Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
TEMA 2
PERETELE CELULAR
Peretele celular este o structură bacteriană definitorie, prin compoziţie chimică, structură
primară, secundară şi terţiară, prezent la toate bacteriile, cu excepţia bacteriilor din genul
Mycoplasma. Este o structură bine definită, rigidă, cu o grosime medie de 15-35 nm, care
înconjoară celula bacteriană, acoperă membrana plasmatică şi poate fi străbătut de flageli, la
bacteriile mobile.
Deşi sistemul actual de clasificare filogenetică se bazează pe criterii oferite de biologia
moleculară (Bergey's Manual of Determinative Bacteriology), o schemă generală de clasificare
fenotipică a bacteriilor utilizează drept criteriu structura peretelui celular.
În fucţie de prezenţa, structura şi gradul de dezvoltare al peretelui celular, bacteriile se
împart în 4 diviziuni:
1. FIRMICUTES (lat. firmus ˗ tare, cutes ˗ înveliş), bacteriile Gram pozitive;
Firmibacteria – bacterii cu peretele celular gros, rigid, prin conţinutul mare de
mureină;
Thallobacteria – bacterii filamentoase (Actinobacteria).
2. GRACILICUTES (lat. gracilis – fragil), bacteriile Gram negative;
Scotobacteria (gr. scotos – întuneric), bacterii care se pot dezvolta în absenţa
luminii;
Photobacteria:
Subclasa: Oxyphotobacteria, respectiv Cyanobacteria;
Subclasa: Anoxyphotobacteria – bacteriile sulfuroase roşii (Chromatiaceae);
– bacteriile sulfuroase verzi (Chlorobacteriaceae);
– bacteriile nesulfuroase roşii (Rhodospirillaceae).
3. TENERICUTES (lat. teneri ˗ moale), bacteriile fără perete celular.
Mollicutes (lat. molli ˗ moale, pliabil), genul reprezentativ fiind Mycoplasma; sînt
cele mai mici bacterii cunoscute capabile de creştere pe medii acelulare;
membrana plasmatică a micoplasmelor are un caracter unic printre bacterii, în
sensul că aceasta conţine steroli care protejează celula de şocul osmotic şi îi
conferă un polimorfizm accentuat.
4. MENDOSICUTES (lat. mendosus ˗ fals, greşit), care cuprinde microorganismele
încadrate în domeniul Archaea, respectiv microorganismele cu organizare celulară de tip
procariot, dar care la nivel molecular sînt mai asemănătoare cu eucariotele decît cu
procariotele, reprezentînd o direcţie de evoluţie aparte. Astfel archaeele prezintă un
perete celular „fals”, în compoziţia căruia întră pseudomureina sau o mureină
neconvenţională (lipsită de acidul N–acetilmuramic), lipidele membranare sînt diferite,
glicerolul fiind înlocuit cu acidul N–acetil-talosaminuronic; alte deosebiri: structura
particulară a moleculelor de ARNt, a ARNr 16S, sensibilitatea diferită la antibiotice.
Peretele celular este format dintr-un strat bazal sau peptidoglican, asemănator la toate
bacteriile şi un strat al structurilor superficiale, foarte diferenţiat, în funcţie de care bacteriile
manifestă caractere tinctoriale diferite: bacterii Gram pozitive, Gram negative şi acido-
alcoolorezistente (fig. 4).
MEMBRANA CITOPLASMATICĂ
Este o membrană fină (6,5-7nm), elastică, lipsită de rezistenţă mecanică ce mărgineşte la
exterior citoplazma bacteriilor şi o separă de peretele celular. Pe secţiune apare trilaminată, fiind
alcatuită din două straturi fosfolipidice dispuse cu părţile hidrofobe faţă în faţă. Printre
moleculele fosfolipidice se găsesc molecule proteice, situate fie la nivelul unuia dintre cele două
straturi fosfolipidice, fie le traversează fiind expuse la ambele feţe ale membranei (fig. 5).
CITOPLASMA
Citoplasma este un sistem coloidal alcătuit din 80% apă, în care se găseşte o cantitate
mare de molecule organice, ioni anorganici, enzime, ARN, vacuole şi incluziuni. Este lipsită de
organitele celulare prezente la celulele eucariote cum sînt reticulul endoplasmatic, aparatul
Golgi, mitocondriile, ergastoplasma. La bacterii nu există cloroplaste, dar există bacterii cu
capacitate fotosintetizantă, la care există un sistem lamelar submembranar, în care este depozitat
pigmentul fotosintetic. La unele bacterii aceste lamele se pot asocia în formaţiuni ovalare, sferice
numite cromatofori. Citoplasma are aspect granular, datorită numărului mare de ribozomi.
MEZOZOMII
Mezozomii bacterieni sînt structuri membranare care se formează prin invaginarea
membranei citoplasmatice sub formă de buzunar sau în deget de mănuşă. Ei nu formează în
citoplazmă cavităţi inerte, ci deschise spre spaţiul periplasmatic (spaţiul dintre membrana
citoplasmatică şi peretele celular) şi sânt în contact direct cu materialul nuclear.
