ARTICOLE ORIGINALE

3
EVALUAREA EFECTULUI ANTIMICROBIAN
AL UNOR SPECII DE BACTERII LACTICE
Assessment of antimicrobian effect of certain lactic acid bacteria
species
Elena Rusu1,2, Manole Cojocaru2, Cristina Cristescu2, Ionela Avram3,
Diana Pelinescu3
1
Institutul de Economie Mondial, Bucureti
2
Departamentul Preclinic, Facultatea de Medicin,
Universitatea Titu Maiorescu, Bucureti
3
Departamentul de Genetic, Facultatea de Biologie, Universitatea Bucureti

REZUMAT
La nivelul tubului gastrointestinal exist un echilibru ntre flora microbiot i tractul digestiv, care are ca efect
diferenierea speciilor comensale de speciile bacteriene patogene. Datorit dezvoltrii de noi terapii i utili-
zrii unor compui antimicrobieni cu spectru larg de aciune, n ultima perioad s-a observat o cretere a
numrul de infecii oportuniste cauzate de tulpini bacteriene i fungice potenial patogene. Bacteriile lactice
produc compui cu activitate antimicrobian, cum ar fi peroxidul de hidrogen, diacetil, acetaldehid, izomeri
D- ai aminoacizilor, reuterin i bacteriocine. Utilizarea probioticelor poate reprezenta o alternativ suplimentar
n vederea creterii i meninerii strii de sntate a organismului uman.

Cuvinte cheie: bacterii lactice, antimicrobian, infecii

ABSTRACT
At the gastrointestinal tract level there is a balance between microbiota and the digestive tract which has as
effect differentiation of pathogenic bacteria commensal species. Lately, due to the development of new ther-
apies and use of a wide spectrum antimicrobian compounds we can notice an increase in the number of
opportunistic infections caused by potentially pathogenic bacterial and fungal strains. Lactic acid bacteria
produce compounds with antimicrobian action, such as hydrogen peroxide, diacetyl, acetaldehyde, D-amino
acids isomers, reutin and bacteriocines. The use of probiotics can represent a supplementary alternative for
increasing and maintaining the well-being of the human body.

Keywords: lactic acid bacteria, antimicrobian, infections

INTRODUCERE lele gazd, precum i asupra interaciunilor dintre

La nivelul tubului gastrointestinal exist un echi-
libru ntre microbiot i tractul digestiv, care are ca
efect diferenierea speciilor comensale de speciile
bacteriene patogene. Studiile privind microorganis-
mele probiotice s-au axat pe metodele de evaluare a
supravieuirii diferitelor specii bacteriene i a func-
ionrii lor la nivel gastrointestinal, a interaciunii
ntre diferite specii microbiene intestinale i celu-
probiotice i sistemul imunitar. n prezent, rezul-
tatele furnizate de studiile clinice converg ctre in-
fluena pe care o are microbiota asupra sntii or-
ganismului uman (1).
n ultimii ani a crescut interesul pentru studierea
i utilizarea probioticelor n diferite afeciuni ale
organismului uman. Printre cele mai relevante
efecte ale probioticelor se numr inhibiia dezvol-
trii unor microorganisme patogene, creterea rs-

Autor corespondent:
ef Lucr. Dr. Elena Rusu, Departamentul Preclinic, Facultatea de Medicin, Universitatea Titu Maiorescu, Str. Gheorghe
Petracu, nr. 67A, sector 3, Bucureti
E-mail: elenarusu98@yahoo.com

