier globulina fixatoare de fier, acizi grai - lipoproteinele, medicamente etc.) -proteine de
transport

reacii de autoaprare fa de agenii patogeni - imunoglobulinele anticorpi proteine de

aprare

reglarea proceselor metabolice hormonii- proteine cu rol de reglare insulina, hormoni de

cretere

depozitarea anumitor elemente, cum ar fi fierul - proteine de depozitare ex. feritina i

hemosiderina din ficat i splin

particip la hrnirea embrionilor proteinele din ou particip la alimentarea puilor mamiferelor proteinele din lapte regleaz presiunea osmotic, permeabilitatea membranelor, echilibrul electrostatic i acido-bazic - proprieti coloidale i caracter amfoter rol esenial n recepionarea, prelucrarea i acumularea informaiilor prin acizii nucleici - ADN; ARN Rol energetic degradarea unui gram de proteine se pun n libertate 4,5 kcal STRUCTURA proteine cu molecule dintr-un singur lan polipeptidic (ribonucleaza, albumina), proteine cu molecule formate din mai multe lanuri polipeptidice care pot fi identice sau diferite. ntre lanurile polipeptidice, sau chiar in interiorul aceluiai lan, exist diverse legturi chimice care contribuie la stabilizarea structurii moleculei proteice: legturi covalente disulfidice sunt legturi foarte puternice(1); legturi de hidrogen (dau stabilitate structural se distrug la denaturarea proteinelor). Se realizeaz ntre hidrogenul gruprii NH-dintr-o legtur peptidic i oxigenul gruprii CO- dintr-o alt legtur peptidic; sau ntre gruparea hidroxilic a restului tirozinei i gruparea carboxilic a restului acidului glutamic sau aspartic (2); legturi ionice, care se realizeaz datorit forei electrostatice de atracie, existent ntre gruprile carboxilice libere i cele aminice libere (3), aflate sub form ionizat n molecula proteic n condiii fiziologice de pH ;

 legturi apolare, care se realizeaz prin fore Van der Waals ntre resturile de hidrocarburi ale aminoacizilor alanin, fenilalanin, valin, leucin i izoleucin. (4-6).
CH CH2 CH3 CH3 CH3 CH3 CH2 CH

S S
1

O H O
2

COO + NH 3
3

CH3 CH3
4

C O

Cistein Acid -amino- H2N -tiopropionic

1- legtur covalent (disulfidic), 2 - legtur de hidrogen, 3 - legtur ionic, 4,5 si 6 - legturi apolare COOH COOH H2N CH Metionin CH Acid -aminoCH2 -metiltiobutiric CH2 SH CH S CH3
2

COOH Cistein Acid -amino- H2N -tiopropionic COOH CH CH2 SH COOH H2N CH CH2 H2N H2N CH CH2 CH2 S CH3 Metionin Acid -amino-metiltiobutiric

Fenilalanin Acid -amino-fenilpropionic

COOH CH CH2

Tirozin Acid -amino-hidroxifenilpropionic

OH
CH2 CO NH CH2 CH NH 2 COOH acid glutamic CH2 CO NH CH2 CH NH 2 COOH acid glutamic H2N CH H glicin H2N CH H glicin COOH + HHN COOH + HHN CH CH3 alanin CH CH3 alanin COOH H2O H2N COOH CH CO NH CH2 SH cistein CH CO NH CH2 SH cistein glicin COOH glicin CH2 COOH CH2 COOH

glutation ( glutamilcisteinilglicin)

glutation ( glutamilcisteinilglicin) H2O H2N CH CO HN CH H CH H CH3 glicil-alanin CO HN CH

COOH

CH3 glicil-alanin

CONFORMAIA STRUCTURAL a proteinelor cuprinde mai multe niveluri de organizare, rspunztoare de proprietile fizico-chimice i biologice i anume: Structura primar a proteinelor se refer la natura, numrul i secvena aminoacizilor coninui n molecula proteic (stabilit pe cale genetic i avnd caracter ereditar). Aminoacizii se leag prin legturi peptidice la un capt al lanului polipeptidic fiind o grupare - NH2 iar la cellalt capt o grupare COOH
Structura lanului polipeptidic n care se respect unghiul valenei atomilor de C se prezint conform formulei de mai jos:

H N CH R1

O C N H

R2 CH C O

H N CH R3

O C

Structura primar a proteinei lanul polipeptidic

structur primar pt. colagen

Radicalii R1, R2, R3, formeaz catene laterale care determin structura secundar i teriar influennd formarea legturilor intercatenare. Ei se gsesc n poziie trans fa de legtura peptidic legtura peptidic se gsete n acelai plan, atomul C se poate roti n plan diferit.