După morfologia lor, mezozomii sânt lamelari, veziculari şi tubulari, iar dispoziţia lor în
celula bacteriană poate fi septată, periferică şi nucleară.
Funcţiile mezozomilor:
participă la replicarea cromozomului bacterian şi diviziunea celulară;
participă la reacţiile de fosforilare oxidativă şi oxidoreducere, dar în măsură mai mică decît
membrana celulară;
sediul unor enzime hidrolitice care îndeplinesc rolul enzimelor lizozomale de la celulele
eucariote;
sinteza şi secreţia unor exoenzime, ca de exemplu penicilinaza sau cefalosporinaza
sinteza peretelui celular şi formarea sporului bacterian.
MATERIALUL NUCLEAR
Este un nucleoid cu o structură primitivă în comparaţie cu nucleul celulelor eucariote.
Nucleoidul este format dintr-o moleculă circulară de ADN, organizată sub forma unui cromozom
haploid care este în contact direct cu citoplasma datorită lipsei membranei nucleare. Molecula de
ADN dublu spiralat este la rîndul ei suprahelicată în jurul unui miez de ARN, dispoziţie necesară
funcţionalităţii materialului nuclear. La bacterii există un contact direct între ADN şi ARN,
aspect important pentru transcrierea şi traducerea informaţiei genetice.
Într-o celulă restantă există un singur nucleoid dar într-o celulă în diviziune pot exista 2,
4 nucleoizi, deoarece diviziunea ADN precede diviziunea celulei bacteriene.
Nucleoidul reprezintă 10% din greutatea uscată a bacteriei.
Este greu de evidenţiat datorită bazofiliei citoplasmei. Poate fi pus în evidenţă prin
coloraţii speciale: coloraţia Feulgen, acridin orange; în microscopia cu contrast de fază (aspect
de litera Y), în microscopia electronică (aspect fibrilar).
Funcţia nucleului bacterian constă în depozitarea informaţiei genetice necesară
autoreplicării, organizării structurale şi funcţionale a celulei bacteriene, deci a caracterelor ce
definesc specia.
RIBOZOMII
Se apreciază că o celulă bacteriană are 20.000 de ribozomi ce conţin 80-90% din ARN-ul
citoplasmatic. Ribozomii reprezintă sediul sintezelor proteice din celulă.
Ribozomii bacterieni au constanta de sedimentare 70S şi sînt formaţi din ARN (60-70%)
şi proteine (30-40%). În ambianţa ionilor de Mg2+ se desfac în două subunităţi cu constanta de
sedimentare 50S şi 30S.
Ribozomii pot fi independenţi în citoplasmă sau pot fi asociaţi în poliribozomi (polisomi).
Poliribozomii sînt liberi în citoplasmă (intervin în sinteza proteinelor solubile) sau pot fi ataşaţi
de membrana citoplasmatică şi sînt implicaţi în sinteza proteinelor membranare şi a proteinelor
de eflux.
Funcţiile ribozomilor:
sînt sediul sintezei proteice;
sînt ţintă de acţiune a unor antibiotice, care se leagă fie de subunitatea 50S, fie de subunitatea
30S şi inhibă sinteza proteinelor (ex. Aminozide (streptomicina), Macrolide (eritromicina)
Tetracicline, Cloramfenicol).
SPORII
Unele bacterii se transformă în spori, care sînt forme primitive de diferenţiere celulară, cu
rezistenţă crescută la factorii de mediu şi care apar endocelular în condiţii nefavorabile de viaţă.
Ei au un inveliş rezistent, format din mai multe straturi datorită căruia rezistă în mediul extern
zeci de ani. Sporogeneza se întalneşte numai la 3 genuri de bacterii gram-pozitive de interes
medical, Clostridium şi Bacillus care sînt bacili şi Sporosarcina care sînt coci.
Sporii nu sânt forme de înmulţire ale bacteriilor. Dintr-o bacterie vegetativă se formează
un singur spor, care în condiţii favorabile de viaţă germinează şi va da naştere unei singure celule
bacteriene.
Sporii pot fi de formă rotundă sau ovală. Diametrul sporilor este mai mic la bacilii
sporulaţi aerobi, nedepăşind diametrul celulei bacteriene (ex. genul Bacillus), pe cînd la genul
anaerob Clostridium, diametrul sporului depăşeşte dimensiunile celulei bacteriene, producînd
deformarea acesteia.
Poziţia sporului bacterian constituie un caracter taxonomic. Sporul poate fi amplasat
central (ex. Bacillus anthracis), subterminal (ex. Clostridium botulinum) sau terminal (ex.
Clostridium tetani) (fig. 6).
TEMA 3
CAPSULA
Majoritatea bacteriilor patogene şi comensale sânt capabile să sintetizeze in vivo un
înveliş extracelular.
Capsula este un înveliş compact, intim legat de celula bacteriană, vizibilă pe preparatele
uzuale sau în coloraţiile negative sub forma unui halou clar ce înconjoară bacteria. Grosimea
capsulei este de cel puţin 0,2 μm.