20 REVISTA ROMN DE BOLI INFECIOASE VOLUMUL XVIII, NR. 1, AN 2015

REVISTA ROMN DE BOLI INFECIOASE VOLUMUL XVIII, NR. 1, AN 2015 21

punsului imun, reducerea nivelului colesterolului Bacteriocinele sunt proteine sau oligopeptide
seric precum i neutralizarea mutagenilor produi antimicrobiene sintetizate de o serie de tulpini bac-
la nivelul colonului i echilibrarea disfunciilor in- teriene Gram pozitive i Gram negative i ele pre-
testinale. Datorit dezvoltrii de noi terapii i uti- zint n general un spectru de activitate mult mai
lizrii unor compui antimicrobieni cu spectru larg ngust dect al antibioticelor de sintez.
de aciune, n ultima perioad s-a observat o cretere Bacteriocinele au o aplicabilitate practic im-
a numrul de infecii oportuniste cauzate de tulpini portant n conservarea alimentelor, dar i n pre-
bacteriene i fungice potenial patogene. De aceea, venirea unor infecii bacteriene. Ele au un spectru
utilizarea probioticelor poate reprezenta o alterna- de inhibiie restrns, acionnd n special asupra
tiv suplimentar n vederea creterii i meninerii bacteriilor Gram pozitive, ns numeroase bacte-
strii de sntate a organismului uman, implicit a riocine produse de bacteriile lactice sunt active m-
calitii vieii. potriva unor patogeni alimentari precum; Bacillus
cereus, Clostridium botulinum, Clostridium per-
BACTERIILE LACTICE fringes, Listeria monocytogenes, Staphilococcus
aureus etc. O mare parte din bacteriocinele produse
Zona intestinal a organismului uman constituie
de bacteriile lactice sunt termostabile, n acest fel
un mediu bogat n diferite specii microbiene, la ni-
velul lui gsindu-se n jur de 800-1.000 de specii meninndu-se activitatea i dup procesele de con-
bacteriene diferite i peste 7.000 de tipuri de tulpini servare termic a alimentelor. Pn n prezent, ni-
(2). Pe msur ce naintm n vrst, microbiota sina produs de specia Lactococcus lactis subsp.
intestinal devine mult mai complex, fiind influen- lactis este singura bacteriocin aprobat pentru uti-
at de stilul de via i de dieta alimentar. n ulti- lizarea n industria alimentar.
ma perioad exist o cretere a cererii de noi tulpini Mecansimele de aciune a bacteriocinelor sunt
de bacterii lactice care prezint efecte probiotice. diverse i complexe datorit n special structurii
Produsele alimentare fermentate prin metode tradi- chimice diferite, ele acionnd n majoritatea ca-
ionale sunt cele mai bune surse unde se pot iden- zurilor asupra membranei celulare prin formare de
tifica diferite tipuri de microorganisme. pori, sau la nivelul unor procese eseniale ale celu-
Una dintre caracteristicile benefice exercitate de lelor vii (transcriere, translaie, replicare, biosinteza
bacteriile lactice este capacitatea acestora de a componentelor peretelui celular) (3).
produce un numr variat de compui cu activitate Bacteriile lactice au un rol important n fermen-
antimicrobian, fa de anumite tulpini de bacterii, tarea i conservarea alimentelor. Ele produc com-
drojdii i fungi. Printre aceti compui ntlnim att pui cu activitate antimicrobian, cum ar fi etanolul,
metabolii cu rol de inhibitori ai creterii microbiene acidul formic, acizi grai, peroxidul de hidrogen,
dar i metabolii cu efect microbicid, cum ar fi de diacetil, acetaldehid, izomeri D- ai aminoacizilor,
exemplu acizii organici (acidul lactic, acidul fenil- etc. n ultimii ani, speciile de bacterii lactice izolate
lactic, acidul hidroxifenillactic, acidul acetic, acidul din produse obinute din fermentare natural, care
propionic etc.), compui de natur proteic precum produc bacteriocine, au fost intens studiate datorit
bacteriocinele i compuii bacteriocin-like, peroxi- potenialului de utilizare ca aditivi siguri pentru