Structura secundar a proteinelor se refer la lungimea i la configuraia spaial a lanului polipeptidic: spiralat i pliat. Configuraia spiralat, numit -helix (helix=melc) - lanul polipeptidic este dispus sub forma unei spirale ca i cnd ar nconjura un cilindru imaginar Rsucirea se face n aa fel, nct resturile aminoacizilor s fie ndreptate spre exteriorul cilindrului . Este specific proteinelor fibrilare (colagen i -keratin din pr i ln) dar apare i la proteinele globulare pe poriuni mari. Structura se datorete legturilor de hidrogen care se formeaz ntre gruprile -CO- de pe o spir i NH de pe spira nvecinat. a aceluiai lan polipeptidic

Structura insulinei - un lant cu 30 aminoacizi - un lant cu 21 aminoacizi Legturile S-S specifice intercatenare

Configuraia pliat, numit i forma straturilor pliate", lanurile polipeptidice se gsesc sub form pliat (n zig-zag) i unite mai multe lanuri ntre ele prin legturi de hidrogen intermoleculare

Structur pliat - alfa

globin

Structur elice structur elice leg. de H

Structura teriar a proteinelor se refer la legturile intercatenare dintre lanurile polipeptidice i la modalitatea de formare a fibrelor proteice Lanul polipeptidic spiralat se poate ncovoia i rsuci n spaiu cu formarea unei structuri spaiale tridimensionale sau poate forma, mpreun cu alte lanuri (datorit legturilor intercatenare), fibre care au o structur asemntoare unei funii formate din fire torsionate Structura cuaternar a proteinelor se refer la modalitile de unire a subunitilor proteice (lanurilor polipeptidice identice sau diferite cu structuri primare, secundare i teriare proprii) pentru a forma uniti funcionale macromoleculare de anumite forme spaiale. Este specific proteinelor cu o greutate molecular de peste 100.000 Numrul subunitilor poate varia n limite foarte mari de la. 4 la hemoglobin la 2.130 proteinele unor virui Legturile stabilite ntre subuniti sunt de acelai tip ca i n structura teriar.

Structur teriar beta -globin

Structura cuaternar - hemoglobin

PROPRIETI FIZICE proteinele sunt substane solide, amorfe, uneori obinute i n stare cristalin. nu difuzeaz prin membrane de colodiu, pergament i celofan datorit greutii moleculare mari. formeaz soluii coloidale cu o viscozitate relativ crescut (proteinele solubile n ap prin nclzire, iradiere, tratare cu acizi, baze sau solveni organici, proteinele se denatureaz (se distruge structura teriar) i pierd proprietile lor biologice specifice. Denaturarea poate fi reversibil sau ireversibil. proteinele nu pot fi distilate sau topite.

soluiile lor sunt levogire. au un caracter amfoter, fiind ncrcate pozitiv la un pH puternic acid i negativ, la un pH puternic bazic. La pH izoelectric molecula proteic este neutr din punct de vedere electric (numrul sarcinilor electrice negative este egal cu numrul sarcinilor electrice pozitive) i nu migreaz n cmpul electric. Datorit caracterului amfoter proteinele pot fi separate prin electroforez. Migreaz spre catod (-) n mediu acid ( ioni pozitivi-cationi) i spre anod (+) n mediu bazic (ioni negativi-anioni). joac rol de soluii tampon pot fi precipitate reversibil n mediu de soluii concentrate ale srurilor alcaline (Na +,K+, Mg2+, NH4+) sau a unor solveni organici solubili n ap (alcool, aceton). Prin precipitarea reversibil nu se produce denaturarea structurii moleculare. precipitarea ireversibil denaturarea care presupune modificri fizico-chimice n structura molecular - se produce prin aciunea unor soluii de sruri ale metalelor grele (Cu, Pb, Hg, Ni, Fe), a acizilor minerali tari, a bazelor alcaline, alcool etilic, aceton (concentrate), prin nclzire, n soluii apoase de uree i tiouree. Prin denaturare proteinele i pierd funciile biologice (enzimatic, hormonal, anticorpi, etc.)

