Metode de laborator
Metode clinice
ASCULTATIA
Directa (cu urechea)/ Indirecta (cu stetoscopul) -se apreciaza BCF la vaca din luna 7-8, la iapa luna 9-11, la
oaie din luna 4, animalele mici: murmur slab
EXAMENUL INTERN
EXAMENUL CU SPECULUM VAGINAL
-modificarile produse in timpul gest. la nivelul cervixului si muc. vaginale, caracteristicile mucusului vaginal
-speculum trivalv Polanski/ bivalv / tubular
Mod de realizare: contentie, toaleta reg. anovulvare, bandajarea bazei cozii, introducerea speculumului inchis,
vertical pe directia fantei vulvare, rotire 90 º, deschidere Femela gestanta: mucus aderent, opac, dens, alb-
cenusiu,mentinand peretii vaginali lipiti; mucoasa vaginala este palida, mata, floarea involta deviata ant., in
jos si lateral, cu falduri sterse. Femela negestanta: mucus transparent, hidratat, aderent, floarea involta este
plasata central, in fundul vaginului, cu falduri evidente.
Metode fizice
1. Radiografia si radioscopia: - La animalele de talie mica si mijlocie - Permit diagn. gestatiei tardiv, dupa initierea
osificarii scheletului fetal Avantaje: precizeaza nr. produsilor, asezarea si dispunerea lor in uter, diagn.
malformatiilor si monstruozitatilor fetale. Riscuri: aproape nule, deoarece organogeneza este terminata
2. Electrocardiografia
Inregistrarea grafica a activitatii cardiace materne (secusele mari), peste care se suprapun secusele mici
(activitatea cardiaca fetala) Martor al viabilitatii fetale- clinica animalelor mici
3. Metoda Sokolovskaia Vaca - fidelitate 80%: cresterea densitatii mucusului cervical la vacile gestante,
evidentiata printr-o reactie cu sulfat de cupru Cu(SO4)2 sol.+ 1 pic mucus ; in 5-6 sec. mucusul cade la fundul
paharului (react.+,femela gestanta)
4. Cristalizarea mucusului cervical la vaca Metoda de diagn. a starii de negestatie (estrus), fidelitate ridicata.
Se realizeaza un frotiu din mucusul cervical- se examineaza la microscop: In proestru si estru: mucusul
cristalizeaza sub forma unei frunze de feriga, excluzandu-se astfel gestatia
5. Ecografia (Ultrasonografia) Diagnosticul ecografic reprezintă o metodă neinvazivă şi nedureroasă de
vizualizare a diferitelor tesuturi moi ale organismului. Folosita la toate speciile. Ultrasunetele- se propaga
liniar (f. bine in mediu lichid, nu si in aer sau mediu solid) si genereaza un ecou la suprafata de separare intre
doua medii cu impedanta acustica diferita. Efectul Doppler: la limita de separare intre cele doua medii exista
particule in miscare (circulatie fetala, placentara, cord fetal, circ. materna) ce det. modificarea frecventei
undei ultrasonice Efectul puls-ecou: ecoul este captat si convertit in semnal acustic/luminos Frecventa
sondei mare = imagine mai clara = penetrabilitate mai redusa
CALENDARUL GESTAŢIONAL AL CĂŢELELOR ÎNTRE ZILELE 20 ŞI 34
Z20 Ampule anecogene (fără ecou embrionar)
Z26 Masă embrionară de formă ovalară
Z26 Evidenţierea capului şi a trunchiului
Z27 Evidenţierea veziculei viteline
Z29 Embrion în formă de 8
Z30 Primele osificări ale craniului
Z33 Mobilitatea embrionului
Z33 Evidenţierea membrelor
Z34 Aspect specific al craniului fetal de cap de insectă
CALENDARUL GESTAŢIONAL AL CĂŢELELOR ÎNTRE ZILELE 36 ŞI 50 DE GESTAŢIE
Z36 Evidenţierea stomacului
Z37 Evidenţierea rahisului
Z38 Distingerea ariei hepato-pulmonare
Z38 Evidenţierea vezicii urinare
Z39 Evidenţierea venei ombilicale
Z41 Evidenţierea coastelor
Z46 Evidenţierea sternului
Z50 Evidenţierea vezicii biliare,
Metode chimice
Reactia Cuboni -evidentierea calitativa a hormonilor estrogeni, printr-o reactie de fluorescenta a acestora,
in prezenta acidului sulfuric -folosita la iapa intre lunile 4-9 de gestatie (estrogeni la nivel urinar), fidelitate
98% -15 ml urina+ 3 ml H2SO4 – (incalzire, filtrare, decantare, racire)- examinare la UV-fluorescenta verde=
reactie+
Metode histologice
1.Metoda Benesch-Kurasava, folosita la iapa - Evidentierea in frotiul efectuat din mucusul cervical a celulelor
epiteliate ciliate,in mici conglomerate, fara leucocite 2. Metoda Ciurea - la scroafa si oaie, fidelitate precoce-
95% -aprecierea modificarilor histologice ale epiteliului vaginal anterior (recoltare biopsica, includere in
gheata, sectiuni, colorare) -la scroafa: in estru epiteliul =20-25 straturi, in metestru 45 straturi, in gestatie 2-3
straturi -la oaie: 10-12 straturi la negestante, la gestante 3-4 straturi, cu celule cubice (dupa ziua a 40-a de
gestatie)
Metode biologice
Principiu: evidentierea modificarilor specifice induse de gonadotropinele extrahipofizare (eCG/PMSG, hCG)
asupra aparatului genital la animalele de laborator. Folosite la iapa. -gonadotropina corionica ecvina = h.