dul de hidrogen, reuterinul etc. conservarea alimentelor (4).
Unii dintre cei mai importani i cunoscui com-
pui implicai n activitatea antimicrobian a bac-
teriilor lactice sunt acizii organici. Acetia au rolul STUDII PRIVIND ACIUNEA
de a inhiba dezvoltarea bacteriilor patogene sau po- ANTIMICROBIAN A UNOR SPECII
tenial patogene, deoarece duc la scderea pH-ului, DE BACTERII LACTICE
oferind astfel un mediu acid nefavorabil dezvoltrii
microorganismelor patogene. Mecanismul de ac- Lactatele fermentate natural sunt o component
iune al acidului lactic const n difuzarea n celul extrem de important n alimentaia populaiei din
a formei nedisociate unde are loc disocierea Romnia, n special pentru populaia din mediul
acestuia i generarea de ioni de hidrogen care de- rural. Cele mai importante specii de bacterii lactice
termin creterea aciditii la nivel citoplasmatic, izolate din produse romneti fermentate sau crude
avnd ca efect perturbarea activitii metabolice a de origine lactat sunt Lactococcus lactis, Leuco-
celulei. Acizii organici au un spectru foarte larg de nostoc sp. i Enterococcus sp. (5). Produsele lactate
aciune, inhibnd att bacteriile Gram negative, ct alimentare probiotice au fost analizate i s-a de-
i pe cele Gram pozitive, precum i o serie de tul- monstrat c, n afar de beneficiile nutriionale, ele
pini de drojdii i fungi. influeneaz pozitiv fiziologia organismului uman.
22 REVISTA ROMN DE BOLI INFECIOASE VOLUMUL XVIII, NR. 1, AN 2015
Cele mai cunoscute produse lactate sunt ngheata,
brnza, iaurtul, laptele mbogit cu tulpini de
Acidophilus i Bifidus, ayran, kefir i kumis. Bu-
turile lactate (fermentate sau nefermentate) sunt
considerate alimente care furnizeaz probiotice. n
procesul de fermentare, se obin n mod natural
acid lactic, acetic i citric, acizi care sunt utilizai
frecvent n industria alimentar pentru mbuntirea realizat n 2001 s-a demonstrat c administrarea de
calitilor organoleptice a mai multor produse des-
tinate consumului (6).
ntr-un studiu publicat n 2012, au fost analizate
6 tulpini de bacterii lactice izolate din produse ali-
mentare vegetale fermentate natural (7) care fac
parte din speciile Leuconostoc sp. i Lactobacillus
sp. O parte dintre acestea prezentau activitate anti-
microbian pentru speciile Escherichia coli i
Salmonella enterica. Acest studiu demonstreaz c
se pot obine tulpini noi de bacterii lactice cu efect
antimicrobian i din produsele alimentare vegetale
fermentate natural, nu numai din produsele lactate
fermentate (iaurt, kefir, brnzeturi etc.) (8). Genul
Lactobacillus este cel mai mare grup care conine o
varietate de specii de bacterii lactice i de aceea
este i cel mai utilizat probiotic ntr-o varietate de
produse alimentare, n principal n lactatele fer-
menate. Murturile sunt un produs alimentar extrem
de utilizat n rile din sud-estul Europei, n special
n Romnia. Acestea se obin prin fermentarea na-
tural a vegetalelor proaspete n prezena unei so-
luii saline. n urma procesului de fermentare se
obin n mediu diferite specii de bacterii lactice.
Prezena i diversitatea acestora depinde de timpul
care trece de la debutul fermentrii (9,10).
Cercetrile efectuate anterior au evideniat efec-
tul antimicrobian al unor tulpini de bacterii lactice
asupra unor specii de Candida albicans i a unor
tulpini bacteriene patogene (Salmonella enteridis,
E. coli, Bacillus cereus, Shigella flexerii). De ase-
menea, s-a remarcat creterea sensibilitii la fluco-
nazol a tulpinii de drojdie n prezena bacteriilor
lactice (11).
Mecanismele de aciune ale probioticelor n
prevenia i tratamentul boliilor infecioase ar fi:
sinteza de substane antibacteriene: speciile
L. rhamnosus GG i L. acidophillus LB pro-
duc substane inhibitoare ale bacteriilor Gram
pozitive i Gram negative;
competiie pentru nutrieni necesar creterii
patogenilor;
inhibiia competitiv a adeziunii patogenilor;
modificarea toxinelor sau a receptorilor toxi-
nelor.
Disfuncia barierei intestinale poate favoriza
translocarea i diseminarea unui numr important
de bacterii, n special bacterii aerobe Gram nega-
tive, producndu-se astfel sepsisul. Acest fenomen
poate aprea n afeciuni grave, precum sepsis post-
operator, pancreatit acut, ciroz hepatic avan-
sat, insuficien multipl de organ. ntr-un studiu
Lactobacillus plantarum la pacienii cu pancreatit
acut sever a sczut semnificativ rata de apariie a
necrozei pancreatice i a abceselor (12). De ase-
menea, tulpina de L. plantarum a determinat sc-
derea ratei infeciilor post-transplant hepatic, rata
de apariie a acestora fiind de 13%, comparativ cu
48% n grupul pacienilor tratai cu antibiotice.
ntr-un alt studiu efectuat la pacieni cu transplant
hepatic s-a administrat un preparat sinbiotic, com-
pus din 4 tulpini probiotice (L. paracasei, L. plan-
tarum, Leuconostoc mesenteroides, Pediococcus
pentiseceus) i patru tipuri de fibre fermentabile
(-glucan, inulin, pectin, amidon). Infecia post-
operatorie a aprut la 1% din grupul tratat, fa de
48% n grupul de control, sugernd astfel c admi-
nistrarea de probiotice poate constitui o alternativ
viabil la antibiotice pentru prevenirea infeciei
postoperatorii. n cazul infeciilor urogenitale s-a
observat c probioticele colonizeaz mucoasa va-
ginal; s-a sugerat poteniala utilizare a acestora n
tratamentul i prevenia infeciilor de tract urinar i
infeciilor vaginale. Exist date clinice care de-
monstreaz eficacitatea tulpinilor L. rhamnosus
GR-1 i Lactobacillus reuteri B-54 i RC-14 n res-
taurarea florei vaginale i reducerea infeciilor la
peste 50% din femei dup administrare oral zilnic
i la 79% din femei dup utilizare vaginal spt-
mnal (13). Speciile de bacteriile care produc acid
lactic pot preveni i trata infeciile genito-urinare
prin aderena lor la nivelul celulelor epiteliale va-
ginale, formnd o barier protectoare mpotriva co-
lonizrii bacteriilor patogene (14). Candidoza vul-
vovaginal este des ntlnit la femei, fiind a doua
patologie dup infeciile de origine bacterian.
Agentul patogen cel mai ntlnit este Candida al-
bicans, iar produsele pe baz de culturi lactice s-au
dovedit a fi extrem de eficiente (15). ntr-un studiu
realizat n 2012, Vicariotto F. i colaboratorii si au
evideniat potenialul terpeutic al utilizrii a dou
tulpini de bacterii lactice, L. fermentum LF10 i
L. acidophilus LA02 sub forma unui produs vaginal
efervescent (16).
De asemenea, a fost analizat i activitatea anti-
microbian a unor tulpini aparinnd genurilor
Lactobacillus, Bifidobacterium, Lactococcus, Strep-
tococcus i Bacillus mpotriva unor specii bac-
REVISTA ROMN DE BOLI INFECIOASE VOLUMUL XVIII, NR. 1, AN 2015
teriene Gram pozitive i Gram negative. Rezulta-
tele au artat c cele mai multe tulpini de bacterii
lactice selecionate produceau compui activi pe
mediu solid, care prezentau proprieti antagoniste
mpotriva speciilor Salmonela, Typhimurium i
E. coli (17).
CONCLUZII
Prin proprietile antifungice i antimicrobiene
demonstrate, anumite tulpini de bacterii lactice pot
mbunti tratamentul antimicrobian specific.
BIBLIOGRAFIE
1. Nobre Costa G., Miglioranza L.H.S. Probiotics: The effects on
human health and current prospects. 365-384. Edited by Everlon Cid
Rigobelo. Publiser: InTech. 2012
2. Backhed F., Ley R.E., Sonnenburg J.L., Peterson D.A., Gordon