PROPRIETI CHIMICE Cea mai important proprietate chimic pentru proteine este hidroliza lor sub aciunea agenilor chimici sau a enzimelor specifice Reacia de hidroliz hidroliza total se produce sub aciunea acizilor, bazelor tari sau a enzimelor proteolitice se obin aminoacizi (prile lor componente). hidroliz parial n mediu slab acid sau alcalin se obin fragmente polipeptidice Reacii specifice gruprilor funcionale libere din molecul datorit gruprilor NH2 libere din molecul, proteinele pot forma sruri de amoniu cu acizi anorganici, se pot dezamina n prezena acidului azotos sau se condenseaz cu aldehidele (ca i aminoacizii) datorit prezenei gruprilor -SH libere, proteinele pot fi oxidate sau reduse prin gruparea -COOH liber, proteinele pot da reacii de esterificare cu alcooli sau pot forma sruri cu baze anorganice. Reacii de culoare Reacia xantoproteic - cu acidul azotic concentrat proteinele care conin aminoacizi aromatici precipit (prin formarea nitroderivailor fenolici) la rece (pp alb) i la cald (pp galben) iar prin alcalinizare pp devine portocaliu Reacia ninhidrinei prin fierberea proteinelor cu ninhidrina apare o coloraie albastru violet datorit gruprilor - NH2 libere. Reacia este specific i peptidelor i aminoacizilor. Reacia biuretului soluiile proteice tratate cu o soluie de sulfat de cupru, n mediu bazic, dezvolt o coloraie albastr-violet datorat formrii unor compui de chelatare colorai. Reacia nu se produce la aminoacizi ci doar ncepnd cu dipeptidele care au cel puin o grupare peptidic (-CO-NH-). Cu sruri de nichel se formeaz chelate portocalii. Numele reaciei vine de la formula biuretului substan cu structur asemntoare peptidelor (-CO-NH-) care formeaz chelai cu metalele. PROPRIETI BIOLOGICE Proteinele se caracterizeaz printr-un nalt grad de specificitate.

 specificifate de organ (sunt organ-specifice), adic fiecare organ al aceluiai organism conine proteinele sale specifice care se deosebesc de proteinele altor organe; specificitate de specie (sunt specie-specifice), adic acelai organ, dar de la specii diferite de animale, conine proteine specifice numai speciei respective (ex. transplantul de organe nu poate fi fcut ntre specii diferite) specificitatea proteinelor joac un rol important n imunologie i st la baza preparrii i aplicrii vaccinurilor.(stimularea formrii unor substane proteice noi capabile s distrug proteina inoculant prin injectarea unei proteine cu rol de vaccin, ser). Substana injectat se numete antigen iar cea care se formeaz n organismul injectat se numete anticorp. marea majoritate a proteinelor au i activiti enzimatice i unele activiti hormonale participnd la reacii metabolice i procese de reglare din organism. PRINCIPALII REPREZENTANI Al HOLOPROTEIDELOR Dup proprietile lor chimice i dup natura solventului n care se dizolv holoproteidele se mpart n : proteine globulare i fibrilare
Nume protein Compoziie Mas molecular (MM) PROTEINE GLOBULARE PROTAMINE Conin diaminoacizi -arginin, lizin, histidin MM mic trec prin membrane coloidale HISTONE Conin diaminoacizi arginina, lizina, histidina structur mai complex MM mai mare PROLAMINE conin acid glutamic i prolin
Caracter acid/ bazic

Solubi litate sol. n ap i acizi diluai

Rspndire

Valoare biologic

bazic

numai n regnul animal n nucleele celulelor spermale ale petilor i psrilor.