Din punct de vedere chimic, capsula tuturor bacteriilor de interes medical este de natură
polizaharidică (Streptococcus pneuomoniae, Klebsiella spp. etc.) cu excepţia capsulei Bacillus
anthracis care este de natură polipeptidică.
Capsula are rol în rezistenţa bacteriilor faţă de fagocitoză, fiind astfel un factor de
virulenţă. Variantele necapsulate ale aceloraşi specii sînt nepatogene. De exemplu, Streptococcus
pneumonie, de tip S, capsulat, produce la şoarecele alb de laborator o septicemie mortală, pe cînd
varinata necapsulată nu este patogenă.
Capsula este o structură cu proprietăţi antigenice specifice (antigenele K) care permit
diferenţierea unor serotipuri în cadrul speciei.
La unele bacterii s-au evidenţiat şi alte structuri de înveliş, cum sînt:
Microcapsula este o structură cu o grosime sub 0,2µm care nu se evidenţiază la
microscopul optic, ci numai prin metode imunologice sau electronomicroscopice (ex. Neisseria
gonorrhoeae). Ea constituie un factor de virulenţă.
Stratul mucos, glicocalixul este un strat amorf şi vîscos ce înveleşte bacteria. El este
format din lanţuri lungi de polizaharide, cum sînt levanii şi dextranii, cu rol major în adezivitatea
bacteriilor de suprafeţe. Astfel, de exemlu, Streptococcus mutans produce cantităţi mari de
dextran şi levan prin intermediul cărora se ataşează de suprafaţa dinţiilor contribuind la formarea
cariilor şi a plăcii dentare. Un alt exeplu este Pseudomonas aeruginosa, care secretă un strat
mucos dens care îi creşte rezistenţa la antibiotice.
Funcţiile capsulei:
este un factor de aderenţă şi colonizare a bacteriilor pe suprafeţe;
protejează bacteriile de diferiţi agenţi antibacterieni din mediu cum sînt: bacteriofagii,
colicinele, complementul, lizozimul sau alte enzime bacteriolitice;
protejează bacteriile de acţiunea fagocitelor, fiind deci un factor de virulenţă;
reprezintă sediul antigenelor capsulare, importante în identificarea acestor bacterii.
Evidenţierea capsulei:
1. În preparate microscopice colorate prin:
Coloraţii negative, care nu colorează capsula, dar capsula este vizibilă ca un halou
translucid în jurul bacteriilor: coloraţia Gram, Burri. În coloraţia Gram, capsula se
evidenţiază doar în frotiuri efectuate di prelevatul patologic (fig.6). Coloraţia Burri
permite evidenţierea capsulei în frotiurile efectuate din culturi bacteriene pure (fig.7).
Coloraţii pozitive: coloraţia Muir.
2. Prin reacţii antigen-anticorp: reacţia de umflare a capsulei (creşte refrigenţa zonei din
jurul bacteriilor, prin legarea anticorpilor de suprafaţa capsulei).
3. După aspectul coloniilor pe medii de cultură.
INCLUZIUNELE CELULARE
Sînt formaţiuni structurale inerte care apar în citoplasma bacteriilor la sfîrşitul perioadei
de creştere activă. Sînt structuri legate de activitatea metabolică a celulei, fiind materiale de
rezervă care se acumulează în diferite regiuni ale celulei atunci cînd cultura se dezvoltă lent sau
nu se mai dezvoltă. În funcţie de compoziţia chimică, incluziunile pot fi clasificate astfel:
polimeri organici – incluziuni de glicogen, amidon, poli-β-hidroxibutirat, cianoficină (în
cazul cianobacteriilor) polimer format din acid aspartic şi arginină;
polimeri anorganici – incluziuni de polimetafosfat (Granulaţii de volutină);
incluziuni anorganice simple – granule de CaCO 3, sulf coloidal (în cazul bacteriilor
sulfuroase.
În cazul bacteriei Bacillus thuringiensis s-au evidenţiat incluziuni (care nu au rol de
depozit) proteice parasporale, cu structură cristalină, de tipul endotoxinei.
Vacuolele sînt structuri intracitoplasmatice sferice cu diametru de 0,3-0,5 μm, totalitatea
lor formînd vacuomul. Vacuolele prezintă o membrană lipoproteică monostratificată, conţin apă
şi susbtanţe dizolvate, iar numărul/celulă variază, ele avînd rol în reglarea presiunii osmotice şi
în etapa premergătoare a formării incluziunilor, de depozit a substanţelor de rezervă.
GRANULAŢIILE DE VOLUTINĂ Reprezintă polimeri anorganici de polimetafosfat.
Servesc în calitate de rezervă de fosfaţi şi pot interveni în metabolismul energetic. Interesul
medical: la agentul difteriei, Corynebacterium diphtheriae, granulele de volutină se localizează la
extremităţile celulei, iar la corynebacterii nepatogene sunt repartizate neuniform în citoplasmă.
La tratarea cu unii coloranţi bazici granulele de volutină se colorează în altă culoare, de ex. în
roşu- violet la colorarea cu albastru de metilen – fenomenul metacromaziei.
Evidenţierea: metoda Loeffler, metoda Neisser