J.I. Host-bacterial mutualism in the human intestine. Science,
307:1915-1920
3. De Vuyst L., Vandamme E.J. Bacteriocins of lactic acid bacteria,
Microbial Genetics and Application, Ed. Blackie Academic and
Professional, 1994: 91-503.
4. Diop M.B., Dicois-Dauphin R., Tine R., Jacquelin A.N., Thonart P.
Bacteriocin producers from traditional food productions. Biotech
Agron Soc Environ, 2007, 11:275-81
5. Zamfir M., Vancanneyt M., Makras L., Vaningelgem F., Lefebvre
K., Pot B., Swings J., De Vuyst L. Biodiversity of lactic acid bacteria
in Romanian dairy produscts. Syst Appl Microbiol 2006, 29(6):487-95
6. Akbarzadeh F., Homayouni A. Probiotics: Dairy probiotic foods and
coronary heart disease: a review on mechanism of action. 121-128.
Edited by Everlon Cid Rigobelo. Publiser: InTech. 2012
7. Zamfir M., Grosu-Tudor S.S. Probiotic potential of some lactic acid
bacteria isolated from Romanian fermented vegetables. Annals of
RSCB 2012, XVIII(1):234-239
8. Zamfir M., Grosu-Tudor S.S. Stress response of some lactic acid
bacteria isolated from Romania artisan dairy products. World J
Microbiol Biotechnol 2014, 30(2):375-84
9. Wouters D., Grosu-Tudor S.S., Zamfir M., De Vuyst L. Bacterial
community dynamics, lactic acid bacteria species diversity and
metabolite kinetics of traditional Romanian vegetables fermentation.
J Sci Food Agric 2013, 93(4):749-60
10. Grosu-Tudor S.S., Zamfir M. Isolated and characterization of lactic
acid bacteria from Romanian fermented vegetables. Rom Biotechnol
Lett 2011, 16(6) supplement:148-154
23
Not
Lucrarea a beneficiat de suport financiar prin
proiectul cu titlul Studii doctorale i postdoctorale
Orizont 2020: promovarea interesului naional
prin excelen, competitivitate i responsabilitate
n cercetarea tiinific fundamental i aplicat
romneasc, numr de identificare contract
POSDRU/159/1.5/S/140106. Programul este cofi-
nanat din Fondul Social European prin Programul
Operaional Sectorial Dezvoltarea Resurselor
Umane 2007-2013. Investete n oameni!
11. Martinez R.C., Franceschini S.A., Patta M.C., Quintana S.M.,
Candido J.C., De Martinis E.C., Reid G. Improved treatment of
vulvovaginal candidiasis with fluconazole plus probiotic Lactobacillus
rhamnosus GR-1 and Lactobacillus reuteri RC-14. Lett Appl Microbiol
2009, 48(3):269-74
12. Mangiante G., Colucci G., Canepari P., Bassi C., Nicoli N., Casaril
A., Marinellor P., Sognoretto C., Bengmark S. Lactobacillus
plantarum reduces infection of pancreatic necrosis in experimental
acute pancreatitis. Dig Surg 2001, 18(1):47-50
13. Anukan K.C., Hayes K., Summer K., Reid G. Probiotic
Lactobacillus rhamnosus GR-1 and Lactobacillus reuteri RC-4 may
help downregulate TNF-alpha, Il-6, Il-8, Il-10 and Il-12 (p70) in the
neurogenic bladder of spinal cord injured patients with urinary tract
infections: a two-case study. Adv. Urol 2009, article ID 680363
14. Dragomir A., Chea D.M. Probioticele i potenialul lor terapeutico-
preventiv. Medicina interna 2008, 3
15. Kohkel G.A., Assefa S., Reid G. Probiotic interference of
Lactobacillus rhamnosus GR-1 and Lactobacillus reuteri RC-14 with
the opportunistic fungal pathogen Candida albicans. Infect Dis Obstet
Gynecol 2012:636474
16. Vicariotto F., Del Piano M., Mogna L., Mogna G. Effectiveness of
the association of 2 probiotic strain formulated in a slow release
vaginal product, in women affected by vulvovaginal candidiasis: a
pilot study. J Clin Gastroenterol 2012, 46 suppl:S73-83
17. Tejero-Sarinena S., Barlow J., Costabile A., Gibson G.R., Rowlan
I. In vitro evaluation of the antimicrobial activity of a range of
probiotics against pathogens: evidence for the effect of organis acids.
Anaerobe 2012, 18(5):530-8