Formeaz cu acizii nucleici, nucleoproteide

bazic

sol.n ap i acizi slabi

In regnul animal : n nucleele celulelor glandulare (timus, pancreas), n globulele roii i albe, n testicole i ficat. n boabele de cereale - zeina din porumb, gliadina din gru, hordeina din orez i avenina din ovz proteine vegetale n boabele cerealelor (proteine ale finii alturi de prolamine) alctuiesc glutenul n regnul animal - n plasma n protoplasma celular - ) n lapte i ou n regnul vegetal n seminelegumina n mazre i linte, faseolina n fasole, edestina n cnep, tuberina n cartofi. apar cu globulinele n regnul animal: ou, lapte, ser , muchi, n regnul vegetal: gru, mazre, semine ricin (f.toxic)

Formeaz cu acizii nucleici, nucleoproteide, -regleaz sinteza ARN

acid

GLUTELINE

Conin acid glutamic, prolin, lizin i triptofan Conin acid glutamic i aspartic MM mare 35 000 i 1 000 000 conin acid glutamic i aspartic, leucin i izoleucin MM mai mici dect globulinele

acid

sol. n alcool 7080% insol. n ap solub. n sol. acide i alcaline greu sol. n ap sol n sol. alcaline Solubil e n ap

nu conin aminoacizi eseniali - val. alimentar nu este complet valoare alimentar glutenul - elasticitate i porozitate pine - sunt -, - i globuline(electroforez) rol de transport, enzimatic aprare imunoglobuline Valoare nutritiv ridicat

GLOBULINE

acid

ALBUMINE

acid

PROTEINE FIBRILARE Conin glicin i SCLEROPRO aminoacizi cu sulf TEINE (ex.cistein) Au structuri liniare, filiforme rsucit sau pliat Rezult de regul din transformarea proteinelor globulare

Insol.n ap sau sol. acide i alcaline

se gsesc preponderent n regnul animal 1. colagenele - din structura tendoanelor, ligamentelor, cartilagiilor, oaselor i pielii; dau gelatina la fiert cu apa 2. elastinele - n fibrele elastice din artere i tendoane, Nu formeaz gelatin.; 3. keratinele - n epiderm, pr, unghii, copite, pene, coarne i ln.; conin sulf

au rol de susinere, de protecie i de rezisten mecanic. Nu hidrolizeaz la aciunea enzimelor proteolitice

PROTEIDELE - HETEROPROTEIDELE (PROTEINELE CONJUGATE)

Heteroproteidele sunt proteine care conin n molecula lor pe lng aminoacizi i o component de natur neproteic, numit grupare prostetic (poate fi ntre 5% i 93%). - legtura dintre partea proteic i gruparea prostetic poate fi realizat prin legturi covalente de tip esteric, legturi ionice, legturi de hidrogen sau legturi apolare de tip Van der Waals. - prin hidroliza heteroproteidelor rezult mai nti gruparea prostetic i apoi aminoacizii deoarece legtura dintre protein i gruparea prostetic este n general, mai slab dect legtura peptidic dintre aminoacizi. n funcie de gruparea prostetic pe care o conin, heteroproteidele se mpart n: fosfoproteide, lipoproteide, glicoproteide, cromoproteide, metaloproteide i nucleoproteide . PRINCIPALII REPREZENTANI Al HETEROPROTEIDELOR FOSFOPROTEIDELE - conin ca grupare prostetic acidul fosforic legat printr-o legtur esteric de gruparea hidroxilic a unui hidroxiaminoacid (serina sau treonina) - au un caracter acid. - reprezentani: cazeina, care exist n lapte sub forma srii de calciu, ovovitelina din glbenu de ou, pepsina enzima proteolitic din sucul gastric . Cazeina i vitelina sunt alimente complete deoarece conin toi aminoacizii eseniali.
OH CH2 O CH NH 2 P O OH sau CH2 CH O NH 2 P

COOH COOH Esterul fosforic al serinei

LIPOPROTEIDELE - gruparea prostetic este format din lipide (lecitin, cefalin, colesterol i altele) legate, de regul, prin legturi ionice de molecula proteic. - intr n structura membranelor celulare, mitocondriilor i reticulului endoplasmatic - au rol de mijloc de transport pentru grsimi, acizi grai i colesterol. Ele influeneaz permebilitatea membranelor biologice i pot furniza energia necesar unor procese metabolice - n anumite boli (diabet, icter, ateroscleroz) cantitatea lipoproteidelor din snge crete GLICOPROTEIDELE