glicoproteic secretat de cel. trofoblastului fetal ce invadeaza cupele endometriale in intervalul 36-120 de zile
de gestatie, cu un maxim intre 55-75
Metoda Animal de experienta Reactie pozitiva= femela de testat
gestanta
1. Ascheim –Zondeck Soricele impubere 3-4 saptamani Ovare cu foliculi maturi, edem
tract genital
2. Friedmann- Schneider Iepuroiace impubere Foliculi numerosi, hipertrofie
uterina
3. Brouha-Hinglais Simonnet Soareci masculi impuberi Hipertrofia vez.sem. & testiculelor
4.Zavadovschi-Nesmeianova Cocosi impuberi Hipertrofia crestei si a testiculelor
5. Galli- Mainini Broscoi ex.microsc.al urinii: spermatozoizi
6. Allen-Doisy Soricele impubere/castrate Frotiu din fluidul vaginal:cel
Schollen
Metode imunologice
1. Inhibarea reactiei de hemaglutinare (IHA) dintre eritrocitele de oaie si un ser antiPMSG, daca aceste
eritrocite sunt puse in prealabil in contact cu serul provenit de la iapa de testat, cand aceasta este
gestanta
ERITROCITE + Ser anti PMSG Aglutinare (martor)
ERITROCITE + Ser iapa de testat Fara reactii vizibile
ERITROCITE + Ser iapa de testat Aglutinare=reactie -
Ser anti PMSG Lipsa aglutinarii=reactie+ (iapa gestanta)
2. Imunoelectroforeza in gel de geloza -serul antiPMSG concentrat si specific se introduce intr-un godeu
central, intr-o placa Petri, seruri de la iepele de testat introduse in godeuri periferice -camp electroforetic
- proteinele vor migra specific in functie de masa lor moleculara, intensitatea liniilor de precipitare ce se
formeaza este direct proportionala cu cant. de PMSG din serul de analizat
Poza
3. Determinarea factorului de gestatie timpurie -complex proteic dependent de gestatie, produs de ovar si
oviduct, care impiedica rejectia embrionului de catre mama (EPF- Early Pregnancy Factor) -se identifica la
24 de ore dupa fecundatie la oaie si dupa numai 4 ore la scroafa
4. Radio Immuno Assay (RIA)- Ac.antiP monoclonali Folosita la iapa, scroafa, RM si rm Ac.antiP+ Ag(P din
ser,lapte) Ac-Ag+Ac.antiP (excesul) Ac.antiP + Ag (P marcat cu tritiu) Ac - Ag + Ag (excesul) -cu
ajutorul unui spectrometru de scintilatie se determina numarul dezintegrarilor radioactive- se raporteaza
la o curba etalon si se precizeaza astfel cantitatea de P (ng/ml) din ser sau lapte.
5. ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) Acelasi principiu ca RIA, doar Ag este marcat cu o enzima.
Ag+enzima - determina degradarea unui substrat, apare o reactie de culoare, a carei intensitate se
determina spectrofotometric sau vizual
Diverse valori ale progesteronemiei la cateva specii domestice
IN LOC DE CONCLUZII :
IAPA – ecografia TR, dozarea P4, evid. PMSG/eCG, ETR, evid. E urinari
VACA – dozarea P4, ecografiaTR, ETR
OAIE,CAPRA – dozarea P4, ecografia TR, ecografia TA, palpatia TA
SCROAFA – dozarea P4, ecografia TR, ecografia TA, palpatia TA +/-
CARNIVORE – ecografia TA= det. relaxinei serice= palpatia TA