conin ca grupare prostetic glucide sunt compui la care predomin componenta proteic dac proporia de glucide din molecula glicoproteidelor depete 4%, compuii poart numele de mucoproteine - se deosebesc glicoproteide acide care conin ca grupare prostetic mucopolizaharide acide (acidul hialuronic) glicoproteide neutre, n care componenta glucidic este un zahr neutru (ca D-manoz, D-galactoz). - se gsesc n esutul conjunctiv i osos, n piele, ser sanguin, albu de ou i n ochi. Exemple: mucinele -secretate de diferite mucoase, rol de fixare a apei n organis; hormonii hipofizei; substanele specifice grupelor sanguine; enzime (colinesteraza); fetuina, din plasma diferitelor animale, cu aciune antiinfecioas CROMOPROTEIDELE - proteide colorate, cu funcii biologice foarte variate - conin ca grupare prostetic o substan colorat. - n funcie de natura prii prostetice, se deosebesc cromoproteide porfirinicei neporfirinice o cromoproteide porfirinice conin nucleul porfirinic format din 4 inele pirolice legate ntre ele prin puni metinice (CH =). Prin substituirea atomilor de hidrogen din pozitiile 18 din molecula porfirinei cu diveri radicali (metil, etil, vinil, acid propionic) se obin porfirinele (gruparea prostetic de la cromoproteide)
CH
I II

N HC NH
IV

HN CH N
III

CH

- hemoglobinele, colorantul rou al globulelor roii cu rol n transportul oxigenului din plmni n esuturile organismului; - mioglobinele, colorantul rou al muchilor cu o structur i un rol asemntor hemoglobinelor; - cloroplastinele, cromoproteide din plante, colorate n verde, a cror grupare prostetic este clorofila,a i b care au un rol important n procesul de fotosintez; - citocromii, intr n structura unor enzime cu rol n procesul de degradare aerob a glucidelor

Nucleul porfirinic - fermentul rou respiraior sau citocromoxidaza cu rol n procesele de oxidoreducere din celul; - catalaza i peroxidaza, enzime care catalizeaz reaciile de descompunere a apei oxigenate; - leghemoglobina, roie, prezent n rdcinile plantelor leguminoase, cu rol n procesul de fixare a azotului atmosferic; - ficocianinele i ficoeritrinele, cromoproteide n algele albastre i roii. o cromoproteide neporfirinice. - hemeritrinele, care constituie pigmentul sanguin rou la unele nevertebrate; - hemocianinele, colorantul sanguin albastru din sngele crustaceelor i molutelor, care poate ajunge la o greutate molecular de pn la 10 000 000; - flavinenzimele, cromoproteide colorate n galben, care au rol n procesele de oxidoreducere i care conin ca grupare prostetic un derivat al riboflavinei; - carotenoproteidele, care au ca grupare prostetic pigmeni din clasa carotenoidelor i joac, alturi de clorofil, un rol important n procesul de fotosintez. Ele au un rol important i n actul vizual, alctuind colorantul fotosensibil al retinei, purpura retinian sau rodopsina. METALOPROTEIDELE - conin ca grupare prostetic diferite metale (Fe, Cu, Zn, Mg, Co, Mo, Mn) legate direct de molecula proteic. conferind acestora proprieti funcionale deosebite. - reprezentani: o feroproteidele (feritina izolat din ficat i splin i siderofilina coninut n plasma sanguin) o cuproproteidele (ceruloplasmina din plasma sanguin i hepatocupreina din ficat).

o insulina (cu coninut de Zn) enzime (carboxipeptidaze, lactat dehidrogenaze, alcool dehidrogenaze, superoxid dismutaza SOD n cele patru forme are cofactori metalici: 1.cuprul i zincul; 2.manganul; 3.fierul; 4. nichelul) NUCLEOPROTEIDELE - sunt cele mai complexe i mai importante heteroproteide. - conin ca grupare prostetic acizi nucleici. - partea proteic (cca 60%) este format preponderent din proteine bazice de tipul protaminelor i histonelor (arginin, histidin, lizin) - pot fi considerate ca sruri ale acizilor nucleici deoarece componenta proteic are caracter bazic iar componenta prostetic are caracter acid pronunat. - ntre componenta proteic i acizii nucleici se stabilesc diferite tipuri de legturi: ionice, covalente, coordinative, fore Van der Waals. - au un coninut ridicat de fosfor prin constituia acizilor nucleici. - se gsesc n toate celulele vegetale i animale (nucleu, protoplasm, lichide biologice) - exist organisme formate numai din nucleoproteide (virusurile i bacteriofagii) ROLUL MAJOR AL NUCLEOPROTEIDELOR: o stocheaz i transmit informaia genetic o particip la biosinteza proteinelor o particip la diviziunea celular . ACIZII NUCLEICI gruparea prostetic a nucleoproteidelor - sunt substane macromoleculare alctuite dintr-un numr foarte mare de uniti structurale de baz numite nucleotide. Sunt polimeri ai mononucleotidelor se mai numesc polinucleotide - nucleotidele sunt alctuite din pentoze, baze azotate i acid fosforic - prin hidroliz bazic sau enzimatic se formeaz mai nti produi intermediari cu mase moleculare mai mici i n final mononucleotide care se descompun n componentele de baz - prin hidroliz acid degradarea este direct n componentele constitutive (baze azotate, pentoze i acid fosforic)

Acizii nucleici
au mas mol. f. mare - 108- 1012 au grad de polimerizare de ordinul miilor i milioanelor

acizii dezoxiribo nucleici ADN

acizii ribonucleici ARN

- conin ca pentoz 2-dezoxiriboza - are codificat informaia referitoare la biosinteza tuturor biomacromoleculelor dintr-un organism ceea ce d caracterul distinct al fiecrui organism - informaia genetic se gsete nscris n secvena nucleotidelor care alctuiesc ADN-ul nuclear numit genom - conin ca pentoz riboza - transmit informaia genetic de la ADN la locul de biositez a proteinelor (mesager, ribozomal, de transport)

Pentru a izola acizii nucleici dintr-o nucleoproteid se denatureaz mai nti componenta proteic (cu salicilat sau laurilsulfit de sodiu n mediu neutru) i se ndeprteaz prin extracie cu sol. apoas de fenol. Acizii nucleici (componenta prostetic) se extrag cu alcool etilic.

COMPONENTELE STRUCTURALE DE BAZ ALE ACIZILOR NUCLEICI Unitatea structural de baz a acizilor nucleici este mononucleotida format din acid fosforic, baze azotate, glucid
ACIZII NUCLEICI polinucleotidaz

oligonucleotide oligonucleotidaz

mononucleotide mononucleotidaz H3PO 4 nucleozid nuleozidaz pentoz riboz dezoxiriboz baz azotat purinic: adenin, guanin pirimidinic: citozin, uracil, timin

1. Componenta glucidic a acizilor nucleici

HO H2C H H O OH H HO H2C H H O OH H

H OH OH riboz (n ARN)

H OH H -2-dezoxiriboz (n ADN)

este reprezentat de dou pentoze: riboza n structura ARN-ului i dezoxiriboza n structura ADN-ului. Ambele glucide aparin seriei D i au configuraie furanozic. Prin hidroxilul semiacetalic (glicozidic) riboza i dezoxiriboza se leag -glicozidic cu bazele azotate permite diferenierea acizilor nucleici ARN, ADN (prin cromatorgrafie) determin o parte din proprietile chimicie i biologice o Ex. acizii dezoxiribonucleici dau cu difenilamina o coloraie albastr (r. Dische); cu cisteina i acidul sulfuric culoare galben-roietic; recoloreaz n rou soluia de fuxin (r. de condensare baze Schiff) 2. Componenta fosforic este acidul fosforic se gsete n acizii nucleici n proporie de 8-14% poate servi la dozarea acizilor nucleici imprim caracterul acid nucleotidelor acidul fosforic este esterificat cu riboza sau dezoxiriboza. El unete nucleotidele prin legturi fosfodiesterice ntre OH-ul din pozia 3 a ribozei sau dezoxiribozei i OH-ul din poziia 5 a ribozei sau dezoxiribozei aparinnd altui nucleotid 3. Bazele azotate deriv de la doi heterocicli: pirimidin i purin absorb radiiile UV la 260 nm i pot fi dozai acizii nucleici prin metode spectrofotometrice

bazele pirimidice conin n molecul oxigen i se gsesc n dou forme tautomere forma cetonic i forma enolic. Gruprile aminice NH2 imprim caracter slab bazic iar cele enolice OH, caracter slab acid. Bazele azotate au caracter amfoter formeaz precipitate greu solubile cu srurile de Ag, Cu, Hg i cu acizii picric i fosfowolframic dintre bazele pirimidinice n structura acizilor nucleici intr: uracilul (U), timina (T) i citozina (C)
O

OH N C HO C H N N O C

O C N C CH3 CH HO N C

H N O C

C N

OH C N C CH3 CH N O C

NH 2 C N CH CH HO N C

NH 2 C N enol Citozin CH CH

H ceto

enol Uracil

H ceto Timina

enol

H ceto

Uracilul i timina au caracter slab acid iat citozina caracter slab bazic bazele purinice sunt derivai ai purinei dintre bazele purinice intr n structura aminoacizilor adenina (A) i guanina(G)
H N1 H C2 C 6 3 N 5C 4C Purina 9 N H N N N Adenina
Baze azotate pirimidinice timin, citozin uracil, citozin purinice adenin, guanin adenin, guanin

NH 2 7 N N H H2N N

OH N N Guanina N H

8C H

Constituienii piridinici i pirimidinici din acizii nucleici Acid nucleic ADN ARN

NUCLEOZIDELE Sunt N-glicozide formate ditr-o baz azotat i o pentoz (riboz sau dezoxiriboz) unite prin legtur glicozidic Din bazele azotate pirimidinice (citozin, uracil respectiv timin) se pot forma citidina, uridina i timidina (nucleozide) Din bazele azotate purinice (adenin, guanin) se pot forma adenozina i guanozina (nucleozide)
O HN HO H2C H H O O N H
HO legturi macroergice O P OH O O P OH O O P OH O H2C H H N O N H H OH N NH 2 N

H OH OH uridin

acidul adenozin-5-trifosforic(ATP)

OH

Nucleozid MONONUCLEOTIDELE

Mononucleotid macroergic ATP

Sunt uniti structurale monomere ale acizilor nucleici (o pentoz, o baz azotat, acid fosforic) Se gsesc n natur n acizii nucleici, coenzime i uneori n stare liber Unele mononucleotide conin n molecula lor dou sau trei resturi de acid fosforic unite ntre ele prin legturi macroergice (legturi bogate energetic) . Prin degradarea hidrolitic a unei legturi fosfoesterice macroergice se elibereaz 7-12 kcal/mol fosfat, iar a unei legturi fosfoesterice simple se elibereaz numai 2-3 kcal/molfosfat

Exemplu de mononucleotid: ATP adenozintrifosfatul care conine dou legturi macroergice are un rol fiziologic foarte important pentru c nmagazineaz energie necesar organismului. Intervine n procesul de fotosintez nmagazinarea energiei pentru sinteza substanelor organice. Prin eleiberare de energie el trece n ADP - adenozindifosfatul care conine o singur legtur macroergic. POLINUCLEOTIDELE Reprezint de fapt moleculele acizilor nucleici n care mononucleotidele se unesc ntre ele prin intermediul acidului fosforic formnd lanuri lungi de polinucleotide. Legturile fosfodiesterice se stabilesc ntre OH-ul din poziia 3 a ribozei sau dezoxiribozei (al unei nucleozide ex. adenozina) i OH-ul din poziia 5 a ribozei sau dezoxiribozei (aparinnd altei nucleozide ex. timidina) Secvena bazelor azotate este determinat genetic (n lanul ADN adenina, timina, guanina, citozina) ACIZII DEZOXIRIBONUCLEICI - ADN se gsesc n cantitate mare n nucleul celular, n special n cromozomi. S-a semnalat prezena ADN n cantiti mici i extranuclear n cloroplaste, mitocondrii, cantitatea de ADN raportat la nucleul celular este o constant pentru specia biologic sunt formai din adenin i guanin (baze purinice) timin i citozin (baze pirimidinice) dezoxiriboz i acid fosforic. Succesiunea bazelor azotate n lanul polinucleotidic nu se face n mod ntmpltor, ci este determinat genetic. ADN reprezint materialul genetic de baz prin care se asigur pstrarea, exprimarea i transmiterea caracterelor ereditare la urmai, fiind caracteristic oricrei specii i fiecrui organism n acizi dezoxiribonucleici extrai din bacterii i virusuri s-au identificat n cantitate foarte mic 5-metilcitozina, 5-hidroximetilcitozina i 5-hidroximetiluracilul. sunt substane macromoleculare formate dintr-un numr foarte mare de mononucleotide. Au masa molecular ntre 50.000 3,5 milioane. Diferiii acizi nucleici se deosebesc ntre ei prin succesiunea mononucleotidelor i prin reprezentarea lor cantitativ.

A N

NH 2 N N O H T HN N O O N O H2N P O N O CH2 N O O O O - legtur fosfodiesteric O O O O P O O P O CH2 O CH3 OH G N C NH 2 N N

N O CH2 H H

H O O H O P O CH2 O

Legend: - legtur -glicozidic

Secven structural a acizilor nucleici (un lan din ADN)

Structural s-a constatat c ADN este format din dou lanuri polinucleotidice lungi, rsucite, n spiral, n jurul unei axe comune de simetrie. n structura cromozomilor dimensiunea ADN-ului ajunge s fie de ordinul centimetrilor Bazele azotate din cele dou lanuri polinucleotidice se leag ntre ele prin puni de hidrogen ceea ce imprim sistemului stabilitate. Din punct de vedere structural este favorizat numai legarea adeninei (A) cu timina (T) i a guaninei (G) cu citozina (C). Aceast comportare a bazelor azotate determin ca raportul dintre A/T i G/C s fie 1. Raportul ADN/ARN este constant pentru celul

ACIZII RIBONUCLEICI ARN se gsesc n citoplasm au rol principal n sinteza proteinelor sunt substane macromoleculare formate din ribonucleotide. Conin n molecul adenin i guanin (baze purinice), citozin i uracil (baze pirimidinice), riboz i acid fosforic. n molecula unor acizi ribonucleici se gsesc baze azotate secundare (5 metilcitozina, 5

hidroximetilcitozina, 5 hidroximetiluracilul Sub aspectul principalelor substane constitutive acizii ribonucleici se deosebesc de acizii dezoxiribonucleici printr-o baz pirimidinic(uracil n loc de timin) i prin pentoz (riboz n loc de dezoxiriboz). structural ARN este constituit dintr-un lan polinucleotidic liniar, pliat fiind posibile formarea de legturi de hidrogen ntre dou segmente al aceluiai lan polinucleotidic (aici vom avea de-a lungul lanului polinucleotidic alternana: adenin-uracil A-U, guanin-citozin G-C care permite stabilirea legturilor de hidrogen specifice pentru stabilitatea macromoleculei dar raportul lor nu este egal cu 1 deoarece nu conin al doilea lan polinucleotidic complementar). La ARN se vor ntlni alternativ n lanul polinucleotidic att structura helicoidal (caracteristic ADN - dac structura pliat a lanului polinucleotidic al ARN face posibil formarea unor legturi de hidrogen ntre bazele azotate complementare aflate fa n fa ca i cum ar fi dou lanuri polinucleotidice diferite) ct i o structur monocatenar specific de fapt ARN-ului.. La virusuri i la unii bacteriofagi purttorii informaiei ereditare sunt acizii ribonucleici. Sub aspect structural i funcional se deosebesc trei tipuri de acizi ribonucleici: - ARN mesager (care transmite informaia genetic de la ADN cromozomal la ribozomii din citoplasm unde are loc biosinteza substanei proteice); - ARN ribozomal (localizat n ribozomii din citoplasm cu rol n asamblarea sistemelor proteosintetizante); ARN solubil sau de transport (localizat n lichidul citoplasmatic cu rol de a transporta aminoacizii activai n ribozomi la ARN ribozomal pentru asamblarea sistemelor sintetizantze.

VIRUSURILE sunt ageni patogeni mai mici dect bacteriile, formai aproape exclusiv din nucleoproteide. bolile provocate de virusuri se numesc viroze i se ntlnesc att la plante ct i la animale i chiar la bacterii, fiind transmisibile. sub aspect biologic virusurile sunt cele mai simple vieuitoare care reprezint proprieti caracteristice materiei vii. Ele se comport ca microorganisme vii numai n interiorul celulelor i esuturilor vii pe care le paraziteaz. nu se dezvolt n organismele moarte. virusurile au o mare capacitate de a produce mutaii , datorit apariiei unor modificri n molecula ADN din celulele pe care le paraziteaz.